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1.
Pesqui. vet. bras ; 38(1): 41-47, Jan. 2018. tab
Artigo em Português | LILACS, VETINDEX | ID: biblio-895559

Resumo

Foi realizado um estudo epidemiológico da leptospirose em fêmeas acima de 24 meses, provenientes de 246 rebanhos, e 2.766 animais amostrados aleatoriamente nos nove municípios que compõem a região do Pantanal de Mato Grosso do Sul, bem como identificados os fatores de risco associados à doença. As amostras de sangue foram coletadas no período de setembro a novembro de 2009 e examinadas pelo teste de aglutinação microscópica ante uma coleção de 24 antígenos vivos de Leptospira spp., representantes dos sorovares Australis, Bratislava, Autumnalis, Butembo, Castellonis, Batavie, Canicola, Whitcombi, Cynopteri, Grippotyphosa, Hebdomadis, Copenhageni, Icterohaemorrhagiae, Javanica, Panamá, Pomona, Pyrogenes, Hardjo, Wolffi, Shermani, Tarassovi, Sentot, Andamana e Patoc. Adicionalmente, representantes de doze estirpes de leptospiras isoladas no Brasil foram adicionados à coleção de antígenos do teste de soroaglutinação microscópica (SAM). A prevalência aparente foi de 66% e a prevalência real de animais infectados, de 79,80%, com intervalo de confiança (IC) de 95% (78,3-81,3) e 241 rebanhos apresentando pelo menos um animal reagente. Os sorovares mais prováveis foram o Hardjo seguido pelo Wolffi. Os resultados demonstram que a leptospirose bovina continua presente no Pantanal, com alta prevalência tanto em rebanhos quanto em indivíduos, sendo os principais fatores de risco para a doença o tipo de exploração e a raça.(AU)


This is an epidemiological study of leptospirosis in 24 month-old females from 246 herds. Two thousand, seven hundred and sixty six (2,766) animals were randomly sampled in the nine counties comprising the region of Pantanal of Mato Grosso do Sul, Brazil. The risk factors associated with the disease were also identified. Blood samples were collected from September to November 2009 and examined by the microscopic agglutination test (MAT) against a collection of 24 live antigens of Leptospira spp., representatives of serovars Australis, Bratislava, Autumnalis, Butembo, Castellonis, Batavie, Canicola Whitcombi, Cynopteri, Grippotyphosa, Hebdomadis, Copenhageni, Icterohaemorrhagiae, Javanica, Panama, Pomona, Pyrogenes, Hardjo, Wolffi, Shermani, Tarassovi, Sentot, Andamana, and Patoc. Additionally, twelve representatives of Leptospira strains isolated in Brazil were added to the collection of antigens for the microscopic agglutination test (MAT). The apparent prevalence was 66% and the actual prevalence of infected animals was 79.80%, with a confidence interval of 95% (78.3 to 81.3) and 241 herds having at least one reactive animal. The most likely serovars were Hardjo followed by Wolffi. Results show that bovine leptospirosis is still present in Pantanal, with high prevalence both in animals and herds, the main risk factors for the disease being the type of cattle farming and breeding.(AU)


Assuntos
Animais , Feminino , Bovinos , Leptospira/isolamento & purificação , Leptospirose/epidemiologia , Testes de Aglutinação/veterinária , Antígenos , Brasil/epidemiologia
2.
Pesqui. vet. bras ; 38(1): 41-47, jan. 2018. tab
Artigo em Português | VETINDEX | ID: vti-735180

Resumo

Foi realizado um estudo epidemiológico da leptospirose em fêmeas acima de 24 meses, provenientes de 246 rebanhos, e 2.766 animais amostrados aleatoriamente nos nove municípios que compõem a região do Pantanal de Mato Grosso do Sul, bem como identificados os fatores de risco associados à doença. As amostras de sangue foram coletadas no período de setembro a novembro de 2009 e examinadas pelo teste de aglutinação microscópica ante uma coleção de 24 antígenos vivos de Leptospira spp., representantes dos sorovares Australis, Bratislava, Autumnalis, Butembo, Castellonis, Batavie, Canicola, Whitcombi, Cynopteri, Grippotyphosa, Hebdomadis, Copenhageni, Icterohaemorrhagiae, Javanica, Panamá, Pomona, Pyrogenes, Hardjo, Wolffi, Shermani, Tarassovi, Sentot, Andamana e Patoc. Adicionalmente, representantes de doze estirpes de leptospiras isoladas no Brasil foram adicionados à coleção de antígenos do teste de soroaglutinação microscópica (SAM). A prevalência aparente foi de 66% e a prevalência real de animais infectados, de 79,80%, com intervalo de confiança (IC) de 95% (78,3-81,3) e 241 rebanhos apresentando pelo menos um animal reagente. Os sorovares mais prováveis foram o Hardjo seguido pelo Wolffi. Os resultados demonstram que a leptospirose bovina continua presente no Pantanal, com alta prevalência tanto em rebanhos quanto em indivíduos, sendo os principais fatores de risco para a doença o tipo de exploração e a raça.(AU)


This is an epidemiological study of leptospirosis in 24 month-old females from 246 herds. Two thousand, seven hundred and sixty six (2,766) animals were randomly sampled in the nine counties comprising the region of Pantanal of Mato Grosso do Sul, Brazil. The risk factors associated with the disease were also identified. Blood samples were collected from September to November 2009 and examined by the microscopic agglutination test (MAT) against a collection of 24 live antigens of Leptospira spp., representatives of serovars Australis, Bratislava, Autumnalis, Butembo, Castellonis, Batavie, Canicola Whitcombi, Cynopteri, Grippotyphosa, Hebdomadis, Copenhageni, Icterohaemorrhagiae, Javanica, Panama, Pomona, Pyrogenes, Hardjo, Wolffi, Shermani, Tarassovi, Sentot, Andamana, and Patoc. Additionally, twelve representatives of Leptospira strains isolated in Brazil were added to the collection of antigens for the microscopic agglutination test (MAT). The apparent prevalence was 66% and the actual prevalence of infected animals was 79.80%, with a confidence interval of 95% (78.3 to 81.3) and 241 herds having at least one reactive animal. The most likely serovars were Hardjo followed by Wolffi. Results show that bovine leptospirosis is still present in Pantanal, with high prevalence both in animals and herds, the main risk factors for the disease being the type of cattle farming and breeding.(AU)


Assuntos
Animais , Feminino , Bovinos , Leptospira/isolamento & purificação , Leptospirose/epidemiologia , Testes de Aglutinação/veterinária , Antígenos , Brasil/epidemiologia
3.
Pesqui. vet. bras ; 38(1)2018.
Artigo em Português | VETINDEX | ID: vti-743725

Resumo

ABSTRACT: This is an epidemiological study of leptospirosis in 24 month-old females from 246 herds. Two thousand, seven hundred and sixty six (2,766) animals were randomly sampled in the nine counties comprising the region of Pantanal of Mato Grosso do Sul, Brazil. The risk factors associated with the disease were also identified. Blood samples were collected from September to November 2009 and examined by the microscopic agglutination test (MAT) against a collection of 24 live antigens of Leptospira spp., representatives of serovars Australis, Bratislava, Autumnalis, Butembo, Castellonis, Batavie, Canicola Whitcombi, Cynopteri, Grippotyphosa, Hebdomadis, Copenhageni, Icterohaemorrhagiae, Javanica, Panama, Pomona, Pyrogenes, Hardjo, Wolffi, Shermani, Tarassovi, Sentot, Andamana, and Patoc. Additionally, twelve representatives of Leptospira strains isolated in Brazil were added to the collection of antigens for the microscopic agglutination test (MAT). The apparent prevalence was 66% and the actual prevalence of infected animals was 79.80%, with a confidence interval of 95% (78.3 to 81.3) and 241 herds having at least one reactive animal. The most likely serovars were Hardjo followed by Wolffi. Results show that bovine leptospirosis is still present in Pantanal, with high prevalence both in animals and herds, the main risk factors for the disease being the type of cattle farming and breeding.


