Detection of icaA, icaD, and bap genes and biofilm production in Staphylococcus aureus and non-aureus staphylococci isolated from subclinical and clinical bovine mastitis / Detecção dos genes icaA, icaD e bap e produção de biofilme por Staphylococcus aureus e estafilococos não-aureus isolados de mastite clínica e subclínica bovina

Algumas espécies de Staphylococcus causam infecções crônicas intramamárias e podem levar à formação de biofilme. No presente estudo, levantou-se a hipótese de que as espécies de Staphylococcus isolados da mastite bovina são capazes de formar biofilme in vitro associado à presença dos genes icaA, icaD ou bap. Um total de 200 isolados de Staphylococcus, sendo 100 Staphylococcus aureus de casos de mastite subclínica e 100 estafilococos não aureus (ENA) de casos de mastite subclínica e clínica, obtidos em duas fazendas leiteiras, no estado de São Paulo, foram avaliados quanto à capacidade de produzir biofilmes in vitro. A presença de icaA, icaD e bap foi confirmada por PCR, e a produção de biofilme em ágar vermelho congo (Congo Red Agar - CRA) e em teste de microplaca (Microtiter Plate - MtP) foi avaliada nos isolados de S. aureus e ENA. Os resultados mostraram a presença dos genes icaA, icaD e bap em S. aureus, mas não em ENA. A produção de biofilme pode estar associada à presença de outros fatores ou genes que estimulam a produção de biofilme in vitro. O ensaio de MtP serve como um modelo quantitativo para o estudo da aderência de espécies de estafilococos associados à mastite bovina.(AU)

Detection of icaA, icaD, and bap genes and biofilm production in Staphylococcus aureus and non-aureus staphylococci isolated from subclinical and clinical bovine mastitis / Detecção dos genes icaA, icaD e bap e produção de biofilme por Staphylococcus aureus e estafilococos não-aureus isolados de mastite clínica e subclínica bovina

Algumas espécies de Staphylococcus causam infecções crônicas intramamárias e podem levar à formação de biofilme. No presente estudo, levantou-se a hipótese de que as espécies de Staphylococcus isolados da mastite bovina são capazes de formar biofilme in vitro associado à presença dos genes icaA, icaD ou bap. Um total de 200 isolados de Staphylococcus, sendo 100 Staphylococcus aureus de casos de mastite subclínica e 100 estafilococos não aureus (ENA) de casos de mastite subclínica e clínica, obtidos em duas fazendas leiteiras, no estado de São Paulo, foram avaliados quanto à capacidade de produzir biofilmes in vitro. A presença de icaA, icaD e bap foi confirmada por PCR, e a produção de biofilme em ágar vermelho congo (Congo Red Agar - CRA) e em teste de microplaca (Microtiter Plate - MtP) foi avaliada nos isolados de S. aureus e ENA. Os resultados mostraram a presença dos genes icaA, icaD e bap em S. aureus, mas não em ENA. A produção de biofilme pode estar associada à presença de outros fatores ou genes que estimulam a produção de biofilme in vitro. O ensaio de MtP serve como um modelo quantitativo para o estudo da aderência de espécies de estafilococos associados à mastite bovina.(AU)

Antimicrobial activity of propolis and essential oils and synergism between these natural products

In the present study, Apis mellifera propolis and essential oils (EOs) obtained from aromatic plants were evaluated as alternative antimicrobials. We aimed to establish the antimicrobial activity of ethanolic extracts of propolis (EEP) from Apis mellifera and of EOs from Caryophyllus aromaticus, Zingiber officinale, Cinnamomum zeylanicum and Mentha piperita against 32 Staphylococcus aureus and Escherichia coli strains from human clinical specimens. The antimicrobials were diluted in agar and the minimal inhibitory concentrations (MIC) were found whereas MIC90 percent values were calculated. Time-kill curve assays using mixtures containing one quarter of MIC90 percent for EEP with all EOs as well cinnamon EO were performed. The cinnamon EO was found to be the most efficient, with MIC90 percent values of 1.22 and 0.96 mg x mL-1 respectively against S. aureus and E. coli, whereas MIC90 percent of EEP were 1.86 and 20.12 mg x mL-1 respectively against S. aureus and E. coli. The combinations of EEP with ginger and mint EOs, and cinnamon with ginger and clove EOs, showed synergistic effects. Consequently, further studies are necessary to confirm these activities in vivo and to evaluate the phytochemical characteristics of natural products.(AU)

Detection of enterotoxin genes of Staphylococcus sp isolated from nasal cavities and hands of food handlers

Food handlers, an important factor in food quality, may contain bacteria that are able to cause foodborne disease. The present study aimed to research coagulase-negative (CNS) and -positive staphylococci (CPS) in 82 food handlers, analyzing nasal and hand swabs, with identification of 62 CNS (75.6%) and 20 CPS strains (24.4%). Staphylococcal enterotoxins genes were investigated by PCR. In 20 CPS strains, 19 were positive for one or more genes. The percentage of CNS presenting genes for enterotoxins was high (46.8%). Despite of the staphylococcal species, the most common gene was sea (35.4%), followed by seh and sej (29.2%). The detection of new staphylococcal enterotoxins (SEs) genes showed a higher pathogenic potential in this genus. The presence of these gene points out the importance of CNS not only as contaminant bacteria but also as a pathogen.

