Immune response in Santa Inês sheep during Fasciola hepatica infection / Resposta imune em ovinos da raça Santa Inês durante a infecção por Fasciola hepatica

In the present study, we describe the proliferative response and the IFN-γ, IL-10, IL-4 cytokine expression profiles in peripheral blood, and IgG production, after the experimental infection of Santa Inês sheep with 250 Fasciola hepatica metacercariae that were evaluated at 60 and 210 days post-infection(dpi). The cytokine expression profile at 60 dpi was characterized by the production of IFN-γ and IL-10, which is indicative of an initial mixed Th1/Th2 response. The modulation of the response occurred at 210 dpi with a predominance of IL-10 and IL-4 over IFN-γ. Mononuclear cells from peripheral blood stimulated with F. hepatica antigen exhibited proliferative capacity at 60 dpi, whereas the response was consistent with modulation from Th1 to Th2 in the chronic phase. The IgG antibody response was more marked at 60 days than at 210 dpi, confirming the mixed-response profile. The late modulation of the T lymphocyte response in association with the predominance of IL-10 and IL-4 at 210 dpi suggests the involvement of these cytokines after the establishment of the parasites in the bile ducts. The transition from a mixed to a regulatory response in the chronic phase was also accompanied by a reduced number of eggs per gram of feces.(AU)

No presente estudo, observou-se a resposta proliferativa e os perfis de expressão de citocinas IFN-γ, IL10, IL-4 no sangue periférico, e a produção de IgG, aos 60 e 210 dias após infecção (dpi) experimental de ovinos Santa Inês com 250 metacercárias de Fasciola hepatica. O perfil de expressão de citocinas aos 60 dpi foi caracterizado pela produção de IFN-γ e IL-10, o que é indicativo de uma resposta mista inicial Th1/ Th2. A modulação da resposta ocorreu aos 210 dpi, com predominância de IL-10 e IL-4 sobre IFN-γ. As células mononucleares do sangue periférico estimuladas com antígeno total de F. hepatica adulta exibiram capacidade proliferativa aos 60 dpi, enquanto a resposta foi consistente com uma modulação de Th1 para Th2 na fase crônica. A resposta do anticorpo IgG foi maior aos 60 dpi do que aos 210 dpi. A modulação tardia da resposta dos linfócitos T em associação com a predominância de IL-10 e IL-4 aos 210 dpi sugere o envolvimento dessas citocinas após o estabelecimento dos parasitos nos ductos biliares. A transição de uma resposta mista para uma resposta com pefil regulador na fase crônica também foi acompanhada por redução dos ovos por grama de fezes.(AU)

New approaches to studying morphological details of intramolluscan stages of Angiostrongylus vasorum / Novas abordagens para estudo morfológico dos estágios intramoluscos de Angiostrongylus vasorum

Angiostrongylus vasorum is a pulmonary artery parasite of domestic and wild canid. On molluscs, intermediate host, first stage larvae (L1) are found after the first day of infection, in the 8th L2 and in the 30 th L3. It was evaluated L1, L2 and L3 recovered by Baermann technique from Achatina fulica infected with 1000 L1. Fifty larvae/stage were incubated with antibodies anti-β-tubulin, anti-α-tubulin, anti- α-actin, anti-β-actin and anti-collagen, and then with Alexa 633. Fifty larvae/stage were observed with picrosirius red and Oil Red O. It was also observed in the anterior region of L1 the beginning of the chitinous stems development, in the initial portion of the intestine and genital primordium. In L2 anterior region, the papillae, chitinous canes juxtaposed to the mouth and intestines bigger than L1. The L3 musculature is well defined, next to the chitinous stems, there are two round distally arranged from each other. It was observed the whole extension of the intestine genital primordium and intense cellularity in the L3 distal portion. With the picrosirius red the L1, L2 and L3 musculature could be observed, as the nerve ganglia on L3. Oil Red O revealed that L1, L2 and L3 store energy on lipid droplets.(AU)

