In-depth transcriptome reveals the potential biotechnological application of Bothrops jararaca venom gland

Lack of complete genomic data of Bothrops jararaca impedes molecular biology research focusing on biotechnological applications of venom gland components. Identification of full-length coding regions of genes is crucial for the correct molecular cloning design. Methods: RNA was extracted from the venom gland of one adult female specimen of Bothrops jararaca. Deep sequencing of the mRNA library was performed using Illumina NextSeq 500 platform. De novo assembly of B. jararaca transcriptome was done using Trinity. Annotation was performed using Blast2GO. All predicted proteins after clustering step were blasted against non-redundant protein database of NCBI using BLASTP. Metabolic pathways present in the transcriptome were annotated using the KAAS-KEGG Automatic Annotation Server. Toxins were identified in the B. jararaca predicted proteome using BLASTP against all protein sequences obtained from Animal Toxin Annotation Project from Uniprot KB/Swiss-Pro database. Figures and data visualization were performed using ggplot2 package in R language environment. Results: We described the in-depth transcriptome analysis of B. jararaca venom gland, in which 76,765 de novo assembled isoforms, 96,044 transcribed genes and 41,196 unique proteins were identified. The most abundant transcript was the zinc metalloproteinase-disintegrin-like jararhagin. Moreover, we identified 78 distinct functional classes of proteins, including toxins, inhibitors and tumor suppressors. Other venom proteins identified were the hemolytic lethal factors stonustoxin and verrucotoxin. Conclusion: It is believed that the application of deep sequencing to the analysis of snake venom transcriptomes may represent invaluable insight on their biotechnological potential focusing on candidate molecules.(AU)

In-depth transcriptome reveals the potential biotechnological application of Bothrops jararaca venom gland

Lack of complete genomic data of Bothrops jararaca impedes molecular biology research focusing on biotechnological applications of venom gland components. Identification of full-length coding regions of genes is crucial for the correct molecular cloning design. Methods: RNA was extracted from the venom gland of one adult female specimen of Bothrops jararaca. Deep sequencing of the mRNA library was performed using Illumina NextSeq 500 platform. De novo assembly of B. jararaca transcriptome was done using Trinity. Annotation was performed using Blast2GO. All predicted proteins after clustering step were blasted against non-redundant protein database of NCBI using BLASTP. Metabolic pathways present in the transcriptome were annotated using the KAAS-KEGG Automatic Annotation Server. Toxins were identified in the B. jararaca predicted proteome using BLASTP against all protein sequences obtained from Animal Toxin Annotation Project from Uniprot KB/Swiss-Pro database. Figures and data visualization were performed using ggplot2 package in R language environment. Results: We described the in-depth transcriptome analysis of B. jararaca venom gland, in which 76,765 de novo assembled isoforms, 96,044 transcribed genes and 41,196 unique proteins were identified. The most abundant transcript was the zinc metalloproteinase-disintegrin-like jararhagin. Moreover, we identified 78 distinct functional classes of proteins, including toxins, inhibitors and tumor suppressors. Other venom proteins identified were the hemolytic lethal factors stonustoxin and verrucotoxin. Conclusion: It is believed that the application of deep sequencing to the analysis of snake venom transcriptomes may represent invaluable insight on their biotechnological potential focusing on candidate molecules.(AU)

Evaluation of a short-term ingestion of zearalenone, fumonisin, and aflatoxin mixture incorporated, at low concentration, into the diet of weanling piglets and the effect of an anti-mycotoxin feed additive / Avaliação tóxica de uma dieta multicontaminada com baixa concentração de zearalenona, fumonisina e aflatoxina em leitões recém desmamados e o efeito de um aditivo antimicotoxinas

An experiment was conducted to evaluate the toxic effects of short-term ingestion of a zearalenone, fumonisin, and aflatoxin mixture, at low concentration, into the diet of weanling piglets and to assess the protective efficacy of an anti-mycotoxin feed additive. For 21 days, piglets were exposed to control or multi-mycotoxin treatment with or without the anti-mycotoxin additive. Growth performance was measured after 21d. Blood samples were taken to serum biochemical analysis and for quantify levels of circulating mononuclear immune cells. Effects on organs weights and histological changes, and expression levels of COX-2 and TNF-α in the liver and jejunum were evaluated. Overall, the multi-mycotoxin treatment had no effect on measured variables, and no adverse histopathological changes in organs were observed. The total serum protein concentration was higher in animals that received the multi-mycotoxin treatment; however, levels remained within normal limits for weanling piglets. In conclusion, the short-term multi-mycotoxin mixture, at the dose levels evaluated in this study, seems not affect the health of weanling piglets through the evaluated parameters. The absence of toxicity associated with the multi-mycotoxin treatment rendered it impossible to evaluate the efficacy of the anti-mycotoxin additive.(AU)

