Estudo dos analitos bioquímicos no plasma de coelhos (Nova Zelândia) mantidos no biotério da Faculdade de Medicina da Universidade de São Paulo / / Biochemical analytes study of rabbits plasma (New Zealand) kept in an animal facility at Faculdade de Medicina da Universidade de São paulo

Objetivos: determinar os valores de normalidade dos componentes do plasma de coelhos da linhagem Nova Zelândia, convencionais, através de testes bioquímicos, comparando os resultados entre os sexos e entre os períodos, ao longo de exames realizados de 2008 a 2010. Material e Métodos: plasma de coelhos provenientes do Centro de Bioterismo da Faculdade de Medicina da Universidade de São Paulo foi testado por sistema de identificação-espectrofolometríca em analisador bioquímico semi-automatizado (Cobas Mira-Roche Diag System) e Kits comerciais (Bioclin/Biosystems e Labtest) padronizados para animais. Resultados: Houve uma variação significativ (p<0,05*) entre as concentrações de AST*, triglicérides e HDL, estando o primeiro e o terceiro aumentados entre as fêmeas e o terceiro, entre os machos. Na comparação dos resultados obtidos entre os anos, observou-se uma diferenciação para ALT nos machos e fêmeas (2008), aumento de LDH, triglicérides e amônia para machos (2009) e aumento de fósfoto, ferro, colesterol total, HDL e VLDL para fêmeas (2009). Conclusão: Foram obtidos os seguintes valores (Média ± erro padrão), machos e fêmeas, respectivamente, alanina aminotransferase (ALT) (U/L) 48,56 ± 8,32,41 ±16,91; aspartato aminotransferase (AST) (U/L)=46,81±15,0,56,8±17,09*; bilirrubina indireta (mg/dL)= 0,36±0,48,0,35; bilirrubina total (mg/dL)=1,02±1,32;2,0±1,17; bilirrubina direta (mg/dL)= 0,37±1,1,0,46±0,49; uréia (mg/dL)= 50,4±9,86,49,58±±10,02; creatina (mg/dL)= 0,37±1,1,0,46±0,94; uréia (mg/dL)=52,53±5,21,41,99±2,82, nitrogênio urêico sanguíneo (Bun-uréia) (mg/dL)= 6,87±0,76,7,82±1,16; cloretos (mEq/dL)= 78,14±8,42,83,04±8,33; glicose (mg/dL)= 104,63±13,37,110,36±12,04; magnésio (mg/dL)= 2,14±1,83,2,04±1,9; colesterol total (mg/dL)= 71,33±12,9,69,92±9,16; triglicerídeos (mg/dL)= 80,88±8,82,54,06±13,99*, lipoproteína de alta densidade (HDL) (mg/dL)= 10,32±2,26, 12,1±3,06, lipoproteína de baixa densidade (LDL) (mg/dL)= 31,73±16,69, 27±21,53, fosfatase alcalina (ALP) (U/L)= 133,1±12,13,140,96±12,77; proteínas totais (g/dL)= 6,07±1,39,6,53±1,25; albumína (g/dL)= 3,04±2,53,3,52±2,19; globulina (g/dL)= 1,83±2,57,2,9±2,02; cálcio (mg/dL)= 7,6±1,61,7,02±1,45; desidrogenase lática (LDH) (mg/dL)= 166,64±18,05, 162, 13±20,86. CEAU nº 251/11.

Objectives: To determine normal values of New Zealand rabbits plasma components conventional, by biochemical tests, comparing the results between gender and periods during tests conducted from 2008 to 2010. Material and Methods: Plasma from rabbits of the Faculdade de Medicina da USP (Universidade of São Paulo) fecilities was tested by spectrophotometric identification system for semi-automated biochemical analyzer (Cobas mira-Roche Diag System), and commercial kits (Bioclin/Biosystems and Labtest) standardized for animals. Results: There was a significant variation (p<0,05*) between the concentrations of AST* (aspartate aminotransferase), triglycerides and HDL (High Density Lipoprotein), with the first and third increased between the females and he third amon males. Comparing the results between years, there was a diference for ALT (alanine aminotransferase) in males and females (2008) , increased LDH (lactate denydiogenase), triglycerides and ammonia for males (2009) and increased phosphorus, iron, total cholesterol, HDL and VLDL (Very Low Density Lipoprotein) to females (2009). Conclusion: We obtained the following values (mean ±standard error), males and females, respectivelu: ALTT(I/L) 48.56±8.32, 41±16.91; AST (U/L) = 46.81±15.0, 56.8±17.09*: indirect bilirubin (mg/dL) = 0.36±0.48, 0.19±0.35; total bilirubin (mg/dL) = 1.02±17.09*; indirect bilirubin (mg/dL) = 0.55±0.23, 0.19±0.24; ammonia (mg/dL) = 50.4±9.86, 49.58±10.02; creatinine (mg/dL) - 0.37±1.1, 0.46±0.94; urea (md/dL) = (mg/dL) = 52.53±5.21, 45.99±2.82; blood urea nitrogen [Bun-urea] (mg/dL) = 6.87±0.76, 7.82±1.16; chloride (mEq dL) = 78.14±8.42, 83.04±8.33; phosphorus (mg/dL) = 5.04±0.95, 5.03±0.93; iron (,mg/dL) = 261.15±35.83, 214.26±45.7; glucose (mg/dL) = 104..63±13.37, 110.36±12.04, magnesium (mg/dL) = 2.14±1.83, 2.04±1.9; total cholesterol (mg/dL) = 71.33±12.9, 69.92±9.16; triglycerides (mg/dL) = 80.88±8.82, 54.06±13.99*; HDL (mg/dL) = 33.75±6.88, 39.43±6.49*; VLDL (mg/dL) = 10.32±2.26, 12.1±3.06; low density lipoprotein [LDL] (md/dL) = 31.73±16.69, 27.0±21.53; alkaline phsphatase [ALP] (U/L) = 133.1±12.13, 140.96±12.77; total protein (g/dL) = 6.07±1.39, 6.53±1.25; albumin (g/dL) = ± 3.04±2.53, 3.52±2.198/ globulin (g/dL) = 1.83±2.57, 2.9±2.02; calcium (mg/dL) = 7.6±1.61, 7.02±1.46; LDH (mg/dL) = 166.64±18.05, 162.13±20.86.

Efeito da temperatura e tempo no armazenamento de metabólitos no plasma de ratos Wistar recém desmamados / Effect of temperature and time storage of metabolites in the plasma of rats weaned

O objetivo deste trabalho foi estabelecer o efeito do congelamento (-80°C) e eficiência na estocagem do plasma sanguíneo com EDTA 10mg/dL na determinação dos metabólitos em ratos recém desmamados. Foram utilizadas amostras de 90 ratos da linhagem Wistar e os analitos testados foram: glicose, colesterol total e frações HDL, LDL, VLDL e triglicérides. Os diferentes tempos de armazenamento das análises apesar de demonstrarem variação na concentração em mg/dL para os metabólitos analisados não apresentaram significância estatística no teste t-Student (p<0,05). Sendo assim, concluímos que é importante que o tempo de armazenamento das amostras seja considerado no planejamento experimental e que o plasma é um material de alta flexibilidade na conservação de certos metabólitos. CEUA Nº 251/11.

