Manutenção in vitro de células IDE8 em dois tipos de soro bovino / In vitro maintenance of IDE8 cells using two types of bovine serum

The present study had the objective of defining the culture conditions, optimizing the maintenance and expansion of an IDE-8 cell line in Brazil, with the aim to propose its use as a model for in vitro infection and multiplication of Brazilian strains of rickettsia and other hemoparasites. The supplementation of IDE-8 cells with two distinct fetal bovine sera (a Brazilian and an imported) was evaluated. Culture media were changed weekly and subcultures were carried out every 15 days. The development of cultures and subcultures was evaluated by the percentage of viability and cellular morphology. The results indicate that the imported SFB can be replaced by the Brazilian SFB one, as no significant differences (P<0.05) were seen among culture viabilities.(AU)

Dopplerfluxometria das artérias renais: valores normais das velocidades sistólica e diastólica e do índice resistivo nas artérias renais principais / Renal arteries Dopplerfluxometry: normal systolic and diastolic flow velocities and resistive index values in the main renal arteries

Dopplerfluxometry of renal arteries has been used to estimate renal perfusion in humans. The aim of this study was to use Dopplerfluxometry technique to calculate the resistive index of main renal arteries in dogs, measuring their systolic and diastolic blood flow velocities. Twenty (10 males, 10 females), adult mongrel dogs, were used in this study. The dogs were submitted to Doppler sonographic evaluation of left and right main renal arteries. The systolic and diastolic blood flow velocities, expressed (in centimeters per second) as mean and standard deviation were 79.96± 8.82 and 28.86± 5.11 in the right main renal artery and 80.22± 6.99 and 29.62± 4.14 in the left main renal artery. The value of resistive index expressed as mean ± standard deviation was 0.64± 0.04 for the right main renal artery and 0.63± 0.028 in the left main renal artery.(AU)

Infecção experimental de cães com amostras de Babesia canis isoladas em Minas Gerais

The objective of the present study was to evaluate parasitemia and packed cell volume patterns of dogs experimentally inoculated with two isolates of Babesia canis: one from Belo Horizonte (BH) and the other from Lavras (Lv), Minas Gerais State, Brazil. Both isolates showed similar patterns, with the peak of parasitemia occurring three days post-infection. From the fourth day, parasitemia was detected in low levels (0.01%) with small periodical increases. The packed cell volume decreased after the parasitemia beginning, with oscillations during the experimental period. All dogs remained apparently normal, except one, which had been inoculated with the BH isolate and presented classical clinical signs of babesiosis (weakness, anemia, hemoglobinuria and depression). The results suggest that the studied isolates have low pathogenicity, and point to the need for further studies aiming to characterize the subspecies of Brazilian isolates.

Retrospective study (1998-2001) on canine ehrlichiosis in Belo Horizonte, MG, Brazil / Estudo retrospectivo (1998 a 2001) da erliquiose canina em Belo Horizonte

The present work describes a retrospective study of clinical cases of ehrlichiosis in dogs examined from March 1998 to September 2001. From the clinical records with laboratorial confirmation of Ehrlichia canis or E. platys infections, the following parameters were analyzed: demographic aspects (age, race, sex, period of the year and origin), clinical characteristics (body temperature, exposure to ticks and clinical signs), and hematological characteristics (blood cell counts and type of infected cell). A total of 194 clinical records were analyzed, from which 31 animals were infected with E. canis and 21 animals with E. platys. The number of cases of canine ehrlichiosis increased considerably from the year 2000 onwards, and 24.4% of the cases occurred in 13- to 24-month-old animals, in different urban and per-urban regions of the municipality of Belo Horizonte. The most frequent symptoms were fever, anorexia, apathy, abdominal pain, lymphadenopathy and dispnea. Regarding hematological alterations, 70.3% of the animals presented anemia, 50% presented thrombocytopenia and 30% leukopenia, and most E. canis morulae were seen in monocytes. The results point to the importance of canine ehrlichiosis, as 35.9% of the dogs with suspected hemoparasitic diseases were infected with Ehrlichia canis or E. platys.(AU)

