Transferência de imunidade passiva (TIP) e dinâmica de anticorpos específicos em bezerros naturalmente expostos para as viroses respiratórias / Passive immune transfer (PIT) and dynamics of specific antibodies in calves naturally exposed to the respiratory viruses

Esta pesquisa avaliou a TIP e a dinâmica de anticorpos (ACs) específicos em bezerros naturalmente expostos aos agentes causadores da doença respiratória bovina (DRB). Foram selecionados 19 bezerros Holandeses alimentados com colostro proveniente de doadoras vacinadas para DRB. Amostras de soro foram obtidas antes e após a ingestão do colostro (48h) para a soroneutralização (SN). Os valores médios (log2) detectados após colostragem foram de 11,5±1,6 (BVDV), 8,8±1,3 (BoHV-1), 5,5±1,6 (BRSV) e 8,4±1,5 (BPIV-3). Cinco bezerros foram criados do nascimento aos 240 dias de vida, observando-se decréscimo nos títulos de ACs para BVDV, BoHV-1 e BPIV-3 ao longo do tempo (P≤0,001). As taxas de infecções detectadas entre o D14 e o D240 foram de 40% (2/5), 20% (1/5), 80% (4/5), e 60% (3/5), respectivamente, para BVDV, BoHV-1, BRSV e BPIV-3. A maioria dos bezerros manifestou broncopneumonia após as infecções virais. Os bezerros apresentaram ACs para todas as viroses às 48 horas de vida, porém os títulos adquiridos para o BRSV foram baixos. A susceptibilidade para as infecções variou de acordo com os níveis e a duração dos títulos de ACs maternos.(AU)

This research evaluated the PIT and the dynamics of specific antibody (Ab) for calves naturally exposed to the viral agents involved in Bovine Respiratory Disease (BRD). Nineteen Holstein calves fed colostrum from vaccinated donors for DRB. Serum samples were obtained before and after colostrum intake (48h) for serum neutralization (SN). Mean values (log2) detected after colostrum feeding were 11.5±1.6 (BVDV), 8.8 ±1.3 (BoHV-1) 5.5±1.6 (BRSV) and 8.4±1.5 (BPIV-3). Five calves were raised from birth to 240 days of life and presented a decrease in Ab titers for BVDV, BoHV-1 and BPIV-3 over time (P≤ 0.001). Infection rates from D14 to D240 were of 40% (2/5), 20% (1/5), 80% (4/5) and 60% (3/5), respectively for BVDV, BoHV-1, BRSV and BPIV-3. Most of the calves presented bronchopneumonia after seroconversion to the virus. Calves presented Ab for all viruses at 48 hours of life, however BRSV Ab titer were low. Levels and persistence of maternal antibody titers determined the susceptibility to viral infections.(AU)

Transferência de imunidade passiva (TIP) e dinâmica de anticorpos específicos em bezerros naturalmente expostos para as viroses respiratórias / Passive immune transfer (PIT) and dynamics of specific antibodies in calves naturally exposed to the respiratory viruses

Esta pesquisa avaliou a TIP e a dinâmica de anticorpos (ACs) específicos em bezerros naturalmente expostos aos agentes causadores da doença respiratória bovina (DRB). Foram selecionados 19 bezerros Holandeses alimentados com colostro proveniente de doadoras vacinadas para DRB. Amostras de soro foram obtidas antes e após a ingestão do colostro (48h) para a soroneutralização (SN). Os valores médios (log2) detectados após colostragem foram de 11,5±1,6 (BVDV), 8,8±1,3 (BoHV-1), 5,5±1,6 (BRSV) e 8,4±1,5 (BPIV-3). Cinco bezerros foram criados do nascimento aos 240 dias de vida, observando-se decréscimo nos títulos de ACs para BVDV, BoHV-1 e BPIV-3 ao longo do tempo (P≤0,001). As taxas de infecções detectadas entre o D14 e o D240 foram de 40% (2/5), 20% (1/5), 80% (4/5), e 60% (3/5), respectivamente, para BVDV, BoHV-1, BRSV e BPIV-3. A maioria dos bezerros manifestou broncopneumonia após as infecções virais. Os bezerros apresentaram ACs para todas as viroses às 48 horas de vida, porém os títulos adquiridos para o BRSV foram baixos. A susceptibilidade para as infecções variou de acordo com os níveis e a duração dos títulos de ACs maternos.(AU)

This research evaluated the PIT and the dynamics of specific antibody (Ab) for calves naturally exposed to the viral agents involved in Bovine Respiratory Disease (BRD). Nineteen Holstein calves fed colostrum from vaccinated donors for DRB. Serum samples were obtained before and after colostrum intake (48h) for serum neutralization (SN). Mean values (log2) detected after colostrum feeding were 11.5±1.6 (BVDV), 8.8 ±1.3 (BoHV-1) 5.5±1.6 (BRSV) and 8.4±1.5 (BPIV-3). Five calves were raised from birth to 240 days of life and presented a decrease in Ab titers for BVDV, BoHV-1 and BPIV-3 over time (P≤ 0.001). Infection rates from D14 to D240 were of 40% (2/5), 20% (1/5), 80% (4/5) and 60% (3/5), respectively for BVDV, BoHV-1, BRSV and BPIV-3. Most of the calves presented bronchopneumonia after seroconversion to the virus. Calves presented Ab for all viruses at 48 hours of life, however BRSV Ab titer were low. Levels and persistence of maternal antibody titers determined the susceptibility to viral infections.(AU)

Serological investigation of antibodies against respiratory viruses in calves from Brazilian family farming and their relation to clinical signs of bovine respiratory disease / Investigação sorológica de anticorpos contra vírus respiratórios em bezerros de propriedades familiares brasileiras e sua relação com os sinais clínicos da doença respiratória dos bovinos