RESUMO: Foi realizado um estudo epidemiológico da leptospirose em fêmeas acima de 24 meses, provenientes de 246 rebanhos, e 2.766 animais amostrados aleatoriamente nos nove municípios que compõem a região do Pantanal de Mato Grosso do Sul, bem como identificados os fatores de risco associados à doença. As amostras de sangue foram coletadas no período de setembro a novembro de 2009 e examinadas pelo teste de aglutinação microscópica ante uma coleção de 24 antígenos vivos de Leptospira spp., representantes dos sorovares Australis, Bratislava, Autumnalis, Butembo, Castellonis, Batavie, Canicola, Whitcombi, Cynopteri, Grippotyphosa, Hebdomadis, Copenhageni, Icterohaemorrhagiae, Javanica, Panamá, Pomona, Pyrogenes, Hardjo, Wolffi, Shermani, Tarassovi, Sentot, Andamana e Patoc. Adicionalmente, representantes de doze estirpes de leptospiras isoladas no Brasil foram adicionados à coleção de antígenos do teste de soroaglutinação microscópica (SAM). A prevalência aparente foi de 66% e a prevalência real de animais infectados, de 79,80%, com intervalo de confiança (IC) de 95% (78,3-81,3) e 241 rebanhos apresentando pelo menos um animal reagente. Os sorovares mais prováveis foram o Hardjo seguido pelo Wolffi. Os resultados demonstram que a leptospirose bovina continua presente no Pantanal, com alta prevalência tanto em rebanhos quanto em indivíduos, sendo os principais fatores de risco para a doença o tipo de exploração e a raça.

4.
Braz. J. Microbiol. ; 49(2): 347-350, Apr.-June 2018. tab
Artigo em Inglês | VETINDEX | ID: vti-20063

Resumo

In swine and bovines, leptospirosis prevention and control is carried out via vaccination of susceptible animals using bacterins. However, the efficiency of leptospirosis vaccines has been questioned. This work aimed to investigate the potency of five leptospirosis vaccines sold commercially in Brazil, challenging the animals with one autochthonous strain of Leptospira, Canicola serovar, denoted LO4, isolated from swine. The standard protocol was followed, and renal carriers of Leptospira were identified among the surviving animals by culture and PCR. Of the five vaccines tested, only two proved effective. None of the surviving animals was positive by culture; however, one animal was positive by PCR. Three of the five vaccines sold commercially in Brazil for the immunization of swine or bovines failed the test of the efficacy to protect the vaccinated animals following challenge with an autochthonous Leptospira strain, Canicola serovar. The two vaccines provided protection against the renal carrier state in the surviving animals. The criteria used to produce leptospirosis bacterins sold commercially in Brazil must be reviewed. The industry should support researches on leptospiral vaccinology to improve the quality of the present vaccines and discover new immunogenic strains, because it is known that vaccination is one of the most important tools to increase the reproduction rates in livestock.(AU)


Assuntos
Animais , Leptospirose/imunologia , Leptospirose/veterinária , Vacinas/análise , Vacinação/veterinária , Leptospira interrogans serovar canicola/imunologia , Bovinos/imunologia , Suínos/imunologia , Sorogrupo , Imunogenicidade da Vacina
5.
Artigo em Inglês | VETINDEX | ID: vti-739172

Resumo

Abstract In swine and bovines, leptospirosis prevention and control is carried out via vaccination of susceptible animals using bacterins. However, the efficiency of leptospirosis vaccines has been questioned. This work aimed to investigate the potency of five leptospirosis vaccines sold commercially in Brazil, challenging the animals with one autochthonous strain of Leptospira, Canicola serovar, denoted LO4, isolated from swine. The standard protocol was followed, and renal carriers of Leptospira were identified among the surviving animals by culture and PCR. Of the five vaccines tested, only two proved effective. None of the surviving animals was positive by culture; however, one animal was positive by PCR. Three of the five vaccines sold commercially in Brazil for the immunization of swine or bovines failed the test of the efficacy to protect the vaccinated animals following challenge with an autochthonous Leptospira strain, Canicola serovar. The two vaccines provided protection against the renal carrier state in the surviving animals. The criteria used to produce leptospirosis bacterins sold commercially in Brazil must be reviewed. The industry should support researches on leptospiral vaccinology to improve the quality of the present vaccines and discover new immunogenic strains, because it is known that vaccination is one of the most important tools to increase the reproduction rates in livestock.

6.
Semina Ci. agr. ; 37(5, supl. 2): 3693-3700, 2016. tab
Artigo em Inglês | VETINDEX | ID: vti-26310

Resumo

The isolation of Mycobacterium bovis is critical to a surveillance system for bovine tuberculosis based on detection of lesions in abattoirs. Thus, four solid culture media and three incubation conditions were investigated to elucidate which combination overcomes the others by assessing growth, time to the first appearance of colonies and their number. Ninety-seven samples of granulomatous lesions were submitted to the decontamination procedure by 1-hexadecylpyridinium chloride at 0.75% w/v, and inoculated on two egg-based media, Stonebrinks (ST) and Lõwenstein-Jensens with sodium pyruvate (LJp), and two agar-based media, tuberculosis blood agar (B83) and Middlebrook 7H11 medium (7H11). Each medium was incubated at 37°C for 90 days in three incubation conditions: in air, in air containing 10% carbon dioxide (CO2), and in air in slopes closed with burned hydrophobic cotton and subsequently plugged with a cork to create a microaerophilic atmosphere. The colonies appeared faster and in higher number when incubated in air containing 10% CO2 (p < 0.01), independent of media. B83 showed a faster growth and detected more isolates at 30 days of incubation, when compared to ST (0.0178), LJp (p < 0.0001) and 7H11 (p < 0.0001), though there was no difference between B83, ST and LJp at 60 and 90 days of incubation. 7H11 presented the lowest number of isolates (p < 0.0001) and a longer period for the appearance of the first colony (p < 0.001). According to our findings, the concomitant use of ST and B83 media incubated in air containing 10% CO2 increases the isolation of M. bovis in a shorter period of time, which improves bovine tuberculosis diagnosis.(AU)


O isolamento do Mycobacterium bovis é fundamental para um sistema de vigilância para tuberculose bovina baseado na detecção de lesões em abatedouro. Assim, quatro meios de cultura sólidos e três condições de incubação foram investigados para elucidar qual combinação supera as outras através da avaliação de crescimento, tempo para o aparecimento da primeira colônia e número de colônias. Noventa e sete amostras de lesões granulomatosas foram submetidas ao processo de descontaminação por cloreto de 1-hexadecilpiridínio a 0,75%, e inoculadas em dois meios a base de ovo, Stonebrink (ST) e Lõwenstein-Jensen com piruvato de sódio (LJp), e dois meios a base de ágar, ágar sangue tuberculose (B83) e Middlebrook 7H11 (7H11). Cada meio foi incubado a 37°C por 90 dias, em três condições de incubação: em atmosfera normal, em atmosfera com acréscimo de 10% de dióxido de carbono (CO2), e em atmosfera normal em tubos fechados com algodão hidrófobo queimado e subsequentemente fechado com rolha para criar uma atmosfera microaerófila. As colônias apareceram mais rapidamente e em maior número quando incubadas em atmosfera com 10% de CO2 (p < 0,01), independente dos meios. As micobactérias cresceram em maior abundância e mais rapidamente no meio B83 aos 30 dias de incubação, comparado a ST (0,0178), LJp (p < 0,0001) e 7H11 (p < 0,0001), apesar de não ter havido diferença entre B83, ST e LJp aos 60 e 90 dias de incubação. 7H11 exibiu o número mais baixo de isolados (p < 0,0001) e um período mais longo para o aparecimento da primeira colônia (p < 0,001). De acordo com nossos resultados, o uso concomitante dos meios ST e B83, incubados em atmosfera com acréscimo de 10% de CO2, aumenta a proporção de isolados e o número de UFC de M. bovis, além de abreviar o tempo para aparecimento das primeiras colônias, melhorando o diagnóstico direto de tuberculose.(AU)