Pulmonary, microbiological and hematological changes in Crotalus durissus terrificus (Serpentes, Viperidae) parasitized by nematodes of the genus Rhabdias (Nematoda, Rhabdiasidae) / Alterações Pulmonares, microbiológicas e hematológicas em Crotalus durissus terrificus (Serpentes, Viperidae) parasitadas pelos nematódeos do gênero Rhabdias (Nematoda, Rhabdiasidae)

This study reported the pulmonary, microbiological, and hematological alterations in Crotalus durissus terrificus parasitized by nematodes of the genus Rhabdias. Histological, microbiological, and hematological analysis were performed on parasitized (n=6) and non-parasitized (n=6) snakes. Granulocytic and mononuclear cell infiltrates in the pulmonary parenchyma and epithelium were also observed during the histological analysis of parasitized snakes. Microbiological analysis of parasitized animals revealed the following Gram-negative bacteria: Citrobacter divergens, Burkholderia cepacia, Stenotrophomonas maltophilia, Proteus vulgaris, Enterobacter sakazakii, Enterobacter ammnigenus, Pseudomonas aeruginosa, Pantoea sp. and Providencia rettgeri. In non-parasitized snakes, the following species were identified: B. cepacia, Pseudomonas fluorescens, and Acinetobacter baumanii. Increased levels of plasmatic protein, decreased lymphocyte counts, and normal red blood cell values were observed in parasitized animals.(AU)

Este trabalho relata as alterações pulmonares, microbiológicas e hematológicas em Crotalus durissus terrificus parasitadas pelo nematódeo do gênero Rhabdias. As análises histológicas, microbiológicas e hematológicas foram realizadas em serpentes parasitadas (n=6) e não parasitadas (n=6). Foram observados infiltrados de células granulocíticas e mononucleares no parênquima pulmonar durante a análise histopatológica das serpentes parasitadas. A análise microbiológica revelou as seguintes bactérias Gram-negativas; Citrobacter divergens, Burkholderia cepacia, Stenotrophomonas maltophilia, Proteus vulgaris, Enterobacter sakazakii, Enterobacter ammnigenus, Pseudomonas aeruginosa, Pantoea sp. e Providencia rettgeri. Nas serpentes não parasitadas foram identificadas: B. cepacia, Pseudomonas fluorescens e Acinetobacter baumanii. Nos animais parasitados observaram-se: aumento da concentração de proteína plasmática, diminuição da contagem de linfócitos, e valores normais de hematimetria.(AU)

Microbiological evaluation of hydric resources provided by the tietê river, district of vitoriana, botucatu, sp, brazil

ABSTRACT Water, fundamental to the existence of mankind, demands the attention of competent authorities since its contamination could become a vehicle for transmission of infectious diseases. Thus the present work aimed to investigate the presence of fecal and total coliforms in water samples taken from wells, a lake and both the margin and channel of the Tiete River, Barra Bonita Dam, Botucatu, São Paulo, Brazil. The necessity of investigation arose by virtue of a high gastrenteritis index detected in the population that utilizes these hydric resources. The most probable number (MPN) of fecal and total coliforms was determined for 168 water samples through the method of multiple tubes. The results showed that only 42% of the samples collected in 4 wells investigated were considered of good quality for human consumption, by not presenting fecal coliforms in 100 mL of water, according to Decree Nº 518 de 25/103/2004. Regarding suitability for bathing/recreational use, according to CONAMA Resolution 357 of 17/03/2005, it was observed that in the locations investigated, only 10% of the samples analyzed were considered inappropriate for bathing and 90% of the remainder were considered satisfactory.

RESUMO A água constitui um dos elementos fundamentais para a existência do homem e sua preservação é uma necessidade que exige atenção das autoridades competentes, pois sua contaminação pode torná-la um veículo na transmissão de doenças infecciosas. Assim, objetivou-se investigar a presença de coliformes totais e fecais em amostras de água provenientes de poços e lago no Bairro Recreio Jardim Mina de Botucatu, São Paulo, e na margem e meio do canal do Rio Tietê, Represa da Barra Bonita, próxima da Usina da Barra Bonita, Botucatu, São Paulo. A necessidade de investigação ocorreu em virtude do alto índice de gastrenterites detectado na população que utilizam esses recursos hídricos. Foi analisado o Número Mais Provável (NMP) de Coliformes Totais e Fecais em 168 amostras de água através do método de tubos múltiplos. De acordo com resultados, verificou-se que, somente 42% das amostras coletadas nos 4 poços investigados, foram consideradas de boa qualidade para o consumo humano, considerando este parâmetro, por não apresentarem coliformes fecais em 100 mL de água, segundo a Portaria MS 518 de 25/103/2004. Quanto aos Padrões de Balneabilidade, segundo a Resolução 357 do CONAMA de 17/03/2005, pode-se observar que nos locais investigados, somente 10% das amostras analisadas foram consideradas impróprias para banho e as 90% restantes foram consideradas satisfatórias.

Susceptibility profile of Salmonella against the antibacterial activity of propolis produced in two regions of Brazil

Propolis antibiotic action has been widely investigated. This assay was carried out in order to observe the in vitro antibacterial activity of propolis against Salmonella enteritidis isolated from food and Salmonella typhimurium isolated from human infections. Propolis was collected by Apis mellifera in two regions of Brazil (Mossoró, Rio Grande do Norte State; and Urubici, Santa Catarina State). Both strains survival percentage decreased with time of incubation in Ethanolic Extracts of Propolis (EEP), demonstrating bactericidal effect after 24 hours. It was also observed that EEP from Mossoró was more effective than that from Urubici. The control of the propolis solvent - 70 percent ethanol - was less effective than EEP, showing only a bacteriostatic effect. We can conclude that propolis shows an activity against Gram-negative bacteria that varies according to the geographical region where it was collected by bees.(AU)