Serum protein profile as a biomarker in diagnosing leishmaniosis and monocytic ehrlichiosis in dogs / Perfil sérico de proteínas como biomarcador nos diagnósticos da leishmaniose e da erliquiose monocítica em cães

Diagnosing Canine Visceral Leishmaniosis is challenging for veterinarians given that its hematological and biochemical abnormalities greatly resemble those of other illnesses of dogs, such as canine ehrlichiosis, which is caused by Ehrlichia canis and is highly prevalent with high pathogenicity. The aim of this study was to determine occurrences of serological positivity for the antigens of Ehrlichia canis and Leishmania infantum and its relationship to globulin concentrations in samples from dogs. Out of 93 samples tested, 12.9% were negative for the antigens of both L. infantum and E. canis; 33.3% were seropositive for both antigens. Discordant results were found from 18.3% that were positive only for L. infantum, while 35.5% were positive only for E. canis. Hyperglobulinemia was observed in 88.2% and the statistical analysis showed that there was a significant relationship between the high levels of globulins and seropositivity for the antigen of E. canis. However, the relationship between positivity for the antigen of L. infantum and hyperglobulinemia, showed that there was no statistically significant relationship between the two laboratory findings. From these results, it can be concluded that concomitant infections occur frequently and that hyperglobulinemia is more closely related to ehrlichiosis than to leishmaniosis, in dogs.

O diagnóstico da leishmaniose canina é um desafio ao Médico Veterinário visto que anormalidades hematológicas e bioquímicas muito se assemelham à outras enfermidades dos cães, como a erliquiose canina, causada pela Ehrlichia canis, muito prevalente e de alta patogenicidade. O objetivo deste estudo foi determinar a positividade sorológica frente aos antígenos de Ehrlichia canis e Leishmania infantum e a sua relação com as concentrações de globulinas em amostras de cães. Das 93 amostras testadas, 12,9% foram negativas frente aos antígenos de E. canis e L. infantum e 33% foram soropositivas. Resultados discordantes foram encontradas em 18,3% positivas apenas para L. infantum, enquanto que 35,5% reagiram apenas frente a E. canis. Hiperglobulinemia foi observada em 88,2% das amostras e a análise estatística mostrou haver relação significante entre a soropositividade frente aos antígenos de E. canis e a hiperglobulinemia, e em contrapartida, a relação entre esse aumento de globulinas e a positividade para L. infantum foi insignificante. Pelos resultados apresentados, pode-se concluir que as infecções concomitantes são frequentes e que a hiperglobulinemia está mais intimamente relacionada a erliquiose quando comparada à leishmaniose em cães.

Serum protein profile as a biomarker in diagnosing leishmaniosis and monocytic ehrlichiosis in dogs / Perfil sérico de proteínas como biomarcador nos diagnósticos da leishmaniose e da erliquiose monocítica em cães

Diagnosing Canine Visceral Leishmaniosis is challenging for veterinarians given that its hematological and biochemical abnormalities greatly resemble those of other illnesses of dogs, such as canine ehrlichiosis, which is caused by Ehrlichia canis and is highly prevalent with high pathogenicity. The aim of this study was to determine occurrences of serological positivity for the antigens of Ehrlichia canis and Leishmania infantum and its relationship to globulin concentrations in samples from dogs. Out of 93 samples tested, 12.9% were negative for the antigens of both L. infantum and E. canis; 33.3% were seropositive for both antigens. Discordant results were found from 18.3% that were positive only for L. infantum, while 35.5% were positive only for E. canis. Hyperglobulinemia was observed in 88.2% and the statistical analysis showed that there was a significant relationship between the high levels of globulins and seropositivity for the antigen of E. canis. However, the relationship between positivity for the antigen of L. infantum and hyperglobulinemia, showed that there was no statistically significant relationship between the two laboratory findings. From these results, it can be concluded that concomitant infections occur frequently and that hyperglobulinemia is more closely related to ehrlichiosis than to leishmaniosis, in dogs.(AU)

