Seroprevalence of Toxoplasma gondii, Neospora caninum, and Brucella abortus in sheep from Toledo, Paraná, Brazil / Soroprevalência de Toxoplasma gondii, Neospora caninum e Brucella abortus em ovinos de Toledo, Paraná, Brasil

Toxoplasmosis is a cosmopolitan disease caused by Toxoplasma gondii and is of great significance in animal production and public health, as evidenced by the two major outbreaks of the disease that occurred in Brazil at the cities of Santa Izabel do Ivai, Paraná and Santa Maria, Rio Grande do Suu. Neospora caninum is the etiological agent of neosporosis, and Brucella spp. causes brucellosis, two of the major causes of reproductive failure in ruminants, causing problems such as abortion, and are responsible for significant economic losses in Brazilian sheep farming. Considering the scarcity of data available on the subject in the study region, the objective of our study was to evaluate seroprevalence of antibodies against T. gondii, N. caninum, and B. abortus in sheep in the municipality of Toledo, Paraná, Brazil. From August 2017 to July 2018, 22 properties were visited, and 240 blood samples were collected from females and males of reproductive age. For detecting antibodies against T. gondii and N. caninum, an Indirect Immunofluorescence technique was utilized, using cutoff points ≥64 and ≥50, respectively. For detecting antibodies against B. abortus, screening was conducted with Acidified Buffered Antigen and verification of reagent samples using the Slow Agglutination and 2-Mercaptoethanol test. Of the analyzed samples, 27.08% (65/240) had antibodies against T. gondii, which were distributed in 81.82% (18/22) of the properties; for N. caninum, there was a prevalence of 15.41% (37/240), and over 68.18% (15/22) of the properties. For B. abortus test results, all samples were considered negative. Our study demonstrated that most properties had animals positive for the protozoa, of which, majorly T. gondii, could cause abortion problems, it being one of the major agents. These epidemiological data provide a basis for strategic programs to implement monitoring and control measures to avoid economic losses in sheep farming.

A toxoplasmose é uma doença cosmopolita, causada pelo Toxoplasma gondii, com grande importância no contexto de produção animal e saúde pública como evidenciado nos dois maiores surtos da doença que ocorreram nas cidades brasileiras de em Santa Izabel do Ivai-PR e Santa Maria-RS. Enquanto o Neospora caninum é o agente causador da neosporose e a Brucella spp. causadora da brucelose, duas das principais causas de falhas reprodutivas em ruminantes, ocasionando problemas como abortamento, e responsáveis por significativas perdas econômicas na ovinocultura brasileira. Considerando a escassez de dados disponíveis sobre o tema para a região estudada, o objetivo do presente estudo foi avaliar a soroprevalência de anticorpos contra T. gondii, N. caninum e B. abortus em ovinos do município de Toledo, Paraná, Brasil. Durante o período de agosto de 2017 a julho de 2018 foram visitadas 22 propriedades e coletadas 240 amostras de sangue de fêmeas e machos em idade reprodutiva. Para a detecção de anticorpos contra o T. gondii e N. caninum foi utilizada a técnica de Imunofluorescência Indireta empregando ponto de corte ≥64 e ≥50, respectivamente. Para a detecção de anticorpos contra B. abortus foi realizada a triagem com o Antígeno Acidificado Tamponado e confirmação das amostras reagentes com o teste de Soroaglutinação Lenta e do 2-Mercaptoetanol. Das amostras analisadas, 27,08% (65/240) apresentaram anticorpos contra o T. gondii, estes se encontravam distribuídas em 81,82% (18/22) das propriedades, para N. caninum observou-se uma prevalência de 15,41% (37/240), distribuídas em 68,18% (15/22) das propriedades. Quanto ao resultado dos testes da B. abortus todas as amostras foram consideradas negativas. O presente estudo mostrou que a grande maioria das propriedades apresentaram animais positivos para os protozoários, os quais, principalmente T. gondii, poderiam estar causando problemas de abortamentos. Estes dados epidemiológicos fornecem embasamento para programas estratégicos a fim de realizar medidas de monitoramento e controle, evitando perdas econômicas na ovinocultura.

Development of a qPCR to diagnose the genus Eimeria in bovines / Desenvolvimento de uma qPCR para o diagnóstico do gênero Eimeria em bovinos

Bovine coccidiosis is caused by protozoa of the genus Eimeria. These protozoa mainly affect young animals, causing a decrease in production and consequent economic losses. The routine diagnosis is made through morphological observation of the oocysts, which has several limitations. The objective of the present study was to develop a qPCR technique for the diagnose of Eimeria spp. in cattle. For this purpose, the 18S rRNA region of the DNA of these parasites was selected, since it is a region with low variability among the species. The qPCR was developed using the SYBR Green, resulting in a PCR with a high sensitivity, able to amplify samples containing only one oocyst of Eimeria spp. of bovines. The feasibility of using qPCR in the diagnosis of the Eimeria Genus is demonstrated in this study, once this technique shows to be less laborious and needs less skills for diagnostic training when compared to the technique conventionally used in theroutine (micromorphometry).

A coccidiose em bovinos é causada por protozoários do gênero Eimeria. Estes protozoários acometem principalmente animais jovens, causando diminuição de produção e consequente perdas econômicas. O diagnóstico de rotina é realizado através de observação morfológica dos oocistos, que possui várias limitações. O objetivo do presente trabalho foi desenvolver uma técnica de qPCR para diagnóstico de Eimeria spp. em bovinos. Para isto foi selecionada a região 18S rRNA do DNA destes parasitas, pois a mesma é uma região com pouca variabilidade entre as espécies. A qPCR foi desenvolvida com a utilização de SYBR Green, tendo como resultado uma PCR com uma alta sensibilidade, capaz de amplificar amostras contendo apenas um oocisto de Eimeria spp de bovinos. Demonstra-se nesse estudo a viabilidade na utilização da qPCR no diagnóstico do gênero Eimeria, sendo esta técnica menos laboriosa e com menos necessidade de treinamento para diagnóstico quando comparada com a técnica convencionalmente utilizada em rotina (micromorfometria).

