Ocular echobiometry and relationship with cranial and body morphometric parameters in Shih Tzu dogs / [Ecobiometria ocular e relação com a morfometria craniana e corporal em cães Shih Tzu]

The purpose of this paper is to determine the ocular echobiometry and investigate its correlation with cranial and body morphometric parameters in 50 adult Shih Tzu dogs. The echobiometric measurements of the anterior chamber (AC), vitreous chamber (VC), lens axial thickness (LTA), transverse lens thickness (LTT), and axial length of the eyeball (ALE) were obtained by two-dimensional ultrasonography. Morphometric measurements of bizygomatic distance (BDIST), frontal-occipital distance (FOD), withers height (WH), thoracic circumference (TC), and body length (BL) were also obtained. The mean of the AC depth was 2.83±0.50mm, the VC was 9.18±0.54mm, the LTA was 6.42±0.32mm and the LTT was 9.17±1.18mm, while the mean of the ALE was 18.82±0.66mm. There was no correlation between ocular echobiometric variables and cranial and body morphometric variables in adult dogs of the Shih Tzu breed, as well as no significant difference of these variables when considering gender and age of the dogs (p ≥ 0.05).

Objetivou-se, com este estudo, a determinação da ecobiometria ocular e a investigação de sua correlação com parâmetros morfométricos cranianos e corporais em 50 cães Shih Tzu adultos. As medidas ecobiométricas da câmara anterior (CA), da câmara vítrea (CV), da espessura axial (ELA), da transversal da lente (ETL) e do comprimento axial do globo ocular (CGO) foram obtidas por meio da ultrassonografia em modo bidimensional. As medidas morfométricas do distanciamento bizigomático (DBZ), do distanciamento fronto-occipital (DFO), da altura de cernelha (AC), da circunferência torácica (CT) e do comprimento corporal (CP) também foram obtidas. A média da profundidade de CA foi de 2,83±0,50mm, da CV foi de 9,18±0,54mm, da ELA foi de 6,42±0,32mm e da ETL foi de 9,17±1,18mm, enquanto a média do CGO foi de 18,82±0,66mm. Não foi verificada correlação entre as variáveis ecobiométricas oculares e as morfométricas cranianas e corporais em cães adultos da raça Shih Tzu, assim como não houve diferença significativa dessas variáveis quando considerado o gênero e a idade dos cães (P≥0,05).

Osteopatia metafisária de colo femoral em 10 felinos – estudo retrospectivo / Femoral neck metaphyseal osteopathy in 10 cats – retrospective study

A osteopatia metafisária pode ocorrer em gatos jovens, predominantemente em machos, com sobrepeso, de forma atraumática, podendo ser em um ou em ambos colos femorais. Tem como característica radiográfica denominado de “apple core”. Os exames histopatológicos revelam presença de fibrose tecidual e condrócitos irregulares e desagrupados. Na avaliação clínico ortopédica observa-se a claudicação intermitente durante a deambulação, dor à palpação, crepitação à manipulação do membro afetado. O presente estudo tem o objetivo de relatar a ocorrência da referida doença em dez felinos, incluindo fêmeas, no qual a resolução cirúrgica consistiu na artroplastia excisional da cabeça e colo femoral. Sendo assim, a osteopatia metafisária deve ser incluída como suspeita clínica ortopédica em felinos com este tipo de sintomatologia, sem apresentar uma pré-disposição para o surgimento desta afecção.

The metaphyseal osteopathy can occur in young cats, predominantly in males, overweight, non-traumatic, and can be one or both femoral necks. It´s characteristic radiographic called “apple core”. Histopathological examination revealed the presence of tissue fibrosis and irregular chondrocytes and ungrouped. Orthopedic clinical evaluation shows intermittent claudication during walking, pain on palpation, crackling on manipulation of the affected limb. This study aims to report the occurrence of the disease in ten cats, including female, in which the surgical resolution consisted of excisional arthroplasty of the head and femoral neck. Therefore, metaphyseal osteopathy should be included as an orthopedic clinical suspicion in cats with this type of symptomatology, without presenting a pre-disposition for the onset of this condition.

