Diversity of tick species (Acari: Ixodidae) in military training areas in Southeastern Brazil / Diversidade de espécies de carrapatos (Acari: Ixodidae) em áreas de instrução militar na região Sudeste do Brasil

Abstract Tick-borne pathogens belong to one of the two main groups of occupational biohazards, and occupational exposure to such agents puts soldiers at risk of zoonotic infections, such as those caused by rickettsiae. There are few studies on acarological fauna and occupational risk in military areas in Brazil. Thus, the present study aimed to analyze the diversity of ticks present in the military training areas of municipalities in the Southeast Region of Brazil. The ticks were collected from the selected areas using the dragging and flagging techniques as well as by visual detection on the operators' clothing, and environmental information was also recorded. A total of ten species were collected from the 66 surveyed areas, belonging to five genera and nine species: Amblyomma sculptum, Amblyomma dubitatum, Amblyomma brasiliense, Amblyomma longirostre, Amblyomma aureolatum, Dermacentor nitens, Rhipicephalus spp., Ixodes spp. and Haemaphysalis spp. The frequent presence of tick species in military training areas along with traces and sightings of wild animals, most commonly capybaras (Hydrochoerus hydrochaeris), in most of the studied areas, indicates high levels of exposure of the military to tick vectors of spotted fever group rickettsiae and the possible occurrence of infections among the troops.

Resumo As doenças transmitidas por carrapatos estão entre os dois principais grupos de riscos biológicos ocupacionais. Tal exposição ocupacional de militares os colocam sob maior risco de adquirirem doenças zoonóticas, como infecções rickettsiais, entre outras. No Brasil, há raros estudos sobre fauna acarológica e o risco ocupacional em áreas militares. Neste sentido, o presente estudo teve por objetivo analisar a diversidade de carrapatos presentes em áreas de treinamento militar de municípios da região Sudeste do Brasil. Os carrapatos foram coletados nas áreas através de arrasto de flanela, bandeiramento e/ou coleta nas vestimentas do operador, sendo registradas também informações ambientais. Das 66 áreas pesquisadas, foram coletados 9.374 carrapatos, com uma diversidade de cinco gêneros, distribuídos em dez espécies: Amblyomma sculptum, Amblyomma dubitatum, Amblyomma brasiliense, Amblyomma longirostre, Amblyomma aureolatum, Amblyomma spp., Dermacentor nitens, Rhipicephalus spp., Ixodes spp. e Haemaphysalis spp. A presença frequente de espécies de carrapatos nas áreas de instrução militar, associada aos vestígios e à presença de animais silvestres, mais comumente de capivaras na maioria das áreas estudadas, evidencia uma grande exposição dos militares a carrapatos vetores de rickettsias do Grupo da Febre Maculosa e a possível ocorrência de casos humanos nas tropas.

Serological and molecular detection of Theileria equi in horses from Sinop, Mato Grosso state, Brazil / Detecção sorológica e molecular de Theileria equi em equinos oriundos de Sinop, Mato Grosso, Brasil

Equine piroplasmosis is the most important tick-borne disease to affect horses in Brazil. Theileria equi is one of the causative agents of equine piroplasmosis. Chronic cases are expected, in which the animals show no apparent signs of infection and remain asymptomatic but constitute a source of the infectious agent that ticks can spread. This study was conducted across 81 ranches located in the municipality of Sinop, State of Mato Grosso, Brazil. A sample calculation was performed to estimate the apparent prevalence of T. equi among horses. A total of 1,853 animals were included in the sampling analysis based on the information available from the Institute of Agricultural and Livestock Defense of Mato Grosso State. The serological analysis of 367 serum samples using an indirect enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) to detect anti-T. equi antibodies revealed that 337 animals were positive, representing a frequency of 90.70%. The molecular analysis to amplify the EMA-1 gene showed positivity in 20 of 89 tested samples. The fragments of four samples were sequenced and analyzed to determine their similarities to sequences from other species, based on sequences deposited at GenBank. All showed 100% similarity with T. equi. Our study represents the first report of T. equi antibodies among the equids in north-central region of Mato Grosso, revealing the widespread distribution of seropositive animals.

A piroplasmose equina é a doença transmitida por carrapatos mais importante em cavalos no Brasil. Theileria equi é um dos agentes causadores da piroplasmose equina. São esperados casos crônicos, nos quais os animais não apresentam sinais aparentes de infecção e permanecem assintomáticos, mas constituem uma fonte de infecção e disseminação por carrapatos. Este estudo foi realizado em 81 fazendas localizadas no município de Sinop, Estado de Mato Grosso, Brasil. Um cálculo amostral foi realizado para estimar a prevalência aparente de T. equi entre cavalos. No total, 1.853 animais foram incluídos na análise amostral com base nas informações disponíveis no Instituto de Defesa Agropecuária do Estado de Mato Grosso. A análise sorológica de 367 amostras de soro por meio de ensaio imunoenzimático indireto (ELISA) para detecção de anticorpos anti-T. equi revelou que 337 animais eram positivos, representando uma frequência de 90,70%. A análise molecular para o gene EMA-1 mostrou positividade em 20 das 89 amostras testadas. Os fragmentos de quatro amostras foram sequenciados e analisados para determinar suas semelhanças com sequências de outras espécies, a partir das sequências depositadas no GenBank. Todos mostraram 100% de similaridade com T. equi. Nosso estudo representa o primeiro relato de anticorpos contra T. equi entre os equídeos na região centro norte de Mato Grosso, revelando a ampla distribuição de animais soropositivos.

Serological and molecular detection of Theileria equi in horses from Sinop, Mato Grosso state, Brazil / Detecção sorológica e molecular de Theileria equi em equinos oriundos de Sinop, Mato Grosso, Brasil

Equine piroplasmosis is the most important tick-borne disease to affect horses in Brazil. Theileria equi is one of the causative agents of equine piroplasmosis. Chronic cases are expected, in which the animals show no apparent signs of infection and remain asymptomatic but constitute a source of the infectious agent that ticks can spread. This study was conducted across 81 ranches located in the municipality of Sinop, State of Mato Grosso, Brazil. A sample calculation was performed to estimate the apparent prevalence of T. equi among horses. A total of 1,853 animals were included in the sampling analysis based on the information available from the Institute of Agricultural and Livestock Defense of Mato Grosso State. The serological analysis of 367 serum samples using an indirect enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) to detect anti-T. equi antibodies revealed that 337 animals were positive, representing a frequency of 90.70%. The molecular analysis to amplify the EMA-1 gene showed positivity in 20 of 89 tested samples. The fragments of four samples were sequenced and analyzed to determine their similarities to sequences from other species, based on sequences deposited at GenBank. All showed 100% similarity with T. equi. Our study represents the first report of T. equi antibodies among the equids in north-central region of Mato Grosso, revealing the widespread distribution of seropositive animals.(AU)

