Imuno-expressão de COX-2, caspase3, Ki67e survivin em tumor venéreo transmissível canino / COX-2, caspase 3, Ki67 and survivin immunoexpresion in canine transmissible venereal tumor / Imunoexpresión de COX-2, caspase 3, ki67 y survivin en tumor venéreo transmisible canino

O tumor venéreo transmissível (TVT) é uma neoplasia de células redondas de aspecto plasmocitóide ou linfocitóide. O tumor apresenta várias particularidades. Nos últimos anos, tem-se evidenciado aumento progressivo de tumores com elevados porcentuais de agressividade e variável resposta à quimioterapia, inclusive resistência; desta forma, tentar predizer este comportamento torna-se importante para auxiliar decisões quanto ao prognóstico e manejo do tumor antes e durante a terapia. Sabendo-se que a utilização da survivina, bem como da caspase-3, do Ki-67 e da COX-2 são importantes para auxiliar no prognóstico, no manejo do paciente e na monitoração da doença durante e após a terapia, este trabalho visou observar em TVTs diferenças na expressão dos imunomarcadores acima citados. Para tal, foi utilizada a técnica de imunocitoquímica em preparações citológicas de 30 tumores de cães atendidos no Hospital Veterinário da FMVZ-UNESP, Campus de Botucatu e os dados analisados pelo teste de spearman (p<0,05). A positividade da survivina variou de 96,15 a 100% em 200 células contadas por amostra, sendo sua principal localização citoplasmática. A marcação pelo anticorpo anti-caspase-3 nos 30 casos de TVT foi baixa, variando de 0 a 6,5% de positividade em 200 células contadas. Em 21 casos, foi possível observar marcação pelo Ki-67, e houve uma média de positividade de 15,57%. Finalmente, em todos os casos houve expressão de COX-2 com valores que variaram de 90,66 a 100% de positividade em 200 células contadas, exceto por um caso que apresentou 24,5% de positividade. Em conclusão, é possível que o emprego destes marcadores no TVT possa auxiliar no estabelecimento de um tratamento diferenciado, pelo que recomendamos, avaliar sua expressão comparando com o tipo de resposta à terapia.

Transmissible venereal tumor is a neoplasm of round cell plasmocitoide and linfocitoide aspect. The tumor present several particularities, for example, in the recent years has been evidenced a progressive increase of tumor with high percentages of aggressiveness and different response to chemotherapy, including resistance. Research this comportment to predict this behavior becomes important to aid decision as to the prognosis and management of the tumor before and during therapy. It is know that the use of the survivin, caspase-3, Ki67 and COX-2 are important to aid prognosis, the patient management and monitoring the tumor during and after therapy. This study aimed to identify differences in the expression of the above mentioned immunomarkers in TVT. For this purpose, the technique of immunocytochemistry on cytological preparations of 30 tumors of dogs examined at the Veterinary Hospital FMVZ-UNESP, Botucatu was used and the date analyzed by the spearman test (p<0,05). The survivin positivity ranged from 96.15 to 100% in 200 cells counted per sample, and its main cytoplasmic localization. The labeling by the anti-caspase-3 in 30 cases of TVT was low, ranging from 0 to 6.5% positivity in 200 cells counted. In 21 cases it was observed by Ki 67 labeling and there was an average of 15 57% positivity. Finally, in all cases there was expression of COX-2 with values ranging from 90.66 to 100% positivity in 200 cells counted, except for one case which showed 24.5% positivity. In conclusion, it is possible that the use of these markers in the TVT may assist in establishing a differential treatment, and we recommend, evaluate its expression compared with the type of response to therapy.