Assuntos
Animais , Bovinos , Mycobacterium bovis/isolamento & purificação , Mycobacterium bovis/crescimento & desenvolvimento , Meios de Cultura , Tuberculose Bovina/diagnóstico , Bovinos , Doenças dos Bovinos/diagnóstico
7.
Semina ciênc. agrar ; 37(5, supl. 2): 3693-3700, 2016. tab
Artigo em Inglês | VETINDEX | ID: biblio-1500596

Resumo

The isolation of Mycobacterium bovis is critical to a surveillance system for bovine tuberculosis based on detection of lesions in abattoirs. Thus, four solid culture media and three incubation conditions were investigated to elucidate which combination overcomes the others by assessing growth, time to the first appearance of colonies and their number. Ninety-seven samples of granulomatous lesions were submitted to the decontamination procedure by 1-hexadecylpyridinium chloride at 0.75% w/v, and inoculated on two egg-based media, Stonebrink’s (ST) and Lõwenstein-Jensen’s with sodium pyruvate (LJp), and two agar-based media, tuberculosis blood agar (B83) and Middlebrook 7H11 medium (7H11). Each medium was incubated at 37°C for 90 days in three incubation conditions: in air, in air containing 10% carbon dioxide (CO2), and in air in slopes closed with burned hydrophobic cotton and subsequently plugged with a cork to create a microaerophilic atmosphere. The colonies appeared faster and in higher number when incubated in air containing 10% CO2 (p < 0.01), independent of media. B83 showed a faster growth and detected more isolates at 30 days of incubation, when compared to ST (0.0178), LJp (p < 0.0001) and 7H11 (p < 0.0001), though there was no difference between B83, ST and LJp at 60 and 90 days of incubation. 7H11 presented the lowest number of isolates (p < 0.0001) and a longer period for the appearance of the first colony (p < 0.001). According to our findings, the concomitant use of ST and B83 media incubated in air containing 10% CO2 increases the isolation of M. bovis in a shorter period of time, which improves bovine tuberculosis diagnosis.


O isolamento do Mycobacterium bovis é fundamental para um sistema de vigilância para tuberculose bovina baseado na detecção de lesões em abatedouro. Assim, quatro meios de cultura sólidos e três condições de incubação foram investigados para elucidar qual combinação supera as outras através da avaliação de crescimento, tempo para o aparecimento da primeira colônia e número de colônias. Noventa e sete amostras de lesões granulomatosas foram submetidas ao processo de descontaminação por cloreto de 1-hexadecilpiridínio a 0,75%, e inoculadas em dois meios a base de ovo, Stonebrink (ST) e Lõwenstein-Jensen com piruvato de sódio (LJp), e dois meios a base de ágar, ágar sangue tuberculose (B83) e Middlebrook 7H11 (7H11). Cada meio foi incubado a 37°C por 90 dias, em três condições de incubação: em atmosfera normal, em atmosfera com acréscimo de 10% de dióxido de carbono (CO2), e em atmosfera normal em tubos fechados com algodão hidrófobo queimado e subsequentemente fechado com rolha para criar uma atmosfera microaerófila. As colônias apareceram mais rapidamente e em maior número quando incubadas em atmosfera com 10% de CO2 (p < 0,01), independente dos meios. As micobactérias cresceram em maior abundância e mais rapidamente no meio B83 aos 30 dias de incubação, comparado a ST (0,0178), LJp (p < 0,0001) e 7H11 (p < 0,0001), apesar de não ter havido diferença entre B83, ST e LJp aos 60 e 90 dias de incubação. 7H11 exibiu o número mais baixo de isolados (p < 0,0001) e um período mais longo para o aparecimento da primeira colônia (p < 0,001). De acordo com nossos resultados, o uso concomitante dos meios ST e B83, incubados em atmosfera com acréscimo de 10% de CO2, aumenta a proporção de isolados e o número de UFC de M. bovis, além de abreviar o tempo para aparecimento das primeiras colônias, melhorando o diagnóstico direto de tuberculose.


Assuntos
Animais , Bovinos , Meios de Cultura , Mycobacterium bovis/crescimento & desenvolvimento , Mycobacterium bovis/isolamento & purificação , Bovinos , Doenças dos Bovinos/diagnóstico , Tuberculose Bovina/diagnóstico
8.
Semina Ci. agr. ; 37(5, supl. 2): 3709-3718, 2016. tab, graf
Artigo em Inglês | VETINDEX | ID: vti-26423

Resumo

The current scenario of international beef trading has increased the pressure for better and faster diagnosis of bovine tuberculosis. Although traditional culture remains the gold standard method to confirm Mycobacterium bovis infection, it is exceedingly time consuming, and demands viable mycobacteria. Molecular methods overcome the flaws of the bacteriological methods with faster detection and identification. However, mycobacterial features like a complex cell wall and pathogenhost interaction make the molecular detection a challenge. Three protocols for DNA extraction (A, B and C) from bovine tissues were tested to verify the most suitable technique for routine diagnostic assessment of their specificity and sensitivity. Thirty culture-positive and thirty culture-negative granulomatous lesions were included in the trial. From each sample, three tissue suspensions at different dilutions (10-1, 10-2 and 10-3) were prepared and submitted to DNA extraction. PCR procedures targeting IS6110 were performed, employing two volumes of DNA: 5 µL of all three dilutions, and 2.5 µL of the 10-1 dilution. Protocol A was able to detect members of the M. tuberculosis complex in most samples. The sensitivity of the test decreased with increase in tissue-suspension dilution. Although Protocol A presented the highest sensitivity followed by C and B, it showed the lowest specificity, which can be due to a failure in primary isolation caused by the lack of viable organisms or incubation time. Regardless classical bacteriological methods are still recommended by OIE, after evaluating the sensitivity of DNA extraction protocols and PCR procedures, we conclude that the best strategy for M. bovis detection is to follow Protocol A on concentrated tissue suspensions.(AU)


O atual comércio internacional de carne tem aumentado a pressão para haver um melhor e mais rápido diagnóstico de tuberculose bovina. O tradicional cultivo continua a ser o método padrão ouro para confirmar a infecção por Mycobacterium bovis, apesar de ser excessivamente demorado e necessitar de micobactérias viáveis. Métodos moleculares representam a superação de todos os defeitos dos métodos bacteriológicos com detecção e identificação mais rápidas. Entretanto, características das micobactérias, como uma complexa parede celular e a interação patógeno-hospedeiro, torna-os um desafio. Três protocolos de extração de DNA (A, B e C) foram testados em tecidos bovinos para verificar qual técnica é mais adequada para diagnóstico de rotina, avaliando sua especificidade e sensibilidade. Trinta lesões granulomatosas positivas no cultivo e 30 lesões granulomatosas negativas no cultivo foram utilizadas no experimento. A partir de cada amostra, três homogeneizados com diferentes diluições (10-1, 10-2 e 10-3) foram preparadas e submetidas à extração de DNA. A PCR para o gene alvo IS6110 foi realizada empregando-se dois volumes de DNA: um com 5 µL para todas as três diluições e outro com 2,5 µL da diluição 10-1. O Protocolo A foi capaz de detectar membros do complexo M. tuberculosis na maior parte das amostras. À medida que a diluição dos homogeneizados aumentou, a sensibilidade diminuiu. Embora o Protocolo A tenha apresentado a maior sensibilidade, seguido por C e B, este revelou a menor especificidade, que pode ser devido à insuficiência de organismos viáveis ou tempo de incubação no primo isolamento. Apesar de os métodos bacteriológicos clássicos ainda serem recomendados pela OIE, através da avaliação da sensibilidade dos protocolos de extração de DNA e dos procedimentos de PCR, concluímos que a melhor estratégia para a detecção de M. bovis é usar o Protocolo A em homogeneizados mais concentrados.(AU)


