Wooden sticks for plaque streaking and microbiological inoculation might be more cost- effective, but is its large scale use feasible? Quality control methods and proof of concept / Métodos de controle de qualidade e prova de conceito para a utilização de palitos de madeira em microbiologia podem ser mais econômicas, mas seu uso em larga escala é viável? Método de controle de qualidade e prova de conceito

The loop is a material classically used in the laboratory for the purpose of plate streaking and handling biological materials. However, metal loops techniques might be time consuming, considering the amount of time spent to guarantee its cooling process through each inoculation. Furthermore, plastic loops may also represent environmental issues during its production and discard process and can also represent higher costs for the laboratory. Thus, in situations of limited resources, even the simplest materials can be restricted due to logistical and budgetary issues, especially in developing countries. Inspired by demands like these, facing an occasional shortage of supply of laboratory plastic handles, we hereby present a quality control for sterilization methods and cost-effectiveness studies towards the use of wooden sticks in a Latin American country and we discuss the possibility of the large-scale use of this technique.

A alça calibrada é um material usado classicamente em laboratório para fins de inoculação em placas e manuseio de materiais biológicos. No entanto, as técnicas de alças metálicas podem consumir muito tempo, considerando a quantidade de tempo gasto para garantir seu processo de resfriamento a cada inoculação. Além disso, alças de plástico também podem representar questões ambientais durante o processo de produção e descarte e também podem representar custos mais altos para o laboratório. Assim, em situações de recursos limitados, até os materiais mais simples podem ser restringidos devido a questões logísticas e orçamentárias, especialmente nos países em desenvolvimento. Inspirados por demandas como essas, diante de uma escassez ocasional de suprimentos de alças de plástico de laboratório, apresentamos um controle de qualidade para métodos de esterilização e estudos de custo-efetividade para o uso de varas de madeira em um país latino-americano e discutimos a possibilidade de grande uso em escala dessa técnica.

Wooden sticks for plaque streaking and microbiological inoculation might be more cost- effective, but is its large scale use feasible? Quality control methods and proof of concept

Abstract The loop is a material classically used in the laboratory for the purpose of plate streaking and handling biological materials. However, metal loops techniques might be time consuming, considering the amount of time spent to guarantee its cooling process through each inoculation. Furthermore, plastic loops may also represent environmental issues during its production and discard process and can also represent higher costs for the laboratory. Thus, in situations of limited resources, even the simplest materials can be restricted due to logistical and budgetary issues, especially in developing countries. Inspired by demands like these, facing an occasional shortage of supply of laboratory plastic handles, we hereby present a quality control for sterilization methods and cost-effectiveness studies towards the use of wooden sticks in a Latin American country and we discuss the possibility of the large-scale use of this technique.

Resumo A alça calibrada é um material usado classicamente em laboratório para fins de inoculação em placas e manuseio de materiais biológicos. No entanto, as técnicas de alças metálicas podem consumir muito tempo, considerando a quantidade de tempo gasto para garantir seu processo de resfriamento a cada inoculação. Além disso, alças de plástico também podem representar questões ambientais durante o processo de produção e descarte e também podem representar custos mais altos para o laboratório. Assim, em situações de recursos limitados, até os materiais mais simples podem ser restringidos devido a questões logísticas e orçamentárias, especialmente nos países em desenvolvimento. Inspirados por demandas como essas, diante de uma escassez ocasional de suprimentos de alças de plástico de laboratório, apresentamos um controle de qualidade para métodos de esterilização e estudos de custo-efetividade para o uso de varas de madeira em um país latino-americano e discutimos a possibilidade de grande uso em escala dessa técnica.

Wooden sticks for plaque streaking and microbiological inoculation might be more cost- effective, but is its large scale use feasible? Quality control methods and proof of concept / Métodos de controle de qualidade e prova de conceito para a utilização de palitos de madeira em microbiologia podem ser mais econômicas, mas seu uso em larga escala é viável? Método de controle de qualidade e prova de conceito

The loop is a material classically used in the laboratory for the purpose of plate streaking and handling biological materials. However, metal loops techniques might be time consuming, considering the amount of time spent to guarantee its cooling process through each inoculation. Furthermore, plastic loops may also represent environmental issues during its production and discard process and can also represent higher costs for the laboratory. Thus, in situations of limited resources, even the simplest materials can be restricted due to logistical and budgetary issues, especially in developing countries. Inspired by demands like these, facing an occasional shortage of supply of laboratory plastic handles, we hereby present a quality control for sterilization methods and cost-effectiveness studies towards the use of wooden sticks in a Latin American country and we discuss the possibility of the large-scale use of this technique.(AU)

