Avaliação comparativa de métodos de ensaio imunoenzimático para theileria equi de amostras de soro equino do estado de São Paulo / Comparative evaluation of methods of immunoenzymatic assay for theileria equi of samples of equine serum of the state of São Paulo

A presente pesquisa teve como objetivo comparar a sensibilidade e especificidade de dois testes diagnósticos, um ELISA indireto e um ELISA competitivo,para Theileria equi,com a finalidade de disponibilizar um teste alternativo para o diagnóstico da babesiose em rebanhos equinos em território nacional. Foram avaliadas 168 amostras de soro equino (suspeitos ou não para babesiose), com idade mínima de um ano, independente de sexo, raça e manejo. Os testes foram realizados segundo especificações de cada fabricante. Os resultados obtidos foram analisados estatisticamente pelo Teste do Qui-quadrado. A concordância entre os testes foi de 97,2% entre os animais soropositivos (105 soropositivos no c-ELISA e 108 soropositivos no ELISA indireto) e 95,2% dos animais soronegativos (63 soronegativos no c-ELISA e 60 soronegativos no ELISA indireto). Não foram observadas diferenças estatisticamente significativas entre os dois testes. Concluiu-se que o teste ELISA indireto apresentou alta sensibilidade e especificidade (98,1% e 92,1%, respectivamente) para o diagnóstico de Babesiose por Theileria equi.

The present research had as objective to compare thesensitivity and specicvityof the tests of indirectELISA e competitive ELISA for Theileria equi, with purpose to evaluate an alternative test for control of babesiose in equinos flocks in domestic territory. 168 samples of equine serum had been evaluated (suspected or babesiosis does not stop), with minimum age of one year, independent of sex, race and handling. The tests had been carried through according to specifications of each manufacturer, following orientations of each one. The gotten results had been analyzed statistical by the Test of the Qui-quadrado. As result, agreement was observed enters the tests of 97,2% of soropositives animals (105 soropositives in c-ELISA and 108 soropositives in the indirect ELISA) and 95.2% of the soronegatives animals (63 soronegatives in c-ELISA and 60 soronegatives in the indirect ELISA). Statistical significant differences between Indirect and competitive test ELISA for Theileria equi had not been observed. It is concluded that indirect test ELISA showed high sensitivity and specificity (98,1% e 92,1%, respectively) for the diagnosis of Babesiosis by Theileria equi.

Avaliação comparativa de métodos de ensaio imunoenzimático para theileria equi de amostras de soro equino do estado de São Paulo / Comparative evaluation of methods of immunoenzymatic assay for theileria equi of samples of equine serum of the state of São Paulo

A presente pesquisa teve como objetivo comparar a sensibilidade e especificidade de dois testes diagnósticos, um ELISA indireto e um ELISA competitivo,para Theileria equi,com a finalidade de disponibilizar um teste alternativo para o diagnóstico da babesiose em rebanhos equinos em território nacional. Foram avaliadas 168 amostras de soro equino (suspeitos ou não para babesiose), com idade mínima de um ano, independente de sexo, raça e manejo. Os testes foram realizados segundo especificações de cada fabricante. Os resultados obtidos foram analisados estatisticamente pelo Teste do Qui-quadrado. A concordância entre os testes foi de 97,2% entre os animais soropositivos (105 soropositivos no c-ELISA e 108 soropositivos no ELISA indireto) e 95,2% dos animais soronegativos (63 soronegativos no c-ELISA e 60 soronegativos no ELISA indireto). Não foram observadas diferenças estatisticamente significativas entre os dois testes. Concluiu-se que o teste ELISA indireto apresentou alta sensibilidade e especificidade (98,1% e 92,1%, respectivamente) para o diagnóstico de Babesiose por Theileria equi.(AU)