Angiostrongylus vasorum é um parasito de artérias pulmonares dos canídeos domésticos e silvestres. Nos moluscos, hospedeiros intermediários, encontram-se no primeiro dia após a infecção, larvas de primeiro estágio (L1), ao 8° L2 e ao 30° L3. Avaliou-se L1, L2 e L3 recuperadas pela técnica de Baermann de Achatina fulica infectada com 1.000 L1. Incubou-se 50 larvas/estádio com anticorpos anti-β-tubulina, anti-α-tubulina, anti-β-actina e anti-colágeno e, em seguida, com anticorpo Alexa 633. Observaram-se também 50 larvas/estádio com picrosirius red e Oil Red O, na região anterior da L1, o início do desenvolvimento de hastes quitinosas, a porção inicial do intestino e o primórdio genital. Na região anterior de L2, papilas, bastões quitinosos justapostos à boca e ao intestino maior que em L1. A musculatura de L3 é bem desenvolvida, próximo às hastes quitinosas, há duas estruturas redondas dispostas distalmente uma da outra. Observaram-se também toda a extensão do intestino, o primórdio genital e a intensa celularidade na porção distal da L3. Com o picrosirius red observou-se a musculatura de L1, L2 e L3, assim como, gânglios nervosos na L3. Oil Red O revelou que L1, L2 e L3 armazenam energia em gotículas lipídicas.(AU)

Nodular and sclerosing gastritis caused by Cylicospirura felineus in a puma (Puma concolor) / Gastrite nodular esclerosante causada por Cylicospirura felineus em onça parda (Puma concolor)

An adult male puma (Puma concolor), hit by a car in an urban area, died three days later despite the therapeutic support provided. At necropsy, multiple firm nodules were identified in the gastric mucosa. The nodules were coated by an intact mucosa with a central opening from which reddish and cylindrical nematodes protruded into the lumen. Twenty-seven nematodes were retrieved for morphological and morphometric evaluations. During histopathological examination of the gastric tissue, the adult nematodes appear in longitudinal and transverse sections, surrounded by thick bands of collagen, interspersed with mixed inflammatory infiltrates. The nematodes had an eosinophilic cuticle with caudal serrated projections (bulbar type), coelomyarian musculature, pseudocoelom, and females with uterus containing numerous larvated eggs, characteristics consistent with the Cylicospirura genus. Morphologically, female nematodes had six large tricuspid teeth in the oral cavity and the vulva had an opening anterior to the esophagus–intestinal junction. Male nematodes had five pairs of small papillae near the tip of the tail. These findings were consistent with Cylicospirura felineus. This parasite should be included in the differential diagnosis of nodular gastric wall lesions in wild felids.(AU)

Uma onça parda (Puma concolor) foi encontrada em uma área urbana após atropelamento e, apesar do suporte terapêutico fornecido, o animal morreu três dias depois. No exame post-mortem, múltiplos nódulos firmes foram identificados na mucosa gástrica. Os nódulos eram revestidos por mucosa intacta com um orifício central, do qual se insinuavam nematódeos cilíndricos e avermelhados. Vinte e sete nematódeos foram recuperados para avaliação morfológica e morfométrica. Na avaliação histopatológica do tecido gástrico, os nematódeos adultos apareceram em cortes longitudinais e transversais, circundados por bandas espessas de colágeno, intercaladas por infiltrado inflamatório misto. Os nematódeos eram constituídos por cutícula eosinofílica, com projeções serrilhadas voltadas caudalmente (do tipo bulbar), musculatura celomiariana, pseudoceloma e, nas fêmeas, útero com numerosos ovos larvados cujos achados foram sugestivos do gênero Cylicospirura. Morfologicamente, a cavidade bucal continha seis grandes dentes trífidos, na fêmea, a abertura da vulva era anterior à junção esôfago intestinal; e os machos tinham cinco pares de pequenas papilas próximas à ponta da cauda. Esses achados foram consistentes com Cylicospirura felineus. Este parasita deve ser incluído no diagnóstico diferencial de lesões nodulares da parede gástrica em felinos selvagens.(AU)

