Antiproliferative, genotoxic and mutagenic potential of synthetic chocolate food flavoring / Potencial antiproliferativo, genotóxico e mutagênico do aroma de chocolate sintético para alimentos

Flavoring additives are of great technological importance for the food industry. However, there is little information regarding the toxicological properties of these micro-ingredients, especially at the cellular level. The present study used meristematic root cells of Allium cepa L. to evaluate the toxicity of a liquid, aroma and flavor synthetic chocolate additive, manufactured and widely marketed throughout Brazil and exported to other countries in South America. The flavoring concentrations evaluated were 100.00; 50.00; 25.00; 1.00; 0.50 and 0.25 µL/L, where the highest concentration established was one-hundred times lower than that commercially suggested for use. The concentration 100 µL/L substantially reduced cell division of meristems within 24- and 48-hours exposure. Concentrations from 100.00 to 0.50 µL/L resulted in a significant number of prophases to the detriment of the other phases of cell division, indicating an aneugenic activity, and induced a significant number of cellular changes, with emphasis on micronuclei, nuclear buds and chromosomal breaks. Under the established analysis conditions, with the exception of concentration 0.25 µL/L, the flavoring of chocolate caused cytotoxicity, genotoxicity and mutagenicity to root meristems.

Os aditivos aromatizantes têm grande importância tecnológica para a indústria de alimentos. Contudo, poucas são as informações quanto as propriedades toxicológicas desses microingredientes, especialmente, em nível celular. No presente estudo avaliou-se, sobre as células meristemáticas de raízes de Allium cepa L., a toxicidade de um aditivo sintético líquido de aroma e sabor de chocolate, fabricado e amplamente comercializado em todo Brasil, e exportado para outros países da América do Sul. As concentrações de aromatizante avaliadas foram 100,00; 50,00; 25,00; 1,00; 0,50 e 0,25 µL/L, onde a maior concentração estabelecida foi cem vezes menor que a sugerida comercialmente para uso. Com base na interpretação dos resultados, a concentração 100 µL/L reduziu substancialmente a divisão celular dos meristemas nas 24 e 48 horas de exposição. As concentrações 100,00 a 0,50 µL/L demonstraram número significativo de prófases em detrimento as outras fases da divisão celular, indicando ação aneugênica, e induziram número significativo de alterações celulares, com ênfase a micronúcleos, broto nucleares e quebras cromossômicas. Nas condições de análises estabelecidas, com exceção a concentração 0,25 µL/L, o aromatizante de chocolate causou citotoxicidade, genotoxicidade e mutagenicidade aos meristemas radiculares.

Antiproliferative, genotoxic and mutagenic potential of synthetic chocolate food flavoring

Abstract Flavoring additives are of great technological importance for the food industry. However, there is little information regarding the toxicological properties of these micro-ingredients, especially at the cellular level. The present study used meristematic root cells of Allium cepa L. to evaluate the toxicity of a liquid, aroma and flavor synthetic chocolate additive, manufactured and widely marketed throughout Brazil and exported to other countries in South America. The flavoring concentrations evaluated were 100.00; 50.00; 25.00; 1.00; 0.50 and 0.25 µL/L, where the highest concentration established was one-hundred times lower than that commercially suggested for use. The concentration 100 µL/L substantially reduced cell division of meristems within 24- and 48-hours exposure. Concentrations from 100.00 to 0.50 µL/L resulted in a significant number of prophases to the detriment of the other phases of cell division, indicating an aneugenic activity, and induced a significant number of cellular changes, with emphasis on micronuclei, nuclear buds and chromosomal breaks. Under the established analysis conditions, with the exception of concentration 0.25 µL/L, the flavoring of chocolate caused cytotoxicity, genotoxicity and mutagenicity to root meristems.

Resumo Os aditivos aromatizantes têm grande importância tecnológica para a indústria de alimentos. Contudo, poucas são as informações quanto as propriedades toxicológicas desses microingredientes, especialmente, em nível celular. No presente estudo avaliou-se, sobre as células meristemáticas de raízes de Allium cepa L., a toxicidade de um aditivo sintético líquido de aroma e sabor de chocolate, fabricado e amplamente comercializado em todo Brasil, e exportado para outros países da América do Sul. As concentrações de aromatizante avaliadas foram 100,00; 50,00; 25,00; 1,00; 0,50 e 0,25 µL/L, onde a maior concentração estabelecida foi cem vezes menor que a sugerida comercialmente para uso. Com base na interpretação dos resultados, a concentração 100 µL/L reduziu substancialmente a divisão celular dos meristemas nas 24 e 48 horas de exposição. As concentrações 100,00 a 0,50 µL/L demonstraram número significativo de prófases em detrimento as outras fases da divisão celular, indicando ação aneugênica, e induziram número significativo de alterações celulares, com ênfase a micronúcleos, broto nucleares e quebras cromossômicas. Nas condições de análises estabelecidas, com exceção a concentração 0,25 µL/L, o aromatizante de chocolate causou citotoxicidade, genotoxicidade e mutagenicidade aos meristemas radiculares.

