Resumo
A reação em cadeia da polimerase (PCR), uma nested-PCR (nPCR) um teste imunoenzimático (ELISA) e a imunodifusão emgel de agar (IDGA) foram utilizados para identificar bovinos Pantaneiros naturalmente infectados pelo vírus da leucemia bovina(BLV), e os resultados dos quatro testes comparados. A concordância entre os testes foi de 86,2%, 70,0% e 62,5%, respectivamentepara ELISA/IDGA, IDGA/PCR e ELISA/PCR. A nPCR amplificou DNA proviral de 12 amostras negativas à PCR e de quatrobovinos com resultados negativos em testes sorológicos; entretanto, não amplificou o DNA proviral de quatro amostras debovinos soropositivos.
Resumo
A reação em cadeia pela polimerase (PCR) foi utilizada para a detecção do vírus da leucemia bovina (VLB) em leucócitos periféricos de bovinos infectados. Os iniciadores utilizados foram construídos para amplificar uma parte do gene env do VLB. Os produtos da PCR foram analisados por eletroforese em gel de agarose corados por brometo de etídeo. A especificidade analítica da PCR foi confirmada por restrição enzimática dos produtos da reação com Bam HI e também pela análise da seqüência de três amostras. Sessenta e cinco animais foram testados para a presença de anticorpos anti-VLB, pela imunodifusão em gel de agar (IDGA) e pela PCR, para detecção direta do VLB. Houve 73,80 por cento de concordância entre os dois testes. Quatro animais positivos na IDGA foram PCR negativos, enquanto 13 animais negativos na IDGA foram positivos na PCR. A sensibilidade diagnóstica obtida foi de 0,87 e a especificidade diagnóstica 0,62. A PCR desenvolvida pode ser uma ferramenta complementar no diagnóstico de infecções causadas pelo VLB, mas deve ter sua sensibilidade diagnóstica melhorada.(AU)
Assuntos
Animais , Bovinos , Imunodifusão , Reação em Cadeia da Polimerase , Vírus da Leucemia Bovina , GenesResumo
A reação em cadeia da polimerase (PCR), uma nested-PCR (nPCR) um teste imunoenzimático (ELISA) e a imunodifusão emgel de agar (IDGA) foram utilizados para identificar bovinos Pantaneiros naturalmente infectados pelo vírus da leucemia bovina(BLV), e os resultados dos quatro testes comparados. A concordância entre os testes foi de 86,2%, 70,0% e 62,5%, respectivamentepara ELISA/IDGA, IDGA/PCR e ELISA/PCR. A nPCR amplificou DNA proviral de 12 amostras negativas à PCR e de quatrobovinos com resultados negativos em testes sorológicos; entretanto, não amplificou o DNA proviral de quatro amostras debovinos soropositivos.