A piroplasmose equina é a doença transmitida por carrapatos mais importante em cavalos no Brasil. Theileria equi é um dos agentes causadores da piroplasmose equina. São esperados casos crônicos, nos quais os animais não apresentam sinais aparentes de infecção e permanecem assintomáticos, mas constituem uma fonte de infecção e disseminação por carrapatos. Este estudo foi realizado em 81 fazendas localizadas no município de Sinop, Estado de Mato Grosso, Brasil. Um cálculo amostral foi realizado para estimar a prevalência aparente de T. equi entre cavalos. No total, 1.853 animais foram incluídos na análise amostral com base nas informações disponíveis no Instituto de Defesa Agropecuária do Estado de Mato Grosso. A análise sorológica de 367 amostras de soro por meio de ensaio imunoenzimático indireto (ELISA) para detecção de anticorpos anti-T. equi revelou que 337 animais eram positivos, representando uma frequência de 90,70%. A análise molecular para o gene EMA-1 mostrou positividade em 20 das 89 amostras testadas. Os fragmentos de quatro amostras foram sequenciados e analisados para determinar suas semelhanças com sequências de outras espécies, a partir das sequências depositadas no GenBank. Todos mostraram 100% de similaridade com T. equi. Nosso estudo representa o primeiro relato de anticorpos contra T. equi entre os equídeos na região centro norte de Mato Grosso, revelando a ampla distribuição de animais soropositivos.(AU)

Serological and molecular detection of Theileria equi in horses from Sinop, Mato Grosso state, Brazil / Detecção sorológica e molecular de Theileria equi em equinos oriundos de Sinop, Mato Grosso, Brasil

Equine piroplasmosis is the most important tick-borne disease to affect horses in Brazil. Theileria equi is one of the causative agents of equine piroplasmosis. Chronic cases are expected, in which the animals show no apparent signs of infection and remain asymptomatic but constitute a source of the infectious agent that ticks can spread. This study was conducted across 81 ranches located in the municipality of Sinop, State of Mato Grosso, Brazil. A sample calculation was performed to estimate the apparent prevalence of T. equi among horses. A total of 1,853 animals were included in the sampling analysis based on the information available from the Institute of Agricultural and Livestock Defense of Mato Grosso State. The serological analysis of 367 serum samples using an indirect enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) to detect anti-T. equi antibodies revealed that 337 animals were positive, representing a frequency of 90.70%. The molecular analysis to amplify the EMA-1 gene showed positivity in 20 of 89 tested samples. The fragments of four samples were sequenced and analyzed to determine their similarities to sequences from other species, based on sequences deposited at GenBank. All showed 100% similarity with T. equi. Our study represents the first report of T. equi antibodies among the equids in north-central region of Mato Grosso, revealing the widespread distribution of seropositive animals.

A piroplasmose equina é a doença transmitida por carrapatos mais importante em cavalos no Brasil. Theileria equi é um dos agentes causadores da piroplasmose equina. São esperados casos crônicos, nos quais os animais não apresentam sinais aparentes de infecção e permanecem assintomáticos, mas constituem uma fonte de infecção e disseminação por carrapatos. Este estudo foi realizado em 81 fazendas localizadas no município de Sinop, Estado de Mato Grosso, Brasil. Um cálculo amostral foi realizado para estimar a prevalência aparente de T. equi entre cavalos. No total, 1.853 animais foram incluídos na análise amostral com base nas informações disponíveis no Instituto de Defesa Agropecuária do Estado de Mato Grosso. A análise sorológica de 367 amostras de soro por meio de ensaio imunoenzimático indireto (ELISA) para detecção de anticorpos anti-T. equi revelou que 337 animais eram positivos, representando uma frequência de 90,70%. A análise molecular para o gene EMA-1 mostrou positividade em 20 das 89 amostras testadas. Os fragmentos de quatro amostras foram sequenciados e analisados para determinar suas semelhanças com sequências de outras espécies, a partir das sequências depositadas no GenBank. Todos mostraram 100% de similaridade com T. equi. Nosso estudo representa o primeiro relato de anticorpos contra T. equi entre os equídeos na região centro norte de Mato Grosso, revelando a ampla distribuição de animais soropositivos.

Genetic diversity of Babesia bovis studied longitudinally under natural transmission conditions in calves in the state of Rio de Janeiro, Brazil / Diversidade genética de Babesia bovis estudada longitudinalmente em condições de transmissão natural entre bezerros no estado do Rio de Janeiro, Brasil

Serum and DNA samples from 15 naturally infected calves in Seropédica, Brazil, were obtained quarterly from birth to 12 months of age, in order to longitudinally evaluate their humoral immune response against Babesia bovis and the merozoite surface antigen diversity of B. bovis. Anti-B. bovis IgG antibodies were detected by an indirect fluorescent antibody test (IFAT) and enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Using DNA amplification, sequencing and phylogenetic analysis, the genetic diversity of B. bovis was assessed based on the genes that encode merozoite surface antigens (MSA-1, MSA-2b and MSA-2c). The serological results demonstrated that up to six months of age, all the calves developed active immunity against B. bovis. Among the 75 DNA samples evaluated, 0, 3 and 5 sequences of the msa-1, msa-2b and msa-2c genes were obtained, respectively. The present study demonstrated that the msa-2b and msa-2c gene sequences amplified from blood DNA of B. bovis-positive calves were genetically diversified. These data emphasize the importance of conducting deeper studies on the genetic diversity of B. bovis in Brazil, in order to design diagnostic antigens and vaccines in the future.(AU)

Para avaliar longitudinalmente a resposta imune humoral anti-B. bovis e a diversidade genética de antígenos de superfície de merozoítos de B. bovis, entre bezerros naturalmente infectados em Seropédica, Brasil, amostras de soro e DNA de 15 bezerros foram obtidas trimestralmente, desde o nascimento até 12 meses de idade. Anticorpos IgG para B. bovis foram detectados pelos testes de Imunofluorescência Indireta e Ensaio de Imunoadsorção Enzimático Indireto. Usando-se amplificação de DNA, sequenciamento e análises filogenéticas, a diversidade genética de B. bovis, com base nos genes que codificam antígenos de superfície de merozoítos (MSA-1, MSA-2b e MSA-2c) foi investigada. Os resultados da sorologia demonstraram que, até os seis meses de idade, todos os bezerros desenvolveram imunidade ativa contra B. bovis. Entre as 75 amostras de DNA avaliadas, foram obtidas 0, 3 e 5 sequências dos genes msa-1, msa-2b e msa-2c. O presente estudo demonstrou que sequências dos genes msa-2b e msa-2c amplificadas a partir de amostras de sangue positivas para B. bovis de bezerros de Seropédica, foram geneticamente distintas. O presente trabalho realça a importância de se realizar estudos aprofundados sobre a diversidade genética de B. bovis no Brasil, objetivando o desenvolvimento de antígenos para o diagnóstico e vacinas no futuro.(AU)

Characterization of cattle tick fever in calves from the northwestern region of Minas Gerais, Brazil / Caracterização do complexo da Tristeza Parasitária Bovina em bezerros da região noroeste de Minas Gerais, Brasil

The present study aimed to characterize the importance of the Anaplasma marginale, Babesia bovis and Babesia bigemina in the genesis of cattle tick fever (CTF) among dairy calves in the northwest of Minas Gerais, Brazil. Blood samples from 300 calves were collected, followed by DNA extraction and nested PCR using oligonucleotide primers to amplify fragments of the semi-nested for the msp5 gene (A. marginale), sbp-4 (B. bovis) and rap-1a (B. bigemina) Among the examined calves, the prevalence of A. marginale was 55.6% (n=167/300), B. bovis was 4.0% (n=12/300) and B. bigemina was 15.3% (n=46/300), by PCR techniques. Parasitic forms of A. marginale and B. bigemina were found in 36,3% and 2,6% of the blood smears while B. bovis was not detected. There was a statistical difference between the positivity of infected animals in the age groups 1 (10-70 days) and (>70-300 days) for A. marginale and B. bigemina. A total of 15 calves with the classic symptoms of disease were examined, and the samples obtained were confirmed as a simple infection by A. marginale through semi-nested PCR. These results confirm bovine anaplasmosis as the primary cause of CTF among the calves of dairy cattle within the studied area.(AU)

