Resumo

Four strains of Staphylococcus aureus isolated from cows with mastitis were assessed as to in vitro sensitivity to four commercial disinfectants (chlorine, polvidone-iodine, chlorhexidine, and lactic acid) used in teat pre- and post-dipping, in the presence and absence of organic matter. The concentration of the disinfectants was determined in accordance with the Brazilian Pharmacopoeia. Four isolates identified as S. aureus from cows diagnosed with subclinical mastitis were subjected to susceptibility testing against disinfectants through an absorbance evaluation at 600 nm on a spectrophotometer. Exposure times (15", 30", 60" and 90") were clocked, and streaking was performed in Brain Heart Infusion (BHI) medium. The iodine sample presented a lower concentration (1.9%) than that given by the manufacturer (2.5%). There was greater (p < 0.05) in vitro disinfectant activity for chlorhexidine and chlorine, with and without organic matter. However, inhibition by organic matter occurred more intensely in the iodine disinfectant (99.0%). The inhibition percentage of S. aureus against iodine and lactic acid at 15, 30, 60 and 90 s was numerically lower than against chlorhexidine and chlorine, regardless of organic matter. Therefore, chlorhexidine and chlorine have greater inhibitory activity against S. aureus, both with and without organic matter.(AU)

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The present paper is a case report of a one-year old nulliparous Alpine Goat belonging to a dairy goat farm in semi-arid region of Brazil. Both glands were naturally infected by α-hemolytic Staphylococcus simulans and evolved similar clinical signs. The mammary glands presented an acute catarrhal mastitis with systemic clinical signs that responded positively to treatment with gentamicin associated with amoxicillin. The present report suggests the importance of the pathogenic potential of non-aureus Staphylococci strains (NAS) as a cause of clinical mastitis also in nulliparous animals. The isolate showed resistance to tetracycline and contained staphylococcal toxin production genes (sec, sec and TSST-1). Moreover, it has been reported that Staphylococcus simulans is an emerging pathogen in humans causing cutaneous and osteoarticular infections, mainly in those in close contact with farm animals. To the best of our knowledge, this is the first report of a clinical mastitis in a nulliparous goat caused by Staphylococcus simulans(AU)

O presente trabalho é o relato do caso de uma cabra nulípara da raça Parda Alpina, de um ano de idade, pertencente ao Setor de Caprinocultura da Universidade Federal da Paraíba ­ Bananeiras - Brasil. Ambas as glândulas foram naturalmente infectadas por Staphylococcus simulans α-hemolítico. As glândulas mamárias apresentaram mastite aguda catarral com envolvimento sistêmico, respondendo positivamente ao tratamento sistêmico com gentamicina associada a amoxicilina. O presente relato sugere a importância do potencial patogênico de Staphylococcus não-aureus (SNA) como causador de mastite clínica também em animais nulíparos. O isolado mostrou resistência a tetraciclina e continha genes de produção de toxinas estafilocócicas (sec, seg e TSST-1). Além disso, tem sido relatado que Staphylococcus simulans é um patógeno emergente em seres humanos causando infecções cutâneas e osteoarticulares, principalmente naqueles que têm contato íntimo com animais de fazenda. Até onde sabemos, este é o primeiro relato de uma mastite clínica em uma cabra nulípara causada por Staphylococcus simulans.(AU)

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Several factors can affect bovine mammary gland health and although bacterial mastitis is the most studied and reported cause, viral infections may also have negative effects on bovine udder health. Viral infections can indirectly damage the papillary duct of the teat, and induce or exacerbate signs of bovine mastitis due to viral-induced immunosuppressive effects that may lead to a greater susceptibility to bacterial mastitis and even intensify the severity of established bacterial infections. Some viruses (Bovine alphaherpesvirus 2, cowpox, pseudocowpox, foot-and-mouth disease, vesicular stomatitis and papillomavirus) affect the integrity of the udder skin, leading to teat lesions, favoring the entry of mastitis-causing pathogens. It is therefore possible that the association between mastitis and viruses is underestimated and may, for example, be associated with negative bacterial culture results. Few milk samples are tested for the presence of viruses, mainly because of the more laborious and expensive procedures required. Furthermore, samples for virus testing would require specific procedures in terms of collection, handling and storage. Thus, there is a knowledge gap in regard to the actual impact of viruses on bovine udder health. Despite the fact that serum anti-virus antibodies can be detected, there is not enough evidence to confirm or exclude the effect of viruses on