Antiproliferative, genotoxic and mutagenic potential of synthetic chocolate food flavoring / Potencial antiproliferativo, genotóxico e mutagênico do aroma de chocolate sintético para alimentos

Flavoring additives are of great technological importance for the food industry. However, there is little information regarding the toxicological properties of these micro-ingredients, especially at the cellular level. The present study used meristematic root cells of Allium cepa L. to evaluate the toxicity of a liquid, aroma and flavor synthetic chocolate additive, manufactured and widely marketed throughout Brazil and exported to other countries in South America. The flavoring concentrations evaluated were 100.00; 50.00; 25.00; 1.00; 0.50 and 0.25 µL/L, where the highest concentration established was one-hundred times lower than that commercially suggested for use. The concentration 100 µL/L substantially reduced cell division of meristems within 24- and 48-hours exposure. Concentrations from 100.00 to 0.50 µL/L resulted in a significant number of prophases to the detriment of the other phases of cell division, indicating an aneugenic activity, and induced a significant number of cellular changes, with emphasis on micronuclei, nuclear buds and chromosomal breaks. Under the established analysis conditions, with the exception of concentration 0.25 µL/L, the flavoring of chocolate caused cytotoxicity, genotoxicity and mutagenicity to root meristems.(AU)

Os aditivos aromatizantes têm grande importância tecnológica para a indústria de alimentos. Contudo, poucas são as informações quanto as propriedades toxicológicas desses microingredientes, especialmente, em nível celular. No presente estudo avaliou-se, sobre as células meristemáticas de raízes de Allium cepa L., a toxicidade de um aditivo sintético líquido de aroma e sabor de chocolate, fabricado e amplamente comercializado em todo Brasil, e exportado para outros países da América do Sul. As concentrações de aromatizante avaliadas foram 100,00; 50,00; 25,00; 1,00; 0,50 e 0,25 µL/L, onde a maior concentração estabelecida foi cem vezes menor que a sugerida comercialmente para uso. Com base na interpretação dos resultados, a concentração 100 µL/L reduziu substancialmente a divisão celular dos meristemas nas 24 e 48 horas de exposição. As concentrações 100,00 a 0,50 µL/L demonstraram número significativo de prófases em detrimento as outras fases da divisão celular, indicando ação aneugênica, e induziram número significativo de alterações celulares, com ênfase a micronúcleos, broto nucleares e quebras cromossômicas. Nas condições de análises estabelecidas, com exceção a concentração 0,25 µL/L, o aromatizante de chocolate causou citotoxicidade, genotoxicidade e mutagenicidade aos meristemas radiculares.(AU)

Antiproliferative, genotoxic and mutagenic potential of synthetic chocolate food flavoring / Potencial antiproliferativo, genotóxico e mutagênico do aroma de chocolate sintético para alimentos

Flavoring additives are of great technological importance for the food industry. However, there is little information regarding the toxicological properties of these micro-ingredients, especially at the cellular level. The present study used meristematic root cells of Allium cepa L. to evaluate the toxicity of a liquid, aroma and flavor synthetic chocolate additive, manufactured and widely marketed throughout Brazil and exported to other countries in South America. The flavoring concentrations evaluated were 100.00; 50.00; 25.00; 1.00; 0.50 and 0.25 µL/L, where the highest concentration established was one-hundred times lower than that commercially suggested for use. The concentration 100 µL/L substantially reduced cell division of meristems within 24- and 48-hours exposure. Concentrations from 100.00 to 0.50 µL/L resulted in a significant number of prophases to the detriment of the other phases of cell division, indicating an aneugenic activity, and induced a significant number of cellular changes, with emphasis on micronuclei, nuclear buds and chromosomal breaks. Under the established analysis conditions, with the exception of concentration 0.25 µL/L, the flavoring of chocolate caused cytotoxicity, genotoxicity and mutagenicity to root meristems.

Os aditivos aromatizantes têm grande importância tecnológica para a indústria de alimentos. Contudo, poucas são as informações quanto as propriedades toxicológicas desses microingredientes, especialmente, em nível celular. No presente estudo avaliou-se, sobre as células meristemáticas de raízes de Allium cepa L., a toxicidade de um aditivo sintético líquido de aroma e sabor de chocolate, fabricado e amplamente comercializado em todo Brasil, e exportado para outros países da América do Sul. As concentrações de aromatizante avaliadas foram 100,00; 50,00; 25,00; 1,00; 0,50 e 0,25 µL/L, onde a maior concentração estabelecida foi cem vezes menor que a sugerida comercialmente para uso. Com base na interpretação dos resultados, a concentração 100 µL/L reduziu substancialmente a divisão celular dos meristemas nas 24 e 48 horas de exposição. As concentrações 100,00 a 0,50 µL/L demonstraram número significativo de prófases em detrimento as outras fases da divisão celular, indicando ação aneugênica, e induziram número significativo de alterações celulares, com ênfase a micronúcleos, broto nucleares e quebras cromossômicas. Nas condições de análises estabelecidas, com exceção a concentração 0,25 µL/L, o aromatizante de chocolate causou citotoxicidade, genotoxicidade e mutagenicidade aos meristemas radiculares.

Role of Synadenium grantii latex proteases in nematicidal activity on Meloidogyne incognita and Panagrellus redivivus / Papel das proteases do látex de Synadenium grantii na atividade nematicida sobre Meloidogyne incognita e Panagrellus redivivus

Synadenium grantii is a Euphorbiaceae plant commonly found in Brazil, known as Janaúba or Leitosinha, whose latex is traditionally used for several purposes. However, it is not known whether the nematicidal action of this plant latex occurs due to the action of proteases. The present work aims to evaluate the nematicidal activity of proteases from Synadenium grantii latex on Meloidogyne incognita and Panagrellus redivivus. S. grantii latex used in the present study was collected from specimens found in Universidade Federal de Viçosa, Viçosa, Minas Gerais, Brazil. The drained latex was collected in Eppendorf microtubes and immediately stored on ice at 4 °C. After this extraction, the latex was frozen (-20 °C) during 2 hours, thawed at room temperature (25 °C) and centrifuged at 10,000 g at 4 °C for 30 minutes to remove larger particles and concentrate the proteases. After the centrifugation, assays of enzymatic activity were performed in order to know in which of the phases the enzymes were found. S. grantii latex presented protease, but no chitinase activity. The results show that there was a significant difference (p 0.01) between the treated and control groups, with 100% mortality of Meloidogyne incognita and 72% average mortality of Panagrellus redivivus. In addition, it was demonstrated that the nematicidal action occurred due to the action of the proteases, since the control was only differentiated from the treatment by the presence of the enzymes with biological activity.(AU)