Osteopatia metafisária de colo femoral em 10 felinos estudo retrospectivo / Femoral neck metaphyseal osteopathy in 10 cats retrospective study

A osteopatia metafisária pode ocorrer em gatos jovens, predominantemente em machos, com sobrepeso, de forma atraumática, podendo ser em um ou em ambos colos femorais. Tem como característica radiográfica denominado de “apple core”. Os exames histopatológicos revelam presença de fibrose tecidual e condrócitos irregulares e desagrupados. Na avaliação clínico ortopédica observa-se a claudicação intermitente durante a deambulação, dor à palpação, crepitação à manipulação do membro afetado. O presente estudo tem o objetivo de relatar a ocorrência da referida doença em dez felinos, incluindo fêmeas, no qual a resolução cirúrgica consistiu na artroplastia excisional da cabeça e colo femoral. Sendo assim, a osteopatia metafisária deve ser incluída como suspeita clínica ortopédica em felinos com este tipo de sintomatologia, sem apresentar uma pré-disposição para o surgimento desta afecção.(AU)

The metaphyseal osteopathy can occur in young cats, predominantly in males, overweight, non-traumatic, and can be one or both femoral necks. It´s characteristic radiographic called “apple core”. Histopathological examination revealed the presence of tissue fibrosis and irregular chondrocytes and ungrouped. Orthopedic clinical evaluation shows intermittent claudication during walking, pain on palpation, crackling on manipulation of the affected limb. This study aims to report the occurrence of the disease in ten cats, including female, in which the surgical resolution consisted of excisional arthroplasty of the head and femoral neck. Therefore, metaphyseal osteopathy should be included as an orthopedic clinical suspicion in cats with this type of symptomatology, without presenting a pre-disposition for the onset of this condition.(AU)

Historical records of orchid bees (Apidae: Euglossini) in Belém Endemism Center: species list of 92 years sampling / Registros históricos de abelhas-das-orquídeas (Apidae: Euglossini) no Centro de Endemismo Belém: lista de espécies de 92 anos de amostragens

The distribution of most species occurs in delimited regions with unique characteristics called centers of endemism. In Eastern Amazon is located the Belém Endemism Center (BEC), one of the most intensely deforested in Brazilian Amazon. Here, we show information about orchid bee assemblages based on historical records from entomological collections. For each species, we calculated occurrence frequency and dominance, and we classified them in 3 statuses: common, intermediate or rare species. Curves of observed and estimated richness were built, based on Jackknife estimator. We found 1,257 specimens from 56 species, constituting records from 1917 to 2009, and one species is a new record for BEC. Higher number of specimens and species was concentrated in a few locations and surveys increased from the 70s. The results suggest a high richness of orchid bees in the BEC, although this scenario is far from what is expected for the entire area. The high occurrence of rare species may be related to their low representativeness in the collections, and the proximity between the areas had favored samplings. Even so, the species list and the conservation status presented here may be useful information in studies comparing past and current orchid bee fauna, and, allied to data on bees responses to land use changes occurred in BEC over the years, can fit as a basis for defining priority areas for conservation.(AU)

A distribuição da maioria das espécies ocorre em regiões delimitadas com características únicas conhecidas como centros de endemismo. Na Amazônia Oriental está localizado o Centro de Endemismo Belém (CEB), uma das áreas mais intensivamente desmatadas na Amazônia Brasileira. Aqui, apresentamos informações sobre assembleias de abelhas orquídeas baseadas em registros históricos de coleções entomológicas. Para cada espécie, foram calculadas a frequência de ocorrência e a dominância, classificando-as em 3 estados: espécies comuns, intermediárias ou raras. Foram geradas curvas de riqueza observada e estimada, com base no estimador Jackknife. Encontramos 1.257 espécimes de 56 espécies, constituindo registros de 1917 a 2009, e uma espécie é um novo registro no CEB. Maior número de espécimes e espécies foi concentrado em poucos locais, com intensificação nas coletas a partir dos anos70. Os resultados sugerem alta riqueza de abelhas orquídeas no CEB, embora esse cenário esteja longe do que é esperado para toda a área. A elevada ocorrência de espécies raras pode estar relacionada à baixa representatividade nas coleções e a proximidade entre as áreas favoreceu as amostragens. Mesmo assim, a lista de espécies e o estado de conservação aqui apresentados podem ser informações úteis em estudos interessados em comparar a fauna passada e atual de abelhas das orquídeas e, aliado a dados sobre as respostas das abelhas às mudanças de uso da terra ocorridas no CEB ao longo dos anos, podem servir de base para definição de áreas prioritárias para conservação.(AU)

Visceral Marek's disease in white-peafowl (Pavo cristatus) / Doença de Marek visceral em pavão-branco (Pavo cristatus)

