Relationship between superovulation and embryo production with ovarian follicular population before superovulatory treatment in Brazilian Bergamasca sheep / [Relação da resposta superovulatória e produção embrionária com a população folicular ovariana antes do tratamento superovulatório de ovelhas da raça Bergamácia Brasileira]

The objective of this study was to quantify the superovulatory response and embryo production of Brazilian Bergamasca sheep and to evaluate the link to the follicular condition before superovulatory treatment, as a reference for selection of donors with potential for superovulation. Follicular population of twenty-three sheep was evaluated by ultrasound during metestrus phase of the estrous cycle and divided into groups of low, medium and high follicular population. Subsequently, they were synchronized, superovulated with 133mg of pFSH, mated and subjected to embryo collection. The superovulatory response (9.0±3.3 vs 10.7±6.2 vs 13.8±7.1) and embryo production (4.0±3.8 vs 2.6±2.0 vs 1,8±4.0) were similar between groups (P>0.05). There was a positive correlation between the number of follicles during the metestrus phase and the number of corpus luteum with premature regression (PLR) (0.52) and a negative correlation between the recovery rate and PLR (-0.44) (P<0.05). The sheep that presented PLR had more follicles during metestrus (16.9±7.8 vs 12.7±3.2) and lower embryo recovery rate (38.8±29.3 vs 72.2±29.9) than those with functional CLs (P<0.05). Follicular quantification during metestrus phases was unable to identify donors with high embryo production. Animals with PLR had a larger follicular population during metestrus and lower embryo recovery rate.(AU)

O objetivo deste trabalho foi quantificar a resposta superovulatória e a produção embrionária de ovelhas Bergamácia Brasileira e relacioná-las com a condição folicular antes do tratamento superovulatório, como referência para seleção de doadoras com potencial para superovulação. Vinte e três ovelhas foram avaliadas quanto à população folicular por ultrassonografia na fase de metaestro do ciclo estral e divididas em grupos com baixa, média e alta população folicular. Posteriormente foram sincronizadas, superovuladas com 133mg de pFSH, acasaladas e submetidas à coleta de embriões. A resposta superovulatória (9,0±3,3 vs. 10,7±6,2 vs. 13,8±7,1) e a produção embrionária (4,0±3,8 vs. 2,6±2,0 vs. 1,8±4,0) foram semelhantes entre os grupos (P>0,05). Houve correlação positiva entre o número de folículos no metaestro e o número de corpos lúteos com regressão prematura (RPCL) (0,52) e correlação negativa entre a taxa de recuperação e RPCL (-0,44) (P <0,05). As ovelhas que apresentaram RPCL tiveram mais folículos no metaestro (16,9±7,8 vs. 12,7±3,2) e menor taxa de recuperação embrionária (38,8±29,3 vs. 72,2±29,9) do que as que apresentaram CLs funcionais (P<0,05). A quantificação folicular nas fases de metaestro não foi capaz de identificar doadoras com alto potencial de produção embrionária. Animais com RPCL tiveram maior população folicular no metaestro e menor recuperação de embriões.(AU)

Serum proteinogram of the Campeiro horse / Proteinograma sérico de equinos da raça Campeiro

The aim of this study to measure the fractions of the total serum proteins of the Campeiro horse and identify the influences of biological variants. Blood samples were taken in 138 horses of the breed Campeiro for measuring the concentration of total serum protein by the biuret method. Serum concentrations of protein fractions were measured by electrophoresis using agarose gel. Groups were formed according to age, sex and reproductive condition. The average values of serum fractions: albumin (2.85±0.36g/dl), alpha 1 (0.28±0.11g/dl), alpha 2 (0.26±0.08g/dL) beta 1 (0.57±0.15g/dl), beta 2 (0.89±0.28g/dL), gamaglobulinas (1.86±0.34g/dL), albumin/globulin ratio (0.75±0.18) and 2.5% percentile and 97.5% had slight differences in relation to the reference interval proposed for the species. They observed higher values of alpha 1 and 2 globulins in the group from that had six to eight years old and gammaglobulins in group above 13 years old. Serum protein concentrations were similar in horses and mares and between non-pregnant and pregnant. Sex and pregnancy status did not affect serum proteinogram. Alpha and gammaglobulins have higher values as the age increases. Serum proteinogram of Campeiro horses shows variations that have to be considered in the interpretation of laboratory tests.(AU)

Este trabalho tem por objetivo mensurar as frações das proteínas totais séricas de equinos Campeiros e identificar as influências de variantes biológicas. Foram colhidas amostras de sangue de 138 equinos, machos e fêmeas da raça Campeiro. A determinação da concentração de proteínas totais séricas foi realizada pelo método de biureto. As concentrações séricas das frações proteicas foram determinadas por eletroforese, utilizando-se gel de agarose. Formaram-se grupos em relação à idade, ao sexo e à condição reprodutiva. Os valores médios das frações séricas albumina (2,85±0,36g/dL), alfa 1 (0,28±0,11g/dL), alfa 2 (0,26±0,08g/dL), beta 1 (0,57±0,15g/dL), beta 2 (0,89±0,28g/dL), gamaglobulinas (1,86±0,34g/dL), relação albumina/globulina (0,75±0,18) e os percentis 2,5% e 97,5% apresentaram diferenças pontuais em relação aos intervalos propostos para a espécie. Observaram-se maiores valores de alfa 1, alfa 2 globulinas, no grupo de seis a oito anos, e de gamaglobulinas, no grupo acima de 13 anos de idade. O proteinograma sérico foi similar entre machos e fêmeas e entre fêmeas vazias e gestantes. Sexo e estado gestacional não afetaram o proteinograma sérico. Alfa e gamaglobulinas têm incrementos em função de idades crescentes. O proteinograma sérico de equinos Campeiros tem variações que devem ser consideradas em exames laboratoriais.(AU)

Serum proteinogram of the Campeiro horse / Proteinograma sérico de equinos da raça Campeiro