O diagnóstico da leishmaniose canina é um desafio ao Médico Veterinário visto que anormalidades hematológicas e bioquímicas muito se assemelham à outras enfermidades dos cães, como a erliquiose canina, causada pela Ehrlichia canis, muito prevalente e de alta patogenicidade. O objetivo deste estudo foi determinar a positividade sorológica frente aos antígenos de Ehrlichia canis e Leishmania infantum e a sua relação com as concentrações de globulinas em amostras de cães. Das 93 amostras testadas, 12,9% foram negativas frente aos antígenos de E. canis e L. infantum e 33% foram soropositivas. Resultados discordantes foram encontradas em 18,3% positivas apenas para L. infantum, enquanto que 35,5% reagiram apenas frente a E. canis. Hiperglobulinemia foi observada em 88,2% das amostras e a análise estatística mostrou haver relação significante entre a soropositividade frente aos antígenos de E. canis e a hiperglobulinemia, e em contrapartida, a relação entre esse aumento de globulinas e a positividade para L. infantum foi insignificante. Pelos resultados apresentados, pode-se concluir que as infecções concomitantes são frequentes e que a hiperglobulinemia está mais intimamente relacionada a erliquiose quando comparada à leishmaniose em cães.(AU)

Avaliação comparativa in vitro da sensibilidade de Rhipicephalus (boophilus) microplus a acaricidas comercializados no município de Rolim de Moura, Rondônia, Brasil / Comparative in vitro assessment of the sensitivity of Rhipicephalus (boophilus) microplus to acaricides commercialized in Rolim de Moura, Rondônia, Brazil

Objetivou-se avaliar in vitro a sensibilidade de Rhipicephalus (Boophilus) microplus aos acaricidas comercializados no município de Rolim de Moura, Rondônia, Brasil. Foram coletadas 400 partenóginas de R. (B.) microplus de bovinos naturalmente infestados, pertencentes a duas propriedades rurais. As partenóginas foram separadas em sete grupos homogêneos de 10 indivíduos cada, para análise dos perfis de sensibilidade ao diclorvós 45% + cipermetrina 5%, cipermetrina 15%, cipermetrina 20%, amitraz 12,5%, deltametrina 2,5% e fipronil 1% e o grupo controle. Foram adotados o Teste de Imersão de Adultos (TIA) e o Teste de Imersão de Larvas (TIL). Para cada grupo de 10 partenóginas foi determinado, o índice de produção de ovos, a eficiência reprodutiva e a eficiência do produto. Na propriedade 1 o produto com ação mais rápida sobre as partenóginas foi o fipronil 1%, que matou 70% (7/10) delas em menos de três dias, tendo também inibido a postura dos ovos nas sobreviventes. Enquanto na propriedade 2, a mortalidade das partenóginas só iniciaram a partir do terceiro dia com o uso do amitraz 12,5%, com 50% (5/10) de morte no vigésimo dia, porém nas partenóginas sobreviventes não houve inibição de postura. Na propriedade 1 a cipermetrina 20% e o amitraz 12,5%, inibiram 100% da eclosão dos ovos e a associação de diclorvós 45% + cipermetrina 5% obteve 98% de eficiência de produto. No entanto, na propriedade 2 não houve inibição de eclosão em nenhum grupo teste e a eficiência do produto, de 44,49% com amitraz 12,5% foi o maior, não se mostrando, mesmo assim, eficiente, dentro das normas vigentes. Quanto ao TIL, na propriedade 1, diclorvós 45% + cipermetrina 5% matou 100% das larvas e na propriedade 2 esse resultado foi observado com o fipronil 1%. Esses primeiros resultados reforçam a necessidade de controle estratégico do carrapato e o uso constante de bioensaios - testes laboratoriais de eficácia de acaricida, antes da prescrição, sobretudo no ambiente amazônico.