Diversos fatores podem afetar a saúde da glândula mamária bovina e embora a mastite bacteriana seja a causa mais estudada e relatada, as infecções virais também podem ter efeitos negativos sobre a saúde da glândula mamária bovina. De forma indireta as infecções virais podem danificar o ducto papilar do teto ou ainda, induzir ou agravar a mastite bovina, devido aos seus efeitos imunossupressores que podem levar a uma maior susceptibilidade para casos de mastite bacteriana e até mesmo intensificar a severidade das infecções bacterianas já estabelecidas. Alguns vírus (Alphaherpesvirus bovino 2, cowpox, pseudocowpox, febre aftosa, estomatite vesicular e papilomavírus) afetam a integridade da pele do úbere, levando a lesões no teto, favorecendo a entrada de patógenos causadores de mastite. Portanto é possível que a associação entre mastites e viroses seja subestimada e podem, por exemplo, estar associada às amostras de diagnóstico de mastite bacteriana com resultados de cultura bacteriana negativa. Além disso, as amostras de leite de vacas com mastite não são coletadas, tratadas e armazenadas adequadamente para pesquisa de vírus que requer cuidados específicos, além de um diagnóstico mais trabalhoso e caro. Desse modo, há lacunas aserem preenchidas quanto ao real impacto das viroses sobre a saúde da glândula mamária bovina. Apesar da possibilidade de detecção de anticorpos séricos c

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Several factors can affect bovine mammary gland health and although bacterial mastitis is the most studied and reported cause, viral infections may also have negative effects on bovine udder health. Viral infections can indirectly damage the papillary duct of the teat, and induce or exacerbate signs of bovine mastitis due to viral-induced immunosuppressive effects that may lead to a greater susceptibility to bacterial mastitis and even intensify the severity of established bacterial infections. Some viruses (Bovine alphaherpesvirus2, cowpox, pseudocowpox, foot-and-mouth disease, vesicular stomatitis and papillomavirus) affect the integrity of the udder skin, leading to teat lesions, favoring the entry of mastitis-causing pathogens. It is therefore possible that the association between mastitis and viruses is underestimated and may, for example, be associated with negative bacterial culture results. Few milk samples are tested for the presence of viruses, mainly because of the more laborious and expensive procedures required. Furthermore, samples for virus testing would require specific procedures in terms of collection, handling and storage. Thus, there is a knowledge gap in regard to the actual impact of viruses on bovine udder health. Despite the fact that serum anti-virus antibodies can be detected, there is not enough evidence to confirm or exclude the effect of viruses on udder health. However, any expectation of milk production from healthy animals should consider the possible impact of viral infections in mastitis development and not underestimate the importance of actions to diagnose and control the disease. Therefore, the purpose of this review is to describe the association of diagnosis and control of viral diseases and their effect on bovine udder health.(AU)

Diversos fatores podem afetar a saúde da glândula mamária bovina e embora a mastite bacteriana seja a causa mais estudada e relatada, as infecções virais também podem ter efeitos negativos sobre a saúde da glândula mamária bovina. De forma indireta as infecções virais podem danificar o ducto papilar do teto ou ainda, induzir ou agravar a mastite bovina, devido aos seus efeitos imunossupressores que podem levar a uma maior susceptibilidade para casos de mastite bacteriana e até mesmo intensificar a severidade das infecções bacterianas já estabelecidas. Alguns vírus (Alphaherpesvirus bovino 2, cowpox, pseudocowpox, febre aftosa, estomatite vesicular e papilomavírus) afetam a integridade da pele do úbere, levando a lesões no teto, favorecendo a entrada de patógenos causadores de mastite. Portanto é possível que a associação entre mastites e viroses seja subestimada e podem, por exemplo, estar associada às amostras de diagnóstico de mastite bacteriana com resultados de cultura bacteriana negativa. Além disso, as amostras de leite de vacas com mastite não são coletadas, tratadas e armazenadas adequadamente para pesquisa de vírus que requer cuidados específicos, além de um diagnóstico mais trabalhoso e caro. Desse modo, há lacunas a serem preenchidas quanto ao real impacto das viroses sobre a saúde da glândula mamária bovina. Apesar da possibilidade de detecção de anticorpos séricos contra os vírus, não existem evidências suficientes para incluir ou excluir os efeitos das viroses a saúde da glândula mamária bovina. Porém, a expectativa de produção de leite por meio de animais saudáveis deve considerar os possíveis impactos das infecções virais no desenvolvimento de mastites, não se pode, portanto, subestimar a importância de ações para o diagnóstico e controle das mesmas. Sendo assim, o propósito desta revisão é descrever as relações entre o diagnóstico de controle das doenças virais e seus potenciais impactos sobre a saúde da glândula mamária bovina.(AU)