Synadenium grantii é uma planta Euphorbiaceae comumente encontrada no Brasil, conhecida como Janaúba ou Leitosinha, e tem seu látex usado tradicionalmente para diferentes propósitos. Entretanto, não se conhece se a atividade nematicida da planta ocorre devido à ação de proteases. O presente trabalho tem como objetivo avaliar a atividade nematicida das proteases do látex de Synadenium grantii sobre Meloidogyne incognita e Panagrellus redivivus. O látex de S. grantii utilizado no presente trabalho foi coletado a partir de espécimes encontradas na Universidade Federal de Viçosa, Viçosa, Minas Gerais, Brazil. O látex foi coletado em microtubos Eppendorf e imediatamente armazenado em gelo a 4 °C. Após esta extração, o látex foi congelado (-20 °C) durante 2 horas, descongelado à temperatura ambiente (25 °C) e centrifugado a 10000 g a 4 °C durante 30 minutos para a remoção de partículas e concentração das proteases. Após a centrifugação, foram realizados ensaios de atividade enzimática para saber em qual das fases as enzimas foram encontradas. O látex de S. grantii apresentou atividade de protease, mas nenhuma atividade de quitinase. Os resultados mostram que houve diferença significativa (p 0,01) entre os grupos tratados e controle, com 100% de mortalidade de Meloidogyne incognita e 72% de mortalidade média de Panagrellus redivivus. Além disso, foi demonstrado que a ação nematicida ocorreu devido à ação das proteases, uma vez que o grupo controle só foi diferenciado do tratamento pela presença das enzimas com atividade biológica.(AU)

Serum biochemical profile of neonatal buffalo calves / Perfil bioquímico sérico de bezerros bubalinos no período neonatal

Serum blood samples from 50 Murrah buffalo calves were examined in this study. The animals were allocated into three groups according to the number of parturitions of their mothers: G1 (n= 15) calves from primiparous buffaloes, G2 (n= 19) calves from buffaloes with two to four parturitions, and G3 (n= 16) calves from buffaloes with five or more parturitions. Blood samples were taken at birth, before colostrum ingestion, at 24h, 48h, and 72h after birth, and at 7, 14, 21, and 30 days after birth for determination of levels of gammaglutamyl transferase (GGT), alkaline phosphatase (ALP), aspartate aminotransferase (AST), creatine kinase, total protein, albumin, globulins (including immunoglobulin G), iron, total calcium, ionized calcium, phosphorus, sodium, and potassium. The age of the calves was found to influence all of the biochemical parameters, with the exception of ionized calcium and potassium in the calves in groups G1 and G3. The calving order was found to influence AST, GGT, total protein, albumin, and globulins, including IgG. The high serum ALP activity in the first two days after birth indicates that measurement of the levels of this enzyme may be used as an indirect method of assessing passive immunity transfer.(AU)

Amostras de sangue de 50 bezerros de búfalo Murrah foram examinados nesse estudo. Os animais foram distribuídos em três grupos de acordo com a paridade de suas genitoras: G1 (n=15) bezerros de búfalas primíparas, G2 (n=19) bezerros de búfalas com 2 a 4 gestações, e G3 (n=16) bezerros de búfalas com cinco ou mais gestações. Amostras de sangue foram colhidas ao nascimento, antes da ingestão de colostro e 24h, 48h, e 72h após o nascimento e 7, 14, 21 e 30 dias após nascimento para determinar níveis de gammaglutamil transferase (GGT), fosfatase alcalina (ALP), aspartato aminotrasferase (AST), creatina quinase, proteínas totais, albumina, globulina (inclusive imunoglobulina G), ferro, cálcio total, cálcio ionizado, fósforo, sódio e potássio. A idade dos bezerros influenciou todos os parâmetros bioquímicos, exceto cálcio ionizado e potássio nos bezerros dos grupos G1 e G3. A ordem de nascimento influenciou AST, GGT, proteínas totais, albumina e globulinas, inclusive IgG. Intensa atividade ALP no soro nos primeiros dois dias após nascimento indica que medidas dos níveis dessa enzima podem ser utilizados como método indireto de avaliar transferência passiva de imunidade.(AU)

Serum biochemical profile of neonatal buffalo calves / Perfil bioquímico sérico de bezerros bubalinos no período neonatal

Serum blood samples from 50 Murrah buffalo calves were examined in this study. The animals were allocated into three groups according to the number of parturitions of their mothers: G1 (n= 15) calves from primiparous buffaloes, G2 (n= 19) calves from buffaloes with two to four parturitions, and G3 (n= 16) calves from buffaloes with five or more parturitions. Blood samples were taken at birth, before colostrum ingestion, at 24h, 48h, and 72h after birth, and at 7, 14, 21, and 30 days after birth for determination of levels of gammaglutamyl transferase (GGT), alkaline phosphatase (ALP), aspartate aminotransferase (AST), creatine kinase, total protein, albumin, globulins (including immunoglobulin G), iron, total calcium, ionized calcium, phosphorus, sodium, and potassium. The age of the calves was found to influence all of the biochemical parameters, with the exception of ionized calcium and potassium in the calves in groups G1 and G3. The calving order was found to influence AST, GGT, total protein, albumin, and globulins, including IgG. The high serum ALP activity in the first two days after birth indicates that measurement of the levels of this enzyme may be used as an indirect method of assessing passive immunity transfer.(AU)

