Tuberculosis in bovine slaughtered in the semi-arid region of Rio Grande do Norte, Brazil / Tuberculose em bovinos abatidos no semiárido do Rio Grande do Norte, Brasil

Between November 2017 and August 2018, in order to determine the occurrence of tuberculosis in cattle slaughtered in the semi-arid region of Rio Grande do Norte, 11,610 bovine carcasses underwent a routine post-mortem inspection. One animal presented suggestive lesions and samples from lung, spleen and heart were submitted to microbiological culture in Stonebrink medium for 90 days and molecular analysis by nested-PCR. For histopathological examination and Ziehl Neelsen staining, the omentum was used. In the cultured samples, two of them (heart and spleen) showed growth, but were not confirmed as M. bovis by conventional PCR. At nested-PCR, the samples showed amplification for the TbD1 region. The presence of numerous granulomas was detected in the histopathological examination characterized by anecrotic center and areas of mineralization, as well as the presence of acid-fast bacilli (AFB) in the Ziehl Neelsen stain. Microbiological culture can show false negative results, despite being considered a gold standard technique, although it takes time. Nested-PCR and histopathology show fast and effective results for the diagnosis of the disease. The presence of positive animals represents a public health risk in the studied region. Therefore, one of the essential systems applied to the control of bovine tuberculosis is the epidemiological surveillance of animals in slaughterhouses.

Entre novembro de 2017 e agosto de 2018, com objetivo de determinar a ocorrência de tuberculose em bovinos abatidos no semiárido do Rio Grande do Norte, 11.610 carcaças de bovinos passaram por inspeção post-mortem de rotina. Um animal apresentou lesões sugestivas e amostras de pulmão, baço e coração foram submetidas ao cultivo microbiológico em meio Stonebrink por 90 dias e análise molecular pela nested-PCR. O omento foi utilizado para exame histopatológico e coloração de Ziehl Neelsen. Nas amostras cultivadas, duas (coração e baço) evidenciaram crescimento, mas M. bovis não foi confirmado na PCR convencional. Já na nested-PCR, as amostras exibiram amplificação para a região TbD1. Foi detectada a presença de inúmeros granulomas no exame histopatológico caracterizados por possuírem um centro necrótico e áreas de mineralização, bem como a presença de bacilos Álcool-ácido resistentes (BAAR)na coloração de Ziehl-Neelsen. A cultura microbiológica pode apresentar resultados falso-negativos, apesar de ser considerada uma técnica padrão-ouro, embora demorada. A nested-PCR e a histopatologia apresentam resultados rápidos e eficazes para o diagnóstico da enfermidade. A presença de animais positivos representa um risco a saúde pública na região estudada. Portanto, um dos sistemas essenciais aplicados ao controle da tuberculose bovina é a vigilância epidemiológica dos animais em abatedouros.

Tuberculosis in bovine slaughtered in the semi-arid region of Rio Grande do Norte, Brazil / Tuberculose em bovinos abatidos no semiárido do Rio Grande do Norte, Brasil

Between November 2017 and August 2018, in order to determine the occurrence of tuberculosis in cattle slaughtered in the semi-arid region of Rio Grande do Norte, 11,610 bovine carcasses underwent a routine post-mortem inspection. One animal presented suggestive lesions and samples from lung, spleen and heart were submitted to microbiological culture in Stonebrink medium for 90 days and molecular analysis by nested-PCR. For histopathological examination and Ziehl Neelsen staining, the omentum was used. In the cultured samples, two of them (heart and spleen) showed growth, but were not confirmed as M. bovis by conventional PCR. At nested-PCR, the samples showed amplification for the TbD1 region. The presence of numerous granulomas was detected in the histopathological examination characterized by anecrotic center and areas of mineralization, as well as the presence of acid-fast bacilli (AFB) in the Ziehl Neelsen stain. Microbiological culture can show false negative results, despite being considered a gold standard technique, although it takes time. Nested-PCR and histopathology show fast and effective results for the diagnosis of the disease. The presence of positive animals represents a public health risk in the studied region. Therefore, one of the essential systems applied to the control of bovine tuberculosis is the epidemiological surveillance of animals in slaughterhouses.(AU)