A alça calibrada é um material usado classicamente em laboratório para fins de inoculação em placas e manuseio de materiais biológicos. No entanto, as técnicas de alças metálicas podem consumir muito tempo, considerando a quantidade de tempo gasto para garantir seu processo de resfriamento a cada inoculação. Além disso, alças de plástico também podem representar questões ambientais durante o processo de produção e descarte e também podem representar custos mais altos para o laboratório. Assim, em situações de recursos limitados, até os materiais mais simples podem ser restringidos devido a questões logísticas e orçamentárias, especialmente nos países em desenvolvimento. Inspirados por demandas como essas, diante de uma escassez ocasional de suprimentos de alças de plástico de laboratório, apresentamos um controle de qualidade para métodos de esterilização e estudos de custo-efetividade para o uso de varas de madeira em um país latino-americano e discutimos a possibilidade de grande uso em escala dessa técnica.(AU)

Wooden sticks for plaque streaking and microbiological inoculation might be more cost- effective, but is its large scale use feasible? Quality control methods and proof of concept / Métodos de controle de qualidade e prova de conceito para a utilização de palitos de madeira em microbiologia podem ser mais econômicas, mas seu uso em larga escala é viável? Método de controle de qualidade e prova de conceito

The loop is a material classically used in the laboratory for the purpose of plate streaking and handling biological materials. However, metal loops techniques might be time consuming, considering the amount of time spent to guarantee its cooling process through each inoculation. Furthermore, plastic loops may also represent environmental issues during its production and discard process and can also represent higher costs for the laboratory. Thus, in situations of limited resources, even the simplest materials can be restricted due to logistical and budgetary issues, especially in developing countries. Inspired by demands like these, facing an occasional shortage of supply of laboratory plastic handles, we hereby present a quality control for sterilization methods and cost-effectiveness studies towards the use of wooden sticks in a Latin American country and we discuss the possibility of the large-scale use of this technique.

A alça calibrada é um material usado classicamente em laboratório para fins de inoculação em placas e manuseio de materiais biológicos. No entanto, as técnicas de alças metálicas podem consumir muito tempo, considerando a quantidade de tempo gasto para garantir seu processo de resfriamento a cada inoculação. Além disso, alças de plástico também podem representar questões ambientais durante o processo de produção e descarte e também podem representar custos mais altos para o laboratório. Assim, em situações de recursos limitados, até os materiais mais simples podem ser restringidos devido a questões logísticas e orçamentárias, especialmente nos países em desenvolvimento. Inspirados por demandas como essas, diante de uma escassez ocasional de suprimentos de alças de plástico de laboratório, apresentamos um controle de qualidade para métodos de esterilização e estudos de custo-efetividade para o uso de varas de madeira em um país latino-americano e discutimos a possibilidade de grande uso em escala dessa técnica.

Aerobic bacteria in oral cavity of Lancehead snakes (Bothrops atrox) with stomatitis / Bactérias aeróbicas da cavidade oral de jararaca-do-norte (Bothrops atrox) com estomatite

Stomatitis is a common disease found on snake farms, and Gram-negative bacilli are the main etiological agents that play an important role as secondary sources of viral or parasitic infections. The purpose of this work was to identify the aerobic bacteria in the oral cavity of Bothrops atrox with stomatitis. Samples for microbiological examination were collected from 12 snakes bred on a commercial snake farm for venom extraction. Samples of the secretion in the oral cavity of each serpent presenting stomatitis were collected from fang sheath, using a cotton swab with sterile alginate. The samples were incubated and cultured on Petri dishes containing blood agar and XLD agar using the agar depletion technique. Bacterial growth occurred in all analyzed samples collected from the oral cavity of Bothrops atrox with stomatitis, and some of the samples contained more than one microorganism. The following Gram-negative bacteria were isolated: Escherichia coli (26.31%), Citrobacter spp. (21.05%), Proteus spp. (15.78%) and Salmonella spp. (10.52%). The only Gram-positive bacterium that was isolated was Staphylococcus spp., which was present in 26.31% of the analyzed samples.(AU)

A estomatite é uma das doenças mais frequentes em criatórios comerciais de serpentes, sendo os bacilos Gram-negativos os principais agentes etiológicos com importante papel, como fontes secundárias, nas infecções virais ou parasitárias. O objetivo do presente trabalho foi analisar as bactérias aeróbicas presentes na cavidade oral em serpentes da espécie Bothrops atrox. Utilizaram-se 12 amostras colhidas com auxílio de swab estéril na região da bainha da presa, em serpentes que apresentaram estomatite, em um criatório comercial. As amostras foram cultivadas em Ágar-sangue e Ágar XLD. Em todas as amostras analisadas, houve crescimento de, pelo menos, um microrganismo. As bactérias Gramnegativas isoladas foram Escherichia coli (26,31%), Citrobacter spp. (21,05%), Proteus spp. (15,78%) e Salmonella spp. (10,52%). A única bactéria Gram-positiva isolada foi a Staphylococcus spp., presente em 26,31% das amostras analisadas.(AU)

