Growth performance, reproductive parameters and fertility measures in young Nellore bulls with divergent feed efficiency

The growth, sexual maturity and fertility-related parameters related of young Nellore bulls with divergent residual feed intake (RFI) raised on pasture were evaluated. After classification of 48 young males as low and high RFI (more and less efficient, respectively), the animals were evaluated for growth and reproductive parameters at 28-day intervals from 14.3 to 24.6 months of age. The semen was cryopreserved in the last sampling and fresh and post-thaw semen samples were evaluated. Low RFI bulls exhibited higher initial and final body weight (P < 0.05), but feed intake, body condition score and growth measures evaluated by carcass ultrasound were unaffected by RFI (P > 0.05). The scrotal circumference, sperm concentration, defects, and quality of fresh semen, and ultrasonographic testicular characteristics were unaffected by RFI (P > 0.05). However, velocity parameters such as average path and curvilinear velocities determined by computer-assisted sperm analysis of thawed semen submitted to the rapid thermoresistance test were improved (P < 0.05) in low RFI bulls, but this improvement in quality did not enhance in vitro sperm fertilizing ability. Our results demonstrated significant differences in metabolism and growth performance between bulls of divergent RFI. In addition, there was slight improvement in the semen quality of bulls with low RFI bulls, but this did not enhance in vitro fertilizing ability. Selection of beef bulls for RFI can be performed, which will result in economic benefits by improving the growth performance of the animals without affecting reproductive parameters.(AU)

Efeitos da suplementação com fontes de ácidos graxos em doadoras da raça holandesa durante o pré e pós-parto sobre o retorno à ciclicidade e produção in vitro de embriões / Effects of fatty acid supplementation in Holstein cows at pre and postpartum period, on estrous cycle return and in vitro production of embryos

A suplementação de bovinos leiteiros com fontes de ácidos graxos poli-insaturados (AGPs) é uma prática utilizada para aumentar o nível energético das dietas, além de proporcionar efeitos positivos nas funções reprodutivas de importantes tecidos, incluindo hipotálamo, hipófise, ovários e útero. O trabalho foi conduzido com objetivo de avaliar as condições reprodutivas do pós-parto, número de folículos, presença de corpo lúteo (CL), concentração de progesterona (P), quantidade de oócitos viáveis e totais e a produção in vitro de embriões (PIVE) de doadoras multíparas da raça Holandesa suplementadas com dieta rica em AGPs protegido (principalmente ácido linoleico - n-6) e não protegido (principalmente ácido linolênico - n-3) durante o pré e pós-parto. As dietas foram fornecidas por 30 dias pré-parto e 60 dias pós-parto. As doadoras foram divididas aleatoriamente em 3 grupos: Controle (n=6), Megalac-E® (n=5; suplementados com fonte de gordura protegida 100 g/doadora/dia no pré-parto e 300 g/doadora/dia no pós-parto) e linhaça (n=5); fonte de gordura não protegida contendo 1 kg/doadora/dia no pré-parto e 1,5 kg/ doadora/dia no pós-parto). Os animais foram submetidos à aspiração folicular (OPU) nos dias 30, 45 e 60 pós-parto. Os oócitos recuperados foram selecionados e os viáveis submetidos aos procedimentos da PIVE. Os dados foram analisados pelo método dos quadrados mínimos utilizando análise de variância pelo procedimento GLM. As diferenças entre as médias foram comparadas pelo teste de Tukey com significância de 5%. Não foi detectado efeito de tratamento de suplementação, de dias de aspirações pós-parto e das interações sobre as variáveis: quantidade de oócitos viáveis, taxa de oócitos viáveis, número de clivagem, de PIVE, taxa de doadoras com CL concentração de P. (P>0,05). No entanto, foi observado maior número de folículos e de oócitos totais no grupo suplementado com linhaça em relação ao grupo Megalac-E® e Controle (P<0,05). A suplementação com AGPs não aumentou o número de oócitos viáveis, a PIVE e o retorno à ciclicidade.