Marek's disease (MD) is a lymphoproliferative disorder caused by Gallid herpesvirus 2 (MDV) that infects mainly domestic gallinaceous birds although wild birds may occasionally be affected. The current report describes the anatomopathological and molecular findings of a case of MD in a white-peafowl (Pavo cristatus). The signs included apathy, hyporexia, and diarrhea. Grossly, 0.5 to 1.5cm in diameter, yellow, soft nodules were observed in the skeletal muscle, lung, kidney, air sacs, small intestine, heart, ovary, ventriculus, and proventriculus. Microscopically, numerous atypical round neoplastic cells were noted. The molecular detection of MDV DNA was implemented to amplify part of the meq gene and products were sequenced for the phylogenetic analysis. Template DNA was obtained from tissues of the affected bird and from blood of all the gallinaceous birds of the Zoo. The expected amplicon for the partial amplification of MDV meq gene was obtained and the amplicons were sequenced. Sequences obtained enabled grouping the strain (accession no. KT768121) with MDV serotype 1 strains from the GenBank. Based on the anatomopathological and molecular findings, the diagnosis of MD in a white-peafowl was reached, and to the authors' knowledge, no previous report regarding MD was published in Pavo cristatus.(AU)

Doença de Marek (MD) é uma desordem linfoproliferativa causada pelo Gallid herpesvirus 2 (MDV), que infecta principalmente galináceos domésticos, porém aves silvestres podem ser ocasionalmente afetadas. O presente relato descreve os achados anatomopatológicos e moleculares de um caso de MD em um pavão-branco (Pavo cristatus). Os sinais clínicos incluíram apatia, hiporexia e diarreia. Macroscopicamente, foram observados nódulos macios, de 0,5 a 1,5cm de diâmetro, no músculo esquelético, no pulmão, nos rins, nos sacos aéreos, no intestino delgado, no coração, no ovário, no ventrículo e no proventrículo. Microscopicamente, numerosas células redondas neoplásicas atípicas foram notadas. A detecção molecular do DNA do MDV foi implementada para amplificar parte do gene meq, e os produtos foram sequenciados para análise filogenética. DNA foi obtido de tecidos de aves afetadas e do sangue de todos os galináceos do zoológico. A esperada amplificação de parte do gene meq de MDV amplificado foi ampliada e sequenciada. As sequências obtidas permitiram o agrupamento da cepa (acesso KT768121) com cepas do sorotipo 1 de MDV do GenBank.. O diagnóstico de MD em pavão-branco foi obtido com base nos achados anatomopatológicos e moleculares e, pelo conhecimento dos autores, não há relatos anteriores publicados de MD em Pavo cristatus.(AU)

Visceral Marek's disease in white-peafowl (Pavo cristatus) / Doença de Marek visceral em pavão-branco (Pavo cristatus)

Marek's disease (MD) is a lymphoproliferative disorder caused by Gallid herpesvirus 2 (MDV) that infects mainly domestic gallinaceous birds although wild birds may occasionally be affected. The current report describes the anatomopathological and molecular findings of a case of MD in a white-peafowl (Pavo cristatus). The signs included apathy, hyporexia, and diarrhea. Grossly, 0.5 to 1.5cm in diameter, yellow, soft nodules were observed in the skeletal muscle, lung, kidney, air sacs, small intestine, heart, ovary, ventriculus, and proventriculus. Microscopically, numerous atypical round neoplastic cells were noted. The molecular detection of MDV DNA was implemented to amplify part of the meq gene and products were sequenced for the phylogenetic analysis. Template DNA was obtained from tissues of the affected bird and from blood of all the gallinaceous birds of the Zoo. The expected amplicon for the partial amplification of MDV meq gene was obtained and the amplicons were sequenced. Sequences obtained enabled grouping the strain (accession no. KT768121) with MDV serotype 1 strains from the GenBank. Based on the anatomopathological and molecular findings, the diagnosis of MD in a white-peafowl was reached, and to the authors' knowledge, no previous report regarding MD was published in Pavo cristatus.(AU)

Doença de Marek (MD) é uma desordem linfoproliferativa causada pelo Gallid herpesvirus 2 (MDV), que infecta principalmente galináceos domésticos, porém aves silvestres podem ser ocasionalmente afetadas. O presente relato descreve os achados anatomopatológicos e moleculares de um caso de MD em um pavão-branco (Pavo cristatus). Os sinais clínicos incluíram apatia, hiporexia e diarreia. Macroscopicamente, foram observados nódulos macios, de 0,5 a 1,5cm de diâmetro, no músculo esquelético, no pulmão, nos rins, nos sacos aéreos, no intestino delgado, no coração, no ovário, no ventrículo e no proventrículo. Microscopicamente, numerosas células redondas neoplásicas atípicas foram notadas. A detecção molecular do DNA do MDV foi implementada para amplificar parte do gene meq, e os produtos foram sequenciados para análise filogenética. DNA foi obtido de tecidos de aves afetadas e do sangue de todos os galináceos do zoológico. A esperada amplificação de parte do gene meq de MDV amplificado foi ampliada e sequenciada. As sequências obtidas permitiram o agrupamento da cepa (acesso KT768121) com cepas do sorotipo 1 de MDV do GenBank.. O diagnóstico de MD em pavão-branco foi obtido com base nos achados anatomopatológicos e moleculares e, pelo conhecimento dos autores, não há relatos anteriores publicados de MD em Pavo cristatus.(AU)