Amostras de sangue de 50 bezerros de búfalo Murrah foram examinados nesse estudo. Os animais foram distribuídos em três grupos de acordo com a paridade de suas genitoras: G1 (n=15) bezerros de búfalas primíparas, G2 (n=19) bezerros de búfalas com 2 a 4 gestações, e G3 (n=16) bezerros de búfalas com cinco ou mais gestações. Amostras de sangue foram colhidas ao nascimento, antes da ingestão de colostro e 24h, 48h, e 72h após o nascimento e 7, 14, 21 e 30 dias após nascimento para determinar níveis de gammaglutamil transferase (GGT), fosfatase alcalina (ALP), aspartato aminotrasferase (AST), creatina quinase, proteínas totais, albumina, globulina (inclusive imunoglobulina G), ferro, cálcio total, cálcio ionizado, fósforo, sódio e potássio. A idade dos bezerros influenciou todos os parâmetros bioquímicos, exceto cálcio ionizado e potássio nos bezerros dos grupos G1 e G3. A ordem de nascimento influenciou AST, GGT, proteínas totais, albumina e globulinas, inclusive IgG. Intensa atividade ALP no soro nos primeiros dois dias após nascimento indica que medidas dos níveis dessa enzima podem ser utilizados como método indireto de avaliar transferência passiva de imunidade.(AU)

Uso da somatotropina recombinante bovina em búfalas leiteiras II: metabolismos energético e mineral / Use of recombinant bovine somatotropin (rbST) in dairy buffaloes II: energy and mineral metabolism

Avaliou-se a influência da somatotropina recombinante bovina (rbST) sobre os metabolismos energético e mineral de búfalas entre 63e 154 dias em lactação. Foram utilizadas 22 búfalas, distribuídas em dois grupos experimentais: grupo rbST - aplicação de 500mg de rbST a cada 14 dias; grupo Controle - sem aplicação de rbST. A cada sete dias, foram coletadas amostras de sangue para a determinação do perfil bioquímico e mensuraram-se a produção de leite e o escore de condição corporal dos animais. As médias dos parâmetros estudados para os grupos rbST e Controle foram, respectivamente: produção de leite (PL): 6,44kg vs. 6,68kg; escore de condição corporal-ECC (1-5): 3,51 vs. 3,57; glicose: 70,58 vs. 64,81mg/dL (P = 0,0003); colesterol: 132,38 vs. 133,40mg/dL; triglicérides: 29,18 vs. 28,32mg/dL; proteína total: 8,57 vs. 8,75g/dL; albumina: 3,47 vs. 3,60g/dL; ureia: 32,46 vs. 33,86mg/dL; creatinina: 1,27 vs. 1,39mg/dL; cálcio:10,25 vs. 10,73mg/dL; fósforo:5,76 vs. 5,62mg/dL; e magnésio:3,70 vs. 3,70mg/dL. O uso de 500mg de rbSTinfluenciou o metabolismo da glicose, porém não modificou a PL, o ECC e os níveis dos demais parâmetros metabólicos estudados.(AU)

The aim was to evaluate the influence of recombinant bovine somatotropin (rbST) on the energy and mineral metabolism of buffaloes between 63 - 154 days in milk. Twenty-two buffaloes distributed in two experimental groups were used: Group rbST (n= 11) - application of 500mg of rbST every 14 days; Control Group (n= 11) - no rbST. Every seven days, blood samples were taken to determine the biochemical profile, and milk production and body condition score were measured. The averages of the variables for rbST and Control groups were, respectively: milk yield (MY) - 6.44kg vs. 6.68kg; body condition score (BCS) - 3.51 vs 3.57 (1-5); glucose - 70.58 vs. 64.81mg/dL (P = 0.0003); cholesterol - 132.38 vs. 133.40mg/dL; triglycerides -29.18 vs. 28.32mg/dL; total protein - 8.57 vs. 8.75g/dL; albumin - 3.47 vs 3.60g/dL; urea - 32.46 vs 33.86mg/dL; creatinine - 1.27 vs 1.39mg/dL; calcium - 10.25 vs. 10.73mg/dL; phosphorus - 5.76 vs 5.62mg/dL; and magnesium - 3.70 vs 3.70mg/dL. Use of 500mg rbST influenced glucose metabolism, but did not modify the MY, BCS and the levels of the other metabolic parameters studied.(AU)

Uso da somatotropina recombinante bovina em búfalas leiteiras II: metabolismos energético e mineral / Use of recombinant bovine somatotropin (rbST) in dairy buffaloes II: energy and mineral metabolism

Avaliou-se a influência da somatotropina recombinante bovina (rbST) sobre os metabolismos energético e mineral de búfalas entre 63e 154 dias em lactação. Foram utilizadas 22 búfalas, distribuídas em dois grupos experimentais: grupo rbST - aplicação de 500mg de rbST a cada 14 dias; grupo Controle - sem aplicação de rbST. A cada sete dias, foram coletadas amostras de sangue para a determinação do perfil bioquímico e mensuraram-se a produção de leite e o escore de condição corporal dos animais. As médias dos parâmetros estudados para os grupos rbST e Controle foram, respectivamente: produção de leite (PL): 6,44kg vs. 6,68kg; escore de condição corporal-ECC (1-5): 3,51 vs. 3,57; glicose: 70,58 vs. 64,81mg/dL (P = 0,0003); colesterol: 132,38 vs. 133,40mg/dL; triglicérides: 29,18 vs. 28,32mg/dL; proteína total: 8,57 vs. 8,75g/dL; albumina: 3,47 vs. 3,60g/dL; ureia: 32,46 vs. 33,86mg/dL; creatinina: 1,27 vs. 1,39mg/dL; cálcio:10,25 vs. 10,73mg/dL; fósforo:5,76 vs. 5,62mg/dL; e magnésio:3,70 vs. 3,70mg/dL. O uso de 500mg de rbSTinfluenciou o metabolismo da glicose, porém não modificou a PL, o ECC e os níveis dos demais parâmetros metabólicos estudados.(AU)