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Bovine mastitis is the inflammation of the mammary gland which causes great losses in milk production. Therefore, the objective of study was to evaluate the prevalence, causative agents and factors related to management practices and production characteristics that influenced clinical mastitis in 44 dairy farms of Viçosa-MG. In 617 cows, clinical mastitis was determined by clinical examination of the mammary gland and mug test. Milk samples from mammary quarters with clinical mastitis were subjected to microbiological tests. A structured questionnaire was used to determine the risk factors for mastitis. The prevalence of clinical mastitis in cattle was 4.8%. The etiological agents more isolated were Staphylococcus aureus (29.73%), Streptococcus agalactiae (16.21%), Escherichia coli (13.51%) and yeast (13.51%). The high number of lactating animals per property, lack of herd sanity, poor hygiene of the environment and inappropriate practices of dry cow treatment had a significant association (p 0.05) with the prevalence of clinical mastitis. Therefore, environmental and animals management should be reviewed to help to reduce cases of mastitis in cattle of Viçosa (MG)

A mastite bovina é a inflamação da glândula mamária que ocasiona grandes perdas na produção leiteira. Portanto, objetivou-se avaliar a prevalência, agentes causadores e fatores relacionados às práticas de manejo e características de produção determinantes de mastite clínica em 44 propriedades leiteiras de Viçosa MG. Em 617 vacas, a mastite clínica foi determinada por meio de exame clínico da glândula mamária e teste da caneca. Amostras de leite dos quartos mamários com mastite clínica foram submetidas à exames microbiológicos. Um questionário estruturado foi aplicado para determinar os fatores de risco à mastite. A prevalência de mastite clínica nos rebanhos foi de 4,8%. Os agentes etiológicos mais isolados foram Staphylococcus aureus (29,73%), Streptococcus agalactiae (16,21%), Escherichia coli (13,51%) e Leveduras (13,51%). O grande número de animais em lactação por propriedade, falta de sanidade do rebanho, falta de higiene do ambiente e práticas inadequadas de tratamento de vaca seca tiveram associação significativa (p 0,05) com a prevalência de mastite clínica. Portanto, os manejos ambiental e animal devem ser revistos para auxiliar na diminuição de casos de mastite em rebanhos de Viçosa (MG)

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A prevalência, agentes causadores e fatores relacionados às práticas de manejo e características deprodução determinantes de mastite subclínica foram analisados em 44 propriedades leiteiras de Viçosa-MG. Em617 vacas, a mastite subclínica foi determinada por California Mastitis Test. Amostras de leite dos animais commastite foram submetidas à exames microbiológicos para confirmação da enfermidade. Um questionárioestruturado foi aplicado para determinar os fatores de risco à mastite. A prevalência de mastite subclínica nosrebanhos foi de 55,4%. Os agentes etiológicos mais isolados foram Corynebacterium sp. (32,99%),Staphylococcus aureus (28,35%), Streptococcus agalactiae (13,66%), Staphylococcus coagulase negativo(13,66%) e Staphylococcus intermedius (6,19%). A baixa produção de leite, procedimentos inadequados deordenha, fornecimento de leite de descarte para bezerras, falta de tratamento de vaca seca, má higiene doambiente das vacas e qualidade ruim da água utilizada nas propriedades rurais tiveram associação significativa (p< 0,05) com a prevalência de mastite subclínica. Maiores cuidados são necessários com as práticas de ordenha emanejo em propriedades de Viçosa-MG

