Sperm filtration as an alternative technique for seminal plasma separation in boars / Filtração de ejaculados suínos como alternativa para a separação do plasma seminal

The present study aimed to evaluate the filtration for separating seminal plasma of boars' ejaculate by means of sperm viability and the occurrence of hyperactivation and lipid peroxidation in fresh semen and after cooling for up to 96 hours. The ejaculate of eight healthy boars of different breeds was collected and the gelatinous portion was separated and discarded. In the laboratory, the semen was fractioned into three aliquots (groups G1, G2 and G3) as follows: G1: semen with plasma diluted in BTS (TOTAL BTS); G2: semen centrifuged at 600G/10' (BTS CEN); and G3: semen filtered with the Sperm-filter® following dilution of the retained cells with BTS (BTS FIL). The analyses were performed at three moments: with fresh samples (D0) and after 48 (D2) and 96 hours (D4) of cooling at 17ºC. The kinetic evaluation was performed using the CASA system, which provided data for the classification of sperm hyperactivity. For lipid stress analysis, the TBARS (thiobarbituric acid reactive substance) test was performed. The variance analysis test was conducted to compare the results between the groups and moments analyzed. The results showed better total motility values (%) for G1 at D0 (67.9, P= 0.001), D2 (36.6, P= 0.004) and D4 (26.1, P= 0.003). The occurrence of hyperactivity was observed in G2 and G3 at moments D2 and D4. In addition, TBARS showed higher peroxidation levels for G1 at D0 (8.1 mM MDA/ml, P= 0.01), D2 (7.4 mM MDA/ml, P= 0.02), and D4 (6.41mMol MDA/ml, P= 0.008) when compared to G2 and G3. Since the filtration method did not demonstrate any damage to the sperm viability, the study concluded that sperm filtration is an accessible and valid tool to replace centrifugation.(AU)

O presente estudo objetivou avaliar a filtração como alternativa para a separação do plasma seminal de ejaculados suínos, ao considerar a viabilidade espermática por meio da ocorrência de hiperativação e peroxidação lipídica no sêmen fresco e após refrigeração por até 96 horas. O ejaculado, de oito cachaços saudáveis de diferentes raças, foram colhidos por meio da técnica da mão enluvada e porção gelatinosa foi separada e descartada. Em laboratório, o sêmen foi fracionado em três alíquotas (grupos G1, G2 e G3) da seguinte forma: G1: sêmen e plasma seminal, diluído em BTS (TOTAL BTS); G2: ejaculado centrifugado a 600G/10' para separação do plasma seminal, e o pellet de espermatozoides formados foram ressuspensos em BTS (BTS CEN); e G3: sêmen filtrado com Sperm-filter®, e espermatozoides retidos foram diluídos em BTS (BTS FIL). As análises foram realizadas em três momentos: amostras frescas (D0), após 48 horas (D2) e seguidas 96 horas (D4) de refrigeração a 17ºC. A avaliação cinética foi realizada pelo sistema CASA, que forneceu dados para a classificação da hiperatividade espermática. Para análise de estresse lipídico, foi realizado o teste TBARS (substâncias reagente ao ácido barbitúrico). Um teste de análise de variâncias foi feito para detectar diferenças entre os grupos e momentos avaliados. Os resultados mostraram melhores valores de motilidade total (%) para G1 em D0 (67,9, P = 0,001), D2 (36,6, P = 0,004) e D4 (26,1, P = 0,003). A ocorrência de hiperatividade foi observada em G2 e G3 nos momentos D2 e D4. Além disso, o TBARS mostrou níveis de peroxidação lipídica mais elevados para G1 em D0 (8,1 mM MDA / ml, P = 0,01), D2 (7,4 mM MDA/ml, P = 0,02) e D4 (6,41 mMol MDA / ml, P = 0,008) quando comparado com G2 e G3. Como a filtração não induziu a danos na viabilidade espermática, o estudo concluiu que a filtração espermática é uma ferramenta acessível e válida para substituir a centrifugação com intuito de separar o plasma seminal.(AU)

Infrared thermography and Doppler ultrasonography to evaluate the effects of scrotal insulation on testicular blood flow dynamics in bulls / Termografia infravermelho e ultrassonografia Doppler na avaliação dos efeitos da insulação escrotal sobre o fluxo sanguíneo testicular em touros

