Total lipids and fatty acids in nutritional label information of packed foods: aspects on legislation and quantification / Lipídios totais e ácidos graxos na informação nutricional do rótulo dos alimentos embalados: aspectos sobre legislação e quantificação

The excessive ingestion of saturated and trans fatty acids on a diet has been associated with an increased risk of getting cardiovascular diseases. In Brazil, the Federal Directive RDC 360/03 of the National Agency for Sanitary Surveillance (ANVISA) demands the declaration of the contents of total fat (TF) or total lipid (TL), saturated fatty acid (SFT) and trans fatty acid (TFA), among other nutrients, on the labels of packed foods as an strategy to prevent chronic diseases. One of the attributions of official laboratories is to certify the stated nutritional contents on food package labels by means of analytical investigation. However, definitions about lipidic components of foods, as well as the analytical methods to be used in their determination, have not been uniformed yet. Considering the legal requirements, the diversity of available analytical methods, and mainly to the rights of customers to obtain reliable information, the present review aims to discuss aspects of the legislation on obligatory nutritional food labeling and the critical steps of analytical methods employed to quantify the lipidic components. These methods may lead to significant divergence on the values of contents of such nutrients. Emphasis is made on evidences of the need for standardization of methodologies for this specific purpose at Brazilian laboratories. This strategy surely will contribute t

A ingestão excessiva de ácidos graxos saturados e trans na dieta tem sido correlacionada ao aumento do risco de doenças cardiovasculares. No Brasil, conforme a Resolução RDC 360/03 da Agência Nacional de Vigilância Sanitária (ANVISA) é exigida a declaração do teor de gordura total (GT) ou lipídios, ácidos graxos saturados (AGS) e trans (AGT) na rotulagem dos alimentos embalados, entre outros nutrientes, como estratégia de prevenção das doenças crônicas. Cabe aos laboratórios oficiais verificarem os teores declarados por meio da análise. No entanto, não estão uniformizadas as definições quanto aos componentes lipídicos, tão pouco quanto aos métodos analíticos a serem adotados, inclusive nos laboratórios brasileiros. Considerando-se as exigências legais, a diversidade dos métodos analíticos disponíveis e, principalmente, o direito do consumidor de obter informações confiáveis, a presente revisão teve como objetivo abordar aspectos sobre a legislação de rotulagem nutricional obrigatória dos alimentos, bem como sobre as etapas críticas dos métodos analíticos de quantificação dos componentes lipídicos. Estas etapas podem levar a divergências significativas nos teores obtidos para os nutrientes. Reforçam-se as evidências da necessidade de padronização das metodologias nos laboratórios brasileiros. Tal padronização contribuirá para garantir o direito do consumidor em obter informações

Analytical methods for detecting gluten in foods / Métodos analíticos para detecção de glúten em alimentos

Treatment of celiac disease (CD) is consisted of a diet free of prolamins as gliadin, hordein, secalin, and avenin existing in wheat, barley, rye, and oats. The Codex Alimentarius Commission (FAO/WHO) has defined the maximum gluten content of 200 ppm (mg/kg) to consider as gluten-free products. The Codex Commission Review 2004 recommended the limits of 20 mg/kg dry mass for naturally gluten- free products, and 200 mg/kg for food derived from gluten - free products. Among analytical methods for detecting or determining glúten/gliadin the following techniques have been used: mass spectrometry, high performance-liquid chromatography, wheat DNA analysis by PCR, and immunoenzyme assay. ELISA based on monoclonal antibody for gliadin has been the technique officially recommended by the Association of Official Analytical Chemistry (AOAC). R5-ELISA has got a provisory approval from the Codex Alimentarius as type I method. R5-ELISA is based on the use of a monoclonal antibody for pentapeptide occurring in gliadin, hordein, secalin, and avenin, and this assay presents sensitivity and limit detection (1.5 ppm gliadin) rates superior in comparison to other techniques. Although, the qualitative analysis for detecting he presence of small fragment of protein in hydrolized prolamine should be assessed by means of DNA-based techniques.

O tratamento para a doença celíaca (DC) consiste em dieta livre das prolaminas: gliadina, hordeina, secalina e avenina existentes no trigo, centeio, cevada e aveia. A Comissão do Codex Alimentarius (FAO/WHO) definiu o limite de 200 ppm (mg/kg) de glúten para o alimento ser considerado livre desse produto. A revisão de 2004 do Codex Alimentarius sugeriu o limite de 20 ppm para produtos naturalmente sem glúten e de 200 ppm para produtos derivados de ingredientes não fonte de glúten, porém esses limites estão ainda em discussão. Entre os métodos analíticos para detectar ou determinar glúten/gliadina têm sido empregadas as técnicas de: espectrometria de massa, cromatografia líquida, análise de DNA do trigo e imununoenzimáticos. O método oficial adotado pela Association of Official Analytical Chemistry (AOAC) é o ELISA baseado no anticorpo monoclonal para gliadina. O Codex Alimentarius endossou temporariamente, o R5 ELISA como Método Tipo I. O R5 ELISA utiliza anticorpo monoclonal para o pentapeptídeo tóxico existente na gliadina, hordeina e secalina. O ELISA, em função de sua maior sensibilidade e apropriado limite de detecção (1,5 ppm de gliadina), é considerado superior às demais técnicas. A presença de pequenos fragmentos de proteína existentes em prolaminas hidrolisadas devem ser avaliados por métodos baseados em DNA.

