Presence of antibiotic-resistant bacteria in pigs for consumption: one health challenge: literature review / Presença de bactérias resistentes a antibióticos em suínos para consumo: desafio à saúde única: revisão de literatura

Pig farming is an area of livestock that has been developing the most in Brazil and the world, with production increasing every year, generating jobs, and being of great importance for the Brazilian economy. In swine production, great health enables these animals to reach their highest point of development and antimicrobials are used, either prophylactically or through food, as growth promoters. Within swine culture, there is a concern regarding antibiotic-resistant bacteria; however, Staphylococcus spp. do not receive the necessary prominence in research, since the pathologies caused by them do not tend to cause great economic losses. Therefore, this review aimed to highlight the importance of bacterial resistance within breeding stock, its possible origins, the importance of Staphylococcus spp. within this topic, and its evolution in swine farming over the years. For this, studies were selected, with an emphasis on information such as country, number of samples, presence of Staphylococcus spp. resistant to methicillin, breeding phase, and phenotypic and molecular tests. In addition, publications were selected that show the importance of understanding the biological and resistance profiles of Staphylococcus spp. in swine herds in Brazil and around the world.

A suinocultura é uma das áreas da pecuária que mais se desenvolveu e se desenvolve no Brasil e no mundo, com a sua produção aumentando todos os anos, gerando empregos diretos e indiretos, e sendo de grande importância para a economia brasileira. Destaca-se na produção de suínos a necessidade de grande sanidade para que estes animais alcancem seu maior ponto de desenvolvimento e, para tal, são utilizados antimicrobianos, seja de forma profilática ou através da alimentação, como promotores de crescimento. Dentro da suinocultura também está presente a preocupação envolvendo as bactérias resistentes a antibióticos, contudo, os Staphylococcus spp. não recebem o destaque necessário em pesquisas, já que as patologias causadas por estes ainda não tendem a causar grandes prejuízos econômicos de forma direta aos produtores. Por este motivo, esta revisão objetivou evidenciar a importância da resistência bacteriana dentro dos planteis, suas possíveis origens, a importância dos Staphylococcus spp. dentro deste tópico e a sua evolução na suinocultura através dos anos. Para este foram selecionados trabalhos encontrados em diferentes bases de dados com ênfase em informações como país, número de amostras, presença de Staphylococcus spp. resistentes a meticilina, fase de criação, e testes fenotípicos e moleculares, além de publicações que evidenciam a importância de se conhecer os perfis biológicos e de resistência dos Staphylococcus spp. nos planteis de suínos do Brasil e do mundo.

Leptospirosis in free-living capybaras (Hydrochaeris hydrochaeris) from a university campus in the city of Araras in São Paulo, Brazil / Leptospirose em capivaras de vida livre (Hydrochaeris hydrochaeris) de um campus universitário na cidade de Araras em São Paulo, Brasil

The capybara (Hydrochaeris hydrochaeris L. 1766) is the largest existing rodent in the world. This animal species, being synanthropic, may serve as a transmitter of different diseases and parasitic infections in animals and humans as well. Leptospirosis is a cosmopolitan infectious disease with a high prevalence in tropical and subtropical regions that can affect humans and other domestic and wild animals. Due to the absence of regional data and the importance of this animal species in transmitting diseases to animals and humans, the aim of this study was to analyze DNA and anti-Leptospira spp. antibodies in free-living capybaras (Hydrochaeris hydrochaeris) from a university campus in the city of Araras in São Paulo, Brazil. A total of 31 capybaras (Hydrochaeris hydrochaeris) were captured for collecting their blood samples. The collected sera were analyzed using the microscopic agglutination test (MAT). For the detection of Leptospira spp. DNA, the serum samples were used to extract genomic DNA for the nested-PCR analysis. Out of the 31 serum samples, 29 (93.55%) were reactive for MAT, with titers ranging from 25 to 400. The antibody could be identified against the most probable serovar in 26 (89.65%) samples, namely: Grippotyphosa (69.23%), Autumnalis (26.92%), and Bratislava (3.85%). Presence of Leptospira via nested-PCR was found only in 3.22% of serum samples. This study revealed the presence of DNA and anti-Leptospira spp. antibodies in free-living capybara. Characterization of these animals as possible carriers and disseminators of the etiological agent in the environment is necessary for identification of infection in other animals and campus visitors.

A capivara (Hydrochaeris hydrochaeris, L., 1766) é o maior roedor existente, pertencente a ordem Rodentia e família Hydrichaeridae. Esta espécie animal por ser sinantrópica pode ser transmissora de diferentes enfermidades infecto-parasitárias para animais e também para o homem. Entre as enfermidades, destaca-se a leptospirose, doença infecciosa cosmopolita com elevada prevalência em regiões tropicais e subtropicais que pode acometer o homem e outros animais domésticos e silvestres. Devido à ausência de dados regionais e a importância desta espécie animal para a saúde única o objetivo deste trabalho foi detectar DNA e anticorpos anti-Leptospira spp. em capivaras (Hydrochaeris hydrochaeris) de vida livre provenientes de um campus universitário da cidade de Araras em São Paulo, Brasil. Foram capturadas 31 capivaras (Hydrochaeris hydrochaeris), as quais passaram por coletas de sangue, onde os soros colhidos foram analisados mediante a técnica de Soroaglutinação Microscópica (SAM). Para a detecção de DNA de Leptospira spp., as amostras de soro foram submetidas a extração de DNA e esses submetidos à técnica de nested-PCR. Das 31 amostras de soro, 29 (93,55%) foram reagentes na SAM com títulos variando de 25 a 400. Em 26 (89,65%) amostras foi possível identificar o anticorpo contra o sorovar mais provável sendo: Grippotyphosa (69,23%), Autumnalis (26,92%) e Bratislava (3,85%) e em uma amostra de soro (3,22%) evidenciou-se a presença de leptospiras através da nested-PCR. Este estudo evidenciou a presença de DNA e anticorpos anti-Leptospira spp. em capivara de vida livre, caracterizando estes animais como possíveis portadores e disseminadores do agente etiológico no ambiente, permitindo a infecção de outros animais e também de visitantes do campus.

Molecular identification of Leptospira interrogans in naturally infected cows from a rural property in the border region: case report / Identificação molecular de Leptospira interrogans em vacas naturalmente infectadas de uma propriedade rural em região fronteiriça: relato de caso

The aim of this study was to investigate the antibodies and DNA of Leptospira spp. isolated from infected cattle in a small rural dairy farm in a border region between Brazil and Paraguay. Blood and urine samples were collected from 50 Holstein cows aged between 1 and 15 years. The diagnostic tests performed were microscopic serum agglutination for antibody detection and polymerase chain reaction for Leptospira spp. detection. Out of the samples analyzed, 48% were MAT positive with titers ranging from 100 to 400, and the most prevalent antibody was to the serovar Hardjo. One serum sample was amplified to 549 bp for the sec y gene, and sequencing identified it as L. interrogans. This is the first report from northwestern Paraná (PR) State of L. interrogans identification in naturally infected milk cattle. Thus, based on these results, to enhance production efficiency, new serological and molecular studies on dairy cattle from border regions are required to characterize the epidemiology of possible genotypes and their consequences in affected herds.