The prevalence, causative agents and factors related to management practices and productioncharacteristics that influenced subclinical mastitis were determined in 44 dairy farms of Viçosa-MG. In 617cows, subclinical mastitis was diagnosed by California Mastitis Test. Milk samples from animals with mastitiswere submitted to microbiological tests for confirmation of the disease. A structured questionnaire was used todetermine the risk factors of mastitis. The prevalence of subclinical mastitis in herds were 55.4%. The etiologicalagents more isolated were Corynebacterium sp. (32.99%), Staphylococcus aureus (28.35%), Streptococcusagalactiae (13.66%), Staphylococcus coagulase negativo (13.66%) and Staphylococcus intermedius (6.19%).The low milk production, inadequate procedure of milking, supplying of disposal milk to calves, lack of mastitistreatment during the dry period, poor hygiene of cows environmental and bad quality of water in farms hadsignificant association (p < 0.05) with the prevalence of subclinical mastitis. Better care of the milking practicesand management of the property are necessary in farms of Viçosa-MG

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O presente trabalho teve como objetivo investigar a influência do estágio da lactação sobre as características físico-químicas e a celularidade do leite em ovelhas da raça Santa Inês. Desse modo, 143 amostras de leite negativas no exame bacteriológico e sem alterações na prova da caneca de fundo escuro provenientes de 33 ovelhas Santa Inês foram utilizadas para determinar a contagem automática e microscópica de células somáticas, os teores de extrato seco total, gordura, lactose e proteína. Os resultados do presente estudo apontaram para aumento da celularidade do leite e dos teores de gordura e proteína e redução do teor de lactose no final da lactação, embora não tenham sido observadas alterações no extrato seco total no leite desses animais durante a lactação. O presente estudo apontou ainda para correlação significativa entre a contagem automática e a microscópica de células somáticas (r = 0,80), a porcentagem de leucócitos mononucleares (r = -0,45), a porcentagem de leucócitos polimorfonucleares (r = 0,45), os teores de lactose (r = - 0,44), proteína (r = 0,37) e gordura (r = 0,30). No entanto, não se observou correlação significativa entre a CCS automática e o teor de extrato seco total (r = 0,007).

The purpose of the present trial was to investigate the influence of lactation stage on milk cellularity and physicochemical characteristics. Thus, 143 milk samples from 33 Santa Ines ewes negative in the bacteriological examination and without any alteration in the strip cup test were used to determine the automatic and microscopic somatic cell count (SCC), and the fat, lactose, protein and total solids content. The results of the present study showed an augment in the SCC and in the fat and protein content, besides a reduction in lactose content at the last lactation stage. Otherwise, no alteration was observed in the total solids content during the lactation period. This study pointed out to a significant correlation between the automatic SCC and the microscopic SCC (r = 0.80), percentage of polymorphonuclear leukocytes (r = 0.45), percentage of mononuclear leukocytes (r = -0.45), lactose (r = - 0.44), protein (r = 0.37) and fat (r = 0.30) content. Nevertheless, significant correlation between the automatic SCC and the total solids content was not observed.

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A presença de processos inflamatórios na glândula mamária pode ser avaliada pela contagem de células somáticas (CCS) no leite. Em ovinos, devido ao maior conteúdo de sólidos totais, sobretudo gordura, a contagem microscópica pode ser prejudicada, sendo necessário reavaliar os métodos de coloração do esfregaço. O presente estudo buscou avaliar a celularidade do leite de ovelhas e a comparação entre diferentes métodos de CCS no leite de ovinos da raça Santa Inês, através da contagem microscópica direta utilizando os corantes Broadhurst-Palley (BP) e Hematoxilina-eosina (HE) e a contagem automática de células somáticas em ovinos da raça Santa Inês. Foram utilizadas 602 amostras de leite de ovelhas Santa Inês em lactação. Estas amostras foram destinadas para a CCS automática e para a contagem leucocitária utilizando as colorações de BP e HE. Os valores logarítmicos da CCS automática (5,56 + 0,68), da contagem microscόpica utilizando as colorações de BP (5,75 + 0,76) e HE (5,01 + 0,89) foram diferentes entre si (P < 0,0001). A contagens de leucόcitos polimorfonucleares e mononucleares foram maiores ao utilizar a coloração de BP quando comparado com a coloração de HE (P < 0,0001). As correlações entre a CCS automática e a CCS microscópica utilizando as colorações de BP e HE foram de r = 0,82 e r = 0,79 (P < 0,0001), respectivamente. A correlação entre a contagem microscόpica direta utilizando as colorações de BP e HE foi de 0,76 (P < 0,0001). Conclui-se que, a metodologia empregada influencia a CCS no leite de ovinos, apesar da alta correlação observada entre a contagem automática de células somáticas e a contagem microscópica direta de células somáticas utilizando as colorações de BP e HE.