Persistência de Staphylococcus coagulase-negativos em glândulas mamárias de ovelhas com mastite subclínica após o tratamento antimicrobiano à secagem / Persistence of coagulase-negative Staphylococci in mammary glands of sheep with subclinical mastitis after antimicrobial treatment at drying-off

Staphylococcus coagulase-negativos (SCN) são os principais micro-organismos responsáveis pela mastite ovina e o tratamento ao final da lactação pode ser usado como método de controle contra a doença. Porém, o longo período seco apresentado pelas ovelhas em alguns sistemas de criação pode prejudicar os efeitos positivos do tratamento antimicrobiano. Os objetivos deste trabalho foram identificar as principais espécies de SCN na etiologia da mastite ovina antes e após o tratamento ao final da lactação das ovelhas, bem como investigar a persistência das espécies mais prevalentes na glândula mamária na lactação seguinte. Sessenta ovelhas foram divididas em dois grupos experimentais, um deles formado por animais sem tratamento antimicrobiano, enquanto o outro era composto por ovelhas cujas metades mamárias foram tratadas com cloxacilina-benzatina por via intramamária. As amostras de leite foram obtidas antes da secagem e aos 15 e 30 dias após o parto da lactação seguinte. As espécies prevalentes foram S. warneri, S. simulans e S. epidermidis. Clones das três espécies de maior ocorrência foram identificados antes e depois do tratamento, ou seja, mesmo com o extenso período seco entre as duas lactações consecutivas, os micro-organismos ainda foram identificados no interior da glândula mamária.

Coagulase-negative Staphylococci (CNS) are the main microorganisms responsible for mastitis in sheep and the treatment in the end of lactation can be used as a control method against disease. However, the long dry period presented by ewes in some breeding systems may impair the positive effects of antimicrobial treatment. The aims of this study were to identify the main CNS species in the etiology of ovine mastitis before and after treatment at dry-off of the ewes, as well as investigate the persistence of the most prevalent species in the mammary gland at the next lactation. Sixty sheep were divided into two experimental groups, one consisting of animals without antimicrobial treatment, while the other was composed by sheep whose mammary halves were treated with cloxacillin-benzathine intramammary. The milk samples were obtained before drying-off and at 15 and 30 days after calving the next lactation. The prevalent species were S. warneri, S. simulans and S. epidermidis. Clones of the three species more prevalent were identified before and after treatment, i.e., even with the extensive dry period between the two consecutive lactations, the microorganisms were still identified in the mammary gland.

Persistência de Staphylococcus coagulase-negativos em glândulas mamárias de ovelhas com mastite subclínica após o tratamento antimicrobiano à secagem / Persistence of coagulase-negative Staphylococci in mammary glands of sheep with subclinical mastitis after antimicrobial treatment at drying-off

Staphylococcus coagulase-negativos (SCN) são os principais micro-organismos responsáveis pela mastite ovina e o tratamento ao final da lactação pode ser usado como método de controle contra a doença. Porém, o longo período seco apresentado pelas ovelhas em alguns sistemas de criação pode prejudicar os efeitos positivos do tratamento antimicrobiano. Os objetivos deste trabalho foram identificar as principais espécies de SCN na etiologia da mastite ovina antes e após o tratamento ao final da lactação das ovelhas, bem como investigar a persistência das espécies mais prevalentes na glândula mamária na lactação seguinte. Sessenta ovelhas foram divididas em dois grupos experimentais, um deles formado por animais sem tratamento antimicrobiano, enquanto o outro era composto por ovelhas cujas metades mamárias foram tratadas com cloxacilina-benzatina por via intramamária. As amostras de leite foram obtidas antes da secagem e aos 15 e 30 dias após o parto da lactação seguinte. As espécies prevalentes foram S. warneri, S. simulans e S. epidermidis. Clones das três espécies de maior ocorrência foram identificados antes e depois do tratamento, ou seja, mesmo com o extenso período seco entre as duas lactações consecutivas, os micro-organismos ainda foram identificados no interior da glândula mamária.(AU)