The aim was to evaluate the influence of recombinant bovine somatotropin (rbST) on the energy and mineral metabolism of buffaloes between 63 - 154 days in milk. Twenty-two buffaloes distributed in two experimental groups were used: Group rbST (n= 11) - application of 500mg of rbST every 14 days; Control Group (n= 11) - no rbST. Every seven days, blood samples were taken to determine the biochemical profile, and milk production and body condition score were measured. The averages of the variables for rbST and Control groups were, respectively: milk yield (MY) - 6.44kg vs. 6.68kg; body condition score (BCS) - 3.51 vs 3.57 (1-5); glucose - 70.58 vs. 64.81mg/dL (P = 0.0003); cholesterol - 132.38 vs. 133.40mg/dL; triglycerides -29.18 vs. 28.32mg/dL; total protein - 8.57 vs. 8.75g/dL; albumin - 3.47 vs 3.60g/dL; urea - 32.46 vs 33.86mg/dL; creatinine - 1.27 vs 1.39mg/dL; calcium - 10.25 vs. 10.73mg/dL; phosphorus - 5.76 vs 5.62mg/dL; and magnesium - 3.70 vs 3.70mg/dL. Use of 500mg rbST influenced glucose metabolism, but did not modify the MY, BCS and the levels of the other metabolic parameters studied.(AU)

Role of Synadenium grantii latex proteases in nematicidal activity on Meloidogyne incognita and Panagrellus redivivus

Abstract Synadenium grantii is a Euphorbiaceae plant commonly found in Brazil, known as Janaúba or Leitosinha, whose latex is traditionally used for several purposes. However, it is not known whether the nematicidal action of this plant latex occurs due to the action of proteases. The present work aims to evaluate the nematicidal activity of proteases from Synadenium grantii latex on Meloidogyne incognita and Panagrellus redivivus. S. grantii latex used in the present study was collected from specimens found in Universidade Federal de Viçosa, Viçosa, Minas Gerais, Brazil. The drained latex was collected in Eppendorf microtubes and immediately stored on ice at 4 °C. After this extraction, the latex was frozen (-20 °C) during 2 hours, thawed at room temperature (25 °C) and centrifuged at 10,000 g at 4 °C for 30 minutes to remove larger particles and concentrate the proteases. After the centrifugation, assays of enzymatic activity were performed in order to know in which of the phases the enzymes were found. S. grantii latex presented protease, but no chitinase activity. The results show that there was a significant difference (p 0.01) between the treated and control groups, with 100% mortality of Meloidogyne incognita and 72% average mortality of Panagrellus redivivus. In addition, it was demonstrated that the nematicidal action occurred due to the action of the proteases, since the control was only differentiated from the treatment by the presence of the enzymes with biological activity.

Resumo Synadenium grantii é uma planta Euphorbiaceae comumente encontrada no Brasil, conhecida como Janaúba ou Leitosinha, e tem seu látex usado tradicionalmente para diferentes propósitos. Entretanto, não se conhece se a atividade nematicida da planta ocorre devido à ação de proteases. O presente trabalho tem como objetivo avaliar a atividade nematicida das proteases do látex de Synadenium grantii sobre Meloidogyne incognita e Panagrellus redivivus. O látex de S. grantii utilizado no presente trabalho foi coletado a partir de espécimes encontradas na Universidade Federal de Viçosa, Viçosa, Minas Gerais, Brazil. O látex foi coletado em microtubos Eppendorf e imediatamente armazenado em gelo a 4 °C. Após esta extração, o látex foi congelado (-20 °C) durante 2 horas, descongelado à temperatura ambiente (25 °C) e centrifugado a 10000 g a 4 °C durante 30 minutos para a remoção de partículas e concentração das proteases. Após a centrifugação, foram realizados ensaios de atividade enzimática para saber em qual das fases as enzimas foram encontradas. O látex de S. grantii apresentou atividade de protease, mas nenhuma atividade de quitinase. Os resultados mostram que houve diferença significativa (p 0,01) entre os grupos tratados e controle, com 100% de mortalidade de Meloidogyne incognita e 72% de mortalidade média de Panagrellus redivivus. Além disso, foi demonstrado que a ação nematicida ocorreu devido à ação das proteases, uma vez que o grupo controle só foi diferenciado do tratamento pela presença das enzimas com atividade biológica.