The objective of this study was to evaluate in vitro the sensitivity of Rhipicephalus (Boophilus) microplus to acaricides sold in the municipality of Rolim de Moura, Rondônia, Brazil. The 400 R. (B.) microplus female ticks were collected from naturally infested cattle, belonging to two rural properties. The ticks were separated into seven homogeneous groups of 10 individuals each, to analyze the sensitivity profiles to dichlorvós 45% + cypermethrin 5%, cypermethrin 15%, cypermethrin 20%, amitraz 12.5%, deltamethrin 2.5% and fipronil 1 % and the control group. The Adult Immersion Test (AIT) and the Larvae Immersion Test (LIT) were adopted. For each group of 10 ticks, the egg production index, reproductive efficiency and product efficiency were determined. At property 1, the product with the fastest action on ticks was fipronil 1%, which killed 70% (7/10) of them in less than three days, and also inhibited the laying of eggs on survivors. While on property 2, the mortality of the ticks only started from the third day with the use of amitraz 12.5%, with 50% (5/10) of death on the twentieth day, however, in the surviving ticks, there was no posture inhibition. In property 1, cypermethrin 20% and amitraz 12.5% inhibited 100% of the eggs hatching and the association of dichlorvós 45% + cypermethrin 5% obtained 98% product efficiency. However, in property 2 there was no hatching inhibition in any test group and the product's efficiency, of 44.49% with amitraz 12.5%, was the highest, not even being efficient, within the current rules. As for LIT, in property 1, dichlorvós 45% + cypermethrin 5% killed 100% of the larvae and in property 2 this result was observed with fipronil 1%. These first results reinforce the need for strategic control of the tick and the constant use of bioassays - laboratory tests for the effectiveness of acaricide, before prescription, especially in the Amazonian environment.

Avaliação comparativa in vitro da sensibilidade de Rhipicephalus (boophilus) microplus a acaricidas comercializados no município de Rolim de Moura, Rondônia, Brasil / Comparative in vitro assessment of the sensitivity of Rhipicephalus (boophilus) microplus to acaricides commercialized in Rolim de Moura, Rondônia, Brazil

Objetivou-se avaliar in vitro a sensibilidade de Rhipicephalus (Boophilus) microplus aos acaricidas comercializados no município de Rolim de Moura, Rondônia, Brasil. Foram coletadas 400 partenóginas de R. (B.) microplus de bovinos naturalmente infestados, pertencentes a duas propriedades rurais. As partenóginas foram separadas em sete grupos homogêneos de 10 indivíduos cada, para análise dos perfis de sensibilidade ao diclorvós 45% + cipermetrina 5%, cipermetrina 15%, cipermetrina 20%, amitraz 12,5%, deltametrina 2,5% e fipronil 1% e o grupo controle. Foram adotados o Teste de Imersão de Adultos (TIA) e o Teste de Imersão de Larvas (TIL). Para cada grupo de 10 partenóginas foi determinado, o índice de produção de ovos, a eficiência reprodutiva e a eficiência do produto. Na propriedade 1 o produto com ação mais rápida sobre as partenóginas foi o fipronil 1%, que matou 70% (7/10) delas em menos de três dias, tendo também inibido a postura dos ovos nas sobreviventes. Enquanto na propriedade 2, a mortalidade das partenóginas só iniciaram a partir do terceiro dia com o uso do amitraz 12,5%, com 50% (5/10) de morte no vigésimo dia, porém nas partenóginas sobreviventes não houve inibição de postura. Na propriedade 1 a cipermetrina 20% e o amitraz 12,5%, inibiram 100% da eclosão dos ovos e a associação de diclorvós 45% + cipermetrina 5% obteve 98% de eficiência de produto. No entanto, na propriedade 2 não houve inibição de eclosão em nenhum grupo teste e a eficiência do produto, de 44,49% com amitraz 12,5% foi o maior, não se mostrando, mesmo assim, eficiente, dentro das normas vigentes. Quanto ao TIL, na propriedade 1, diclorvós 45% + cipermetrina 5% matou 100% das larvas e na propriedade 2 esse resultado foi observado com o fipronil 1%. Esses primeiros resultados reforçam a necessidade de controle estratégico do carrapato e o uso constante de bioensaios - testes laboratoriais de eficácia de acaricida, antes da prescrição, sobretudo no ambiente amazônico.(AU)