The aim of this study to measure the fractions of the total serum proteins of the Campeiro horse and identify the influences of biological variants. Blood samples were taken in 138 horses of the breed Campeiro for measuring the concentration of total serum protein by the biuret method. Serum concentrations of protein fractions were measured by electrophoresis using agarose gel. Groups were formed according to age, sex and reproductive condition. The average values of serum fractions: albumin (2.85±0.36g/dl), alpha 1 (0.28±0.11g/dl), alpha 2 (0.26±0.08g/dL) beta 1 (0.57±0.15g/dl), beta 2 (0.89±0.28g/dL), gamaglobulinas (1.86±0.34g/dL), albumin/globulin ratio (0.75±0.18) and 2.5% percentile and 97.5% had slight differences in relation to the reference interval proposed for the species. They observed higher values of alpha 1 and 2 globulins in the group from that had six to eight years old and gammaglobulins in group above 13 years old. Serum protein concentrations were similar in horses and mares and between non-pregnant and pregnant. Sex and pregnancy status did not affect serum proteinogram. Alpha and gammaglobulins have higher values as the age increases. Serum proteinogram of Campeiro horses shows variations that have to be considered in the interpretation of laboratory tests.(AU)

Este trabalho tem por objetivo mensurar as frações das proteínas totais séricas de equinos Campeiros e identificar as influências de variantes biológicas. Foram colhidas amostras de sangue de 138 equinos, machos e fêmeas da raça Campeiro. A determinação da concentração de proteínas totais séricas foi realizada pelo método de biureto. As concentrações séricas das frações proteicas foram determinadas por eletroforese, utilizando-se gel de agarose. Formaram-se grupos em relação à idade, ao sexo e à condição reprodutiva. Os valores médios das frações séricas albumina (2,85±0,36g/dL), alfa 1 (0,28±0,11g/dL), alfa 2 (0,26±0,08g/dL), beta 1 (0,57±0,15g/dL), beta 2 (0,89±0,28g/dL), gamaglobulinas (1,86±0,34g/dL), relação albumina/globulina (0,75±0,18) e os percentis 2,5% e 97,5% apresentaram diferenças pontuais em relação aos intervalos propostos para a espécie. Observaram-se maiores valores de alfa 1, alfa 2 globulinas, no grupo de seis a oito anos, e de gamaglobulinas, no grupo acima de 13 anos de idade. O proteinograma sérico foi similar entre machos e fêmeas e entre fêmeas vazias e gestantes. Sexo e estado gestacional não afetaram o proteinograma sérico. Alfa e gamaglobulinas têm incrementos em função de idades crescentes. O proteinograma sérico de equinos Campeiros tem variações que devem ser consideradas em exames laboratoriais.(AU)

Phospholipid composition and resistance to vitrification of in vivo blastocyst of a Brazilian naturalized porcine breed / Composição de fosfolipídios e resistência à vitrificação de blastocistos produzidos in vivo de uma raça de suíno naturalizada brasileira

Piau porcine blastocysts were submitted to MALDI-TOF to identify the main phospholipids (PL). After that, in vivo blastocysts (D6) were vitrified (n=52), non-vitrified were used as control (n=42). After warming, blastocysts were in vitro cultured to assess re-expansion and hatching at 24 and 48 hours. Finally, at 48 hours, hatched blastocysts were submitted to RT-qPCR searching for BCL2A1, BAK, BAX and CASP3 genes. For MALDI-TOF, the ion intensity was expressed in arbitrary units. Blastocyst development was compared by Qui-square (P< 0.05). Among the most representative PL was the phosphatidylcholine [PC (32:0) + H]+; [PC (34:1) + H]+ and [PC (36:4) + H]+. Beyond the PL, MALDI revealed some triglycerides (TG), including PPL (50:2) + Na+, PPO (50:1) + Na+, PLO (52:3) + Na+ and POO (52:2) + Na. Re-expansion did not differ (P> 0.05) between fresh or vitrified blastocysts at 24 (33.3%; 32.7%) or 48 hours (2.4%; 13.5%). Hatching rates were higher (P< 0.05) for fresh compared to vitrified at 24 (66.7%; 15.4%) and 48 hours (97.6%; 36.0%). BAX was overexpressed (P< 0.05) after vitrification. In conclusion, Piau blastocysts can be cryopreserved by Cryotop. This study also demonstrated that the apoptotic pathway may be responsible for the low efficiency of porcine embryo cryopreservation.(AU)

Blastocistos de suínos foram submetidos ao MALDI-TOF para se identificarem os principais fosfolipídios (PL). Depois, parte destes embriões (D6) foram vitrificados (n=52), ou permaneceram frescos (grupo controle, n=42). Após o aquecimento, os blastocistos foram cultivados in vitro para se avaliar a reexpansão e a eclosão (BE) às 24 e 48 horas. Finalmente, às 48 horas, os BE foram submetidos ao RT-qPCR em busca dos genes BCL2A1, BAK, BAX e CASP3. No MALDI-TOF, a intensidade do íon foi expressa em unidades arbitrárias. O desenvolvimento embrionário foi comparado por qui-quadrado (P<0,05). Entre os PL mais representativos estavam as fosfatidilcolinas [PC (32: 0) + H] +; [PC (34: 1) + H] + e [PC (36: 4) + H] +. Além do PL, o MALDI revelou alguns triglicerídeos (TG), incluindo PPL (50: 2) + Na +, PPO (50: 1) + Na +, PLO (52: 3) + Na + e POO (52: 2) + Na. A reexpansão não diferiu (P>0,05) entre blastocistos frescos ou vitrificados às 24 (33,3%, 32,7%) e 48 horas (2,4%, 13,5%). As taxas de eclosão foram maiores (P<0,05) para o grupo fresco comparado ao vitrificado às 24 (66,7% x 15,4%) e 48 horas (97,6% x 36,0%). O BAX estava mais expresso (P<0,05) após a vitrificação. Concluindo, os blastocistos Piau podem ser criopreservados por Cryotop. Este estudo também demonstrou que a via apoptótica pode ser responsável pela baixa eficiência da criopreservação de embriões suínos.(AU)