O presente estudo teve como objetivo caracterizar a importância de Anaplasma marginale, Babesia bigemina e Babesia bovis na gênese da tristeza parasitária bovina em bezerros leiteiros do noroeste de Minas Gerais. Foram coletadas 300 amostras sanguíneas de bezerros, seguidas por extração de DNA e Nested- PCR utilizando oligonucleotídeos iniciadores que amplificam fragmentos dos genes sbp-4 (B. bovis) e rap-1a (B. bigemina) e a Semi-Nested para o gene msp5 (A. marginale). A prevalência de A. marginale foi 55,66% (167/300), B. bigemina, 15,33% (46/300) e B. bovis 4,0% (12/300) dos bezerros examinados. Formas parasitárias de A. marginale and B. bigemina foram encontradas em 36,33% e 2,66% dos esfregaços sanguíneos, enquanto B. bovis não foi detectado. Houve diferença estatística entre as prevalências de animais infectados nas faixas etárias 1 (10-70 dias) e 2 (>70-300 dias). Um total de 15 animais com sintomas clássicos da doença foram examinados, e as amostras foram confirmadas como uma infecção simples por A. marginale através da Nested-PCR. Esses resultados confirmam a anaplasmose bovina como a principal agente da tristeza parasitária bovina nos bezerros do rebanho estudado.(AU)

Characterization of cattle tick fever in calves from the northwestern region of Minas Gerais, Brazil / Caracterização do complexo da Tristeza Parasitária Bovina em bezerros da região noroeste de Minas Gerais, Brasil

The present study aimed to characterize the importance of the Anaplasma marginale, Babesia bovis and Babesia bigemina in the genesis of cattle tick fever (CTF) among dairy calves in the northwest of Minas Gerais, Brazil. Blood samples from 300 calves were collected, followed by DNA extraction and nested PCR using oligonucleotide primers to amplify fragments of the semi-nested for the msp5 gene (A. marginale), sbp-4 (B. bovis) and rap-1a (B. bigemina) Among the examined calves, the prevalence of A. marginale was 55.6% (n=167/300), B. bovis was 4.0% (n=12/300) and B. bigemina was 15.3% (n=46/300), by PCR techniques. Parasitic forms of A. marginale and B. bigemina were found in 36,3% and 2,6% of the blood smears while B. bovis was not detected. There was a statistical difference between the positivity of infected animals in the age groups 1 (10-70 days) and (>70-300 days) for A. marginale and B. bigemina. A total of 15 calves with the classic symptoms of disease were examined, and the samples obtained were confirmed as a simple infection by A. marginale through semi-nested PCR. These results confirm bovine anaplasmosis as the primary cause of CTF among the calves of dairy cattle within the studied area.(AU)

O presente estudo teve como objetivo caracterizar a importância de Anaplasma marginale, Babesia bigemina e Babesia bovis na gênese da tristeza parasitária bovina em bezerros leiteiros do noroeste de Minas Gerais. Foram coletadas 300 amostras sanguíneas de bezerros, seguidas por extração de DNA e Nested- PCR utilizando oligonucleotídeos iniciadores que amplificam fragmentos dos genes sbp-4 (B. bovis) e rap-1a (B. bigemina) e a Semi-Nested para o gene msp5 (A. marginale). A prevalência de A. marginale foi 55,66% (167/300), B. bigemina, 15,33% (46/300) e B. bovis 4,0% (12/300) dos bezerros examinados. Formas parasitárias de A. marginale and B. bigemina foram encontradas em 36,33% e 2,66% dos esfregaços sanguíneos, enquanto B. bovis não foi detectado. Houve diferença estatística entre as prevalências de animais infectados nas faixas etárias 1 (10-70 dias) e 2 (>70-300 dias). Um total de 15 animais com sintomas clássicos da doença foram examinados, e as amostras foram confirmadas como uma infecção simples por A. marginale através da Nested-PCR. Esses resultados confirmam a anaplasmose bovina como a principal agente da tristeza parasitária bovina nos bezerros do rebanho estudado.(AU)

Influência do peri-parto sobre o perfil hematológico de vacas mestiças (holandês x zebu) mantidas sob pastejo rotativo / Influence of periparturient on the hematologic profile of crossbred cows (holstein x zebu) in pasture rotating

O objetivo do estudo foi conhecer a influência do período peri-parto sobre parâmetros avaliados no hemograma de vacas leiteiras. Foram utilizadas 25 vacas mestiças (Holandês x Zebu) e avaliados os seguintes parâmetros: volume globular, contagem de eritrócitos, concentração de hemoglobina, concentração de proteína plasmática total, concentração de fibrinogênio plasmático, leucometria global e específica. As amostras de sangue foram colhidas semanalmente, com início na 4ª semana anterior ao parto etérmino na 4ª semana após o parto. Para análise quantitativa dos dados, foi utilizada análise da variância (ANOVA), regressão linear e teste t de Student a 5% de probabilidade (p<0,05). Os resultados indicaram um decréscimo (p<0,05) na contagem de eritrócitos do pré-parto ao pós-parto, apesar destes valores permanecerem dentro dos limites de referência. No leucograma, observou-se leucocitose com neutrofilia, linfocitose e monocitose no período anterior ao parto, seguido de decréscimos das médias aos limites fisiológicos no pós-parto, efeitos estes característicos da estimulação adrenérgica, principalmente no momento do parto. Proteínas plasmáticas e fibrinogênio foram os parâmetros que sofreram menos alterações no período estudado. Com base nos resultados do presente estudo, ressalta-se a importância do acompanhamento dos parâmetros do leucograma no peri-parto a fim de caracterizar melhor a possibilidade de processos inflamatórios, infecciosos ou alterações relacionadas ao estresse do manejo inadequado, visto que no momento do peri-parto, as vacas tornam-se momentaneamente mais susceptíveis a enfermidades infecciosas. Por isso, a necessidade de um eficiente manejo profilático para evitar a ocorrência de doenças.(AU)

This study aimed to analyze the influence of peripartum on hematological parameters of dairy cows. We used 25 crossbred cows (Holstein x Zebu) to determine the following parameters: globular volume, erythrocyte count, hemoglobin content, total plasma protein, plasma fibrinogen, total leukocytes and leukometry specific. Blood collections were made every week starting at four weeks before the birth and ending at four weeks after parturition. For quantitative analysis of the various parameters studied was used analysis of variance (ANOVA), linear regression and Student t-test at 5% probability (p <0.05). The results showed fewer erythrocytes postpartum when compared with antepartum, although remaining in the reference values for the species. In the leukogram, leukocytosis was observed with neutrophilia, lymphocytosis and monocytosis in the period before parturition, followed by decreases to the physiological limits in the postpartum period, which are characteristic of adrenergic stimulation, especially at the time of parturition. Plasma proteins and fibrinogen were the parameters that suffered the least changes in the studied period. Based on the results of the present study, it is important to follow the leukogram parameters in the peripartum, in order to better characterize the possibility of inflammatory, infectious or stress-related changes in the inadequate management, since at the moment of peripartum, cows become momentarily more susceptible to infectious diseases. Therefore, the need for an efficient prophylactic management to avoid the occurrence of diseases.(AU)