Assuntos
Animais , Bovinos , Tuberculose Bovina/diagnóstico , Mycobacterium bovis , Doenças dos Bovinos/diagnóstico , Reação em Cadeia da Polimerase/veterinária
9.
Semina Ci. agr. ; 37(5, supl. 2): 3685-3692, 2016. tab
Artigo em Inglês | VETINDEX | ID: vti-26231

Resumo

Preservation of specimens during transportation between abattoirs and diagnostic laboratories defines a critical stage in the definitive diagnosis of bovine tuberculosis by the isolation of Mycobacterium bovis. A 2-step study was designed to verify the maximum time that tissue samples can be stored in saturated sodium borate solution (SSB) with the highest detection of M. bovis isolates. Ninety hamsters were inoculated intraperitoneally with a suspension of M. bovis strain AN5 and were humanely euthanized after 40 days. Their spleens were collected and stored in SSB during four distinct periods (30, 60, 90 and 120 days) with incubation at two temperatures (27C and 37C). The control group was cultured on the day of euthanasia. Sixty-nine suspected tuberculous lesions samples were collected in the abattoir and were stored in SSB for three periods (30, 60 and 90 days) at 27C in the laboratory. The bovine control group was cultured on the day of entry in the laboratory. Both experiments were analyzed separately based on the growth proportion of isolates and the number of colonies. SSB was able to maintain the viability of most M. bovis at high temperatures for up to 30 days. A progressive decline was observed with other storage periods at 27C, and no growth was obtained after 60-day storage at 37C. Despite the loss in viability of M. bovis, SSB is the most favorable choice to preserve specimens during transportation across a large country with high variation in environmental temperature. The sensitivity of M. bovis detection by bacteriological examination is inversely proportional to storage time. Therefore, the storage of tuberculous lesion specimens in SSB is recommended to not exceed 30 days at 27°C before cultivation.(AU)


A conservação de espécimes durante o transporte entre abatedouros e laboratórios de diagnóstico define uma etapa crítica no diagnóstico definitivo da tuberculose bovina pelo isolamento de Mycobacterium bovis. Um estudo de duas fases foi delineado para verificar o tempo máximo de armazenamento que amostras teciduais podem ser mantidas em solução saturada de borato de sódio (SSB) com a mais alta detecção de isolados de M. bovis. Noventa hamsters foram inoculados com suspensão de M. bovis cepa AN5 por via intraperitoneal e, após 40 dias, submetidos à eutanásia humanitária. Os baços foram coletados, armazenados em SSB por quatro períodos distintos (30, 60, 90 e 120 dias) e incubados a duas temperaturas (27 e 37C). O grupo controle foi cultivado no mesmo dia da eutanásia. Sessenta e nove amostras de lesões suspeitas de tuberculose foram coletadas em abatedouro e armazenadas em SSB por três períodos (30, 60 e 90 dias) a 27C no laboratório. O grupo controle bovino foi cultivado no dia da entrada no laboratório. Ambos os experimentos foram analisados separadamente baseados na proporção de crescimento de isolados e no número de colônias. A SSB foi capaz de manter a maioria de M. bovis viáveis em altas temperaturas por até 30 dias. Houve um declínio progressivo nos outros períodos de armazenamento a 27C, e não houve crescimento a partir de 60 dias a 37C. Apesar da perda de viabilidade de M. bovis, a SSB é a escolha mais favorável para preservar as amostras durante o transporte em um grande país com alta variação de temperatura ambiente. A sensibilidade de detecção de M. bovis por exames bacteriológicos é inversamente proporcional ao tempo de armazenamento. Portanto, é recomendado que o armazenamento de amostras de lesões tuberculosas em SSB não exceda 30 dias a 27°C antes do cultivo.(AU)


Assuntos
Animais , Bovinos , Cobaias , Cricetinae , Tuberculose Bovina/diagnóstico , Mycobacterium bovis , Preservação de Tecido/veterinária , Doenças dos Bovinos , Bovinos
10.
Semina ciênc. agrar ; 37(5, supl. 2): 3685-3692, 2016. tab
Artigo em Inglês | VETINDEX | ID: biblio-1500591

Resumo

Preservation of specimens during transportation between abattoirs and diagnostic laboratories defines a critical stage in the definitive diagnosis of bovine tuberculosis by the isolation of Mycobacterium bovis. A 2-step study was designed to verify the maximum time that tissue samples can be stored in saturated sodium borate solution (SSB) with the highest detection of M. bovis isolates. Ninety hamsters were inoculated intraperitoneally with a suspension of M. bovis strain AN5 and were humanely euthanized after 40 days. Their spleens were collected and stored in SSB during four distinct periods (30, 60, 90 and 120 days) with incubation at two temperatures (27C and 37C). The control group was cultured on the day of euthanasia. Sixty-nine suspected tuberculous lesions samples were collected in the abattoir and were stored in SSB for three periods (30, 60 and 90 days) at 27C in the laboratory. The bovine control group was cultured on the day of entry in the laboratory. Both experiments were analyzed separately based on the growth proportion of isolates and the number of colonies. SSB was able to maintain the viability of most M. bovis at high temperatures for up to 30 days. A progressive decline was observed with other storage periods at 27C, and no growth was obtained after 60-day storage at 37C. Despite the loss in viability of M. bovis, SSB is the most favorable choice to preserve specimens during transportation across a large country with high variation in environmental temperature. The sensitivity of M. bovis detection by bacteriological examination is inversely proportional to storage time. Therefore, the storage of tuberculous lesion specimens in SSB is recommended to not exceed 30 days at 27°C before cultivation.


A conservação de espécimes durante o transporte entre abatedouros e laboratórios de diagnóstico define uma etapa crítica no diagnóstico definitivo da tuberculose bovina pelo isolamento de Mycobacterium bovis. Um estudo de duas fases foi delineado para verificar o tempo máximo de armazenamento que amostras teciduais podem ser mantidas em solução saturada de borato de sódio (SSB) com a mais alta detecção de isolados de M. bovis. Noventa hamsters foram inoculados com suspensão de M. bovis cepa AN5 por via intraperitoneal e, após 40 dias, submetidos à eutanásia humanitária. Os baços foram coletados, armazenados em SSB por quatro períodos distintos (30, 60, 90 e 120 dias) e incubados a duas temperaturas (27 e 37C). O grupo controle foi cultivado no mesmo dia da eutanásia. Sessenta e nove amostras de lesões suspeitas de tuberculose foram coletadas em abatedouro e armazenadas em SSB por três períodos (30, 60 e 90 dias) a 27C no laboratório. O grupo controle bovino foi cultivado no dia da entrada no laboratório. Ambos os experimentos foram analisados separadamente baseados na proporção de crescimento de isolados e no número de colônias. A SSB foi capaz de manter a maioria de M. bovis viáveis em altas temperaturas por até 30 dias. Houve um declínio progressivo nos outros períodos de armazenamento a 27C, e não houve crescimento a partir de 60 dias a 37C. Apesar da perda de viabilidade de M. bovis, a SSB é a escolha mais favorável para preservar as amostras durante o transporte em um grande país com alta variação de temperatura ambiente. A sensibilidade de detecção de M. bovis por exames bacteriológicos é inversamente proporcional ao tempo de armazenamento. Portanto, é recomendado que o armazenamento de amostras de lesões tuberculosas em SSB não exceda 30 dias a 27°C antes do cultivo.