Um experimento foi conduzido para avaliar os efeitos tóxicos da ingestão simultânea de baixos níveis de zearalenona, fumonisina e aflatoxinas em uma dieta para leitões recém desmamados e avaliar a eficácia de um aditivo antimicotoxinas. Durante 21 dias, os leitões foram expostos aos tratamentos controle ou multicontaminado com ou sem a inclusão do aditivo antimicotoxina. O desempenho dos animais foi avaliado após 21d. Foram coletadas amostras de sangue para análise bioquímica sérica e para quantificar os níveis de células imunes mononucleares circulantes. Foram avaliados os pesos e alterações histológicas dos órgãos e a expressão de COX-2 e TNF-α no fígado e no jejuno. Em geral, o tratamento com micotoxinas não teve efeito sobre as variáveis analisadas e não foram observadas alterações histopatológicas adversas nos órgãos. A concentração de proteína sérica total foi maior para os animais que receberam o tratamento com multimicotoxinas; no entanto, os níveis permaneceram dentro dos limites normais para leitões desmamados. A dieta multicontaminada com micotoxinas, na dose avaliada neste estudo, parece não afetar a saúde de leitões recém desmamados através dos parâmetros avaliados. A ausência de toxicidade associada ao tratamento com micotoxinas tornou impossível avaliar a eficácia do aditivo antimicotoxina.(AU)

Efeito de diferentes protocolos de descongelação sobre o sêmen canino criopreservado em diluidor à base água de coco em pó (ACP-160®) / Effect of different thawing protocols on canine semen cryopreserved in a powdered coconut water extender (ACP-160®)

Sabe-se que a temperatura, bem como a velocidade de descongelação do sêmen, pode afetar a qualidade deste. Dessa forma, o objetivo deste trabalho foi testar diferentes protocolos de descongelação para o sêmen canino diluído em ACP-106® e criopreservado. Para tanto, coletaram-se dez ejaculados oriundos de oito cães, sendo a fração espermática avaliada quanto ao volume, concentração, motilidade, vigor, pH, morfologia, integridade acrossomal e teste hiposmótico. Diluiu-se o sêmen em ACP-106®, contendo 20% de gema de ovo e 6% de glicerol, sendo congelado em palhetas de 0,25 mL. Depois de uma semana, a primeira palheta foi descongelada a uma temperatura de 37°C/60s, a segunda a 55°C/5s e a terceira a 75°C/8s e reavaliaram-se os parâmetros seminais. Os protocolos apresentaram resultados semelhantes para quase todos os parâmetros avaliados, com exceção da motilidade espermática, que foi melhor preservada na descongelação a 55°C/5s por até trinta minutos, seguida do protocolo de 37°C/60s e por último o de 75°C/8s. Analisando-se estes resultados, pode-se concluir que, para o sêmen canino congelado no diluidor ACP-106®, o melhor protocolo para descongelação foi o de 55C/5s.

It is known that temperature and thawing velocity can affect sperm quality during freeze-thawing procedures. Thus, the aim of this research was to compare different thawing protocols for canine semen extended in ACP-106® extender and cryopreserved. Ten ejaculates were collected from eight dogs and sperm rich fraction was evaluated regarding volume, concentration, motility, vigor, pH, morphology, acrosomal integrity and hyposmotic swelling test. Then, semen was extended in ACP-106® with 20% egg yolk and 6% glycerol, and frozen in 0.25 mL straws. After one week, one straw was thawed at 37°C/60s, another one at 55°C/5s and a third one at 75°C/8s, and the seminal characteristics were reevaluated. Similar results were observed for all the groups, except for sperm motility which was better preserved at 55°C/5s for up 30min than at 37°C/60s or 75°C/8s. From these results, it is concluded that canine semen extended in ACP -106® is better thawed at 55°C/5s.

