Effect of glutamine on the mRNA level of key enzymes of malate-aspartate shuttle in the rat intestine subjected to ischemia reperfusion / Efeito da glutamina sobre o nível de RNA Mensageiro das enzimas-chave do ciclo malato-aspartato no intestino de ratos submetidos à isquemia e reperfusão

PURPOSE: To determine the effects of oral L-glutamine (L-Gln) and the dipeptide l-alanyl-glutamine (L-Ala-Gln) upon the activity of the malate-aspartate shuttle in the rat distal small intestine following ischemia and reperfusion. METHODS: Seventy-two Wistar rats (350-400g), were randomized in 2 groups (n = 36): group S (Sham) and Group T (Treatment) and divided into 12 subgroups (n = 6): A-A6, and B1-B6. The subgroups A1-A3 were subjected to sham procedures at 30 and 60 minutes. Thirty minutes before the study, rats were treated with calcium caseinate, 0.5g/Kg (subgroups A1, A4, B1, B4), L-Gln, 0.5g / kg (subgroups A2, A5, B2 and B5) or L-Ala-Gln, 0.75g/Kg (subgroups A3, A6, B3, B6), administered by gavage. Ischemia was achieved by clamping the mesenteric vessels, delimiting a segment of bowel 5 cm long and 5 cm apart from the ileocecal valve. Samples were collected 30 and 60 minutes after start of the study for real-time PCR assay of malate dehydrogenases (MDH1-2) and aspartate-aminotransferases (GOT1-2) enzymes. RESULTS: Tissue MDH and GOT mRNA expression in intestinal samples from rats preconditioned with either L-Gln or L-Ala-Gln showed no significant differences both during ischemia and early reperfusion. CONCLUSION: Activation of the malate-aspartate shuttle system appears not to be the mechanism of glutamine-mediated elevation of glucose oxidation in rat intestine during ischemia/reperfusion injury.(AU)

OBJETIVO: Determinar os efeitos da administração oral de L-glutamina (L-Gln) e do dipeptídeo L-alanil-glutamina (L-Ala-Gln) sobre a atividade do ciclo malato-aspartato no intestino delgado distal de ratos após isquemia/reperfusão. MÉTODOS: Setenta e dois ratos Wistar (350-400g) foram randomizados em 2 grupos (n = 36): T grupo S (Sham) e grupo (Tratamento) e distribuídos em 12 subgrupos (n = 6): A-A6, e B1-B6. Os subgrupos A1-A3 foram submetidos a procedimentos "sham" aos 30 e 60 minutos. Trinta minutos antes do estudo, os ratos foram tratados com caseinato de cálcio, 0,5 g/kg (subgrupos A1, A4, B1 e B4), L-Gln, 0,5 g/kg (subgrupos A2, A5, B2 e B5) ou L-Ala -Gln, 0,75g/kg (subgrupos A3, A6, B3, B6), administrado por gavagem. A isquemia foi obtida por pinçamento dos vasos mesentéricos, delimitando um segmento do intestino cinco centímetros de comprimento e 5 cm da válvula ileocecal. Amostras foram coletadas aos 30-60 minutos para ensaio de PCR em tempo real das enzimas malato desidrogenases (MDH1-2), aspartato-aminotransferase (GOT1-2). RESULTADOS: A expressão de MDH e GOT mRNA nas amostras provenientes do intestino delgado de ratos pré-condicionados com L-Gln ou L-Ala-Gln não apresentou diferenças significativas, tanto durante a isquemia como na fase inicial de reperfusão. CONCLUSÃO: Ativação do ciclo malato-aspartato não parece ser o mecanismo de elevação glutamina-mediada da oxidação da glicose no intestino de ratos durante a isquemia / reperfusão.(AU)

Is subdiaphragmatic aortic cross-clamping a suitable model for spinal cord ischemia/reperfusion injury study in rats? / O pinçamento sub-diagragmático da aorta é um modelo adequado para o estudo da lesão medular de isquemia/reperfusão em ratos?