The supplementation of dairy cattle with sources of polyunsaturated fatty acids (PUFA) can be used to increase the energy level of the diet in addition to having positive effects on reproductive functions of important tissues including the hypothalamus, pituitary, ovaries and uterus. The aims of this study were to evaluate the reproductive conditions of the postpartum, number of follicles, corpus luteum (CL) presence, concentration of progesterone (P4), aspirated oocytes, amount of viable oocytes and in vitro production of embryos (IVPE) of the Holstein multiparous donors supplemented with rich diet in protected PUFA (especially linoleic acid - n-6) and non-protected (especially linolenic acid - n-3) during pre and postpartum. The diets had been given for pre-partum during 30 d and postpartum 60 d. The donors were divided into three groups: Control (n=6), Megalac-E® (n=5; supplemented with protected fat source 100 g/donor/day in pre-partum and 300 g/donor/day in postpartum) and linseed (n=5; supplemented with fat source unprotected containing 1 kg/donor/day pre-partum and 1.5 kg/donor/day in postpartum). The animals were submitted to ovum pick-up (OPU) on days 30, 45 and 60 d postpartum. The recovered oocytes were selected and the viable ones were submitted to IVPE procedures. The data were analyzed by the method of least squares variance using the GLM protocol. The differences between averages were compared by Tukey test with 5% significance. There was no detectable effect of treatment, aspirations of postpartum days and interactions on variables: CL presence, concentration of P4, amount of viable oocytes, viable oocytes rate, IVPE and embryos production rate. However, was observed in the group supplemented with linseed more follicles and total oocytes than Megalac-E® and Control group. Supplementation with PUFA didn't increase the number of viable oocytes and IVPE.

Selection of Nelore bulls on in vitro production of embryos / Seleção de reprodutores bovinos da raça nelore na produção in vitro de embriões

This study evaluated the bull effect on the cleavage (CR) and blastocyst rate (BLR) by verifying which of these parameters can be used for selection of semen from Nelore bulls by in vitro production (IVP) of embryos. The immature oocytes from slaughterhouse cows ovaries were matured in vitro in TCM 199 medium with 10% estrous cow serum (ECS), 5µg/ml FSH and 5µg/ml LH. After 24 h of culture, the mature oocytes were incubated with frozenthawed semen from 4 Nelore bulls (A, B, C and D), which were submitted to the washing procedure and the sperm concentration adjusted to 5 x 106 cells/ml. The oocytes-sperm incubation lasted 18-21 h and the TALP-IVF supplemented with 30µg/ml heparin was the culture medium used. After this, the oocytes were transferred into microdroplets of Ménezo medium with 10% ECS and bovine oviduct epithelial cells in suspension and were further cultured by 9 days. All the cultures were performed at 38.5C with 5% CO2 in air and the data were analysed by chi-square test. There was no difference (P>0.05) among the bulls regarding to CR (A= 61.2%; B= 61.3%; C= 66.1%; D= 64.1%). In terms off BLR, bull C (4.1%) was significantly different from bulls A (10.6%), B (12.1%) and C (18.8%), which were not different to each other. The results indicated that the selection of bulls for IVP of bovine embryos should be done by using the blastocyst rate as tile goal.