Coagulase-negative Staphylococci (CNS) are the main microorganisms responsible for mastitis in sheep and the treatment in the end of lactation can be used as a control method against disease. However, the long dry period presented by ewes in some breeding systems may impair the positive effects of antimicrobial treatment. The aims of this study were to identify the main CNS species in the etiology of ovine mastitis before and after treatment at dry-off of the ewes, as well as investigate the persistence of the most prevalent species in the mammary gland at the next lactation. Sixty sheep were divided into two experimental groups, one consisting of animals without antimicrobial treatment, while the other was composed by sheep whose mammary halves were treated with cloxacillin-benzathine intramammary. The milk samples were obtained before drying-off and at 15 and 30 days after calving the next lactation. The prevalent species were S. warneri, S. simulans and S. epidermidis. Clones of the three species more prevalent were identified before and after treatment, i.e., even with the extensive dry period between the two consecutive lactations, the microorganisms were still identified in the mammary gland.(AU)

CARACTERIZAÇÃO PATOLÓGICA E MOLECULAR DA COLIBACILOSE EM FRANGOS DE CORTE DE MOÇAMBIQUE E EM GALINHAS POEDEIRAS DO BRASIL

A colibacilose aviária é uma doença bacteriana que causa elevados prejuízos na avicultura de todo o mundo. O objetivo deste estudo é descrever os aspectos patológicos, moleculares e bacteriológicos da colibacilose em frangos de corte e em galinhas provenientes de Moçambique e Brasil, respectivamente. O trabalho foi dividido em dois artigos. O primeiro descreve a colibacilose em 49 frangos de três a 35 dias e o segundo faz a pesquisa dos genes de virulência em 15 amostras de frangos e oito de galinhas poedeiras provenientes de Moçambique e Brasil, respectivamente, que vieram a óbito após e submetidos a necropsia para coleta de diversos órgãos para processamento histológico, microbiológico, imuno-histoquímico e molecular. Macroscopicamente, em frangos foi observado deposição acentuada de fibrina principalmente no coração [100% (49/49)], fígado [100% (49/49)], rins [8,2% (4/49)] e pulmão [18,4% (9/49)]. Na histologia, a lesão prevalente foi serosite fibrinoheterofílica entremeada em fibrina e acompanhada por agregados bacterianos cocobacilares. Em galinhas poedeiras foi observado durante a necropsia desidratação, palidezda crista, bem como aumento difuso do baço e material friável amarelado na luz intestinal. Microscopicamente, a enterite fibrinoheterofílica associado à fibrina, macrófagos e ocasionais células gigantes multinucleadas e plasmócitos foi a lesão mais prevalente. Na microbiologia, foram isoladas colônias puras de Escherichia coli em frangos [24,5% (12/49)] e galinhas poedeiras [12,5% (1/8)], com acentuada marcação positiva na imunohistoquímica para anticorpo anti-Escherichia coli em amostras de frango em amostras de frango analisadas. Foi realizada a reação em cadeia de polimerase (PCR) multiplex para pesquisa de cinco genes de virulência de E. coli onde houve positividade em 80% (12/15) de frangos de corte e 62,5% (5/8) em galinhas. Com os resultados obtidos, concluiu-se que a colibacilose foi a causa da morte dos frangos e das galinhas em estudo infectadas por cepas patogênicas resistentes e multirresistentes para vários antimicrobianos apesar destas terem proveniência bem como manejo diferente.

Colibacillosis is a bacterial disease that causes high economic losses in the poultry industry worldwide. The aimed of this study is describe the pathological, molecular and bacteriological aspects of colibacillosis in broiler chickens and in layers from Mozambique and Brazil, respectively. The study was separated in two papers. The first describe the disease in Forty-nine broiler chickens with 3 to 35 days, the second paper screams virulance genes in fifteen poultry and in eight layer samples from Mozambique and Brazil repectively that died and necropsied to histologic, microbiology, imuno-histoquimic and molecular analise. Macroscopically, was observed in broiler chickens severe fibrin deposition mainly in the heart [100% (49/49)], liver [100% (49/49)], kidneys [8.2% (4/49)] and in the lungs [18.4% (9/49)]. Microscopically, the fibrin-hecterofilic enteritis associated with fibrin, macrophags and occasional multinucleated giant cells and plasm cells was prevalent lesion observed. In microbiological culture was isolated E. coli colonies in broilers [24,5% (12/49)] and in hens chickens [12,5% (1/8). 49)], with marked positive staining for anti-Escherichia coli antibody in the immunohistochemistry to broilers sample. Multiplex polymerase chain reaction (PCR) was performed for despite to five E. coli virulence genes, there were positivity in 80% (12/15) of broiler chickens and 20% (1/5) in layer. With the results obtained, can conclude that colibacillosis was the cause of death for broiler chickens and layers that were infected with pathogenic and resistant strains for many antimicrobial, although they had origins and management differences.