Angiostrongylus minasensis n. sp.: new species found parasitizing coatis (Nasua nasua) in an urban protected area in Brazil / Angiostrongylus minasensis n. sp.: nova espécie encontrada parasitando quatis (Nasua nasua) em área de proteção urbana no Brasil

Currently, there are 21 species of Angiostrongylus that parasitize the pulmonary or mesenteric arteries of wild and domestic rodents, felids, canids and human. Species of Angiostrongylus have cosmopolitan distribution covering tropical, subtropical and temperate regions. The procyonid Nasua nasua (coati) is a reservoir host for a wide variety of parasites that may be harmful to its populations or may contain etiological agents with zoonotic potential. In urban areas, coatis are usually found in close association with humans and domestic animals. We morphologically and molecularly characterized a new species of Angiostrongylus found in N. nasua in a protected area within Belo Horizonte, Brazil. The new species of Angiostrongylus differs from other species of the same genus in terms of the length and bifurcation level of the lateral and ventral rays, the length of spicules and female tail morphology. Molecular phylogenetic results based on the mitochondrial cytochrome c oxidase subunit 1 gene suggest that the newly identified species belongs to a genetic lineage that is separate from other species of Angiostrongylus. This new species was collected from the mesenteric arteries of N. nasua. It was named Angiostrongylus minasensis n. sp(AU)

Existem 21 espécies de Angiostrongylus que parasitam as artérias pulmonares ou mesentéricas de roedores silvestres e domésticos, felídeos, canídeos e homem. Espécies de Angiostrongylus têm uma distribuição cosmopolita que abrange regiões tropicais, subtropicais e temperadas. O procionídeo Nasua nasua (quati) é hospedeiro de vários parasitos que podem ser prejudiciais para suas populações ou conter agentes etiológicos com potencial zoonótico. Nas áreas urbanas, os quatis podem ser encontrados em estreita associação com seres humanos e animais domésticos. Nós caracterizamos morfológica e molecularmente uma nova espécie de Angiostrongylus encontrada em N. nasua de uma área protegida na cidade de Belo Horizonte, Brasil. A nova espécie de Angiostrongylus difere de outras espécies do mesmo gênero pelo comprimento e nível de bifurcação dos raios lateral e ventral, o comprimento dos espículos e a morfologia da cauda da fêmea. Resultados moleculares e filogenéticos baseados no gene mitocondrial citocromo c oxidase subunidade 1 indicam que a espécie recém-identificada pertence a uma linhagem genética separada de outras espécies de Angiostrongylus. O presente relato descreve uma nova espécie de Angistrongylus coletada das artérias mesentéricas de N. nasua, denominada Angiostrongylus minasensis n. sp(AU)

Dynamics of haemocytes from Pseudosuccinea columella circulating infected by Fasciola hepatica / Dinâmica de hemócitos circulantes de Pseudosuccinea columella infectados por Fasciola hepatica

The lymnaeids are important in the epidemiology of Fasciola hepatica, a neglected and endemic zoonosis. The interaction between the internal defense system of Pseudosuccinea columella and F. hepatica has been little studied. In the present study the effect of infection by F. hepatica on P. columella circulating haemocytes was investigated. Changes in the average number of total circulating haemocytes have been observed at 30 minutes post-infection and 1, 7, 10, 14, 21, 28 and 50 days post-infection (dpi). Miracidia were observed head-foot and mantle at 30 minutes post-infection. Miracidia/Sporocysts in the mantle skirt 1 dpi, and fully formed sporocysts were observed in the head-foot at 7 dpi. Rediae became evident at 10 dpi and were located between the haemocoel and the muscles from 14 dpi; 50 dpi, the rediae in the digestive gland contained cercariae. The statistical analysis of the total haemocytes of P. columella infected by F. hepatica showed significant differences on the 30 minutes post-infection and 1, 14, 21, and 28 dpi in comparison to uninfected molluscs (0 dpi). Therefore, the interference observed on the internal defence system of P. columella may have direct association with the development of F. hepatica.(AU)