O objetivo deste trabalho foi pesquisar anticorpos e DNA de Leptospira spp. em uma propriedade rural leiteira de uma região fronteiriça entre Brasil e Paraguai. Foram coletadas amostras de sangue e urina de 50 animais da raça Holandesa com idade variando de um a quinze anos, de uma pequena propriedade rural de exploração leiteira em uma região de fronteira entre Brasil e Paraguai. Quanto aos diferentes diagnósticos foi utilizado a soroaglutinação microscópica para a detecção de anticorpos e também foi realizada a reação em cadeia pela polimerase para a detecção de DNA de Leptospira spp. Das amostras analisadas, 48,00% foram soro reagentes na SAM com títulos variando de 100 a 400 e o anticorpo contra o sorovar mais prevalente foi o Hardjo. Uma amostra de soro amplificou 549pb para o gene sec y, e no sequenciamento foi identificada como Leptospira interrogans. Este é o primeiro relato da região noroeste do estado do Paraná (PR) relacionado à identificação de L. interrogans de bovinos de leite naturalmente infectados e em virtude dos resultados deste trabalho são necessários novos estudos sorológicos e moleculares em criações de gado de leite de regiões fronteiriças para se caracterizar a epidemiologia dos possíveis genótipos e suas possíveis consequências nos rebanhos afetados visando sempre à eficiência da produção.

Leptospirosis in free-living capybaras (Hydrochaeris hydrochaeris) from a university campus in the city of Araras in São Paulo, Brazil / Leptospirose em capivaras de vida livre (Hydrochaeris hydrochaeris) de um campus universitário na cidade de Araras em São Paulo, Brasil

The capybara (Hydrochaeris hydrochaeris L. 1766) is the largest existing rodent in the world. This animal species, being synanthropic, may serve as a transmitter of different diseases and parasitic infections in animals and humans as well. Leptospirosis is a cosmopolitan infectious disease with a high prevalence in tropical and subtropical regions that can affect humans and other domestic and wild animals. Due to the absence of regional data and the importance of this animal species in transmitting diseases to animals and humans, the aim of this study was to analyze DNA and anti-Leptospira spp. antibodies in free-living capybaras (Hydrochaeris hydrochaeris) from a university campus in the city of Araras in São Paulo, Brazil. A total of 31 capybaras (Hydrochaeris hydrochaeris) were captured for collecting their blood samples. The collected sera were analyzed using the microscopic agglutination test (MAT). For the detection of Leptospira spp. DNA, the serum samples were used to extract genomic DNA for the nested-PCR analysis. Out of the 31 serum samples, 29 (93.55%) were reactive for MAT, with titers ranging from 25 to 400. The antibody could be identified against the most probable serovar in 26 (89.65%) samples, namely: Grippotyphosa (69.23%), Autumnalis (26.92%), and Bratislava (3.85%). Presence of Leptospira via nested-PCR was found only in 3.22% of serum samples. This study revealed the presence of DNA and anti-Leptospira spp. antibodies in free-living capybara. Characterization of these animals as possible carriers and disseminators of the etiological agent in the environment is necessary for identification of infection in other animals and campus visitors.(AU)

A capivara (Hydrochaeris hydrochaeris, L., 1766) é o maior roedor existente, pertencente a ordem Rodentia e família Hydrichaeridae. Esta espécie animal por ser sinantrópica pode ser transmissora de diferentes enfermidades infecto-parasitárias para animais e também para o homem. Entre as enfermidades, destaca-se a leptospirose, doença infecciosa cosmopolita com elevada prevalência em regiões tropicais e subtropicais que pode acometer o homem e outros animais domésticos e silvestres. Devido à ausência de dados regionais e a importância desta espécie animal para a saúde única o objetivo deste trabalho foi detectar DNA e anticorpos anti-Leptospira spp. em capivaras (Hydrochaeris hydrochaeris) de vida livre provenientes de um campus universitário da cidade de Araras em São Paulo, Brasil. Foram capturadas 31 capivaras (Hydrochaeris hydrochaeris), as quais passaram por coletas de sangue, onde os soros colhidos foram analisados mediante a técnica de Soroaglutinação Microscópica (SAM). Para a detecção de DNA de Leptospira spp., as amostras de soro foram submetidas a extração de DNA e esses submetidos à técnica de nested-PCR. Das 31 amostras de soro, 29 (93,55%) foram reagentes na SAM com títulos variando de 25 a 400. Em 26 (89,65%) amostras foi possível identificar o anticorpo contra o sorovar mais provável sendo: Grippotyphosa (69,23%), Autumnalis (26,92%) e Bratislava (3,85%) e em uma amostra de soro (3,22%) evidenciou-se a presença de leptospiras através da nested-PCR. Este estudo evidenciou a presença de DNA e anticorpos anti-Leptospira spp. em capivara de vida livre, caracterizando estes animais como possíveis portadores e disseminadores do agente etiológico no ambiente, permitindo a infecção de outros animais e também de visitantes do campus.(AU)

Molecular identification of Leptospira interrogans in naturally infected cows from a rural property in the border region: case report / Identificação molecular de Leptospira interrogans em vacas naturalmente infectadas de uma propriedade rural em região fronteiriça: relato de caso

The aim of this study was to investigate the antibodies and DNA of Leptospira spp. isolated from infected cattle in a small rural dairy farm in a border region between Brazil and Paraguay. Blood and urine samples were collected from 50 Holstein cows aged between 1 and 15 years. The diagnostic tests performed were microscopic serum agglutination for antibody detection and polymerase chain reaction for Leptospira spp. detection. Out of the samples analyzed, 48% were MAT positive with titers ranging from 100 to 400, and the most prevalent antibody was to the serovar Hardjo. One serum sample was amplified to 549 bp for the sec y gene, and sequencing identified it as L. interrogans. This is the first report from northwestern Paraná (PR) State of L. interrogans identification in naturally infected milk cattle. Thus, based on these results, to enhance production efficiency, new serological and molecular studies on dairy cattle from border regions are required to characterize the epidemiology of possible genotypes and their consequences in affected herds.(AU)

O objetivo deste trabalho foi pesquisar anticorpos e DNA de Leptospira spp. em uma propriedade rural leiteira de uma região fronteiriça entre Brasil e Paraguai. Foram coletadas amostras de sangue e urina de 50 animais da raça Holandesa com idade variando de um a quinze anos, de uma pequena propriedade rural de exploração leiteira em uma região de fronteira entre Brasil e Paraguai. Quanto aos diferentes diagnósticos foi utilizado a soroaglutinação microscópica para a detecção de anticorpos e também foi realizada a reação em cadeia pela polimerase para a detecção de DNA de Leptospira spp. Das amostras analisadas, 48,00% foram soro reagentes na SAM com títulos variando de 100 a 400 e o anticorpo contra o sorovar mais prevalente foi o Hardjo. Uma amostra de soro amplificou 549pb para o gene sec y, e no sequenciamento foi identificada como Leptospira interrogans. Este é o primeiro relato da região noroeste do estado do Paraná (PR) relacionado à identificação de L. interrogans de bovinos de leite naturalmente infectados e em virtude dos resultados deste trabalho são necessários novos estudos sorológicos e moleculares em criações de gado de leite de regiões fronteiriças para se caracterizar a epidemiologia dos possíveis genótipos e suas possíveis consequências nos rebanhos afetados visando sempre à eficiência da produção.(AU)

Transferability of heterologous microsatellite primers in Leiarius marmoratus / Transferibilidade de primers microssatélites heterólogos em Leiarius marmoratus

The Amazonian Jundiá (Leiarius marmoratus) (Siluliformes: Pimelodidae) is a species of catfish with social and economic importance in some South American countries such as Brazil and Colombia. Genetic evaluation of this species is limited due to the lack of specific molecular markers, hindering studies on genetic diversity and structure in animals under captive conditions or in natural populations. The objective of the present study was to evaluate the transferability of heterologous microsatellite markers in Leiarius marmoratus. Thirty-two heterologous primers were tested in L. marmoratus. The primers that presented the best standards were applied to 20 specimens, and the number of alleles (Na), number of effective alleles (Ne), gene diversity per Locus (GdL) and percentage of amplification failure (Md) were calculated. Eleven primers demonstrated satisfactory transferability patterns, all from the fish of the Pimelodidae family, of which, seven were monomorphic and four polymorphic. The eleven markers presented low percentage of Md (mean was 5.9% samples per locus). Na varied from one to two alleles per locus, revealing low polymorphism in the evaluated samples. The mean Ne and GdL numbers were 1.77 and 0.32, respectively. The transferability of the heterologous microsatellite loci in L. marmoratus was shown to be possible. However, further tests are needed to apply these markers inpopulation genetic studies.