O presente trabalho avaliou o efeito do reprodutor nas taxas de clivagem (TC) e de blastocistos (TBL) com a finalidade de verificar qual desses parâmetros serviria para selecionar o sêmen de reprodutores da raça Nelore para produção in vitro (PIV) de embriões. Oócitos imaturos provenientes de ovários de vacas de abatedouro foram submetidos a maturação in vitro utilizando o meio TCM 199, acrescido de 10% de soro de vaca em estro (SVE),  5µg/ml de FSH e 5µg/ml de LH. Após 24 h de cultura, os oócitos maturos foram incubados com sêmen descongelado de 4 reprodutores da raça Nelore (A, B, C e D), previamente submetidos ao procedimento de lavagem e a concentração espermática ajustada para 5 x 106 células/ml. A incubação dos oócitos-sêmen teve a duração de 18 a 21 h e o meio de cultura utilizado foi o TALP-FIV suplementado com 30µg/ml de heparina. Após este período, os oócitos foram transferidos para placas contendo microgotas de meio Ménezo suplementado com 10% de SVE e células epiteliais do oviduto bovino em suspensão, cobertas com óleo de silicone, permanecendo em cultura por mais 9 dias. Todas as culturas foram realizadas a 38,5ºC em atmosfera com 5% de CO2 e os dados foram analisados pelo Teste do Quíquadrado. Não houve diferença (P>0,05) entre os reprodutores com relação a TC (A= 61,2%; B= 61,3 %; C= 66,1%; D= 64,1%). Com relação a TBL, o reprodutor C (4,1%) foi inferior (P<

Selection of Nelore bulls on in vitro production of embryos / Seleção de reprodutores bovinos da raça nelore na produção in vitro de embriões

This study evaluated the bull effect on the cleavage (CR) and blastocyst rate (BLR) by verifying which of these parameters can be used for selection of semen from Nelore bulls by in vitro production (IVP) of embryos. The immature oocytes from slaughterhouse cows ovaries were matured in vitro in TCM 199 medium with 10% estrous cow serum (ECS), 5µg/ml FSH and 5µg/ml LH. After 24 h of culture, the mature oocytes were incubated with frozenthawed semen from 4 Nelore bulls (A, B, C and D), which were submitted to the washing procedure and the sperm concentration adjusted to 5 x 106 cells/ml. The oocytes-sperm incubation lasted 18-21 h and the TALP-IVF supplemented with 30µg/ml heparin was the culture medium used. After this, the oocytes were transferred into microdroplets of Ménezo medium with 10% ECS and bovine oviduct epithelial cells in suspension and were further cultured by 9 days. All the cultures were performed at 38.5C with 5% CO2 in air and the data were analysed by chi-square test. There was no difference (P>0.05) among the bulls regarding to CR (A= 61.2%; B= 61.3%; C= 66.1%; D= 64.1%). In terms off BLR, bull C (4.1%) was significantly different from bulls A (10.6%), B (12.1%) and C (18.8%), which were not different to each other. The results indicated that the selection of bulls for IVP of bovine embryos should be done by using the blastocyst rate as tile goal.

O presente trabalho avaliou o efeito do reprodutor nas taxas de clivagem (TC) e de blastocistos (TBL) com a finalidade de verificar qual desses parâmetros serviria para selecionar o sêmen de reprodutores da raça Nelore para produção in vitro (PIV) de embriões. Oócitos imaturos provenientes de ovários de vacas de abatedouro foram submetidos a maturação in vitro utilizando o meio TCM 199, acrescido de 10% de soro de vaca em estro (SVE),  5µg/ml de FSH e 5µg/ml de LH. Após 24 h de cultura, os oócitos maturos foram incubados com sêmen descongelado de 4 reprodutores da raça Nelore (A, B, C e D), previamente submetidos ao procedimento de lavagem e a concentração espermática ajustada para 5 x 106 células/ml. A incubação dos oócitos-sêmen teve a duração de 18 a 21 h e o meio de cultura utilizado foi o TALP-FIV suplementado com 30µg/ml de heparina. Após este período, os oócitos foram transferidos para placas contendo microgotas de meio Ménezo suplementado com 10% de SVE e células epiteliais do oviduto bovino em suspensão, cobertas com óleo de silicone, permanecendo em cultura por mais 9 dias. Todas as culturas foram realizadas a 38,5ºC em atmosfera com 5% de CO2 e os dados foram analisados pelo Teste do Quíquadrado. Não houve diferença (P>0,05) entre os reprodutores com relação a TC (A= 61,2%; B= 61,3 %; C= 66,1%; D= 64,1%). Com relação a TBL, o reprodutor C (4,1%) foi inferior (P<