Bovine respiratory disease (BRD) is responsible for economic losses in cattle production. Viruses are categorized as primary etiological agents. The aims of this study were to evaluate the presence of antibodies against bovine viral diarrhea virus (BVDV), bovine herpes virus type 1 (BoHV-1), and bovine respiratory syncytial virus (BRSV) in healthy and BRD calves from family farming in relation to clinical signs of BRD. Hundred and forty-five calves were randomly selected and physical examination was performed. Only 123 animals were classified as healthy and BRD calves. Antibodies were evaluated by virus neutralization test. Person's Chi-square test and Fisher's exact test were performed as univariate analysis. Binary Logistic Regression was applied as multivariate analysis. Variables with P<0.10 were considered statistically significant. Variables with 0.15<P<0.10 were considered as statistical tendencies. Antibodies against BoHV-1, BVDV, and BRSV were detected in 32%, 23% and 37% animals. Antibodies against both three viruses were detected in 26.8% of calves. The presence of antibodies against BRSV were associated to normal heart rates (P=0.018) and unilateral airflow (P=0.035). Tendency was observed to unilateral airflow (P=0.06) Statistical tendencies were observed to Ab-BoHV-1 and body temperature (P=0.119) and breathing pattern (P=0.123). The profile of antibodies against respiratory viruses in calves from Brazilian family farming was firstly described. The results confirmed the importance of some clinical signs to viral infection.(AU)

A doença respiratória dos bovinos (DRB) é responsável por importantes perdas econômicas para a produção bovina, com maior impacto na agricultura familiar. Os vírus são comumente caracterizados como agentes etiológicos primários devido a mudanças na mucosa respiratória, na produção de citocinas e no funcionamento do sistema imune. Os objetivos deste estudo transversal foram avaliar a presença de anticorpos contra o vírus da diarreia viral bovina (VDVB), herpes vírus bovino tipo 1 (HVbo-1) e vírus respiratório sincicial bovino (VRSB) em bezerros sadios e com DRB de assentamentos em associação com a presença sinais clínicos de DRB. Cento e quarenta e cinco animais foram randomicamente selecionados e exame físico foi realizado. Somente 123 animais foram classificados em sadios e com DRB. Anticorpos foram identificados pelo teste de virusneutralização. Teste de qui-quadrado e teste exato de Fisher foram utilizados como análise univariada. A análise multivariada foi realizada pela regressão binária logística com o método Backward conditional. Variáveis com P<0,10 foram considerados significantes. Variáveis com 0,15<P<0,10 foram consideradas tendências. Anticorpos contra HVbo-1, VDVB e VRSB foram detectados em 32%, 23% e 37% dos animais. A presença concomitante de anticorpos contra os três vírus foi detectada em 26,8% dos bezerros. A presença de anticorpos contra VRSB foi associada à frequência cardíaca normal (P=0,018) e fluxo de ar nasal unilateral (P=0,035). Tendência estatística observada para anticorpos contra VDVB temperatura corporal (P=0,119) e padrão respiratório (P=0,123). Ao nosso conhecimento, este é o primeiro estudo que objetivou a avaliação da presença de anticorpos contra VDVB, VRSB e HVbo-1 em bezerros de assentamentos do estado de São Paulo, Brasil e sua relação com as manifestações clínicas da DRB.(AU)

Serological investigation of antibodies against respiratory viruses in calves from Brazilian family farming and their relation to clinical signs of bovine respiratory disease / Investigação sorológica de anticorpos contra vírus respiratórios em bezerros de propriedades familiares brasileiras e sua relação com os sinais clínicos da doença respiratória dos bovinos

Bovine respiratory disease (BRD) is responsible for economic losses in cattle production. Viruses are categorized as primary etiological agents. The aims of this study were to evaluate the presence of antibodies against bovine viral diarrhea virus (BVDV), bovine herpes virus type 1 (BoHV-1), and bovine respiratory syncytial virus (BRSV) in healthy and BRD calves from family farming in relation to clinical signs of BRD. Hundred and forty-five calves were randomly selected and physical examination was performed. Only 123 animals were classified as healthy and BRD calves. Antibodies were evaluated by virus neutralization test. Person's Chi-square test and Fisher's exact test were performed as univariate analysis. Binary Logistic Regression was applied as multivariate analysis. Variables with P<0.10 were considered statistically significant. Variables with 0.15

A doença respiratória dos bovinos (DRB) é responsável por importantes perdas econômicas para a produção bovina, com maior impacto na agricultura familiar. Os vírus são comumente caracterizados como agentes etiológicos primários devido a mudanças na mucosa respiratória, na produção de citocinas e no funcionamento do sistema imune. Os objetivos deste estudo transversal foram avaliar a presença de anticorpos contra o vírus da diarreia viral bovina (VDVB), herpes vírus bovino tipo 1 (HVbo-1) e vírus respiratório sincicial bovino (VRSB) em bezerros sadios e com DRB de assentamentos em associação com a presença sinais clínicos de DRB. Cento e quarenta e cinco animais foram randomicamente selecionados e exame físico foi realizado. Somente 123 animais foram classificados em sadios e com DRB. Anticorpos foram identificados pelo teste de virusneutralização. Teste de qui-quadrado e teste exato de Fisher foram utilizados como análise univariada. A análise multivariada foi realizada pela regressão binária logística com o método Backward conditional. Variáveis com P<0,10 foram considerados significantes. Variáveis com 0,15

Serological investigation of antibodies against respiratory viruses in calves from Brazilian family farming and their relation to clinical signs of bovine respiratory disease