Influência do peri-parto sobre o perfil hematológico de vacas mestiças (holandês x zebu) mantidas sob pastejo rotativo / Influence of periparturient on the hematologic profile of crossbred cows (holstein x zebu) in pasture rotating

O objetivo do estudo foi conhecer a influência do período peri-parto sobre parâmetros avaliados no hemograma de vacas leiteiras. Foram utilizadas 25 vacas mestiças (Holandês x Zebu) e avaliados os seguintes parâmetros: volume globular, contagem de eritrócitos, concentração de hemoglobina, concentração de proteína plasmática total, concentração de fibrinogênio plasmático, leucometria global e específica. As amostras de sangue foram colhidas semanalmente, com início na 4ª semana anterior ao parto etérmino na 4ª semana após o parto. Para análise quantitativa dos dados, foi utilizada análise da variância (ANOVA), regressão linear e teste t de Student a 5% de probabilidade (p<0,05). Os resultados indicaram um decréscimo (p<0,05) na contagem de eritrócitos do pré-parto ao pós-parto, apesar destes valores permanecerem dentro dos limites de referência. No leucograma, observou-se leucocitose com neutrofilia, linfocitose e monocitose no período anterior ao parto, seguido de decréscimos das médias aos limites fisiológicos no pós-parto, efeitos estes característicos da estimulação adrenérgica, principalmente no momento do parto. Proteínas plasmáticas e fibrinogênio foram os parâmetros que sofreram menos alterações no período estudado. Com base nos resultados do presente estudo, ressalta-se a importância do acompanhamento dos parâmetros do leucograma no peri-parto a fim de caracterizar melhor a possibilidade de processos inflamatórios, infecciosos ou alterações relacionadas ao estresse do manejo inadequado, visto que no momento do peri-parto, as vacas tornam-se momentaneamente mais susceptíveis a enfermidades infecciosas. Por isso, a necessidade de um eficiente manejo profilático para evitar a ocorrência de doenças.

This study aimed to analyze the influence of peripartum on hematological parameters of dairy cows. We used 25 crossbred cows (Holstein x Zebu) to determine the following parameters: globular volume, erythrocyte count, hemoglobin content, total plasma protein, plasma fibrinogen, total leukocytes and leukometry specific. Blood collections were made every week starting at four weeks before the birth and ending at four weeks after parturition. For quantitative analysis of the various parameters studied was used analysis of variance (ANOVA), linear regression and Student t-test at 5% probability (p <0.05). The results showed fewer erythrocytes postpartum when compared with antepartum, although remaining in the reference values for the species. In the leukogram, leukocytosis was observed with neutrophilia, lymphocytosis and monocytosis in the period before parturition, followed by decreases to the physiological limits in the postpartum period, which are characteristic of adrenergic stimulation, especially at the time of parturition. Plasma proteins and fibrinogen were the parameters that suffered the least changes in the studied period. Based on the results of the present study, it is important to follow the leukogram parameters in the peripartum, in order to better characterize the possibility of inflammatory, infectious or stress-related changes in the inadequate management, since at the moment of peripartum, cows become momentarily more susceptible to infectious diseases. Therefore, the need for an efficient prophylactic management to avoid the occurrence of diseases.

Longitudinal evaluation of humoral immune response and merozoite surface antigen diversity in calves naturally infected with Babesia bovis, in São Paulo, Brazil / Avaliação longitudinal da resposta immune humoral e diversidade de antígenos de superfície de merozoítos em bezerros naturalmente infectados com Babesia bovis, em São Paulo, Brasil

Babesiosis is an economically important infectious disease affecting cattle worldwide. In order to longitudinally evaluate the humoral immune response against Babesia bovis and the merozoite surface antigen diversity of B. bovis among naturally infected calves in Taiaçu, Brazil, serum and DNA samples from 15 calves were obtained quarterly, from their birth to 12 months of age. Anti-B. bovis IgG antibodies were detected by means of the indirect fluorescent antibody test (IFAT) and enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). The polymerase chain reaction (PCR) was used to investigate the genetic diversity of B. bovis, based on the genes that encode merozoite surface antigens (MSA-1, MSA-2b and MSA-2c). The serological results demonstrated that up to six months of age, all the calves developed active immunity against B. bovis. Among the 75 DNA samples evaluated, 2, 4 and 5 sequences of the genes msa-1, msa-2b and msa-2c were obtained. The present study demonstrated that the msa-1 and msa-2b genes sequences amplified from blood DNA of calves positive to B. bovis from Taiaçu were genetically distinct, and that msa-2c was conserved. All animals were serologically positive to ELISA and IFAT, which used full repertoire of parasite antigens in despite of the genetic diversity of MSAs.(AU)

A babesiose é uma doença infecciosa economicamente importante que afeta o gado bovino em todo o mundo. Para avaliar longitudinalmente a resposta imune humoral contra B. bovis e a diversidade genética de antígenos de superfície de merozoítos de B. bovis, entre bezerros naturalmente infectados em Taiaçu, Brasil, amostras de soro e DNA de 15 bezerros, foram obtidos trimestralmente, desde o nascimento até aos 12 meses de idade. Os anticorpos IgG para B. bovis foram detectados pelos testes de Imunofluorescência Indireta e Ensaio de Imunoadsorção Enzimático Indireto. A Reação em Cadeia da Polimerase foi utilizada para investigar a diversidade genética de B. bovis, com base em genes que codificam antígenos de superfície de merozoítos (MSA-1, MSA-2b e MSA-2c). Os resultados da sorologia demonstraram que até seis meses de idade todos os bezerros desenvolveram imunidade ativa contra B. bovis. Entre as 75 amostras de DNA avaliadas, foram obtidas 2, 4 e 5 sequências dos genes msa-1, msa-2b e msa-2c. O presente trabalho demonstrou que as sequências dos genes msa-1 e msa-2b amplificadas do DNA do sangue de amostras positivas a B. bovis de bezerros de Taiaçu foram geneticamente distintas, e msa-2c conservadas. Todos os animais foram soropositivos ao ELISA e ao IFAT, os quais utilizaram o repertório completo de antígenos parasitários, apesar da diversidade genética dos MSAs.(AU)

Detecção e tratamento de otite por Rhabditis blumi em bovinos da região Norte do Brasil / Detection and treatment of otitis by Rhabditis blumi in cattle of northern Brazil

