Bases para um programa de controle da artrite encefalite caprina em rebanho leiteiro / [Bases for a program of control of caprine arthritis encephalite in dairy flock]

Objetivou-se avaliar um programa de controle da artrite encefalite caprina (AEC), por meio de testes diagnósticos sensíveis, separação de mãe e cria após o parto e medidas de manejo, com o intuito de formar rebanho livre do vírus. Utilizou-se um total de 47 cabritos da raça Saanen, mantidos isoladamente até o resultado dos primeiros testes de reação em cadeia de polimerase nested (PCR nested) e Western Blotting (WB), com base na coleta de sangue no momento do nascimento (M0). No PCR nested, quatro animais foram positivos, no M0, e foram eutanasiados. Posteriormente, os demais 43 cabritos foram submetidos à coleta de sangue aos 60 (M60) e 270 (M270) dias de vida para realização de novos testes de WB e PCR nested, que não detectaram animais positivos. Pode-se afirmar que a metodologia adotada neste estudo foi efetiva no controle da doença, nas fases de aleitamento e pós-aleitamento, e que a combinação do sistema de manejo, a fim de propiciar diminuição de risco de transmissão horizontal, com técnicas de diagnóstico mais apuradas, como o WB e a PCR nested, é relevante para elaboração de plano estratégico de controle da enfermidade.(AU)

We aimed to evaluate a program to control Caprine Arthritis Encephalitis (CAE), using diagnostic tests, separation of the mother and postpartum and other management measures, in order to form a free flock of the virus. We used a total of 47 Saanengoats in isolation until the results of the first nested Polymerase Chain Reaction (nested PCR) and Western Blotting (WB) tests, based on blood collection at the time of birth (M0). In the nested PCR, 4 animals were positive, at M0, and were eliminated. Later, the other 43goats were submitted to blood collection at 60 (M60) and 270 (M270) days of life to perform new tests of WB and nested PCR, which did not detect positive animals. We can affirm that the methodology adopted in this study was effective in the control of the disease, in the phase of breastfeeding and post-breastfeeding, and that the combination of the management system, which allows a reduction of risk of horizontal transmission, with more accurate diagnostic techniques, such as WB and nested PCR, is relevant for the elaboration of a strategic plan for the disease control.(AU)

Vírus da artrite encefalite caprina em sêmen: diagnóstico e transmissão / Caprine arthritis encephalitis virus by semen: diagnosis and transmission

Está consolidado que o vírus da artrite encefalite caprina (CAEV) está presente no sêmen, tanto naforma livre (RNA viral) no líquido seminal, como na forma de DNA pró-viral integrado às células nãoespermáticas. Estudos sugerem, ainda, que a presença do CAEV no sêmen pode não ter correlação positiva como diagnóstico no sangue e que o patógeno pode ser detectado no plasma seminal antes mesmo da conversãosorológica. Além disso, os órgãos sexuais masculinos podem contribuir para a eliminação do DNA pró-viral doCAEV no ejaculado, e a transmissão do vírus pela via reprodutiva foi recentemente comprovada utilizando-se ainseminação artificial. Se considerada a adoção de testes de diagnósticos realizados diretamente no sêmen, podesediminuir o risco da entrada ou da disseminação do CAEV nos rebanhos pela via reprodutiva, especialmente nainseminação em que o número de fêmeas que podem receber sêmen contaminado é expressivamente maior.Neste contexto, objetivou-se com esta revisão fazer um levantamento bibliográfico e apontar perspectivas deutilização do sêmen para o diagnóstico da artrite encefalite caprina (CAE).(AU)

It is well established that the Caprine Arthritis Encephalitis Virus (CAEV) is found in semen, either infree form (RNA) in the seminal fluid or in the integrated proviral DNA in leukocytes and macrophages present inthe semen. Studies also suggest that the presence of CAEV in semen may not have a positive correlation with theblood diagnosis, and that the pathogen can be detected in seminal plasma even before the seroconvertion.Furthermore, male sexual organs may contribute to the DNA proviral elimination of CAEV in the ejaculate andtransmission of the virus by reproduction was recently demonstrated using artificial insemination. If consideredthe adoption of diagnostic tests performed directly in semen, it can reduce the risk of entry of the virus or thespread of CAEV in flocks through reproduction, especially insemination, in which the number of femalesreceiving contaminated semen is significantly higher. In this context, the aim of this report was to review theliterature and point out perspectives for the use of semen in the diagnosis of caprine arthritis-encephalitis(CAE).(AU)

