Profile of IL-2, IL-4, IL-10, IFN-gamma, TNF-alpha and KC-like cytokines in pregnant bitches / Perfil de citocinas IL-2, IL-4, IL-10, IFN-gamma, TNF-alpha e células KC-like em cadelas gestantes

The aim of this study was to determine the profile of IL-2, IL-4, IL-10, IFN-γ, and TNF-α cytokines and KC-like cells (natural killer) in pregnant bitches, unpublished values for the species. A total of 27 females of the Shi Tzu, Pug, English Bulldog and French breeds, weighing 4-20kg and aged 4-6 years were used. Blood samples were collected from bitches during the anestrous and on the 2nd, 5th, 6th, 7th and 8th week of pregnancy. Serum levels of cytokines were measured by panel MILLIPLEX MAP (CCYTO-90K, MILLIPORE, Billerica, Massachusetts, USA) validated for dogs. Twenty four females showed physiological pregnancy and three bitches showed pathological pregnancy. There was no difference between cytokine values during anestrous and gestational weeks of bitches (P>0.05). However, it was possible to verify the physiological behavior of serum levels during modulation of immune response in the gestational process of animals. In animals with gestational disorders, abnormal values for IL-2, IL-4 and INF-y were noted. It was concluded that serum levels of cytokines evaluated in pregnant bitches can help the better understanding of physiological and pathological gestational processes and correlated immunology in this species.(AU)

Objetivou-se por meio deste estudo determinar o perfil das citocinas IL-2, IL-4, IL-10, IFN-γ, TNF-α e células KC-like (natural killer) em cadelas gestantes, valores que são inéditos para a espécie. Foram utilizadas 27 fêmeas das raças Shi-tzu, Pug, Bulldog Inglês e Francês, pesando de 4 a 20 kg e com idade entre quatro e seis anos. Foram coletadas amostras sanguíneas das cadelas durante o anestro e na segunda, quinta, sexta, sétima e oitava semanas gestacionais. Os níveis séricos de citocinas foram dosados pelo painel MILLIPLEX MAP (CCYTO-90K, MILLIPORE, Billerica, Massachusetts, EUA) validado para cães. Vinte e quatro fêmeas apresentaram gestação fisiológica e três cadelas, gestação patológica. Não foi verificada diferença entre os valores das citocinas durante anestro e nas semanas gestacionais das cadelas (P>0,05). Entretanto, foi possível verificar o comportamento fisiológico dos níveis séricos durante a modulação da resposta imune no processo gestacional dos animais. Verificaram-se, nos animais com afecções gestacionais, valores alterados para IL-2, IL-4 e INF-y. Pôde-se concluir que os valores séricos das citocinas avaliadas, nas cadelas gestantes, podem auxiliar no maior conhecimento dos processos fisiológicos e patológicos da gestação, correlacionados à imunologia, nessa espécie.(AU)

Xenotransplante em camundongos imunossuprimidos coletado por meio de ovariectomia unilateral total vídeolaparoscópica em ovelha / Xenotransplantation in immunosuppressed mice collected from total unilateral laparoscopic ovariectomy in sheep

Objetivou-se neste estudo descrever a técnica de xenotransplante gonadal em camundongosimunossuprimidos por meio de ovariectomia unilateral total videolaparoscópica (OVL) em ovelhas. Foramutilizadas quatro ovelhas como doadoras do tecido reprodutivo e camundongos em fase reprodutiva (n = 12)como receptores. As coletas foram realizadas por videocirurgia, e foram avaliados o tempo de cirurgia, as respostascomportamentais antiálgicas, o apetite, o escore corporal e a locomoção durante 10 dias pós-operatórios. Osxenotransplantes foram realizados na cápsula renal dos camundongos, sendo avaliados histologicamente 60 diasapós o transplante. O tempo de cirurgia foi de 18 ± 3 min. A técnica OVL apresentou-se minimamente invasiva,sem complicações cirúrgicas, proporcionando mínimo desconforto e ótima recuperação dos animais, e pode serempregada em ovelhas adultas e pré-púberes para coleta de tecidos reprodutivos para conservação de gametas. Parahistologia dos tecidos xenotransplantados, verificou-se viabilidade tecidual, com neovascularização e ausência defocos necróticos, porém não se visualizaram folículos nas diferentes fases. Concluiu-se que a OVL pode ser atécnica empregada em ovelhas pré-púberes e adultas para recuperação de tecido reprodutivo paraxenotransplante. Para o xenotransplante, sugere-se que os fragmentos ovarianos selecionados contenham umnúmero suficiente de folículos primordiais para o possível sucesso da biotécnica.(AU)