O presente estudo teve como objetivo descrever a ocorrência de otite parasitária causada por Rhabditis blumi em bovinos leiteiros de raça Gir de uma fazenda da região Norte do Brasil. Foram coletadas amostras de 42 bovinos por swab e lavado dos condutos auditivos externos (CAE). Ao exame clínico, 9,5% (4/42) dos bovinos apresentavam sintomatologia nervosa, como leve a moderada rotação da cabeça, apatia, flacidez dos lábios e ptose palpebral unilateral, alopecia das regiões da cabeça e cupim, causados pelo desconforto e prurido da região auricular, alteração na mastigação e acúmulo de alimento na cavidade oral. Adicionalmente, 71,4% (30/42) dos abovinos mostraram a presença do parasita no cerúmen dos condutos auditivos. À análise microscópica do material do saco conjuntival foi observado presença do parasita em 90% (9/10) dos bovinos avaliados. Os 30 bovinos positivos para Rhabditis spp. foram distribuídos aleatoriamente em três grupos de 10 animais: (G1) Bovinos controle, (G2) Bovinos tratados com ivermectina 1% pour on e (G3) Bovinos submetidos a lavado dos condutos auditivos externos (CAE). Cada tratamento foi repetido três vezes com intervalo de sete dias. No G1 os 10 bovinos mantiveram-se infectados durante todo o estudo. No G2 20% dos bovinos foram negativos após os dois primeiros tratamentos, porém, mostraram-se positivos na terceira avaliação. No G3 todos os bovinos mantiveram-se positivos, sendo observada apenas diminuição da carga parasitária. A identificação por análise molecular por meio de fragmentos amplificados da expansão D2/D3 do 28S rDNA confirmou a presença apenas da espécie Rhabditis blumi nos animais. Baseado nas observações clínicas, morfológicas e moleculares pode-se relatar o primeiro caso de R. blumi em bovinos da raça Gir no Estado do Pará, através da compra de animais oriundos de áreas onde a otite parasitária tem sido diagnosticada, principalmente de Minas Gerais, para formar animais mestiços (Gir x Holandês). Desta forma ressalta-se a importância do exame clínico prévio dos animais a serem transferidos para outras propriedades ou regiões. Este relato também parece ser o primeiro sobre a presença de R. blumi no saco conjuntival de bovinos. O tratamento com ivermectina no G2 não surtiu melhora clínica dos bovinos.(AU)

This study aimed to describe the occurrence of parasitic otitis caused by Rhabditis blumi in dairy cattle of the Gir race from a farm in northern Brazil. Forty-two samples were collected from cattle by swab washed from the external auditory canal (EAC). On clinical examination, in 71.4% (30/42) of the cattle the parasite was found in the cerumen of the ear canal, along with alopecia of head and hump caused by discomfort and itching of the auricular region. At microscopic analysis of material from the conjunctival sac the parasite was found in 90% (9/10) of the evaluated cattle. In addition, 9.5% (4/42) of the cattle showed nervous symptoms, such as mild to moderate rotation of the head, apathy, flaccid lips and unilateral ptosis, change in chewing and food accumulation in the oral cavity. Thirty cattle positive for Rhabditis spp. were randomly divided into three groups of 10 animals each: (G1) Cattle Control, (G2) Cattle treated with ivermectin 1% pour-on, and (G3) Cattle undergoing wash of the external auditory canal (EAC). Each treatment was repeated three times with intervals of seven days. In G1, 10 cattle remained infected throughout the study. In G2, 20% of the cattle were negative after the first two treatments, however were positive at the third evaluation. In G3, all cattle remained positive, but with decrease in parasite load. Identification by molecular analysis of amplified fragments through the expansion D2/D3 28S rDNA confirmed the presence of only Rhabditis blumi. Based on clinical, morphologic and molecular examination, it appears to be the first report of the occurrence of R. blumi infection in Gir cattle in the State of Pará, due to the purchase of cattle from areas where parasitic otitis has been diagnosed, as from Minas Gerais, to produce crossbred animals (Gir x Holstein). This emphasizes the importance of prior clinical examination by the veterinary service in order to transfer only healthy animals to other properties or regions. This appears also to be the first report on R. blumi infection of the conjunctival sac in cattle. Treatment with ivermectin in G2 did not produce clinical improvement.(AU)

Detecção e tratamento de otite por Rhabditis blumi em bovinos da região Norte do Brasil / Detection and treatment of otitis by Rhabditis blumi in cattle of northern Brazil

O presente estudo teve como objetivo descrever a ocorrência de otite parasitária causada por Rhabditis blumi em bovinos leiteiros de raça Gir de uma fazenda da região Norte do Brasil. Foram coletadas amostras de 42 bovinos por swab e lavado dos condutos auditivos externos (CAE). Ao exame clínico, 9,5% (4/42) dos bovinos apresentavam sintomatologia nervosa, como leve a moderada rotação da cabeça, apatia, flacidez dos lábios e ptose palpebral unilateral, alopecia das regiões da cabeça e cupim, causados pelo desconforto e prurido da região auricular, alteração na mastigação e acúmulo de alimento na cavidade oral. Adicionalmente, 71,4% (30/42) dos abovinos mostraram a presença do parasita no cerúmen dos condutos auditivos. À análise microscópica do material do saco conjuntival foi observado presença do parasita em 90% (9/10) dos bovinos avaliados. Os 30 bovinos positivos para Rhabditis spp. foram distribuídos aleatoriamente em três grupos de 10 animais: (G1) Bovinos controle, (G2) Bovinos tratados com ivermectina 1% pour on e (G3) Bovinos submetidos a lavado dos condutos auditivos externos (CAE). Cada tratamento foi repetido três vezes com intervalo de sete dias. No G1 os 10 bovinos mantiveram-se infectados durante todo o estudo. No G2 20% dos bovinos foram negativos após os dois primeiros tratamentos, porém, mostraram-se positivos na terceira avaliação. No G3 todos os bovinos mantiveram-se positivos, sendo observada apenas diminuição da carga parasitária. A identificação por análise molecular por meio de fragmentos amplificados da expansão D2/D3 do 28S rDNA confirmou a presença apenas da espécie Rhabditis blumi nos animais. Baseado nas observações clínicas, morfológicas e moleculares pode-se relatar o primeiro caso de R. blumi em bovinos da raça Gir no Estado do Pará, através da compra de animais oriundos de áreas onde a otite parasitária tem sido diagnosticada, principalmente de Minas Gerais, para formar animais mestiços (Gir x Holandês)[...](AU)

This study aimed to describe the occurrence of parasitic otitis caused by Rhabditis blumi in dairy cattle of the Gir race from a farm in northern Brazil. Forty-two samples were collected from cattle by swab washed from the external auditory canal (EAC). On clinical examination, in 71.4% (30/42) of the cattle the parasite was found in the cerumen of the ear canal, along with alopecia of head and hump caused by discomfort and itching of the auricular region. At microscopic analysis of material from the conjunctival sac the parasite was found in 90% (9/10) of the evaluated cattle. In addition, 9.5% (4/42) of the cattle showed nervous symptoms, such as mild to moderate rotation of the head, apathy, flaccid lips and unilateral ptosis, change in chewing and food accumulation in the oral cavity. Thirty cattle positive for Rhabditis spp. were randomly divided into three groups of 10 animals each: (G1) Cattle Control, (G2) Cattle treated with ivermectin 1% pour-on, and (G3) Cattle undergoing wash of the external auditory canal (EAC). Each treatment was repeated three times with intervals of seven days. In G1, 10 cattle remained infected throughout the study. In G2, 20% of the cattle were negative after the first two treatments, however were positive at the third evaluation. In G3, all cattle remained positive, but with decrease in parasite load. Identification by molecular analysis of amplified fragments through the expansion D2/D3 28S rDNA confirmed the presence of only Rhabditis blumi. Based on clinical, morphologic and molecular examination, it appears to be the first report of the occurrence of R. blumi infection in Gir cattle in the State of Pará, due to the purchase of cattle from areas where parasitic otitis has been diagnosed, as from Minas Gerais, to produce crossbred animals (Gir x Holstein). This emphasizes the importance of prior clinical examination by the veterinary service in order to transfer only healthy animals to other properties or regions[...](AU)

Risk factors related to resistance to Rhipicephalus (Boophilus) microplus and weight gain of heifers / Fatores de risco relacionados à resistência a Rhipicephalus (Boophilus) microplus e ganho de peso de bezerras