Phospholipid composition and resistance to vitrification of in vivo blastocyst of a Brazilian naturalized porcine breed / Composição de fosfolipídios e resistência à vitrificação de blastocistos produzidos in vivo de uma raça de suíno naturalizada brasileira

Piau porcine blastocysts were submitted to MALDI-TOF to identify the main phospholipids (PL). After that, in vivo blastocysts (D6) were vitrified (n=52), non-vitrified were used as control (n=42). After warming, blastocysts were in vitro cultured to assess re-expansion and hatching at 24 and 48 hours. Finally, at 48 hours, hatched blastocysts were submitted to RT-qPCR searching for BCL2A1, BAK, BAX and CASP3 genes. For MALDI-TOF, the ion intensity was expressed in arbitrary units. Blastocyst development was compared by Qui-square (P< 0.05). Among the most representative PL was the phosphatidylcholine [PC (32:0) + H]+; [PC (34:1) + H]+ and [PC (36:4) + H]+. Beyond the PL, MALDI revealed some triglycerides (TG), including PPL (50:2) + Na+, PPO (50:1) + Na+, PLO (52:3) + Na+ and POO (52:2) + Na. Re-expansion did not differ (P> 0.05) between fresh or vitrified blastocysts at 24 (33.3%; 32.7%) or 48 hours (2.4%; 13.5%). Hatching rates were higher (P< 0.05) for fresh compared to vitrified at 24 (66.7%; 15.4%) and 48 hours (97.6%; 36.0%). BAX was overexpressed (P< 0.05) after vitrification. In conclusion, Piau blastocysts can be cryopreserved by Cryotop. This study also demonstrated that the apoptotic pathway may be responsible for the low efficiency of porcine embryo cryopreservation.(AU)

Blastocistos de suínos foram submetidos ao MALDI-TOF para se identificarem os principais fosfolipídios (PL). Depois, parte destes embriões (D6) foram vitrificados (n=52), ou permaneceram frescos (grupo controle, n=42). Após o aquecimento, os blastocistos foram cultivados in vitro para se avaliar a reexpansão e a eclosão (BE) às 24 e 48 horas. Finalmente, às 48 horas, os BE foram submetidos ao RT-qPCR em busca dos genes BCL2A1, BAK, BAX e CASP3. No MALDI-TOF, a intensidade do íon foi expressa em unidades arbitrárias. O desenvolvimento embrionário foi comparado por qui-quadrado (P<0,05). Entre os PL mais representativos estavam as fosfatidilcolinas [PC (32: 0) + H] +; [PC (34: 1) + H] + e [PC (36: 4) + H] +. Além do PL, o MALDI revelou alguns triglicerídeos (TG), incluindo PPL (50: 2) + Na +, PPO (50: 1) + Na +, PLO (52: 3) + Na + e POO (52: 2) + Na. A reexpansão não diferiu (P>0,05) entre blastocistos frescos ou vitrificados às 24 (33,3%, 32,7%) e 48 horas (2,4%, 13,5%). As taxas de eclosão foram maiores (P<0,05) para o grupo fresco comparado ao vitrificado às 24 (66,7% x 15,4%) e 48 horas (97,6% x 36,0%). O BAX estava mais expresso (P<0,05) após a vitrificação. Concluindo, os blastocistos Piau podem ser criopreservados por Cryotop. Este estudo também demonstrou que a via apoptótica pode ser responsável pela baixa eficiência da criopreservação de embriões suínos.(AU)

Protocolo com nove dias de progesterona para inseminação artificial em tempo fixo em vacas taurinas adaptadas ao clima tropical / Protocol with nine days of progesterone for fixed-time artificial insemination in Bos taurus cows adapted to the tropical weather

Três experimentos foram realizados para adaptar um protocolo de sincronização de estro e da ovulação para ser utilizado em programas de inseminação artificial em tempo fixo (IATF) em vacas taurinas tropicalmente adaptadas. No Exp. 1 (crossover), vacas pluríparas Curraleiro Pé-Duro (n= 12) receberam um dispositivo intravaginal contendo 1g de P4 por oito dias e 2mg de BE intramuscular (IM) no momento da inserção do dispositivo (dia 0). No dia da remoção do dispositivo (dia 8), as fêmeas receberam 150µg de D-cloprostenol sódico e 300UI de gonadotrofina coriônica equina (eCG) IM, sendo, então, divididas aleatoriamente para receber 1mg de BE no dia 8 (BE8) ou 1mg de BE no dia 9 (BE9). A aplicação de BE no D9 atrasou a ovulação em aproximadamente 15 horas (P<0,05). No Experimento 2, foram avaliados protocolos com oito (P4D8) e nove dias (P4D9) de exposição à progesterona, resultando em parâmetros de desenvolvimento folicular e luteal semelhantes entre os tratamentos (P>0,05). No Experimento 3, os protocolos hormonais de IATF BE8 e P4D9 foram testados para a taxa de prenhez, alcançando 23% (10/43) e 20% (9/45), respectivamente (P>0,05). Embora o grupo P4D9 tenha mostrado avanço na proporção de animais que responderam ao protocolo quando comparado ao protocolo BE8, este não se refletiu em melhora na taxa de prenhez.(AU)

Three experiments were performed to adapt a synchronization protocol of estrus synchronization and ovulation to be used in fixed time artificial insemination programs (FTAI) in tropically adapted Bos taurus cows. In Exp. 1 (crossover) multiparous Curraleiro Pé-Duro cows (n= 12) received an intravaginal device containing 1g of P4 for 8 days and 2mg of EB at the time of device insertion (Day 0). On the P4 device removal (Day 8) females received 150g of D-cloprostenol Sodic and 300IU of equine chorionic gonadotropin (eCG). Then, they were randomly divided to receive 1mg of EB on Day 8 (EB8) or on Day 9 (EB9). EB9 delayed ovulation approximately 15 hours (P<0.05). In Exp. 2, protocols using progesterone for eight (P4D8) or nine days (P4D9) were evaluated, resulting in similar parameters of folicular and luteal development (P>0.05). In Exp. 3, EB8 and P4D9 protocols were used to evaluate the pregnancy rate, reaching 23% (10/43) and 20% (9/45), respectively (P>0.05). Although P4D9 protocol has shown improvement in proportion of animals that responded to the protocol when compared to EB8 protocol, it was not able to improve pregnancy rate.(AU)