Assuntos
Animais , Bovinos , Cobaias , Cricetinae , Cricetinae , Cricetinae , Mycobacterium bovis , Preservação de Tecido/veterinária , Tuberculose Bovina/diagnóstico , Bovinos , Doenças dos Bovinos
11.
Semina ciênc. agrar ; 37(5, supl. 2): 3709-3718, 2016. tab, graf
Artigo em Inglês | VETINDEX | ID: biblio-1500604

Resumo

The current scenario of international beef trading has increased the pressure for better and faster diagnosis of bovine tuberculosis. Although traditional culture remains the gold standard method to confirm Mycobacterium bovis infection, it is exceedingly time consuming, and demands viable mycobacteria. Molecular methods overcome the flaws of the bacteriological methods with faster detection and identification. However, mycobacterial features like a complex cell wall and pathogenhost interaction make the molecular detection a challenge. Three protocols for DNA extraction (A, B and C) from bovine tissues were tested to verify the most suitable technique for routine diagnostic assessment of their specificity and sensitivity. Thirty culture-positive and thirty culture-negative granulomatous lesions were included in the trial. From each sample, three tissue suspensions at different dilutions (10-1, 10-2 and 10-3) were prepared and submitted to DNA extraction. PCR procedures targeting IS6110 were performed, employing two volumes of DNA: 5 µL of all three dilutions, and 2.5 µL of the 10-1 dilution. Protocol A was able to detect members of the M. tuberculosis complex in most samples. The sensitivity of the test decreased with increase in tissue-suspension dilution. Although Protocol A presented the highest sensitivity followed by C and B, it showed the lowest specificity, which can be due to a failure in primary isolation caused by the lack of viable organisms or incubation time. Regardless classical bacteriological methods are still recommended by OIE, after evaluating the sensitivity of DNA extraction protocols and PCR procedures, we conclude that the best strategy for M. bovis detection is to follow Protocol A on concentrated tissue suspensions.


O atual comércio internacional de carne tem aumentado a pressão para haver um melhor e mais rápido diagnóstico de tuberculose bovina. O tradicional cultivo continua a ser o método padrão ouro para confirmar a infecção por Mycobacterium bovis, apesar de ser excessivamente demorado e necessitar de micobactérias viáveis. Métodos moleculares representam a superação de todos os defeitos dos métodos bacteriológicos com detecção e identificação mais rápidas. Entretanto, características das micobactérias, como uma complexa parede celular e a interação patógeno-hospedeiro, torna-os um desafio. Três protocolos de extração de DNA (A, B e C) foram testados em tecidos bovinos para verificar qual técnica é mais adequada para diagnóstico de rotina, avaliando sua especificidade e sensibilidade. Trinta lesões granulomatosas positivas no cultivo e 30 lesões granulomatosas negativas no cultivo foram utilizadas no experimento. A partir de cada amostra, três homogeneizados com diferentes diluições (10-1, 10-2 e 10-3) foram preparadas e submetidas à extração de DNA. A PCR para o gene alvo IS6110 foi realizada empregando-se dois volumes de DNA: um com 5 µL para todas as três diluições e outro com 2,5 µL da diluição 10-1. O Protocolo A foi capaz de detectar membros do complexo M. tuberculosis na maior parte das amostras. À medida que a diluição dos homogeneizados aumentou, a sensibilidade diminuiu. Embora o Protocolo A tenha apresentado a maior sensibilidade, seguido por C e B, este revelou a menor especificidade, que pode ser devido à insuficiência de organismos viáveis ou tempo de incubação no primo isolamento. Apesar de os métodos bacteriológicos clássicos ainda serem recomendados pela OIE, através da avaliação da sensibilidade dos protocolos de extração de DNA e dos procedimentos de PCR, concluímos que a melhor estratégia para a detecção de M. bovis é usar o Protocolo A em homogeneizados mais concentrados.


Assuntos
Animais , Bovinos , Doenças dos Bovinos/diagnóstico , Mycobacterium bovis , Tuberculose Bovina/diagnóstico , Reação em Cadeia da Polimerase/veterinária
12.
Braz. J. Vet. Res. Anim. Sci. (Online) ; 53(3): 1-9, 2016. mapas, tab
Artigo em Inglês | LILACS, VETINDEX | ID: biblio-875233

Resumo

Opossum (Didelphis spp.) is an omnivorous marsupial native to the Americas that shows synanthropic behavior in urban areas. Despite its proximity to domestic animals and humans, knowledge of its participation in the epidemiology of some zoonotic agents is substantial. This study aimed to determine the presence of antibodies against Toxoplasma gondii, Neospora spp. and Leptospira spp. in blood samples collected from opossums in 18 municipalities in the state of São Paulo, Brazil, between 2003 and 2008. Blood samples from 343 opossums: Didelphis aurita (n = 256) and Didelphis albiventris (n = 87) were obtained. These were tested to detect antibodies against T. gondii, using the modified agglutination test (MAT-Toto; cutoff ≥ 25); Neospora spp., using the indirect fluorescent antibody test (IFAT; cutoff ≥ 25); and Leptospira spp., using the microscopic agglutination test (MAT-Lepto; cutoff ≥ 100). Frequency of anti-T. gondii, Neospora spp. and Leptospira spp. antibodies were in 22.7%, 1.5% and 3.5%, respectively. The serogroups-serovars of Leptospira spp. presenting positive MAT-Lepto reactions were: AutumnalisButembo; Mini-Mini; Ballum-Castellonis; Icterohaemorrhagiae-Icterohaemorrhagiae; Icterohaemorrhagiae-Copenhageni and Grippotyphosa-Grippotyphosa or Bananal. This study demonstrated that these zoonotic agents are circulating in opossum populations in the state of São Paulo. Therefore, investigations regarding the role of marsupials in the epidemiology of each of these diseases should be conducted, especially to understand the behavior of these animals as zoonosis maintenance hosts.(AU)


O gambá (Didelphis spp.) é um marsupial onívoro nativo das Américas que apresenta comportamento sinantrópico em áreas urbanas. Apesar da sua proximidade com animais domésticos e o homem, o conhecimento da sua participação na epidemiologia de alguns agentes zoonóticos é fundamental. Este estudo objetivou determinar a presença de anticorpos contra Toxoplasma gondii, Neospora spp. e Leptospira spp. em amostras de sangue colhidas de gambás de 18 municípios do estado de São Paulo, Brasil, entre 2003 e 2008. Foram obtidas amostras sanguíneas de 343 gambás: Didelphis aurita (n = 256) e Didelphis albiventris (n = 87). As amostras foram testadas para detecção de anticorpos contra T. gondii, utilizando o teste de aglutinação modificado (TAM-Toxo; ponto de corte ≥ 25); Neospora spp., utilizando a reação de imunofluorescência indireta (RIFI; ponto de corte ≥ 25); e Leptospira spp., utilizando a soroaglutinação microscópica (SAM-Lepto; ponto de corte ≥ 100). As frequências de anticorpos contra T. gondii, Neospora spp. e Leptospira spp. foram 22,7%, 1,5% e 3,5%, respectivamente. Os sorogrupossorovares de Leptospira spp. que apresentaram soropositividade foram: Autumnalis-Butembo; Mini-Mini; Ballum-Castellonis; Icterohaemorrhagiae-Icterohaemorrhagiae; Icterohaemorrhagiae-Copenhageni e Grippotyphosa-Grippotyphosa ou Bananal. Esse estudo demonstrou que esses agentes estão circulando em populações de gambás no estado de São Paulo. Desta forma, investigações que visam determinar o papel dos marsupiais na epidemiologia de cada doença devem ser conduzidas, especialmente visando o entendimento do comportamento desses animais como hospedeiros dessas zoonoses.(AU)