O Jundiá da Amazônia (Leiarius marmoratus) (Siluliformes: Pimelodidae) é uma espécie de catfish com importância social e econômica em alguns países Sul americanos como Brasil e Colômbia. A avaliação genética dessa espécie é limitada devido a ausência de marcadores moleculares específicos para L. marmoratus, dificultando estudos sobre a diversidade e estrutura genética em animais em condições de cativeiro ou em populações naturais. O objetivo do presente estudo foi avaliar a transferibilidade de 32 marcadores microssatélites heterólogos em Leiarius marmoratus. Os primers que apresentaram melhores padrões foram aplicados em 20 espécimes, sendo calculados o número de alelos (Na), número de alelos efetivos (Ne), diversidade gênica por Locus (GdL) e porcentagem de falha na amplificação (Md). Onze primers demonstraram padrões satisfatórios de transferibilidade, todos oriundos de peixes da família Pimelodidae, dos quais sete foram monomórficos e quatro polimórficos. Os onze marcadores apresentaram baixa porcentagem de Md (média 5,9% amostras por loco). O Na variou deum a dois alelos por loco, revelando baixo polimorfismo nas amostras avaliadas. O número médio de Ne e GdL foram 1,77 e 0,32, respectivamente. Estudos genéticos envolvendo indivíduos de diferentes regiões poderão apresentar novos alelos e maior número de loci polimórficos. A transferibilidade de loci microssatélites heterólogos em L. marmoratus se mostrou possível, no entanto, novos testes são necessários para aplicação desses marcadores em estudos genéticos populacionais.

Genetic diversity of Tambaqui (Teleostei - Characidae) broodstocks from Northern region of Brazil using microsatellite markers / Diversidade genética de estoque de Tambaqui (Teleostei - Characidae) da região Norte do Brasil usando marcadores microssatélites

The Amazonian fish Tambaqui (Colossoma macropomum) is the most common native species in Brazil. This species has the highest production rate in the Northern region, especially in the State of Rondônia. The genetic evaluation of Tambaqui is an extremely important to increase productivity in fish farms or improve the adaptability in restocking natural populations. The objective of this study was to evaluate the genetic diversity of three Tambaqui broodstocks in Rondônia, Brazil. Six microsatellite markers were used to analyze a total of 89 breeders collected from three fish farms located in Ji-Paraná (JP), Ouro Preto do Oeste (OP) and Presidente Médici (PM). A total of 37 alleles between 140 and 310 bp were found, including the presence of exclusive and low frequency alleles in the three broodstocks. The average values of observed heterozygosity ranged from 0.404 (PM) to 0.499 (JP). The FIS coefficient values were positive for the three broodstocks, demonstrating a deficit of heterozygotes. The Molecular Variance Analysis (AMOVA) showed greater variation within the stocks than between them. The genetic differentiation was moderate and significant between the stocks, with higher differentiation between JP x PM and lower between OP x PM. The Bayesian analysis designated an optimal value of K=3 groupings. Although there is moderate genetic diversity between broodstocks, the high FIS indicates a possible decline of diversity in the next generations, and therefore, the incorporation of new breeders is suggested to increase the genetic diversity in the three stocks.

O peixe amazônico Tambaqui (Colossoma macropomum) é a espécie nativa mais produzida no Brasil. Esta espécie é a mais criada na região Norte, principalmente no Estado de Rondônia. A avaliação genética de Tambaqui é extremamente importante para aumentar a produtividade nas pisciculturas ou melhorar a adaptabilidade no repovoamento de populações naturais. O objetivo deste estudo foi avaliar a diversidade genética de três estoques de Tambaqui em Rondônia, Brasil. Seis marcadores microssatélites foram utilizados para analisar um total de 89 reprodutores coletados em três pisciculturas localizadas em Ji-Paraná (JP), Ouro Preto do Oeste (OP) e Presidente Médici (PM). Foram encontrados 37 alelos entre 140 e 310 pb, incluindo a presença de alelos exclusivos e de baixa frequência nas três ninhadas. Os valores médios de heterozigosidade observada variaram de 0,404 (PM) a 0,499 (JP). Os valores do coeficiente de FIS foram positivos para as três ninhadas, demonstrando déficit de heterozigotos. A Análise de Variância Molecular (AMOVA) mostrou maior variação dentro dos estoques do que entre eles. A diferenciação genética foi moderada e significativa entre os estoques, com maior diferenciação entre JPxPM e menor entre OP x PM. A análise bayesiana designou um valor ótimo de K = 3 agrupamentos. Embora exista uma diversidade genética moderada entre os filhotes, o alto SIF indica um possível declínio da diversidade nas próximas gerações e, portanto, sugere-se a incorporação de novos criadores para aumentar a diversidade genética nos três estoques.

Transferability of heterologous microsatellite primers in Leiarius marmoratus / Transferibilidade de primers microssatélites heterólogos em Leiarius marmoratus

The Amazonian Jundiá (Leiarius marmoratus) (Siluliformes: Pimelodidae) is a species of catfish with social and economic importance in some South American countries such as Brazil and Colombia. Genetic evaluation of this species is limited due to the lack of specific molecular markers, hindering studies on genetic diversity and structure in animals under captive conditions or in natural populations. The objective of the present study was to evaluate the transferability of heterologous microsatellite markers in Leiarius marmoratus. Thirty-two heterologous primers were tested in L. marmoratus. The primers that presented the best standards were applied to 20 specimens, and the number of alleles (Na), number of effective alleles (Ne), gene diversity per Locus (GdL) and percentage of amplification failure (Md) were calculated. Eleven primers demonstrated satisfactory transferability patterns, all from the fish of the Pimelodidae family, of which, seven were monomorphic and four polymorphic. The eleven markers presented low percentage of Md (mean was 5.9% samples per locus). Na varied from one to two alleles per locus, revealing low polymorphism in the evaluated samples. The mean Ne and GdL numbers were 1.77 and 0.32, respectively. The transferability of the heterologous microsatellite loci in L. marmoratus was shown to be possible. However, further tests are needed to apply these markers inpopulation genetic studies.(AU)