Protocolo com nove dias de progesterona para inseminação artificial em tempo fixo em vacas taurinas adaptadas ao clima tropical / Protocol with nine days of progesterone for fixed-time artificial insemination in Bos taurus cows adapted to the tropical weather

Três experimentos foram realizados para adaptar um protocolo de sincronização de estro e da ovulação para ser utilizado em programas de inseminação artificial em tempo fixo (IATF) em vacas taurinas tropicalmente adaptadas. No Exp. 1 (crossover), vacas pluríparas Curraleiro Pé-Duro (n= 12) receberam um dispositivo intravaginal contendo 1g de P4 por oito dias e 2mg de BE intramuscular (IM) no momento da inserção do dispositivo (dia 0). No dia da remoção do dispositivo (dia 8), as fêmeas receberam 150µg de D-cloprostenol sódico e 300UI de gonadotrofina coriônica equina (eCG) IM, sendo, então, divididas aleatoriamente para receber 1mg de BE no dia 8 (BE8) ou 1mg de BE no dia 9 (BE9). A aplicação de BE no D9 atrasou a ovulação em aproximadamente 15 horas (P<0,05). No Experimento 2, foram avaliados protocolos com oito (P4D8) e nove dias (P4D9) de exposição à progesterona, resultando em parâmetros de desenvolvimento folicular e luteal semelhantes entre os tratamentos (P>0,05). No Experimento 3, os protocolos hormonais de IATF BE8 e P4D9 foram testados para a taxa de prenhez, alcançando 23% (10/43) e 20% (9/45), respectivamente (P>0,05). Embora o grupo P4D9 tenha mostrado avanço na proporção de animais que responderam ao protocolo quando comparado ao protocolo BE8, este não se refletiu em melhora na taxa de prenhez.(AU)

Three experiments were performed to adapt a synchronization protocol of estrus synchronization and ovulation to be used in fixed time artificial insemination programs (FTAI) in tropically adapted Bos taurus cows. In Exp. 1 (crossover) multiparous Curraleiro Pé-Duro cows (n= 12) received an intravaginal device containing 1g of P4 for 8 days and 2mg of EB at the time of device insertion (Day 0). On the P4 device removal (Day 8) females received 150g of D-cloprostenol Sodic and 300IU of equine chorionic gonadotropin (eCG). Then, they were randomly divided to receive 1mg of EB on Day 8 (EB8) or on Day 9 (EB9). EB9 delayed ovulation approximately 15 hours (P<0.05). In Exp. 2, protocols using progesterone for eight (P4D8) or nine days (P4D9) were evaluated, resulting in similar parameters of folicular and luteal development (P>0.05). In Exp. 3, EB8 and P4D9 protocols were used to evaluate the pregnancy rate, reaching 23% (10/43) and 20% (9/45), respectively (P>0.05). Although P4D9 protocol has shown improvement in proportion of animals that responded to the protocol when compared to EB8 protocol, it was not able to improve pregnancy rate.(AU)

Development of fixed-time artificial insemination protocols for locally adapted Curraleiro Pé-Duro cows / Desenvolvimento de protocolos de inseminação artificial em tempo fixo em vacas da raça localmente adaptada Curraleiro Pé-Duro

Two experiments were conducted aiming to evaluate the effects of two ovulatory inducers (Exp.1) and equine chorionic gonadotropin (eCG; Exp.2) on follicular and luteal dynamics in a fixed-time AI (FTAI) protocol in locally adapted Curraleiro Pé-Duro cows. In Exp. 1 multiparous cows (n=12) received an intravaginal device containing 1g of progesterone (P4) for 8 days and 2mg of estradiol benzoate (EB) intramuscularly (IM) at device insertion (Day 0). At device removal (Day 8) 0.150mg of Sodium D-Cloprostenol was administered IM and the cows were randomly assigned to receive 1mg of EB (EB8) or 1mg of estradiol cypionate (EC8) IM, or to not receive any ovulatory inducer (Control). All the animals participated in all treatments (crossover). The interval from P4 removal to ovulation was shorter and less variable in the EB8 treatment group (P≤0.05). In Exp. 2 (crossover), multiparous cows (n=12) received the same hormonal treatment as the EB8 group in Exp.1. At device removal (Day 8) cows were randomly assigned to receive 300UI of eCG IM or to not receive eCG (Control). No difference was ascertained on follicular and luteal parameters in Exp. 2 (P>0.05). We concluded that EB can be used as the ovulatory inducer (Exp. 1) in a FTAI protocol in Curraleiro Pé-Duro cows. However, eCG (Exp. 2) was not able to stimulate follicular and luteal development. This result is probably due to the adaptive capacity of Curraleiro Pé-Duro cows that maintained a satisfactory body condition score even in dry and hot environments.(AU)