ABSTRACT: Bovine respiratory disease (BRD) is responsible for economic losses in cattle production. Viruses are categorized as primary etiological agents. The aims of this study were to evaluate the presence of antibodies against bovine viral diarrhea virus (BVDV), bovine herpes virus type 1 (BoHV-1), and bovine respiratory syncytial virus (BRSV) in healthy and BRD calves from family farming in relation to clinical signs of BRD. Hundred and forty-five calves were randomly selected and physical examination was performed. Only 123 animals were classified as healthy and BRD calves. Antibodies were evaluated by virus neutralization test. Persons Chi-square test and Fishers exact test were performed as univariate analysis. Binary Logistic Regression was applied as multivariate analysis. Variables with P 0.10 were considered statistically significant. Variables with 0.15 P 0.10 were considered as statistical tendencies. Antibodies against BoHV-1, BVDV, and BRSV were detected in 32%, 23% and 37% animals. Antibodies against both three viruses were detected in 26.8% of calves. The presence of antibodies against BRSV were associated to normal heart rates (P=0.018) and unilateral airflow (P=0.035). Tendency was observed to unilateral airflow (P=0.06) Statistical tendencies were observed to Ab-BoHV-1 and body temperature (P=0.119) and breathing pattern (P=0.123). The profile of antibodies against respiratory viruses in calves from Brazilian family farming was firstly described. The results confirmed the importance of some clinical signs to viral infection.

RESUMO: A doença respiratória dos bovinos (DRB) é responsável por importantes perdas econômicas para a produção bovina, com maior impacto na agricultura familiar. Os vírus são comumente caracterizados como agentes etiológicos primários devido a mudanças na mucosa respiratória, na produção de citocinas e no funcionamento do sistema imune. Os objetivos deste estudo transversal foram avaliar a presença de anticorpos contra o vírus da diarreia viral bovina (VDVB), herpes vírus bovino tipo 1 (HVbo-1) e vírus respiratório sincicial bovino (VRSB) em bezerros sadios e com DRB de assentamentos em associação com a presença sinais clínicos de DRB. Cento e quarenta e cinco animais foram randomicamente selecionados e exame físico foi realizado. Somente 123 animais foram classificados em sadios e com DRB. Anticorpos foram identificados pelo teste de virusneutralização. Teste de qui-quadrado e teste exato de Fisher foram utilizados como análise univariada. A análise multivariada foi realizada pela regressão binária logística com o método Backward conditional. Variáveis com P 0,10 foram considerados significantes. Variáveis com 0,15 P 0,10 foram consideradas tendências. Anticorpos contra HVbo-1, VDVB e VRSB foram detectados em 32%, 23% e 37% dos animais. A presença concomitante de anticorpos contra os três vírus foi detectada em 26,8% dos bezerros. A presença de anticorpos contra VRSB foi associada à frequência cardíaca normal (P=0,018) e fluxo de ar nasal unilateral (P=0,035). Tendência estatística observada para anticorpos contra VDVB temperatura corporal (P=0,119) e padrão respiratório (P=0,123). Ao nosso conhecimento, este é o primeiro estudo que objetivou a avaliação da presença de anticorpos contra VDVB, VRSB e HVbo-1 em bezerros de assentamentos do estado de São Paulo, Brasil e sua relação com as manifestações clínicas da DRB.

Detecting the effect of Umckaloabo/EPs®7630 liquid extract after its therapeutic purposed usage in calves showing symptoms of respiratory tract infection

Background: Respiratory tract diseases are commonly seen in beef cattle. Young calves are affected with many respiratory pathogens. Viral pathogens are particularly seen. There are many causative factors, e.g. environmental conditions, immune system of calves. Therefore, alternative treatments are needed for viral respiratory infections. The purpose of the current study was to investigate effectiveness of Umckaloabo/EPs®7630 liquid extract in some bovine viral pathogens of young beef calves.Materials, Methods & Results: Antibody presence in terms of bovine herpesvirus type 1 (BHV-1), bovine viral diarrhea virus (BVDV), bovine parainfluenza virus type 3 (BPIV-3), bovine respiratory syncytial virus (BRSV) and bovine adenovirus type 3 (BAV-3) was searched in blood serum samples of 40 Holstein calves aged 6 months and over showing respiratory tract infection symptoms. All animals were found seronegative in terms of other factors except BRSV. Out of 20 BRSV seropositive calves, 10 of them were classified as control group and the other ten as testing group. BRSV antibody titers were also detected in blood samples of both groups on day 0. Umckaloabo/EPs®7630 liquid extract was given through oral route to animals in testing group according to their weights for 14 days morning, noon and night. No application was performed on animals in control group. BRSV antibody titers were detected in blood samples of animals in both groups taken on days 1st, 3rd, 5th, 7th, 10th and 14th. At the end of day 14th, BRSV antibody titer increased in 9 out of 10 animals (90%) in testing group that were given Umckaloabo/EPs® 7630 liquid extract while one of them (10%) showed no variability. BRSV antibody titer increased in 6 out of 10 animals (60%) in control group while it decreased in one of them (10%) and 3 of them (30%) showed no variability.[...]

Detecting the Effect of Umckaloabo/EPs®7630 Liquid Extract after its Therapeutic Purposed Usage in Calves Showing Symptoms of Respiratory Tract Infection

Background: Respiratory tract diseases are commonly seen in beef cattle. Young calves are affected with many respiratory pathogens. Viral pathogens are particularly seen. There are many causative factors, e.g. environmental conditions, immune system of calves. Therefore, alternative treatments are needed for viral respiratory infections. The purpose of the current study was to investigate effectiveness of Umckaloabo/EPs®7630 liquid extract in some bovine viral pathogens of young beef calves.Materials, Methods & Results: Antibody presence in terms of bovine herpesvirus type 1 (BHV-1), bovine viral diarrhea virus (BVDV), bovine parainfluenza virus type 3 (BPIV-3), bovine respiratory syncytial virus (BRSV) and bovine adenovirus type 3 (BAV-3) was searched in blood serum samples of 40 Holstein calves aged 6 months and over showing respiratory tract infection symptoms. All animals were found seronegative in terms of other factors except BRSV. Out of 20 BRSV seropositive calves, 10 of them were classified as control group and the other ten as testing group. BRSV antibody titers were also detected in blood samples of both groups on day 0. Umckaloabo/EPs®7630 liquid extract was given through oral route to animals in testing group according to their weights for 14 days morning, noon and night. No application was performed on animals in control group. BRSV antibody titers were detect