The objective of this study was to determine the effect of store in freezer (-80ºC) and efficient storage of blood plasma with EDTA 10mg/dL in the determination of metabolites in newly weaned rats. Samples of 90 Wistar rats and the analytes were tested: glucose, total cholesterol and HDL, LDL, VLDL and triglycerides. The different storage times of the analysis showed variation in the concentration in mg / dL for the metabolites analyzed did not show statistical significance in Student’s t test (p <0.05), when use samples refrigerated and frozen at -80ºC. Therefore, we conclude that it is important that the storage time of the samples is considered in the experimental design and the plasma is a material of high flexibility in the storage of certain metabolites.

Estudo dos analitos bioquímicos no plasma de coelhos (Nova Zelândia) mantidos no biotério da Faculdade de Medicina da Universidade de São Paulo / / Biochemical analytes study of rabbits plasma (New Zealand) kept in an animal facility at Faculdade de Medicina da Universidade de São paulo

Objetivos: determinar os valores de normalidade dos componentes do plasma de coelhos da linhagem Nova Zelândia, convencionais, através de testes bioquímicos, comparando os resultados entre os sexos e entre os períodos, ao longo de exames realizados de 2008 a 2010. Material e Métodos: plasma de coelhos provenientes do Centro de Bioterismo da Faculdade de Medicina da Universidade de São Paulo foi testado por sistema de identificação-espectrofolometríca em analisador bioquímico semi-automatizado (Cobas Mira-Roche Diag System) e Kits comerciais (Bioclin/Biosystems e Labtest) padronizados para animais. Resultados: Houve uma variação significativ (p<0,05*) entre as concentrações de AST*, triglicérides e HDL, estando o primeiro e o terceiro aumentados entre as fêmeas e o terceiro, entre os machos. Na comparação dos resultados obtidos entre os anos, observou-se uma diferenciação para ALT nos machos e fêmeas (2008), aumento de LDH, triglicérides e amônia para machos (2009) e aumento de fósfoto, ferro, colesterol total, HDL e VLDL para fêmeas (2009). Conclusão: Foram obtidos os seguintes valores (Média ± erro padrão), machos e fêmeas, respectivamente, alanina aminotransferase (ALT) (U/L) 48,56 ± 8,32,41 ±16,91; aspartato aminotransferase (AST) (U/L)=46,81±15,0,56,8±17,09*; bilirrubina indireta (mg/dL)= 0,36±0,48,0,35; bilirrubina total (mg/dL)=1,02±1,32;2,0±1,17; bilirrubina direta (mg/dL)= 0,37±1,1,0,46±0,49; uréia (mg/dL)= 50,4±9,86,49,58±±10,02; creatina (mg/dL)= 0,37±1,1,0,46±0,94; uréia (mg/dL)=52,53±5,21,41,99±2,82, nitrogênio urêico sanguíneo (Bun-uréia) (mg/dL)= 6,87±0,76,7,82±1,16; cloretos (mEq/dL)= 78,14±8,42,83,04±8,33; glicose (mg/dL)= 104,63±13,37,110,36±12,04; magnésio (mg/dL)= 2,14±1,83,2,04±1,9; colesterol total (mg/dL)= 71,33±12,9,69,92±9,16; triglicerídeos (mg/dL)= 80,88±8,82,54,06±13,99*, lipoproteína de alta densidade (HDL) (mg/dL)= 10,32±2,26, 12,1±3,06, lipoproteína de baixa densidade (LDL) (mg/dL)= 31,73±16,69, 27±21,53, fosfatase alcalina (ALP) (U/L)= 133,1±12,13,140,96±12,77; proteínas totais (g/dL)= 6,07±1,39,6,53±1,25; albumína (g/dL)= 3,04±2,53,3,52±2,19; globulina (g/dL)= 1,83±2,57,2,9±2,02; cálcio (mg/dL)= 7,6±1,61,7,02±1,45; desidrogenase lática (LDH) (mg/dL)= 166,64±18,05, 162, 13±20,86. CEAU nº 251/11.(AU)

Objectives: To determine normal values of New Zealand rabbits plasma components conventional, by biochemical tests, comparing the results between gender and periods during tests conducted from 2008 to 2010. Material and Methods: Plasma from rabbits of the Faculdade de Medicina da USP (Universidade of São Paulo) fecilities was tested by spectrophotometric identification system for semi-automated biochemical analyzer (Cobas mira-Roche Diag System), and commercial kits (Bioclin/Biosystems and Labtest) standardized for animals. Results: There was a significant variation (p<0,05*) between the concentrations of AST* (aspartate aminotransferase), triglycerides and HDL (High Density Lipoprotein), with the first and third increased between the females and he third amon males. Comparing the results between years, there was a diference for ALT (alanine aminotransferase) in males and females (2008) , increased LDH (lactate denydiogenase), triglycerides and ammonia for males (2009) and increased phosphorus, iron, total cholesterol, HDL and VLDL (Very Low Density Lipoprotein) to females (2009). Conclusion: We obtained the following values (mean ±standard error), males and females, respectivelu: ALTT(I/L) 48.56±8.32, 41±16.91; AST (U/L) = 46.81±15.0, 56.8±17.09*: indirect bilirubin (mg/dL) = 0.36±0.48, 0.19±0.35; total bilirubin (mg/dL) = 1.02±17.09*; indirect bilirubin (mg/dL) = 0.55±0.23, 0.19±0.24; ammonia (mg/dL) = 50.4±9.86, 49.58±10.02; creatinine (mg/dL) - 0.37±1.1, 0.46±0.94; urea (md/dL) = (mg/dL) = 52.53±5.21, 45.99±2.82; blood urea nitrogen [Bun-urea] (mg/dL) = 6.87±0.76, 7.82±1.16; chloride (mEq dL) = 78.14±8.42, 83.04±8.33; phosphorus (mg/dL) = 5.04±0.95, 5.03±0.93; iron (,mg/dL) = 261.15±35.83, 214.26±45.7; glucose (mg/dL) = 104..63±13.37, 110.36±12.04, magnesium (mg/dL) = 2.14±1.83, 2.04±1.9; total cholesterol (mg/dL) = 71.33±12.9, 69.92±9.16; triglycerides (mg/dL) = 80.88±8.82, 54.06±13.99*; HDL (mg/dL) = 33.75±6.88, 39.43±6.49*; VLDL (mg/dL) = 10.32±2.26, 12.1±3.06; low density lipoprotein [LDL] (md/dL) = 31.73±16.69, 27.0±21.53; alkaline phsphatase [ALP] (U/L) = 133.1±12.13, 140.96±12.77; total protein (g/dL) = 6.07±1.39, 6.53±1.25; albumin (g/dL) = ± 3.04±2.53, 3.52±2.198/ globulin (g/dL) = 1.83±2.57, 2.9±2.02; calcium (mg/dL) = 7.6±1.61, 7.02±1.46; LDH (mg/dL) = 166.64±18.05, 162.13±20.86.(AU)

Efeito da temperatura e tempo no armazenamento de metabólitos no plasma de ratos Wistar recém desmamados / Effect of temperature and time storage of metabolites in the plasma of rats weaned

O objetivo deste trabalho foi estabelecer o efeito do congelamento (-80°C) e eficiência na estocagem do plasma sanguíneo com EDTA 10mg/dL na determinação dos metabólitos em ratos recém desmamados. Foram utilizadas amostras de 90 ratos da linhagem Wistar e os analitos testados foram: glicose, colesterol total e frações HDL, LDL, VLDL e triglicérides. Os diferentes tempos de armazenamento das análises apesar de demonstrarem variação na concentração em mg/dL para os metabólitos analisados não apresentaram significância estatística no teste t-Student (p<0,05). Sendo assim, concluímos que é importante que o tempo de armazenamento das amostras seja considerado no planejamento experimental e que o plasma é um material de alta flexibilidade na conservação de certos metabólitos. CEUA Nº 251/11.(AU)