Foram realizados dois experimentos com o objetivo de avaliar o efeito de dois indutores da ovulação e da gonadotrofina coriônica equina (eCG) na dinâmica folicular e luteal, em um protocolo de inseminação artificial em tempo fixo (IATF) em vacas localmente adaptadas da raça Curraleiro Pé-Duro. No experimento 1, vacas pluríparas receberam um dispositivo intravaginal contendo 1g de progesterona (P4) durante oito dias e 2mg de benzoato de estradiol (BE) intramuscular (IM) no momento da inserção do dispositivo (dia zero). Na retirada do dispositivo (dia oito), as vacas receberam 0,150mg de D-cloprostenol sódico IM e foram separadas aleatoriamente para receber 1mg de BE IM (BE8) ou 1mg de cipionato de estradiol IM (CE8), ou nenhum indutor da ovulação (controle). Todos os animais participaram de todos os tratamentos (crossover). O intervalo entre a retirada da P4 e a ovulação foi menor e menos variável no tratamento BE8 (P≤0,05). O momento da ovulação foi mais precoce e mais concentrado nos animais do grupo BE 8. No experimento 2 (crossover), vacas pluríparas receberam o mesmo tratamento hormonal do grupo BE8 do experimento1. Na retirada do dispositivo (dia 8), as vacas foram separadas aleatoriamente para receberem 300UI de eCG IM, enquanto o controle não. Não houve diferença nos parâmetros foliculares e luteais avaliados no experimento 2 (P>0,05). Em conclusão, o BE pode ser utilizado como indutor da ovulação (experimento 1) em protocolos de IATF em vacas Curraleiras Pé-Duro. Entretanto, o eCG (experimento 2) não foi capaz de estimular o desenvolvimento folicular e luteal. Esse resultado é devido provavelmente à capacidade adaptativa das vacas Curraleiras Pé-Duro em manter uma condição corporal satisfatória mesmo em condições de clima seco e quente.(AU)

Development of fixed-time artificial insemination protocols for locally adapted Curraleiro Pé-Duro cows / Desenvolvimento de protocolos de inseminação artificial em tempo fixo em vacas da raça localmente adaptada Curraleiro Pé-Duro

Two experiments were conducted aiming to evaluate the effects of two ovulatory inducers (Exp.1) and equine chorionic gonadotropin (eCG; Exp.2) on follicular and luteal dynamics in a fixed-time AI (FTAI) protocol in locally adapted Curraleiro Pé-Duro cows. In Exp. 1 multiparous cows (n=12) received an intravaginal device containing 1g of progesterone (P4) for 8 days and 2mg of estradiol benzoate (EB) intramuscularly (IM) at device insertion (Day 0). At device removal (Day 8) 0.150mg of Sodium D-Cloprostenol was administered IM and the cows were randomly assigned to receive 1mg of EB (EB8) or 1mg of estradiol cypionate (EC8) IM, or to not receive any ovulatory inducer (Control). All the animals participated in all treatments (crossover). The interval from P4 removal to ovulation was shorter and less variable in the EB8 treatment group (P≤0.05). In Exp. 2 (crossover), multiparous cows (n=12) received the same hormonal treatment as the EB8 group in Exp.1. At device removal (Day 8) cows were randomly assigned to receive 300UI of eCG IM or to not receive eCG (Control). No difference was ascertained on follicular and luteal parameters in Exp. 2 (P>0.05). We concluded that EB can be used as the ovulatory inducer (Exp. 1) in a FTAI protocol in Curraleiro Pé-Duro cows. However, eCG (Exp. 2) was not able to stimulate follicular and luteal development. This result is probably due to the adaptive capacity of Curraleiro Pé-Duro cows that maintained a satisfactory body condition score even in dry and hot environments.(AU)

Foram realizados dois experimentos com o objetivo de avaliar o efeito de dois indutores da ovulação e da gonadotrofina coriônica equina (eCG) na dinâmica folicular e luteal, em um protocolo de inseminação artificial em tempo fixo (IATF) em vacas localmente adaptadas da raça Curraleiro Pé-Duro. No experimento 1, vacas pluríparas receberam um dispositivo intravaginal contendo 1g de progesterona (P4) durante oito dias e 2mg de benzoato de estradiol (BE) intramuscular (IM) no momento da inserção do dispositivo (dia zero). Na retirada do dispositivo (dia oito), as vacas receberam 0,150mg de D-cloprostenol sódico IM e foram separadas aleatoriamente para receber 1mg de BE IM (BE8) ou 1mg de cipionato de estradiol IM (CE8), ou nenhum indutor da ovulação (controle). Todos os animais participaram de todos os tratamentos (crossover). O intervalo entre a retirada da P4 e a ovulação foi menor e menos variável no tratamento BE8 (P≤0,05). O momento da ovulação foi mais precoce e mais concentrado nos animais do grupo BE 8. No experimento 2 (crossover), vacas pluríparas receberam o mesmo tratamento hormonal do grupo BE8 do experimento1. Na retirada do dispositivo (dia 8), as vacas foram separadas aleatoriamente para receberem 300UI de eCG IM, enquanto o controle não. Não houve diferença nos parâmetros foliculares e luteais avaliados no experimento 2 (P>0,05). Em conclusão, o BE pode ser utilizado como indutor da ovulação (experimento 1) em protocolos de IATF em vacas Curraleiras Pé-Duro. Entretanto, o eCG (experimento 2) não foi capaz de estimular o desenvolvimento folicular e luteal. Esse resultado é devido provavelmente à capacidade adaptativa das vacas Curraleiras Pé-Duro em manter uma condição corporal satisfatória mesmo em condições de clima seco e quente.(AU)

Perfil bioquímico sérico de equinos clinicamente sadios da raça Campeiro / Serum biochemical profile from clinically healthy Campeiro horses

Amostras de sangue foram obtidas de 138 equinos registrados da raça Campeiro, com idade média de 9,7±5,4 anos, sendo 14 machos (10,15%) e 124 fêmeas (89,85%). Observaram-se valores médios da atividade sérica de GGT: 13,73±4,08 U/L; AST: 246,34±72,87U/L; ALT: 5,13±1,18U/L; FA: 284,32±53,33UI/L; CK: 132,54±72,25U/L; LDH: 511,38±143,65U/L; e das concentrações séricas de ureia: 38,65±12,62mg/dL e de creatinina: 1,24±0,24mg/dL. Os valores médios de AST, FA, ALT, ureia e creatinina foram semelhantes aos propostos na literatura para outras raças. Os valores de CK, GGT e LDH foram superiores aos comumente utilizados como referências. Não houve diferença nas concentrações de nenhum dos componentes séricos avaliados nas diferentes idades analisadas. Maiores valores médios nas concentrações de ureia e menores de creatinina foram observados nas fêmeas em relação aos machos, assim como a maior atividade sérica de FA em fêmeas gestantes em relação às éguas vazias. O perfil bioquímico sérico de equinos sadios da raça Campeiro apresenta variações peculiares que devem ser levadas em consideração na interpretação de exames laboratoriais.(AU)