Development of a qPCR to diagnose the genus Eimeria in bovines / Desenvolvimento de uma qPCR para o diagnóstico do gênero Eimeria em bovinos

Bovine coccidiosis is caused by protozoa of the genus Eimeria. These protozoa mainly affect young animals, causing a decrease in production and consequent economic losses. The routine diagnosis is made through morphological observation of the oocysts, which has several limitations. The objective of the present study was to develop a qPCR technique for the diagnose of Eimeria spp. in cattle. For this purpose, the 18S rRNA region of the DNA of these parasites was selected, since it is a region with low variability among the species. The qPCR was developed using the SYBR Green, resulting in a PCR with a high sensitivity, able to amplify samples containing only one oocyst of Eimeria spp. of bovines. The feasibility of using qPCR in the diagnosis of the Eimeria Genus is demonstrated in this study, once this technique shows to be less laborious and needs less skills for diagnostic training when compared to the technique conventionally used in theroutine (micromorphometry).(AU)

A coccidiose em bovinos é causada por protozoários do gênero Eimeria. Estes protozoários acometem principalmente animais jovens, causando diminuição de produção e consequente perdas econômicas. O diagnóstico de rotina é realizado através de observação morfológica dos oocistos, que possui várias limitações. O objetivo do presente trabalho foi desenvolver uma técnica de qPCR para diagnóstico de Eimeria spp. em bovinos. Para isto foi selecionada a região 18S rRNA do DNA destes parasitas, pois a mesma é uma região com pouca variabilidade entre as espécies. A qPCR foi desenvolvida com a utilização de SYBR Green, tendo como resultado uma PCR com uma alta sensibilidade, capaz de amplificar amostras contendo apenas um oocisto de Eimeria spp de bovinos. Demonstra-se nesse estudo a viabilidade na utilização da qPCR no diagnóstico do gênero Eimeria, sendo esta técnica menos laboriosa e com menos necessidade de treinamento para diagnóstico quando comparada com a técnica convencionalmente utilizada em rotina (micromorfometria).(AU)

Protection against Toxoplasma gondii cysts in pigs immunized with rROP2 plus Iscomatrix / Proteção contra cistos de Toxoplasma gondii em suínos imunizados com rROP2 associado à Iscomatrix

This study aimed to evaluate the humoral immune response in pigs immunized intranasally and intramuscularly with recombinant Toxoplasma gondii rROP2 protein in combination with the adjuvant Iscomatrix. Twelve mixed breed pigs divided into three groups (n=4) were used, G1 received recombinant ROP2 proteins (200 µg/dose) plus Iscomatrix, G2 received PBS plus Iscomatrix, and G3 as the control group. The intranasal (IN) and intramuscular (IM) routes were used. Animals were challenged orally with VEG strain oocysts and treated on day three after challenge. Fever, anorexia, and prostration were the clinical signs observed in all animals. All the G1 animals produced antibodies above the cut-off on the day of the challenge, while the G2 and G3 remained below the cut-off. Better partial protection against parasitemia and cyst tissue formation was observed in G1 than G3. The protection factors against tissue cyst formation were 40.0% and 6.1% for G1 and G2, respectively, compared to G3. In conclusion, there were not systemic antibody responses in pigs with IN immunization with rROP2+Iscomatrix; however, after IM immunization, those animals produced higher titers than animal controls. We associated these results with partial protection obtained against parasitemia and tissue cysts formation.(AU)

O objetivo deste estudo foi avaliar a resposta imune humoral em suínos imunizados pelas vias intranasal e intramuscular com proteínas recombinantes rROP2 do Toxoplasma gondii associadas ao adjuvante Iscomatrix. Doze suínos cruzados divididos em 3 grupos (n=4) foram utilizados. O G1 recebeu proteína recombinante ROP2 (200mg/dose) associada ao adjuvante Iscomatrix; o G2 recebeu PBS associado ao Iscomatrix; e o G3 foi o grupo controle. As vias intranasal (IN) e intramuscular (IM) foram utilizadas. Os animais foram desafiados por via oral com a cepa VEG e tratados no dia três após o desafio. Febre, anorexia e prostração foram os sinais clínicos observados em todos os animais. Todos os animais do G1 produziram anticorpos acima do ponto de corte no dia do desafio, enquanto os animais do G2 e G3 permaneceram abaixo do ponto de corte no desafio. Proteção parcial contra parasitemia e formação de cistos teciduais foram observadas nos suínos do G1 comparados ao G3. Os fatores de proteção contra a formação de cistos teciduais foram 40,0% e 6,1% no G1 e G2, respectivamente, comparados com o G3. Como conclusão, não houve estimulação da resposta imune humoral sistêmica nos suínos após as imunizações IN com rROP2+Iscomatrix. Estes animais, porém, após a imunização IM, produziram títulos de anticorpos mais altos que os animais controles. Esses resultados foram associados a uma proteção parcial contra a parasitemia e formação de cistos teciduais.(AU)

Neospora caninum and Toxoplasma gondii: seroprevalence and associated factors in cows from milk farms of Toledo, Parana, Brazil / Neospora caninum e Toxoplasma gondii: soroprevalência e fatores associados em vacas leiteiras de Toledo, Paraná, Brasil

Neospora caninum and Toxoplasma gondii are important protozoa in cattle production. Neosporosis is responsible for reproductive failures in cattle, constituting one of the main causes of abortion and leading to significant economic losses in dairy farming. Toxoplasmosis is a cosmopolitan disease of great importance in the context of public health and animal production. Considering the lack of available data on the subject for the studied region, the objective of the present study was to detect the seroprevalence of antibodies against N. caninum and T. gondii in dairy cows in the municipality of Toledo, Western Paraná, Brazil and to assess how to detect factors associated with risk or protection. Serology was performed with serum samples from 390 dairy cows from 58 farms by indirect immunofluorescence (IFI) reaction using cutoff point 100 for N. caninum and 64 for T. gondii. The analysis of associations between seropositivity and the variables detected in the properties was also performed. The seroprevalence for Neospora caninum was 15.4% (60/390; CI 95% 12.4-19.3) and for Toxoplasma gondii was 38.7% (151/390; CI 95% 34.0-43.6). The prevalence of co-infection was 8.72% (34/390; CI 95% 6.31-11.94). For N. caninum, the presence of abortion was observed as a risk factor (OR= 5.32). With T. gondii, the presence of abortion was found to be a risk factor (OR= 2.09) and properties with 10 or more lactating animals was found to be a protection factor (OR= 0.56). Abortion was also detected as a factor associated with the risk of co-infection (OR= 11.80). Through serological diagnosis, the present study showed that protozoa are widely distributed among dairy cattle in the region, and control and prophylaxis measures should be adopted in the studied animal population. Because abortion is a risk associated with N. caninum, T. gondii, and the two agents surveyed (co-infection), all reproductive disorders detected in cattle should include neosporosis and toxoplasmosis as a differential diagnosis.(AU)