Different concentration of benzylpenicillin benzatin addition on cryopreserved canine semen using a powdered coconut water extender (ACP-106®) / Diferentes concentrações de benzilpenicilina benzatina no sêmen canino criopreservado em diluidor à base de água de coco na forma de pó (ACP-106®)

This research aimed at analyzing the effect of benzylpenicillin benzatin addition in different concentrations, on semen motility, morphology and functional spermatic membrane integrity, and of control of bacterial growth on canine semen cryopreserved in ACP-106®. Thirteen ejaculates were used, evaluated and further divided into four aliquots. Each aliquots was extended in ACP-106® with 20% egg yolk and four concentrations of benzylpenicillin benzatin, forming four experimental groups: G0 (without antibiotic); G500 (with 500UI/mL); G1000 (with 1000UI/mL); and G1500 (with 1500UI/mL). After then, the samples were frozen and stored in liquid nitrogen. After about one week, samples were thawed and submitted to spermatic and microbiology evaluations. No differences were observed among groups after thawing regarding seminal parameters, morphology, intact acrossoma and percentual of live spermatozoa, as well for the number of UFC/L. In computerized analyzes, it was also evidenced no differences for all seminal parameters. In conclusion, benzylpenicillin benzatin added to ACP-106® does not control bacterial growth and does not influence spermatic quality after canine semen cryopreservation.

Objetivou-se avaliar o efeito da adição de benzilpenicilina benzatina em diferentes concentrações, sobre a motilidade, morfologia e integridade funcional de membrana do espermatozoide, e o controle do crescimento bacteriano no sêmen canino criopreservado em ACP-106®. Foram utilizados treze ejaculados, avaliados e posteriormente divididos em quatro alíquotas. Cada alíquota foi diluída em ACP-106® com 20% de gema de ovo e quatro concentrações de benzilpenicilina benzatina, de maneira a formar os quatro grupos experimentais: G0 (diluído sem antibiótico); G500 (com 500UI/mL); G1000 (com 1000UI/mL); e G1500 (com 1500UI/mL). Em seguida, as amostras foram congeladas e armazenadas em nitrogênio líquido. Após cerca de uma semana, foram descongeladas e submetidas à avaliação espermática e microbiológica. Nenhuma diferença foi observada entre os grupos após descongelação, com relação aos parâmetros seminais avaliados de morfologia, acrossoma intacto e percentual de espermatozoides vivos, bem como para ao número de UFC/L. Na avaliação computadorizada, também não foi evidenciada diferença entre os grupos para todos os parâmetros avaliados. Conclui-se que a benzilpenicilina benzatina quando adicionada ao ACP-106® não controla o crescimento bacteriano e não influencia a qualidade espermática após a criopreservação do sêmen canino.

Cryopreservation canine semen using a powdered coconut water extender (apc-106): effect of glycerol temperature addition (27oc and 4oc) / Criopreservação de sêmen canino com um diluidor à base de água de coco na forma de pó (acp-106®): efeito da temperatura de adição do glicerol (27 e 4c)

The aim of the present study was to compare the effect of glycerol addition at two temperatures on canine semen extended and frozen with powdered coconut water extender (ACP-106®). Twelve ejaculates were collected, the sperm-rich fraction was evaluated and further divided into two aliquots. The first aliquot was extended in ACP-106® with 5% egg yolk and glycerol at 27ºC (G27) and the second one was also extended in ACP-106® with 5% egg yolk, with glycerol addition at 4ºC (G4). Samples were frozen, thawed and submitted to evaluations of morphology, acrossomal integrity, hypo-osmotic swelling and alive spermatozoa. No differences were observed between groups after thawing regarding all seminal parameters. In computerized analyzes, it was also not evidenced differences between groups for total and progressive motility, percentual of spermatozoa with fast and medium velocity, and average path velocity (VAP) of spermatozoa with fast and medium velocity, being observed in G4 and G27, respectively, a total motility of 24.45 ± 3.87% and 31.65 ± 3.93% with the VAP of the fast spermatozoa of 91.24 ± 7.74µm/s and 106.25 ± 3.94µm/s. In conclusion, the glycerol temperature addition does not influence the quality of post-thawed canine semen diluted in ACP-106®.KEY WORDS: ACP-106®, cryopreservation, dog, glycerol, semen.