Colpocytology of estrous cycle in cat / Colpocitologia do ciclo estral em gatas

Colpocytology was performed in ten female cats of unknown breed, granted by the Hospital Veterinário Governador Laudo Natel of FCAVJ-UNESP, which remained in individual cages, with balanced feeding and water ad libitum. Estrous cycle phases were defined by classification and by couting scaled of epithelial cells from vagina. In that trial, it was observed that the number of anuclear superficial cells prevailed during proestrus and oestrus, while nucleated superficial cells were found in greater number at proestrus. Parabasal and intermediate cells were present at metestrum and anestrus in more expressive numbers. Regarding parabasal cells, there was a prevailance at the anestrus stage.

Foram submetidas à colpocitologia 10 gatas, sem raça definida, cedidas pelo Hospital Veterinário Governador Laudo Natel da FCAVJ-UNESP, as quais permaneceram em gatis individuais, recebendo ração balanceada e água à vontade. As fases do ciclo estral foram definidas pela identificação e contagem das células epiteliais descamativas da vagina. Neste trabalho, observou-se que o número de células superficiais anucleadas predominaram nas fases de proestro e estro, ao passo que as células superficias nucleadas foram identificadas em maior número no proestro. Já as células intermediárias e parabasais apresentaram-se em números mais expressivos no metaestro e anestro. Com relação às células parabasais, houve predominância destas na fase de anestro.

Evaluation of oocyte maturation conditions and bull effect on the in vitro bovine embryo production / Avaliação das condições de maturação oocitária e do efeito do reprodutor na produção in vitro de embriões bovinos

The conditions of in vitro maturation of bovine oocytes (Exp. I) and bull effect (Exp. II) on cleavage (CR) and the in vitro morulae and blastocysts (MO/BL) rates were evaluated. Imatured oocytes were matured in vitro under different conditions: B-199 medium with 5% estrous cow serum (ECS), 5% fetal calf serum (FCS) and granulosa cells (T1/Exp. I) or B-199 medium with 10% FCS, 14 IU/ml PMSG and 7 IU/ml hCG (T2/Exp I). After 24 h culture, the mature oocytes were inseminated with frozen-thawed semen from two bulls (R1 and R2/Exp. II). In the Exp. I, the T1 and T2 oocytes were inseminated with semen from R1/Exp. II and in the exp. II the semen from both bulls inseminated T1/Exp. I oocytes. After 48 h, the 2-4 cells embryos were transferred into embryo culture droplets and were further cultured for 9 days. The CR of T2/Exp I was higher (p 0.01) than T1/Exp. I. There was a significant difference (p 0.05) between bulls on CR and Mo/Bl production. The use of hormones in a maturation medium has no effect on embryo production, however the procedure seems to be simpler than with granulosa cells. The use of semen from different bulls for in vitro fertilization has affected the subsequent in vitro production of embryos.

Avaliaram-se as condições de cultura para maturação dos oócitos (Exp. I) e o efeito do reprodutor (Exp. II) sobre as taxas de clivagem (TC) e de mórulas e blastocistos (MO/BL) produzidos in vitro. Oócitos imaturos foram submetidos a maturação in vitro sob diferentes condições: meio B-199, acrescido de 5% de soro de vaca em estro (SVE), 5% de soro fetal bovino (SFB) e células da granulosa (T1/Exp. I) ou meio B-199, acrescido de 10% de SFB, 14 UI/ml de PMSG e 7 UI/ml de hCG (T2/Exp I). Após 24 h de cultura, os oócitos maturos foram inseminados com sêmen descongelado de dois reprodutores (R1 e R2 /Exp. II) e, após 48 h de incubação, os embriões de 2 e 4 células foram transferidos para placas de cultivo in vitro, onde permaneceram em cultura por mais 9 dias. No Exp. I, os oócitos de T1 e T2 foram inseminados com sêmen do R1/Exp. II. No Exp. II, os oócitos do T1/Exp. I foram inseminados com sêmen de R1 e R2/Exp. II. No Exp. I, a TC foi superior (p 0,01) para T2, quando comparado com T1. A produção de MO/BL não foi diferente (p>;0,05) entre tratamentos. No Exp. II, a TC e a taxa de MO/BL diferiram (p 0,05) para cada reprodutor. A adição de hormônios no meio de maturação, embora não tenha interferido na produção de embriões, parece ser um procedimento mais prático que o uso de células da granulosa. A utilização de sêmen de diferentes reprodutores afetou o subseqüente desenvol