Neospora caninum e Toxoplasma gondii são protozoários importantes na cadeia produtiva dos bovinos. A neosporose é responsável por falhas reprodutivas nesta espécie, constituindo uma das principais causas de abortamento, levando a significativas perdas econômicas na pecuária leiteira. A toxoplasmose é uma doença cosmopolita, com grande importância no contexto de saúde pública e produção animal. Considerando a escassez de dados disponíveis sobre o tema para a região estudada, o objetivo do presente estudo foi detectar a soroprevalência de anticorpos contra N. caninum e T. gondii em fêmeas de bovinos leiteiros no município de Toledo, Oeste do Paraná, Brasil, bem como detectar os fatores associados ao risco ou proteção. A sorologia foi realizada com amostras de soro de 390 fêmeas bovinas leiteiras provenientes de 58 propriedades rurais, pela reação de Imunofluorescência Indireta (IFI) utilizando ponto de corte 100 para o N. caninum e 64 para o T. gondii. Também foi procedida as análises das associações entre a soropositividade e as variáveis detectadas nas propriedades. A soroprevalência encontrada para o Neospora caninum foi de 15,4% (60/390; IC 95% 12,4-19,3) e para o Toxoplasma gondii foi de 38,7% (151/390; IC 95% 34,0-43,6), sendo que a co-infecção detectada foi de 8,72% (34/390; IC 95% 6,31-11,94). Para o N. caninum foi observado como fator associado ao risco a presença de aborto (OR= 5,32). Já para o T. gondii, como fatores associados ao risco, foi encontrado a presença de aborto (OR= 2,09) e como fator associado à proteção, foi detectado propriedades com 10 ou mais animais em lactação (OR= 0,56). O aborto foi também detectado como um fator associado ao risco da co-infecção (OR= 11,80). Através do diagnóstico sorológico o presente estudo evidenciou que os protozoários estão amplamente distribuídos entre os bovinos leiteiros da região e medidas de controle e profilaxia devem ser adotadas na população animal estudada. Devido ao aborto ser uma associação de risco para o N. caninum, para o T. gondii e para os dois agentes pesquisados (co-infecção), todas as desordens reprodutivas detectadas em bovinos devem incluir a neosporose e a toxoplasmose como diagnóstico diferencial.(AU)

Mieloencefalite equina por protozoario (MEP): revisão de literatura / Equine protozoal myeloencephalitis (EPM): literature review

A mieloencefalite protozoária equina (MEP) é uma doença infecciosa causada principalmente pelo protozoário Sarcocystis neurona que produz disfunção neurológica no cérebro e na medula, porém pode ser causada também pelo Neospora caninum e Neospora huguesi. O equino é o hospedeiro acidental e o vetor do protozoário é o gambá (hospedeiros definitivos). Um exame é o teste imunológico do líquor, que proporciona um diagnóstico preciso. No tratamento é utilizado coccidioestatico, antiinflamatório, vitaminas e analgésicos, e evitar que o hospedeiro definitivo tenha acesso aos alimentos dos equinos. O objetivo do presente trabalho foi desenvolver uma revisão de literatura sobre mieloencefalite protozoária equina.(AU)

Equine protozoal myeloencephalitis (EPM) is an infectious disease caused mainly by the protozoan Sarcocystis neuron that produces neurological dysfunction in the brain and marrow, but can also be caused by Neospora caninum and Neospora huguesi. The equine is the accidental host and the vector of the protozoan is the opossum (definitive hosts). An examination is the CSF test, which provides an accurate diagnosis. In the treatment coccidiostatic, anti-inflammatory, vitamins and analgesics are used, and to avoid that the definitive host has access to the food of the horses. The objective of the present work was to develop a literature review on equine protozoal myeloencephalitis.(AU)

Neospora caninum: seroepidemiology of cows and dogs from milk farms of Cunha, São Paulo, Brazil / Neospora caninum: soroepidemiologia de vacas e cães de propriedades leiteiras de Cunha, São Paulo, Brasil

Neosporosis, a parasitic disease prevalent worldwide, is caused by the protozoan Neospora caninum, an obligatory intracellular parasite that can cause abortions and infertility in females, resulting in high economic losses. The aim of this study was to determine the seroprevalence of antibodies against N. caninum in dairy cattle, and the occurrence of antibodies in dogs from farms in the municipality of Cunha, São Paulo, Brazil. Additionally, eighteen months after the primary study, an analysis to determine the incidence, seroconversion, and occurrence of anti-N. caninum antibodies was conducted in cows. Sampling was carried out in two phases: during the first one, 400 dairy cattle and 50 dog blood samples from 40 farms were collected. During the second phase, blood samples were collected from 119 cows belonging to 16 farms visited 18 months before. Serum samples were analyzed by indirect immunofluorescence (IFI) with titers ≥ 100 for cattle and ≥ 50 for dogs considered as positives. The occurrence of antibodies against N. caninum was 15.0% (60/400) and 14.0% (7/50) for cattle and dogs, respectively. After 18 months, the observed incidence of antibodies was 7.4% (4/54), the conversion detected was 71.4% (seropositive to seronegative) and 7.4% (seronegative to seropositive animals), and the observed occurrence was 7.56% (9/119). The calculated odds ratio (OR) was significant (p < 0.05) for abortions, presence of dogs, and parturition stalls. However, protection factors were identified in 2- to 4-year-old dairy cattle and in the number of lactating cows ≤ 10 animals. Thus, the presence of antibodies against N. caninum in the studied suggested both vertical and horizontal transmission are occurring in cattle.

A neosporose é uma doença parasitária de distribuição mundial, cujo agente etiológico é o protozoário intracelular obrigatório Neospora caninum, o qual pode causar abortamentos e infertilidade em fêmeas, promovendo elevados prejuízos econômicos. O objetivo deste estudo foi determinar a soroprevalência de anticorpos contra N. caninum em bovinos de leite e a ocorrência de anticorpos em cães destas propriedades do município de Cunha, São Paulo, Brasil. Como segunda etapa, 18 meses após o primeiro estudo, foi conduzido outro estudo em vacas para determinar da incidência, soroconversão e ocorrência de anti-N. caninum. As colheitas foram realizadas em duas fases. Na primeira, participaram do estudo 400 bovinos de leite e 50 cães pertencentes a 40 propriedades rurais. Na segunda fase, foram efetuadas novas colheitas em 119 vacas de 16 propriedades já anteriormente visitadas na fase 1. Amostras de soro foram analisadas por imunofluorescência indireta (IFI) com títulos ≥100 para bovinos e ≥50 para cães foram considerados positivos. A ocorrência de anticorpos contra N. caninum foi de 15,0% (60/400) e 14,0% (7/50) para bovinos e cães respectivamente. Após 18 meses a incidência de anticorpos observada foi de 7,4% (4/54), a conversão detectada foi de 71,4% (animais soropositivos para soronegativos) e 7,4% (animais soronegativos para soropositivos) e a ocorrência observada foi de 7,56% (9/119). O “odds ratio” (OR) calculado revelou significância estatística (p < 0,05) para os seguintes fatores; abortamentos, propriedades com cães, e piquetes de parição. No entanto, fatores associados a proteção da positividade foram identificados entre; vacas entre 2 a 4 anos de idade, e o número de vacas em lactação ≤10 animais. Neste trabalho foi revelada a presença do N. caninum circulando na região estudada, sugerindo o papel de fêmeas bovinas e cães como transmissores do agente etiológico...