Objetivou-se comparar o efeito da temperatura de adição do glicerol sobre o sêmen canino diluído em água de coco na forma de pó (ACP-106®) e criopreservado. Coletaram-se doze ejaculados, para avaliação da fração espermática, dividida em duas alíquotas. A primeira foi diluída em ACP-106® com 5% de gema de ovo e 6% de glicerol a 27C (G27) e a segunda em ACP-106® com 5% de gema de ovo, com a glicerolização a 4C (G4). As amostras foram congeladas, posteriormente, descongeladas e submetidas às avaliações de morfologia, integridade acrossomal, teste hipo-osmótico e percentual de vivos. Não se observou diferença entre as temperaturas de adição do glicerol em todos os parâmetros. Na análise computadorizada, também não se evidenciou diferença entre os grupos na motilidade total e progressiva, percentual de espermatozoides com velocidade rápida e média, e velocidade média da trajetória (VAP) dos espermatozoides com velocidade rápida e média, sendo observadas, em G4 e G27, respectivamente, uma motilidade total de 24,45 ± 3,93% e 31,65 ± 3,87% e VAP dos espermatozoides rápidos de 91,24 ± 7,74µm/s e 106,25 ± 3,94µm/s. Conclui-se que a temperatura de adição do glicerol não influencia a qualidade pós-descongelação do sêmen canino diluído em ACP-106®.PALAVRAS-CHAVES: ACP-106®, cão, criopreservação, glicerol, sêmen.

Cinética do crescimento de Borrelia burgdorferi (Spirochaetaceae) em diferentes meios de cultivo / Cinetic growth of Borrelia burgdorferi (Spirochaetacease) in different culture media

Estudou-se a cinética de crescimento de Borrelia burgdorferi, por um período de 3 meses, utilizando os seguintes oito meios de cultivo : (1) BSK adicionado de soro de coelho, (2) BSK adicionado de soro de suíno, (3) BSK adicionado de soro de suíno + 5 fluorouracil, (4) PMR, (5) CTB, (6) Dubos, (7) Caldo Brucella e (8) BHI. Todos os meios foram preparados assepticamente e mantidos em tubos de ensaio com capacidade para 10 ml. Para cada meio, o inoculo foi padronizado para conter no início 10² espiroquetas para cada 0,1 ml de cultivo. O monitoramento do crescimento foi feito contando-se o total de espiroquetas em 0,1 ml do meio entre lâmina de microscopia e lamínula com dimen sões de 10x30mm, tendo sido utilizado microscópio de campo escuro. A contagem foi realizada durante 14 semanas, tendo sido diária nos primeiros 12 dias e semanal a partir desta data. Houve crescimento de B. burgdorferi em todos meios testados, com melhor performance para três deles: BSK adicionado de soro de coelho, BSK adicionado de soro de suíno + 5 fluorouracil e meio CTB. Observou-se crescimento de B. burgdorferi a partir da 4ª semana, atingindo o platô de crescimento entre a 8ª e 12ª semanas, quando começou a exaustão do meio de cultivo. Formas císticas de B. burgdorferi foram observadas em todos os meios testados. (AU)

The cinetic of growth of Borrelia burgdorferi was studied during a 3-month period, using the following 8 culture media: (1) rabbit serum BSK, (2) swine serum BSK, (3) swine serum BSK+5 fluorouracil, (4) PMR, (5) CTB, (6) Dubos, (7) Brucella broth and (8) BHI. All media were prepared aseptically and were maintained in culture tubes of 10 ml capacity. For each medium, the inoculum was standardized to contain initially 102 spirochetes for each 0.1 ml of culture. The growth was monitorized by counting the total number of spirochetes in 0.1ml of medium in a dark field microscope, using a 10x30 mm cover slip. For the first 12 days, counting was done each 24 hours, and afterwards once a week during 14 weeks. There occurred growth of B. burgdorferi in all tested media, with the best performance of three of them: BSK with rabbit serum, BSK swine serum + 5 fluorouracil, and CTB medium. Growth of B. burgdorferi was seen from the 4th week on, reaching its maximum within 8-12 weeks, depleting the culture medium after this time. Cystic forms of B. burgdorferi were observed with all tested media.(AU)