Uso da técnica de swim-up para a remoção do Vírus da Artrite Encefalite Caprina do sêmen de reprodutores infectados / Use of swim-up technique for removal of the Caprine Arthritis Encephalitis Virus in the semen of infect bucks

Neste estudo, 67 ejaculados foram avaliados, antes e depois da técnica de swim-up, em relação à qualidade seminal e à presença do CAEV. Das 67 amostras testadas por PCRn, antes do swim-up, 47 (70,15%) foram positivas para o DNA pró-viral. No entanto, quatro amostras adicionais foram positivas ao RT-nested PCR após o swim-up, o que permite dizer que, pelo menos, 76,12% (51/67) delas estavam infectadas antes da lavagem. Todavia, em 23,88% (16/67) das amostras não foi detectada a presença do CAEV. Após a aplicação da técnica de swim-up, constatou-se, pela PCRn e RT-nested PCR, que houve uma redução significativa (²= 9,078, p<0,001) da presença do CAEV nas amostras seminais, pois 28 de 51 amostras positivas resultaram livres do vírus (54,90%), tanto para DNA pró-viral quanto para o vírus livre. Em relação à motilidade individual progressiva (MIP) e vigor espermático obtidos antes e depois da técnica de swim-up, observou-se uma diminuição significativa em suas médias, sendo o MIP de 86,42% para 71,49%, já o vigor espermático de 4,16 para 3,93. Conclui-se que a eliminação do CAEV no sêmen é de caráter intermitente, e que a associação da PCRn e RT-nested PCR é uma opção segura para a certificação sanitária individual das amostras seminais quanto à presença ou ausência do CAEV. Finalmente, a técnica de swim-up promove uma redução na infectividade de amostras de sêmen contaminadas, e, além disso, é possível promover a recuperação de espermatozoides viáveis.

In this study, 67 ejaculates were assessed before and after the swim-up technique in relation to semen quality and presence of CAEV. Of the 67 samples tested by Nested PCR, before swim-up 47 (70.15%) were positive for viral DNA. Furthermore, four additional samples were positive for RT-nested PCR after swim-up, which allows us to affirm that at least 76.12% (51/67) were infected before washing. However, 23.88% (16/67) of the samples did not detect the presence of CAEV. After application of the swim-up technique it was found, by Nested PCR and RT-nested PCR, that there was a significant decrease (² = 9.078, p <0.001) in the presence of CAEV in semen samples, once 28 of 51 positive samples were free from the virus (54.90%) for both proviral DNA and the free form of the virus. Regarding individual progressive motility (IPM) and spermatic vigor obtained before and after the swim-up technique, a significant decrease was observed in the average, being 86.42% of the IPM to 71.49% and the spermatic vigor from 4.16 for the 3.93. It is concluded that the removal of CAEV in semen has an intermittent character, and the combination of PCR and RT-nested PCR is a safe option for health certification of individual semen samples for the presence or absence of CAEV. Finally, the swim-up technique promotes a reduction in the infectivity of contaminated semen samples, and it is possible to promote the recovery of high individual progressive motility sperm and sperm vigor.

Uso da técnica de swim-up para a remoção do Vírus da Artrite Encefalite Caprina do sêmen de reprodutores infectados / Use of swim-up technique for removal of the Caprine Arthritis Encephalitis Virus in the semen of infect bucks