Neospora caninum: seroepidemiology of cows and dogs from milk farms of Cunha, São Paulo, Brazil / Neospora caninum: soroepidemiologia de vacas e cães de propriedades leiteiras de Cunha, São Paulo, Brasil

Neosporosis, a parasitic disease prevalent worldwide, is caused by the protozoan Neospora caninum, an obligatory intracellular parasite that can cause abortions and infertility in females, resulting in high economic losses. The aim of this study was to determine the seroprevalence of antibodies against N. caninum in dairy cattle, and the occurrence of antibodies in dogs from farms in the municipality of Cunha, São Paulo, Brazil. Additionally, eighteen months after the primary study, an analysis to determine the incidence, seroconversion, and occurrence of anti-N. caninum antibodies was conducted in cows. Sampling was carried out in two phases: during the first one, 400 dairy cattle and 50 dog blood samples from 40 farms were collected. During the second phase, blood samples were collected from 119 cows belonging to 16 farms visited 18 months before. Serum samples were analyzed by indirect immunofluorescence (IFI) with titers ≥ 100 for cattle and ≥ 50 for dogs considered as positives. The occurrence of antibodies against N. caninum was 15.0% (60/400) and 14.0% (7/50) for cattle and dogs, respectively. After 18 months, the observed incidence of antibodies was 7.4% (4/54), the conversion detected was 71.4% (seropositive to seronegative) and 7.4% (seronegative to seropositive animals), and the observed occurrence was 7.56% (9/119). The calculated odds ratio (OR) was significant (p < 0.05) for abortions, presence of dogs, and parturition stalls. However, protection factors were identified in 2- to 4-year-old dairy cattle and in the number of lactating cows ≤ 10 animals. Thus, the presence of antibodies against N. caninum in the studied suggested both vertical and horizontal transmission are occurring in cattle.(AU)

A neosporose é uma doença parasitária de distribuição mundial, cujo agente etiológico é o protozoário intracelular obrigatório Neospora caninum, o qual pode causar abortamentos e infertilidade em fêmeas, promovendo elevados prejuízos econômicos. O objetivo deste estudo foi determinar a soroprevalência de anticorpos contra N. caninum em bovinos de leite e a ocorrência de anticorpos em cães destas propriedades do município de Cunha, São Paulo, Brasil. Como segunda etapa, 18 meses após o primeiro estudo, foi conduzido outro estudo em vacas para determinar da incidência, soroconversão e ocorrência de anti-N. caninum. As colheitas foram realizadas em duas fases. Na primeira, participaram do estudo 400 bovinos de leite e 50 cães pertencentes a 40 propriedades rurais. Na segunda fase, foram efetuadas novas colheitas em 119 vacas de 16 propriedades já anteriormente visitadas na fase 1. Amostras de soro foram analisadas por imunofluorescência indireta (IFI) com títulos ≥100 para bovinos e ≥50 para cães foram considerados positivos. A ocorrência de anticorpos contra N. caninum foi de 15,0% (60/400) e 14,0% (7/50) para bovinos e cães respectivamente. Após 18 meses a incidência de anticorpos observada foi de 7,4% (4/54), a conversão detectada foi de 71,4% (animais soropositivos para soronegativos) e 7,4% (animais soronegativos para soropositivos) e a ocorrência observada foi de 7,56% (9/119). O “odds ratio” (OR) calculado revelou significância estatística (p < 0,05) para os seguintes fatores; abortamentos, propriedades com cães, e piquetes de parição. No entanto, fatores associados a proteção da positividade foram identificados entre; vacas entre 2 a 4 anos de idade, e o número de vacas em lactação ≤10 animais. Neste trabalho foi revelada a presença do N. caninum circulando na região estudada, sugerindo o papel de fêmeas bovinas e cães como transmissores do agente etiológico...(AU)

Mieloencefalite equina por protozoario (MEP): revisão de literatura / Equine protozoal myeloencephalitis (EPM): literature review

A mieloencefalite protozoária equina (MEP) é uma doença infecciosa causada principalmente pelo protozoário Sarcocystis neurona que produz disfunção neurológica no cérebro e na medula, porém pode ser causada também pelo Neospora caninum e Neospora huguesi. O equino é o hospedeiro acidental e o vetor do protozoário é o gambá (hospedeiros definitivos). Um exame é o teste imunológico do líquor, que proporciona um diagnóstico preciso. No tratamento é utilizado coccidioestatico, antiinflamatório, vitaminas e analgésicos, e evitar que o hospedeiro definitivo tenha acesso aos alimentos dos equinos. O objetivo do presente trabalho foi desenvolver uma revisão de literatura sobre mieloencefalite protozoária equina.

Equine protozoal myeloencephalitis (EPM) is an infectious disease caused mainly by the protozoan Sarcocystis neuron that produces neurological dysfunction in the brain and marrow, but can also be caused by Neospora caninum and Neospora huguesi. The equine is the accidental host and the vector of the protozoan is the opossum (definitive hosts). An examination is the CSF test, which provides an accurate diagnosis. In the treatment coccidiostatic, anti-inflammatory, vitamins and analgesics are used, and to avoid that the definitive host has access to the food of the horses. The objective of the present work was to develop a literature review on equine protozoal myeloencephalitis.

rROP2 from Toxoplasma gondii as a potential vaccine against oocyst shedding in domestic cats / rROP2 de Toxoplasma gondii como potencial vacina contra a eliminação de oocistos em gatos domésticos

The aim of the present study was to evaluate oocyst shedding in cats immunized by nasal route with T. gondiiproteins ROP2. Twelve short hair cats (Felis catus) were divided in three groups G1, G2 and G3 (n=4). Animals from G1 received 100 μg of rROP2 proteins plus 20 μg of Quil-A, G2 received 100 μg of BSA plus 20 μg of Quil-A, and the G3 only saline solution (control group). All treatments were done by intranasal route at days 0, 21, 42, and 63. The challenge was performed in all groups on day 70 with ≅ 800 tissue cysts of ME-49 strain by oral route. Animals from G1 shed less oocysts (86.7%) than control groups. ELISA was used to detect anti-rROP2 IgG and IgA, however, there were no correlation between number of oocyst shedding by either IgG or IgA antibody levels. In the present work, in spite of lesser oocysts production in immunized group than control groups, it was not possible to associate the use of rROP2 via nostrils with protection against oocyst shedding. For the future, the use of either other recombinant proteins or DNA vaccine, in combination with rROP2 could be tested to try improving the efficacy of this kind of vaccine. (AU)