O Jundiá da Amazônia (Leiarius marmoratus) (Siluliformes: Pimelodidae) é uma espécie de catfish com importância social e econômica em alguns países Sul americanos como Brasil e Colômbia. A avaliação genética dessa espécie é limitada devido a ausência de marcadores moleculares específicos para L. marmoratus, dificultando estudos sobre a diversidade e estrutura genética em animais em condições de cativeiro ou em populações naturais. O objetivo do presente estudo foi avaliar a transferibilidade de 32 marcadores microssatélites heterólogos em Leiarius marmoratus. Os primers que apresentaram melhores padrões foram aplicados em 20 espécimes, sendo calculados o número de alelos (Na), número de alelos efetivos (Ne), diversidade gênica por Locus (GdL) e porcentagem de falha na amplificação (Md). Onze primers demonstraram padrões satisfatórios de transferibilidade, todos oriundos de peixes da família Pimelodidae, dos quais sete foram monomórficos e quatro polimórficos. Os onze marcadores apresentaram baixa porcentagem de Md (média 5,9% amostras por loco). O Na variou deum a dois alelos por loco, revelando baixo polimorfismo nas amostras avaliadas. O número médio de Ne e GdL foram 1,77 e 0,32, respectivamente. Estudos genéticos envolvendo indivíduos de diferentes regiões poderão apresentar novos alelos e maior número de loci polimórficos. A transferibilidade de loci microssatélites heterólogos em L. marmoratus se mostrou possível, no entanto, novos testes são necessários para aplicação desses marcadores em estudos genéticos populacionais.(AU)

Transferability of heterologous primers in Brycon falcatus / Transferibilidade de primers heterólogos em Brycon falcatus

The genusBryconcomprises fish species of significant socioeconomic and biological importance in Brazil. Despite that, the genetic knowledge about these species is scarce, especially regardingBrycon falcatus. Thus, the objective of this study was to evaluate the transferability of heterologous microsatellite primers inB. falcatus for the first time. Heterologous primers obtained from B. opalinus, B. hilarii, B. insignis, B. orbignyanus, B. amazonicus, Prochilodus argenteus, Prochilodus lineatus, Piaractus mesopotamicus, and Colossoma macropomum were evaluated. The primers that showed the best amplification patterns were applied to a sample of 22 individuals and the genetic parameters were calculated. Nine primers displayed satisfactory cross-amplification withB. falcatus: BoM5 (Brycon opalinus); Bh8, Bh13 and Bh16 (B. hilarii); Borg59 (B. orbignyanus); Bag22 (B. amazonicus); Par12 and Par80 (P. argenteus), and Cm1A8 (C. macropomum). The genetic parameters (number of alleles, effective alleles, allele richness, and expected and observed heterozygosity) and the polymorphic information content (PIC) confirmed the viability of these primers for population genetics analyses. Our study demonstrates the potential of transferability of microsatellite markers from related species and even different genera to B. falcatus, providing usefull tools for future population genetic studies in this species.(AU)

O gênero Brycon compreende um grupo de espécies de peixes de grande importância socioeconômica e biológica no Brasil. Entretanto, o conhecimento genético dessas espécies é escasso, principalmente no caso do Brycon falcatus. Diante disso, objetivou-se verificar a transferibilidade de primers heterólogos em B. falcatus. Foram avaliados primers heterólogos provenientes das espécies B. opalinus, B. hilarii, B. insignis, B. orbignyanus, B. amazonicus, Prochilodus argenteus, Prochilodus lineatus, Piaractus mesopotamicus e Colossoma macropomum. Os primers que demonstraram melhores padrões de amplificação foram aplicados a uma amostra de 22 indivíduos e os parâmetros genéticos foram calculados. Nove primers apresentaram resultados satisfatórios de amplificação cruzada com B. falcatus: BoM5 (Brycon opalinus), Bh8, Bh13 e Bh16 (B. hilarii); Borg59 (Brycon orbignyanus); Bag22 (B. amazonicus); Par12 and Par80 (Prochilodus argenteus) e Cm1A8 (Colossoma macropomum). Os parâmetros genéticos (número de alelos, alelos efetivos, riqueza de alelos e heterozigosidade esperada e observada) e o conteúdo de informação polimórfica (PIC) demonstraram a viabilidade da utilização dos primers para análises genéticas populacionais. Nosso estudo demonstra o potencial de transferibilidade de marcadores microssatélites de espécies relacionadas e até de gêneros diferentes para B. falcatus, fornecendo ferramentas úteis para futuros estudos genéticos populacionais nessa espécie.(AU)

Genetic diversity of Tambaqui (Teleostei - Characidae) broodstocks from Northern region of Brazil using microsatellite markers / Diversidade genética de estoque de Tambaqui (Teleostei - Characidae) da região Norte do Brasil usando marcadores microssatélites

The Amazonian fish Tambaqui (Colossoma macropomum) is the most common native species in Brazil. This species has the highest production rate in the Northern region, especially in the State of Rondônia. The genetic evaluation of Tambaqui is an extremely important to increase productivity in fish farms or improve the adaptability in restocking natural populations. The objective of this study was to evaluate the genetic diversity of three Tambaqui broodstocks in Rondônia, Brazil. Six microsatellite markers were used to analyze a total of 89 breeders collected from three fish farms located in Ji-Paraná (JP), Ouro Preto do Oeste (OP) and Presidente Médici (PM). A total of 37 alleles between 140 and 310 bp were found, including the presence of exclusive and low frequency alleles in the three broodstocks. The average values of observed heterozygosity ranged from 0.404 (PM) to 0.499 (JP). The FIS coefficient values were positive for the three broodstocks, demonstrating a deficit of heterozygotes. The Molecular Variance Analysis (AMOVA) showed greater variation within the stocks than between them. The genetic differentiation was moderate and significant between the stocks, with higher differentiation between JP x PM and lower between OP x PM. The Bayesian analysis designated an optimal value of K=3 groupings. Although there is moderate genetic diversity between broodstocks, the high FIS indicates a possible decline of diversity in the next generations, and therefore, the incorporation of new breeders is suggested to increase the genetic diversity in the three stocks.(AU)

O peixe amazônico Tambaqui (Colossoma macropomum) é a espécie nativa mais produzida no Brasil. Esta espécie é a mais criada na região Norte, principalmente no Estado de Rondônia. A avaliação genética de Tambaqui é extremamente importante para aumentar a produtividade nas pisciculturas ou melhorar a adaptabilidade no repovoamento de populações naturais. O objetivo deste estudo foi avaliar a diversidade genética de três estoques de Tambaqui em Rondônia, Brasil. Seis marcadores microssatélites foram utilizados para analisar um total de 89 reprodutores coletados em três pisciculturas localizadas em Ji-Paraná (JP), Ouro Preto do Oeste (OP) e Presidente Médici (PM). Foram encontrados 37 alelos entre 140 e 310 pb, incluindo a presença de alelos exclusivos e de baixa frequência nas três ninhadas. Os valores médios de heterozigosidade observada variaram de 0,404 (PM) a 0,499 (JP). Os valores do coeficiente de FIS foram positivos para as três ninhadas, demonstrando déficit de heterozigotos. A Análise de Variância Molecular (AMOVA) mostrou maior variação dentro dos estoques do que entre eles. A diferenciação genética foi moderada e significativa entre os estoques, com maior diferenciação entre JPxPM e menor entre OP x PM. A análise bayesiana designou um valor ótimo de K = 3 agrupamentos. Embora exista uma diversidade genética moderada entre os filhotes, o alto SIF indica um possível declínio da diversidade nas próximas gerações e, portanto, sugere-se a incorporação de novos criadores para aumentar a diversidade genética nos três estoques.(AU)

Seroepidemiology of leptospirosis and toxoplasmosis in equines in the northwest region of Paraná / Soroepidemiologia da leptospirose e toxoplasmose em equinos da região noroeste do Paraná