Neste estudo, 67 ejaculados foram avaliados, antes e depois da técnica de swim-up, em relação à qualidade seminal e à presença do CAEV. Das 67 amostras testadas por PCRn, antes do swim-up, 47 (70,15%) foram positivas para o DNA pró-viral. No entanto, quatro amostras adicionais foram positivas ao RT-nested PCR após o swim-up, o que permite dizer que, pelo menos, 76,12% (51/67) delas estavam infectadas antes da lavagem. Todavia, em 23,88% (16/67) das amostras não foi detectada a presença do CAEV. Após a aplicação da técnica de swim-up, constatou-se, pela PCRn e RT-nested PCR, que houve uma redução significativa (²= 9,078, p<0,001) da presença do CAEV nas amostras seminais, pois 28 de 51 amostras positivas resultaram livres do vírus (54,90%), tanto para DNA pró-viral quanto para o vírus livre. Em relação à motilidade individual progressiva (MIP) e vigor espermático obtidos antes e depois da técnica de swim-up, observou-se uma diminuição significativa em suas médias, sendo o MIP de 86,42% para 71,49%, já o vigor espermático de 4,16 para 3,93. Conclui-se que a eliminação do CAEV no sêmen é de caráter intermitente, e que a associação da PCRn e RT-nested PCR é uma opção segura para a certificação sanitária individual das amostras seminais quanto à presença ou ausência do CAEV. Finalmente, a técnica de swim-up promove uma redução na infectividade de amostras de sêmen contaminadas, e, além disso, é possível promover a recuperação de espermatozoides viáveis.(AU)

In this study, 67 ejaculates were assessed before and after the swim-up technique in relation to semen quality and presence of CAEV. Of the 67 samples tested by Nested PCR, before swim-up 47 (70.15%) were positive for viral DNA. Furthermore, four additional samples were positive for RT-nested PCR after swim-up, which allows us to affirm that at least 76.12% (51/67) were infected before washing. However, 23.88% (16/67) of the samples did not detect the presence of CAEV. After application of the swim-up technique it was found, by Nested PCR and RT-nested PCR, that there was a significant decrease (² = 9.078, p <0.001) in the presence of CAEV in semen samples, once 28 of 51 positive samples were free from the virus (54.90%) for both proviral DNA and the free form of the virus. Regarding individual progressive motility (IPM) and spermatic vigor obtained before and after the swim-up technique, a significant decrease was observed in the average, being 86.42% of the IPM to 71.49% and the spermatic vigor from 4.16 for the 3.93. It is concluded that the removal of CAEV in semen has an intermittent character, and the combination of PCR and RT-nested PCR is a safe option for health certification of individual semen samples for the presence or absence of CAEV. Finally, the swim-up technique promotes a reduction in the infectivity of contaminated semen samples, and it is possible to promote the recovery of high individual progressive motility sperm and sperm vigor.(AU)

Investigando a fragmentação não induzida e a susceptibilidade à fragmentação do DNA espermático: refinamento da avaliação espermática. Parte 2 / Investigating not induced fragmentation and susceptibility of sperm DNA: refinement of sperm evaluation. Second part

A integridade do DNA espermático está intimamente relacionada com a fertilidade. Técnicas queavaliam o DNA espermático possuem grande importância e potencial de serem aplicadas nas rotinas dasavaliações andrológicas. No entanto, são necessários maiores conhecimentos sobre as técnicas e seus princípiospara permitir que sejam empregadas apropriadamente de acordo com os objetivos e resultados esperados. Dessaforma, assim como abordado na Parte 1, nesta Parte 2 serão abordadas técnicas de avaliação do DNAespermático: TUNEL, laranja de acridina e Sperm Chromatin Structure Assay (SCSA). A técnica de TUNELfundamenta-se na adição de nucleotídeos modificados marcados com fluorescência às fitas fragmentadas. Atécnica avalia, portanto, diretamente a fragmentação de DNA da amostra. A sonda laranja de acridina é capaz dediferenciar, por meio de diferentes colorações, o DNA fragmentado do não fragmentado. Já a técnica de SCSAbaseia-se na imposição de um desafio ao espermatozoide; esta técnica avalia a susceptibilidade dosespermatozoides à fragmentação de DNA, sendo, portanto, uma avaliação indireta. A presente revisão permiteexpor a opinião dos autores sobre as diferentes técnicas e suas aplicações, mostrando o potencial emprego delasnos exames de rotina e nas pesquisas.(AU)

Sperm DNA integrity is directly related to male fertility. Techniques to assess sperm DNA are importantand have potential to be applied in routine evaluation of semen. However, the techniques and principles need tobe further studied to apply they correctly and to get relevant results. Thus, as discussed in Part 1, Part 2 willaddress evaluation techniques of sperm DNA: TUNEL, acridine orange and Sperm Chromatin Structure Assay(SCSA). TUNEL is based on addition of modified nucleotides labeled with fluorescence to fragmented tapesevaluating, therefore, directly, the DNA fragmentation of the sample. Acridine orange differentiates fragmentedDNA by different colors. On the other hand, SCSA are based on the imposition of a challenge to sperm. Thus,this technique assesses the susceptibility of sperm DNA fragmentation constituting indirect assessment. Thereview allows showing opinion of the authors about different techniques and their applications. Therefore,potential use of these techniques in routine exams and researches are addressed.(AU)