The present research had as objective to compare thesensitivity and specicvityof the tests of indirectELISA e competitive ELISA for Theileria equi, with purpose to evaluate an alternative test for control of babesiose in equinos flocks in domestic territory. 168 samples of equine serum had been evaluated (suspected or babesiosis does not stop), with minimum age of one year, independent of sex, race and handling. The tests had been carried through according to specifications of each manufacturer, following orientations of each one. The gotten results had been analyzed statistical by the Test of the Qui-quadrado. As result, agreement was observed enters the tests of 97,2% of soropositives animals (105 soropositives in c-ELISA and 108 soropositives in the indirect ELISA) and 95.2% of the soronegatives animals (63 soronegatives in c-ELISA and 60 soronegatives in the indirect ELISA). Statistical significant differences between Indirect and competitive test ELISA for Theileria equi had not been observed. It is concluded that indirect test ELISA showed high sensitivity and specificity (98,1% e 92,1%, respectively) for the diagnosis of Babesiosis by Theileria equi.(AU)

Determinação sérica de colesterol e triglicérides em cavalos soroprodutores alimentados com concentrados com teores de 15% ou 22% de proteína bruta / Serum evaluation of cholesterol and triglycerides of serum-producing horses fed concentrate with 15% or 22% of crude protein

A produção de soro-hiperimune em eqüinos ainda é fundamental para obtenção do soro utilizado no tratamento de algumas enfermidades como o tétano e a difteria. Para verificar o possível benefício da utilização de concentrados hiperprotéicos na dieta dos cavalos soroprodutores da Fazenda São Joaquim do Instituto Butantan-SP, foram analisados os teores séricos de colesterol e triglicérides de 32 animais, pertencentes ao plantel de produção de soro antidiftérico. Estes foram distribuídos, ao acaso, em dois grupos de 16 eqüinos. Os animais do grupo A receberam concentrado com 15% de proteína bruta (PB) e os animais do grupo B receberam concentrado com 22% de PB. As amostras de soro foram obtidas em dois ciclos de produção nos momentos anteriores à inoculação do antígeno, antes das sangrias de produção e nos dias 15, 30 e 45 de descanso. As concentrações de triglicérides foram maiores no grupo Bno dia 58 do primeiro ciclo (p<0,001) e, no segundo ciclo, foram maiores no grupo A nos dias 95 e 137 (p<0,04) e no grupo B no dia 109 (p<0,04). Não houve diferença entre os grupos para as concentrações séricas de colesterol. Este trabalho concluiu que embora as concentrações séricas de triglicérides e colesterol sejam sensíveis ao processo de produção de plasma-hiperimune antidifitérico, os resultados encontrados não foram suficientes para afirmar se hábenefício ou não na utilização de concentrado hiperprotéico(22% PB) em cavalos produtores de soro-hiperimune anti-difteria em dois ciclos de produção.(AU)

The hyperimmune serum production in horses is still fundamental to obtain the serum used in the treatment of some diseases like tetanus and diphtery. In order to determine the benefit of the utilization of high-protein concentrate in serum-producing horses dietary of Butantan Institute, the serum concentrations of cholesterol and triglycerides were screened from a group of 32 anti-diphteric serum-producing horses. Those horses were distributed occasionally in two groups of 16 equines. The animals of group A were fed with a concentrate with 15% of crude protein (CP) and the animals of group B were fed with a concentrate with 22% of CP. The serum samples were obtained in two immunization periods, in moments previous to the antigen inoculation, before the bleeding of production and with a delay of 15, 30 and 45 days after the last bleeding. The serum concentrations of triglycerides were higher in group B in day 58 of the first period (p<0,001) and in the second period were higher in group A in days 95 and 137 (p<0,04) and in group B in day 109(p<0,04). There was no difference between the groups for cholesterol serum concentrations. We concluded that although the triglycerides and cholesterol serum concentrations be sensitive to the process ofanti-diphteric hyperimmune plasma production, the results found were not enough to affirm weather there is or not a benefit in the utilization of high-protein concentrate (22% CP) in anti-diphteric serum-producing horses based on two periods of production.(AU)