Leptospirosis and toxoplasmosis are diseases that may affect man and domestic and wild animals. They also have wide geographical distributions and thus cause large public health issues. The objective of the current study was to conduct leptospirosis and toxoplasmosis seroepidemiology in horses used for animal traction in small rural propertiesof the municipality of Umuarama, in northwest region of the state of Paraná, Brazil. Blood samples were collected from 312 horses from 87 small farms. Microscopic agglutination tests (MAT) and indirect immunofluorescence (IIF) analysis were performed on sera to detect leptospirosis and toxoplasmosis, respectively. These were performed in conjunction with an epidemiological questionnaire. The MAT results included 180 (57.69%) samples that were considered reactive with titers between 100 and 12800 for one or more serovars. Thirty-three (10.57%) samples subjected to IIF were considered reactive, with titers ranging between 64 and 1024. From the analyzed variables, contact with wild animals (p= 0.012) and animal exchange between properties (p = 0.004) were associated with toxoplasma infection. The study revealed that horses in the northwestern region of Paraná were exposed to Leptospira spp. and Toxoplasma gondii, with an insignificant implication of the animals clinical condition; however, since it is possible for animals to transmit...(AU)

A leptospirose e a toxoplasmose são enfermidades de ampla distribuição geográfica e podem acometer o homem, animais domésticos e selvagens que causam elevados problemas para a saúde pública. O objetivo deste trabalho foi realizar a soroepidemiologia da leptospirose e toxoplasmose em equinos utilizados como tração animal de pequenas propriedades rurais do município de Umuarama, região noroeste do estado do Paraná, Brasil. Foram coletadas amostras de sangue de 312 equinos de 87 pequenas propriedades rurais. Para detectar a leptospirose e toxoplasmose os soros foram submetidos às técnicas de soroaglutinação microscópica (SAM) e imunofluorescencia indireta (IFI) respectivamente associada ao preenchimento de um questionário epidemiológico. Na SAM, 180 (57,69%) amostras foram consideradas reagentes apresentando títulos entre 100 e 12800, para um ou mais sorovares. Na IFI, 33 (10,57%) amostras foram consideradas reagentes com títulos de 64 a 1024. Em relação às variáveis analisadas, o contato com animais selvagens (p= 0,012) e troca de animais entre propriedades (p= 0,004) foram associados à infecção toxoplásmica. O estudo revela que os equinos da região noroeste do Paraná estão expostos a Leptospira spp. e ao Toxoplasma gondii, tendo uma implicação insignificante relacionado ao aspecto clínico destes animais, porém podendo ser considerados um problema para a saúde única, pois, os...(AU)

Skin antisepsis protocols for the collection of blood from donor dogs / Protocolos de antissepsia de pele para colheita de sangue de cães doadores

The objective of this study was to evaluate and compare the bactericidal efficacy of 2% chlorhexidine surfactant solution + 70% alcohol and 2% chlorhexidine surfactant solution + 0.5% chlorhexidine-alcohol, and standardize skin antisepsis for blood collection from donor dogs. One hundred and twenty skin swabsof the jugular regions of 20 dogs were evaluated. Swabs were distributed into six treatment(T) groups according to the disinfectant used and removal or retention of local hair: T1involved neither antisepsisnorhair removal; T2comprised 2% chlorhexidine + 0.5% chlorhexidine-alcoholwithout hair removal;T3 comprised 2% chlorhexidine + 70% alcohol without hair removal; T4comprised hair removal but no antisepsis;T5comprised 2% chlorhexidine + 0.5% chlorhexidine-alcohol withhair removal; and T6comprised 2% chlorhexidine + 70% alcohol with hair removal. Antiseptic agents were continuously applied in a single direction for a total of 3 min. Use of antiseptics was effective with or without hair removal, resulting in the absence of bacterial growth. Complete efficacy of the technique used in this study may have been due to the increased antiseptic application time. In conclusion,the antisepsis protocols tested in this study can be safely used for the collection of blood from dogs; although,removal of hair prior to antisepsis is still recommended.

O objetivo deste estudo foi avaliar e comparar o potencial de redução bacteriana proporcionado peloclorexidinadegermante 2% + álcool 70% eclorexidinadegermante 2% + clorexidinaalcoolica 0,5% e padronizar a antissepsia de pele para colheita de sangue de cães doadores. Foram avaliados 120 zaragatoas de pele da região da jugular de 20 cães, que foram distribuídos em seis tratamentos (T) de acordo com oagente usado para desinfecção, associado, ou não, a tricotomia local: T1 - Tratamento sem tricotomia e sem antissepsia, T2 - Tratamento clorexidinadegermante 2% + clorexidinaalcoolica 0,5% sem tricotomia, T3 - Tratamento clorexidina 2% + álcool 70% sem tricotomia, T4 - Tratamento com tricotomia e sem antissepsia, T5 - Tratamento clorexidina 2% + clorexidina alcoólica 0,5% com tricotomia, T6 - Tratamento clorexidina 2% + álcool 70% com tricotomia. A antissepsia foi feita de forma contínua em um único sentido, totalizando 3 minutos. O uso dos antissépticos se mostraram eficazes nos tratamentos com e sem tricotomia não apresentando crescimento bacteriano. A eficácia de 100% da técnica utilizada no presente trabalho pode ser decorrente do maior tempo de antissepsia. Conclui-se que os protocolos de antissepsia realizados neste estudo podem ser utilizados com segurança para a colheita de sangue de cães, embora ainda o recomendado seja a tricotomia antes da antissepsia.

Skin antisepsis protocols for the collection of blood from donor dogs / Protocolos de antissepsia de pele para colheita de sangue de cães doadores

The objective of this study was to evaluate and compare the bactericidal efficacy of 2% chlorhexidine surfactant solution + 70% alcohol and 2% chlorhexidine surfactant solution + 0.5% chlorhexidine-alcohol, and standardize skin antisepsis for blood collection from donor dogs. One hundred and twenty skin swabsof the jugular regions of 20 dogs were evaluated. Swabs were distributed into six treatment(T) groups according to the disinfectant used and removal or retention of local hair: T1involved neither antisepsisnorhair removal; T2comprised 2% chlorhexidine + 0.5% chlorhexidine-alcoholwithout hair removal;T3 comprised 2% chlorhexidine + 70% alcohol without hair removal; T4comprised hair removal but no antisepsis;T5comprised 2% chlorhexidine + 0.5% chlorhexidine-alcohol withhair removal; and T6comprised 2% chlorhexidine + 70% alcohol with hair removal. Antiseptic agents were continuously applied in a single direction for a total of 3 min. Use of antiseptics was effective with or without hair removal, resulting in the absence of bacterial growth. Complete efficacy of the technique used in this study may have been due to the increased antiseptic application time. In conclusion,the antisepsis protocols tested in this study can be safely used for the collection of blood from dogs; although,removal of hair prior to antisepsis is still recommended.(AU)

O objetivo deste estudo foi avaliar e comparar o potencial de redução bacteriana proporcionado peloclorexidinadegermante 2% + álcool 70% eclorexidinadegermante 2% + clorexidinaalcoolica 0,5% e padronizar a antissepsia de pele para colheita de sangue de cães doadores. Foram avaliados 120 zaragatoas de pele da região da jugular de 20 cães, que foram distribuídos em seis tratamentos (T) de acordo com oagente usado para desinfecção, associado, ou não, a tricotomia local: T1 - Tratamento sem tricotomia e sem antissepsia, T2 - Tratamento clorexidinadegermante 2% + clorexidinaalcoolica 0,5% sem tricotomia, T3 - Tratamento clorexidina 2% + álcool 70% sem tricotomia, T4 - Tratamento com tricotomia e sem antissepsia, T5 - Tratamento clorexidina 2% + clorexidina alcoólica 0,5% com tricotomia, T6 - Tratamento clorexidina 2% + álcool 70% com tricotomia. A antissepsia foi feita de forma contínua em um único sentido, totalizando 3 minutos. O uso dos antissépticos se mostraram eficazes nos tratamentos com e sem tricotomia não apresentando crescimento bacteriano. A eficácia de 100% da técnica utilizada no presente trabalho pode ser decorrente do maior tempo de antissepsia. Conclui-se que os protocolos de antissepsia realizados neste estudo podem ser utilizados com segurança para a colheita de sangue de cães, embora ainda o recomendado seja a tricotomia antes da antissepsia.(AU)