Detecting the effect of Umckaloabo/EPs®7630 liquid extract after its therapeutic purposed usage in calves showing symptoms of respiratory tract infection

Background: Respiratory tract diseases are commonly seen in beef cattle. Young calves are affected with many respiratory pathogens. Viral pathogens are particularly seen. There are many causative factors, e.g. environmental conditions, immune system of calves. Therefore, alternative treatments are needed for viral respiratory infections. The purpose of the current study was to investigate effectiveness of Umckaloabo/EPs®7630 liquid extract in some bovine viral pathogens of young beef calves.Materials, Methods & Results: Antibody presence in terms of bovine herpesvirus type 1 (BHV-1), bovine viral diarrhea virus (BVDV), bovine parainfluenza virus type 3 (BPIV-3), bovine respiratory syncytial virus (BRSV) and bovine adenovirus type 3 (BAV-3) was searched in blood serum samples of 40 Holstein calves aged 6 months and over showing respiratory tract infection symptoms. All animals were found seronegative in terms of other factors except BRSV. Out of 20 BRSV seropositive calves, 10 of them were classified as control group and the other ten as testing group. BRSV antibody titers were also detected in blood samples of both groups on day 0. Umckaloabo/EPs®7630 liquid extract was given through oral route to animals in testing group according to their weights for 14 days morning, noon and night. No application was performed on animals in control group. BRSV antibody titers were detected in blood samples of animals in both groups taken on days 1st, 3rd, 5th, 7th, 10th and 14th. At the end of day 14th, BRSV antibody titer increased in 9 out of 10 animals (90%) in testing group that were given Umckaloabo/EPs® 7630 liquid extract while one of them (10%) showed no variability. BRSV antibody titer increased in 6 out of 10 animals (60%) in control group while it decreased in one of them (10%) and 3 of them (30%) showed no variability.[...](AU)

Detection of an untyped strain of bovine respiratory syncytial virus in a dairy herd / Detecção de uma estirpe não tipável do vírus respiratório sincicial bovino em rebanho leiteiro

Bovine respiratory syncytial virus (BRSV) causes important lower respiratory tract illness in calves. According to F and G proteins genetic sequences, three BRSV subgroups have been reported and characterized in several countries, showing differences in its distribution. In Brazil, the virus is widely disseminated throughout the herds and the few characterized isolates revealed the solely occurrence of the subgroup B. This study describes the detection and characterization of an untyped BRSV strain from a twenty-days-old calf from a herd without clinical respiratory disease. Nasal swabs were analyzed by RT-nested PCR for the F and G proteins genes. One sample has amplified the F protein gene. Sequencing and subsequent phylogenetic reconstruction were accomplished, revealing that the strain could not be grouped with any other BRSV subgroups reported. This result may suggest that the BRSV is in constantly evolution, even in Brazil, where the vaccination is not a common practice. More detailed studies about BRSV characterization are necessary to know the virus subgroups distribution among the Brazilian herds to recommend appropriated immunoprophylaxis.(AU)

O vírus respiratório sincicial bovino (BRSV) é responsável por causar severa doença respiratória principalmente em bezerros. De acordo com sequências genéticas das proteínas F e G deste vírus,três subgrupos de BRSV foram relatados e caracterizados em vários países, mostrando diferenças nas suas distribuições. No Brasil, o vírus encontra-se disseminado pelos rebanhos bovinos e, dos poucos isolados caracterizados, todos foram classificados no subgrupo B. Assim, o estudo descreve a detecção e caracterização de uma estirpe de BRSV não tipável proveniente de um bezerro de vinte dias de idade, de um rebanho sem histórico clínico de doença respiratória. Suabes nasais foram analisados pela técnica de RT-nested PCR para os genes das proteínas F e G do BRSV e uma amostra amplificou o gene da proteína F. O sequenciamento da amostra e subsequente reconstrução filogenética mostrou o não agrupamento da estirpe com quaisquer outros subgrupos de BRSV relatados. Este resultado sugere a constante evolução do BRSV, mesmo no Brasil, onde a vacinação não é uma prática comum. Estudos mais detalhados sobre a caracterização do BRSV são necessários para melhor entender a distribuição dos subgrupos nos rebanhos brasileiros a fim de proporcionar medidas de imunoprofilaxia adequadas.(AU)

Antibody responses in mice after immunization with inactivated bovine respiratory syncytial virus using different adjuvants

Bovine respiratory syncytial virus (BRSV) causes pneumonia in young cattle. Modified-live-virus (MLV) and inactivated vaccines are currently used for the control of clinical effects of BRSV infections in cattle. On the present research, the stimulation of specific anti-BRSV immunoglobulin isotypes was investigated, through the use of different commercially available adjuvants (Water-in-oil emulsion, Quil A, Aluminum-hydroxide) in inbred mice (Balb/C and C57BL/6). BRSV antibodies were measured using an enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and the results were compared to the antibody levels induced by immunization of animals using live-BRSV-virus. Water-in-oil emulsion and alum- adjuvant preparations induced higher levels of IgG1 immunoglobulins, whereas Quil A favored the production of IgG2 antibodies, this last being a more appropriate response profile for the specific case of BRSV. Not using adjuvants resulted in poor levels of specific antibodies. The isotype profile of specific antibodies obtained varied greatly depending on the adjuvants used. This information may be useful for the formulation of more effective BRSV inactivated vaccines; however, these findings have to be confirmed in cattle.