Role of Synadenium grantii latex proteases in nematicidal activity on Meloidogyne incognita and Panagrellus redivivus

Abstract Synadenium grantii is a Euphorbiaceae plant commonly found in Brazil, known as Janaúba or Leitosinha, whose latex is traditionally used for several purposes. However, it is not known whether the nematicidal action of this plant latex occurs due to the action of proteases. The present work aims to evaluate the nematicidal activity of proteases from Synadenium grantii latex on Meloidogyne incognita and Panagrellus redivivus. S. grantii latex used in the present study was collected from specimens found in Universidade Federal de Viçosa, Viçosa, Minas Gerais, Brazil. The drained latex was collected in Eppendorf microtubes and immediately stored on ice at 4 °C. After this extraction, the latex was frozen (-20 °C) during 2 hours, thawed at room temperature (25 °C) and centrifuged at 10,000 g at 4 °C for 30 minutes to remove larger particles and concentrate the proteases. After the centrifugation, assays of enzymatic activity were performed in order to know in which of the phases the enzymes were found. S. grantii latex presented protease, but no chitinase activity. The results show that there was a significant difference (p 0.01) between the treated and control groups, with 100% mortality of Meloidogyne incognita and 72% average mortality of Panagrellus redivivus. In addition, it was demonstrated that the nematicidal action occurred due to the action of the proteases, since the control was only differentiated from the treatment by the presence of the enzymes with biological activity.

Resumo Synadenium grantii é uma planta Euphorbiaceae comumente encontrada no Brasil, conhecida como Janaúba ou Leitosinha, e tem seu látex usado tradicionalmente para diferentes propósitos. Entretanto, não se conhece se a atividade nematicida da planta ocorre devido à ação de proteases. O presente trabalho tem como objetivo avaliar a atividade nematicida das proteases do látex de Synadenium grantii sobre Meloidogyne incognita e Panagrellus redivivus. O látex de S. grantii utilizado no presente trabalho foi coletado a partir de espécimes encontradas na Universidade Federal de Viçosa, Viçosa, Minas Gerais, Brazil. O látex foi coletado em microtubos Eppendorf e imediatamente armazenado em gelo a 4 °C. Após esta extração, o látex foi congelado (-20 °C) durante 2 horas, descongelado à temperatura ambiente (25 °C) e centrifugado a 10000 g a 4 °C durante 30 minutos para a remoção de partículas e concentração das proteases. Após a centrifugação, foram realizados ensaios de atividade enzimática para saber em qual das fases as enzimas foram encontradas. O látex de S. grantii apresentou atividade de protease, mas nenhuma atividade de quitinase. Os resultados mostram que houve diferença significativa (p 0,01) entre os grupos tratados e controle, com 100% de mortalidade de Meloidogyne incognita e 72% de mortalidade média de Panagrellus redivivus. Além disso, foi demonstrado que a ação nematicida ocorreu devido à ação das proteases, uma vez que o grupo controle só foi diferenciado do tratamento pela presença das enzimas com atividade biológica.

Water level effect on herbaceous plant assemblages at an artificial reservoir-Lago Azul State Park, Southern Brazil

This study presents the effect of water level variation on the assemblages of herbaceous species in Mourão I Reservoir, Lago Azul State Park, Southern Brazil. The structure and distribution of populations was examined in February (dry period) and April (rainy period), 2011, in two transects. These transects started at the forest edge towards the center of the lake. The end of the transect coincided with the end of the plants within the lake. On every two meters along of the transects we sampled a wooden square of 0.25 m2 for species biomass analysis.The macrophyte stand was composed entirely of emergent species. Considering the periods, most species were less frequent in the rainy period (April), but Ipomea ramosissima (Poir.) Choisy, Commelina nudiflora L., Eleocharis acuntagula (Roxb.) Schult. and Verbena litorales (Kunth.) had their frequency increased during this period, probably due to their resistance. The influence of flood as measured by the NMDS point out that both before and after the flood, there are plots with distinct compositions and biomass. The water level variation affects the dynamics of plant composition and structure in marginal areas of the Reservoir.

Resumo Este estudo apresenta o efeito da variação no nível hidrométrico do reservatório Mourão I, no Parque Estadual do Lago Azul, Paraná sobre a assembleia de espécies herbáceas na região de formação do reservatório. O estudo da estrutura e distribuição das populações foi realizado nos meses de fevereiro (seca) e abril (cheia) de 2011, para isto estabeleceu-se em pontos distintos duas transecções. As transecções começavam na bordada floresta em direção ao centro do lago. O fim da coleta na transecção acontecia quando acabavam as plantas dentro do lago. Ao longo das transecções a cada dois metros um quadrado de madeira com área de 0,25 m2 foi utilizado para amostrar as espécies, com coleta de biomassa. A maioria das espécies teve sua frequência reduzida durante a cheia (abril), porém Ipomea ramosissima (Poir.) Choisy, Commelina nudiflora L., Eleocharis acuntagula (Roxb.) Schult. e Verbena litorales (Kunth.) aumentaram sua frequência durante esse período. A influência da cheia medida pelo NMS indica que tanto antes da cheia quanto após a cheia existem parcelas com composições e biomassa típicas. A variação hidrométrica tem influência sobre a dinâmica da composição e estrutural vegetal nas áreas marginais do reservatório.

Water level effect on herbaceous plant assemblages at an artificial reservoir-Lago Azul State Park, Southern Brazil / O efeito do nível hidrométrico sobre a vegetação herbácea de um reservatório artificial no Sul do Brasil

This study presents the effect of water level variation on the assemblages of herbaceous species in Mourão I Reservoir, Lago Azul State Park, Southern Brazil. The structure and distribution of populations was examined in February (dry period) and April (rainy period), 2011, in two transects. These transects started at the forest edge towards the center of the lake. The end of the transect coincided with the end of the plants within the lake. On every two meters along of the transects we sampled a wooden square of 0.25 m2 for species biomass analysis.The macrophyte stand was composed entirely of emergent species. Considering the periods, most species were less frequent in the rainy period (April), but Ipomea ramosissima (Poir.) Choisy, Commelina nudiflora L., Eleocharis acuntagula (Roxb.) Schult. and Verbena litorales (Kunth.) had their frequency increased during this period, probably due to their resistance. The influence of flood as measured by the NMDS point out that both before and after the flood, there are plots with distinct compositions and biomass. The water level variation affects the dynamics of plant composition and structure in marginal areas of the Reservoir.(AU)