Comparative study between in vivo and in vitro toxicological methods and microbiological quality assessment in disposable hygienic products / Estudo comparativo entre os métodos in vivo e in vitro na análise toxicológica de produtos de higiene descartáveis e sua avaliação microbiológica

The purpose of this study was to compare both in vivo and in vitro methods evaluating toxicity and microbiological quality of 60 disposable hygienic products samples commercialized in the city of São Paulo. For in vivo toxicity testing, both Draize, and modified Magnusson-Kligman Method were carried out, and agar diffusion was used for in vitro testing, employing NCTC clone 929 (ATCCCCL1) and SIRC (ATCC-CCL-60) cell lines. Microbiological analysis was performed according to Bacteriological Analytical Manual On Line, 2001. The analyzed products neither caused primary skin rash, nor cumulative dermal rash, nor cutaneous sensitization, though on in vitro test, slight to severe toxicities were observed in 18 samples on both cell lines, with zone index (ZI) of 2.0 4.0. Microbiological analysis revealed high number of mesophilic aerobic microorganisms counting, positive results for molds, and presence of Enterobacter sp, Enterobacter agglomerans and Enterobacter cloacae. Based on the observed data in order to guarantee the consumer health safety it should be stated the use of in vitro cytotoxicity test for both products of internal and external use, in addition to the tests referred by effective Brazilian laws. The preceding accomplishment of this test might be established as screening test.

Os objetivos deste trabalho foram comparar os métodos in vivo e in vitro na avaliação da toxicidade dérmica e estimar a qualidade microbiológica de 60 amostras de produtos de higiene descartáveis comercializados na cidade de São Paulo. Nos testes de toxicidade in vivo foram utilizados o Método de Draize e o Método Modificado por Magnusson e Kligman e nos testes in vitro o Método de difusão em agar, empregando as linhagens celulares, NCTC clone 929 (ATCC- CCL1) e SIRC (ATCC-CCL- 60). A análise microbiológica foi realizada de acordo com o Bacteriological Analytical Manual On Line, 2001. Os produtos analisados não apresentaram irritação dérmica primária, cumulativa e sensibilização cutânea, mas nos testes in vitro, foi observada em 18 amostras toxicidade leve à severa, com índice de zona (IZ) variando de 2,0 - 4,0 nas duas linhagens celulares testadas. A análise microbiológica apresentou número elevado de bactérias aeróbias mesófilas, resultados positivos para bolores, presença de Enterobacter sp, Enterobacter agglomerans e Enterobacter cloacae. De acordo com os resultados obtidos e para garantir a segurança da saúde do usuário recomenda-se que, além dos testes já mencionados pela legislação vigente, seja também preconizado teste de citotoxicidade in vitro, para os produtos de uso interno e externo. A realização prévia deste teste pode se constituir em mecanismo de triagem

Evaluation of statistical criteria applicable to interlaboratory comparisons for lead in blood / Avaliação de critérios estatísticos utilizados em programas interlaboratoriais para pesquisa de chumbo em sangue

The participation in Interlaboratory Comparison Programme (IP) is a tool used by laboratories to ensure reliability of analytical results. In IPs the selection of a statistical treatment applied to the results can affect the estimation of the true value (assigned value) and its uncertainty, the acceptance range and the performance assessment of the participants laboratories. Using the results of the participant laboratories in the Proficiency Test Programme for lead in blood, coordinated by Instituto Adolfo Lutz, São Paulo, for different levels of concentration, seven statistical techniques were compared. The assigned value was calculated using the median, or the average value after the elimination of the dispersed results, employing Hampel, Grubbs, Dixon and Z-scores criteria. The acceptance range was calculated according to Z score,making use of the standard deviation or using Horwitzs equation or the Horwitzs one modified by Thompson. It was also used the current criterion applied to the Program, which considers Xdesignated ± 6, for concentrations [Pb-s] 40 g/100mL and Xdesignated ± 15% Xdesignated for concentrations > 40 g/ 100mL. It was verified that the assigned values obtained through the statistical techniques used did not present significant differences when the confidence level was 5%. However, the acceptance ranges obtained showed they were influenced by t