Phenotypic and molecular detection of Salmonella sp. on growing, rearing and production phases in a commercial group of laying hens / Detecção fenotípica e molecular de Salmonella sp. nas fases de cria, recria e produção em lote de poedeiras comerciais

This present study was developed with the objective of detect Salmonella sp. by conventional bacteriology and qPCR techniques in samples of flooring material from transport crates (meconium); raising environment (swab of cages and drinking fountains); cloacal swab; food and insects from growing, rearing and production phases in a commercial group of laying hens. A total of 864 samples were collected, among whom 248 originated from growing, 392 from rearing and 224 from production phase. Among the 864 samples, 2,8% where positives in bacteriologic technique and 15.3% in qPCR. Contamination was higher in growing and rearing phases and declined in production phase. Twenty four isolations of Salmonella where typified as Salmonella Agona (41.7%), Salmonella Livingstone (33.3%), Salmonella Cerro (16.7%), Salmonella Senftenberg (4.2%) and Salmonella Schwarzengrund (4.2%). During growing phase Salmonella Livingstone was identified. These findings suggest vertical contamination in the group. During rearing and production phases, isolated materials belong to serovars Agona, Cerro, Senftenberg and Schwarzengrund, pointing to horizontal contamination. It is possible to conclude that both vertical and horizontal contaminations are important during the cycle of commercial egg production and contamination in rearing phase is higher than in growing and production phases.(AU)

O presente estudo foi desenvolvido com objetivo de detectar Salmonella sp. pelas técnicas de bacteriologia convencional e PCR em tempo real em amostras de forros de caixas de transporte (mecônio), de ambientes de criação (suabes de gaiola e de bebedouro), suabes de cloaca, ração e insetos oriundos das fases de cria, recria e produção de um lote de poedeiras comerciais. Foram coletadas 864 amostras das quais 248 foram originadas da cria, 392 da recria e 224 da produção. Das 864 amostras 2,8% foram positivas na técnica bacteriológica e 15,3% no PCR em tempo real. A contaminação aumentou da fase de cria para a recria e declinou na fase de produção. Vinte e quatro isolados de Salmonella foram tipificados como Salmonella Agona (41,7%), Salmonella Livingstone (33,3%), Salmonella Cerro (16,7%), Salmonella Senftenberg (4,2%) e Salmonella Schwarzengrund (4,2%). Na fase de cria identificou-se Salmonella Livingstone. Esses achados sugerem a contaminação vertical do lote. Nas fases de recria e produção os isolados pertenceram aos sorovares Agona, Cerro, Senftenberg e Schwarzengrund apontando para a contaminação horizontal. Pode-se concluir com este estudo que tanto a contaminação vertical como a horizontal são importantes no ciclo de produção de ovos comerciais e que a contaminação na fase de recria é maior que na fase de cria e de produção.(AU)

Phenotypic and molecular detection of Salmonella sp. on growing, rearing and production phases in a commercial group of laying hens / Detecção fenotípica e molecular de Salmonella sp. nas fases de cria, recria e produção em lote de poedeiras comerciais

This present study was developed with the objective of detect Salmonella sp. by conventional bacteriology and qPCR techniques in samples of flooring material from transport crates (meconium); raising environment (swab of cages and drinking fountains); cloacal swab; food and insects from growing, rearing and production phases in a commercial group of laying hens. A total of 864 samples were collected, among whom 248 originated from growing, 392 from rearing and 224 from production phase. Among the 864 samples, 2,8% where positives in bacteriologic technique and 15.3% in qPCR. Contamination was higher in growing and rearing phases and declined in production phase. Twenty four isolations of Salmonella where typified as Salmonella Agona (41.7%), Salmonella Livingstone (33.3%), Salmonella Cerro (16.7%), Salmonella Senftenberg (4.2%) and Salmonella Schwarzengrund (4.2%). During growing phase Salmonella Livingstone was identified. These findings suggest vertical contamination in the group. During rearing and production phases, isolated materials belong to serovars Agona, Cerro, Senftenberg and Schwarzengrund, pointing to horizontal contamination. It is possible to conclude that both vertical and horizontal contaminations are important during the cycle of commercial egg production and contamination in rearing phase is higher than in growing and production phases.(AU)