Teste da fosfatase alcalina e contagem de bactérias totais e em leite humano ordenhado / Alkaline phosphatase test and counting of total bacteria and in human milk

A excelência do leite materno como fonte de alimentação exclusiva para lactentes até os seis meses de idade não constitui motivo de dúvida, uma vez que esse alimento possui uma composição química que corresponde perfeitamente às necessidades fisiológicas do metabolismo normal do bebê. Porém, existem vários fatores que impedem o processo natural de amamentação, surgindo assim a necessidade de centros de armazenamento e distribuição de leite humano, os Bancos de leite Humano. Sabendo-se que o leite humano é um alimento extremamente nutritivo, passível de contaminação, e tendo em vista os receptores de tal alimento, um rígido controle de qualidade torna-se necessário. Assim, técnicas adequadas e sensíveis de controle de qualidade são importantes. Os objetivos do estudo foram testar a eficácia do Teste da Fosfatase Alcalina, utilizado rotineiramente em leite de vaca, em leite humano e avaliar o padrão microbiológico dos leites pasteurizados...(AU)

CRYOPRESERVATION CANINE SEMEN USING A POWDERED COCONUT WATER EXTENDER (APC-106): EFFECT OF GLYCEROL TEMPERATURE ADDITION (27OC AND 4OC) / CRIOPRESERVAÇÃO DE SÊMEN CANINO COM UM DILUIDOR À BASE DE ÁGUA DE COCO NA FORMA DE PÓ (ACP-106®): EFEITO DA TEMPERATURA DE ADIÇÃO DO GLICEROL (27 E 4C)

The aim of the present study was to compare the effect of glycerol addition at two temperatures on canine semen extended and frozen with powdered coconut water extender (ACP-106®). Twelve ejaculates were collected, the sperm-rich fraction was evaluated and further divided into two aliquots. The first aliquot was extended in ACP-106® with 5% egg yolk and glycerol at 27ºC (G27) and the second one was also extended in ACP-106® with 5% egg yolk, with glycerol addition at 4ºC (G4). Samples were frozen, thawed and submitted to evaluations of morphology, acrossomal integrity, hypo-osmotic swelling and alive spermatozoa. No differences were observed between groups after thawing regarding all seminal parameters. In computerized analyzes, it was also not evidenced differences between groups for total and progressive motility, percentual of spermatozoa with fast and medium velocity, and average path velocity (VAP) of spermatozoa with fast and medium velocity, being observed in G4 and G27, respectively, a total motility of 24.45 ± 3.87% and 31.65 ± 3.93% with the VAP of the fast spermatozoa of 91.24 ± 7.74µm/s and 106.25 ± 3.94µm/s. In conclusion, the glycerol temperature addition does not influence the quality of post-thawed canine semen diluted in ACP-106®.KEY WORDS: ACP-106®, cryopreservation, dog, glycerol, semen. 

Objetivou-se comparar o efeito da temperatura de adição do glicerol sobre o sêmen canino diluído em água de coco na forma de pó (ACP-106®) e criopreservado. Coletaram-se doze ejaculados, para avaliação da fração espermática, dividida em duas alíquotas. A primeira foi diluída em ACP-106® com 5% de gema de ovo e 6% de glicerol a 27C (G27) e a segunda em ACP-106® com 5% de gema de ovo, com a glicerolização a 4C (G4). As amostras foram congeladas, posteriormente, descongeladas e submetidas às avaliações de morfologia, integridade acrossomal, teste hipo-osmótico e percentual de vivos. Não se observou diferença entre as temperaturas de adição do glicerol em todos os parâmetros. Na análise computadorizada, também não se evidenciou diferença entre os grupos na motilidade total e progressiva, percentual de espermatozoides com velocidade rápida e média, e velocidade média da trajetória (VAP) dos espermatozoides com velocidade rápida e média, sendo observadas, em G4 e G27, respectivamente, uma motilidade total de 24,45 ± 3,93% e 31,65 ± 3,87% e VAP dos espermatozoides rápidos de 91,24 ± 7,74µm/s e 106,25 ± 3,94µm/s. Conclui-se que a temperatura de adição do glicerol não influencia a qualidade pós-descongelação do sêmen canino diluído em ACP-106®.PALAVRAS-CHAVES: ACP-106®, cão, criopreservação, glicerol, sêmen. 