The objective of this study was to evaluate in vitro the sensitivity of Rhipicephalus (Boophilus) microplus to acaricides sold in the municipality of Rolim de Moura, Rondônia, Brazil. The 400 R. (B.) microplus female ticks were collected from naturally infested cattle, belonging to two rural properties. The ticks were separated into seven homogeneous groups of 10 individuals each, to analyze the sensitivity profiles to dichlorvós 45% + cypermethrin 5%, cypermethrin 15%, cypermethrin 20%, amitraz 12.5%, deltamethrin 2.5% and fipronil 1 % and the control group. The Adult Immersion Test (AIT) and the Larvae Immersion Test (LIT) were adopted. For each group of 10 ticks, the egg production index, reproductive efficiency and product efficiency were determined. At property 1, the product with the fastest action on ticks was fipronil 1%, which killed 70% (7/10) of them in less than three days, and also inhibited the laying of eggs on survivors. While on property 2, the mortality of the ticks only started from the third day with the use of amitraz 12.5%, with 50% (5/10) of death on the twentieth day, however, in the surviving ticks, there was no posture inhibition. In property 1, cypermethrin 20% and amitraz 12.5% inhibited 100% of the eggs hatching and the association of dichlorvós 45% + cypermethrin 5% obtained 98% product efficiency. However, in property 2 there was no hatching inhibition in any test group and the product's efficiency, of 44.49% with amitraz 12.5%, was the highest, not even being efficient, within the current rules. As for LIT, in property 1, dichlorvós 45% + cypermethrin 5% killed 100% of the larvae and in property 2 this result was observed with fipronil 1%. These first results reinforce the need for strategic control of the tick and the constant use of bioassays - laboratory tests for the effectiveness of acaricide, before prescription, especially in the Amazonian environment.(AU)

In vivo phagocytosis and hematology in Astyanax altiparanae, a potential model for surrogate technology

Although the potential of surrogate propagation technology for aquaculture and conservation of Neotropical fish, the poor understanding of the host immune system may results in rejection and destruction of the donor material. Thus, it is necessary to study and to develop methods to evaluate the effects of immunosuppressive drugs employment and to evaluate the immunocompatibility between donor and receptor. Thus, the present study aimed to optimize a methodology to assess in vivo phagocytosis in Astyanax altiparanae using Saccharomyces cerevisiae and to evaluate their hematological response resultant from the inflammatory induction. To this, S. cerevisiae were labeled with Congo red and injected in the coelomic cavity of A. altiparanae at the concentration of 2.5 x 106 cells mL-1. A PBS solution and a non-injected group were kept as control. Fish blood was sampled and the phagocytic capacity and index were determined at 1, 2, 3 and 6 h post-injection (hpi). The yeast injection successfully stimulated phagocytosis, with the best result for phagocytosis assessment after 2 hpi. Moreover, it was achieved a high traceability of phagocytized and non-phagocytized yeast under optic microscopy analysis due to the Congo red labeling. The hematological profile was similar to usually observed in early infections, indicating lymphocyte migration to inflammatory site and increase in number of circulating phagocytes due to natural response to inflammatory stimulus. In conclusion, our method was efficient to assess in vivo phagocytosis in A. altiparanae and will be an important tool to evaluate the efficacy of immunosuppressive drugs in this species. Additionally, these results may serve as support for further studies in fish immunocompetence, both in laboratory and in field conditions.(AU)

Apesar do potencial apresentado pela tecnologia de propagação mediada para a aquicultura e conservação de peixes Neotropicais, o pobre entendimento do sistema imune do hospedeiro pode resultar na rejeição e destruição do material do doador. Com isso, se fazem necessários o estudo e o desenvolvimento de métodos para análise tanto dos efeitos de drogas imunossupressoras quanto para a avaliação da imunocompatibilidade entre doadores e receptores. Logo, o presente estudo teve como objetivo aperfeiçoar um método para analisar a fagocitose in vivo em Astyanax altiparanae usando Saccharomyces cerevisiae marcado e avaliar seu perfil hematológico resultante da indução inflamatória. Para isso, S. cerevisiae foram marcados com vermelho Congo e injetados na cavidade celomática dos A. altiparanae na concentração de 2,5 x 106 células.mL-1. Peixes injetados com PBS e peixes não injetados foram mantidos como controle. Sangue foi colhido e a capacidade fagocítica e o índice fagocítico foram determinados após 1, 2, 3 e 6 horas após à injeção (hpi). A injeção de levedura estimulou a fagocitose com sucesso, com o melhor resultado atingido após 2 hpi. Ainda, foi observada uma alta rastreabilidade das leveduras fagocitadas e não fagocitadas sob microscopia óptica devido à marcação com vermelho Congo. O perfil hematológico foi similar ao observado usualmente em infecções recém-induzidas, indicando migração de linfócitos ao sítio inflamatório e aumento no número de fagócitos circulantes devido à resposta natural ao estímulo inflamatório. Como conclusão, nosso método foi eficiente para analisar a fagocitose in vivo em A. altiparanae e será uma ferramenta importante para a avaliação de eficácia de drogas imunossopressoras para esta espécie. Em adição, estes resultados podem contribuir para futuros estudos em imunocompetência em peixes, tanto em âmbito laboratorial quanto a campo.(AU)