Serological diagnosis and molecular characterization of Leptospira spp. in the blood and urine of bovine females from refrigerated slaughterhouses / Diagnóstico sorológico e caracterização molecular de Leptospira spp. em sangue e urina de fêmeas bovinas de matadouros-frigoríficos

Leptospirosis is an important socioeconomic disease in humans, as well as in domestic and wild animals, being caused by Leptospira spp. Bovine animals are considered reservoirs of this disease, because they intermittently disseminate the bacteria into the environment through their urine. In this way, the cattle an important source of Leptospira infection. The objective of this study was to detect Leptospira spp. antibodies and DNA in bovine females from two refrigerated slaughterhouses in the microregion of Umuarama, Paraná, Brazil. In particular, blood and urine samples from 52 crossbred bovine females older than 36 months from the two slaughterhouses were used. The microscopic agglutination test (MAT) was used to detect leptospiral antibodies, and the polymerase chain reaction (PCR) and subsequent sequencing were used to detect Leptospira DNA. The MAT yielded 22 (42.3%) serum samples considered reagent, while the nested PCR test resulted in one amplified sample (1.9%)of 289 bp. This single sample was then amplified again using primers for the SecY gene (549 bp). Sequencing of this gene characterized the bacteria as L. borgpetersenii that were similar to the serovar Hardjo of the genotype Hardjobovis. This is the first molecular confirmation of Hardjobovis-like L.borgpetersenii in the urine of crossbred bovine females older than 36 months from slaughterhouses in the microregion of Umuarama. This studys results show that it is important to combine serological and molecular diagnosis in the detection of Leptospira spp. Therefore, both methods were used to improve our understanding of the epidemiology of this disease in bovine animals from the microregion of Umuarama. In addition, the analysis informed the subsequent adoption of preventive measures and educational One Health actions to prevent economic losses related to the herd, as well as social losses related to workers and the environment.(AU)

A leptospirose é uma importante doença sócio-econômica acarretada pela Leptospira spp. que afeta homens e animais domésticos ou selvagens. Os bovinos são considerados reservatórios desta enfermidade, sendo importante fonte de infecção por eliminar a bactéria pela urina de forma intermitente no meio ambiente. O objetivo deste trabalho foi detectar anticorpos e DNA de Leptospira spp. em fêmeas bovinas provenientes de dois matadouro-frigoríficos da microrregião de Umuarama, Paraná, Brasil. Neste trabalho foram utilizadas amostras de sangue e urina de 52 fêmeas bovinas mestiças com idade superior a 36 meses provenientes de dois matadouros-frigoríficos. Para detecção de anticorpo anti-Leptospira spp. foi realizada a prova de Soroaglutinação Microscópica (SAM), e para a detecção de DNA foi realizada a reação em cadeia pela polimerase (PCR) e posterior sequenciamento. Na SAM,22 (42,30%) amostras de soro foram consideradas reagentes e na nested PCR uma (1,92%) amostra amplificou 289 pb, e posteriormente, a mesma amostra amplificada novamente para o gene sec Y com 549pb. O sequenciamento do gene Sec Y caracterizou o produto obtido como L. borgpetersenii semelhante ao sorovar Hardjo genótipo Hardjobovis. Esta é a primeira confirmação molecular semelhante ao genótipo Hardjobovis pertencente à espécie L. borgpetersenii em urina de fêmeas bovinas mestiças com idade superior a 36 meses proveniente de matadouros-frigoríficos localizados na microrregião de Umuarama no estado do Paraná. Os resultados deste trabalho evidenciam a importância da associação do diagnostico sorológico e molecular para a detecção de Leptospira spp. Isto é importante para o entendimento da epidemiologia desta enfermidade em bovinos da microrregião de Umuarama e adoção de medidas de prevenção e ações de educação em saúde na esfera da Saúde Única, evitando assim perdas econômicas relacionado ao rebanho e sociais relacionadas a trabalhadores e meio ambiente.(AU)

Identification of enterobacteria in free-living nonhuman primates in an urban park in the northern Region of the State of Paraná, Brazil / Identificação de enterobactérias em primatas não-humanos de vida livre em um parque urbano na Região Norte do Estado do Paraná, Brasil

Populations of nonhuman primates are often considered to be a link in the chain of emerging infectious diseases, as they are reservoirs for different zoonotic pathogens. The objective of this study was to identify the presence of bacteria from the family Enterobacteriaceae in free-living nonhuman primates. The research was carried out in an urban park located in a city in the northern region of the State of Paraná, Brazil. The animals were captured in Tomahawk-type traps and chemically restrained, being oral and rectal samples collected with sterile swabs. For bacterial isolation, the samples were seededon MacConkey agar plates and grown under anaerobic conditions. The subsequent identification was conducted using a commercial biochemical kit. Sixteen primates identified as black-capuchin-monkeys (Sapajus nigritus) were captured. Seven different enterobacterial species were identified from the oral cavity swabs: six Escherichia coli (42.9%), three Kluyvera species (21.40%), one Serratia rubidaea(7.14%), one Enterobacter aerogenes (7.14%), one Enterobacter cloacae (7.14%), one Hafnia alvei (7.14%), and one Erwinia herbicola (7.14%). Seven different species were identified from the rectal swabs: six Escherichia coli (40%), three Kluyvera species (20%), two Enterobacter aerogenes (13.32%),one Erwinia herbicola (6.67%), one Serratia rubidaea (6.67%), one Pragia fontium (6.67%), and one Edwardsiella tarda (6.67%). The results indicate that the isolated bacteria belong mainly to the human microbiota and had crossed the interspecific barrier, contaminating the nonhuman primates.(AU)

As populações de primatas não humanos frequentemente são consideradas um elo na cadeia de doenças infecciosas emergentes, por constituírem reservatórios que propiciam o surgimento de diferentes patógenos zoonóticos. O objetivo deste trabalho foi identificar a presença de bactérias da família Enterobacteriaceae em primatas não humanos de vida livre. O estudo foi realizado em um parque urbano localizado em uma cidade da região norte do Estado do Paraná. Os animais foram capturados em armadilhas do tipo Tomahawk e submetidos a contenção farmacológica para colheita de amostras da microbiota oral e retal com zaragatoas estéreis. Para o isolamento bacteriano as amostras foram semeadas pela técnica de esgotamento em placas contendo ágar MacConkey, com posterior identificação por testes bioquímicos utilizando kit comercial. Foram capturados 16 primatas não humanos identificados como Sapajus nigritus (macaco-prego). Na cavidade oral foi possível identificar sete diferentes espécies de bactérias, sendo seis (42,9%) Escherichia coli, três espécies de Kluyvera (21,40%), uma (7,14%) Serratia rubidae, uma (7,14%) Enterobacter aerogenes, uma (7,14%) Enterobacter cloacae, uma (7,14) Hafnia alvei e uma (7,14%) Erwinia herbicola. No reto foi possível identificar sete diferentes espécies de bactérias, sendo seis (40%) Escherichia coli, três espécies de Kluyvera (20%), duas (13,32%) Enterobacter aerogenes, uma (6,67%) Erwinia herbicola, uma (6,67%) Serratia rubidae, uma (6,67%) Pragla fotiun e uma (6,67%) Edwardsiella tarda. Os resultados indicam que as bactérias isoladas são pertencentes principalmente à microbiota humana, e estão ultrapassando a barreira interespecífica e contaminando os primatas.(AU)