O objetivo do presente estudo foi avaliar a eliminação de oocistos de Toxoplasma gondii em gatos imunizados pela via nasal com proteínas ROP2 de T. gondii. Doze gatos sem raça definida (Felis catus) foram divididos em três grupos experimentais G1, G2 e G3 (n = 4). Os animais do G1 receberam 100 μg de proteínas de rROP2 mais 20 μg de Quil-A, G2 recebeu 100 μg de albumina de soro bovino (BSA) junto com 20 μg de Quil-A, e o G3 recebeu apenas solução salina (grupo de controle). Todos os tratamentos foram realizados pela via intranasal nos dias 0, 21, 42 e 63. O desafio foi realizado em todos os grupos no dia 70 com aproximadamente 800 cistos de tecido da cepa ME-49 por via oral. Os animais de todos os grupos tiveram as suas fezes examinadas e o número de oocistos foi determinado durante 20 dias após o desafio. Os animais de G1 eliminaram menos oocistos (86,7%) do que os grupos controles. O ELISA foi utilizado para detectar IgG e IgA anti-rROP2, no entanto, não houve correlação entre o número de eliminhação de oocistos com os níveis de anticorpos IgG ou IgA. No presente trabalho, apesar da menor produção de oocistos no grupo imunizado (G1) em relação aos grupos controles (G2 e G3), não foi possível associar o uso de rROP2 pela via nasal com proteção contra eliminação de oocistos de T. gondii. Para o futuro, a utilização de outras proteínas recombinantes, ou mesmo vacina de DNA, em combinação com rROP2 poderia ser utilizada para tentar melhorar a eficácia deste tipo de vacina.(AU)

Presence of antibodies against Leishmania spp. in domestic dogs from Toledo, Paraná, Brazil / Ocorrência de anticorpos anti-Leishmania spp. em cães domiciliados da região de Toledo, Paraná, Brasil

Leishmaniases are a group of diseases caused by Leishmania protozoa affecting various vertebrate hosts, including humans and dogs. Dogs represent the most important domestic reservoir of leishmaniasis. For this reason, the aim of this study was to detect the presence of antibodies against Leishmania spp. in dogs being treated at the veterinary hospital of our institution. Samples were obtained from 175 animals by jugular or cephalic venipuncture, and serum was subsequently separated. Anti-Leishmania spp. IgG antibodies were detected in these specimens using indirect immunofluorescence. This revealed that of the 175 serum samples, those of four (2.28%) animals reacted positively and the antibodies title was 40. These data are consistent with the transmission of Leishmania spp. in the region, suggesting that dogs represent a reservoir of American cutaneous leishmaniasis. This is the first description of circulating antibodies against Leishmania spp. in the West region of Paraná State.

As leishmanioses são doenças causadas pelo protozoário Leishmania e acometem vários hospedeiros vertebrados, incluindo humanos e cães. Cães representam o reservatório doméstico mais importante da leishmaniose. O objetivo do presente trabalho foi detectar a presença de anticorpos contra Leishmania spp. em cães atendidos na rotina de animais de companhia do Hospital Veterinário desta instituição de ensino. Amostras de sangue de 175 animais foram obtidas por venopunção jugular ou cefálica com posterior obtenção dos soros. Estas amostras foram submetidas à reação de imunofluorescência indireta para detecção de anticorpos da classe IgG anti-Leishmania. A reação sorológica dos 175 soros realizados revelou quatro (2,28%) animais reagentes com título 40. Estes dados revelam a presença de espécies de Leishmania spp. circulando na região, sugerindo o papel de cães como reservatórios para leishmaniose cutânea americana. Esta é a primeira descrição da circulação de anticorpos contra Leishmania spp. na região Oeste do Paraná.

Presence of antibodies against Leishmania spp. in domestic dogs from Toledo, Paraná, Brazil / Ocorrência de anticorpos anti-Leishmania spp. em cães domiciliados da região de Toledo, Paraná, Brasil

Leishmaniases are a group of diseases caused by Leishmania protozoa affecting various vertebrate hosts, including humans and dogs. Dogs represent the most important domestic reservoir of leishmaniasis. For this reason, the aim of this study was to detect the presence of antibodies against Leishmania spp. in dogs being treated at the veterinary hospital of our institution. Samples were obtained from 175 animals by jugular or cephalic venipuncture, and serum was subsequently separated. Anti-Leishmania spp. IgG antibodies were detected in these specimens using indirect immunofluorescence. This revealed that of the 175 serum samples, those of four (2.28%) animals reacted positively and the antibodies title was 40. These data are consistent with the transmission of Leishmania spp. in the region, suggesting that dogs represent a reservoir of American cutaneous leishmaniasis. This is the first description of circulating antibodies against Leishmania spp. in the West region of Paraná State.(AU)

As leishmanioses são doenças causadas pelo protozoário Leishmania e acometem vários hospedeiros vertebrados, incluindo humanos e cães. Cães representam o reservatório doméstico mais importante da leishmaniose. O objetivo do presente trabalho foi detectar a presença de anticorpos contra Leishmania spp. em cães atendidos na rotina de animais de companhia do Hospital Veterinário desta instituição de ensino. Amostras de sangue de 175 animais foram obtidas por venopunção jugular ou cefálica com posterior obtenção dos soros. Estas amostras foram submetidas à reação de imunofluorescência indireta para detecção de anticorpos da classe IgG anti-Leishmania. A reação sorológica dos 175 soros realizados revelou quatro (2,28%) animais reagentes com título 40. Estes dados revelam a presença de espécies de Leishmania spp. circulando na região, sugerindo o papel de cães como reservatórios para leishmaniose cutânea americana. Esta é a primeira descrição da circulação de anticorpos contra Leishmania spp. na região Oeste do Paraná.(AU)

Inquérito soroepidemiológico sobre Neospora caninum em rebanhos leiteiros de Parauapebas, Estado do Pará / Serological survey of Neospora caninum in dairy herds from Parauapebas, State of Pará

Neospora caninum é um protozoário coccídio de difusão mundial que causa prejuízos econômicos no criatório. Para levantar a frequência de anticorpos anti-N. caninum em rebanhos leiteiros no município de Parauapebas, Região Sudeste do Estado do Pará, 465 amostras de soros procedentes de 45 propriedades foram submetidas à reação de imunofluorescência indireta (ponto de corte 1:100). Foi determinada a frequência de 13,33% de anticorpos anti-N. caninum com a seguinte distribuição de títulos: 27(43,55 %) no título 100; 14 (22,58 %) no 200; 16 (25,80%) no 400 e 5 (8,07 %) no 800, nenhum soro com título >800 e pelo menos um animal positivo na maioria das propriedades. A maior frequência ocorreu entre as fêmeas, sem diferença significativa na frequência entre os sexos (Teste exato de Fisher=0,59, P=0,99); animais de dois anos apresentaram a maior frequência, embora seu número fosse menor que os de idade >5 anos, sem diferença significativa na frequência entre faixas etárias ((?2=2,1, p=0,71); não foi observada diferença significativa entre frequência e ocorrência de aborto (?2=2,3, p=0,13) e frequência e presença de cães nas propriedades (?2=0,26, p=0,60). Ações de vigilância sanitária são recomendadas para prevenir a entrada de novas fontes de N. caninum e controlar sua difusão nos rebanhos.(AU)