The aim of this study was to evaluate the dynamics of the scrotal temperature, sperm quality and testicular blood flow by using infrared thermography and Doppler ultrasonography in bulls submitted to scrotal insulation. Braford bulls (n = 8) at 18 months of age, were assigned into the following groups: insulated for 72 h (G 72; n = 2), 96 h (G 96, n = 2), 120 h (G 120, n = 2), and control animals (CON; n = 2) that remained without insulation. Infrared thermography and Doppler ultrasonography parameters were measured at four different time points: immediately after the scrotal insulation (M0), within 10 min (M10), 30 min (M30) and 60 min (M60) after scrotal insulation. The sperm quality was evaluated weekly (S1/S12). The data were analyzed by ANOVA, t-test (paired) and Pearson's correlation with a significance level of 5%. None of the observed variables were different between the insulated groups (P > 0.05). Insulated animals showed higher scrotal temperature in M0 compared to that in the M10, M30 and M60 periods (P < 0.05). There was no difference in the pulsatility and resistive indexes after scrotal insulation. However, blood flow velocity was higher in M10 compared to that in the M0, M30 and M60 periods (P < 0.05). The sperm quality was higher (P < 0.05) in all twelve collections from the control group compared with the insulated groups. Scrotal insulation resulted in changes in the sperm quality, scrotal temperature and testicular blood flow velocity.(AU)

O objetivo deste estudo foi avaliar a dinâmica da temperatura escrotal, a qualidade espermática e o fluxo sanguíneo testicular utilizando a termografia infravermelho e a ultrassonografia Doppler em touros submetidos a insulação escrotal. Touros Braford (n=8) aos 18 meses de idade, foram distribuídos nos seguintes grupos: insulados por 72 h (G 72; n=2), 96 h (G 96; n=2), 120 h (G120, n=2), e animais controle (CON; n=2) que permaneceram sem insulação. Os parâmetros de termografia infravermelha e ultrassonografia Doppler foram medidos em quatro diferentes momentos: imediatamente após a insulação escrotal (M0), aos 10 min (M10), 30 min (M30) e 60 min (M60) após a insulação escrotal. A qualidade espermática foi avaliada semanalmente (S1 / S12). Os dados foram analisados por ANOVA, teste t (pareado) e correlação de Pearson com nível de significância de 5%. Nenhuma das variáveis observadas foi diferente entre os grupos insulados (P > 0,05). Os animais insulados apresentaram maior temperatura escrotal em M0 quando comparados aos M10, M30 e M60 (P < 0,05). Não houve diferença nos índices de pulsatilidade e resistividade após a insulação escrotal. No entanto, a velocidade do fluxo sanguíneo foi maior em M10 em relação aos períodos M0, M30 e M60 (P < 0,05). A qualidade espermática foi maior (P < 0,05) em todas as doze coletas do grupo controle em comparação com os grupos insulados. A insulação escrotal resultou em mudanças na qualidade espermática, temperatura escrotal e na velocidade do fluxo sanguíneo testicular.(AU)

as / Sperm subpopulations

A biotecnologia da reprodução é importante para melhorar a eficiência reprodutiva desenvolvendométodos que identifiquem os melhores reprodutores. Embora a motilidade espermática seja a variável maisavaliada, é necessária a avaliação das características da cinética espermática, as quais se alteram conformeespécie, indivíduos, ejaculados e desafios a que são submetidos. Atualmente sabe-se que o ejaculado não écomposto de um grupo homogêneo de espermatozoides, e sim por subpopulações espermáticas heterogêneas, asquais apresentam respostas variadas quanto aos padrões de motilidade, e a identificação dessas subpopulaçõespode auxiliar na escolha do reprodutor mais eficiente.(AU)

Reproductive biotechnology is important for improving reproductive efficiency by developing methodsthat identify the best breeding. Although sperm motility is the most evaluated variable, it is necessary to evaluatethe characteristics of sperm kinetics, which change according to species, individuals, ejaculates and thechallenges that are submitted. It is known that ejaculate is not composed of a homogeneous group ofspermatozoids, but by heterogeneous sperm subpopulations, such as varied kiosks for motility patterns, and asubpopulation identifier may aid in the selection of most efficient breeders.(AU)

as / Sperm subpopulations

A biotecnologia da reprodução é importante para melhorar a eficiência reprodutiva desenvolvendométodos que identifiquem os melhores reprodutores. Embora a motilidade espermática seja a variável maisavaliada, é necessária a avaliação das características da cinética espermática, as quais se alteram conformeespécie, indivíduos, ejaculados e desafios a que são submetidos. Atualmente sabe-se que o ejaculado não écomposto de um grupo homogêneo de espermatozoides, e sim por subpopulações espermáticas heterogêneas, asquais apresentam respostas variadas quanto aos padrões de motilidade, e a identificação dessas subpopulaçõespode auxiliar na escolha do reprodutor mais eficiente.

Reproductive biotechnology is important for improving reproductive efficiency by developing methodsthat identify the best breeding. Although sperm motility is the most evaluated variable, it is necessary to evaluatethe characteristics of sperm kinetics, which change according to species, individuals, ejaculates and thechallenges that are submitted. It is known that ejaculate is not composed of a homogeneous group ofspermatozoids, but by heterogeneous sperm subpopulations, such as varied kiosks for motility patterns, and asubpopulation identifier may aid in the selection of most efficient breeders.