O presente trabalho descreve um estudo retrospectivo da casuística clínica de erliquiose em cães atendidos entre março de 1998 e setembro de 2001. Foram analisadas 194 fichas clínicas de animais com suspeita de hemoparasitoses, nas quais 31 cães foram diagnosticados com Ehrlichia canis e 21 com Ehrlichia platys, por meio de exame parasitológico direto de esfregaços sangüíneos. Foram considerados alguns aspectos demográficos (idade, raça, sexo, época do ano e região de origem), características clínicas (temperatura corporal, presença e/ou histórico de carrapatos e sinais clínicos) e hematológicas (hemograma completo e célula parasitada). O número de diagnósticos de erliquiose aumentou consideravelmente a partir de 2000, sendo que 24,4% dos casos ocorreram em animais entre 13 e 24 meses de idade na cidade de Belo Horizonte e áreas peri-urbanas, verificando-se maior risco de infecção em animais que residiam em casas. Os sintomas mais freqüentes foram febre, anorexia, apatia, dor abdominal, linfadenopatia e dispnéia. Quanto às alterações hematológicas, 70,3% apresentaram anemia, 50% trombocitopenia e 30% leucopenia e a maioria das infecções por E. canis foi visualizada em monócitos. Os resultados apontam para a necessidade de maior atenção por parte dos clínicos e técnicos para a erliquiose canina uma vez que 35,9% dos cães atendidos com suspeita de hemoparasitoses apresentavam infecções por E. canis ou E. platys.(AU)

Quimioprofilaxia da babesiose bovina com diidroxitetraciclina de longa duração / Chemoprophylaxis of bovine babesiosis with long-acting diidroxytetracycline

A ação da diidroxitetraciclina de longa duração foi testada em bezerros experimentalmente inoculados com Babesia bigemina e em desafio natural em área endêmica. Em uma propriedade de gado de leite, 18 bezerros foram inoculados com 10 elevado a oitava potência hemácias parasitadas por B. bigemina. Dez animais foram tratados com 20 mg/kg de diidroxitetraciclina de longa ação, sete dias após o inóculo, e oito foram deixados como controle. Todos os animais do grupo controle e apenas três dos tratados apresentaram parasitemia, sendo que dois já estavam infestados no dia do tratamento. Em um segundo experimento, dez bezerros receberam dois tratamentos de 20 mg/kg de diidroxitetraciclina de longa ação aos 15 e 36 dias após serem liberados em piquetes e oito bezerros foram deixados como testemunhas. Os animais do grupo tratado apresentaram aumento significativo do período pré-patente e menor redução do volume globular, em relação aos do grupo controle (AU)

The action of the long-acting diidroxytetracycline was tested in calves experimentally inoculated with Babesia bigemina and naturally challenged in an endemic area. In a dairy herd, 18 calves were inoculated with a dose of 108 infected erythrocytes. Ten animals were treated with long-acting diidroxytetracycline (20 mg/kg), seven days after the inoculum, and eight animals were kept as control. All control and only three treated animals presented parasitemia, from which two animals were already positive when the treatment started. In a second experiment, ten calves received two treatments of diidroxytetracycline (20mg/kg) on days 15 and 36 after being transferred to a small paddock, and eight calves were kept as control. The animals from the treated group presented a significant increase of the pre-patent period and a smaller reduction on packed cell volume in relation to those of the control group.(AU)

Detection of equine herpesvirus 1 DNA in a single embryo and in horse semen by polymerase chain reaction

The genome of one equine embryo and three equine semen specimens collected from a Brazilian farm were tested by polymerase chain reaction (PCR) for the presence of EHV-1 and EHV-4-specific timidine kinase (TK) sequences. The PCR detected specific EHV-1 TK gene sequences in all samples tested. The peripheral blood leukocytes (PBL) of the embryo donor mare also was amplified by EHV-1 TK primers. Infectious virus was not recovered from any specimens. The animals did not show any clinical signal of EHV-1 or EHV-4 infections. EHV-4 was not detected in the studied specimens. The results indicate that PCR was more sensitive than virus isolation in cell culture for detecting EHV-1 in semen of carrier horses.

O genoma das amostras de um embrião e semen de três eqüinos, coletados em uma fazenda brasileira, foram testados para a presença de seqüências específicas dos genes da timidina kinase (TK) de herpesvírus eqüino-1 (HVE-1) e herpesvírus eqüino-4 (HVE-4) por meio de reação em cadeia da polimerase (PCR). A PCR detectou seqüências específicas do gene de TK de HVE-1 em todas as amostras testadas. O DNA template extraído de leucócitos periféricos da égua doadora do embrião também foi amplificado pelos pares de primers designados para TK do HVE-1. Vírus infeccioso não foi isolado desses espécimes. Os resultados indicaram que o PCR foi mais sensível do que o método de isolamento em cultura de células para a detecção do HVE-1 em sêmen de cavalos portadores.