Os limnaeideos são importantes na epidemiologia de Fasciola hepatica, uma zoonose negligenciada e endêmica. A interação entre o sistema interno de defesa de Pseudosuccinea columella e F. hepatica tem sido pouco estudada. No presente estudo, investigou-se o efeito da infecção por F. hepatica nos hemócitos circulantes de P. columella. Alterações no número médio de hemócitos circulantes foram observadas aos 30 minutos e 1, 7, 10, 14, 21, 28 e 50 dias após a infecção (dpi). Miracídios foram observados na região cefalopodal e manto aos 30 minutos após a infecção. Miracídio/esporocistos foram observados no colar do manto ao 1 dpi, e esporocistos totalmente formados na região cefalopodal aos 7 dpi. Rédias tornam-se evidentes aos 10 dpi entre a hemocele e músculos a partir de 14 dpi; e rédias com cercárias próximas a glândula digestiva aos 50 dpi. A análise estatística dos hemócitos totais de P. columella infectados por F. hepatica demonstrou diferenças significativas nos 30 minutos pós-infecção e 1, 14, 21 e 28 dpi em comparação aos moluscos não infectados (0 dpi). Portanto, a interferência observada no sistema de defesa interna de P. columella pode ter associação direta com o desenvolvimento de F. hepatica.(AU)

Occurrence of Fasciola hepatica (Linnaeus, 1758) in capybara (Hydrochoerus hydrochaeris) (Linnaeus, 1766) in Minas Gerais, Brazil / Ocorrência de Fasciola hepatica (Linnaeus, 1758) em capivara (Hydrochoerus hydrochaeris) (Linnaeus, 1766) em Minas Gerais, Brasil

Abstract Fasciola hepatica is a parasite that affects the hepatic ducts of several species of domestic and wild vertebrates, causing huge economic losses to livestock rearing worldwide. Reports on occurrences of F. hepatica in capybaras are an important epidemiological aspect of this disease, since these rodents can be a source of contamination for other animals and humans. In the present study, conducted in a rural area of the municipality of Confins, Minas Gerais, fresh feces from capybaras were collected from the ground near a lagoon at the edge of the Ribeirão da Mata river. These were examined using the technique of four metal sieves. F. hepatica eggs were recovered. This trematode species was confirmed by observing morphological characteristics and measuring the eggs recovered from the capybara feces, and through experimental infection of Lymnaea columella (Say, 1817) by miracidia from these eggs and subsequent infection of C57/BL06 mice with metacercariae originating from these infected mollusks. The data suggest the occurrence of natural cycle of F. hepatica in this region and provide a warning that expansion of the geographical distribution of this parasite by means of this rodent is possible. It is therefore important to adopting measures for epidemiological control of this helminthiasis.(AU)

Resumo Fasciola hepatica é um parasito que acomete os ductos hepáticos de diversas espécies de vertebrados domésticos e silvestres, causando grandes perdas econômicas na pecuária global. Relatos sobre a ocorrência de F. hepatica em capivaras constituem um importante aspecto epidemiológico dessa parasitose, visto que esses roedores podem ser fonte de contaminação para outros animais e humanos. No presente estudo realizado em área rural do município de Confins, Minas Gerais, foram coletadas no solo, próximo à lagoa marginal do rio Ribeirão da Mata, fezes frescas de capivaras. Essas foram examinadas pela técnica de quatro tamises metálicos. Foram recuperados ovos de F. hepatica. A confirmação da espécie desse trematódeo foi realizada por observação de características morfológica e mensuração dos ovos recuperados das capivaras, infecção experimental de moluscos Lymnaea columella (Say, 1817) por miracídios oriundos desses ovos e pela infecção de camundongos C57/BL06 com metacercárias oriundas desses moluscos infectados. Os dados obtidos sugerem a ocorrência do ciclo natural de F. hepatica na região, alertando que a expansão da distribuição geográfica deste parasito por esse roedor é possível. Portanto, é importante a adoção de medidas para o controle epidemiológico desta helmintíase.(AU)