Neospora caninum is a coccidian protozoan that affects cattle worldwide causing economic losses. To survey the frequency of anti-N. caninum antibodies in dairy herds in the municipality of Parauapebas, Southeast of Pará, samples of 465 sera from 45 farms were subjected to indirect immunofluorescence assay (cutoff 1:100). Anti-N. caninum antibodies were found with a frequency of 13,33% with the following titer distribution: 27 (43,55%) for titer 100; 14 (22,58%) for 200; 16 (25,80%) for 400, and 5 (8,07%) for 800; no serum titers more than 800 was noted, but at least one positive animal was present in most farms. The highest frequency occurred among females, with no significant difference in frequency between the sexes (Fisher exact test = 0,59, P = 0,99); 2-year-old animals had the highest frequency, although their numbers were lesser than those aged >5 years, with no significant difference in frequency between the age groups (?2 = 2,1, P = 0,71). No significant difference was observed between the frequency and occurrence of abortion (?2 = 2,3, P = 0,13) and frequency and presence of dogs in the farms (?2 = 0,26, P = 0,60). Actions toward health monitoring are recommended to prevent the entry of new sources of N. caninum and to control its spread within herds.(AU)

Genetic characterization of Toxoplasma gondii isolates from eared doves (Zenaida auriculata) in Brazil / Caracterização genética de isolados de Toxoplasma gondii de pombos (Zenaida auriculata) no Brasil

Eared doves (Zenaida auriculata), which are common in urban, rural and wild areas in many regions of Brazil, are frequently prey for domestic cats. Therefore Toxoplasma gondii isolates obtained from doves may reflect greater environmental diversity than those from other hosts. The aim of the present study was to evaluate T. gondii seroprevalence, isolate and genotype strains from Z. auriculata. Serum and tissue samples were collected from 206 doves for use in the modified agglutination test (MAT) and mouse bioassay. The prevalence of T. gondii antibodies in the doves was 22.3% (46/206), with titers ranging from 16 to 4096, and T. gondii strains were isolated from 12 of these doves. Five genotypes were detected by means of PCR-RFLP, including ToxoDB genotypes #1, #6, #17 and #65, and one genotype that had not previously been described (ToxoDB#182). This was the first report on isolation of T. gondii from Z. auriculata. This study confirmed the genetic diversity of T. gondii isolates and the existence of clonal type II (ToxoDB genotype #1) in Brazil.

Pombos silvestres (Zenaida auriculata), comuns em áreas urbanas, rurais e selvagens em muitas regiões do Brasil, são frequentemente predados por gatos domésticos. Sendo assim, os isolados de T. gondii obtidos de pombos podem refletir uma maior diversidade ambiental do que os outros hospedeiros. O objetivo do presente estudo foi avaliar a soroprevalência, isolar e genotipar T. gondii de Z. auriculata. Amostras de soro e tecido foram coletadas de 206 pombos para o teste de aglutinação modificado (MAT) e o bioensaio em camundongos. A prevalência de anticorpos contra T. gondii em pombos foi 22,3% (46/206), com títulos variando de 16 a 4096, e T. gondii foi isolado de 12 pombos. Cinco genótipos foram detectados por PCR-RFLP, incluindo os genótipos ToxoDB #1, #6, #17, #65 e um genótipo não descrito anteriormente (ToxoDB#182). Esse é o primeiro relato de isolamento de T. gondii de Z. auriculata. Este estudo também confirmou a diversidade dos isolados de T. gondii e a presença de tipo clonal II (ToxoDB #1) no Brasil.

Diagnosis and isolation of Toxoplasma gondii in horses from brazilian slaughterhouses / Diagnóstico e isolamento de Toxoplasma gondii em equídeos de frigoríficos brasileiros

This study aimed to investigate anti-Toxoplasma gondii antibodies and to isolate the parasite from the brains of horses processed at slaughterhouses in Brazil. We collected brain and blood samples from 398 horses of various ages, from six Brazilian states. Serum samples were evaluated by indirect fluorescent antibody test (IFAT cut-off titre ≥ 1:64), and brains were submitted to mouse bioassay. Among the 398 horses, positivity for T. gondii was identified in 46 (11.6%) by IFAT and in 14 (3.5%) by mouse bioassay. In 12 of those 14 bioassays, mice were positive only by IFAT (cut-off titre ≥ 1:16), T. gondii being isolated in the remaining two. Using polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism (PCR-RFLP) analysis of 18S rDNA to differentiate among T. gondii, Neospora caninum, and Sarcocystis neurona, we found that two of the 14 brains were positive for T. gondii only. For genotyping of the two isolates and the PCR-positive brain, we performed PCR-RFLP based on 13 markers, and SAG2 all samples were Toxoplasma gondii type I. Collectively, IFAT of horse sera and mouse bioassay identified positivity in 60 (15%) of the samples. Our results show that some horses sent to slaughter in Brazil have been exposed toT. gondii.

O objetivo do estudo foi investigar anticorpos anti-Toxoplasma gondii e isolar o parasita do cérebro de equídeos abatidos em matadouros-frigoríficos no Brasil. Colheram-se amostras de 398 cérebros e sangue de equídeos machos e fêmeas de idades variadas, provenientes de seis estados brasileiros. As amostras de soro foram avaliadas pelo teste de imunofluorescência indireta (IFI) para T. gondii (ponto de corte ≥ 64), e os fragmentos de cérebros foram submetidos ao bioensaio em camundongos. Por meio da IFI, 46 (11,6%) equídeos foram soropositivos. Pelo bioensaio em camundongos, 14 (3,5%) cérebros de equídeos testados foram positivos. Em doze dos bioensaios, os camundongos foram positivos somente pela IFI (ponto de corte ≥ 16) e T. gondii foi isolado nos outros dois bioensaios. A PCR-RFLP com base em 18S rDNA para diferenciar entre T. gondii, Neospora caninum, e Sarcocystis neurona foram feitas em todos os 14 cérebros e dois foram positivos apenas para T. gondii. De dois isolados positivos para T. gondii e do cérebro positivo à PCR em que realizou-se a PCR-RFLP, com base em 13 marcadores e SAG2, a genotipagem mostrou ser o T. gondii tipo I para todas as amostras. A IFI de soros de equídeos e do bioensaio em camundongos identificaram positividade em 60 (15%) amostras testadas. Os resultados mostram que alguns cavalos enviados para abate foram expostos ao T. gondii.