O vírus respiratório sincicial bovino (BRSV) causa pneumonia em bovinos jovens. Vacinas de vírus vivo modificado (MLV) e vacinas inativadas são atualmente utilizadas para o controle dos efeitos clínicos de infecções pelo BRSV em bovinos. No presente trabalho, investigou-se a estimulação dos isotipos de imunoglobulinas específicas anti-BRSV, através da utilização de diferentes adjuvantes disponíveis comercialmente (água em óleo de emulsão, Quil A, hidróxido de alumínio) em camundongos isogênicos (Balb/C e C57BL/6). Anticorpos contra o BRSV foram medidos usando-se um ensaio imunoenzimático (ELISA), e os resultados foram comparados com os níveis de anticorpos induzidos pela imunização de animais utilizando-se o BRSV vivo. As preparações em que se empregou óleo mineral e alumínio como adjuvantes induziram altos níveis de imunoglobulinas IgG1, enquanto QuilA favoreceu a produção de anticorpos de classe IgG2, sendo este último um perfil de resposta mais desejável para o caso específico de BRSV. A não utilização de adjuvantes resultou em baixa produção de anticorpos específicos. O perfil de isotipos de imunoglobulinas secretados variou bastante conforme o adjuvante utilizado. Esta informação pode ser útil futuramente na formulação de vacinas inativadas mais eficazes contra o BRSV. Todavia, esses achados devem ser confirmados em bovinos.

Antibody responses in mice after immunization with inactivated bovine respiratory syncytial virus using different adjuvants

Bovine respiratory syncytial virus (BRSV) causes pneumonia in young cattle. Modified-live-virus (MLV) and inactivated vaccines are currently used for the control of clinical effects of BRSV infections in cattle. On the present research, the stimulation of specific anti-BRSV immunoglobulin isotypes was investigated, through the use of different commercially available adjuvants (Water-in-oil emulsion, Quil A, Aluminum-hydroxide) in inbred mice (Balb/C and C57BL/6). BRSV antibodies were measured using an enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and the results were compared to the antibody levels induced by immunization of animals using live-BRSV-virus. Water-in-oil emulsion and alum- adjuvant preparations induced higher levels of IgG1 immunoglobulins, whereas Quil A favored the production of IgG2 antibodies, this last being a more appropriate response profile for the specific case of BRSV. Not using adjuvants resulted in poor levels of specific antibodies. The isotype profile of specific antibodies obtained varied greatly depending on the adjuvants used. This information may be useful for the formulation of more effective BRSV inactivated vaccines; however, these findings have to be confirmed in cattle.

O vírus respiratório sincicial bovino (BRSV) causa pneumonia em bovinos jovens. Vacinas de vírus vivo modificado (MLV) e vacinas inativadas são atualmente utilizadas para o controle dos efeitos clínicos de infecções pelo BRSV em bovinos. No presente trabalho, investigou-se a estimulação dos isotipos de imunoglobulinas específicas anti-BRSV, através da utilização de diferentes adjuvantes disponíveis comercialmente (água em óleo de emulsão, Quil A, hidróxido de alumínio) em camundongos isogênicos (Balb/C e C57BL/6). Anticorpos contra o BRSV foram medidos usando-se um ensaio imunoenzimático (ELISA), e os resultados foram comparados com os níveis de anticorpos induzidos pela imunização de animais utilizando-se o BRSV vivo. As preparações em que se empregou óleo mineral e alumínio como adjuvantes induziram altos níveis de imunoglobulinas IgG1, enquanto QuilA favoreceu a produção de anticorpos de classe IgG2, sendo este último um perfil de resposta mais desejável para o caso específico de BRSV. A não utilização de adjuvantes resultou em baixa produção de anticorpos específicos. O perfil de isotipos de imunoglobulinas secretados variou bastante conforme o adjuvante utilizado. Esta informação pode ser útil futuramente na formulação de vacinas inativadas mais eficazes contra o BRSV. Todavia, esses achados devem ser confirmados em bovinos.

Antibody responses in mice after immunization with inactivated bovine respiratory syncytial virus using different adjuvants

Bovine respiratory syncytial virus (BRSV) causes pneumonia in young cattle. Modified-live-virus (MLV) and inactivated vaccines are currently used for the control of clinical effects of BRSV infections in cattle. On the present research, the stimulation of specific anti-BRSV immunoglobulin isotypes was investigated, through the use of different commercially available adjuvants (Water-in-oil emulsion, Quil A, Aluminum-hydroxide) in inbred mice (Balb/C and C57BL/6). BRSV antibodies were measured using an enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and the results were compared to the antibody levels induced by immunization of animals using live-BRSV-virus. Water-in-oil emulsion and alum- adjuvant preparations induced higher levels of IgG1 immunoglobulins, whereas Quil A favored the production of IgG2 antibodies, this last being a more appropriate response profile for the specific case of BRSV. Not using adjuvants resulted in poor levels of specific antibodies. The isotype profile of specific antibodies obtained varied greatly depending on the adjuvants used. This information may be useful for the formulation of more effective BRSV inactivated vaccines; however, these findings have to be confirmed in cattle.

O vírus respiratório sincicial bovino (BRSV) causa pneumonia em bovinos jovens. Vacinas de vírus vivo modificado (MLV) e vacinas inativadas são atualmente utilizadas para o controle dos efeitos clínicos de infecções pelo BRSV em bovinos. No presente trabalho, investigou-se a estimulação dos isotipos de imunoglobulinas específicas anti-BRSV, através da utilização de diferentes adjuvantes disponíveis comercialmente (água em óleo de emulsão, Quil A, hidróxido de alumínio) em camundongos isogênicos (Balb/C e C57BL/6). Anticorpos contra o BRSV foram medidos usando-se um ensaio imunoenzimático (ELISA), e os resultados foram comparados com os níveis de anticorpos induzidos pela imunização de animais utilizando-se o BRSV vivo. As preparações em que se empregou óleo mineral e alumínio como adjuvantes induziram altos níveis de imunoglobulinas IgG1, enquanto QuilA favoreceu a produção de anticorpos de classe IgG2, sendo este último um perfil de resposta mais desejável para o caso específico de BRSV. A não utilização de adjuvantes resultou em baixa produção de anticorpos específicos. O perfil de isotipos de imunoglobulinas secretados variou bastante conforme o adjuvante utilizado. Esta informação pode ser útil futuramente na formulação de vacinas inativadas mais eficazes contra o BRSV. Todavia, esses achados devem ser confirmados em bovinos.