The aim of the present study was to evaluate the influence of age and genetics in dairy heifers on resistance to the cattle tick Rhipicephalus (Boophilus) microplus and correlate these parameters with weight gain. Twenty-two heifers were evaluated from birth up to two years of age. Resistance to the cattle tick was evaluated by counting the number of engorged female ticks and subjective qualification of the larvae and nymph infestation. The animals were weighted in the first 24 hours after birth and at six, 12, 18 and 24 months of age. The average tick count and weight gain were compared by Tukeys test at 5% significance. Subsequently, linear regression was performed to verify the strength of the association between the risk factors age and genetics and infestation by R. (B.) microplus. Age and genetics were both significant risk factors for R. (B.) microplus infestation in heifers. Between the third and sixth months of age, the animals showed a window of susceptibility to R. (B.) microplus. Regardless of age, Bos taurus heifers had higher infestations than Bos indicus, crossbred F1 (½ B. taurus x ½ B. indicus) and crossbred Gir-Holstein (Girolando) (5/8 B. taurus x 3/8 B. indicus) heifers. B. taurus heifers were heavier than B. indicus heifers at birth and had significantly greater weight gain (p 0.01).(AU)

O objetivo do estudo foi conhecer a influência da idade e da genética sobre a resistência ao carrapato Rhipicephalus (Boophilus) microplus e correlacionar estes parâmetros com ganho de peso de bezerras de origem leiteira. Foram avaliadas 22 bezerras desde o nascimento até dois anos de idade. A avaliação da resistência foi realizada por meio da contagem de teleóginas ingurgitados e qualificação subjetiva da infestação por larvas e ninfas. Os animais foram pesados nas primeiras 24 horas pós-nascimento, aos seis, 12, 18 e 24 meses de idade. A comparação das médias das contagens de carrapatos e ganho de peso foi realizada pelo teste Tukey a 5% de significância. Posteriormente foi realizada regressão linear para verificar a força da associação entre os fatores de risco idade e genética e a infestação por R. (B.) microplus. A idade e a genética constituíram importantes fatores de risco para infestação por R. (B.) microplus nas bezerras. Entre o terceiro e sexto mês de idade, os animais apresentaram uma janela de suscetibilidade ao carrapato R. (B.) microplus. Independente da idade, bezerras Bos taurus foram mais infestadas do que bezerras Bos indicus, mestiças F1 (½ B. taurus x ½ B. indicus) e Girolandas (5/8 B. taurus x 3/8 B. indicus). Além de nascerem mais pesadas, as bezerras B. taurus demonstraram ganho de peso significativamente maior (p 0.01) do que as bezerras B. indicus.(AU)

Outbreak of anaplasmosis associated with the presence of different Anaplasma marginale strains in dairy cattle in the states of São Paulo and Goiás, Brazil / Surto de anaplasmose associado com a presença de diferentes cepas de Anaplasma marginale em gado leiteiro dos estados de São Paulo e Goiás, Brasil

The present study reports the genetic diversity of Anaplasma marginale during anaplasmosis outbreaks in rural properties of the states of Goiás and São Paulo, Brazil. Mortality rates of 3.5% (37/1,050) in calves, 4.7% (45/954) in heifers and 1.1% (25/2,200) in lactating cows were observed in a cattle herd of the municipality of Mambaí, state of Goiás, central-western Brazil. In a cattle herd from the municipality of Lins, state of São Paulo, in southeastern Brazil, none of the animals died, despite presenting clinical signs suggestive of bovine anaplasmosis and exhibiting a drastic decrease in milk production. Thus, blood samples were collected from 100 animals with clinical signs suggestive of bovine anaplasmosis in the municipalities of Mambaí and Lins. Based on the microsatellite structure of the MSP1a of A. marginale, the genotypes E and H were observed in Lins, and the C, D and E genotypes were found in Mambaí. The analysis of the tandem repeat structures of the MSP1a showed nine different strains (τ-10 -15, α-β2, α-β3-13, α-β2 192, τ-β-100, α-β2-Γ, 193-β-100, 191-13-Γ and 191-13-18) in Lins and two (α-β3-Γ and E-F-φ2-F2) in Mambaí. Three new tandem repeats of MSP1a (191, 192 and 193) were described. The τ-10-15 and α-β3-Γ strains were predominantly associated with the occurrence of clinical anaplasmosis and mortality in calves, heifers and lactating cows.(AU)

O presente estudo relata a diversidade genética de Anaplasma marginale durante surtos de anaplasmose bovina no Brasil em propriedades localizadas nos Estados de Goiás e São Paulo. No rebanho bovino de Mambaí, Estado de Goiás, Centro-oeste do Brasil, observaram-se taxas de mortalidade de 3,5% (37/1050) nos bezerros; 4,7% (45/954) nas novilhas e 1,1% (25/2200) nas vacas em lactação. No rebanho bovino de Lins, Estado de São Paulo, Sudeste do Brasil, embora os animais tenham apresentado sinais clínicos sugestivos de anaplasmose bovina, culminando em redução drástica da produção leiteira, nenhum animal veio a óbito. Assim, amostras de sangue de 100 bovinos com sinais clínicos sugestivos de anaplasmose foram coletadas em Mambaí-GO e Lins-SP. Baseando-se na estrutura do microssatélite da MSP1a de A. marginale, observou-se a presença dos genótipos E e H em Lins e C, D e E em Mambaí. A análise da estrutura em “tandem repeats” da MSP1a mostrou nove diferentes estirpes (τ-10 -15, α-β2, α-β3-13, α-β2 192, τ-β-100, α-β2-Γ, 193-β-100, 191-13-Γ e 191-13-18) em Lins e duas (α-β3-Γ e E-F-φ2-F2) em Mambaí. Três novos “tandem repeats” da MSP1a (191, 192 e 193) foram descritos. Foi observado predomínio das estirpes τ-10-15 e α-β3-Γ associado à ocorrência de anaplasmose clínica e mortalidade em bezerras, novilhas e vacas em lactação.(AU)

Serological detection of Anaplasma marginale, Babesia bovis and Babesia bigemina in beef cattle of the northern and central-western regions of Brazil / Detecção sorológica de Anaplasma marginale, Babesia bovis e Babesia bigemina em bovinos de corte das regiões Norte e Centro-Oeste do Brasil

The objective of this study was to assess the occurrence of antibodies against Anaplasma marginale, Babesia bovis and Babesia bigemina in beef cattle of the northern and central-western regions of Brazil. A total of 1703 blood samples were collected from cattle from 100 farms distributed among 37 municipalities in the states of Mato Grosso, Pará and Tocantins. The search for antibodies was conducted using an indirect enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), and antibodies were observed for B. bovis, B. bigemina and A. marginale in cattle from Mato Grosso, Tocantins and Pará at rates of 99%, 90% and 41%; 99%, 70% and 52%; and 97%, 97% and 75%, respectively. The results show that the analyzed regions exhibit enzootic stability for infection with B. bovis and B. bigemina, whereas the same result was not observed with A. marginale.(AU)