O presente estudo foi desenvolvido com objetivo de detectar Salmonella sp. pelas técnicas de bacteriologia convencional e PCR em tempo real em amostras de forros de caixas de transporte (mecônio), de ambientes de criação (suabes de gaiola e de bebedouro), suabes de cloaca, ração e insetos oriundos das fases de cria, recria e produção de um lote de poedeiras comerciais. Foram coletadas 864 amostras das quais 248 foram originadas da cria, 392 da recria e 224 da produção. Das 864 amostras 2,8% foram positivas na técnica bacteriológica e 15,3% no PCR em tempo real. A contaminação aumentou da fase de cria para a recria e declinou na fase de produção. Vinte e quatro isolados de Salmonella foram tipificados como Salmonella Agona (41,7%), Salmonella Livingstone (33,3%), Salmonella Cerro (16,7%), Salmonella Senftenberg (4,2%) e Salmonella Schwarzengrund (4,2%). Na fase de cria identificou-se Salmonella Livingstone. Esses achados sugerem a contaminação vertical do lote. Nas fases de recria e produção os isolados pertenceram aos sorovares Agona, Cerro, Senftenberg e Schwarzengrund apontando para a contaminação horizontal. Pode-se concluir com este estudo que tanto a contaminação vertical como a horizontal são importantes no ciclo de produção de ovos comerciais e que a contaminação na fase de recria é maior que na fase de cria e de produção.(AU)

PERFIL BACTERIOLÓGICO E CITOLÓGICO DE LAVADO TRAQUEOBRÔNQUICO DE EQUINOS SADIOS EM SISTEMA INTENSIVO E EXTENSIVO

A equinocultura é uma atividade econômica relevante em grande parte do mundo, sendo as afecções respiratórias responsáveis por grandes perdas econômicas e quedas de desempenho esportivo. Objetivou-se com essa pesquisa traçar qualitativamente o perfil citológico e microbiológico do aparelho respiratório superior de equinos em duas situações de regimes de criações por meio de lavado traqueobrônquico. Para tanto, foram analisados dezoito animais, separados em dois grupos: G1, com nove equinos mantidos em sistema extensivo de criação e G2, com nove equinos mantidos em baias no regime intensivo. Foram realizadas análises citológicas e bacteriológicas desses lavados. Os resultados citológicos foram condizentes com a literatura, observando-se a predominância celular de macrófagos alveolares. Numa avaliação comparativa, o G2 permitiu a detecção de hemossiderófagos, comprovando que os animais mantidos em baias possuem alto índice de partículas em superfície, aumentando a incidência de Hemorragia Pulmonar Induzida por Exercício (HPIE). A avaliação bacteriana evidenciou no G1 isolamento de 13 espécies no G1 e 19 no G2, com predominância de bacilos em ambos os grupos. Na pesquisa, foi possível concluir que há diferença qualitativa da flora bacteriana e de células inflamatórias entre os dois regimes de criação.

Echinoculture is a relevant economic activity in much of the world, with respiratory diseases responsible for large economic losses and declines in sports performance. The objective of this research was to qualitatively trace the cytological and microbiological profile of the upper respiratory tract of horses in two situations of breeding regimes. Among the various methods of diagnosis and prognosis evaluation for patients with respiratory diseases, it was decided to evaluate the samples obtained in this study by means of tracheobronchial lavage. For this, eighteen animals were analyzed, separated into two groups: G1, with nine horses kept in an extensive breeding system and G2, with nine horses kept in bays under intensive regime. Cytological and bacteriological analyzes of these washes were carried out. The cytological results were consistent with the literature, observing the cellular predominance of alveolar macrophages. In a comparative evaluation, the G2 allowed the detection of haemosiderophages, proving that the animals kept in bays have a high surface particle index, increasing the incidence of Exercise Induced Pulmonary Hemorrhage (HPIE). The bacterial avalieted evidenced in G1 isolation of 13 species in G1 and 19 in G2, with predominance of bacilli in both groups. In the research, it was possible to conclude that there is qualitative and quantitative difference of bacterial flora and inflammatory cells between the two breeding regimes.

Identificação de Mycobacterium bovis em carcaças de bovinos abatidos no estado da Bahia, Brasil, por métodos bacteriológico e molecular / Identification of Mycobacterium bovis in carcasses of cattle slaughtered in Bahia state, Brazil by bacteriological and molecular methods

O objetivo do presente trabalho foi utilizar métodos bacteriológicos e moleculares para a identificação do Mycobacterium bovis em lesões observadas em carcaças de bovinos durante a inspeção post mortem de rotina em matadouros-frigoríficos com serviço de inspeção oficial. Foram acompanhados o abate e a inspeção de 825.394 bovinos, sadios, ao exame ante mortem pelo serviço de inspeção oficial em 10 matadouros-frigoríficos do estado da Bahia, entre abril de 2009 e abril de 2012. Cento e oitenta bovinos apresentaram lesões sugestivas de tuberculose e outras linfadenites, as quais foram avaliadas quanto à presença de Mycobacterium bovis por exame bacteriológico e pela PCR multiplex. A maioria das lesões estava localizada em linfonodos do trato respiratório e 71% eram provenientes de bovinos machos com até 32 meses de idade. No isolamento bacteriano, 13,9% (25/180) das amostras apresentavam colônias pequenas, de superfície granular e de coloração creme-amareladas, em meio de cultura Stonebrink-Leslie, e o crescimento médio foi de 34 dias. Todos os esfregaços dos isolados evidenciaram BAAR, e, pela PCR multiplex, 56% (14/25) dos isolados foram identificados como M. bovis. A associação entre exame post mortem, bacteriológico e PCR multiplex permitiu a identificação do agente de forma rápida e em regiões com status sanitário de baixa prevalência, demonstrando ser importante para a detecção dos focos de tuberculose bovina e o auxílio nos programas de controle e erradicação da tuberculose.(AU)