In vivo phagocytosis and hematology in Astyanax altiparanae, a potential model for surrogate technology

Abstract Although the potential of surrogate propagation technology for aquaculture and conservation of Neotropical fish, the poor understanding of the host immune system may results in rejection and destruction of the donor material. Thus, it is necessary to study and to develop methods to evaluate the effects of immunosuppressive drugs employment and to evaluate the immunocompatibility between donor and receptor. Thus, the present study aimed to optimize a methodology to assess in vivo phagocytosis in Astyanax altiparanae using Saccharomyces cerevisiae and to evaluate their hematological response resultant from the inflammatory induction. To this, S. cerevisiae were labeled with Congo red and injected in the coelomic cavity of A. altiparanae at the concentration of 2.5 x 106 cells mL-1. A PBS solution and a non-injected group were kept as control. Fish blood was sampled and the phagocytic capacity and index were determined at 1, 2, 3 and 6 h post-injection (hpi). The yeast injection successfully stimulated phagocytosis, with the best result for phagocytosis assessment after 2 hpi. Moreover, it was achieved a high traceability of phagocytized and non-phagocytized yeast under optic microscopy analysis due to the Congo red labeling. The hematological profile was similar to usually observed in early infections, indicating lymphocyte migration to inflammatory site and increase in number of circulating phagocytes due to natural response to inflammatory stimulus. In conclusion, our method was efficient to assess in vivo phagocytosis in A. altiparanae and will be an important tool to evaluate the efficacy of immunosuppressive drugs in this species. Additionally, these results may serve as support for further studies in fish immunocompetence, both in laboratory and in field conditions.

Resumo Apesar do potencial apresentado pela tecnologia de propagação mediada para a aquicultura e conservação de peixes Neotropicais, o pobre entendimento do sistema imune do hospedeiro pode resultar na rejeição e destruição do material do doador. Com isso, se fazem necessários o estudo e o desenvolvimento de métodos para análise tanto dos efeitos de drogas imunossupressoras quanto para a avaliação da imunocompatibilidade entre doadores e receptores. Logo, o presente estudo teve como objetivo aperfeiçoar um método para analisar a fagocitose in vivo em Astyanax altiparanae usando Saccharomyces cerevisiae marcado e avaliar seu perfil hematológico resultante da indução inflamatória. Para isso, S. cerevisiae foram marcados com vermelho Congo e injetados na cavidade celomática dos A. altiparanae na concentração de 2,5 x 106 células.mL-1. Peixes injetados com PBS e peixes não injetados foram mantidos como controle. Sangue foi colhido e a capacidade fagocítica e o índice fagocítico foram determinados após 1, 2, 3 e 6 horas após à injeção (hpi). A injeção de levedura estimulou a fagocitose com sucesso, com o melhor resultado atingido após 2 hpi. Ainda, foi observada uma alta rastreabilidade das leveduras fagocitadas e não fagocitadas sob microscopia óptica devido à marcação com vermelho Congo. O perfil hematológico foi similar ao observado usualmente em infecções recém-induzidas, indicando migração de linfócitos ao sítio inflamatório e aumento no número de fagócitos circulantes devido à resposta natural ao estímulo inflamatório. Como conclusão, nosso método foi eficiente para analisar a fagocitose in vivo em A. altiparanae e será uma ferramenta importante para a avaliação de eficácia de drogas imunossopressoras para esta espécie. Em adição, estes resultados podem contribuir para futuros estudos em imunocompetência em peixes, tanto em âmbito laboratorial quanto a campo.