Antimicrobial activity of species Zingiber officinale Roscoe and Alpinia purpurata (Vieill.) K. Schum. (Zingiberaceae) - Review / Atividade antimicrobiana das espécies Zingiber officinale Roscoe e Alpinia purpurata (Vieill.) K. Schum. (Zingiberaceae) - Revisão

The functionality of nutraceutical foods is attributed to their bioactive compounds. These compounds are widely produced by plants, such as phenolic compounds, which have antioxidant activity and/or antimicrobial activity, acting against damage to macromolecules such as lipids, proteins, and nucleic acids. Secondary plant metabolites, including classes such as phenolic compounds, alkaloids, and terpenoids, have a wide variety of biological activities with medicinal potential. These secondary metabolites are considered bioactive compounds. The Zingiberaceae family received special attention for their large bioactive compound production. Such compounds are useful in foods as herbs, spices, flavorings, and seasonings and in the pharmaceutical and cosmetic industries as antioxidants and antimicrobials. Gingers are recognized as safe by the American Food and Drug Administration (FDA), resulting in no side effects when consumed in moderate amounts. Recent studies show that, in addition to rhizomes, the leaves and flowers of some ginger species have antioxidant activity and consequent medicinal potential. Studies have demonstrated that in vitro and in vivo research is needed to evaluate the efficacy of ginger extracts and understand their role in the modulation of biological and molecular pathways, thus enabling the development of new therapeutic strategies. Thereby, the present work aims to provide a bibliographic review on the antimicrobial activity of Zingiber officinale Roscoe and Alpinia purpurata (Vieill.) K. Schum. (Zingiberaceae), popularly known as ginger and red ginger respectively, and their potential use in the One Health initiative.(AU)

A funcionalidade dos alimentos nutracêuticos é atribuída aos seus compostos bioativos. Estes compostos são amplamente produzidos pelos vegetais, tais como os compostos fenólicos, que possuem atividade antioxidante e/ou atividade antimicrobiana entre outras, agindo contra danos em macromoléculas como lipídeos, proteínas e ácidos nucléicos. Os metabólitos secundários das plantas, incluindo algumas classes como compostos fenólicos, alcaloides e terpenóides, possuem uma ampla variedade de atividades biológicas com potencial medicinal. Esses metabólitos secundários são considerados compostos bioativos. A família Zingiberaceae tem recebido atenção especial, por produzir muitos compostos bioativos que são úteis em alimentos como ervas e especiarias; aromatizantes e temperos; nas indústrias farmacêutica e cosmética como agentes antioxidantes e antimicrobianos. Os gengibres são reconhecidos como seguros pela American Food and Drug Administration (FDA) e não possuem efeitos colaterais quando consumidos em quantidades moderadas. Estudos recentes demonstram que além dos rizomas, as folhas e flores de algumas espécies de gengibres possuem atividade antioxidante e consequentemente um potencial medicinal. Estudos demonstram que são necessárias pesquisas in vitro e in vivo para avaliar a eficácia dos extratos do gengibre e compreender o seu papel na modulação das vias biológicas e moleculares, possibilitando assim, novas estratégias terapêuticas. Dessa forma, o presente trabalho tem como objetivo, uma revisão bibliográfica sobre a atividade antimicrobiana de Zingiber officinale Roscoe e Alpinia purpurata (Vieill.) K. Schum. (Zingiberaceae), conhecidos popularmente como gengibre e gengibre-vermelho respectivamente e seu uso na Saúde Única.(AU)

Serological and molecular findings in diagnosis of leptospirosis serovar hardjo in a dairy bovine herd / Acompanhamento sorológico e molecular do sorovar hardjo no diagnóstico de leptospirose em um rebanho bovino leiteiro

The cattle are considered hosts of the Hardjo serovar, causing economic damages due to the reproductive failures like abortions and infertility. The serovar Hardjo usually remains in the reproductive tract and also in the renal tubules where it is eliminated intermittently in the urine for months. Placental remnants, the aborted fetus and contaminated urine promote the permanence of this bacterium within the herd for years. Thus, the objective of this study was to monitor for prolonged period, cows naturally infected with Leptospira ssp. through microbiological culture, serological examination and DNA detection of the pathogen in the urine. The dairy herd was composed of 50 breeding cows with a history of abortion and infertility, without leptospirosis vaccine and located in the northern region of Paraná. Blood and urine samples were collected and laboratorial diagnosis were performed five times at intervals of four months. Blood samples were collected from the all 50 animals and the serum was submitted to the microscopic agglutination test (MAT) for the detection of anti-leptospira antibodies. Of the total cows, 20 showed antibody titres ≥ 1: 100 in MAT and urine samples were collected from only those animals with higher titers to perform nested-PCR (n-PCR) and bacterial isolation per culture. In addition, two urine samples from five animals with antibody titers < 1: 100 were collected in MAT for n-PCR. Serovar Hardjo wasconsidered the most frequent during the serological monitoring of the animals evaluated. The n-PCRtechnique was able to detect leptospiral DNA in the urine of animals with MAT ≥ 1: 100 antibody titersand urine from animals whose titers were < 1: 100. Sequencing of the leptospiral amplicons shared100% nucleotide sequence identity with the Leptospira interrogans species. Positive n-PCR resultsfrom animals with titers of < 1: 100 suggest that the cut-off of MAT is could be not sufficient to detectrenal carriers, so it is also important to...(AU)

Os bovinos são considerados hospedeiros do sorovar Hardjo, causando prejuízos econômicos devido aos problemas reprodutivos como abortos e infertilidade. O sorovar Hardjo costuma permanecer no trato reprodutivo e também nos túbulos renais onde é eliminado de forma intermitente na urina por meses. Restos placentários, o feto abortado e a urina contaminada favorecem a permanência dessa bactéria dentro do rebanho por anos. Assim, o objetivo deste estudo foi monitorar por período prolongado, vacas naturalmente infectadas por Leptospira ssp. através de cultura microbiológica, exame sorológico e detecção de DNA do patógeno na urina. O rebanho leiteiro estudado era constituído por 50 vacas reprodutoras com histórico de abortos e infertilidade, sem uso de vacina contra a leptospirose e localizada na região Norte do Paraná. As amostras de sangue e urina foram coletadas e submetidas a análises laboratoriais em cinco vezes em intervalos espaçados de quatro meses. As amostras de sangue foram coletadas dos 50 animais e o soro foi submetido ao teste de soroaglutinação microscópica (SAM) para detecção de anticorpos anti-leptospira. Do total vacas, 20 demonstraram títulos de anticorpos ≥ 1: 100 na SAM e foram coletadas amostras de urina apenas destes animais com maiores título para realizar a nested-PCR (n-PCR) e isolamento bacteriano por cultura. Adicionalmente, foram coletadas duas amostras de urina de cinco animais com títulos de anticorpos < 1: 100 na SAM para n-PCR. OSorovar Hardjo foi considerado como sendo o mais frequente durante o monitoramento sorológico dosanimais avaliados. A técnica de n-PCR foi capaz de detectar DNA leptospiral na urina de animais comtítulos de anticorpos ≥ 1: 100 e na urina de animais cujos títulos eram < 1:100. O sequenciamento dosamplicons leptospíricos compartilhou 100% de identidade da sequência de nucleotídeos com a espécieLeptospira interrogans. Os resultados positivos da n-PCR dos animais com títulos < 1: 100 sugerem quea...(AU)