The objective of this study was to determine the effect of store in freezer (-80ºC) and efficient storage of blood plasma with EDTA 10mg/dL in the determination of metabolites in newly weaned rats. Samples of 90 Wistar rats and the analytes were tested: glucose, total cholesterol and HDL, LDL, VLDL and triglycerides. The different storage times of the analysis showed variation in the concentration in mg / dL for the metabolites analyzed did not show statistical significance in Students t test (p <0.05), when use samples refrigerated and frozen at -80ºC. Therefore, we conclude that it is important that the storage time of the samples is considered in the experimental design and the plasma is a material of high flexibility in the storage of certain metabolites.(AU)

Estudo comparativo dos valores hematológicos entre sexo e categorias sanitárias de camundongos C57BL/6 e BALB/c / Hematological comparative study between sex and sanitary categories of C57BL/6 and BALB/C Mouse

A finalidade deste estudo é oferecer aos pesquisadores dados que possam ser relevantes na escolha do modelo experimental a ser utilizado, comparando os valores hematologicos de camundongos de linhagens isogênicas, mantidos em biotérios Convencional e SPF - (Specific Pathogen Free). foram utilizados 80 camundongos selecionados por categoria sanitária e sexo, sem sinais clínicos de doenças, acima de 10 semanas. O perfil gematológico analisado foi determinado pelo processo de citometria, no qual a separação de entrócitos e leucócitos ocorre por volume celular, sendo utilizada a identificação celular pelo método em suspensão e qualificação. Os exames realizados foram eitrograma e leucograma no equipamento (Celm CC510) e os derivados hematológicos como índices hematimétricos; a quantificação morfológica de leucócitos e eritrócitos foram determinadas por varredura (Panótico-comercial) e hemoglobina por espectrofolometria (Celm E210D). A comparação dos valores hematológicos de camundongos das linhagens isogênicas BALB/c e C57BL/6, mantidos em biotérios Convencional e SPF não apresentou diferenças entre os parâmetros: contagem de hemácias, hematoctiyo, hemoglobina corpuscular média; contagem de leucócitos, monócitos, linfócitos e basofilos. Os eosinófilos apresentam valores diferentes entre os secos e entre as categorias sanitárias, em ambas as linhagens. Os neutrófilos, nas fêmeas C57Bl/6, foram superiores em número, nos convencionais quando comparadas às fêmeas SPF. Certificado CEAU nº 251/11 HCFMUSP.

The purpose of this study was to provide researchers with data that may be relevant in the choice of experimental model to be used, comparing the haematological values of isogenic strains of mice kept in conventional animal facilities and SPF - (Specific Pathogen Free). 80 mice were used for selected health category and sex, without clinical signs of disease, over 10 weeks, The blood profile analysis was determined by flow cytometry process, where the separation of erythrocytes and leukocytes occurs by cell volume and is used to identify the cell suspension method and quantification. The tests were performed on the equipment erythrogram and WBC (Celma CC510) and RBC indices as derived from hematological, morphological quantification of leukocytes and erythrocytes were determined by scanning (Panótico-commercial) and hemoglobin by spectrophometry (Celm, E210D). Comparison of leukocytes occurs by cell volume and is used to identify the cell sushaematological values of isogenic strains of mice BALB/c and C57BL/6, kept in conventional animal facilities and SPF, showed no differences between the parameters: erythrocyte count, hematocrit, hemoglobin, mean corpuscular volume, mean corpuscular hemoglobin, hemoglobin concentration mean corpuscular; WBC, monocytes, lymphocytes, and basophils. Eosinophils showed different values between the sexes and between health categories, in both strains. Neutrophilis, in the female C57BL/6 were greater in number in females qhen compared to conventional SPF. Certified nº 251/11 CEAU HCFMUSP.

Perfil bioquímico dos animais de laboratório do biotério da Faculdade de Medicina da USP / / Biochemical profile of laboratory animals of the Medical School USP

Objetivo: Os parãmetros bioquímicos são utilizados em pesquisas cientificas, em conjunto com outros fatores, para análise dos resultados experimentais. Animais de laboratório criados em diferentes biotérios apresentam variações em seus valores devido a dieta, manejo, estado sanitário, idade, vias de coleta do sangue e outros interferentes. Desta forma, o objetivo deste trabalho foi determinar o perfil bioquímico de camundongos, ratos, hamsters e coelhos convencionais criados pelo Centro de bioterismo da FMUSP. Materiais e Métodos: Foram utilizados 20 camundongos das linhagens isogênicas BALB/c e C57Bl/6 e da heterogênica Swiss; 40 ratos Wistar, 40 hamsters Golden e 40 coelhos New Zealand. Os exames realizados foram: uréia/BUN (Blood Urea Nitrogen), creatinina, proteínas totais, albumina e globulinas, ferro, fósforo, glicose, colesterol total e suas frações LDI (Low Density Lipoprotein), HDL (High Density Lipoprotein), VLDL (Very Low Density Lipoprotein), Bilirrubina total e frações (direta, indireta), cloretos, magnésio, triglicerides, Alt/AST (alanina aminotransferase, aspartato aminotransaminase), amônia, cálcio, ALP (fosfatase alcalina) e LDH (desidrogenase lática), determinados por fotocolorimetria semi-automática (Cobas Mira) e kits bioclin, Labtest e Byosystems. Resultados: Apresentados pelas médias e os erros padrões das concentrações de analitos, no plasma, agrupados por sexo. Conclusão: Foram determinados os perfis bioquímicos de camundongos, ratos, hamsters e coelhos convencionais do centro de Bioterismo da FMUSP, oferecendo uma ferramenta valiosa aos pesquisadores ao analisar seus resultados experimentais. Certificado CEAU nº 251/11 HCFMUSP.

Objective: The biochemical parameters are used in scientific research in conjunction with other factors, to analyze the experimental results. Laboratory animals raised in different animal houses have variations in their values due to diet, management health status, age, the process of colecting blood and other interferences. Thus, the objective of this study was to created by conventional Bioterty Center FMUSP . Materials and Methods: We used 20 isogenic strains of mice BALB/6 and C57BL/6 and Swiss heterogeneous, 40 Wistat rats, 40 rabbits and 40 hamsters Golden New Zealand. The tests performed were: urea / BUN (Blood Urea Nitrogen), creatine, total protein, albumin and globulins, iron, phosphorus, glucose, total cholesterol and LDL (Low Density Lipoprotein), HDL (High Density Lipoprotein), VLDL (very Low Density Lipoprotein), total bilirubin and fractions (direct, indirect), chlondes, magnesium, triglucerides, ALT/AST (alanine aminotransferase, aspartate aminotransaminase), ammonium, calcium, ALP (alkaline phosphatase) and LDH (lactate denydrogenase), certain by semi-automatic spectrophotometer (Cobas Mira) and Bioclin kitas, and Labtest Biosystems. Results: Presented by the means and standard errors of the concentrations of analytes in plasma, grouped by sex. Conclusion: We determined the biochemical profiles of mice, rats, hamsters and rabbits conventional Biotery FMUSP Center, offering a valuable tool for researchers to analyze their experimental results. Certified No 251/11 CEAU HCFMUSP.