Effects of fatty acid suplementation in Holstein cows at pre and post partum period, on estrous cycle return and in vitro production of embryos / Efeitos da suplementação com fontes de ácidos graxos em doadoras da raça Holandesa durante o pré e pós-parto sobre o retorno à ciclicidade e produção in vitro de embriões

The supplementation of dairy cattle with sources of polyunsaturated fatty acids (PUFA) can be use to increase the energy level of the diet in addition to having positive effects on reproductive functions of important tissues including the hypothalamus, pituitary, ovaries and uterus. The aims of this study were to evaluate the reproductive conditions of the postpartum, number of follicles, corpus luteum (CL) presence, concentration of progesterone (P4), aspirated oocytes, amount of viable oocytes and in vitro production of embryos (IVPE) of the Holstein multiparous donors supplemented with rich diet in protected PUFA (especially linoleic acid - n- 6) and non-protected (especially linolenic acid - n-3) during pre and post partum. The diets had been given for pre-partum during 30 d and post partum 60 d. The donors were divided into three groups: Control (n=6), Megalac-E® (n=5; supplemented with protected fat source 100 g/donor/ day in pre-partum and 300 g/donor/day in postpartum) and linseed (n=5; supplemented with fat source unprotected containing 1 kg/donor/day pre-partum and 1.5 kg/donor/day in postpartum). The animals were submitted to ovum pick-up (OPU) on days 30, 45 and 60 d postpartum. The recovered oocytes were selected and the viable ones were submitted to IVPE procedures. The data were analyzed by the method of least squares variance using the GLM protocol. The differen

A suplementação de bovinos leiteiros com fontes de ácidos graxos poliinsaturados (AGPs) é uma prática utilizada para aumentar o nível energético das dietas, além de proporcionar efeitos positivos nas funções reprodutivas de importantes tecidos, incluindo hipotálamo, hipófise, ovários e útero. O trabalho foi conduzido com objetivo de avaliar as condições reprodutivas do pós-parto, número de folículos, presença de corpo lúteo (CL), concentração de progesterona (P4), quantidade de oócitos viáveis e totais e a produção in vitro de embriões (PIVE) de doadoras multíparas da raça Holandesa suplementadas com dieta rica em AGPs protegido (principalmente ácido linoleico - n-6) e não protegido (principalmente ácido linolênico - n-3) durante o pré e pósparto. As dietas foram fornecidas por 30 dias pré-parto e 60 dias pós-parto. As doadoras foram divididas aleatoriamente em 3 grupos: Controle (n=6), Megalac-E® (n=5; suplementados com fonte de gordura protegida 100 g/doadora/dia no pré-parto e 300 g/doadora/dia no pós-parto) e linhaça (n=5); fonte de gordura não protegida contendo 1 kg/doadora/dia no pré-parto e 1,5 kg/ doadora/dia no pós-parto). Os animais foram submetidos à aspiração folicular (OPU) nos dias 30, 45 e 60 pós-parto. Os oócitos recuperados foram selecionados e os viáveis submetidos aos procedimentos da PIVE. Os dados foram analisados pelo método dos quadrados mínimos utilizan