Immunocytochemical characterization of the cytopathic effect induced by bovine respiratory syncytial virus strain RC 98 on Hep-2 cells / Caracterização imunocitoquímica do efeito citopático induzido pelo vírus respiratório sincicial bovino amostra RC98 em células Hep-2

Caracterizou-se o efeito citopático produzido pela amostra de vírus respiratório sincicial bovino (BRSV) RC-98, isolada na Argentina, por meio de imunocitoquímica em cultivos de células da linhagem Hep-2. Um soro policlonal anti-BRSV foi utilizado para a imunocitoquímica em células Hep-2 infectadas. Sinais específicos do virus foram observados no citoplasma de um grande número de células, consistindo em inclusões citoplasmáticas e células sinciciais. Efeitos citopáticos distintos foram observados, com frequência, no núcleo das células infectadas, aparecendo como sinais específicos fortes, podendo corresponder a inclusões intranucleares. A presença de sinais intranucleares pode consistir uma característica particular da amostra RC98 do BRSV. (AU)

O polietilenoglicol aumenta a penetração do vírus da diarréia viral bovina, do vírus da estomatite vesicular e do vírus sincicial respiratório bovino em células de cultivo

The low efficiency of penetration of some viruses in cultured cells may represent an obstacle for viral isolation and/or viral multiplication in tissue culture. This study investigated the effect of polyethylene glycol (PEG) on the penetration and replication of seven bovine enveloped viruses in culture cells. Penetration efficiency was measured by counting the number of viral plaques produced in bovine kidney cells (MDBK). The addition of 5% PEG (molecular weight 6.000) to the viral inoculum containing 100 TCID50 mL-1 (tissue culture median infectious dosis) of each virus, during adsorption for 2h at 37°C, resulted in a significant increase in the number of plaques for bovine viral diarrhea virus (BVDV) (increase of 3.4-fold), vesicular stomatitis virus (VSV) (2.2-fold) and bovine respiratory syncytial virus (BRSV) (1.5-fold). The addition of 5% PEG to the inoculum of bovine herpesviruses 1, 2 and 5 (BoHV-1, BoHV-2 and BoHV-5) did not increase the number of viral plaques. On the other hand, PEG produced a reduction in the number of plaques by bovine parainfluenza virus (bPI-3V) (1.4-fold). Furthermore, the addition of 5% PEG produced a 10- to 1000-fold increase in the sensitivity of BVDV detection in the serum of three persistently infected calves; and doubled the sensitivity of detection of BRSV in nasal secretions of two experimentally infected sheep. These results demonstrate that PEG enhances the efficiency of infection by BVDV, VSV and BRSV in cultured bovine cells and therefore may be used to increase the sensitivity of virus detection in clinical samples (viral isolation), and/or to increase virus titers in cell cultures.

A baixa eficiência de penetração de alguns vírus em células de cultivo pode representar uma dificuldade para o isolamento e a multiplicação viral in vitro. No presente estudo investigou-se o efeito do polietilenoglicol (PEG) na replicação de sete vírus bovinos em células de linhagem de rim bovino (MDBK). A eficiência de penetração e replicação foi mensurada pela contagem do número de placas virais produzidas em tapetes celulares, após adsorção do inóculo viral (100 DICC50 mL-1) com ou sem a adição de PEG a 5% (peso molecular 6.000). A adição de PEG ao inóculo resultou em aumentos significativos do número de placas para o vírus da diarréia viral bovina (BVDV) (aumento de 3,4 vezes), vírus da estomatite vesicular (VSV) (2,2 vezes) e vírus respiratório sincicial bovino (BRSV) (1,5 vezes). A adição de PEG não produziu aumento significativo no número de placas dos herpesvírus bovinos 1, 2 e 5 (BoHV-1, BoHV-2 e BoHV-5). Por outro lado, o PEG produziu uma redução do número de placas (1,4 vezes) produzidas pelo vírus da parainfluenza bovina (bPI-3V). A adição de PEG a 5% também aumentou a sensibilidade de detecção (entre 10 e 100 vezes) do BVDV no soro de três bezerros persistentemente infectados. Para o BRSV, a adição de PEG aumentou em duas vezes a sensibilidade do isolamento viral de secreções nasais de duas ovelhas infectadas experimentalmente. Esses resultados demonstram que o PEG aumenta a eficiência de infecção do BVDV, VSV e BRSV em células de cultivo, podendo ser utilizado para aumentar a sensibilidade de detecção desses vírus em amostras clínicas (isolamento viral) e/ou, para aumentar os títulos de vírus produzidos em cultivo celular.