Triagem de Helicobacter spp. em fezes de roedores de laboratório através da técnica de PCR / / Screening for Helicobacter spp inrodent feces laboratory using PCR technique

Este trabalho tem como objetivo otimizar a triagem da bactéria Helicobacter spp em programa de controle sanitário de animais de laboratório, aplicando a técnica de PCR (Polymerase Chain Reaction). Cinquenta amostras de fezes de cada linhagem ou espécie: camundongo C57BL/6, BALB/c, Swiss; ratos Wistar e Hamster foram submetidas à reação de PCR, utilizando os oligonucleotídeos iniciadores F: 5’ CTATGACGGGTATCCGGC 3' E R: 5' ATTCCACCTACCTCTCCCA 3' que amplificam um produto de 374 Este trabalho tem como objetivo otimizar a triagem da bactéria Helicobacter spp em programa de controle sanitário de animais de laboratório, aplicando a técnica de PCR (Polymerase Chain Reaction). Cinquenta amostras de fezes de cada linhagem ou espécie: camundongo C57BL/6, BALB/c, Swiss; ratos Wistar e Hamster foram submetidas à reação de PCR, utilizando os oligonucleotídeos iniciadores F: 5’ CTATGACGGGTApb. Separados por eletroforese em gel de agarose, os produtos foram visualizados e fotodocumentados sob luz ultravioleta.A técnica de PCR possibilitou a detecção de camundongos positivos, sendo 18% da linhagem C57BL/6, 52% da linhagem BALB/c, 62% da linhagem Swiss. Em ratos da linhagem Wistar, foram detectados 28% de positividade e em hamster, 44%. Esses resultados sugerem que a técnica de PCR empregada foi eficaz para a triagem de Helicobacter spp em colônias de animais de laboratório. Certificado CEAU nº 251/11 HCFMUSP.

This work aimed to optimize the screening of the bacterium Helicobacter spp in sanitary control program of laboratory animals, using the PCR (Polymerase Chain Reaction). Fifty stool samples from each strain or species: C57BL/6, BALB/c, Swiss, Hamster and Wistar rats were subjected to PCR using the primers F: 5’ CTATGACGGGTATCCGGC 3' and R: 5' ATTCCACCTACCTCTCCCA 3' that amplofy 374 bp product. Separated by agarose gel electrophoresis, products were visualized and photographed under ultraviolet light. The PCR technique allowed the detection of positive mice, 18% of C57BL/6, 52% of the strain BALB/c, 62% of Swiss strain. In Wistar rats were detected 28% ´possivity and hamster 44%. These results suggest that the PCR technique used was effective in screening for Helicobacter spp in colonies of laboratory animals. Certified CRAU Nº 251/11 HCFMUSP.

Parâmetros hematológicos normais em coelhos Nova Zelândia do biotério da Faculdade de Medicina da USP / Normal Haematological parameters in New Zealand rabbits from Faculdade de Medicina da USP animal facility

OBJETIVO: realizar análise comparativa de valores hematológicos entre sexos no mesmo período: anos de 2008, 2009 e 2010; bem como a comparação dos resultados agrupados. MATERIAL E MÉTODOS: 60 coelhos da raça Nova Zelândia, 30 machos e 30 fêmeas, idade entre 2-4 meses, criados em condições convencionais, foram submetidos a exames hematológicos, coletando-se o sangue pela artéria auricular central. As médias foram comparadas aplicando-se o teste t-Student, para p<0,05. RESULTADOS: foram observadas diferenças significantes entre as médias e os desvios padrão de machos e de fêmeas, para: hematócrito e hemoglobina, ano de 2010; eosinófilos, em 2008 e 2009; monócitos, ano de 2009, e neutrófilos, ano de 2010, na comparação dos sexos no mesmo período. A análise dos dados agrupados em 3 anos não apontou diferenças significantes entre os sexos. CONCLUSÃO: resultados encontrados, de machos e de fêmeas, respectivamente: eritrócitos x 106/mm3: 5,94±2,97, 4,86±3,63; Hematócrito %: 31,20±1,78, 26,40±4,50; Hemoglobina g/dL: 10,58±4,70, 8,94±3,57; volume corpuscular médio %: 52,58±3,86, 54,02±2,86; hemoglobina corpuscular média fl (fentolitros): 17,83±7,45, 36,22±7,35; concentração de hemoglobina corpuscular média %: 33,89±0,44, 34,10±0,02; Leucócitos x 103 /mm3: 9,98±2,45, 6,66±2,81; eosinófilos %: 5,40±1,14, 5,20±1,17; monócitos %: 2,40±0,89, 2,00±0,63; Linfócitos %:39,00±4,47, 40,02±20,93; Basófilos %: 0,00±0, 0,00±0; Bastonetes %: 11,40±1,34, 12,60±3,55; Segmentados %: 37,00±5,19, 40,20±1,60; Neutrófilos %: 48,40±4,93, 52,80±3,56. CEUA nº 251/11.

OBJECTIVE: To conduct a comparative analysis of hematologic values between sexes in the same period of the years 2008, 2009 and 2010, and the comparison of the pooled results. MAT ERIAL AND METHODS: 60 New Zealand rabbits, 30 males and 30 females, aged 2 to 4 months, bred in conventional conditions, were subjected to blood tests, blood was collected by the central auricular artery. Means were compared applying the Student t test, p <0.05. RESULTS: Significant differences were observed between the means and standard deviations of males and females, for hematocrit and hemoglobin, 2010; eosinophils, in 2008 and 2009; monocytes, 2009, and neutrophils, 2010, in comparison of the sexes in the same period. The analysis of pooled data over 3 years showed no significant differences between the sexes. CONCLUSION: We found the following results of males and females, respectively: erythrocytes x 106/mm3: 5.94±2.97, 4.86±3.63; hematocrit %: 31.20±1.78, 26.40±4.50; hemoglobin g/dL, 10.58±4.70, 8.94 ± 3.57; mean corpuscular volume %: 52.58±3.86, 54.02±2.86; mean corpuscular hemoglobin fl (fentoliter): 17.83±7.45, 36.22±7.35; mean corpuscular hemoglobin concentration %: 33.89±0.44, 34.10±0.02; leukocytes x103/mm3: 9.98±2.45, 6.66±2.81; eosinophils %: 5.40±1.14, 5.20±1.17; monocytes %: 2.40±0.89, 2.00±0.63; lymphocytes %: 39.00±4.47, 40.02±20.93; basophils %: 0.00±0, 0.00±0; rods %: 11.40±1.34; 12.60±3.55; segmented %: 37.00±5.19, 40.20±1.60; neutrophils %: 48.40±4.93, 52.80±3.56. CEUA No. 251/11.