Blood samples were obtained from 138 equines of the Campeiro breed with mean ages of 9.7±5.4 years, including 14 males (10.15%) and 124 mares (89.85%). Mean values of serum of GGT: 13.73 ± 4.08U/L; AST: 246.34±72.87U/L; ALT 5.13±1.18U/L; FA: 284.32±53.33IU/L; CK: 132.54±72.25U/L; LDH: 511.38±143.65U/L; and serum urea: 38.65±12.62mg/dL and creatinine: 1.24±0.24mg/dL were observed. The mean values of AST, FA, ALT, urea and creatinine were similar to those proposed in the literature for other breeds. The CK values, GGT, and LDH were higher than those commonly used as references. There was no difference in the concentrations of any of the serum components evaluated at different ages analyzed. Further average values in the lower urea concentrations and creatinine were observed in females compared to males, as well as the higher serum activity of FA in pregnant mares in relation to non-pregnant. Serum biochemical profile of healthy horses of the Campeiro breed presents peculiar variations that must be taken into consideration in the interpretation of laboratory tests.(AU)

Produção de embriões em ovinos Morada Nova e Somalis Brasileira / Embryo production in Morada Nova and Somalis Brasileira ewes

Superovulatory response and embryo yield in 19 Morada Nova and 20 Somalis Brasileira ewes was analyzed. All animals were synchronized with the insertion of an intravaginal device (CIDR®) on Day 0, replaced by a new device on Day 7, which remained in place until Day 14 and superovulated with 133mg of porcine FSH (pFSH) in decreasing doses at 12h intervals from Day 12 until Day 15 of the treatment, and a single dose of equine chorionic gonadotropin (eCG, 200UI) on Day 14 (i.e., administered in CIDR removal). Fifty hours after CIDR® removal, females were inseminated by laparoscopy. All embryos were recovered by laparotomy 5 days after insemination. Sheep which responded to the superovulation protocol (P>0.05) included 74% of the Morada Nova ewes and 50% of the Somalis Brasileira ewes. Morada Nova showed better results (P<0.05) than Somalis Brasileira in number of ovulations (15.38 ± 5.24 vs. 10.56 ± 2.83), total structures (11.00 ± 7.55 vs. 3.33 ± 1.94) and embryo yields (6.79 ± 5.35 vs. 2.90 ± 2.18). Despite the high fertilization rate, degenerate embryo rate was high for both breeds, with an overall rate of 39% (57/145). In conclusion, superovulatory response and embryo yields in Morada Nova ewes were considered sufficient to justify the use of this procedure in genetic resources conservation programs. However, improvements to embryo quality and control of precocious regression of corpus luteum are necessary to produce better results in the MOET program, with minimal variations and maximum embryo yield in Morada Nova and Somalis Brasileira ewes.(AU)

Produção de embriões em ovinos Morada Nova e Somalis Brasileira / Embryo production in Morada Nova and Somalis Brasileira ewes

Superovulatory response and embryo yield in 19 Morada Nova and 20 Somalis Brasileira ewes was analyzed. All animals were synchronized with the insertion of an intravaginal device (CIDR®) on Day 0, replaced by a new device on Day 7, which remained in place until Day 14 and superovulated with 133mg of porcine FSH (pFSH) in decreasing doses at 12h intervals from Day 12 until Day 15 of the treatment, and a single dose of equine chorionic gonadotropin (eCG, 200UI) on Day 14 (i.e., administered in CIDR removal). Fifty hours after CIDR® removal, females were inseminated by laparoscopy. All embryos were recovered by laparotomy 5 days after insemination. Sheep which responded to the superovulation protocol (P>0.05) included 74% of the Morada Nova ewes and 50% of the Somalis Brasileira ewes. Morada Nova showed better results (P<0.05) than Somalis Brasileira in number of ovulations (15.38 ± 5.24 vs. 10.56 ± 2.83), total structures (11.00 ± 7.55 vs. 3.33 ± 1.94) and embryo yields (6.79 ± 5.35 vs. 2.90 ± 2.18). Despite the high fertilization rate, degenerate embryo rate was high for both breeds, with an overall rate of 39% (57/145). In conclusion, superovulatory response and embryo yields in Morada Nova ewes were considered sufficient to justify the use of this procedure in genetic resources conservation programs. However, improvements to embryo quality and control of precocious regression of corpus luteum are necessary to produce better results in the MOET program, with minimal variations and maximum embryo yield in Morada Nova and Somalis Brasileira ewes.(AU)

Perfil bioquímico sérico de equinos clinicamente sadios da raça Campeiro / Serum biochemical profile from clinically healthy Campeiro horses

Blood samples were obtained from 138 equines of the Campeiro breed with mean ages of 9.7±5.4 years, including 14 males (10.15%) and 124 mares (89.85%). Mean values of serum of GGT: 13.73 ± 4.08U/L; AST: 246.34±72.87U/L; ALT 5.13±1.18U/L; FA: 284.32±53.33IU/L; CK: 132.54±72.25U/L; LDH: 511.38±143.65U/L; and serum urea: 38.65±12.62mg/dL and creatinine: 1.24±0.24mg/dL were observed. The mean values of AST, FA, ALT, urea and creatinine were similar to those proposed in the literature for other breeds. The CK values, GGT, and LDH were higher than those commonly used as references. There was no difference in the concentrations of any of the serum components evaluated at different ages analyzed. Further average values in the lower urea concentrations and creatinine were observed in females compared to males, as well as the higher serum activity of FA in pregnant mares in relation to non-pregnant. Serum biochemical profile of healthy horses of the Campeiro breed presents peculiar variations that must be taken into consideration in the interpretation of laboratory tests.(AU)