In vivo phagocytosis and hematology in Astyanax altiparanae, a potential model for surrogate technology

Abstract Although the potential of surrogate propagation technology for aquaculture and conservation of Neotropical fish, the poor understanding of the host immune system may results in rejection and destruction of the donor material. Thus, it is necessary to study and to develop methods to evaluate the effects of immunosuppressive drugs employment and to evaluate the immunocompatibility between donor and receptor. Thus, the present study aimed to optimize a methodology to assess in vivo phagocytosis in Astyanax altiparanae using Saccharomyces cerevisiae and to evaluate their hematological response resultant from the inflammatory induction. To this, S. cerevisiae were labeled with Congo red and injected in the coelomic cavity of A. altiparanae at the concentration of 2.5 x 106 cells mL-1. A PBS solution and a non-injected group were kept as control. Fish blood was sampled and the phagocytic capacity and index were determined at 1, 2, 3 and 6 h post-injection (hpi). The yeast injection successfully stimulated phagocytosis, with the best result for phagocytosis assessment after 2 hpi. Moreover, it was achieved a high traceability of phagocytized and non-phagocytized yeast under optic microscopy analysis due to the Congo red labeling. The hematological profile was similar to usually observed in early infections, indicating lymphocyte migration to inflammatory site and increase in number of circulating phagocytes due to natural response to inflammatory stimulus. In conclusion, our method was efficient to assess in vivo phagocytosis in A. altiparanae and will be an important tool to evaluate the efficacy of immunosuppressive drugs in this species. Additionally, these results may serve as support for further studies in fish immunocompetence, both in laboratory and in field conditions.

Resumo Apesar do potencial apresentado pela tecnologia de propagação mediada para a aquicultura e conservação de peixes Neotropicais, o pobre entendimento do sistema imune do hospedeiro pode resultar na rejeição e destruição do material do doador. Com isso, se fazem necessários o estudo e o desenvolvimento de métodos para análise tanto dos efeitos de drogas imunossupressoras quanto para a avaliação da imunocompatibilidade entre doadores e receptores. Logo, o presente estudo teve como objetivo aperfeiçoar um método para analisar a fagocitose in vivo em Astyanax altiparanae usando Saccharomyces cerevisiae marcado e avaliar seu perfil hematológico resultante da indução inflamatória. Para isso, S. cerevisiae foram marcados com vermelho Congo e injetados na cavidade celomática dos A. altiparanae na concentração de 2,5 x 106 células.mL-1. Peixes injetados com PBS e peixes não injetados foram mantidos como controle. Sangue foi colhido e a capacidade fagocítica e o índice fagocítico foram determinados após 1, 2, 3 e 6 horas após à injeção (hpi). A injeção de levedura estimulou a fagocitose com sucesso, com o melhor resultado atingido após 2 hpi. Ainda, foi observada uma alta rastreabilidade das leveduras fagocitadas e não fagocitadas sob microscopia óptica devido à marcação com vermelho Congo. O perfil hematológico foi similar ao observado usualmente em infecções recém-induzidas, indicando migração de linfócitos ao sítio inflamatório e aumento no número de fagócitos circulantes devido à resposta natural ao estímulo inflamatório. Como conclusão, nosso método foi eficiente para analisar a fagocitose in vivo em A. altiparanae e será uma ferramenta importante para a avaliação de eficácia de drogas imunossopressoras para esta espécie. Em adição, estes resultados podem contribuir para futuros estudos em imunocompetência em peixes, tanto em âmbito laboratorial quanto a campo.

AVALIAÇÃO DE PROTOCOLO DE EXTRAÇÃO DE DNA DE BRUCELLA SPP. EM SÊMEN BOVINO / EVALUATION PROTOCOL FOR DNA EXTRACTION OF Brucella spp. IN BOVINE SEMEN

A brucelose é uma doença infecto-contagiosa, de caráter zoonótico e de grande importância tanto em produção animal, quanto na saúde pública. É causada por bactérias do gênero Brucella, que provocam orquites e epididimites uni ou bilaterais em touros, podendo levar a sub-fertilidade e a esterilidade. Machos bovinos assintomáticos tornam-se importantes disseminadores desta doença nos rebanhos. Desta forma objetivou-se avaliar o protocolo de extração de DNA de Brucella spp em sêmen in natura bovino, submetendo-os aos testes diagnósticos PCR (protocolo Lise Enzimática por Proteinase e Fenol: Clorofórmio – PK), Antígeno Acidificado Tamponado (AAT) e Sêmem Plasma Aglutinação (SPA), de 33 touros utilizados em monta natural. O protocolo PK foi eficaz na extração de DNA de Brucella spp. Dos 33 touros testados, oito foram reagentes na PCR (24,24%), seis (18,18%) reagentes na SPA, e dos 23 animais com amostra de soro sanguíneo, um (4%) foi reagente para o AAT. Apenas um animal foi reagente na SPA e no AAT, e não reagente na PCR. Por outro lado sete animais apresentaram-se com s&am