Occurrence of gastrointestinal and renal helminths in Zenaida auriculata (Des Murs, 1847) trap-captured from Brazil / Ocorrência de helmintos gastrintestinais e renais em Zenaida auriculata (Des Murs, 1847) capturados no Brasil

This study aimed to determine the prevalence of gastrointestinal and renal helminths from naturally infected Zenaida auriculata captured in Londrina, Paraná State. Two hundred and one Eared doves were trapped and the gastrointestinal and renal helminths were collected and identified according to morphological structures. One hundred and sixteen (57.71%) doves were parasitized by helminths with specific prevalences for Ornithostrongylus quadriradiatus in 50 doves (24.88%), Ascaridia columbae in 47 (23.38%), Paratanaisia bragai and P. confusa in 34 (16.92%),Tetrameres fissispina in 17 (8.46%), Synhimantus nasuta in 14 (6.47%), Brachylaima mazzantii in 4 (1.99%) and Raillietina allomyodes in 2 doves (1.00%). Seventy four/201 (37.00%) birds were infected with only one species, and 96/201 (48.00%) pigeons were infected with nematodes. The association between different classes of helminths occurred in 40/201 (20.00%) animals. The results showed statistically differences between the presence of nematode (p = 0.00001) and trematode species (p ≤ 0.05) in the doves, and there was an association between the local of capture and the presence of trematodes and A. columbae (p ≤ 0.05). This study is the first to report the infection of Z. auriculata from Brazil with O. quadriradiatus, A. columbae, T. fissispina, S. nasuta, R. allomyodes, P. bragai and P. confusa.

O objetivo deste estudo foi determinar a prevalência de helmintos gastrintestinais e renais de Zenaida auriculata naturalmente infectados capturados em Londrina, Paraná. Duzentos e um pombos-de-bando foram capturados e os helmintos gastrintestinais e renais foram coletados e identificados de acordo com as estruturas morfológicas. Cento e dezesseis (57,71%) pombos estavam parasitados por helmintos com as seguintes prevalências: Ornithostrongylus quadriradiatus em 50 pombos (24,88%), seguido por Ascaridia columbae em 47 (23,38%), Paratanaisia bragai e P. confusa em 34 (16,92%), Tetrameres fissispina em 17 (8,46%), Synhimantus nasuta em 14 (6,47%), Brachylaima mazzantii em 4 (1,99%) e Raillietina allomyodes em 2 pombos (1,00%). Setenta e quatro/201 (37,00%) aves apresentaram-se infectadas por apenas uma espécie, e 96/201 (48,00%) pombos com nematodas. A associação entre diferentes classes de helmintos ocorreu em 40/201 (20,00%) animais. Os resultados mostraram diferenças estatísticas entre a presença de nematodas (p = 0,00001) e trematodas (p ≤ 0,05) em pombos, e houve associação entre o local de captura e a presença de trematodas e A. columbae (p ≤ 0,05). Este trabalho é o primeiro a relatar a infecção de Z. auriculata no Brasil com O. quadriradiatus, A. columbae, T. fissispina, S. nasuta, R. allomyodes, P. bragaie P. confusa.

Neospora caninum: evaluation of vertical transmission in slaughtered dairy cows (Bos taurus) / Neospora caninum: avaliação da transmissão vertical em vacas leiteiras (Bos taurus)

Neospora caninum is a worldwide parasite recognized as one of the main parasites responsible for abortion in cattle. The objective of this study was to evaluate vertical transmission of N. caninum in dairy cows (Bos taurus) that were slaughtered at an abattoir in the state of Santa Catarina, southern Brazil. Blood samples (with and without EDTA) from 60 pregnant dairy cows and blood and tissue samples (brain, lung, heart and liver) from their fetuses were collected and used for PCR and serological evaluation. Blood samples from 60 non-pregnant cows were collected and used to detect antibodies. Anti-N. caninum antibodies were detected by indirect ELISA. Antibodies against N. caninum were observed in 41.6% (25∕60) of the pregnant cows and in 43.3% (26∕60) of the non-pregnant cows. Antibodies against the parasite were detected in sera from three fetuses (5.5%). PCR analysis revealed that 3.3% (2∕60) of the cows and 6.6% (4∕60) of the fetuses evaluated were positive for specific N. caninum primers. These positive fetuses were between 4-6 months of age. Therefore, considering PCR and serological tests to be indicative of vertical transmission in fetuses, 11.6% (7∕60) of the fetuses were infected by N. caninum during gestation.

Neospora caninum é um parasita de distribuição mundial reconhecido como um dentre os principais parasitas, responsável por abortamento em bovinos. O objetivo deste estudo foi avaliar a transmissão vertical de N. caninum em vacas leiteiras (Bos taurus) que foram submetidas ao abate em matadouro no Estado de Santa Catarina, sul do Brasil. Sangue (com e sem EDTA) de 60 vacas leiteiras prenhas e amostras de sangue e tecidos (cérebro, pulmão, coração e fígado) de seus fetos foram coletados e utilizados para PCR e avaliação sorológica. Amostras de sangue de 60 vacas não-gestantes foram obtidas e utilizadas para detecção de anticorpos. A detecção de anticorpos séricos anti-N. caninum foi avaliada pelo ELISA-teste indireto. Anticorpos anti-N. caninum foram observados em 41,6% (25∕60) das vacas prenhas e em 43,3% (26∕60) das vacas não-gestantes. Três fetos (5,5%) foram soros positivos para N. caninum. Análise pela PCR revelou que 3,3% (2∕60) das vacas e 6,6% (4∕60) dos fetos avaliados foram positivos paraN. caninum. As idades dos fetos positivos eram de 4 a 6 meses. Portanto, considerando a PCR e a sorologia como indicativo de transmissão vertical em fetos, 11,6% (7∕60) dos fetos foram infectados por N. caninum durante a gestação.

Isolation and genotyping of Toxoplasma gondii from pregnant dairy cows (Bos taurus) slaughtered / Isolamento e genotipagem de Toxoplasma gondii em vacas de leite (Bos taurus) prenhas abatidas

The current study aimed to evaluate serology, and isolate and genotype Toxoplasma gondii strains from pregnant dairy cows, slaughtered in an abattoir for human consumption, and their fetuses. Blood from 60 pregnant dairy cows and blood and tissue samples (brain, lung, heart, and liver) from their fetuses were collected and analyzed in a mouse bioassay. Antibodies against T. gondii were observed in 48.3% of cows and 3.7% of fetuses (IFAT, titers ≥ 50 for cows and 25 for fetuses were considered positive). Fourteen fetuses (23.3%) and six cows (10.0%) were identified as positive in the bioassay. T. gondii was isolated from a blood sample of a cow older than 4 years old in the 6th month of pregnancy, and from a blood sample of a fetus in the 6th month of gestation. These isolates were identified by polymerase chain reaction (PCR) as being of T. gondii and both strains showed type II alleles for all PCR-restriction fragment length polymorphism (PCR-RFLP) markers tested. T. gondii type II strain from cattle was isolated for the first time in Brazil. The current study also showed that transplacental transmission of T. gondii naturally occurs in dairy cows (23.3%) from Southern Brazil.(AU)