Resumo Este estudo apresenta o efeito da variação no nível hidrométrico do reservatório Mourão I, no Parque Estadual do Lago Azul, Paraná sobre a assembleia de espécies herbáceas na região de formação do reservatório. O estudo da estrutura e distribuição das populações foi realizado nos meses de fevereiro (seca) e abril (cheia) de 2011, para isto estabeleceu-se em pontos distintos duas transecções. As transecções começavam na bordada floresta em direção ao centro do lago. O fim da coleta na transecção acontecia quando acabavam as plantas dentro do lago. Ao longo das transecções a cada dois metros um quadrado de madeira com área de 0,25 m2 foi utilizado para amostrar as espécies, com coleta de biomassa. A maioria das espécies teve sua frequência reduzida durante a cheia (abril), porém Ipomea ramosissima (Poir.) Choisy, Commelina nudiflora L., Eleocharis acuntagula (Roxb.) Schult. e Verbena litorales (Kunth.) aumentaram sua frequência durante esse período. A influência da cheia medida pelo NMS indica que tanto antes da cheia quanto após a cheia existem parcelas com composições e biomassa típicas. A variação hidrométrica tem influência sobre a dinâmica da composição e estrutural vegetal nas áreas marginais do reservatório.(AU)

Influence of urban area on the water quality of the Campo River basin, Paraná State, Brazil

The Campo River basin is located on the third plateau of the Paraná State or trap plateau of Paraná, at the middle portion between the rivers Ivaí and Piquiri, southern Brazil, between the coordinates 23° 53 and 24° 10 South Latitude and 52° 15 and 52° 31 West Longitude. The basin has 384 Km² area, being 247 km2 in the municipality of Campo Mourão and 137 km2 in the municipality of Peabiru, in Paraná State. The Campo River is a left bank tributary of the Mourão River, which flows into the Ivaí River. The objective of this study was to monitor water quality in the Km 119 River and the Campo River, tributaries of the Mourão River, with monthly collection of water samples to determine pH, temperature, turbidity, biochemical oxygen demand, dissolved oxygen, fecal coliforms, total solids, total nitrogen, ammoniacal nitrogen, nitrite, nitrate and total phosphorus. The results obtained were compared with the indices established by the environmental legislation and applied in the determination of the Water Quality Index (WQI) used by the Water Institute of Paraná State, regulating environmental agency. Poor water quality in these rivers presents a worrying scenario for the region, since this river is the main source of water supply for the public system. Results of organic matter, fecal coliforms and total phosphorus were higher than the limits established by Resolution CONAMA 357/2005 to river class 2, specially at downstream of the Km 119 River and the Campo River, due to the significant influence of the urban anthropic activity by the lack of tertiary treatment and also rural by the lack of basic sanitation in this area. Results of WQI of Km 119 River and do Campo River indicated that water quality can be classified as average in 71% and good in 29% of the sites evaluated.

Resumo A Bacia Hidrográfica Rio do Campo está situada no terceiro planalto paranaense, na porção média entre os rios Ivaí e Piquiri, Sul do Brasil, entre as coordenadas 23° 53 e 24°10 de Latitude Sul e 52°15 e 52°31 de Longitude Oeste. A bacia ocupa área de 384 Km2, sendo 247 km2 no município de Campo Mourão e 137 km2 no município de Peabiru, no estado do Paraná. O Rio do Campo é um afluente da margem esquerda do Rio Mourão, que deságua no Rio Ivaí. O objetivo deste trabalho foi monitorar a qualidade da água do rio Km 119 e rio do Campo, afluentes do Rio Mourão, com coletas mensais de amostras de água para determinação do pH, temperatura, turbidez, demanda bioquímica de oxigênio, oxigênio dissolvido, coliformes fecais, sólidos totais, nitrogênio total, nitrogênio amoniacal, nitrito, nitrato e fósforo total. Os resultados obtidos foram comparados aos limites estabelecidos na legislação ambiental vigente para poluentes na água e aplicados na determinação do Índice de Qualidade das Águas (IQA) usado pelo Instituto das Águas do Paraná, órgão ambiental fiscalizador. A má qualidade observada nestes rios é preocupante para a região que usufruiu destas águas como principal fonte de abastecimento público. Resultados de matéria orgânica, coliformes totais e fósforo total extrapolaram os padrões estabelecidos na Resolução CONAMA 357/2005 para rio classe 2, especialmente à jusante do rio Km 119 e do Rio do Campo, devido à influência significativa da atividade antrópica urbana pela falta de tratamento terciário e rural pela falta de saneamento básico nesta área. Os resultados do IQA do Rio Km 119 e Rio do Campo indicam que as águas podem ser classificadas com qualidade média em 71% e boa em 29% nos pontos avaliados.