Estudo comparativo de sensibilidade das técnicas de cultura bacteriana e PCR para a detecção de Pasteurella pneumotropica em roedores / /Comparative sensivity for Pasteurella pneumotropica detection of rodents by bacterial culture and PCR techniques

Objetivo: Realizar uma comparação, em relação a sensibilidade, das técnicas de cultura bacteriana e PCR para detecção de Pasteurella pneumotropica, em colônias convencionais de camundongos das linhagens isogênicas C57BL/6, BALB/c e heterogênica Swiss; ratos Wistar e Hamster Golden. Materiais e Métodos: 230 amostras de traquéia foram coletadas e divididas em partes iguais: uma parte foi encaminhada para a cultura bacteriana, onde foram realizadas provas bioquímicas manuais e semi-automatizadas. A outra parte foi submetida à reação de PCR, onde os oligonucleotídeos iniciadores foram F; 5’ ACCTACTCTTGACATCCAGA 3’ e R; 5’ CGCTCCACATCGCTGCTT 3’ que amplificam em 296 pb. Os produtos obtidos foram separados por eletroforese em gel de agarose. A visualização e fotodocumentação foram realizadas sob luz ultravioleta. Resultados e conclusão: Os resultados obtidos através da cultura bacteriana foram de 1,75% de casos positivos e 98,25% de negativos. Em relação ao PCR observamos o resultado de 63% de positivos e 37% de casos negativos. Concluindo, nossos resultados demonstram que a técnica de PCR oferece significativamente maior sensibilidade para detecção de P. pneumotropica quando comparado a cultura bacteriana. CEUA nº 251/11.

OBJECTIVE: To conduct a comparative study of the sensitivity by bacterial culture and PCR detection of Pasteurella pneumotropica in conventional colonies of inbred mice strains C57BL/6, BALB/c and Swiss outbred; Golden Hamster and Wistar rats. MATERIALS AND METHODS: 230 samples of the trachea were collected and divided into equal parts: one part was sent for culture, where biochemical tests were performed manually and semi-automated, after bacterial isolation. The other part was subjected to PCR, used primers F, 5 ‘ACCTACTCTTGACATCCAGA 3’ and R, 5 ‘CGCTCCACATCGCTGCTT 3’ which amplifies at 296 bp. The products obtained were separated by electrophoresis in agarose gel. Visualization and photodocumentation were performed under ultraviolet light. RESULTS AND CONCLUSION: The results obtained by bacterial culture were 1.75% of positive cases and negative in 98.25%; 63% and 37% of cases positive and negative, respectively, by PCR. These results point to the greater sensitivity of PCR (x2 = 0.10, 0.80 < p <0.50) when compared to bacterial culture. CEUA nº 251/11

Detecção de Proteus mirabilis nas fezes de camundongos spf / /Detection of Proteus mirabilis in specifc pathogen free mice feces

O presente estudo teve como objetivo apresentar os resultados de pesquisa de positividade do microorganismo Proteus mirabilis em camundongos das linhagens C57BL/6, BALB/c e BALB/c Nude, originários do setor de criação de camundongos livres de patógenos específicos (SPF) do Centro de Bioterismo da Faculdade de Medicina da USP e relatar a importância do isolamento deste microorganismo em colônias de animais. Para tanto, amostras de fezes de 71 camundongos da linhagem C57BL/6, 48 camundongos da linhagem BALB/c e 26 camundongos da linhagem BALB/c Nude, foram semeadas em meios específicos para bactérias gram negativas e diagnosticado no Enterokit B da Probac do Brasil. Nossos resultados mostraram que, as linhagens de camundongos C57BL/6, BALB/c e BALB/c Nude apresentaram P.mirabilis nas fezes, nas porcentagens de 80,3%, 62,5% e 73,1% respectivamente, sendo inadequadas para utilização em protocolos experimentais das áreas de radiobiologia, imunologia, oncologia e cirurgias experimentais invasivas, por interferirem potencialmente nos resultados destas áreas. CEUA nº 251/11.

This study aimed to present the positive results of Proteus mirabilis research from strains inbred mice C57BL/6, BALB/c and BALB/c Nude, originating from the sector of Specific Pathogen Free (SPF) mice - Animal Facilities of Faculdade de Medicina (USP – University of São Paulo) and report the importance of isolation of this microorganism in colonies of animals. For this, stool samples from: 71 C57BL/6, 48 BALB/c and 26 BALB /c Nude inbred mice, were inoculated in cultural bacteria specific media and diagnosed in the B Enterokit Probac-Brasil. Our results showed that the strains of C57BL/6, BALB/c and BALB/c Nude presented P.mirabilis in stool, percentages of 80.3%, 62.5% and 73.1% respectively, being unsuitable for use in experimental protocols in the fields of radiobiology, immunology, oncology, and experimental invasive surgeries by interfering mainly on the results of these areas. CEUA No. 251/11.

Detecção de Proteus mirabilis nas fezes de camundongos spf / /Detection of Proteus mirabilis in specifc pathogen free mice feces

O presente estudo teve como objetivo apresentar os resultados de pesquisa de positividade do microorganismo Proteus mirabilis em camundongos das linhagens C57BL/6, BALB/c e BALB/c Nude, originários do setor de criação de camundongos livres de patógenos específicos (SPF) do Centro de Bioterismo da Faculdade de Medicina da USP e relatar a importância do isolamento deste microorganismo em colônias de animais. Para tanto, amostras de fezes de 71 camundongos da linhagem C57BL/6, 48 camundongos da linhagem BALB/c e 26 camundongos da linhagem BALB/c Nude, foram semeadas em meios específicos para bactérias gram negativas e diagnosticado no Enterokit B da Probac do Brasil. Nossos resultados mostraram que, as linhagens de camundongos C57BL/6, BALB/c e BALB/c Nude apresentaram P.mirabilis nas fezes, nas porcentagens de 80,3%, 62,5% e 73,1% respectivamente, sendo inadequadas para utilização em protocolos experimentais das áreas de radiobiologia, imunologia, oncologia e cirurgias experimentais invasivas, por interferirem potencialmente nos resultados destas áreas. CEUA nº 251/11.(AU)

This study aimed to present the positive results of Proteus mirabilis research from strains inbred mice C57BL/6, BALB/c and BALB/c Nude, originating from the sector of Specific Pathogen Free (SPF) mice - Animal Facilities of Faculdade de Medicina (USP University of São Paulo) and report the importance of isolation of this microorganism in colonies of animals. For this, stool samples from: 71 C57BL/6, 48 BALB/c and 26 BALB /c Nude inbred mice, were inoculated in cultural bacteria specific media and diagnosed in the B Enterokit Probac-Brasil. Our results showed that the strains of C57BL/6, BALB/c and BALB/c Nude presented P.mirabilis in stool, percentages of 80.3%, 62.5% and 73.1% respectively, being unsuitable for use in experimental protocols in the fields of radiobiology, immunology, oncology, and experimental invasive surgeries by interfering mainly on the results of these areas. CEUA No. 251/11.(AU)

Estudo comparativo de sensibilidade das técnicas de cultura bacteriana e PCR para a detecção de Pasteurella pneumotropica em roedores / /Comparative sensivity for Pasteurella pneumotropica detection of rodents by bacterial culture and PCR techniques

Objetivo: Realizar uma comparação, em relação a sensibilidade, das técnicas de cultura bacteriana e PCR para detecção de Pasteurella pneumotropica, em colônias convencionais de camundongos das linhagens isogênicas C57BL/6, BALB/c e heterogênica Swiss; ratos Wistar e Hamster Golden. Materiais e Métodos: 230 amostras de traquéia foram coletadas e divididas em partes iguais: uma parte foi encaminhada para a cultura bacteriana, onde foram realizadas provas bioquímicas manuais e semi-automatizadas. A outra parte foi submetida à reação de PCR, onde os oligonucleotídeos iniciadores foram F; 5 ACCTACTCTTGACATCCAGA 3 e R; 5 CGCTCCACATCGCTGCTT 3 que amplificam em 296 pb. Os produtos obtidos foram separados por eletroforese em gel de agarose. A visualização e fotodocumentação foram realizadas sob luz ultravioleta. Resultados e conclusão: Os resultados obtidos através da cultura bacteriana foram de 1,75% de casos positivos e 98,25% de negativos. Em relação ao PCR observamos o resultado de 63% de positivos e 37% de casos negativos. Concluindo, nossos resultados demonstram que a técnica de PCR oferece significativamente maior sensibilidade para detecção de P. pneumotropica quando comparado a cultura bacteriana. CEUA nº 251/11.(AU)