Evaluation of a short-term ingestion of zearalenone, fumonisin, and aflatoxin mixture incorporated, at low concentration, into the diet of weanling piglets and the effect of an anti-mycotoxin feed additive / Avaliação tóxica de uma dieta multicontaminada com baixa concentração de zearalenona, fumonisina e aflatoxina em leitões recém desmamados e o efeito de um aditivo antimicotoxinas

An experiment was conducted to evaluate the toxic effects of short-term ingestion of a zearalenone, fumonisin, and aflatoxin mixture, at low concentration, into the diet of weanling piglets and to assess the protective efficacy of an anti-mycotoxin feed additive. For 21 days, piglets were exposed to control or multi-mycotoxin treatment with or without the anti-mycotoxin additive. Growth performance was measured after 21d. Blood samples were taken to serum biochemical analysis and for quantify levels of circulating mononuclear immune cells. Effects on organs weights and histological changes, and expression levels of COX-2 and TNF-α in the liver and jejunum were evaluated. Overall, the multi-mycotoxin treatment had no effect on measured variables, and no adverse histopathological changes in organs were observed. The total serum protein concentration was higher in animals that received the multi-mycotoxin treatment; however, levels remained within normal limits for weanling piglets. In conclusion, the short-term multi-mycotoxin mixture, at the dose levels evaluated in this study, seems not affect the health of weanling piglets through the evaluated parameters. The absence of toxicity associated with the multi-mycotoxin treatment rendered it impossible to evaluate the efficacy of the anti-mycotoxin additive.

Um experimento foi conduzido para avaliar os efeitos tóxicos da ingestão simultânea de baixos níveis de zearalenona, fumonisina e aflatoxinas em uma dieta para leitões recém desmamados e avaliar a eficácia de um aditivo antimicotoxinas. Durante 21 dias, os leitões foram expostos aos tratamentos controle ou multicontaminado com ou sem a inclusão do aditivo antimicotoxina. O desempenho dos animais foi avaliado após 21d. Foram coletadas amostras de sangue para análise bioquímica sérica e para quantificar os níveis de células imunes mononucleares circulantes. Foram avaliados os pesos e alterações histológicas dos órgãos e a expressão de COX-2 e TNF-α no fígado e no jejuno. Em geral, o tratamento com micotoxinas não teve efeito sobre as variáveis analisadas e não foram observadas alterações histopatológicas adversas nos órgãos. A concentração de proteína sérica total foi maior para os animais que receberam o tratamento com multimicotoxinas; no entanto, os níveis permaneceram dentro dos limites normais para leitões desmamados. A dieta multicontaminada com micotoxinas, na dose avaliada neste estudo, parece não afetar a saúde de leitões recém desmamados através dos parâmetros avaliados. A ausência de toxicidade associada ao tratamento com micotoxinas tornou impossível avaliar a eficácia do aditivo antimicotoxina.

Different concentration of benzylpenicillin benzatin addition on cryopreserved canine semen using a powdered coconut water extender (ACP-106®) / Diferentes concentrações de benzilpenicilina benzatina no sêmen canino criopreservado em diluidor à base de água de coco na forma de pó (ACP-106®)

This research aimed at analyzing the effect of benzylpenicillin benzatin addition in different concentrations, on semen motility, morphology and functional spermatic membrane integrity, and of control of bacterial growth on canine semen cryopreserved in ACP-106®. Thirteen ejaculates were used, evaluated and further divided into four aliquots. Each aliquots was extended in ACP-106® with 20% egg yolk and four concentrations of benzylpenicillin benzatin, forming four experimental groups: G0 (without antibiotic); G500 (with 500UI/mL); G1000 (with 1000UI/mL); and G1500 (with 1500UI/mL). After then, the samples were frozen and stored in liquid nitrogen. After about one week, samples were thawed and submitted to spermatic and microbiology evaluations. No differences were observed among groups after thawing regarding seminal parameters, morphology, intact acrossoma and percentual of live spermatozoa, as well for the number of UFC/L. In computerized analyzes, it was also evidenced no differences for all seminal parameters. In conclusion, benzylpenicillin benzatin added to ACP-106® does not control bacterial growth and does not influence spermatic quality after canine semen cryopreservation.