Genetic diversity and virulence genes in Streptococcus uberis strains isolated from bovine mastitis / Diversidade genética e genes de virulência em amostras de Streptococcus uberis isolados de mastite bovina

Mastitis is one of the most common and costly infectious diseases in dairy cattle worldwide. This is a multifactorial illness caused by different microorganisms, including virus, yeasts, algae, parasites, and several species of bacteria. Among these bacteria, Streptococcus uberis is an important environmental pathogen that is responsible for a large range of clinical and subclinical mammary infections, especially in intensively managed herds. Despite the increasing importance of this pathogen in the etiology of bovine mastitis, data on its virulence and diversity in Brazilian dairy herds are scarce. The aims of the present study were to investigate the virulence characteristics of S. uberis isolated from bovine mastitis and to assess the molecular epidemiology of the Brazilian isolates using pulsed-field gel electrophoresis (PFGE). In this work, 46 strains of S. uberis isolated from bovine mastitis from 26 Brazilian dairy herds were evaluated regarding their genetic diversity by PFGE using with the SmaI enzyme. Additionally, the presence of the virulence genes skc and pauA, which encode plasminogen activators, and the gene sua, which encodes an adhesion molecule in mammary epithelial cells, were assessed by PCR. Our results showed a high genetic diversity in the population, displaying many different patterns in the PFGE analysis. A high proportion of strains was positive for virulence genes in the sampled population(sua [100%], pauA [91%], and skc [91%]). The high frequency of skc, pauA, and sua genes amongthe studied strains suggests the importance of these virulence factors, possibly helping S. uberis in thecolonization of the bovine mammary gland. Surveys of the genetic and molecular characteristics of thispathogen can improve our knowledge of bacterial activity and identify molecules that have roles in theestablishment of the infection. This might help in the development of more effective measures to controland prevent bovine mastitis.

A mastite é uma das doenças infecciosas mais onerosas em bovinos leiteiros em todos os continentes. Trata-se de uma doença de cunho multifatoral causada por diferentes microrganismos, incluindo vírus, leveduras, algas, parasitas e várias espécies de bactérias. Entre as bactérias, Streptococcus uberis destaca-se como um importante agente ambiental, responsável por uma grande variedade de infecções clínicas e subclínicas da glândula mamária, especialmente em sistemas de produção intensivos. Apesar da crescente importância de S. uberis na etiologia da mastite bovina, existem poucos estudos sobre a diversidade populacional e fatores de virulência deste patógeno em rebanhos leiteiros brasileiros.Os objetivos do presente estudo foram investigar as características de virulência e a epidemiologia molecular de S. uberis isolados de mastite bovina em rebanhos brasileiros, utilizando-se a PCR e a eletroforese em gel de campo pulsado (PFGE). Para tal, 46 amostras de S. uberis isoladas de mastite bovina em 26 rebanhos leiteiros de uma mesma mesorregião brasileira foram avaliadas quanto à diversidade populacional por eletroforese em gel de campo pulsado (PFGE), utilizando-se a enzima Smal. Além disso, foi realizada PCR para detectar os genes de virulência pauA e skc, que codificam ativadores de plasminogênio, e do gene sua, que codifica uma proteína de adesão às celulas epiteliais da glândula mamária. Nossosresultados mostraram uma alta diversidade genética na população estudada, com vários padrões dePFGE, e uma elevada frequência dos genes de virulência pesquisados: sua (100%), pauA (91%) e skc(91%). A alta frequência dos genes skc, pauA e sua sugere a importância destes fatores de virulênciapara S. uberis na colonização da glândula mamária bovina. Estudos moleculares e genéticos sobre esteagente podem contribuir muito para melhorar o conhecimento sobre a patogenia, permitindo identificarmoléculas que tenham papel relevante no estabelecimento da infecção, fornecendo...

Genetic diversity and virulence genes in Streptococcus uberis strains isolated from bovine mastitis / Diversidade genética e genes de virulência em amostras de Streptococcus uberis isolados de mastite bovina

Mastitis is one of the most common and costly infectious diseases in dairy cattle worldwide. This is a multifactorial illness caused by different microorganisms, including virus, yeasts, algae, parasites, and several species of bacteria. Among these bacteria, Streptococcus uberis is an important environmental pathogen that is responsible for a large range of clinical and subclinical mammary infections, especially in intensively managed herds. Despite the increasing importance of this pathogen in the etiology of bovine mastitis, data on its virulence and diversity in Brazilian dairy herds are scarce. The aims of the present study were to investigate the virulence characteristics of S. uberis isolated from bovine mastitis and to assess the molecular epidemiology of the Brazilian isolates using pulsed-field gel electrophoresis (PFGE). In this work, 46 strains of S. uberis isolated from bovine mastitis from 26 Brazilian dairy herds were evaluated regarding their genetic diversity by PFGE using with the SmaI enzyme. Additionally, the presence of the virulence genes skc and pauA, which encode plasminogen activators, and the gene sua, which encodes an adhesion molecule in mammary epithelial cells, were assessed by PCR. Our results showed a high genetic diversity in the population, displaying many different patterns in the PFGE analysis. A high proportion of strains was positive for virulence genes in the sampled population(sua [100%], pauA [91%], and skc [91%]). The high frequency of skc, pauA, and sua genes amongthe studied strains suggests the importance of these virulence factors, possibly helping S. uberis in thecolonization of the bovine mammary gland. Surveys of the genetic and molecular characteristics of thispathogen can improve our knowledge of bacterial activity and identify molecules that have roles in theestablishment of the infection. This might help in the development of more effective measures to controland prevent bovine mastitis.(AU)

A mastite é uma das doenças infecciosas mais onerosas em bovinos leiteiros em todos os continentes. Trata-se de uma doença de cunho multifatoral causada por diferentes microrganismos, incluindo vírus, leveduras, algas, parasitas e várias espécies de bactérias. Entre as bactérias, Streptococcus uberis destaca-se como um importante agente ambiental, responsável por uma grande variedade de infecções clínicas e subclínicas da glândula mamária, especialmente em sistemas de produção intensivos. Apesar da crescente importância de S. uberis na etiologia da mastite bovina, existem poucos estudos sobre a diversidade populacional e fatores de virulência deste patógeno em rebanhos leiteiros brasileiros.Os objetivos do presente estudo foram investigar as características de virulência e a epidemiologia molecular de S. uberis isolados de mastite bovina em rebanhos brasileiros, utilizando-se a PCR e a eletroforese em gel de campo pulsado (PFGE). Para tal, 46 amostras de S. uberis isoladas de mastite bovina em 26 rebanhos leiteiros de uma mesma mesorregião brasileira foram avaliadas quanto à diversidade populacional por eletroforese em gel de campo pulsado (PFGE), utilizando-se a enzima Smal. Além disso, foi realizada PCR para detectar os genes de virulência pauA e skc, que codificam ativadores de plasminogênio, e do gene sua, que codifica uma proteína de adesão às celulas epiteliais da glândula mamária. Nossosresultados mostraram uma alta diversidade genética na população estudada, com vários padrões dePFGE, e uma elevada frequência dos genes de virulência pesquisados: sua (100%), pauA (91%) e skc(91%). A alta frequência dos genes skc, pauA e sua sugere a importância destes fatores de virulênciapara S. uberis na colonização da glândula mamária bovina. Estudos moleculares e genéticos sobre esteagente podem contribuir muito para melhorar o conhecimento sobre a patogenia, permitindo identificarmoléculas que tenham papel relevante no estabelecimento da infecção, fornecendo...(AU)