Effects of cigarette smoke inhalation and coffee consumption on bone formation and osseous integration of hydroxyapatite implant / Os efeitos do cigarro e do consumo de café sobre a formação óssea e a integração óssea de implantes de hidroxiapatita

The present study aims to assess the effects of cigarette smoke inhalation and/or coffee consumption on bone formation and osseous integration of a dense hydroxyapatite (DHA) implant in rats. For this study, 20 male rats were divided into four groups (n = 5): CT (control) group, CE (coffee) group, CI (cigarette) group and CC (coffee + cigarette) group. During 16 weeks, animals in the CI group were exposed to cigarette smoke inhalation equivalent to 6 cigarettes per day; specimens in the CE group drank coffee as liquid diet; and rats in the CC group were submitted to both substances. In the 6th week a 5 mm slit in the parietal bone and a 4 mm slit in the tibia were performed on the left side: the former was left open while the latter received a DHA implant. As soon as surgeries were finished, the animals returned to their original protocols and after 10 weeks of exposure they were euthanised (ethically sacrificed) and the mentioned bones collected for histological processing. Data showed that exposure to cigarette smoke inhalation and coffee consumption did not interfere in weight gain and that solid and liquid diet consumption was satisfactory. Rats in the CC group showed a decrease in bone neoformation around the tibial DHA implant (31.8 ± 2.8) as well as in bone formation in the parietal slit (28.6 ± 2.2). On their own, cigarette smoke inhalation or coffee consumption also led to diminished bone neoformation around the implant and delayed the bone repair process in relation to the CT group. However, reduction in the bone repair process was accentuated with exposure to both cigarette smoke inhalation and coffee consumption in this study.(AU)

O presente estudo teve como objetivo avaliar os efeitos do tabagismo e do consumo de café, isolada ou concomitantemente, sobre a formação óssea e a osseointegração de implantes hidroxiapatita densa. Foram utilizados 20 ratos machos, divididos em quatro grupos (n = 5): grupo CT (controle); grupo CA (café); grupo CI (cigarro), e grupo CC (cigarro + café). Durante 16 semanas, os animais do grupo CI foram expostos à fumaça de seis cigarros/dia; os animais do grupo CA consumiram café como dieta líquida, e os animais do grupo CC, ambas as substâncias. Após seis semanas de exposição, uma falha óssea de 5 mm foi produzida no osso parietal esquerdo e de 4 mm, na tíbia esquerda dos animais. A falha do parietal foi mantida aberta, enquanto na tíbia corpos cerâmicos de hidroxiapatita densa (HAD) foram implantados em cavidade produzida cirurgicamente. Após as cirurgias, os animais retornaram aos protocolos experimentais e, ao término de dez semanas, foram eutanasiados, sendo as tíbias e os parietais coletados para processamento histológico. A exposição à fumaça do cigarro e o consumo de café não interferiram no ganho de peso dos animais, e os consumos de dieta líquida e sólida foram satisfatórios entre os grupos. Os animais do grupo CC apresentaram menor volume de osso neoformado ao redor do implante de HAD na tíbia (31,8 ± 2,8) e menor osteogênese na falha produzida no osso parietal (28,6 ± 2,2). O café e o cigarro consumidos isoladamente provocam a diminuição do volume de osso ao redor do implante e o atraso no processo de reparação óssea. Observou-se que o consumo de café associado à exposição à fumaça do cigarro reduziu de forma acentuada o processo de reparação óssea, no presente estudo.(AU)

AVALIAÇÃO COMPARATIVA IN VITRO DA SENSIBILIDADE DE Rhipicephalus (Boophilus) microplus A ACARICIDAS COMERCIALIZADOS NO MUNICÍPIO DE ROLIM DE MOURA, RONDÔNIA, BRASIL