Vírus da artrite encefalite caprina em sêmen: diagnóstico e transmissão / Caprine arthritis encephalitis virus by semen: diagnosis and transmission

Está consolidado que o vírus da artrite encefalite caprina (CAEV) está presente no sêmen, tanto naforma livre (RNA viral) no líquido seminal, como na forma de DNA pró-viral integrado às células nãoespermáticas. Estudos sugerem, ainda, que a presença do CAEV no sêmen pode não ter correlação positiva como diagnóstico no sangue e que o patógeno pode ser detectado no plasma seminal antes mesmo da conversãosorológica. Além disso, os órgãos sexuais masculinos podem contribuir para a eliminação do DNA pró-viral doCAEV no ejaculado, e a transmissão do vírus pela via reprodutiva foi recentemente comprovada utilizando-se ainseminação artificial. Se considerada a adoção de testes de diagnósticos realizados diretamente no sêmen, podesediminuir o risco da entrada ou da disseminação do CAEV nos rebanhos pela via reprodutiva, especialmente nainseminação em que o número de fêmeas que podem receber sêmen contaminado é expressivamente maior.Neste contexto, objetivou-se com esta revisão fazer um levantamento bibliográfico e apontar perspectivas deutilização do sêmen para o diagnóstico da artrite encefalite caprina (CAE).

It is well established that the Caprine Arthritis Encephalitis Virus (CAEV) is found in semen, either infree form (RNA) in the seminal fluid or in the integrated proviral DNA in leukocytes and macrophages present inthe semen. Studies also suggest that the presence of CAEV in semen may not have a positive correlation with theblood diagnosis, and that the pathogen can be detected in seminal plasma even before the seroconvertion.Furthermore, male sexual organs may contribute to the DNA proviral elimination of CAEV in the ejaculate andtransmission of the virus by reproduction was recently demonstrated using artificial insemination. If consideredthe adoption of diagnostic tests performed directly in semen, it can reduce the risk of entry of the virus or thespread of CAEV in flocks through reproduction, especially insemination, in which the number of femalesreceiving contaminated semen is significantly higher. In this context, the aim of this report was to review theliterature and point out perspectives for the use of semen in the diagnosis of caprine arthritis-encephalitis(CAE).

Padronização do Elisa indireto e Western Blot para diagnóstico da artrite-encefalite caprina / Standardization of indirect Elisa and Western Blot for diagnosis of Caprine Arthritis-Encephalitis

A artrite-encefalite caprina (CAE) é diagnosticada rotineiramente pela técnica de imunodifusão em gel de agarose (IDGA), que é considerada pouco sensível. Objetivou-se com este estudo padronizar testes de Elisa-i e Western Blot (WB) para diagnóstico precoce de anticorpos em caprinos contra CAEV e comparar os resultados obtidos nesses testes com a prova de IDGA. Para a padronização dos testes Elisa-i e WB, utilizaram-se diferentes concentrações e diluições de antígeno, soros e conjugado. No Elisa-i, adotaram-se microplacas rígidas com 96 poços, sendo a combinação de concentração de 0,5µg/poço de antígeno e diluições de 1:100 de soro e 1:1500 de conjugado a que apresentou melhor resultado. No WB foram utilizadas membranas de nitrocelulose, definindo-se as diluições de 1:50 de soro e 1:15000 de conjugado. Para avaliar o desempenho das técnicas, 222 amostras de soro caprino foram testadas e os dados obtidos foram comparados com o IDGA. A sensibilidade e a especificidade do Elisa-i/IDGA, WB/IDGA e WB/Elisa-i foram de 70% e 91%, 100% e 72,6%, 84,6% e 76,5%, concomitantemente. O índice Kappa desses testes foi de 0,35, 0,2 e 0,36, respectivamente. As técnicas de Elisa-i e WB apresentaram-se mais sensíveis que a IDGA, podendo ser utilizadas como ferramentas para o diagnóstico precoce da CAE.(AU)