The aim of the present study was to perform bacteriological and molecular methods for identification of Mycobacterium bovis in lesions derived from bovine carcasses detected during routine post-mortem examination in officially inspected slaughterhouses. We checked the slaughter and inspection of 825,394 bovines, health upon ante-mortem examination, by the official service in 10 slaughterhouses of Bahia state from April, 2009 to April 2012. Lesions suggestive of tuberculosis were collected from 180 bovines and further evaluated by bacteriology and multiplex PCR. The majority of lesions were located in the respiratory tract lymph nodes and 71% were from male bovines up to 32 months old. 13.9% of samples presented small, granular and creamy-yellowish colonies after being cultured in Stonebrink-Leslie with an average growth time of 34 days. All smears from the isolated samples were Acid Fast Bacilli (AFB) and among them 56% were identified by mPCR as M. bovis. Thus, the association between post-mortem examination, culture and multiplex PCR allowed the bacillus identification in a reduced time and in regions of low prevalence, pointing out its importance for bovine tuberculosis detection and as a supportive tool for the tuberculosis control and eradication program.(AU)

Experimental infection of one-day-old chicks with Salmonella Serotypes Previously isolated from poultry facilities, wild birds, and swine

In order to maintain the high production and export rates achieved by the Brazilian poultry industry, it is necessary to prevent and control certain disease agents, such as Salmonella spp. Using bacterial cultures, the aim of the present study was to investigate the prevalence of Salmonella spp. in specimens collected from broiler facilities. Local wild birds were also sampled, as well as the feces of swine housed on the poultry farm. After sample collection, the isolated serotypes were subsequently inoculated into broiler chicks to determine their effects. Positive samples were collected from the following locations in the poultry facilities: poultry litter (S. serotype 4,5,12:R:-; S. Heidelberg; S. Infantis), broiler feces (S. Heidelberg; S. serotype 6,7:R:-; S. serotype 4,5,12:R:-; S. Tennessee), water (S. Glostrup; S. serotype 6,8:d:-;), and lesser mealworms (Alphitobius diaperinus) found in the litter (S. Tennessee). Among the 36 wild birds captured, S. Heidelberg was isolated from one bird's organs and intestinal contents (Colaptes campestris), and S. Enteritidis was isolated from another bird's intestinal contents (Zenaida auriculata). Salmonella Panama and Salmonella Typhimurium were isolated from swine feces. One-day-old chicks (150) were divided into 10 groups of 15 animals each. Each group was orally inoculated with a previously isolated serotype of Salmonella. Soft stools were observed on the cage floor and around the birds' cloaca between 3 and 12 days post-infection (dpi). The different serotypes of Salmonella used to inoculate the chicks were re-isolated from the spleen, liver, and cecal content samples of the infected birds on 15 and 21 dpi.

Experimental infection of one-day-old chicks with Salmonella Serotypes Previously isolated from poultry facilities, wild birds, and swine

In order to maintain the high production and export rates achieved by the Brazilian poultry industry, it is necessary to prevent and control certain disease agents, such as Salmonella spp. Using bacterial cultures, the aim of the present study was to investigate the prevalence of Salmonella spp. in specimens collected from broiler facilities. Local wild birds were also sampled, as well as the feces of swine housed on the poultry farm. After sample collection, the isolated serotypes were subsequently inoculated into broiler chicks to determine their effects. Positive samples were collected from the following locations in the poultry facilities: poultry litter (S. serotype 4,5,12:R:-; S. Heidelberg; S. Infantis), broiler feces (S. Heidelberg; S. serotype 6,7:R:-; S. serotype 4,5,12:R:-; S. Tennessee), water (S. Glostrup; S. serotype 6,8:d:-;), and lesser mealworms (Alphitobius diaperinus) found in the litter (S. Tennessee). Among the 36 wild birds captured, S. Heidelberg was isolated from one bird's organs and intestinal contents (Colaptes campestris), and S. Enteritidis was isolated from another bird's intestinal contents (Zenaida auriculata). Salmonella Panama and Salmonella Typhimurium were isolated from swine feces. One-day-old chicks (150) were divided into 10 groups of 15 animals each. Each group was orally inoculated with a previously isolated serotype of Salmonella. Soft stools were observed on the cage floor and around the birds' cloaca between 3 and 12 days post-infection (dpi). The different serotypes of Salmonella used to inoculate the chicks were re-isolated from the spleen, liver, and cecal content samples of the infected birds on 15 and 21 dpi.