Objetivou-se avaliar o efeito da adição de benzilpenicilina benzatina em diferentes concentrações, sobre a motilidade, morfologia e integridade funcional de membrana do espermatozoide, e o controle do crescimento bacteriano no sêmen canino criopreservado em ACP-106®. Foram utilizados treze ejaculados, avaliados e posteriormente divididos em quatro alíquotas. Cada alíquota foi diluída em ACP-106® com 20% de gema de ovo e quatro concentrações de benzilpenicilina benzatina, de maneira a formar os quatro grupos experimentais: G0 (diluído sem antibiótico); G500 (com 500UI/mL); G1000 (com 1000UI/mL); e G1500 (com 1500UI/mL). Em seguida, as amostras foram congeladas e armazenadas em nitrogênio líquido. Após cerca de uma semana, foram descongeladas e submetidas à avaliação espermática e microbiológica. Nenhuma diferença foi observada entre os grupos após descongelação, com relação aos parâmetros seminais avaliados de morfologia, acrossoma intacto e percentual de espermatozoides vivos, bem como para ao número de UFC/L. Na avaliação computadorizada, também não foi evidenciada diferença entre os grupos para todos os parâmetros avaliados. Conclui-se que a benzilpenicilina benzatina quando adicionada ao ACP-106® não controla o crescimento bacteriano e não influencia a qualidade espermática após a criopreservação do sêmen canino.

Determinação da resistência do leite humano ao alizarol / Determination of the resistance of the human milk to the alizarol

Leite humano é o alimento mais adequado ao lactente, o qual fornece todos os elementos necessários para a nutrição nos primeiros meses de vida, promovendo o crescimento, a manutenção e equilíbrio da flora do trato intestinal, bem como a transmissão da imunidade passiva. A composição do leite varia com a alimentação, fase da lactação, grupos étnicos e fatores patológicos. Embora sejam semelhantes, as proteínas do leite humano não são idênticas ás do leite bovino, e a alta relação proteínas do soro / caseínas, no primeiro, resulta em diferenças na acidez e na formação de um gel gástrico mais suave. Os Bancos de Leite Humano são instituições sem fins lucrativos, que fazem a coleta e o processamento do leite para fornecimento ás crianças, em situações onde a mãe tem dificuldades em amamentar e/ou nos casos em que há leite excedente. Atualmente existe uma preocupação de adotar práticas seguras para instituir programas de certificação de qualidade do leite beneficiado. Para isso, é necessário que haja seleção do leite cru antes de ser pasteurizado, o que é feito pela análise da acidez titulável em graus Dornic. O objetivo deste trabalho foi determinar a resistência do leite humano ao método colorimétrico do Alizarol, usado para a seleção do leite bovino pelas indústrias, que descarta o leite ácido e impróprio para a pasteurização, sendo mais rápido que o da titulação, de baixo custo e bastante seguro. Os resultados mostraram que o leite humano pode ser selecionado por este método, além do que facilita o trabalho dos funcionários dos bancos de leite, os quais não precisam ser treinados.(AU)

Human milk is the best food for the suckle, being recommended in the first months of life. The composition of milk is connected on to the feeding, ethnic groups, phase of lactation and to the health to the mammary gland. The proteins of human milk are not identical to the ones of bovine milk, and the high relation proteins of the whey/casein in the first one results in differences in the acidity and the formation of the gel gastric softer. The Human Milk Banks are institutions, without lucrative ends, that make the collection and the processing of milk for supply to the children in situations where the mother has difficulties in suckling and/or in the cases where she has exceeding milk. Currently a concern exists to adopt pratical insurances to institute programs of certification of quality of benefited milk: For this, it is necessary that it has an selection of milk before being pasteurized, what is made by the analysis of the acidity in Dornic degrees. The objective of this work was to determine the resistence of human milk to the colorimetric Omethod of the Alizarol, used for the selection of bovine milk for the industries, that discards acid and improper milk, for the pasteurization, being faster than of the titulation, low cost and sufficient insurance. The results had shown that human milk can be selected by this method, beyong the one that facilitates the work of the employees of the milk banks, which does not need to be trained. (AU)