Caprine arthritis-encephalitis (CAE) is routinely diagnosed with the Agarose Gel Immunodiffusion (AGID) technique, which is considered to have low sensitivity. The objective of this study was to standardize testing i-Elisa and Western Blot for early detection of antibodies against CAEV in goats and compare the results obtained in these tests with proof of AGID. For standardization of i-Elisa and WB, different concentrations and dilutions of antigen, sera and conjugate were used. In the i-Elisa, rigid microplate with 96 wells was adopted, and the combination that showed the best result was a concentration of 0.5µg/ well of antigen and dilutions of the serum of 1:100 and conjugate of 1:1500. In the WB nitrocellulose membranes were used, and the dilutions of the serum were defined at 1:50 and conjugate at 1:15000. To evaluate the performance of the techniques, 222 goat serum samples were tested and the data were compared with the AGID. The sensitivity and specificity of Elisa-i/IDGA, WB/AGID and WB/Elisa-i were 70% and 91%, 100% and 72.6%, 84.6% and 76.5%, concomitantly. The Kappa index of these tests was 0.35, 0.2 and 0.36, respectively. The i-Elisa and WB techniques were more sensitive than the AGID and can be used as tools for early diagnosis of CAE.(AU)

Parâmetros clínicos e hematológicos de reprodutores caprinos infectados naturalmente pelo vírus da artrite encefalite caprina durante a transição da estação seca para chuvosa no ceará

ABSTRACT Caprine arthritis encephalitis (CAE) is a specific infectious disease of caprines. It usually leads to a chronic disease, being characterized by a long incubation period and a slow and progressive clinical evolution. The aim of this work was to evaluate the clinical and hematologic parameters of bucks naturally infected by the CAE virus, as well to verify the influence of the transition from the dry to rainy season in the state of Ceará, Brazil, on these parameters. The work was carried out at the Brazilian Agricultural Research Corporation Goats in Sobral, state of Ceará. A total of 8 bucks positive for CAE were used, maintained in a semi-intensive raising system and submitted to biweekly clinical exams and complete blood count monthly, from September 2006 to February 2007. The data were expressed as means and analyzed using the software Staview with 5% of probability. A significant increase of the heart rate was observed during the rainy station (90.09 ± 16.21 bpm). An articular clinical index superior to 7, considered as a clinical indication of arthritis, was verified in 3 animals during the experiment, although the climatic season did not influence this parameter. A significant increase was observed in the absolute count of eosinophiles (90.09 ± 16.21 /µL) and monocytes (100.91 ± 21.12 /µL) during the rainy season. We conclude that the climatic season did not alter the physical parameters of the CAEV-infected bucks studied in this experiment in the north of the state of Ceará, Brazil. However, the rainy station provides climatic and environmental conditions that alter the monocyte and eosinophile count of these bucks.

RESUMO A artrite encefalite caprina (CAE) é uma doença infecciosa específica dos caprinos. Geralmente apresenta-se de forma crônica, caracterizando-se por um longo período de incubação e uma evolução clínica lenta e progressiva. O objetivo deste trabalho foi avaliar os parâmetros clínicos e hematológicos de reprodutores caprinos naturalmente infectados pelo vírus da CAE, bem como verificar a influência da transição das estações seca e chuvosa no Ceará nestes parâmetros. O trabalho foi conduzido na Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuária, Embrapa Caprinos, no Município de Sobral, CE. Foram utilizados oito reprodutores caprinos positivos para CAE, mantidos em um sistema semi-intensivo de criação, submetidos a exames clínicos quinzenais e a hemograma completo mensal, durante o período de setembro de 2006 a fevereiro de 2007. Os dados foram expressos na forma de média e analisados pelo software Staview a 5% de probabilidade. Observou-se um aumento significativo da freqüência cardíaca durante a estação chuvosa (90,09 ± 16,21 bpm). O índice articular clínico superior a sete, considerado indicativo de um quadro clínico de artrite, foi verificado em três animais durante todo o experimento, todavia a estação climática não interferiu neste parâmetro. Foi observado um aumento significativo na contagem absoluta de eosinófilos (90,09 ± 16,21/µL) e monócitos (100,91 ± 21,12/µL) durante a estação chuvosa. Conclui-se que a estação climática não altera os parâmetros físicos de reprodutores caprinos infectados pelo CAEV explorados na região norte do Estado do Ceará. Todavia, a estação chuvosa propicia condições climáticas e ambientais que alteram a contagem de monócitos e eosinófilos desses reprodutores.