The aim of this study was to describe the technique of gonadal xenotransplantation inimmunosuppressed mice from total unilateral laparoscopic ovariectomy (OVL) in sheep. Four sheep were usedas donors of reproductive tissue in mice in the reproductive phase (n = 12) as receivers. Samples were collectedby laparoscopic surgery, evaluating the time of surgery, observation of behavioral anti-painful responses,monitoring appetite, body condition score and locomotion for 10 days postoperatively. The xenografts wereperformed in the renal capsule of mice, as evaluated histologically 60 days after transplantation. The operationtime was 18 ± 3 min, the technique presented OVL minimally invasive surgical complications without providingminimum discomfort and optimum recovery of the animals and can be used in adult and prepubertal sheep forcollecting reproductive tissues for the conservation of gametes. Histology tissue xenotransplanteted was a viabletissue, with neovascularization and absence of necrotic foci, but follicles at different stages were not visualized.It was concluded that the OVL technique can be employed in sheep and adult prepubertal for recoveringreproductive tissue for xenotransplantation. For xenotransplantation, it is suggested that the ovarian fragmentsselected contain a sufficient number of primordial follicles for the possible success of biotech.(AU)

Xenotransplante em camundongos imunossuprimidos coletado por meio de ovariectomia unilateral total vídeolaparoscópica em ovelha / Xenotransplantation in immunosuppressed mice collected from total unilateral laparoscopic ovariectomy in sheep

Objetivou-se neste estudo descrever a técnica de xenotransplante gonadal em camundongosimunossuprimidos por meio de ovariectomia unilateral total videolaparoscópica (OVL) em ovelhas. Foramutilizadas quatro ovelhas como doadoras do tecido reprodutivo e camundongos em fase reprodutiva (n = 12)como receptores. As coletas foram realizadas por videocirurgia, e foram avaliados o tempo de cirurgia, as respostascomportamentais antiálgicas, o apetite, o escore corporal e a locomoção durante 10 dias pós-operatórios. Osxenotransplantes foram realizados na cápsula renal dos camundongos, sendo avaliados histologicamente 60 diasapós o transplante. O tempo de cirurgia foi de 18 ± 3 min. A técnica OVL apresentou-se minimamente invasiva,sem complicações cirúrgicas, proporcionando mínimo desconforto e ótima recuperação dos animais, e pode serempregada em ovelhas adultas e pré-púberes para coleta de tecidos reprodutivos para conservação de gametas. Parahistologia dos tecidos xenotransplantados, verificou-se viabilidade tecidual, com neovascularização e ausência defocos necróticos, porém não se visualizaram folículos nas diferentes fases. Concluiu-se que a OVL pode ser atécnica empregada em ovelhas pré-púberes e adultas para recuperação de tecido reprodutivo paraxenotransplante. Para o xenotransplante, sugere-se que os fragmentos ovarianos selecionados contenham umnúmero suficiente de folículos primordiais para o possível sucesso da biotécnica.

The aim of this study was to describe the technique of gonadal xenotransplantation inimmunosuppressed mice from total unilateral laparoscopic ovariectomy (OVL) in sheep. Four sheep were usedas donors of reproductive tissue in mice in the reproductive phase (n = 12) as receivers. Samples were collectedby laparoscopic surgery, evaluating the time of surgery, observation of behavioral anti-painful responses,monitoring appetite, body condition score and locomotion for 10 days postoperatively. The xenografts wereperformed in the renal capsule of mice, as evaluated histologically 60 days after transplantation. The operationtime was 18 ± 3 min, the technique presented OVL minimally invasive surgical complications without providingminimum discomfort and optimum recovery of the animals and can be used in adult and prepubertal sheep forcollecting reproductive tissues for the conservation of gametes. Histology tissue xenotransplanteted was a viabletissue, with neovascularization and absence of necrotic foci, but follicles at different stages were not visualized.It was concluded that the OVL technique can be employed in sheep and adult prepubertal for recoveringreproductive tissue for xenotransplantation. For xenotransplantation, it is suggested that the ovarian fragmentsselected contain a sufficient number of primordial follicles for the possible success of biotech.