Amostras de sangue foram obtidas de 138 equinos registrados da raça Campeiro, com idade média de 9,7±5,4 anos, sendo 14 machos (10,15%) e 124 fêmeas (89,85%). Observaram-se valores médios da atividade sérica de GGT: 13,73±4,08 U/L; AST: 246,34±72,87U/L; ALT: 5,13±1,18U/L; FA: 284,32±53,33UI/L; CK: 132,54±72,25U/L; LDH: 511,38±143,65U/L; e das concentrações séricas de ureia: 38,65±12,62mg/dL e de creatinina: 1,24±0,24mg/dL. Os valores médios de AST, FA, ALT, ureia e creatinina foram semelhantes aos propostos na literatura para outras raças. Os valores de CK, GGT e LDH foram superiores aos comumente utilizados como referências. Não houve diferença nas concentrações de nenhum dos componentes séricos avaliados nas diferentes idades analisadas. Maiores valores médios nas concentrações de ureia e menores de creatinina foram observados nas fêmeas em relação aos machos, assim como a maior atividade sérica de FA em fêmeas gestantes em relação às éguas vazias. O perfil bioquímico sérico de equinos sadios da raça Campeiro apresenta variações peculiares que devem ser levadas em consideração na interpretação de exames laboratoriais.(AU)

Behavioral characteristics of calving in Curraleiro Pé-duro cows

Studies were conducted to characterize the labor behavior in Curraleiro Pé-duro cows, a Locally adapted breed found in the semiarid region of Brazil, which is considered rustic and fertile. Eleven Curraleiro Pé-duro cows were kept in pasture and were Observed every 4 h to assess the beginning of birth, and subsequently were constantly monitored until the complete expulsion of the placenta, accordingly to the three different stages of labor. The cows were evaluated according to the following events: staring into the flank (SIF); licking vulva and lifting the tail (LVUT); head-Butts to the flank (HF); dripping colostrum (DC); lying down and standing (restlessness; LDS); duration of the first phase (Dur1P); amount of initial contractions (IC); time to onset of appearing of feet (TOAF); duration of calving (DC) and duration time from end of calving til l the expulsion of the placenta (DurExpP). The results are presented as mean ± standard deviation: SIF (4.00 ± 2.37); LVUT (2.38 ± 1.06); HF (1.80 ± 0.45); DC (1.20 ± 0.45); LDS (2.56 ± 1.33);IC (6.00 ± 2.9); Dur1F (71 ± 40 min); TOAF (7± 8 min); DC (25 ± 24 min); and DurExpP (228 ± 76 min). These results allow us to characterize the events that precede and accompany the moment of labor in Curraleiro Pé-duro cows.(AU)

Ovulation induction in ewes using GnRH in long and short-term synchronization protocols

This study was done to evaluate the efficiency of GnRH along with long-term and short-term synchronization protocols on ovulation induction and corpus luteum development. Ewes underwent four protocols: Long+GnRH (n = 11) with vaginal sponge (60 mg MAP) for 12 days along with 300 IU of eCG on day 12 and 0.025 mg of GnRH 27 h after sponge removal; Long (n = 10) with vaginal sponge for 12 days along with 300 IU of eCG on day 12; Short GnRH (n = 10) with vaginal sponge for 7 days along with 37.5 μg of D-cloprostenol on day 5 and 300 IU of eCG on day 7, plus 0.025 mg of GnRH used 27 h after sponge removal; and Short (n = 10) with vaginal sponge for 7 days. D-cloprostenol (37.5 μg) was administered on day 5 and eCG (300 IU) was administered on day 7.Ovulation was evaluated 52, 56, 60, 66, 72, 76 h after sponge removal. Blood was collected twelve days after sponge removal to measure progesterone concentration. On this same day, the corpus luteum was measure and counted. When GnRH was used, all ewes ovulated, while 70 and 80% of ewes ovulated in protocols that had not received GnRH (Long and Short, respectively). The GnRH accelerated ovulation (P< 0.05) in relation to sponge removal in both protocols and induced ovulation in approximately 28 h. The GnRH Was effective in inducing ovulation without decreasing the corpus luteum volume and progesterone concentration.

Behavioral characteristics of calving in Curraleiro Pé-duro cows

Studies were conducted to characterize the labor behavior in Curraleiro Pé-duro cows, a Locally adapted breed found in the semiarid region of Brazil, which is considered rustic and fertile. Eleven Curraleiro Pé-duro cows were kept in pasture and were Observed every 4 h to assess the beginning of birth, and subsequently were constantly monitored until the complete expulsion of the placenta, accordingly to the three different stages of labor. The cows were evaluated according to the following events: staring into the flank (SIF); licking vulva and lifting the tail (LVUT); head-Butts to the flank (HF); dripping colostrum (DC); lying down and standing (restlessness; LDS); duration of the first phase (Dur1P); amount of initial contractions (IC); time to onset of appearing of feet (TOAF); duration of calving (DC) and duration time from end of calving til l the expulsion of the placenta (DurExpP). The results are presented as mean ± standard deviation: SIF (4.00 ± 2.37); LVUT (2.38 ± 1.06); HF (1.80 ± 0.45); DC (1.20 ± 0.45); LDS (2.56 ± 1.33);IC (6.00 ± 2.9); Dur1F (71 ± 40 min); TOAF (7± 8 min); DC (25 ± 24 min); and DurExpP (228 ± 76 min). These results allow us to characterize the events that precede and accompany the moment of labor in Curraleiro Pé-duro cows.