The somatic cell count (SCC) have been widely used as an indirect marker of inflammation, and consequently in the diagnosis of mastitis. In ewes, there is a need to evaluate the different dyes used in microscopic SCC due to the higher total solid content, mainly due to the fat content, that can impair the evaluation of the microscopic SCC. Thus, the present study aimed to evaluate the milk cellularity and compare different methodologies used to determine milk SCC as the microscopic leukocyte count using the Broadhurst-Palley (BP) and Hematoxilin-eosin (HE) stains and the automatic somatic cell count in Santa Ines ewes. Thus, 602 milk samples from Santa Ines ewes in different lactation stages were used and submitted for automatic SCC and the microscopic leukocyte count using the BP and HE stains. The logarithm values of automatic SCC (5.56 + 0.68), the microscopic somatic SCC using the BP (5.75 + 0.76) and the HE dye (5.01 + 0.89) were different (P < 0.0001). The polymorphonuclear and mononuclear leukocytes counts were higher using the BP dye when compared to the HE dye (P < 0.0001). The correlations among automatic CSS and the microscopic SCC using the BP and HE were r = 0.82 and r = 0.79, respectively (P < 0.0001). The correlation between the microscopic SCC using the BP and HE dyes was 0.76 (P < 0.0001). Thus, despite the high correlation observed among the automatic somatic cell count and the microscopic leukocyte count using the BP and HE stains, the methodology applied can influence the milk SCC from Santa Ines ewes.

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A infecção pelo vírus da leucemia bovina (VLB) leva ao desenvolvimento de linfocitose persistente (LP) ou linfossarcomas, principalmente em rebanhos bovinos leiteiros. Entretanto, os eventos que induzem tais manifestações ou o efeito da infecção na função das diferentes populações de leucócitos são pouco conhecidos. Avaliou-se o efeito da infecção pelo VLB na produção intracelular de peróxido de hidrogênio (H2O2) em leucócitos circulantes, mensurada pela fluorescência produzida pela diclorodihidrofluoresceína, utilizando-se de citometria de fluxo. As células foram obtidas de cinco vacas soronegativas; cinco vacas infectadas pelo VLB, alinfocitóticas; e cinco vacas infectadas, manifestando LP. Verificou-se que a infecção pelo VLB não altera a porcentagem de leucócitos circulantes produzindo H2O2, com ou sem prévio estímulo por adição in vitro: de 12-miristato 13-acetato de forbol (PMA); de lipopolissacarídeos de Escherichia coli (LPS); ou Staphylococcus aureus. Todavia, a produção de H2O2 em leucócitos de animais apresentando LP, com ou sem estímulo, foi menor que aquela verificada em leucócitos de animais soronegativos e de animais soropositivos alinfocitóticos. Os estímulos aumentaram a porcentagem de leucócitos produzindo H2O2 e a produção intracelular média em animais soronegativos ou naqueles infectados alinfocitóticos. Contudo, em leucócitos de vacas soropositivas manifestando LP, a fagocitose de S. aureus não elevou a porcentagem de leucócitos produzindo H2O2. Também, apenas a adição de PMA elevou a produção intracelular de H2O2 em leucócitos de fêmeas soropositivas manifestando LP. Concluiu-se que bovinos infectados pelo VLB, manifestando LP, apresentam menor produção intracelular de H2O2, demonstrando vulnerabilidade funcional refletida por imunossupressão.

Widespread Bovine Leukemia Virus (BLV) infection leads to persistent lymphocytosis (PL) or lymphosarcoma, mainly in dairy herds. Nevertheless, neither the sequence of events that conducts to these symptoms, nor the effect of infection on function of different leukocyte populations, is well known. We evaluated the effect of BLV infection on immune response of cows through the analysis of hydrogen peroxide (H2O2) intracellular production of circulating leukocytes after in vitro stimuli with phorbol-12-myristate-13-acetate (PMA), Escherichia coli lipopolysaccharides (LPS), or Staphylococcus aureus. Cells were obtained from five BLV-non infected cows, five BLV-infected, non-lymphocytotic cows, and five BLV-infected cows with PL, and analyzed by flow cytometry. Intracellular production of H2O2 was measured by dichlorodihydrofluorescein diacetate dependent fluorescence. Results showed that BLV infection does not alter the percentage of H2O2-producing circulating leukocytes (H2O2-PCL), with or without previous stimuli. However, the average of H2O2 intracellular production, with or without previous stimuli, in leukocytes obtained from cows with PL was smaller than those from cells obtained from BLV-negative cows and from BLV-infected, non-lymphocytotic cows. Moreover, stimuli increased H2O2 intracellular production and the percentage of H2O2-PCL obtained from BLVnegative cows and from BLV-infected, non-lymphocytotic cows. Conversely, neither phagocytosis of S. aureus and stimulus with LPS increases H2O2 intracellular production, nor phagocytosis increases the percentage of H2O2-PCL, when leukocytes were obtained from cows with PL. Thus, results show that BLV-infected cattle, with PL, have an impaired H2O2 intracellular production, demonstrating functional vulnerability reflected by immunosuppression.