El tumor venéreo transmisible (TVT) es una neoplasia de células redondas de aspecto plasmocitóide o linfocitoide. El tumor presenta varias particularidades, por ejemplo, en los últimos años se ha evidenciado aumento progresivo de tumores con elevados porcentajes de agresividad y variable respuesta a la quimioterapia, inclusive resistencia; desta forma, intentar predecir este comportamiento se torna importante para auxiliar decisiones relacionadas con el pronóstico y manejo del tumor antes y durante de la terapia. Se sabe que la utilización de la survivina, así como la caspasa-3, del Ki-67 y de la COX-2, son importantes para auxiliar el pronóstico, manejo del paciente y elmonitoramiento de un tumor durante la terapia, así, este trabajo busco identificaren TVTs la diferencia en la expresión de losinmunomarcadores citados. Para ello, fue utilizada la técnica de inmunocitoquímica en preparaciones citológicas de 30 tumores de caninos atendidos en el Hospital Veterinario de la FMVZ-UNESP, Campus Botucatu y los datos análizados a través del test de spearman (p<0,05). La positividad de la survivina vario de 96,15 %a 100% en 200 células contadas. La marcación anti-caspasa -3 en los 30 casos de TVT fue baja variando de 0% a 6,5%. En 21 casos fue posible observar marcación por el Ki67, y hubo una media de positividad de 15,57%. Finalmente, en todos los casos hubo expresión de COX-2 con valores que variaron de 99,66 % a 100% de positividad en 200 células contadas, excepto por un caso que presento 24,5 % de positividad. En conclusión, es posible que el empleo de estos marcadores en TVT puedan auxiliar el establecimiento de un tratamiento diferenciado, por lo que recomendamos, evaluar su expresión comparada con el tipo de respuesta a la terapia.

Imunoexpressão e citogenética do tumor venéreo transmissível natural no cão

O tumor venéreo transmissível (TVT) caracteriza-se por ser uma neoplasia de origem controversa. Baseado nos resultados obtidos anteriormente por nosso grupo de pesquisa, dos três tipos morfológicos do TVT, os de morfologia plasmocitóide são mais agressivos. De acordo com as características morfológicas do TVT, a resposta à terapia é variável e sabendo-se que a utilização da survivina, bem como da caspase-3, do Bcl-6, do Bcl-2, do Ki-67 e da COX-2 são importantes para auxiliar no prognóstico, no manejo do paciente e na monitoração da doença durante e após a terapia, este projeto visou, além de estudos citogenéticos, observar se há diferenças na expressão dos imunomarcadores acima citados, nos TVTs plasmocitóides e linfocitóides. Para tal, foram utilizados 30 cães atendidos no Hospital Veterinário da FMVZ-UNESP, Campus de Botucatu. Devido baixa incidência de TVT linfocitóide no HV-UNESP-Botucatu, não foi possível fazer correlações entre os tipos plasmocitóide e linfocitóide. A positividade da survivina variou de 96,15 a 100% em 200 células contadas e, em dois casos, a marcação da survivina foi citoplasmática e nuclear, nos outros casos a marcação foi apenas citoplasmática. A marcação pelo anticorpo anti-caspase-3 nos 30 casos de TVT foi baixa, variando de 0 a 6,5% de positividade em 200 células contadas, o que sugere um comportamento agressivo do TVT. Neste estudo, o TVT não expressou Bcl-2 nem Bcl-6 nas tentativas de imunomarcação. Dos 30 casos de TVT que foi realizado marcação pelo Ki-67, em 21 casos foi possível a contagem de células e houve uma média de positividade de 15,57%. Houve expressão de COX-2 em todos os casos e os valores variaram de 90,66 a 100% de positividade em 200 células contadas, exceto por um caso que apresentou 24,50% de positividade. A distribuição...

The characterization of transmissible venereal tumor (TVT) as neoplastic in origin is controversial. Based on results obtained previously by our research group, of the three TVT morphological types, those of plasmocytoid morphology are most aggressive. According to morphological characteristics of TVT, response to therapy is variable; and given that using survivin, caspase-3, Bcl-6, Bcl-2, Ki-67 and COX-2 to aid in prognosis, patient management and the monitoring of this disease during and after therapy, this project aimed, besides cytogenetic studies, to observe whether there are differences in expression of the aforementioned immunomarkers, in plasmocytoid TVTs and lymphocytoids. For this, 30 dogs, treated at the Veterinary Hospital of FMVZ-UNESP, Campus at Botucatu, were utilized without restriction as to sex, breed or age, with cytological diagnosis of transmissible venereal tumor. There was prevalence of males; age varied from 1 to 14 years, the majority were SRD dogs and localization was preferentially genital. Due to low lymphocytoid TVT incidence (5.91%) at HV-UNESP?Botucatu, it was not possible to make correlations between plasmocytoid and lymphcytoid types. Positivity of survivin varied from 96.15 to 100% in the 200 cells counted and, in two cases, marking for survivin was cytoplasmic and nuclear, while in other cases marking was only cytoplasmic. Survivin is associated with more aggressive behavior and shorter lifespan in the majority of tumors. In men, highly aggressive neoplasias present lower cytoplasmic expression of caspase-3 than low-grade neoplasias. Marking by anti-caspase-3 antibody in 30 TVT cases was low, varying from 0 to 6.5% positiviity in 200 cells counted, which suggests aggressive TVT behavior. In our study, TVT did not express Bcl-2 or Bcl-6...

