A fast immunoassay for the screening of alfa-trenbolone in bovine urine / Um imunoensaio rápido para a detecção de alfa-trembolona em urinabovina

Brazil is one of the many countries that forbids the use of anabolic compounds, which generates difficulties on monitoring its use, once it has one of the biggest cattle herd. Therefore, several anabolic compounds are used, including trenbolone acetate. With the agreement of “Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento", an ELISA based test was done with the production of polyclonal antibodies in rabbits and testing in steers urine which received trenbolone acetate implants. The test showed to be cheap, easy and reliable to use in bovine urine to determine alfa- trenbolone, trenbolone acetate major metabolite, released in the animals urine until 60 days after implant was been injected. The results in comparison to the ones obtained by the commercial kit used by the Brazilian "Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento" were similar, with no significant differences.(AU)

O Brasil está entre os países que mantêm o uso de anabolizantes proibido, o que gera dificuldades muito grandes no monitoramento destas substâncias, uma vez que possui o maior rebanho bovino. Contudo, diversas substâncias são largamente utilizadas, entre as quais o acetato de trembolona. Com o consentimento do Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento, foram produzidos anticorpos policlonais para um teste baseado em ELISA ("enzyme linked immunosorbent assay") capazes de detectar acetato de trembolona na urina de bovinos tratados com trembolona. O teste apresentou baixo custo e de fácil execução para a detecção de alfa-trembolone, o principal metabólito na absorção do acetato de trembolona, liberado na urina dos animais. Os resultados foram similares aos obtidos com o "kit" comercial usado pelo Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento do Brasil.(AU)

Residuos de antimicrobianos em peixe : depleção residual e desenvolvimento de metodos analiticos / Antimicrobials residues in fish : residual depletion and development of analytical methods

Os antimicrobianos são largamente empregados na medicina veterinária, e resíduos destes podem permanecer nos alimentos de origem animal, acima de valores considerados seguros, quando não são respeitadas as boas práticas veterinárias. Este trabalho teve por objetivos: (i) desenvolver e validar métodos analíticos para a determinação de multi-resíduos de quinolonas (enrofloxacina, ciprofloxacina, danofloxacina, sarafloxacina, ácido oxolínico e flumequina) em carne de peixe, usando a cromatografia líquida de alta eficiência associada a detecção por fluorescência (HPLC-FL) e cromatografia líquida associada a espectrometria de massas em tandem por interface de ionização por electrospray e (LC-ESI-MS/MS Q-ToF); (ii) desenvolver e validar métodos analíticos para a determinação de oxitetraciclina (OTC) em ração e carne de tilápias por HPLC-DAD e HPLC-FL, respectivamente e (iii) realizar um ensaio com tilápias (Oreochromis niloticus) para avaliar a depleção da OTC na carne desses peixes. De modo geral, a extração das quinolonas e da OTC da carne de peixes foi conduzida por extração sólido líquido seguida da limpeza do extrato em cartuchos de extração em fase sólida. A separação cromatográfica dos antimicrobianos foi realizada em coluna de fase reversa octadecil híbrida. Os métodos foram validados mediante avaliação dos seguintes parâmetros: faixa linear, linearidade, sensibilidade, seletividade, limites de detecção e quantificação, precisão intra e inter-ensaios e exatidão. Para o método LC-MS/MS foi também avaliado o efeito matriz. Todos os métodos foram considerados adequados aos objetivos propostos neste trabalho. Para avaliar a depleção de OTC na carne de tilápias, os peixes (peso médio de 93 a 115 g) receberam o fármaco via ração na dose de 80 mg OTC/kg peso vivo/dia, por cinco dias consecutivos. A temperatura da água durante o ensaio variou de 16,5 a 24,5 °C. A curva de depleção se ajustou a um modelo exponencial de primeira ordem. O tempo de meia vida de eliminação foi de 2,5 dias e o período de carência estimado foi de 5 dias

Antimicrobials are widely employed in veterinary medicine, and their residues could remain in food of animal origin above values considered safe if good veterinary practices are not followed. The aim of this work is to address (i) the development and validation of analytical methods using high performance liquid chromatography with fluorescence detection (HPLC-FL) and liquid chromatography electrospray ionization tandem mass spectrometry (LC-ESI-MS/MS Q-Tof) for the determination of multi residues of quinolones (enrofloxacin, ciprofloxacin, danofloxacin, sarafloxacin, oxolinic acid and flumequine) in fish; (ii) the development and validation of analytical methods for the determination of oxytetracycline (OTC) in fish feed and tilapia fish fillets using HPLC-DAD and HPLC-FL, respectively, and (iii) the study of tilapias (Oreochromis niloticus) in order to evaluate the depletion of OTC from the fish fillet. In general, the extraction of the quinolones and OTC from the fish matrix was conducted by solid-liquid extraction followed by clean-up on solid phase extraction cartridges. The antimicrobials chromatographic separation was performed on a reverse phase octadecyl hybrid column. The methods were validated through the following parameters: linear range, linearity, sensitivity, selectivity, detection limit, quantitation limit, intra- and inter-assay precision and accuracy. For the LC-MS/MS method, the matrix effect was also evaluated. All methods were adequate to the proposed objectives. In order to evaluate the depletion of OTC in the tilapia fillets, the fish (weight range 93 ¿ 115 g) were given medicated feed in a concentration of 80 mg OTC/kg body weight/day for five consecutive days. The water temperature was between 16.5 to 24.5 °C during the treatment. The depletion curve was fitted to an exponential first order model. The elimination half-life was 2.5 days and the withdrawal period was estimated as five days