Investigação diagnóstica de doença concomitante babesiose e anaplasmose em rebanho eqüino, por técnicas de Nested PCR e c - ELISA ou ELISA indireto / Diagnostic investigation of concomitant disease babesiosis and anaplasmosis in equine herd by nested PCR e - ELISA or indirect ELISA

Em função da proximidade cada vez maior entre o cavalo e o homem, é de extrema importância ter conhecimentos das doenças que acometem os equinos, que por ventura, podem acometer seres humanos. Dentre muitas doenças, pode-se citar duas, que promovem grandes perdas econômicas aos rebanhos eqüinos, tanto no tratamento desses rebanhos, como com a morte dos mesmos, dificultando a importação e exportação de animais: a babesiose e a erliquiose (anaplasmose), que podem estar ou não associadas, acometendo um animal, concomitantemente. A presente pesquisa teve como objetivo investigar e diagnosticar doença concomitante babesiose (por Babesia equi ou Theileria equi) e Erliquiose (por Erliquia equi ou Anaplasma phagocytophilum), no estado de São Paulo, em rebanhos eqüinos, utilizando as técnicas de Nested PCR (Nested polymerase chain reaction reação em cadeia pela polimerase para diagnóstico de T. equi e A. phagocytophilum) e c-ELISA (competitive enzyme-linked immunosorbent assay para diagnóstico de T. equi) ou ELISA indireto (para diagnóstico de A. phagocytophilum) e comparar os resultados obtidos nas diferentes técnicas em 250 amostras de eqüino (sangue total e soro). Como resultado, obteve-se 38,4%, 46% e 36% de positividade, respectivamente, nos testes de pesquisa de hematozoário, c-ELISA e Nested PCR para Theileria equi e 0%, 3% e 0% de positividade, respectivamente, nos testes de pesquisa de hemoparasita, ELISA indireto e Nested PCR para Anaplasma phagocytophilum, não sendo observada a co-infecção de Babesiose e Anaplasmose no rebanho estudo

Due to the increasing proximity between horse and man, it is of extreme importance to understand the diseases that affect horses which by chance may affect humans. Among many diseases, babesiosis and ehrlichiosis (anaplasmosis) promote high economic losses to horses herds in consequence of costs of treatment and also death, making it difficult to import and export animals: They can or not be linked affecting an animal at the same time. This study aimed to investigate and diagnose concomitant babesiosis (Babesia equi and Theileria equi) and ehrlichiosis (for ehrlichia equipment or Anaplasma phagocytophilum) in equine herds of the state of Sao Paulo, using the techniques of Nested PCR (Nested polymerase chain reaction for the diagnosis of T. equi and A. phagocytophilum) and c-ELISA (competitive enzyme-linked immunosorbent assay for diagnosis of T. equi) or ELISA (for diagnosis of A. phagocytophilum). Also to compare results obtained in these different techniques in 250 samples of horse (whole blood and serum). Results showed 38.4%, 46% and 36% positivity, respectively, in tests for the detection of Theileria equi through hematozoan, c-ELISA and Nested PCR and 0%, 3% and 0% positivity, respectively, in tests for the detection of Anaplasma phagocytophilum through blood parasites, indirect ELISA and Nested PCR. It was not observed co-infection Babesiosis and anaplasmosis in the herd study

AVALIAÇÃO COMPARATIVA DE MÉTODOS DE ENSAIO IMUNOENZIMÁTICO PARA THEILERIA EQUI DE AMOSTRAS DE SORO EQUINO DO ESTADO DE SÃO PAULO.