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O objetivo do presente trabalho foi avaliar o efeito do congelamento e da incubação do leite de ovelhas da raça Santa Inês sobre os resultados da cultura bacteriológica. Desta forma, 45 amostras de leite ovino foram coletadas, e submetidas aos seguintes tratamentos: cultura bacteriológica (T1), e simultaneamente incubadas a 37°C por 18 horas (T2) e congeladas a -20°C por 24 horas (T3). Após esses períodos, as amostras dos T2 e T3 foram submetidas à cultura bacteriológica. O T2 possibilitou aumento no isolamento de estafilococos coagulase-negativo (ECN) comparadas ao T1, não ocorrendo o mesmo com o T3. No entanto, o T2 permitiu o desenvolvimento de bactérias normalmente presentes na microbiota dos ductos dos tetos em ovelhas sadias, como o Bacillus spp. Os resultados do presente estudo indicam que a incubação pode ser aplicada para a detecção de ECN na tentativa de reduzir resultados falso-negativos na cultura bacteriológica do leite de ovelhas da raça Santa Inês, determinando o uso mais eficiente dos recursos laboratoriais e a redução dos custos para os proprietários.

Milk samples from 45 halves were collected from lactating ewes to evaluate the effect of freezing and incubation of the whole milk on the qualitative results of bacteriologic culture. Thus, these milk samples were submitted to the following treatments: standard culture technique (T1), incubation for 18h at 37°C (T2) and thawing at -20°C for 24h (T3). After these periods, the milk samples from T2 and T3 were submitted to standard culture technique. The T2 showed an increase in the proportion of coagulase-negative staphylococci (CNS) recovery compared to T1, although the same cannot be predicted by T3. Conversely, the T2 allows the growth of some bacteria present in clinically healthy teats ducts as Bacillus spp.. The results of the present study indicated that the incubation of the whole milk can be applied to detection of CNS in ewes' milk in attempt to reduce the false-negative culture milk samples that can lead to a more efficient use of laboratory resources and reduce costs to herd owners.

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Avaliou-se, por citometria de fluxo, a fagocitose de Staphylococcus aureus conjugados com iodeto de propídio (IP), por leucócitos circulantes obtidos de cinco fêmeas bovinas negativas no sorodiagnóstico para a Leucose Enzoótica Bovina (LEB); de cinco fêmeas infectadas, manifestando linfocitose persistente (LP); e de cinco fêmeas infectadas, porém alinfocitóticas. Observou-se que, entre as amostras dos animais soronegativos, a porcentagem média de células realizando fagocitose (12,90%) não diferiu da observada entre as células dos animais alinfocitóticos (14,70%). Contudo, ambas foram maiores (p=0,047) que aquela verificada entre as células obtidas de animais manifestando LP (7,20%). Além disso, a intensidade média de fagocitose (caracterizada pela intensidade de fluorescência do IP, em valores arbitrários), verificada em leucócitos de animais manifestando LP (17,43) foi menor (p<0,001) que a observada em leucócitos de animais alinfocitóticos (29,50), e que a observada em leucócitos de animais soronegativos (25,18), que não diferiram entre si. Assim, os resultados permitem-nos alvitrar que há alteração na função fagocítica de leucócitos circulantes em animais infectados pelo vírus da LEB, manifestando LP.