Assuntos
Animais , Leptospira/imunologia , Neospora/imunologia , Gambás/imunologia , Toxoplasma/imunologia , Técnica Indireta de Fluorescência para Anticorpo/veterinária , Estudos Soroepidemiológicos
13.
Braz. j. vet. res. anim. sci ; 53(3): 01-09, 2016. mapas, tab
Artigo em Inglês | VETINDEX | ID: vti-15508

Resumo

Opossum (Didelphis spp.) is an omnivorous marsupial native to the Americas that shows synanthropic behavior in urban areas. Despite its proximity to domestic animals and humans, knowledge of its participation in the epidemiology of some zoonotic agents is substantial. This study aimed to determine the presence of antibodies against Toxoplasma gondii, Neospora spp. and Leptospira spp. in blood samples collected from opossums in 18 municipalities in the state of São Paulo, Brazil, between 2003 and 2008. Blood samples from 343 opossums: Didelphis aurita (n = 256) and Didelphis albiventris (n = 87) were obtained. These were tested to detect antibodies against T. gondii, using the modified agglutination test (MAT-Toto; cutoff ≥ 25); Neospora spp., using the indirect fluorescent antibody test (IFAT; cutoff ≥ 25); and Leptospira spp., using the microscopic agglutination test (MAT-Lepto; cutoff ≥ 100). Frequency of anti-T. gondii, Neospora spp. and Leptospira spp. antibodies were in 22.7%, 1.5% and 3.5%, respectively. The serogroups-serovars of Leptospira spp. presenting positive MAT-Lepto reactions were: Autumnalis-Butembo; Mini-Mini; Ballum-Castellonis; Icterohaemorrhagiae-Icterohaemorrhagiae; Icterohaemorrhagiae-Copenhageni and Grippotyphosa-Grippotyphosa or Bananal. This study demonstrated that these zoonotic agents are circulating in opossum populations in the state of São Paulo. Therefore, investigations regarding the role of marsupials in the epidemiology of each of these diseases should be conducted, especially to understand the behavior of these animals as zoonosis maintenance hosts.(AU)


O gambá (Didelphis spp.) é um marsupial onívoro nativo das Américas que apresenta comportamento sinantrópico em áreas urbanas. Apesar da sua proximidade com animais domésticos e o homem, o conhecimento da sua participação na epidemiologia de alguns agentes zoonóticos é fundamental. Este estudo objetivou determinar a presença de anticorpos contra Toxoplasma gondii, Neospora spp. e Leptospira spp. em amostras de sangue colhidas de gambás de 18 municípios do estado de São Paulo, Brasil, entre 2003 e 2008. Foram obtidas amostras sanguíneas de 343 gambás: Didelphis aurita (n = 256) e Didelphis albiventris (n = 87). As amostras foram testadas para detecção de anticorpos contra T. gondii, utilizando o teste de aglutinação modificado (TAM-Toxo; ponto de corte ≥ 25); Neospora spp., utilizando a reação de imunofluorescência indireta (RIFI; ponto de corte ≥ 25); e Leptospira spp., utilizando a soroaglutinação microscópica (SAM-Lepto; ponto de corte ≥ 100). As frequências de anticorpos contra T. gondii, Neospora spp. e Leptospira spp. foram 22,7%, 1,5% e 3,5%, respectivamente. Os sorogrupossorovares de Leptospira spp. que apresentaram soropositividade foram: Autumnalis-Butembo; Mini-Mini; Ballum-Castellonis; Icterohaemorrhagiae-Icterohaemorrhagiae; Icterohaemorrhagiae-Copenhageni e Grippotyphosa-Grippotyphosa ou Bananal. Esse estudo demonstrou que esses agentes estão circulando em populações de gambás no estado de São Paulo. Desta forma, investigações que visam determinar o papel dos marsupiais na epidemiologia de cada doença devem ser conduzidas, especialmente visando o entendimento do comportamento desses animais como hospedeiros dessas zoonoses.(AU)


Assuntos
Animais , Toxoplasma/imunologia , Neospora/imunologia , Leptospira/imunologia , Gambás/imunologia , Estudos Soroepidemiológicos , Técnica Indireta de Fluorescência para Anticorpo/veterinária
14.
Braz. j. vet. res. anim. sci ; 53(3): 01-09, 2016. map, tab
Artigo em Inglês | VETINDEX | ID: biblio-1471051

Resumo

Opossum (Didelphis spp.) is an omnivorous marsupial native to the Americas that shows synanthropic behavior in urban areas. Despite its proximity to domestic animals and humans, knowledge of its participation in the epidemiology of some zoonotic agents is substantial. This study aimed to determine the presence of antibodies against Toxoplasma gondii, Neospora spp. and Leptospira spp. in blood samples collected from opossums in 18 municipalities in the state of São Paulo, Brazil, between 2003 and 2008. Blood samples from 343 opossums: Didelphis aurita (n = 256) and Didelphis albiventris (n = 87) were obtained. These were tested to detect antibodies against T. gondii, using the modified agglutination test (MAT-Toto; cutoff ≥ 25); Neospora spp., using the indirect fluorescent antibody test (IFAT; cutoff ≥ 25); and Leptospira spp., using the microscopic agglutination test (MAT-Lepto; cutoff ≥ 100). Frequency of anti-T. gondii, Neospora spp. and Leptospira spp. antibodies were in 22.7%, 1.5% and 3.5%, respectively. The serogroups-serovars of Leptospira spp. presenting positive MAT-Lepto reactions were: Autumnalis-Butembo; Mini-Mini; Ballum-Castellonis; Icterohaemorrhagiae-Icterohaemorrhagiae; Icterohaemorrhagiae-Copenhageni and Grippotyphosa-Grippotyphosa or Bananal. This study demonstrated that these zoonotic agents are circulating in opossum populations in the state of São Paulo. Therefore, investigations regarding the role of marsupials in the epidemiology of each of these diseases should be conducted, especially to understand the behavior of these animals as zoonosis maintenance hosts.


O gambá (Didelphis spp.) é um marsupial onívoro nativo das Américas que apresenta comportamento sinantrópico em áreas urbanas. Apesar da sua proximidade com animais domésticos e o homem, o conhecimento da sua participação na epidemiologia de alguns agentes zoonóticos é fundamental. Este estudo objetivou determinar a presença de anticorpos contra Toxoplasma gondii, Neospora spp. e Leptospira spp. em amostras de sangue colhidas de gambás de 18 municípios do estado de São Paulo, Brasil, entre 2003 e 2008. Foram obtidas amostras sanguíneas de 343 gambás: Didelphis aurita (n = 256) e Didelphis albiventris (n = 87). As amostras foram testadas para detecção de anticorpos contra T. gondii, utilizando o teste de aglutinação modificado (TAM-Toxo; ponto de corte ≥ 25); Neospora spp., utilizando a reação de imunofluorescência indireta (RIFI; ponto de corte ≥ 25); e Leptospira spp., utilizando a soroaglutinação microscópica (SAM-Lepto; ponto de corte ≥ 100). As frequências de anticorpos contra T. gondii, Neospora spp. e Leptospira spp. foram 22,7%, 1,5% e 3,5%, respectivamente. Os sorogrupossorovares de Leptospira spp. que apresentaram soropositividade foram: Autumnalis-Butembo; Mini-Mini; Ballum-Castellonis; Icterohaemorrhagiae-Icterohaemorrhagiae; Icterohaemorrhagiae-Copenhageni e Grippotyphosa-Grippotyphosa ou Bananal. Esse estudo demonstrou que esses agentes estão circulando em populações de gambás no estado de São Paulo. Desta forma, investigações que visam determinar o papel dos marsupiais na epidemiologia de cada doença devem ser conduzidas, especialmente visando o entendimento do comportamento desses animais como hospedeiros dessas zoonoses.