OBJECTIVE: To conduct a comparative study of the sensitivity by bacterial culture and PCR detection of Pasteurella pneumotropica in conventional colonies of inbred mice strains C57BL/6, BALB/c and Swiss outbred; Golden Hamster and Wistar rats. MATERIALS AND METHODS: 230 samples of the trachea were collected and divided into equal parts: one part was sent for culture, where biochemical tests were performed manually and semi-automated, after bacterial isolation. The other part was subjected to PCR, used primers F, 5 ‘ACCTACTCTTGACATCCAGA 3 and R, 5 ‘CGCTCCACATCGCTGCTT 3 which amplifies at 296 bp. The products obtained were separated by electrophoresis in agarose gel. Visualization and photodocumentation were performed under ultraviolet light. RESULTS AND CONCLUSION: The results obtained by bacterial culture were 1.75% of positive cases and negative in 98.25%; 63% and 37% of cases positive and negative, respectively, by PCR. These results point to the greater sensitivity of PCR (x2 = 0.10, 0.80 < p <0.50) when compared to bacterial culture. CEUA nº 251/11(AU)

Parâmetros hematológicos normais em coelhos Nova Zelândia do biotério da Faculdade de Medicina da USP / Normal Haematological parameters in New Zealand rabbits from Faculdade de Medicina da USP animal facility

OBJETIVO: realizar análise comparativa de valores hematológicos entre sexos no mesmo período: anos de 2008, 2009 e 2010; bem como a comparação dos resultados agrupados. MATERIAL E MÉTODOS: 60 coelhos da raça Nova Zelândia, 30 machos e 30 fêmeas, idade entre 2-4 meses, criados em condições convencionais, foram submetidos a exames hematológicos, coletando-se o sangue pela artéria auricular central. As médias foram comparadas aplicando-se o teste t-Student, para p<0,05. RESULTADOS: foram observadas diferenças significantes entre as médias e os desvios padrão de machos e de fêmeas, para: hematócrito e hemoglobina, ano de 2010; eosinófilos, em 2008 e 2009; monócitos, ano de 2009, e neutrófilos, ano de 2010, na comparação dos sexos no mesmo período. A análise dos dados agrupados em 3 anos não apontou diferenças significantes entre os sexos. CONCLUSÃO: resultados encontrados, de machos e de fêmeas, respectivamente: eritrócitos x 106/mm3: 5,94±2,97, 4,86±3,63; Hematócrito %: 31,20±1,78, 26,40±4,50; Hemoglobina g/dL: 10,58±4,70, 8,94±3,57; volume corpuscular médio %: 52,58±3,86, 54,02±2,86; hemoglobina corpuscular média fl (fentolitros): 17,83±7,45, 36,22±7,35; concentração de hemoglobina corpuscular média %: 33,89±0,44, 34,10±0,02; Leucócitos x 103 /mm3: 9,98±2,45, 6,66±2,81; eosinófilos %: 5,40±1,14, 5,20±1,17; monócitos %: 2,40±0,89, 2,00±0,63; Linfócitos %:39,00±4,47, 40,02±20,93; Basófilos %: 0,00±0, 0,00±0; Bastonetes %: 11,40±1,34, 12,60±3,55; Segmentados %: 37,00±5,19, 40,20±1,60; Neutrófilos %: 48,40±4,93, 52,80±3,56. CEUA nº 251/11.(AU)

OBJECTIVE: To conduct a comparative analysis of hematologic values between sexes in the same period of the years 2008, 2009 and 2010, and the comparison of the pooled results. MAT ERIAL AND METHODS: 60 New Zealand rabbits, 30 males and 30 females, aged 2 to 4 months, bred in conventional conditions, were subjected to blood tests, blood was collected by the central auricular artery. Means were compared applying the Student t test, p <0.05. RESULTS: Significant differences were observed between the means and standard deviations of males and females, for hematocrit and hemoglobin, 2010; eosinophils, in 2008 and 2009; monocytes, 2009, and neutrophils, 2010, in comparison of the sexes in the same period. The analysis of pooled data over 3 years showed no significant differences between the sexes. CONCLUSION: We found the following results of males and females, respectively: erythrocytes x 106/mm3: 5.94±2.97, 4.86±3.63; hematocrit %: 31.20±1.78, 26.40±4.50; hemoglobin g/dL, 10.58±4.70, 8.94 ± 3.57; mean corpuscular volume %: 52.58±3.86, 54.02±2.86; mean corpuscular hemoglobin fl (fentoliter): 17.83±7.45, 36.22±7.35; mean corpuscular hemoglobin concentration %: 33.89±0.44, 34.10±0.02; leukocytes x103/mm3: 9.98±2.45, 6.66±2.81; eosinophils %: 5.40±1.14, 5.20±1.17; monocytes %: 2.40±0.89, 2.00±0.63; lymphocytes %: 39.00±4.47, 40.02±20.93; basophils %: 0.00±0, 0.00±0; rods %: 11.40±1.34; 12.60±3.55; segmented %: 37.00±5.19, 40.20±1.60; neutrophils %: 48.40±4.93, 52.80±3.56. CEUA No. 251/11.(AU)

Triagem de Helicobacter spp. em fezes de roedores de laboratório através da técnica de PCR / / Screening for Helicobacter spp inrodent feces laboratory using PCR technique

Este trabalho tem como objetivo otimizar a triagem da bactéria Helicobacter spp em programa de controle sanitário de animais de laboratório, aplicando a técnica de PCR (Polymerase Chain Reaction). Cinquenta amostras de fezes de cada linhagem ou espécie: camundongo C57BL/6, BALB/c, Swiss; ratos Wistar e Hamster foram submetidas à reação de PCR, utilizando os oligonucleotídeos iniciadores F: 5 CTATGACGGGTATCCGGC 3' E R: 5' ATTCCACCTACCTCTCCCA 3' que amplificam um produto de 374 Este trabalho tem como objetivo otimizar a triagem da bactéria Helicobacter spp em programa de controle sanitário de animais de laboratório, aplicando a técnica de PCR (Polymerase Chain Reaction). Cinquenta amostras de fezes de cada linhagem ou espécie: camundongo C57BL/6, BALB/c, Swiss; ratos Wistar e Hamster foram submetidas à reação de PCR, utilizando os oligonucleotídeos iniciadores F: 5 CTATGACGGGTApb. Separados por eletroforese em gel de agarose, os produtos foram visualizados e fotodocumentados sob luz ultravioleta.A técnica de PCR possibilitou a detecção de camundongos positivos, sendo 18% da linhagem C57BL/6, 52% da linhagem BALB/c, 62% da linhagem Swiss. Em ratos da linhagem Wistar, foram detectados 28% de positividade e em hamster, 44%. Esses resultados sugerem que a técnica de PCR empregada foi eficaz para a triagem de Helicobacter spp em colônias de animais de laboratório. Certificado CEAU nº 251/11 HCFMUSP. (AU)