A participação em Programas de comparação Interlaboratorial (PI) é uma ferramenta utilizada pelos laboratórios para garantir a confiabilidade de seus resultados analíticos. Em PIs a escolha do tratamento estatístico aplicado aos resultados pode afetar a estimativa do valor verdadeiro (valor designado) e a incerteza associada, o intervalo de aceitação e a avaliação de desempenho dos laboratórios. Empregando resultados dos laboratórios participantes do Programa de Ensaio de Proficiência para chumbo em sangue (PEP-Pb-s), coordenado pelo Instituto Adolfo Lutz, São Paulo, para diferentes níveis de concentração, foram comparados sete critérios estatísticos. O valor designado foi calculado usando a mediana, ou a média após exclusão dos dispersos, empregando os critérios de Hampel, Grubbs, Dixon e Z-score. O intervalo de aceitação foi calculado pelo Z-score empregando o desvio padrão ou utilizando as equações de Horwitz ou de Horwitz modificada por Thompson. Foi também utilizado o critério atualmente empregado no Programa, que considera Xdesignado ± 6, para concentrações [Pb-s] 40 g/100mL e Xdesignado ± 15% Xdesignado para concentrações > 40 g/100mL. Verificou-se que os valores designados obtidos pelos critérios estatísticos empregados não apresentaram diferenças significantes em um nível de significância de 5%. Porém, os intervalos de aceitação obtidos mostraram-se influenciados

Saturated fatty acids in foodstuffs: comparison of procedures in gas chromatographic analysis / Ácidos graxos saturados em produtos alimentícios: comparação de procedimentos na análise por cromatografia gasosa

The present paper describes the data observed in comparing procedures for determining saturated fatty acids for nutritional labeling by GC/FID. Two procedures to prepare the fatty acids methyl esters [a cold base-catalyzed with KOH 0,2 molL-1 methanolic, and a base and acid - combined procedure (Hartman and Lago)] were compared. Also, two methods were evaluated for calculating the fatty acid concentration, expressed in grams per 100 grams of food (by means of internal standard, and by normalization of area multiplied by theoretical conversion factors). Six samples were analyzed: egg, two types of cookies, soya extract, cappuccino powder, and coffee powder. Variance analysis and Tukey test (p 0,05%) were applied. No significant difference was observed between the methylation procedures. On the other hand, significant difference was observed in calculating both method for determining the saturated fatty acids in cappuccino and coffee samples. The results point out that it is necessary to use internal standard to quantify the fatty acids in foodstuffs, and further studies should be done to evaluate the use of theoretical factors to calculate fatty acids composition in foodstuffs containing several ingredients.

No presente trabalho são apresentados os resultados obtidos da comparação de metodologias adotadasnas análises de ácidos graxos saturados em laboratórios brasileiros. Foram comparados dois procedimentosde preparação de ésteres metílicos de ácidos graxos a partir dos lipídios extraídos (IUPAC 2301 e Hartmane Lago) e dois métodos de cálculo para expressar a concentração de ácidos graxos saturados em g/100g deamostra (cálculo com padrão interno ou com normalização de área multiplicada por fator de conversãoteórico). As análises foram feitas por cromatografia gasosa. Foram analisadas seis amostras, sendo: ovo,biscoito recheado, biscoito amanteigado, extrato de soja, mistura para cappuccino e café. Para avaliar asdiferenças entre os procedimentos foi aplicada a ANOVA, e no caso de valores com p 0,05 foi utilizado oteste de Tukey (nível de confiança de 95%). Comparando os processos de preparação de ésteres metílicosnão foi observada diferença significativa entre eles para todas as matrizes (considerando mesmo métodode cálculo); com relação ao método de cálculo observou-se diferenças estatisticamente significativas paraas amostras de café e cappuccino. Os resultados mostram que é necessária a utilização de um padrãointerno para determinação quantitativa dos ácidos graxos nos alimentos e que estudos mais abrangentesdevem feitos para verificar a aplicação dos fatores teóricos nos cál

A partial digestion method of raw bean (Phaseolus vulgaris) by acid hydrolysis for simultaneously determining inorganic nutrients by means of ICP OES: validation and application / Método de digestão parcial de feijão cru (Phaseolus vulgaris) por hidrólise ácida para a determinação simultânea de nutrientes inorgânicos por ICP OES: validação e aplicação