Entre novembro de 2017 e agosto de 2018, com objetivo de determinar a ocorrência de tuberculose em bovinos abatidos no semiárido do Rio Grande do Norte, 11.610 carcaças de bovinos passaram por inspeção post-mortem de rotina. Um animal apresentou lesões sugestivas e amostras de pulmão, baço e coração foram submetidas ao cultivo microbiológico em meio Stonebrink por 90 dias e análise molecular pela nested-PCR. O omento foi utilizado para exame histopatológico e coloração de Ziehl Neelsen. Nas amostras cultivadas, duas (coração e baço) evidenciaram crescimento, mas M. bovis não foi confirmado na PCR convencional. Já na nested-PCR, as amostras exibiram amplificação para a região TbD1. Foi detectada a presença de inúmeros granulomas no exame histopatológico caracterizados por possuírem um centro necrótico e áreas de mineralização, bem como a presença de bacilos Álcool-ácido resistentes (BAAR)na coloração de Ziehl-Neelsen. A cultura microbiológica pode apresentar resultados falso-negativos, apesar de ser considerada uma técnica padrão-ouro, embora demorada. A nested-PCR e a histopatologia apresentam resultados rápidos e eficazes para o diagnóstico da enfermidade. A presença de animais positivos representa um risco a saúde pública na região estudada. Portanto, um dos sistemas essenciais aplicados ao controle da tuberculose bovina é a vigilância epidemiológica dos animais em abatedouros.(AU)

Molecular detection of Cercopithifilaria bainae and other tick-borne pathogens in Rhipicephalus sanguineus s.l. isolated from dogs in Midwest Brazil / Detecção molecular de Cercopithifilaria bainae e outros patógenos transmitidos por carrapatos em Rhipicephalus sanguineus s.l. isolados de cães no Centro-Oeste do Brasil

The aim of the present study was to detect Cercopithifilaria bainae and other tick-borne pathogens and to perform molecular characterization of the tick Rhipicephalus sanguineus s.l. collected from dogs. Ticks (n = 432, including 8 larvae, 59 nymphs, and 365 adults) were sampled from domiciled dogs (n = 73) living in Campo Grande, Mato Grosso do Sul (Midwest Brazil). All ticks were morphologically identified as R. sanguineus. Genomic DNA was extracted in pools (three to five ticks per animal) and was used for definition of R. sanguineus haplotypes (based on 16S rRNA analysis) and pathogen identification (Cercopithifilaria sp., Ehrlichia canis, Anaplasma platys, Hepatozoon canis, Babesia vogeli and Rickettsia spp.). Rhipicephal us sanguineus specimens were identified as haplotypes A and B. DNA of Cercopithifilaria bainae (43.83%; 32/73), Ehrlichia canis (24.65%; 18/73), Anaplasma platys (19.17%; 14/73), and Hepatozoon canis (5.47%; 4/73) was detected. The identity of pathogens was confirmed by DNA sequence analysis. The present study confirms the presence of haplotypes A and B of R. sanguineus in the state of Mato Grosso do Sul and its importance as a vector of several pathogens of veterinary concern. Finally, this is the first report to identify C. bainae in ticks in the Midwestern region of Brazil.(AU)

O objetivo do presente estudo foi detectar Cercopithifilaria bainae e outros patógenos transmitidos por carrapatos e realizar a caracterização molecular do carrapato Rhipicephalus sanguineus s.l. coletado em cães. Carrapatos (n = 432, incluindo 8 larvas, 59 ninfas e 365 adultos) foram amostrados de cães domiciliados (n = 73) residentes no município de Campo Grande, Mato Grosso do Sul (centro-oeste do Brasil). Todos os carrapatos foram identificados morfologicamente como R. sanguineus. O DNA genômico foi extraído em pools (três a cinco carrapatos por animal), seguido pela definição de haplótipos (com base no gene 16S rRNA) e pela investigação de patógenos (Cercopithifilaria sp., Ehrlichia canis, Anaplasma platys, Hepatozoon canis, Babesia vogeli e Rickettsia spp.). Os espécimes coletados foram identificados como haplótipos A e B de R. sanguineus. Foram detectados DNA de Cercopithifilaria bainae (43,83%; 32/73), Ehrlichia canis (24,65%; 18/73), Anaplasma platys (19,17%; 14/73) e Hepatozoon canis (5,47%; 4/73). A identidade dos patógenos foi confirmada por análise de sequência de DNA. O presente estudo confirma a circulação dos haplótipos A e B de R. sanguineus no estado de Mato Grosso do Sul e sua importância como vetor de vários patógenos de interesse veterinário. Finalmente, este é o primeiro relato de C. bainae em carrapatos na região centro-oeste do Brasil.(AU)