Objetivou-se avaliar in vitro a sensibilidade de Rhipicephalus (Boophilus) microplus aos acaricidas comercializados no município de Rolim de Moura, Rondônia, Brasil. Foram coletadas 400 partenóginas de R. (B.) microplus de bovinos naturalmente infestados, pertencentes a duas propriedades rurais. As partenóginas foram separadas em sete grupos homogêneos de 10 indivíduos cada, para análise dos perfis de sensibilidade ao diclorvós 45% + cipermetrina 5%, cipermetrina 15%, cipermetrina 20%, amitraz 12,5%, deltametrina 2,5% e fipronil 1% e o grupo controle. Foram adotados o Teste de Imersão de Adultos (TIA) e o Teste de Imersão de Larvas (TIL). Para cada grupo de 10 partenóginas foi determinado, o índice de produção de ovos, a eficiência reprodutiva e a eficiência do produto. Na propriedade 1 o produto com ação mais rápida sobre as partenóginas foi o fipronil 1%, que matou 70% (7/10) delas em menos de três dias, tendo também inibido a postura dos ovos nas sobreviventes. Enquanto na propriedade 2, a mortalidade das partenóginas só iniciaram a partir do terceiro dia com o uso do amitraz 12,5%, com 50% (5/10) de morte no vigésimo dia, porém nas partenóginas sobreviventes não houve inibição de postura. Na propriedade 1 a cipermetrina 20% e o amitraz 12,5%, inibiram 100% da eclosão dos ovos e a associação de diclorvós 45% + cipermetrina 5% obteve 98% de eficiência de produto. No entanto,

AVALIAÇÃO DE PROTOCOLO DE EXTRAÇÃO DE DNA DE BRUCELLA SPP. EM SÊMEN BOVINO / EVALUATION PROTOCOL FOR DNA EXTRACTION OF Brucella spp. IN BOVINE SEMEN

A brucelose é uma doença infecto-contagiosa, de caráter zoonótico e de grande importância tanto em produção animal, quanto na saúde pública. É causada por bactérias do gênero Brucella, que provocam orquites e epididimites uni ou bilaterais em touros, podendo levar a sub-fertilidade e a esterilidade. Machos bovinos assintomáticos tornam-se importantes disseminadores desta doença nos rebanhos. Desta forma objetivou-se avaliar o protocolo de extração de DNA de Brucella spp em sêmen in natura bovino, submetendo-os aos testes diagnósticos PCR (protocolo Lise Enzimática por Proteinase e Fenol: Clorofórmio – PK), Antígeno Acidificado Tamponado (AAT) e Sêmem Plasma Aglutinação (SPA), de 33 touros utilizados em monta natural. O protocolo PK foi eficaz na extração de DNA de Brucella spp. Dos 33 touros testados, oito foram reagentes na PCR (24,24%), seis (18,18%) reagentes na SPA, e dos 23 animais com amostra de soro sanguíneo, um (4%) foi reagente para o AAT. Apenas um animal foi reagente na SPA e no AAT, e não reagente na PCR. Por outro lado sete animais apresentaram-se com s&am

SERUM PROTEIN PROFILE AS A BIOMARKER IN DIAGNOSING LEISHMANIOSIS AND MONOCYTIC EHRLICHIOSIS IN DOGS

Diagnosing Canine Visceral Leishmaniosis is challenging for veterinarians given that its hematological and biochemical abnormalities greatly resemble those of other illnesses of dogs, such as canine ehrlichiosis, which is caused by Ehrlichia canis and is highly prevalent with high pathogenicity. The aim of this study was to determine occurrences of serological positivity for the antigens of Ehrlichia canis and Leishmania infantum and its relationship to globulin concentrations in samples from dogs. Out of 93 samples tested, 12.9% were negative for the antigens of both L. infantum and E. canis; 33.3% were seropositive for both antigens. Discordant results were found from 18.3% that were positive only for L. infantum, while 35.5% were positive only for E. canis. Hyperglobulinemia was observed in 88.2% and the statistical analysis showed that there was a significant relationship between the high levels of globulins and seropositivity for the antigen of E. canis. However, the relationship between positivity for the antigen of L. infantum and hyperglobulinemia, showed that there was no statistically significant relationship between the two laboratory findings. From these results, it can be concluded that concomitant infections occur frequently and that hyperglobulinemia is more closely related to ehrlichiosis than to leishmaniosis, in dogs.