Investigando a compactação e a fragmentação não induzida do DNA espermático: refinamento da avaliação espermática parte 1 / Investigating condensation and not induced fragmentation of sperm DNA: Refinement of sperm evaluation first part

O DNA espermático possui papel essencial na reprodução, visto que danos no material genético podemprejudicar os processos de fecundação e desenvolvimento embrionário. Ademais, há evidências de que danos aoDNA podem ser causados por alterações epigenéticas. Entretanto, embora ainda não seja aplicada nas avaliaçõesandrológicas de rotina, faz-se essencial a avaliação do status de integridade do DNA espermático. Existemdiversas técnicas de avaliação com diferentes princípios e objetivos. A aplicação destas irá depender dosequipamentos disponíveis, do treinamento da equipe e das respostas a serem obtidas. Ainda, para a interpretaçãodos resultados obtidos, é necessário o conhecimento do princípio de análise de cada técnica. Assim, a presenterevisão, dividida em duas partes, tem por objetivo abordar diferentes técnicas de avaliação. As técnicasabordadas na parte 1 estão relacionadas às avaliações de compactação da cromatina (azul de toluidina, azul deanilina e cromomicina A3) e à avaliação direta da fragmentação de DNA (ensaio Cometa e teste de dispersão dacromatina modificado). Na parte 2, serão abordadas as técnicas de TUNEL, laranja de acridina e “SpermChromatin Structure Assay” (SCSA). Nesta revisão, serão abordados os princípios dos testes e a interpretaçãodos resultados baseados na literatura e nas pesquisas do grupo.(AU)

Sperm DNA has an important role on reproduction. Injuries in genetic material can impair thefertilization processes and embryonic development. Furthermore, there is evidence that DNA damage can becaused by epigenetic alterations. Although DNA evaluation in sperm analysis routine assessments is essential, itis not yet performed. There are numerous techniques of DNA evaluation with different principles and objectives.Application of these techniques will depend on the equipment available, the staff training and answers to berequired. To interpret the results, however, knowledge of each analysis technique is required. Therefore, thisreview, divided in two parts, aims to consider different techniques. The techniques that will be consideredthroughout the first part of review are: toluidine blue, aniline blue, A3 chromomycyn, Comet assay anddispersion test of modified chromatin. In the second part, it will be approached TUNEL, acridine orange andSperm Chromatin Structure Assay (SCSA) techniques. We will discuss the testes and the main results based onliterature and researches of our group.(AU)

Investigando a compactação e a fragmentação não induzida do DNA espermático: refinamento da avaliação espermática – parte 1 / Investigating condensation and not induced fragmentation of sperm DNA: Refinement of sperm evaluation – first part

O DNA espermático possui papel essencial na reprodução, visto que danos no material genético podemprejudicar os processos de fecundação e desenvolvimento embrionário. Ademais, há evidências de que danos aoDNA podem ser causados por alterações epigenéticas. Entretanto, embora ainda não seja aplicada nas avaliaçõesandrológicas de rotina, faz-se essencial a avaliação do status de integridade do DNA espermático. Existemdiversas técnicas de avaliação com diferentes princípios e objetivos. A aplicação destas irá depender dosequipamentos disponíveis, do treinamento da equipe e das respostas a serem obtidas. Ainda, para a interpretaçãodos resultados obtidos, é necessário o conhecimento do princípio de análise de cada técnica. Assim, a presenterevisão, dividida em duas partes, tem por objetivo abordar diferentes técnicas de avaliação. As técnicasabordadas na parte 1 estão relacionadas às avaliações de compactação da cromatina (azul de toluidina, azul deanilina e cromomicina A3) e à avaliação direta da fragmentação de DNA (ensaio Cometa e teste de dispersão dacromatina modificado). Na parte 2, serão abordadas as técnicas de TUNEL, laranja de acridina e “SpermChromatin Structure Assay” (SCSA). Nesta revisão, serão abordados os princípios dos testes e a interpretaçãodos resultados baseados na literatura e nas pesquisas do grupo.