O polietilenoglicol aumenta a penetração do vírus da diarréia viral bovina, do vírus da estomatite vesicular e do vírus sincicial respiratório bovino em células de cultivo

The low efficiency of penetration of some viruses in cultured cells may represent an obstacle for viral isolation and/or viral multiplication in tissue culture. This study investigated the effect of polyethylene glycol (PEG) on the penetration and replication of seven bovine enveloped viruses in culture cells. Penetration efficiency was measured by counting the number of viral plaques produced in bovine kidney cells (MDBK). The addition of 5% PEG (molecular weight 6.000) to the viral inoculum containing 100 TCID50 mL-1 (tissue culture median infectious dosis) of each virus, during adsorption for 2h at 37°C, resulted in a significant increase in the number of plaques for bovine viral diarrhea virus (BVDV) (increase of 3.4-fold), vesicular stomatitis virus (VSV) (2.2-fold) and bovine respiratory syncytial virus (BRSV) (1.5-fold). The addition of 5% PEG to the inoculum of bovine herpesviruses 1, 2 and 5 (BoHV-1, BoHV-2 and BoHV-5) did not increase the number of viral plaques. On the other hand, PEG produced a reduction in the number of plaques by bovine parainfluenza virus (bPI-3V) (1.4-fold). Furthermore, the addition of 5% PEG produced a 10- to 1000-fold increase in the sensitivity of BVDV detection in the serum of three persistently infected calves; and doubled the sensitivity of detection of BRSV in nasal secretions of two experimentally infected sheep. These results demonstrate that PEG enhances the efficiency of infection by BVDV, VSV and BRSV in cultured bovine cells and therefore may be used to increase the sensitivity of virus detection in clinical samples (viral isolation), and/or to increase virus titers in cell cultures.

A baixa eficiência de penetração de alguns vírus em células de cultivo pode representar uma dificuldade para o isolamento e a multiplicação viral in vitro. No presente estudo investigou-se o efeito do polietilenoglicol (PEG) na replicação de sete vírus bovinos em células de linhagem de rim bovino (MDBK). A eficiência de penetração e replicação foi mensurada pela contagem do número de placas virais produzidas em tapetes celulares, após adsorção do inóculo viral (100 DICC50 mL-1) com ou sem a adição de PEG a 5% (peso molecular 6.000). A adição de PEG ao inóculo resultou em aumentos significativos do número de placas para o vírus da diarréia viral bovina (BVDV) (aumento de 3,4 vezes), vírus da estomatite vesicular (VSV) (2,2 vezes) e vírus respiratório sincicial bovino (BRSV) (1,5 vezes). A adição de PEG não produziu aumento significativo no número de placas dos herpesvírus bovinos 1, 2 e 5 (BoHV-1, BoHV-2 e BoHV-5). Por outro lado, o PEG produziu uma redução do número de placas (1,4 vezes) produzidas pelo vírus da parainfluenza bovina (bPI-3V). A adição de PEG a 5% também aumentou a sensibilidade de detecção (entre 10 e 100 vezes) do BVDV no soro de três bezerros persistentemente infectados. Para o BRSV, a adição de PEG aumentou em duas vezes a sensibilidade do isolamento viral de secreções nasais de duas ovelhas infectadas experimentalmente. Esses resultados demonstram que o PEG aumenta a eficiência de infecção do BVDV, VSV e BRSV em células de cultivo, podendo ser utilizado para aumentar a sensibilidade de detecção desses vírus em amostras clínicas (isolamento viral) e/ou, para aumentar os títulos de vírus produzidos em cultivo celular.

O polietilenoglicol aumenta a penetração do vírus da diarréia viral bovina, do vírus da estomatite vesicular e do vírus sincicial respiratório bovino em células de cultivo

The low efficiency of penetration of some viruses in cultured cells may represent an obstacle for viral isolation and/or viral multiplication in tissue culture. This study investigated the effect of polyethylene glycol (PEG) on the penetration and replication of seven bovine enveloped viruses in culture cells. Penetration efficiency was measured by counting the number of viral plaques produced in bovine kidney cells (MDBK). The addition of 5% PEG (molecular weight 6.000) to the viral inoculum containing 100 TCID50 mL-1 (tissue culture median infectious dosis) of each virus, during adsorption for 2h at 37°C, resulted in a significant increase in the number of plaques for bovine viral diarrhea virus (BVDV) (increase of 3.4-fold), vesicular stomatitis virus (VSV) (2.2-fold) and bovine respiratory syncytial virus (BRSV) (1.5-fold). The addition of 5% PEG to the inoculum of bovine herpesviruses 1, 2 and 5 (BoHV-1, BoHV-2 and BoHV-5) did not increase the number of viral plaques. On the other hand, PEG produced a reduction in the number of plaques by bovine parainfluenza virus (bPI-3V) (1.4-fold). Furthermore, the addition of 5% PEG produced a 10- to 1000-fold increase in the sensitivity of BVDV detection in the serum of three persistently infected calves; and doubled the sensitivity of detection of BRSV in nasal secretions of two experimentally infected sheep. These results demonstrate that PEG enhances the efficiency of infection by BVDV, VSV and BRSV in cultured bovine cells and therefore may be used to increase the sensitivity of virus detection in clinical samples (viral isolation), and/or to increase virus titers in cell cultures.

A baixa eficiência de penetração de alguns vírus em células de cultivo pode representar uma dificuldade para o isolamento e a multiplicação viral in vitro. No presente estudo investigou-se o efeito do polietilenoglicol (PEG) na replicação de sete vírus bovinos em células de linhagem de rim bovino (MDBK). A eficiência de penetração e replicação foi mensurada pela contagem do número de placas virais produzidas em tapetes celulares, após adsorção do inóculo viral (100 DICC50 mL-1) com ou sem a adição de PEG a 5% (peso molecular 6.000). A adição de PEG ao inóculo resultou em aumentos significativos do número de placas para o vírus da diarréia viral bovina (BVDV) (aumento de 3,4 vezes), vírus da estomatite vesicular (VSV) (2,2 vezes) e vírus respiratório sincicial bovino (BRSV) (1,5 vezes). A adição de PEG não produziu aumento significativo no número de placas dos herpesvírus bovinos 1, 2 e 5 (BoHV-1, BoHV-2 e BoHV-5). Por outro lado, o PEG produziu uma redução do número de placas (1,4 vezes) produzidas pelo vírus da parainfluenza bovina (bPI-3V). A adição de PEG a 5% também aumentou a sensibilidade de detecção (entre 10 e 100 vezes) do BVDV no soro de três bezerros persistentemente infectados. Para o BRSV, a adição de PEG aumentou em duas vezes a sensibilidade do isolamento viral de secreções nasais de duas ovelhas infectadas experimentalmente. Esses resultados demonstram que o PEG aumenta a eficiência de infecção do BVDV, VSV e BRSV em células de cultivo, podendo ser utilizado para aumentar a sensibilidade de detecção desses vírus em amostras clínicas (isolamento viral) e/ou, para aumentar os títulos de vírus produzidos em cultivo celular.