Influence of urban area on the water quality of the Campo River basin, Paraná State, Brazil / Influência da área urbana na qualidade das águas na Bacia do Rio do Campo River, estado do Paraná, Brasil

The Campo River basin is located on the third plateau of the Paraná State or trap plateau of Paraná, at the middle portion between the rivers Ivaí and Piquiri, southern Brazil, between the coordinates 23° 53 and 24° 10 South Latitude and 52° 15 and 52° 31 West Longitude. The basin has 384 Km² area, being 247 km2 in the municipality of Campo Mourão and 137 km2 in the municipality of Peabiru, in Paraná State. The Campo River is a left bank tributary of the Mourão River, which flows into the Ivaí River. The objective of this study was to monitor water quality in the Km 119 River and the Campo River, tributaries of the Mourão River, with monthly collection of water samples to determine pH, temperature, turbidity, biochemical oxygen demand, dissolved oxygen, fecal coliforms, total solids, total nitrogen, ammoniacal nitrogen, nitrite, nitrate and total phosphorus. The results obtained were compared with the indices established by the environmental legislation and applied in the determination of the Water Quality Index (WQI) used by the Water Institute of Paraná State, regulating environmental agency. Poor water quality in these rivers presents a worrying scenario for the region, since this river is the main source of water supply for the public system. Results of organic matter, fecal coliforms and total phosphorus were higher than the limits established by Resolution CONAMA 357/2005 to river class 2, specially at downstream of the Km 119 River and the Campo River, due to the significant influence of the urban anthropic activity by the lack of tertiary treatment and also rural by the lack of basic sanitation in this area. Results of WQI of Km 119 River and do Campo River indicated that water quality can be classified as average in 71% and good in 29% of the sites evaluated.(AU)

A Bacia Hidrográfica Rio do Campo está situada no terceiro planalto paranaense, na porção média entre os rios Ivaí e Piquiri, Sul do Brasil, entre as coordenadas 23° 53 e 24°10 de Latitude Sul e 52°15 e 52°31 de Longitude Oeste. A bacia ocupa área de 384 Km2, sendo 247 km2 no município de Campo Mourão e 137 km2 no município de Peabiru, no estado do Paraná. O Rio do Campo é um afluente da margem esquerda do Rio Mourão, que deságua no Rio Ivaí. O objetivo deste trabalho foi monitorar a qualidade da água do rio Km 119 e rio do Campo, afluentes do Rio Mourão, com coletas mensais de amostras de água para determinação do pH, temperatura, turbidez, demanda bioquímica de oxigênio, oxigênio dissolvido, coliformes fecais, sólidos totais, nitrogênio total, nitrogênio amoniacal, nitrito, nitrato e fósforo total. Os resultados obtidos foram comparados aos limites estabelecidos na legislação ambiental vigente para poluentes na água e aplicados na determinação do Índice de Qualidade das Águas (IQA) usado pelo Instituto das Águas do Paraná, órgão ambiental fiscalizador. A má qualidade observada nestes rios é preocupante para a região que usufruiu destas águas como principal fonte de abastecimento público. Resultados de matéria orgânica, coliformes totais e fósforo total extrapolaram os padrões estabelecidos na Resolução CONAMA 357/2005 para rio classe 2, especialmente à jusante do rio Km 119 e do Rio do Campo, devido à influência significativa da atividade antrópica urbana pela falta de tratamento terciário e rural pela falta de saneamento básico nesta área. Os resultados do IQA do Rio Km 119 e Rio do Campo indicam que as águas podem ser classificadas com qualidade média em 71% e boa em 29% nos pontos avaliados.(AU)

Effect of slope on the forest structure of the Atlantic Forest domain in southern Brazil / Efeito da inclinação na estrutura de uma floresta do domínio Mata Atlântica no sul do Brasil

The mosaic landscape composition of forest fragments located on high slopes, shallow soils hinder ecological interactions and the survival of plant species. This study aimed to show, in an environment with these characteristics, the effect of the environmental gradient relating the soil, slope, and vegetation of a fragment of the Montane Seasonal Semideciduous Forest. The forest structure was sampled in 12 continuous rectangular plots, with 30 X 20m, totaling 0.72ha. Soil samples were taken by drilling every 20m along the hydrographic divisor and opening of three trenches used as soil sampling sites for in situ determination of soil color, horizon, and nutrients. Horizons were classified as O/A/Cr in the altered rock with a marked presence of gravels, and the soil was classified as Litholic Neosol. The area has a steep slope, from 18.05% to 36.99%. Linear regression analysis indicated an opposite pattern for species richness in relation to slope and a positive relationship between slope and the number of standing dead individuals. Species richness was also positively related to the distance from forest edges. The evaluation evidenced the strong influence of slope and human activities in forest remnant as common to several high-altitude remnants, and small conservation actions can guarantee their maintenance.

Efeito da Inclinação na Estrutura de uma Floresta do Domínio Mata Atlântica no Sul do Brasil. A composição da paisagem em mosaico de fragmentos florestais localizados em encostas altas, solos rasos dificultam as interações ecológicas e a sobrevivência de espécies vegetais. Este estudo teve como objetivo mostrar em um ambiente com essas características o efeito do gradiente ambiental relacionando o solo, a declividade e a vegetação de um fragmento de Floresta Estacional Semidecidual Montana. A estrutura da floresta foi amostrada em 12 parcelas retangulares contínuas, com 30X20m, totalizando 0,72ha. As amostras de solo foram coletadas por perfuração a cada 20m ao longo do divisor hidrográfico e abertura de três trincheiras usadas como locais de amostragem de solo para determinação in situ da cor do solo, horizonte e nutrientes. Os horizontes foram classificados como O/A/Cr na rocha alterada com presença marcante de cascalhos, e o solo foi classificado como Neossolo Litólico. A área apresenta declive acentuado, de 18,05% a 36,99%. A análise de regressão linear destacou o padrão oposto de riqueza de espécies em relação à inclinação e uma relação positiva entre a inclinação e o número de indivíduos mortos em pé. A riqueza de espécies também foi positivamente relacionada à distância das bordas da floresta. A avaliação evidenciou que a forte influência do declive e das atividades antrópicas no remanescente florestal são fatores comuns a diversos remanescentes de altitude, e pequenas ações de conservação podem garantir sua manutenção.