This study evaluated the phagocytosis of propidium iodide-labeled Staphylococcus aureus (PI-Sa) by circulating leukocytes obtained from five Enzootic Bovine Leukosis (EBL)-negative cows, five naturally EBL-infected, non-lymphocytotic cows, and five EBL-positive cows with persistent lymphocytosis (PL), analyzed by flow cytometry. Among cells obtained from EBL-infected cows, presenting PL, the percentage of leukocytes carrying out phagocytosis (7.20%), was smaller (p=0.047) than that verified among cells obtained from non-infected (12.90%), and from BLV-infected, non-lymphocytotic cows (14.70%). Furthermore, leukocytes obtained from EBL-infected cows, presenting PL, showed smaller phagocytosis intensity (characterized by the intensity of propidium iodide fluorescence) than leukocytes obtained from non-infected and from EBL-infected, non-lymphocytotic, cows (p<0.001). Therefore, results show a decreased phagocytic function among circulating leukocytes obtained from BLV-infected, lymphocytotic cows.

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Foi demonstrado o envolvimento das espécies reativas de oxigênio (ERO) na patogênese de algumas retroviroses, levando muitas vezes à progressão e/ou persistência das mesmas. No entanto, o papel das espécies reativas de oxigênio resultante da modulação do sistema antioxidante, e seu envolvimento na infecção de bovinos naturalmente infectados pelo VLEB, até o presente trabalho, não tinha sido ainda investigado. Desta forma, o presente estudo objetivou-se avaliar o envolvimento do estresse oxidativo na infecção pelo VLEB em bovinos naturalmente infectados, associado ou não ao estabelecimento da linfocitose persistente (LP). Assim, a avaliação do estresse oxidativo se deu pelo teor de malondialdeído, concentração de glutationa reduzida, atividade da glutationa peroxidase e da superóxido dismutase, e pela atividade antioxidante total; e a resposta imune pela quantificação das subpopulações de linfócitos, função fagocítica e produção intracelular de peróxido de hidrogênio de leuccitos polimorfonucleares, morte celular e proliferação linfocitária, além da avaliação hematológica e sorodiagnóstico da leucose enzoótica bovina (LEB). Os resultados do presente estudo apontaram para o envolvimento do estresse oxidativo na infecção pelo vírus da leucose enzoótica bovina, dado pela menor concentração de glutationa peroxidase e a tendência a menor atividade da superxido dismutase eritrocitárias nos animais infectados pelo VLEB, não podendo, contudo, ser associado à fase da infecção. Ademais, os marcadores de estresse oxidativo não apresentaram alterados nem sequer a atividade antioxidante total destes animais. Além disso, o presente trabalho apontou para menor proliferação de linfócitos e redução da apoptose de células CD5+ nos animais infectados pelo VLEB manifestando LP, corroborados pelo significante aumento da população de linfcitos B (CD21+), e dos principais co-marcadores das células infectadas, no caso células CD5+ e CD11b+, nestes animais. No entanto, não observou diferenças significativas na população de linfócitos T destes animais, nem sequer alteração da capacidade fagocítica e produção intracelular de peróxido de hidrogênio pela população de leucócitos polimorfonucleares nos animais infectados

Abundant observations of multiple pathogenic interactions between reactive oxygen species (ROS) and the pathogenesis of some retroviruses have drawn attention to role of ROS on disease progression and/or persistence of infection. Therefore, the role of the oxidative stress resulted from the modulation of the antioxidant system in dairy cows naturally infected with BLV has not been studied yet. So, the present study tries to investigate the involvement of oxidative stress in dairy cows naturally infected with BLV associated or not with the persistent lymphocytosis (PL). Thus, the oxidative stress was evaluated by the malondialdehyde, reduced glutathione content, and by the activity of glutathione peroxidase and superoxide dismutase, and also total antioxidant activity. The immune response was also evaluated by the quantification of lymphocyte subsets, lymphocyte proliferation, polymorfonuclear leukocytes phagocytosis and intracellular hydrogen peroxide production, and cell death. The results of the present work point out to an involvement of oxidative stress in dairy cows naturally infected with BLV, given by a lower glutathione peroxidase activity and also a tendency towards lower superoxide dismutase activity, but it can be not associated with PL. Futhermore, the oxidative stress markers and also the total antioxidant status was not altered in infected animals. The present study also showed a lower lymphocyte proliferarion and apoptosis rates of CD5+ cells, strengthen by a higher B cells (CD21+) counts and also by a significant augment of CD5+ and CD11b+ positive cells that are often co-expressed by the infected cells. Although, no significant difference was observed in T cells counts. Moreover, the phagocytosis rates and the intracellular hydrogen peroxide production by the polymorphonuclear leukocytes are not altered in BLV infected dairy cows