OBJETIVO: Avaliar a eficácia do pinçamento da aorta subdiafragmática no modelo experimental de isquemia/reperfusão da medula espinhal em ratos. Trinta e seis ratos Wistar, machos, foram aleatoriamente distribuídos em 2 grupos (n=18) e submetidos ao pinçamento subdiafragmático da aorta, durante 30 minutos (Grupo-2 -Isquemia/Reperfusão). Os ratos do Grupo-1 (G-1 - Sham) foram utilizados como controles e submetidos a laparotomia sem pinçamento arterial. As amostras (medula e sangue arterial) foram coletadas ao término do período de isquemia (T-0) e 10 (T-10) e 20 (T-20) minutos mais tarde e nos mesmos intervalos, no grupo G-1. As concentrações teciduais e sanguíneas de piruvato, lactato, glicose e as concentrações medulares de trifosfato de adenosina (ATP) foram determinadas por ensaios enzimáticos. RESULTADOS: As concentrações de piruvato e glicose (sangue e tecido) e de lactato e ATP (medula) não foram diferentes,comparando G-1 versus G-2. A lactacemia elevou-se significantemente no G-2, comparado ao G-1, durante a reperfusão (T-10). CONCLUSÃO: O modelo experimental de pinçamento subdiafragmático da aorta não é adequado para o estudo da lesão de isquemia/reperfusão na medula de ratos, uma vez que não proporciona alterações nas concentrações in vivo de metabólitos teciduais, por exemplo de lactato ou ATP, compatíveis com aquelas encontradas em tecidos sujeitos à isquemia/reperfusão.(AU)

PURPOSE: To evaluate the efficacy of subdiaphragmatic aortic cross-clamping in an experimental model of ischemia/reperfusion injury of the spinal cord in albino rats. METHODS: Thirty-six male Wistar rats were randomized in two groups (n=18): G-1 (Sham) and G-2 (Ischemia/Reperfusion, I/R). G-2 rats were submitted to 30 min subdiafragmatic aortic cross-clamping. G-1 rats served as controls and were submitted to surgical trauma (laparotomy) without ischemia. Samples (spinal cord and arterial blood) were collected at the end of ischemic period and 10 (T-10) and 20 (T-20) min later in G-2 rats. Sham rats (G-1) samples were collected at the same time-points. Blood and tissue metabolites concentrations of pyruvate, lactate, glucose and medullary adenosine triphosphate (ATP) were assayed. RESULTS: Blood and tissue concentrations of pyruvate and glucose as well as lactate and medullary ATP were not different when comparing G1 to G2. Lactacemia was significantly elevated in G-2 compared with G-1 rats during reperfusion (T-10). CONCLUSION: Subdiaphragmatic aortic cord cross-clamping is not a suitable rat model for spinal cord ischemia/reperfusion injury study as it does not ensure changes in in vivo tissue metabolites concentrations similar to those found in tissues subjected to ischemia/reperfusion.(AU)

Effects of L-alanyl-glutamine upon the blood and kidney biochemical parameters in the rat hind limb model of ischemia/reperfusion / Efeitos da L-alanil-glutamina sobre os parâmetros bioquímicos do sangue e do rim no rato submetido à isquemia/reperfusão do membro pélvico

OBJETIVO: Investigar alterações dos parâmetros metabólicos no sangue e rim de ratos submetidos à isquemia/reperfusão do membro pélvico. MÉTODOS: Quarenta e oito ratos machos foram distribuídos aleatoriamente em 2 grupos pré-tratados com administração intragástrica de solução salina 2,0 mL (G-1) ou L-alanil-glutamina 0,75 mgKg-1(G-2), uma vez ao dia (7:00h) durante 7 dias. Uma hora após a última gavagem todos os ratos foram anestesiados com éter dietílico, laparotomizados e submetidos ao pinçamento da artéria de ilíaca esquerda, durante 3 horas. Amostras foram coletadas ao término de isquemia e durante a reperfusão (1-3-6h) para determinação das concentrações in vivo de piruvato, lactato, glicose e corpos cetônicos (rim e sangue) e ATP (rim). RESULTADOS: Lactacemia e cetonemia aumentaram no grupo G-2 quando comparadas às aferidas em ratos não-tratados, durante a reperfusão. As concentrações de piruvato diminuíram e de lactato aumentaram significativamente no rim, durante a reperfusão (1h, 3h) em ratos do G-2 comparados aos respectivos controles. Houve um aumento significante nas concentrações renais de glicose, ATP e corpos cetônicos nos ratos tratados com L-alanil-glutamina durante a reperfusão (3h). CONCLUSÕES: A isquemia do membro pélvico em ratos pré-tratados com L-alanil-glutamina induz aumento da lactacemia e da concentração de lactato renal, indicando atividade glicolítica aumentada na medula renal. A hipercetonemia induzida pela oferta do dipeptídeo sugere cetogênese elevada, sinalizada por possível queda nas concentrações plasmáticas de insulina resultante da maior oxidação de glicose e utilização desse hormônio em tecidos periféricos.(AU)