Assuntos
Animais , Gambás/imunologia , Leptospira/imunologia , Neospora/imunologia , Toxoplasma/imunologia , Estudos Soroepidemiológicos , Técnica Indireta de Fluorescência para Anticorpo/veterinária
15.
Semina Ci. agr. ; 37(5, supl. 2): 3737-3742, 2016. graf, tab
Artigo em Inglês | VETINDEX | ID: vti-26232

Resumo

Milk cream must be pasteurized in order to be sold in Brazil. However, there are no specific legal requirements for this product, and producers set their own pasteurization parameters using the ones approved for milk as a reference. Considering that fat protects bacteria from heat, that no thermal inactivation studies have been performed on Mycobacterium bovis present in cream, and that bovine tuberculosis is endemic in Brazil, the aim of this study was to evaluate the inactivation of M. bovis in milk cream subjected to commercial parameters of pasteurization. Milk cream samples were contaminated and pasteurized in a water bath at 75, 80, 85, and 90C for 5 and 15 s. M. bovis cells were plated onto Stonebrink-Leslie medium, incubated at 36C for 45 days, and quantified; the result was expressed in log CFU mL-1. The fat content of the samples ranged from 34% to 37% and the average initial load of M. bovis was 8.0 Log CFU mL-1. The average decay of the M. bovis populations was 4.0, 4.3, 4.9 and 6.7 log CFU mL-1 when the cream was incubated for 15 sec at 75, 80, 85 and 90C, respectively, showing that the efficiency of the heat treatment was improved by increasing the temperature of the process. Given the lipophilic nature of M. bovis, the cream should be subjected to more intense parameters of pasteurization than those applied to milk.(AU)


A pasteurização do creme de leite é obrigatória no Brasil, mas não há parâmetros legais específicos para esse produto, de forma que as empresas estabelecem seus próprios parâmetros tendo como referência mínima os aprovados para a pasteurização do leite. Assim, considerando que a gordura tem efeito termo protetor para as bactérias, que não há estudos de inativação térmica do Mycobacterium bovis em creme de leite e que a tuberculose bovina é endêmica no Brasil, o objetivo deste estudo foi avaliar a inativação de M. bovis em creme de leite, submetido aos parâmetros comerciais de pasteurização. Amostras de creme de leite foram contaminadas e pasteurizadas em Banho-Maria a 75C, 80C, 85C e 90C, por até 15 s. O M. bovis foi quantificado por semeadura em meio Stonebrink-Leslie, incubado a 36ºC por 45 dias, e o resultado expresso em Log UFC mL-1. O teor de gordura das amostras variou de 34 a 37% e a carga inicial média de M. bovis foi de 8,0 Log UFC mL-1. O decaimento médio da população de M. bovis foi de 4,0, 4,3, 4,9 e 6,7 Log UFC mL-1, quando expostos respectivamente às temperaturas estudadas por 15 s, demonstrando que a eficácia do tratamento térmico melhorou com o aumento da temperatura do processo. Devido ao caráter lipofílico do M. bovis, o creme de leite deveria ser submetido a parâmetros de pasteurização mais intensos do que aqueles aplicados ao leite.(AU)


Assuntos
Animais , Feminino , Bovinos , Pasteurização , Mycobacterium bovis/patogenicidade , Leite/microbiologia , Gorduras , Tuberculose Bovina/microbiologia
16.
Semina ciênc. agrar ; 37(5, supl. 2): 3737-3742, 2016. graf, tab
Artigo em Inglês | VETINDEX | ID: biblio-1500593

Resumo

Milk cream must be pasteurized in order to be sold in Brazil. However, there are no specific legal requirements for this product, and producers set their own pasteurization parameters using the ones approved for milk as a reference. Considering that fat protects bacteria from heat, that no thermal inactivation studies have been performed on Mycobacterium bovis present in cream, and that bovine tuberculosis is endemic in Brazil, the aim of this study was to evaluate the inactivation of M. bovis in milk cream subjected to commercial parameters of pasteurization. Milk cream samples were contaminated and pasteurized in a water bath at 75, 80, 85, and 90C for 5 and 15 s. M. bovis cells were plated onto Stonebrink-Leslie medium, incubated at 36C for 45 days, and quantified; the result was expressed in log CFU mL-1. The fat content of the samples ranged from 34% to 37% and the average initial load of M. bovis was 8.0 Log CFU mL-1. The average decay of the M. bovis populations was 4.0, 4.3, 4.9 and 6.7 log CFU mL-1 when the cream was incubated for 15 sec at 75, 80, 85 and 90C, respectively, showing that the efficiency of the heat treatment was improved by increasing the temperature of the process. Given the lipophilic nature of M. bovis, the cream should be subjected to more intense parameters of pasteurization than those applied to milk.


A pasteurização do creme de leite é obrigatória no Brasil, mas não há parâmetros legais específicos para esse produto, de forma que as empresas estabelecem seus próprios parâmetros tendo como referência mínima os aprovados para a pasteurização do leite. Assim, considerando que a gordura tem efeito termo protetor para as bactérias, que não há estudos de inativação térmica do Mycobacterium bovis em creme de leite e que a tuberculose bovina é endêmica no Brasil, o objetivo deste estudo foi avaliar a inativação de M. bovis em creme de leite, submetido aos parâmetros comerciais de pasteurização. Amostras de creme de leite foram contaminadas e pasteurizadas em Banho-Maria a 75C, 80C, 85C e 90C, por até 15 s. O M. bovis foi quantificado por semeadura em meio Stonebrink-Leslie, incubado a 36ºC por 45 dias, e o resultado expresso em Log UFC mL-1. O teor de gordura das amostras variou de 34 a 37% e a carga inicial média de M. bovis foi de 8,0 Log UFC mL-1. O decaimento médio da população de M. bovis foi de 4,0, 4,3, 4,9 e 6,7 Log UFC mL-1, quando expostos respectivamente às temperaturas estudadas por 15 s, demonstrando que a eficácia do tratamento térmico melhorou com o aumento da temperatura do processo. Devido ao caráter lipofílico do M. bovis, o creme de leite deveria ser submetido a parâmetros de pasteurização mais intensos do que aqueles aplicados ao leite.


Assuntos
Feminino , Animais , Bovinos , Mycobacterium bovis/patogenicidade , Pasteurização , Gorduras , Leite/microbiologia , Tuberculose Bovina/microbiologia
17.
Semina ciênc. agrar ; 37(5, supl. 2): 3727-3736, 2016. graf, tab
Artigo em Inglês | VETINDEX | ID: biblio-1500605

Resumo

Parameters for milk pasteurization were established a long time ago, considering the thermal resistance of Mycobacterium bovis, and the systematic adoption of this process has drastically reduced the incidence of human tuberculosis caused by this pathogen. However, more recently, molecular methods have allowed the identification of genetic variations in this bacterium that may lead to greater thermal resistance. The aim of this study was to investigate whether genetic variation leads to variation in the death pattern of this bacterium during the milk pasteurization process. Samples of UHT (ultra-high temperature)-treated whole milk were artificially contaminated with four different Mycobacterium bovis spoligotypes and were subjected to pasteurization by low-temperature long-time (LTLT) and high-temperature short-time (HTST) treatments. The M. bovis spoligotypes were quantified (Colony Forming Unit per milliliter of milk) before and during the thermal process. The decay of the pathogen was quantified by calculating the difference between the measurements at the beginning and at the end of the thermal treatment. The data demonstrated that the LTLT and HTST pasteurization processes considerably reduced the M. bovis load in the milk; however, the bacterium was not eliminated. There was no difference in the thermal resistance of the spoligotypes tested or in the efficiency of pasteurization processes (LTLT versus HTST). However, heating phase was more effective in reducing the M. bovis load than the target temperature maintenance phase.