This work aimed to optimize the screening of the bacterium Helicobacter spp in sanitary control program of laboratory animals, using the PCR (Polymerase Chain Reaction). Fifty stool samples from each strain or species: C57BL/6, BALB/c, Swiss, Hamster and Wistar rats were subjected to PCR using the primers F: 5 CTATGACGGGTATCCGGC 3' and R: 5' ATTCCACCTACCTCTCCCA 3' that amplofy 374 bp product. Separated by agarose gel electrophoresis, products were visualized and photographed under ultraviolet light. The PCR technique allowed the detection of positive mice, 18% of C57BL/6, 52% of the strain BALB/c, 62% of Swiss strain. In Wistar rats were detected 28% ´possivity and hamster 44%. These results suggest that the PCR technique used was effective in screening for Helicobacter spp in colonies of laboratory animals. Certified CRAU Nº 251/11 HCFMUSP.(AU)

Perfil bioquímico dos animais de laboratório do biotério da Faculdade de Medicina da USP pt / / Biochemical profile of laboratory animals of the Medical School USP

Objetivo: Os parãmetros bioquímicos são utilizados em pesquisas cientificas, em conjunto com outros fatores, para análise dos resultados experimentais. Animais de laboratório criados em diferentes biotérios apresentam variações em seus valores devido a dieta, manejo, estado sanitário, idade, vias de coleta do sangue e outros interferentes. Desta forma, o objetivo deste trabalho foi determinar o perfil bioquímico de camundongos, ratos, hamsters e coelhos convencionais criados pelo Centro de bioterismo da FMUSP. Materiais e Métodos: Foram utilizados 20 camundongos das linhagens isogênicas BALB/c e C57Bl/6 e da heterogênica Swiss; 40 ratos Wistar, 40 hamsters Golden e 40 coelhos New Zealand. Os exames realizados foram: uréia/BUN (Blood Urea Nitrogen), creatinina, proteínas totais, albumina e globulinas, ferro, fósforo, glicose, colesterol total e suas frações LDI (Low Density Lipoprotein), HDL (High Density Lipoprotein), VLDL (Very Low Density Lipoprotein), Bilirrubina total e frações (direta, indireta), cloretos, magnésio, triglicerides, Alt/AST (alanina aminotransferase, aspartato aminotransaminase), amônia, cálcio, ALP (fosfatase alcalina) e LDH (desidrogenase lática), determinados por fotocolorimetria semi-automática (Cobas Mira) e kits bioclin, Labtest e Byosystems. Resultados: Apresentados pelas médias e os erros padrões das concentrações de analitos, no plasma, agrupados por sexo. Conclusão: Foram determinados os perfis bioquímicos de camundongos, ratos, hamsters e coelhos convencionais do centro de Bioterismo da FMUSP, oferecendo uma ferramenta valiosa aos pesquisadores ao analisar seus resultados experimentais. Certificado CEAU nº 251/11 HCFMUSP. (AU)

Objective: The biochemical parameters are used in scientific research in conjunction with other factors, to analyze the experimental results. Laboratory animals raised in different animal houses have variations in their values due to diet, management health status, age, the process of colecting blood and other interferences. Thus, the objective of this study was to created by conventional Bioterty Center FMUSP . Materials and Methods: We used 20 isogenic strains of mice BALB/6 and C57BL/6 and Swiss heterogeneous, 40 Wistat rats, 40 rabbits and 40 hamsters Golden New Zealand. The tests performed were: urea / BUN (Blood Urea Nitrogen), creatine, total protein, albumin and globulins, iron, phosphorus, glucose, total cholesterol and LDL (Low Density Lipoprotein), HDL (High Density Lipoprotein), VLDL (very Low Density Lipoprotein), total bilirubin and fractions (direct, indirect), chlondes, magnesium, triglucerides, ALT/AST (alanine aminotransferase, aspartate aminotransaminase), ammonium, calcium, ALP (alkaline phosphatase) and LDH (lactate denydrogenase), certain by semi-automatic spectrophotometer (Cobas Mira) and Bioclin kitas, and Labtest Biosystems. Results: Presented by the means and standard errors of the concentrations of analytes in plasma, grouped by sex. Conclusion: We determined the biochemical profiles of mice, rats, hamsters and rabbits conventional Biotery FMUSP Center, offering a valuable tool for researchers to analyze their experimental results. Certified No 251/11 CEAU HCFMUSP.(AU)

Estudo comparativo dos valores hematológicos entre sexo e categorias sanitárias de camundongos C57BL/6 e BALB/c / Hematological comparative study between sex and sanitary categories of C57BL/6 and BALB/C Mouse

A finalidade deste estudo é oferecer aos pesquisadores dados que possam ser relevantes na escolha do modelo experimental a ser utilizado, comparando os valores hematologicos de camundongos de linhagens isogênicas, mantidos em biotérios Convencional e SPF - (Specific Pathogen Free). foram utilizados 80 camundongos selecionados por categoria sanitária e sexo, sem sinais clínicos de doenças, acima de 10 semanas. O perfil gematológico analisado foi determinado pelo processo de citometria, no qual a separação de entrócitos e leucócitos ocorre por volume celular, sendo utilizada a identificação celular pelo método em suspensão e qualificação. Os exames realizados foram eitrograma e leucograma no equipamento (Celm CC510) e os derivados hematológicos como índices hematimétricos; a quantificação morfológica de leucócitos e eritrócitos foram determinadas por varredura (Panótico-comercial) e hemoglobina por espectrofolometria (Celm E210D). A comparação dos valores hematológicos de camundongos das linhagens isogênicas BALB/c e C57BL/6, mantidos em biotérios Convencional e SPF não apresentou diferenças entre os parâmetros: contagem de hemácias, hematoctiyo, hemoglobina corpuscular média; contagem de leucócitos, monócitos, linfócitos e basofilos. Os eosinófilos apresentam valores diferentes entre os secos e entre as categorias sanitárias, em ambas as linhagens. Os neutrófilos, nas fêmeas C57Bl/6, foram superiores em número, nos convencionais quando comparadas às fêmeas SPF. Certificado CEAU nº 251/11 HCFMUSP.(AU)

The purpose of this study was to provide researchers with data that may be relevant in the choice of experimental model to be used, comparing the haematological values of isogenic strains of mice kept in conventional animal facilities and SPF - (Specific Pathogen Free). 80 mice were used for selected health category and sex, without clinical signs of disease, over 10 weeks, The blood profile analysis was determined by flow cytometry process, where the separation of erythrocytes and leukocytes occurs by cell volume and is used to identify the cell suspension method and quantification. The tests were performed on the equipment erythrogram and WBC (Celma CC510) and RBC indices as derived from hematological, morphological quantification of leukocytes and erythrocytes were determined by scanning (Panótico-commercial) and hemoglobin by spectrophometry (Celm, E210D). Comparison of leukocytes occurs by cell volume and is used to identify the cell sushaematological values of isogenic strains of mice BALB/c and C57BL/6, kept in conventional animal facilities and SPF, showed no differences between the parameters: erythrocyte count, hematocrit, hemoglobin, mean corpuscular volume, mean corpuscular hemoglobin, hemoglobin concentration mean corpuscular; WBC, monocytes, lymphocytes, and basophils. Eosinophils showed different values between the sexes and between health categories, in both strains. Neutrophilis, in the female C57BL/6 were greater in number in females qhen compared to conventional SPF. Certified nº 251/11 CEAU HCFMUSP.(AU)