In this investigation a wet digestion technique (HCl hydrolysis) of raw bean (Phaseolus vulgaris) was validated in order to perform the simultaneous determination of inorganic nutrients Ca, Cu, Fe, K, Mg, Mn, Na, P, and Zn by means of inductively coupled argon plasma optical emission spectrometry (ICPOES). This simple, relatively rapid, and with satisfactory performance characteristics technique was employed for analyzing 40 raw bean marketed in São Paulo state (Brazil). After determining inorganic nutrients by emission spectrometry, the obtained concentrations of Ca, Cu, Fe, K, Mg, Mn, Na, P, and Zn contents (in mg/100g bean) were 120±20; 0.8±0.1; 6.0±0.9; 1370±80; 170±10; 1.5±0.4; 1.4±0.4; 350±50; and 2.6±0.3, respectively. These inorganic nutrients contents are in agreement with the information from six food composition tables, except of Na that showed a significantly lower value. The results were also used to estimate the bean consumption contribution in Recommended Daily Intakes (RDI) for the investigated nutrients, and it was noted that bean can significantly contribute in Cu, Mg, Mn, P, Fe, and Zn RDIs.

Neste trabalho foi validada a técnica de digestão por via úmida (hidrólise com HCl) de feijão (Phaseolus vulgaris), para efetuar a determinação simultânea dos nutrientes inorgânicos Ca, Cu, Fe, K, Mg, Mn, Na, P e Zn, por espectrometria de emissão óptica com plasma de argônio indutivamente acoplado (ICPOES). Essa técnica simples, relativamente rápida e com características satisfatórias de desempenho, foi utilizada na preparação de 40 amostras de feijão cru comercializadas no estado de São Paulo, Brasil. Após a determinação das concentrações dos nutrientes inorgânicos por ICP OES, os teores obtidos (emmg/100g de feijão) de Ca, Cu, Fe, K, Mg, Mn, Na, P e Zn foram, respectivamente, de 120±20; 0,8±0,1; 6,0±0,9; 1370±80; 170±10; 1,5±0,4; 1,4±0,4; 350±50; 2,6±0,3. Esses teores mostraram-se satisfatoriamente concordantes com as informações de seis tabelas de composição de alimentos, com a exceção do teor de sódio que apresentou-se significativamente menor. Os resultados também foram usados para estimar a contribuição do consumo de feijão na Ingestão Diária Recomendada (IDR) dos nutrientes investigados, constatando-se que o feijão pode contribuir significativamente principalmente nas IDRs do Cu, Mg, Mn, P e Fe.

Detection of gluten in foods by means of ELISA / Detecção de glúten em alimentos por meio de ELISA

Celiac disease is characterized by intolerance or hypersensitivity to ingested prolamins, which are composites of wheat, rye, barley and oats. Gluten proteins of wheat are constituted of approximately 50% of prolamins named gliadins. The treatment for celiac disease is a gluten - free diet. The Brazilian legislation determines that the industrialized food products must bring warning about the presence or absence of gluten in the respective labels. Two reference samples from interlaboratory study, and thirteen food products were analyzed for determining the gluten by means of commercially available immunoenzyme assay - ELISA sandwich format using monoclonal antibody anti- gliadin. The detection limit was of 10 ppm (mg/kg). Reference samples showed satisfactory results and good accuracy. Gluten was detected in analyzed food products in those the cited component was indicated in the respective labels. No gluten amount was detected in samples with indication of gluten absence, except in a sample. The used immunoenzyme assay discriminated non-toxic prolamins for patients with celiac disease, as in rice flour, corn, soy, manioc, potato, and sweet potato proteins, whose ingredients were indicated in the respective labels. The presented results evidence the performance and the practicability of ELISA for determining low levels of gluten in foods.

A doença celíaca é caracterizada pela intolerância ou hipersensibilidade à ingestão de prolaminas existentes no trigo, centeio, cevada e aveia. As proteínas do glúten do trigo são constituídas de aproximadamente 50% de prolaminas, denominadas gliadinas. O tratamento adotado para a doença celíaca é a dieta livre de glúten. A legislação brasileira determina que os produtos alimentícios industrializados devem apresentar a advertência da presença ou ausência de glúten na rotulagem. Duas amostras de referência estabelecidas em um estudo interlaboratorial e treze produtos alimentícios industrializados foram analisados para determinar a presença de glúten por meio de ensaio imunoenzimático comercial, ELISA técnica sanduíche, utilizando-se anticorpo monoclonal anti gliadina. O limite de detecção foi de 10 ppm (mg/kg). As amostras de referência revelaram resultados satisfatórios com boa exatidão. O glúten foi detectado nos produtos alimentícios que continham o referido componente declarado na rotulagem. O glúten não foi detectado nas amostras declaradas isentas de glúten, com exceção de uma amostra. O ensaio imunoenzimático utilizado discriminou as prolaminas não tóxicas apropriadas para os pacientes com doença celíaca, como os da farinha de arroz, milho, soja, mandioca, batata e batata doce, cujos ingredientes constavam nos dizeres de rotulagem. Os resultados apresentados evidenciam