Sperm DNA has an important role on reproduction. Injuries in genetic material can impair thefertilization processes and embryonic development. Furthermore, there is evidence that DNA damage can becaused by epigenetic alterations. Although DNA evaluation in sperm analysis routine assessments is essential, itis not yet performed. There are numerous techniques of DNA evaluation with different principles and objectives.Application of these techniques will depend on the equipment available, the staff training and answers to berequired. To interpret the results, however, knowledge of each analysis technique is required. Therefore, thisreview, divided in two parts, aims to consider different techniques. The techniques that will be consideredthroughout the first part of review are: toluidine blue, aniline blue, A3 chromomycyn, Comet assay anddispersion test of modified chromatin. In the second part, it will be approached TUNEL, acridine orange andSperm Chromatin Structure Assay (SCSA) techniques. We will discuss the testes and the main results based onliterature and researches of our group.

Investigando a fragmentação não induzida e a susceptibilidade à fragmentação do DNA espermático: refinamento da avaliação espermática. Parte 2 / Investigating not induced fragmentation and susceptibility of sperm DNA: refinement of sperm evaluation. Second part

A integridade do DNA espermático está intimamente relacionada com a fertilidade. Técnicas queavaliam o DNA espermático possuem grande importância e potencial de serem aplicadas nas rotinas dasavaliações andrológicas. No entanto, são necessários maiores conhecimentos sobre as técnicas e seus princípiospara permitir que sejam empregadas apropriadamente de acordo com os objetivos e resultados esperados. Dessaforma, assim como abordado na Parte 1, nesta Parte 2 serão abordadas técnicas de avaliação do DNAespermático: TUNEL, laranja de acridina e Sperm Chromatin Structure Assay (SCSA). A técnica de TUNELfundamenta-se na adição de nucleotídeos modificados marcados com fluorescência às fitas fragmentadas. Atécnica avalia, portanto, diretamente a fragmentação de DNA da amostra. A sonda laranja de acridina é capaz dediferenciar, por meio de diferentes colorações, o DNA fragmentado do não fragmentado. Já a técnica de SCSAbaseia-se na imposição de um desafio ao espermatozoide; esta técnica avalia a susceptibilidade dosespermatozoides à fragmentação de DNA, sendo, portanto, uma avaliação indireta. A presente revisão permiteexpor a opinião dos autores sobre as diferentes técnicas e suas aplicações, mostrando o potencial emprego delasnos exames de rotina e nas pesquisas.

Sperm DNA integrity is directly related to male fertility. Techniques to assess sperm DNA are importantand have potential to be applied in routine evaluation of semen. However, the techniques and principles need tobe further studied to apply they correctly and to get relevant results. Thus, as discussed in Part 1, Part 2 willaddress evaluation techniques of sperm DNA: TUNEL, acridine orange and Sperm Chromatin Structure Assay(SCSA). TUNEL is based on addition of modified nucleotides labeled with fluorescence to fragmented tapesevaluating, therefore, directly, the DNA fragmentation of the sample. Acridine orange differentiates fragmentedDNA by different colors. On the other hand, SCSA are based on the imposition of a challenge to sperm. Thus,this technique assesses the susceptibility of sperm DNA fragmentation constituting indirect assessment. Thereview allows showing opinion of the authors about different techniques and their applications. Therefore,potential use of these techniques in routine exams and researches are addressed.

The role of proestrus on fertility and postovulatory uterine function in the cow

Modern protocols to synchronize ovulations for timed artificial insemination and timed embryo transfer that include manipulations in the proestrus period (i.e., between luteolysis and estrus) affect fertility in cattle. Specifically, stimulating pre-ovulatory follicle growth and exposure to estrogens after CL regression increase the proportion of cows pregnant and decrease late embryo mortality. Such effects may be due to both pre-ovulatory actions of estrogens and post-ovulatory actions of progesterone, as concentrations of the later hormone may be changed in response to manipulations conducted during proestrus. In the first portion of this paper we describe strategies used recently to manipulate the proestrus period in protocols for synchronization of ovulation, and to present evidence of their effects on fertility. Manipulations of timing and prominence of sex steroids during the proestrus and early diestrus that affect fertility may act on targets such as the endometrium. This tissue expresses receptors for both estrogens and progesterone and these hormones change endometrial function to support conceptus growth and pregnancy maintenance. However, specific cellular and molecular mechanisms through which fertility is affected via manipulations of the proestrus are poorly understood. In the second portion of this paper we describe a well-defined animal model to study changes in endometrial function induced by manipulations conducted during the proestrus. Such manipulations induced endometrial changes on sex steroid receptors expression, cell proliferation, oxidative metabolism and eicosanoid synthesis in the uterus, but not on glucose transport to uterine lumen . In summary, evidence is accumulating to support a positive role of increasing duration and estrogen availability during the proestrus on fertility to synchronization protocols. Such positive effects may be through changes in endometrial function to stimulate conceptus growth and survival.