O presente estudo teve como objetivo avaliar a ocorrência de anticorpos, isolar e genotipar Toxoplasma gondii de vacas prenhas abatidas em um matadouro para consumo humano e de seus respectivos fetos. Sangue de 60 vacas gestantes e amostras de sangue e tecidos (cérebro, pulmão, coração e fígado) de seus fetos foram coletados e utilizados para bioensaio em camundongos. Anticorpos contra T. gondii foram observados em 48,3% das vacas e em 3,7% dos fetos (foram considerados positivos títulos ≥50 para as vacas e ≥25 para os fetos). Quatorze fetos (23,3%) e seis vacas (10,0%) apresentaram-se positivas para T. gondii ao bioensaio. T. gondii foi isolado de amostra de sangue de uma vaca com mais de quatro anos no 6º mês de gestação e de amostra de sangue de um feto no 6º mês de gestação. Por PCR esses isolados foram identificados como sendo de T. gondii e ambas as cepas apresentaram o alelo tipo II em todos os marcadores de PCR-RFLP testados. Esta é a primeira identificação de genótipo tipo II de T. gondii em bovinos do Brasil. Além disso, este estudo mostrou que a transmissão transplacentária de T. gondii ocorre naturalmente em bovinos de leite (23,3%).(AU)

Toxoplasma gondii: humoral and cellular immune response of BALB/c mice immunized via intranasal route with rTgROP2 / Toxoplasma gondii: avaliação da resposta imune humoral e celular de camundongos BALB/c imunizados pela via nasal com rTgROP2

TgROP2 is an intracellular protein associated with rhoptries of Toxoplama gondii and an antigen component of a candidate vaccine for toxoplasmosis. he purpose of the present study was to evaluate the eficacy of rTgROP2 to stimulate humoral and cellular immune responses in BALB/c mice via intranasal injection. TgROP2 partial coding sequence was (196-561) amplified by PCR from genomic T. gondii RH strain DNA and cloned into the pTrcHis expression vector. Escherichia coli Rosetta 2 cells transformed with pTrcHis-TgROP2 showed high levels (1 mg.mL potentiation -1) of recombinant protein after 4 hours of IPTG induction. Recombinant TgROP2 exhibited an apparent Mr equal to 54 kDa. In order to test immunogenicity of the recombinant protein, 10 BALB/c mice received 10 µg of rROP2 protein + 10 µg of Quil-A via intranasal injection. Doses were administered at days 0, 21, and 42. Three animals were euthanized and used to evaluate cellular immune response on day 62. Five (50%) and two (20%) out of ten animals produced IgG (DO mean = 0.307; cut-of = 0.240) and IgA (DO mean = 0.133, cut-of = 0.101), respectively, by ELISA on day 62. he proliferation of splenocytes revealed high stimulation index (SI) when co-cultured with 5, 10 and 15 µg.mL potentiation -1 of rTgROP2. These results indicate that intranasal immunization with recombinant protein ROP2 plus Quil-A can elicit both cellular and humoral immune responses in BALB/c mice. (AU)

TgROP2 é uma proteína localizada nas roptrias do Toxoplasma gondii, sendo um antígeno candidato a componente de uma vacina contra a toxoplasmose. O objetivo do presente estudo foi avaliar a eficácia da TgROP2 recombinante em estimular a resposta imune celular e humoral de camundongos BALB/c após estímulo intranasal. A sequência da TgROP2 foi amplificada pela PCR a partir da cepa RH e clonada em vetor de expressão pTrc-His. Após a transformação em Escherichia coli- Rosetta 2, a pTrcHis-TgROP2 exibiu alto nível de expressão após 4 horas de indução com IPTG. A proteína recombinante apresentou uma massa molecular aparente de aproximadamente 54 kDa. Para avaliar a imunogenicidade dessa proteína recombinante, 10 camundongos receberam, pela via intranasal, 10 µg da rROP2 associado a 10 µg de Quil-A. Três doses foram realizadas nos dias 0, 21 e 42. No dia 62 do experimento, três animais foram eutanasiados para avaliar as respostas imune celular e humoral. Cinco (50%) e dois (20%) dos 10 animais apresentaram níveis de IgG (DO média = 0,307; ponto de corte = 0,240) e IgA (DO média = 0,133; ponto de corte = 0,101) acima do ponto de corte no ELISA no dia 62. A proliferação de esplenócitos revelou altos Índices de Estimulação (SI), quando as células foram cultivadas com 5, 10 e 15 µg.mL elevado a -1 de rTgROP2. Os resultados obtidos indicam que a via nasal pode estimular tanto a resposta imune celular como a humoral. (AU)

Inquérito soroepidemiológico sobre Neospora caninum em rebanhos leiteiros de Parauapebas, Estado do Pará / Serological survey of Neospora caninum in dairy herds from Parauapebas, State of Pará

Neospora caninum é um protozoário coccídio de difusão mundial que causa prejuízos econômicos no criatório. Para levantar a frequência de anticorpos anti-N. caninum em rebanhos leiteiros no município de Parauapebas, Região Sudeste do Estado do Pará, 465 amostras de soros procedentes de 45 propriedades foram submetidas à reação de imunofluorescência indireta (ponto de corte 1:100). Foi determinada a frequência de 13,33% de anticorpos anti-N. caninum com a seguinte distribuição de títulos: 27(43,55 %) no título 100; 14 (22,58 %) no 200; 16 (25,80%) no 400 e 5 (8,07 %) no 800, nenhum soro com título >800 e pelo menos um animal positivo na maioria das propriedades. A maior frequência ocorreu entre as fêmeas, sem diferença significativa na frequência entre os sexos (Teste exato de Fisher=0,59, P=0,99); animais de dois anos apresentaram a maior frequência, embora seu número fosse menor que os de idade >5 anos, sem diferença significativa na frequência entre faixas etárias ((?2=2,1, p=0,71); não foi observada diferença significativa entre frequência e ocorrência de aborto (?2=2,3, p=0,13) e frequência e presença de cães nas propriedades (?2=0,26, p=0,60). Ações de vigilância sanitária são recomendadas para prevenir a entrada de novas fontes de N. caninum e controlar sua difusão nos rebanhos.

Neospora caninum is a coccidian protozoan that affects cattle worldwide causing economic losses. To survey the frequency of anti-N. caninum antibodies in dairy herds in the municipality of Parauapebas, Southeast of Pará, samples of 465 sera from 45 farms were subjected to indirect immunofluorescence assay (cutoff 1:100). Anti-N. caninum antibodies were found with a frequency of 13,33% with the following titer distribution: 27 (43,55%) for titer 100; 14 (22,58%) for 200; 16 (25,80%) for 400, and 5 (8,07%) for 800; no serum titers more than 800 was noted, but at least one positive animal was present in most farms. The highest frequency occurred among females, with no significant difference in frequency between the sexes (Fisher exact test = 0,59, P = 0,99); 2-year-old animals had the highest frequency, although their numbers were lesser than those aged >5 years, with no significant difference in frequency between the age groups (?2 = 2,1, P = 0,71). No significant difference was observed between the frequency and occurrence of abortion (?2 = 2,3, P = 0,13) and frequency and presence of dogs in the farms (?2 = 0,26, P = 0,60). Actions toward health monitoring are recommended to prevent the entry of new sources of N. caninum and to control its spread within herds.