Ovulation induction in ewes using GnRH in long and short-term synchronization protocols

This study was done to evaluate the efficiency of GnRH along with long-term and short-term synchronization protocols on ovulation induction and corpus luteum development. Ewes underwent four protocols: Long+GnRH (n = 11) with vaginal sponge (60 mg MAP) for 12 days along with 300 IU of eCG on day 12 and 0.025 mg of GnRH 27 h after sponge removal; Long (n = 10) with vaginal sponge for 12 days along with 300 IU of eCG on day 12; Short GnRH (n = 10) with vaginal sponge for 7 days along with 37.5 μg of D-cloprostenol on day 5 and 300 IU of eCG on day 7, plus 0.025 mg of GnRH used 27 h after sponge removal; and Short (n = 10) with vaginal sponge for 7 days. D-cloprostenol (37.5 μg) was administered on day 5 and eCG (300 IU) was administered on day 7.Ovulation was evaluated 52, 56, 60, 66, 72, 76 h after sponge removal. Blood was collected twelve days after sponge removal to measure progesterone concentration. On this same day, the corpus luteum was measure and counted. When GnRH was used, all ewes ovulated, while 70 and 80% of ewes ovulated in protocols that had not received GnRH (Long and Short, respectively). The GnRH accelerated ovulation (P< 0.05) in relation to sponge removal in both protocols and induced ovulation in approximately 28 h. The GnRH Was effective in inducing ovulation without decreasing the corpus luteum volume and progesterone concentration.(AU)

Situação atual da superovulação em ovinos / Current status of superovulation in ewes

Esta revisão apresenta uma visão geral e crítica da base técnica dos procedimentos de superovulação,expondo as limitações e os últimos avanços dessa tecnologia na produção de embriões ovinos. Entre osresponsáveis pelas limitações dos protocolos comumente empregados, destacam-se a variabilidade no grau depurificação das gonadotrofinas derivadas da hipófise, a falta de controle da dinâmica folicular, as falhas noprocesso de fertilização e o elevado índice de regressão prematura do corpo lúteo. Algumas abordagens foramempregadas visando ao controle desses limitantes e obteve-se aceitável resposta superovulatória, como: autilização de gonadotrofinas recombinantes; a superestimulação no dia, ou em até 24 h, da emergência de umaonda folicular; a administração de GnRH e seus agonistas, como indutores de ovulação, principalmente quandofor realizada inseminação artificial com sêmen congelado; e a aplicação de hCG, GnRH ou inibidores daprostaglandina F2α após a ocorrência das ovulações múltiplas. Essas abordagens resultaram em melhoriasrelevantes nos programas de MOTE em ovinos.(AU)

The present paper reviews an overview and critique of the technical basis of the procedures forsuperovulation, exposing the limitations and recent advances in this technology in production of sheep embryos.Among those responsible for the limitations of commonly used protocols, those that stand out are the variability inthe degree of purification of pituitary gonadotropins, the lack of control of follicular dynamics, failures in thefertilization process and the high rate of premature regression of the corpus luteum. Some approaches have beenemployed for the control of these impediments, enhancing superovulatory response, such as the use of recombinantgonadotropins; superstimulation on the day or within 24 h of emergence of a follicular wave; and the administrationof GnRH agonists to induce ovulation, especially when artificial insemination is carried out with frozen semen; andthe administration of hCG, GnRH or prostaglandin F2α inhibitors after the occurrence of multiple ovulations.These approaches have resulted in significant improvements to MOET programs in sheep.(AU)

Situação atual da superovulação em ovinos / Current status of superovulation in ewes

Esta revisão apresenta uma visão geral e crítica da base técnica dos procedimentos de superovulação,expondo as limitações e os últimos avanços dessa tecnologia na produção de embriões ovinos. Entre osresponsáveis pelas limitações dos protocolos comumente empregados, destacam-se a variabilidade no grau depurificação das gonadotrofinas derivadas da hipófise, a falta de controle da dinâmica folicular, as falhas noprocesso de fertilização e o elevado índice de regressão prematura do corpo lúteo. Algumas abordagens foramempregadas visando ao controle desses limitantes e obteve-se aceitável resposta superovulatória, como: autilização de gonadotrofinas recombinantes; a superestimulação no dia, ou em até 24 h, da emergência de umaonda folicular; a administração de GnRH e seus agonistas, como indutores de ovulação, principalmente quandofor realizada inseminação artificial com sêmen congelado; e a aplicação de hCG, GnRH ou inibidores daprostaglandina F2α após a ocorrência das ovulações múltiplas. Essas abordagens resultaram em melhoriasrelevantes nos programas de MOTE em ovinos.

The present paper reviews an overview and critique of the technical basis of the procedures forsuperovulation, exposing the limitations and recent advances in this technology in production of sheep embryos.Among those responsible for the limitations of commonly used protocols, those that stand out are the variability inthe degree of purification of pituitary gonadotropins, the lack of control of follicular dynamics, failures in thefertilization process and the high rate of premature regression of the corpus luteum. Some approaches have beenemployed for the control of these impediments, enhancing superovulatory response, such as the use of recombinantgonadotropins; superstimulation on the day or within 24 h of emergence of a follicular wave; and the administrationof GnRH agonists to induce ovulation, especially when artificial insemination is carried out with frozen semen; andthe administration of hCG, GnRH or prostaglandin F2α inhibitors after the occurrence of multiple ovulations.These approaches have resulted in significant improvements to MOET programs in sheep.

Sexagem fetal em equinos / Fetal sexing in equines

O crescimento exponencial da equinocultura nacional implica a necessidade da utilização de biotécnicasda reprodução, com o objetivo de aumentar a produção e facilitar o manejo nos criatórios. Uma dessasferramentas é a sexagem fetal, que pode ser realizada em diversas fases da gestação, por meio da identificaçãodo tubérculo genital ou da gônada fetal (mais utilizados) e recentemente pelo DNA fetal livre circulante,constituindo ainda um recurso pouco utilizado na rotina dos haras. Objetivou-se nesta revisão descrever asprincipais técnicas de sexagem fetal em éguas.(AU)

The exponential growth of the national equine breeding implies the need to use reproduction biotechniques in order to increase production and facilitate management on stud farms. One of these is fetal sexing,which can be performed at different stages of pregnancy by identifying genital tubercle, fetal gonad and morerecently circulating free-cell fetal DNA, which is still scarcely used in routine stud farms. The aim of this reviewis to describe the main techniques for fetal sexing in mares.(AU)