The role of proestrus on fertility and postovulatory uterine function in the cow

Modern protocols to synchronize ovulations for timed artificial insemination and timed embryo transfer that include manipulations in the proestrus period (i.e., between luteolysis and estrus) affect fertility in cattle. Specifically, stimulating pre-ovulatory follicle growth and exposure to estrogens after CL regression increase the proportion of cows pregnant and decrease late embryo mortality. Such effects may be due to both pre-ovulatory actions of estrogens and post-ovulatory actions of progesterone, as concentrations of the later hormone may be changed in response to manipulations conducted during proestrus. In the first portion of this paper we describe strategies used recently to manipulate the proestrus period in protocols for synchronization of ovulation, and to present evidence of their effects on fertility. Manipulations of timing and prominence of sex steroids during the proestrus and early diestrus that affect fertility may act on targets such as the endometrium. This tissue expresses receptors for both estrogens and progesterone and these hormones change endometrial function to support conceptus growth and pregnancy maintenance. However, specific cellular and molecular mechanisms through which fertility is affected via manipulations of the proestrus are poorly understood. In the second portion of this paper we describe a well-defined animal model to study changes in endometrial function induced by manipulations conducted during the proestrus. Such manipulations induced endometrial changes on sex steroid receptors expression, cell proliferation, oxidative metabolism and eicosanoid synthesis in the uterus, but not on glucose transport to uterine lumen . In summary, evidence is accumulating to support a positive role of increasing duration and estrogen availability during the proestrus on fertility to synchronization protocols. Such positive effects may be through changes in endometrial function to stimulate conceptus growth and survival. (AU)

Controle farmacológico do ciclo estral / Pharmacologicol control of oestrus cicle

O emprego de hormônios na fêmea suína objetiva a sincronização do estro à puberdade em marrãs e a sincronização do estro para o emprego da técnica da inseminação artificial em tempo fixo. Na sincronização do estro à puberdade, atenção especial deve estar voltada ao manejo da marrã, pois, além de representar de 30 a 40% do plantel de matrizes, vários fatores envolvidos no manejo afetam a vida útil reprodutiva, influenciando,assim, o rebanho como um todo. O presente trabalho vem abordar alguns aspectos relacionados aos hormônios no ciclo estral, com atenção voltada à importância da sincronização do estro, visando, no complexo interativo do manejo reprodutivo, a uma vida útil reprodutiva ideal, fruto do melhor aproveitamento da matriz no plantel e consequente homogeneização da produção.p(AU)

The use of hormones in the swine female, aims the estrus synchronization at puberty in gilts and the estrus synchronization to the technique of artificial insemination at fixed time. Special attention must be given to the puberty estrus synchronization on the gilts management, because, besides representing 30 to 40% of the breeding herd, there are many factors involved that may affect their reproductive lifetime. The presenting article describes some aspects in relation to the hormones in estrous cycle, mainly estrus synchronization that influenced reproductive lifetime, to the better usage of the female management in the breeding herd and finally in direction to the production homogeneity(AU)

Controle farmacológico do ciclo estral / Pharmacologicol control of oestrus cicle

O emprego de hormônios na fêmea suína objetiva a sincronização do estro à puberdade em marrãs e a sincronização do estro para o emprego da técnica da inseminação artificial em tempo fixo. Na sincronização do estro à puberdade, atenção especial deve estar voltada ao manejo da marrã, pois, além de representar de 30 a 40% do plantel de matrizes, vários fatores envolvidos no manejo afetam a vida útil reprodutiva, influenciando,assim, o rebanho como um todo. O presente trabalho vem abordar alguns aspectos relacionados aos hormônios no ciclo estral, com atenção voltada à importância da sincronização do estro, visando, no complexo interativo do manejo reprodutivo, a uma vida útil reprodutiva ideal, fruto do melhor aproveitamento da matriz no plantel e consequente homogeneização da produção.p

The use of hormones in the swine female, aims the estrus synchronization at puberty in gilts and the estrus synchronization to the technique of artificial insemination at fixed time. Special attention must be given to the puberty estrus synchronization on the gilts management, because, besides representing 30 to 40% of the breeding herd, there are many factors involved that may affect their reproductive lifetime. The presenting article describes some aspects in relation to the hormones in estrous cycle, mainly estrus synchronization that influenced reproductive lifetime, to the better usage of the female management in the breeding herd and finally in direction to the production homogeneity