A presente pesquisa teve como objetivo comparar a sensibilidade e especificidade de dois testes diagnósticos, um ELISA indireto e um ELISA competitivo,para Theileria equi,com a finalidade de disponibilizar um teste alternativo para o diagnóstico da babesiose em rebanhos equinos em território nacional. Foram avaliadas 168 amostras de soro equino (suspeitos ou não para babesiose), com idade mínima de um ano, independente de sexo, raça e manejo. Os testes foram realizados segundo especificações de cada fabricante. Os resultados obtidos foram analisados estatisticamente pelo Teste do Qui-quadrado. A concordância entre os testes foi de 97,2% entre os animais soropositivos (105 soropositivos no c-ELISA e 108 soropositivos no ELISA indireto) e 95,2% dos animais soronegativos (63 soronegativos no c-ELISA e 60 soronegativos no ELISA indireto). Não foram observadas diferenças estatisticamente significativas entre os dois testes. Concluiu-se que o teste ELISA indireto apresentou alta sensibilidade e especificidade (98,1% e 92,1%, respectivamente) para o diagnóstico de Babesiose por Theileria equi.

Variações da crase sangüínea durante a hiperimunização e após sangria e plasmaferese em eqüinos de produção de soro hiperimune anti-crotálico / Variation of blood profile during the hyperimmunization and after bleeding and plasmapherese in equine serum hyperimune anticrotalic\'s production

Para o estabelecimento do quadro sangüíneo de eqüinos durante a hiperimunização para produção de soro hiperimune anti-crotálico e após as sangrias de produção e a plasmaferese, foram utilizados 20 animais, obedecendo as normas do protocolo de hiperimunização do Instituto Butantan. As amostras foram colhidas antes das inoculações do antígeno (veneno crotálico), antes e depois das sangrias de produção, após as plasmafereses e 15, 30 e 45 dias após a última sangria, totalizando 340 colheitas, realizadas em 17 momentos. Nas amostras, foram determinados valores do hemograma (número de hemácias, volume globular, teor de hemoglobina, VCM, HCM, CHCM, número de leucócitos, contagem diferencial de leucócitos) e de alguns parâmetros de bioquímica sérica (ferro, transferrina e bilirrubinas). Significativas variações no quadro hematológico dos eqüinos foram observadas na fase de hiperimunização, caracterizando anemia normocítica, normocrômica, sem alterações significativas do leucograma. Além disso, verificou-se diminuição significativa da sideremia associada ao aumento da concentração de transferrina sérica, permitindo classificar-se a anemia, como do tipo ferropriva. Nas fases de sangrias, observou-se evidentes variações no quadro hematológico demonstrando uma anemia hipocitêmica normocítica hipercrômica pós-sangrias, sem variações nos valores do leucograma, mas com significativas variações nos constituintes bioquímicos (diminuição do ferro sérico e aumento da concentração de transferrina). No período de repouso foi evidente a eficácia da plasmaferese, com pronta , mas parcial recuperação do hemograma e da sideremia dos animais anêmicos, facilitando o rápido retorno para normalidade hematológica, tornando-os aptos a nova produção de soro hiperimune

Twenty animals were used to assess the blood profile of horses during hyperimmunization for anticrotalic hyperimmune serum production and after the bleedings of production and the plasmapherese, obeying the protocol schedule of Instituto Butantan. The samples were obtained before the antigen inoculations (crotalic poison), before and after the bleedings of production, right after the plasmapherese and 15, 30 and 45 days after the last one, making a total of 340 collections in 17 moments. Samples were analyzed for hemogram (number of erythrocytes, packed cell volume, hemoglobin, MCV, MCH, MCHC, white cell count, differential leukocytes count) and some serum biochemical components (iron, transferrin and bilirrubin). Significant variations were observed on the blood profile of the horses throughout the hyperimmunization, showing normocytic, normochromic anemia, without significant alterations on leukogram. Beside that, a significant reduction of the hemosiderin was observed in association with the elevation of the serum transferrin concentration, making possible its classification as an iron deficiency-like anemia. During the bleedings phases, evident variations were observed on the blood profile showing pos-sangrias hypocitemic normocytic, hyperchromic anemia without changing the leukogram values, but with significant variations on the biochemical components (reduction of serum iron and increase of transferrin concentrations). During rest periods, the efficacy of plasmapherese was evident with a rapid but partial recuperation of the hemogram and the hemosiderin of the anemic animals, making easier the fast return of hematologic normality and making them capable to a new hyperimmune serum production