Efeito da própolis sobre a agressividade do tumor venéreo transmissível canino : ensaios in vitro

O tumor venéreo transmissível (TVT) é a segunda neoplasia de maior prevalência nos cães atendidos no Hospital Veterinário de Botucatu. Na associação entre o comportamento biológico do tumor e a clínica desses animais, há fortes diferenças em relação às apresentadas na literatura especializada no assunto. O TVT desperta, no meio científico, o interesse pela sua origem, modo de transmissão e questionável regressão espontânea, fato atribuído ao comportamento versátil desse tumor, diferindo dos mecanismos de outras neoplasias. Investigações têm sugerido fenômenos semelhantes aos que ocorrem nos tumores de outras espécies, inclusive no homem. A quimioterapia para o TVT é a mais indicada. Porém, traz efeitos colaterais extremamente tóxicos às células desses animais. Pesquisadores relatam a propriedade antitumoral in vitro da própolis sobre o grau de agressividade do TVT. Para tal, foram utilizadas células neoplásicas de 77 animais, sem distinção por raça, sexo e idade. Os animais foram provenientes do Hospital Veterinário da FMVZ - UNESP, Campus de Botucatu. As neoplasias foram divididas em três Grupos: TVT linfocitóide; TVT plasmocitóide e TVT misto. Nestas neoplasias, o índice de proliferação celular foi verificado pelo AgNOR e CEC, para auxiliar a averiguar o grau de agressividade do tumor. No final do estudo, foi possível observar que a própolis apresenta atividade antitumoral tempo-dose dependente sobre as células de TVT, incluindo nas do grupo plasmocitóide (considerada a de maior agressividade), onde, após 48 horas e na concentração de 100 æg, a atividade antitumoral é efetiva. Concluímos também que os marcadores de proliferação (AgNOR e CEC) mostram-se eficientes para monitorar a evolução do TVT e que, a avaliação clínica, morfológica e o estudo in vitro auxiliam no diagnóstico, na conduta terapêutica e na monitoração do TVT

The transmissible venereal tumor is the second most common neoplasia among the dogs attended in the Veterinary Hospital of Botucatu. When neoplastic biological behavior and clinical findings are associated, intense differences were presented with the literature. In the scientific environment, interest in the origin of this tumor, the means of transmissible and questionable spontaneous regression, since this tumour has a versatile behavior, differs from that in other neoplasias. Studies have been done that show similar phenomena occurring in human neoplasias. Chemotherapy is advised for transmissible venereal tumor, but it has extreme toxicity for other cells. Investigators have related the antitumoral properties of propolis; so, this study aimed to verify the supposed antitumoral effect on the transmissible venereal canine tumor, in order to minimize the toxicity caused by chemotherapy. Seventy-seven animals from Veterinary Hospital of Botucatu, were used. Based on the cellular morphology stained with Giemsa, new nomenclature was created and the animals were divided into three groups: "lymphocyte-like" transmissible venereal tumor, "plasmocyte-like" transmissible venereal tumor and "mixed" transmissible venereal tumor. Proliferation markers (AgNOR and CEC) were used to verify whether there were malignancies, in different morphological groups and in the sensitivity to propolis, were studied in vitro. In this study, we saw that propolis showed activity on transmissible venereal tumor. After 48 hours and with 100 æg of propolis, the antitumoral activity was effective, including the "plasmocyte-like" transmissible venereal tumor, that showed cytotoxic effect only with the greatest dose and the longest time