Serological diagnosis of Babesia equi and B. caballi in pregnant mares

O objetivo do presente estudo foi determinar a dinâmica da produção de anticorpos anti-Babesia equi e B. caballi em éguas gestantes em condições naturais de campo em Minas Gerais e avaliar a eficiência da transferência passiva de anticorpos via colostro. Foram analisadas, pela imunofluorescência indireta, amostras de soros colhidas de 34 fêmeas aos 290, 305 e 320 dias de gestação, e no momento do parto, e de seus respectivos potros até 36 horas após o nascimento. Aos 290 dias de gestação, todas as fêmeas estavam positivas para B. equi e apenas duas estavam negativas para B. caballi. Todos os potros tornaram-se positivos para B. equi após ingestão de colostro, entretanto 42% permaneceram negativos para B. caballi 36 horas após o nascimento. Não se observou influência dos níveis de anticorpos durante a gestação na transferência passiva de anticorpos aos potros. A transferência passiva foi menos eficiente para B. caballi, sugerindo que os potros estão mais sujeitos a adquirirem infecção por esse agente.

Uso de inóculo padronizado de Anaplasma marginale e da quimioprofilaxia no controle da anaplasmose bovina / Use of standardized inoculum of Anaplasma marginale and chemoprophylaxis to control bovine anaplasmosis

O uso de inóculo homólogo padronizado de Anaplasma marginale foi comparado à prática de quimioprofilaxia com diidrato de oxitetraciclina na redução da riquetsemia e do volume globular (VG) causada pela anaplasmose bovina. Os animais que receberam o inóculo (10(7) hemácias com Anaplasma marginale)apresentaram, ao serem desafiados em campo, riquetsemia média de 1,2 por cento e redução média de VG de 23,0 por cento, significativamente inferiores às do grupo-controle (P<0,05). No experimento de quimioprofilaxia os animais que receberam três doses de diidrato de oxitetraciclina (20mg/kg), com intervalos de 25 dias, apresentaram riquetsemia de 2,7 por cento e redução de 36,3 por cento no VG, significativamente inferiores às do grupo-controle (P<0,05). Ambas as medidas preventivas testadas foram eficientes na redução da intensidade da riquetsemia e na queda do VG.(AU)

The use of a homologous standardized inoculum of Anaplasma marginale was compared to a chemoprophylatic method, using dihydrate oxytetracycline, considering reduction of rickttsemia and packed cell volume (PCV), during A. marginale infections in calves. The animals that had received the inoculum (10(7) A. marginale infected erythrocytes) showed a 1.2% reduction of rickettsemia and the PCV decreased 23.0%, when challenged in the field. These values were statistically lower than those obtained from animals in the control group. As far as chemoprophylaxis is concerned, the animals that had been treated three times with dihydrate oxytetracycline (20 mg/kg) showed a 2.7% reduction of rickettsemia and the PCV decreased 36.3%. These values were also statistically lower than those obtained from animals in the control group. Both preventive measures proved to be efficient in reducing rickettsemia and decrease of PCV.(AU)

Use of an ELISA system for detection of equine herpesvirus 1 (EHV-1) antibodies in non-symptomatic pregnant mares and neonatal foals

An ELISA system was applied to study the prevalence of EHV-1 in vaccinated and non-vaccinated Brazilian horses. Serum samples were taken from non-symptomatic pregnant mares, before and after the parturition, and from their neonatal foals. The antigen was prepared from a purified virus fraction (HVE-1 AB1 strain). The ELISA absorbance of 0.3516 was determined as the threshold of negative values. This cut-off level was defined from a selected interval, which determined a sensibility of 100% and a specificity of 94.7%, from a serum collection obtained from pregnant mares and fetuses. In this study, a strong correlation was found between the ELISA and serum neutralization for specific EHV-1 antibody detection.

Um sistema de ELISA foi utilizado para se estudar a prevalência do herpesvirus eqüino 1 (HVE-1) em plantéis de cavalos brasileiros vacinados e não vacinados. Amostras de soros foram coletadas de éguas gestantes assintomáticas, antes e após o parto e de seus respectivos potros recém-nascidos. O antígeno foi preparado de uma fração viral purificada (HVE-1 amostra Ab1). O ponto de corte (absorvância de 0,3516) foi determinado considerando o limite máximo para os valores negativos. Esse valor determinou sensibilidade de 100% e especificidade de 94,7%, utilizando um banco de soros de éguas gestantes e fetos. No estudo observou-se alta correlação entre o ELISA e a soro-neutralização para detecção de anticorpos específicos contra o EHV-1.