Os parâmetros para a pasteurização do leite foram estabelecidos há muito tempo, considerando a resistência térmica de Mycobacterium bovis e a adoção sistemática deste processo reduziu drasticamente a incidência de tuberculose humana causada por este patógeno. Entretanto, mais recentemente, métodos moleculares permitiram a identificação de variações genéticas nesta bactéria que podem levar a uma maior resistência térmica. O objetivo deste estudo foi investigar se a variação genética apresenta modificação no padrão de morte da bactéria durante o processo de pasteurização do leite. Amostras de leite tratadas por UHT (ultra-alta temperatura) integral foram contaminadas com quatro diferentes espoligotipos de Mycobacterium bovis e foram submetidos ao tratamento por temperatura baixa e tempo longo (LTLT) e temperatura alta e tempo curto (HTST). Os espoligotipos M. bovis foram quantificados (Unidades Formadoras de colônias por mililitro de leite) antes e durante o processo térmico. A diminuição do patógeno foi quantificada através do cálculo da diferença entre as medições no início e no fim do tratamento térmico. Os dados demonstraram que os processos de pasteurização HTST e LTLT reduziram consideravelmente a carga de M. bovis no leite; no entanto, a bactéria não foi eliminada. Não houve diferença na resistência térmica dos espoligotipos testados nem na eficiência dos processos de pasteurização (HTST versus LTLT). Entretanto, a fase de aquecimento foi mais eficaz na redução da carga de M. bovis que a fase de manutenção da temperatura-alvo.


Assuntos
Leite/microbiologia , Mycobacterium bovis/patogenicidade , Pasteurização , Descontaminação
18.
Semina Ci. agr. ; 37(5, supl. 2): 3727-3736, 2016. graf, tab
Artigo em Inglês | VETINDEX | ID: vti-26794

Resumo

Parameters for milk pasteurization were established a long time ago, considering the thermal resistance of Mycobacterium bovis, and the systematic adoption of this process has drastically reduced the incidence of human tuberculosis caused by this pathogen. However, more recently, molecular methods have allowed the identification of genetic variations in this bacterium that may lead to greater thermal resistance. The aim of this study was to investigate whether genetic variation leads to variation in the death pattern of this bacterium during the milk pasteurization process. Samples of UHT (ultra-high temperature)-treated whole milk were artificially contaminated with four different Mycobacterium bovis spoligotypes and were subjected to pasteurization by low-temperature long-time (LTLT) and high-temperature short-time (HTST) treatments. The M. bovis spoligotypes were quantified (Colony Forming Unit per milliliter of milk) before and during the thermal process. The decay of the pathogen was quantified by calculating the difference between the measurements at the beginning and at the end of the thermal treatment. The data demonstrated that the LTLT and HTST pasteurization processes considerably reduced the M. bovis load in the milk; however, the bacterium was not eliminated. There was no difference in the thermal resistance of the spoligotypes tested or in the efficiency of pasteurization processes (LTLT versus HTST). However, heating phase was more effective in reducing the M. bovis load than the target temperature maintenance phase.(AU)


Os parâmetros para a pasteurização do leite foram estabelecidos há muito tempo, considerando a resistência térmica de Mycobacterium bovis e a adoção sistemática deste processo reduziu drasticamente a incidência de tuberculose humana causada por este patógeno. Entretanto, mais recentemente, métodos moleculares permitiram a identificação de variações genéticas nesta bactéria que podem levar a uma maior resistência térmica. O objetivo deste estudo foi investigar se a variação genética apresenta modificação no padrão de morte da bactéria durante o processo de pasteurização do leite. Amostras de leite tratadas por UHT (ultra-alta temperatura) integral foram contaminadas com quatro diferentes espoligotipos de Mycobacterium bovis e foram submetidos ao tratamento por temperatura baixa e tempo longo (LTLT) e temperatura alta e tempo curto (HTST). Os espoligotipos M. bovis foram quantificados (Unidades Formadoras de colônias por mililitro de leite) antes e durante o processo térmico. A diminuição do patógeno foi quantificada através do cálculo da diferença entre as medições no início e no fim do tratamento térmico. Os dados demonstraram que os processos de pasteurização HTST e LTLT reduziram consideravelmente a carga de M. bovis no leite; no entanto, a bactéria não foi eliminada. Não houve diferença na resistência térmica dos espoligotipos testados nem na eficiência dos processos de pasteurização (HTST versus LTLT). Entretanto, a fase de aquecimento foi mais eficaz na redução da carga de M. bovis que a fase de manutenção da temperatura-alvo.(AU)


Assuntos
Mycobacterium bovis/patogenicidade , Pasteurização , Leite/microbiologia , Descontaminação
19.
Braz. J. Microbiol. ; 45(3): 1083-1088, July-Sept. 2014. tab
Artigo em Inglês | VETINDEX | ID: vti-27390

Resumo

We investigated the existence of cross-protection between two anti-leptospirosis monovalent experimental bacterins produced with two strains of Leptospira serogroup Pomona: Fromm strain of serovar Kennewicky, isolated from pigs in the United States, and strain GR6 of serovar Pomona isolated from pigs in Brazil. Both were added of aluminum hydroxide as an adjuvant. Experimental bacterins were tested with the hamster potency test in order to assess protection provided against the disease and against the establishment of kidney infection. Controls were polyvalent commercial vaccine produced with Leptospira strains isolated outside Brazil, which included a representative of Pomona serovar, or Sorensen solution added of aluminum hydroxide adjuvant. The challenge was performed with cross-strains of serogroup Pomona tested in accordance with international standards established for the potency test. After 21 days of the challenge, survivors were killed to evaluate the condition of Leptospira renal carrier. Experimental bacterins protected hamsters against homologous and heterologous strains, demonstrating the existence of cross-protection. The commercial vaccine protected the hamsters challenged with both strains, but there was a high proportion of animals diagnosed as renal carriers when the challenge was performed with strain GR6, isolated from pigs in Brazil.


Assuntos
Animais , Cricetinae , Vacinas Bacterianas/administração & dosagem , Vacinas Bacterianas/imunologia , Proteção Cruzada , Leptospirose/imunologia , Leptospirose/prevenção & controle , Adjuvantes Imunológicos/administração & dosagem , Hidróxido de Alumínio/administração & dosagem , Portador Sadio/microbiologia , Portador Sadio/prevenção & controle , Rim/microbiologia , Leptospira/isolamento & purificação , Resultado do Tratamento
20.
Acta sci. vet. (Online) ; 42: Pub. 1213, Oct. 24, 2014. ilus, tab
Artigo em Português | VETINDEX | ID: vti-30617

Resumo

Background: Goat milk is quite useful as an alternative for feeding children and adults who are sensitive or allergic to bovine milk because of its peculiar characteristics, and goat milk ensures the subsistence of small producers. Therefore, ensuring the purity and satisfactory quality of dairy goat products is essential for consumer safety. Accordingly, the present study aimed to detect adulteration of goat milk and curd goat cheese with bovine milk contaminants using polymerase chain reaction (PCR).Materials, Methods & Results: For this purpose, the detection limit of the PCR assay was tested using bovine milk added to goat milk at concentrations of 0.5%, 1.0%, 5.0%, 10.0%, 25.0%, 50.0%, and 100%. Subsequently, goat milk from 79 producers and 43 samples collected from community cooling tanks was tested. Curd goat cheese was subsequently manufactured in the laboratory according to technical recommendations. The quality of the curd cheese was assessed by adding the aforementioned concentrations of bovine milk to goat milk, and PCR was performed to detect contaminants. Genomic DNA was extracted from milk and curd cheese samples and subjected to amplification by PCR using specific primers. After amplification, PCR products were analyzed in 1.5% agarose gel, stained with ethidium bromide, and visualized using a UV transilluminator. The quality of milk DNA was evaluated using...(AU)


Assuntos
Leite/química , Fraude , Contaminação de Alimentos/análise , Queijo/análise , Cabras , Bovinos , Reação em Cadeia da Polimerase
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