O objetivo deste estudo foi verificar a ocorrência de anticorpos contra Anaplasma marginale, Babesia bovis e Babesia bigemina em bovinos de corte das regiões Norte e Centro Oeste do Brasil. Foram selecionadas randomicamente 1703 amostras de sangue de bovinos em 100 propriedades rurais distribuídos em 37 municípios dos estados do Mato Grosso, Pará e Tocantins. A pesquisa de anticorpos foi realizada por meio do Ensaio de Imunoadsorção Enzimático (ELISA) Indireto. A ocorrência de anticorpos observada para B. bovis, B. bigemina e A. marginale em bovinos dos estados do Mato Grosso, Tocantins e Pará foi 99%, 90% e 41%; 99%, 70% e 52% e 97%, 97% e 75%, respectivamente. Os resultados mostram que as regiões analisadas apresentam estabilidade enzoótica para a infecção por B. bovis e B. bigemina, não sendo observado o mesmo para Anaplasma marginale.(AU)

Molecular and serological detection of Babesia Bovis and Babesia Bigemina in cattle in the Rio de Janeiro, Brazil / Detecção molecular e sorológica de Babesia Bovis e Babesia Bigemina em bovinos no Rio de Janeiro, Brasil

Bovine babesiosis is an important disease of cattle where Rhipicephalus microplus acts as a vector for the two causal organisms Babesia bovis and Babesia bigemina. A total of 22 calves were randomly monitored during three years by semi-nested PCR assay and ELISA test to determine prevalence of B. bovis and B. bigemina. The overall prevalence of B. bovis and B. bigemina was 30% and 35% by nested PCR (nPCR), and 70% and 75% by ELISA, respectively. Statistical analysis of the characteristics of animals showed that age and tick infestations (p<0.05) might play an important role in the spread of babesiosis as animal less than 6 months old. A high correlation (Kappa index of 0.70 for B. bovis and 0.65 for B. bigemina, respectively) between serological and molecular tests suggests that the combination of the utilized techniques in the present study is suitable for babesiosis diagnosis in an endemic unstable area.(AU)

A babesiose bovina é uma importante doença do gado, onde Rhipicephalus microplus atua como um vetor para os dois organismos causais Babesia bovis e Babesia bigemina. Um total de 22 animais foram aleatoriamente e monitorados durante três anos, por nested PCR e teste de ELISA para determinar a prevalência de B. bovis e B. bigemina. A prevalência global de B. bovis e B. babesia foi de 30% e 35%, em nPCR, e 70% e 75% por ELISA, respectivamente. A análise estatística das características dos animais mostrou que a idade e carrapatos (p <0,05) podem desempenhar um papel importante na propagação de babesiose em animais com menos de 6 meses de idade. Uma correlação elevada (índice Kappa de 0,70 para B. bovis e B. babesia 0,65, respectivamente) entre os testes sorológicos e moleculares sugere que a combinação das técnicas utilizadas no presente estudo é adequado para o diagnóstico da babesiose numa área de instabilidade endémica.(AU)

Estudo longitudinal dos fatores de risco para anaplasmose e transmissão transplacentária em rebanhos bovinos / Longitudinal study of risk factors for anaplasmosis and transplacental transmission in herd cattle

Anaplasma marginale, bacteria that occurs in tropical and subtropical areas throughout the world, isresponsible for causing a disease that is one of the most constraint to cattle production in many countries.The present work aimed to investigate potential risk factors for anaplasmosis and the occurrence oftransplacental transmission by molecular and serological assays in cattle. A total of 22 calves wererandomly sampled and monitored during four years; the presence of infection/exposure to A. marginalewas assessed by a semi-nested PCR assay targeting msp-5 gene of A. marginale, indirect ELISA fordetection of IgG antibodies to A. marginale and blood smears. The A. marginale infection prevalencedata were analyzed in relation to risk factors, using chi-squared, odds ratio and multiple logisticregressions. DNA amplification results revealed a frequency of infection with A. marginale of 41%(9/22) in the newborn calves before colostrum suckling. However, only 14% (3/22) of newborn calveswere seropositive for A. marginale. All calves were positive to A. marginale by PCR and microscopicexamination of blood smears before the two and fourth month of age, respectively. The main risk factorsassociated with seroprevalence were breed (OR=36.2), tick infestation (OR=3.44) and stocking density(OR=3.28). The results indicated that exposure of cattle to A. marginale was common in dairy herdsand endemic instability situation probably is due to inadequate antibody production in cows or geneticvariability of pathogen. This study still demonstrated that in addition to transmission of A. marginaleby ticks and flies, the transplacental transmission is very important and should be the target of diseasecontrol programs in Brazil.

Anaplasma marginale, bactéria que ocorre em regiões tropicais e subtropicais do mundo, é responsávelpor causar uma das doenças que mais restringem a criação de bovinos em diversos países. O presentetrabalho teve como objetivo investigar potenciais fatores de risco para a anaplasmose e a ocorrênciade transmissão transplacentária por ensaios moleculares e sorológicos em bovinos. Um total de 22animais foram amostrados e acompanhados durante quatro anos; a presença de infecção / exposiçãoa A. marginale, foi avaliada pelo semi-nested PCR alvejando o gene MSP-5 de A. marginale, peloELISA indireto para a detecção de anticorpos IgG anti-A. marginale e esfregaço sanguíneo. Os dadosde prevalência de infecção por A. marginale foram analisados em relação aos fatores de risco, usando x², odds ratio e regressão logística múltipla. A amplificação de DNA revelou uma frequência de infecçãopor A. marginale de 41% (9/22) nos bezerros recém-nascidos antes de ingerirem colostro. No entanto,apenas 14% (3/22) dos bezerros recém-nascidos eram soropositivos para A. marginale. Todos osbezerros foram positivos para A. marginale por PCR e no exame microscópico de esfregaço sanguíneo,antes do segundo e quarto mês de idade, respectivamente. Os principais fatores de risco associadosa soroprevalência foram raça (OR = 36,2), infestação por carrapatos (OR = 3,44) e densidade (OR =3,28). Os resultados indicaram que a exposição de gado para A. marginale era comum nos rebanhosleiteiros e a situação de instabilidade endêmica provavelmente se faz devido à produção inadequada deanticorpos em vacas ou a variabilidade genética do patógeno. Este estudo demonstra ainda que, além datransmissão de A. marginale por carrapatos e moscas, a transmissão transplacentária é muito importantee deve ser alvo de programas de controle da doença no Brasil.

Estudo longitudinal dos fatores de risco para anaplasmose e transmissão transplacentária em rebanhos bovinos / Longitudinal study of risk factors for anaplasmosis and transplacental transmission in herd cattle

Anaplasma marginale, bacteria that occurs in tropical and subtropical areas throughout the world, isresponsible for causing a disease that is one of the most constraint to cattle production in many countries.The present work aimed to investigate potential risk factors for anaplasmosis and the occurrence oftransplacental transmission by molecular and serological assays in cattle. A total of 22 calves wererandomly sampled and monitored during four years; the presence of infection/exposure to A. marginalewas assessed by a semi-nested PCR assay targeting msp-5 gene of A. marginale, indirect ELISA fordetection of IgG antibodies to A. marginale and blood smears. The A. marginale infection prevalencedata were analyzed in relation to risk factors, using chi-squared, odds ratio and multiple logisticregressions. DNA amplification results revealed a frequency of infection with A. marginale of 41%(9/22) in the newborn calves before colostrum suckling. However, only 14% (3/22) of newborn calveswere seropositive for A. marginale. All calves were positive to A. marginale by PCR and microscopicexamination of blood smears before the two and fourth month of age, respectively. The main risk factorsassociated with seroprevalence were breed (OR=36.2), tick infestation (OR=3.44) and stocking density(OR=3.28). The results indicated that exposure of cattle to A. marginale was common in dairy herdsand endemic instability situation probably is due to inadequate antibody production in cows or geneticvariability of pathogen. This study still demonstrated that in addition to transmission of A. marginaleby ticks and flies, the transplacental transmission is very important and should be the target of diseasecontrol programs in Brazil.(AU)