Vírus respiratório sincicial bovino

O Vírus Respiratório Sincicial Bovino (BRSV) é uma causa importante de doença respiratória, principalmente em bovinos jovens, caracterizada por pneumonia intersticial. A distribuição das infecções pelo BRSV é mundial e o vírus foi identificado em diferentes episódios no Brasil. O vírus pertence ao gênero Pneumovirus da família Paramyxoviridae e o seu genoma RNA não-segmentado de sentido negativo codifica para 10 proteínas. As proteínas de fusão (F) e de adesão (G) constituem os principais alvos para o sistema imune do hospedeiro. Esse fato deve estar relacionado com a grande variabilidade destas proteínas e de seus genes correspondentes, conforme determinado tanto por anticorpos monoclonais quanto por análise filogenética com base em seqüências de nucleotídeos. A transmissão, resposta imune e patogenia das infecções pelo BRSV, foram estudadas no hospedeiro natural sob condições naturais e experimentais; todavia, alguns aspectos da imunobiologia da infecção são ainda pouco conhecidos. O uso de modelos experimentais, especialmente roedores, pode fornecer novas informações sobre esse assunto. O estado atual do diagnóstico laboratorial das infecções e as medidas de controle para prevenir surtos de BRSV também são apresentados e discutidos.

Detecting the Effect of Umckaloabo/EPs®7630 Liquid Extract after its Therapeutic Purposed Usage in Calves Showing Symptoms of Respiratory Tract Infection

Background: Respiratory tract diseases are commonly seen in beef cattle. Young calves are affected with many respiratory pathogens. Viral pathogens are particularly seen. There are many causative factors, e.g. environmental conditions, immune system of calves. Therefore, alternative treatments are needed for viral respiratory infections. The purpose of the current study was to investigate effectiveness of Umckaloabo/EPs®7630 liquid extract in some bovine viral pathogens of young beef calves.Materials, Methods & Results: Antibody presence in terms of bovine herpesvirus type 1 (BHV-1), bovine viral diarrhea virus (BVDV), bovine parainfluenza virus type 3 (BPIV-3), bovine respiratory syncytial virus (BRSV) and bovine adenovirus type 3 (BAV-3) was searched in blood serum samples of 40 Holstein calves aged 6 months and over showing respiratory tract infection symptoms. All animals were found seronegative in terms of other factors except BRSV. Out of 20 BRSV seropositive calves, 10 of them were classified as control group and the other ten as testing group. BRSV antibody titers were also detected in blood samples of both groups on day 0. Umckaloabo/EPs®7630 liquid extract was given through oral route to animals in testing group according to their weights for 14 days morning, noon and night. No application was performed on animals in control group. BRSV antibody titers were detect

Vírus respiratório sincicial bovino

O Vírus Respiratório Sincicial Bovino (BRSV) é uma causa importante de doença respiratória, principalmente em bovinos jovens, caracterizada por pneumonia intersticial. A distribuição das infecções pelo BRSV é mundial e o vírus foi identificado em diferentes episódios no Brasil. O vírus pertence ao gênero Pneumovirus da família Paramyxoviridae e o seu genoma RNA não-segmentado de sentido negativo codifica para 10 proteínas. As proteínas de fusão (F) e de adesão (G) constituem os principais alvos para o sistema imune do hospedeiro. Esse fato deve estar relacionado com a grande variabilidade destas proteínas e de seus genes correspondentes, conforme determinado tanto por anticorpos monoclonais quanto por análise filogenética com base em seqüências de nucleotídeos. A transmissão, resposta imune e patogenia das infecções pelo BRSV, foram estudadas no hospedeiro natural sob condições naturais e experimentais; todavia, alguns aspectos da imunobiologia da infecção são ainda pouco conhecidos. O uso de modelos experimentais, especialmente roedores, pode fornecer novas informações sobre esse assunto. O estado atual do diagnóstico laboratorial das infecções e as medidas de controle para prevenir surtos de BRSV também são apresentados e discutidos.

Detecting the Effect of Umckaloabo/EPs®7630 Liquid Extract after its Therapeutic Purposed Usage in Calves Showing Symptoms of Respiratory Tract Infection

Background: Respiratory tract diseases are commonly seen in beef cattle. Young calves are affected with many respiratory pathogens. Viral pathogens are particularly seen. There are many causative factors, e.g. environmental conditions, immune system of calves. Therefore, alternative treatments are needed for viral respiratory infections. The purpose of the current study was to investigate effectiveness of Umckaloabo/EPs®7630 liquid extract in some bovine viral pathogens of young beef calves.Materials, Methods & Results: Antibody presence in terms of bovine herpesvirus type 1 (BHV-1), bovine viral diarrhea virus (BVDV), bovine parainfluenza virus type 3 (BPIV-3), bovine respiratory syncytial virus (BRSV) and bovine adenovirus type 3 (BAV-3) was searched in blood serum samples of 40 Holstein calves aged 6 months and over showing respiratory tract infection symptoms. All animals were found seronegative in terms of other factors except BRSV. Out of 20 BRSV seropositive calves, 10 of them were classified as control group and the other ten as testing group. BRSV antibody titers were also detected in blood samples of both groups on day 0. Umckaloabo/EPs®7630 liquid extract was given through oral route to animals in testing group according to their weights for 14 days morning, noon and night. No application was performed on animals in control group. BRSV antibody titers were detect