Detecção de Mycoplasma pulmonis no trato respiratório superior em roedores através da técnica de PCR / /Mycoplasma pulmonis detection in the rodents respiratoru tract by PCR

Objetivo: apresentar a técnica de PCR para a detecção de Mycoplasma pulmonis das colônias convencionais de camundongos das linhagens isogênicas C57BL/6, BALB/c e heterogênica Swiss, e ratos Wistar. Material e Métodos: A extração do DNA foi realizada a partir de fragmento de traqueia, utilizando para a reação de PCR os oligonucleotídeos iniciadores F: 5’- CA TGT TCT TGG CCA CCTAT - 3’ e R:5’ - ATC CCT CAA TGA GCT GGT TC - 3' que amplificam um produto de 152 pb. Os produtos obtidos foram separados por eletrólise em gel de agarose. A visualização e fotodocumentação foram realizadas sob luz ultravioleta. Resultados e conclusões: A PCR possibilitou a detecção de camundongos positivos, sendo 38% da linhagem C57BL/6, 24% da linhagem BALB/c, 14% da linhagem heterogênica Swiss e 52% de ratos Wistar. Esses resultados sugerem que o emprego da técnica de PCR foi eficaz para o diagnóstico de Mycoplasma pulmonis em colônias de animais de laboratório. Certificado CEAU nº 251/11 HCFMUSP.

Objective: To introduce the PCR technique for detection of Mycoplasma pulmonis in conventional colony of mice inbred strains C5BL/6, BALB/c, outbred Swiss, and Whistar rats. Methods: DNA extraction was made from a fragment of the trachea, using the PCR primers F: 5’-CA TCT TGG TGT CCA CCTAT - 3’ and R:5’ - ATC CCT CAA TGA GCT GGT TC-3' which amplify a product of 152 bp. The products were separated by agarose gel electrophoresis. The viewing and photo documentation were performed under ultravioleta light. Results and Conclusion: The PCR allowed the detection of positive mice, 38% of C57BL/6, 24% of BALB/c 14% of Swiss and 52% of Wistar rats. These results suggest that the use of PCR technique was effective for the diagnosis of Mycoplasma pulmonis in colonies of laboratory animals. Certified CEAU nº 251/11 HCFMUSP.

Detecção de Mycoplasma pulmonis no trato respiratório superior em roedores através da técnica de PCR / /Mycoplasma pulmonis detection in the rodents respiratoru tract by PCR

Objetivo: apresentar a técnica de PCR para a detecção de Mycoplasma pulmonis das colônias convencionais de camundongos das linhagens isogênicas C57BL/6, BALB/c e heterogênica Swiss, e ratos Wistar. Material e Métodos: A extração do DNA foi realizada a partir de fragmento de traqueia, utilizando para a reação de PCR os oligonucleotídeos iniciadores F: 5- CA TGT TCT TGG CCA CCTAT - 3 e R:5 - ATC CCT CAA TGA GCT GGT TC - 3' que amplificam um produto de 152 pb. Os produtos obtidos foram separados por eletrólise em gel de agarose. A visualização e fotodocumentação foram realizadas sob luz ultravioleta. Resultados e conclusões: A PCR possibilitou a detecção de camundongos positivos, sendo 38% da linhagem C57BL/6, 24% da linhagem BALB/c, 14% da linhagem heterogênica Swiss e 52% de ratos Wistar. Esses resultados sugerem que o emprego da técnica de PCR foi eficaz para o diagnóstico de Mycoplasma pulmonis em colônias de animais de laboratório. Certificado CEAU nº 251/11 HCFMUSP. (AU)

Objective: To introduce the PCR technique for detection of Mycoplasma pulmonis in conventional colony of mice inbred strains C5BL/6, BALB/c, outbred Swiss, and Whistar rats. Methods: DNA extraction was made from a fragment of the trachea, using the PCR primers F: 5-CA TCT TGG TGT CCA CCTAT - 3 and R:5 - ATC CCT CAA TGA GCT GGT TC-3' which amplify a product of 152 bp. The products were separated by agarose gel electrophoresis. The viewing and photo documentation were performed under ultravioleta light. Results and Conclusion: The PCR allowed the detection of positive mice, 38% of C57BL/6, 24% of BALB/c 14% of Swiss and 52% of Wistar rats. These results suggest that the use of PCR technique was effective for the diagnosis of Mycoplasma pulmonis in colonies of laboratory animals. Certified CEAU nº 251/11 HCFMUSP.(AU)

Inbred F344 rats as a biologic model of intra-abdominal sepsis / Ratos isogênicos F344 como modelo biológico de sepsis intra-abdominal

Aiming to design a biologic model of acute intra-abdominal sepsis for experimental studies, conventional, isogenic rats F344 were infected with the bacteria Escherichia coli (E.coli), strain 11775, serotype H7:01:K1. Six hours after inoculation with E. coli, the animals - males and females - showed the following symptoms: piloerection, hyperpnea and decreased motor activity. The lethal dosis (LD50), was 6 x 10(5) CFU/ml, analyzed in 32 males and 32 females. The highest mortality rate was observed on the first 24 hours. Liver dysfunction, common in intra-abdominal sepsis, was evaluated at 0, 24, 48 and 168 hours after inoculation, by means of serum enzyme activities. Study of the migration of polymorphonuclear-neutrophil cells (PMN) and mononuclear-macrophage ones (MN) showed a significant increase of PMN in E. coli inoculated males (z > 4.7; P<0.003) and females (z > 6.2; P < 0.0003), when compared to control groups. As for MN cells, there were no differences between inoculated and control groups, in males (z = 2.3; P = 0.0107) and in females (z = 1.8; P = 0.0359) as well. In conclusion, these results show that inbred F344 rats are adequate biologic models for studies of acute, intra-abdominal sepsis.(AU)

Com o objetivo de estudar um modelo biológico de sepsis intra-abdominal aguda para estudos experimentais, foram infectados ratos isogênicos F344, convencionais, com a bactéria Escherichia coli (E.coli), cepa ATCC 11775, sorotipo H7:O1:K1. Os animais inoculados, machos e fêmeas, apresentaram 6 horas após a inoculação por E.coli os seguintes sintomas: arqueamento do dorso, piloereção, hiperpnéia e diminuição das atividades motoras. A dose que produziu 50% de mortalidade (DL50) após 7 dias, determinada pelo método Reed & Muench, foi de 6 x 105 CFU/ml (analisado em 32 machos e 32 fêmeas). A maior concentração de mortalidade foi observada nas primeiras 24 horas. A disfunção hepática, comum em sepsis intra-abdominal, foi avaliada por provas enzimáticas, em 0, 24, 48 e 168 horas após a inoculação. O estudo da migração de células polimorfonucleares-neutrófilos (PMN) e mononucleares-macrófagos (MN) apontou um aumento significante de PMN entre o grupos de machos (z ³ 4,7; p < 0,003) e de fêmeas (z ³ 6,2; p < 0,0003) inoculados E.coli, quando comparados ao grupos controles. Quanto às células MN, não houve diferença entre os grupos inoculados e os controles, tanto para os machos (z=2,3; p = 0,0107), como para as fêmeas (z=1,8; p =0,0359). Em conclusão, estes resultados demonstram que os ratos isogênicos F344 são modelos biológicos adequados para estudos de sepsis intra-abdominal aguda.(AU)