Anaplasma marginale, bactéria que ocorre em regiões tropicais e subtropicais do mundo, é responsávelpor causar uma das doenças que mais restringem a criação de bovinos em diversos países. O presentetrabalho teve como objetivo investigar potenciais fatores de risco para a anaplasmose e a ocorrênciade transmissão transplacentária por ensaios moleculares e sorológicos em bovinos. Um total de 22animais foram amostrados e acompanhados durante quatro anos; a presença de infecção / exposiçãoa A. marginale, foi avaliada pelo semi-nested PCR alvejando o gene MSP-5 de A. marginale, peloELISA indireto para a detecção de anticorpos IgG anti-A. marginale e esfregaço sanguíneo. Os dadosde prevalência de infecção por A. marginale foram analisados em relação aos fatores de risco, usando x², odds ratio e regressão logística múltipla. A amplificação de DNA revelou uma frequência de infecçãopor A. marginale de 41% (9/22) nos bezerros recém-nascidos antes de ingerirem colostro. No entanto,apenas 14% (3/22) dos bezerros recém-nascidos eram soropositivos para A. marginale. Todos osbezerros foram positivos para A. marginale por PCR e no exame microscópico de esfregaço sanguíneo,antes do segundo e quarto mês de idade, respectivamente. Os principais fatores de risco associadosa soroprevalência foram raça (OR = 36,2), infestação por carrapatos (OR = 3,44) e densidade (OR =3,28). Os resultados indicaram que a exposição de gado para A. marginale era comum nos rebanhosleiteiros e a situação de instabilidade endêmica provavelmente se faz devido à produção inadequada deanticorpos em vacas ou a variabilidade genética do patógeno. Este estudo demonstra ainda que, além datransmissão de A. marginale por carrapatos e moscas, a transmissão transplacentária é muito importantee deve ser alvo de programas de controle da doença no Brasil.(AU)

Serological occurrence of Babesia bovis, Babesia bigemina and Anaplasma marginale in cattle and water buffaloes of Pará, Brazil / Ocorrência sorológica de Babesia bovis, Babesia bigemina e Anaplasma marginale em bovinos e bubalinos no estado do Pará, Brasil

Among the major diseases that affect cattle and water buffaloes, the tick-borne diseases are detaches. Bovine babesiosis caused by Babesia bigemina and Babesia bovis, and anaplasmosis, caused by Anaplasma marginale rickettsia, are of great economic importance to cattle diseases. The aim of this study was to compare the serologic occurrence for the agents of tick fever in cattle and water buffaloes in the middle region southeast of the state of Pará, northern Brazil. Blood samples were collected from 679 beef cattle (Nelore) and 430 water buffaloes (Mediterranean and Murrah) in eight cities of middle region southeast of Pará, Brazil. The research of antibodies IgG against A. marginale, B. bigemina and B. bovis was performed through of the indirect enzyme-linked immunosorbent assay (iELISA). Cattle compared to buffaloes showed higher occurrence of antibodies against B. bovis (97,34% and 33.95%), B. bigemina (97,34% and 27.21%) and A. marginale (74,52% and 47.90%), respectively. The probability of cattle are serologically positive to A. marginale, B. bovis and B. bigemina was 1,5 (74,52/47,90%), 3,58 (97,34/27,21%) and 2,87 (97,34/33,95%) times higher than that buffaloes, respectively. These results suggest that buffaloes may be more resistant to vectors being subjected to a lower rate of infection than cattle.(AU)

Dentre as principais enfermidades que acometem bovinos e bubalinos, destacam-se as doenças transmitidas por carrapatos. As babesioses bovinas, causadas por Babesia bigemina e Babesia bovis, e a anaplasmose, causada pela rickettsia Anaplasma marginale, são doenças de grande importância econômica para a bovinocultura. O objetivo deste trabalho foi comparar a ocorrência sorológica para os agentes da Tristeza Parasitária em bovinos e bubalinos na mesorregião sudeste do estado do Pará, região norte do Brasil. Foram efetuadas coletas de sangue de 679 bovinos de corte (Nelore) e 430 bubalinos (Mediterrâneo e Murrah) em oito cidades da mesorregião do sudeste do estado do Pará, Brasil. A pesquisa de anticorpos da classe IgG contra A. marginale, B. bigemina e B. bovis foi realizada por Ensaio de Imunoadsorção Enzimático Indireto (iELISA). Bovinos, quando comparados a bubalinos, apresentaram maior ocorrência de anticorpos contra B. bovis (97,34% e 33.95%), B. bigemina (97,34% e 27.21%) e A. marginale (74,52% e 47.90%), respectivamente. O número de bovinos soropositivos para A. marginale, B. bovis e B. bigemina foi 1,5 (74,52/47,90%), 3,58 (97,34/27,21%) e 2,87 (97,34/33,95%) vezes maior do que os bubalinos, respectivamente. Os resultados permitem concluir que, habitando a mesma mesorregião e sendo submetidos a mesma pressão de vetores e agentes, os bubalinos apresentaram ocorrência...(AU)

Detecção sorológica e molecular de Anaplasma marginale em búfalos na Ilha de Marajó, Pará / Serological and molecular detection of Anaplasma marginale in water buffaloes on Marajó Island, State of Pará, Brazil

O objetivo do estudo foi testar a prevalência sorológica e molecular de Anaplasma marginale em búfalos do municipio de Soure, Ilha de Marajó, estado do Pará, Brasil. Para a pesquisa sorologica foram selecionados randomicamente 800 animais e para a pesquisa molecular 50 destes animais foram aleatoriamente escolhidos. Para quantificar a prevalência sorológica utilizou-se o ensaio de imunoadsorção enzimático indireto (iELISA) com antígeno total contendo proteínas de superfície externa e para quantificar a prevalência molecular utilizou-se a reação em cadeia da polimerase (PCR), envolvendo a amplificação de fragmento gênico da proteína de superfície maior 5 (MSP5). A prevalência de animais positivos no ELISA para A. marginale foi de 25% (200/800). Na PCR foi detectada a presença de A. marginale em 2% (1/50) dos animais. Embora apenas um animal tenha sido positivo na PCR, observou-se que o mesmo foi negativo no ELISA. A presença do agente, mesmo em baixa prevalência, mostra que os bubalinos podem funcionar como um importante reservatório desse patógeno para os rebanhos bovinos da região norte do Brasil.(AU)

The aim of the study was to test the molecular and serological prevalence of Anaplasma marginale in water buffaloes of the Marajó Island, State of Pará, Brazil. For serologic research were randomly selected 800 buffaloes and for molecular research 50 of these animals were randomly chosen. To quantify the serological prevalence we used the indirect enzyme linked immunosorbent assay (iELISA) with total antigen containing proteins outer surface. To quantify the prevalence molecular was used the polymerase chain reaction (PCR) involving gene amplification fragment larger surface protein 5 (MSP5). The prevalence of positive animals in iELISA was 25% (200/800). In the PCR we detected the presence of A. marginale in 2% (1/50) of animals. Although only one animal was positive in PCR, we found that it was negative in ELISA. The presence of the agent, even in low prevalence, shows that buffaloes can act as an important reservoir for transmission of the pathogen to cattle in northern Brazil.(AU)