Experimental infection of one-day-old chicks with Salmonella Serotypes Previously isolated from poultry facilities, wild birds, and swine

In order to maintain the high production and export rates achieved by the Brazilian poultry industry, it is necessary to prevent and control certain disease agents, such as Salmonella spp. Using bacterial cultures, the aim of the present study was to investigate the prevalence of Salmonella spp. in specimens collected from broiler facilities. Local wild birds were also sampled, as well as the feces of swine housed on the poultry farm. After sample collection, the isolated serotypes were subsequently inoculated into broiler chicks to determine their effects. Positive samples were collected from the following locations in the poultry facilities: poultry litter (S. serotype 4,5,12:R:-; S. Heidelberg; S. Infantis), broiler feces (S. Heidelberg; S. serotype 6,7:R:-; S. serotype 4,5,12:R:-; S. Tennessee), water (S. Glostrup; S. serotype 6,8:d:-;), and lesser mealworms (Alphitobius diaperinus) found in the litter (S. Tennessee). Among the 36 wild birds captured, S. Heidelberg was isolated from one bird's organs and intestinal contents (Colaptes campestris), and S. Enteritidis was isolated from another bird's intestinal contents (Zenaida auriculata). Salmonella Panama and Salmonella Typhimurium were isolated from swine feces. One-day-old chicks (150) were divided into 10 groups of 15 animals each. Each group was orally inoculated with a previously isolated serotype of Salmonella. Soft stools were observed on the cage floor and around the birds' cloaca between 3 and 12 days post-infection (dpi). The different serotypes of Salmonella used to inoculate the chicks were re-isolated from the spleen, liver, and cecal content samples of the infected birds on 15 and 21 dpi.(AU)

PLEUROPNEUMONIA POR Mannheimia haemolytica EM CAPRINOS ASSOCIADA AO ESTRESSE DE TRANSPORTE NO BRASIL

A pleuropneumonia por Mannheimia haemolytica é uma enfermidade com elevada morbidade e mortalidade de ruminantes de todas as idades. O objetivo desse estudo é descrever os aspectos epidemiológicos, patológicos, bacteriológicos e moleculares de pleuropneumonia em caprinos transportados da região Nordeste para a região sul do Brasil. Quarenta caprinos (seis meses a quatro anos de idade) vieram a óbito em dois períodos: durante o transporte e dois a três dias após o desembarque. Os sinais clínicos observados incluíam dispneia, secreção nasal mucopurulenta e tosse. Estes caprinos foram submetidos ao exame de necropsia, na qual foram colhidos múltiplos fragmentos de órgãos para análise histopatológica, bacteriológica e molecular. Macroscopicamente, todos os caprinos apresentaram áreas de consolidação pulmonar, predominantemente da região cranioventral, associadas à deposição de grande quantidade de fibrina, com espessamento e aderência pleural em 90% (36/40) dos casos, além de hidrotórax em 37,5% (15/40) dos casos. Histologicamente, as lesões em todos os caprinos eram constituídas por pleuropneumonia fibrinossupurativa, caracterizada por infiltrado inflamatório difuso acentuado de neutrófilos em pleura, alvéolos, brônquios e bronquíolos, associado à deposição difusa acentuada de fibrina, bem como edema alveolar. Através do exame bacteriológico, foram isoladas bactérias do gênero Mannheimia em todos os casos. Foi realizada a reação em cadeia de polimerase (PCR) para o gene 16S rDNA de Mannheimia spp., na qual 26 amostras resultaram positivas. Através do sequenciamento molecular, obteve-se 98% de identidade para o gene 16S rDNA e 98% de semelhança com Mannheimia haemolytica em todos isolados. M. haemolytica é a principal bactéria causadora de pleuropneumonia em caprinos submetidos ao estresse.

Pleuropneumonia by Mannheimia haemolytica is a disease that causes high morbidity and mortality in ruminants of all ages. This study describes the epidemiological, pathological, bacteriological and molecular features of pleuropneumonia in goats transported from the Northeast region to Southern Brazil. Forty goats (six months-old to four years-old) died in two periods: during transportation and two or three days after unloading. Clinical signs included dyspnea, mucopurulent nasal discharge and cough. These goats were necropsied and multiple organ fragments were collected for histopathological, bacteriological and molecular analysis. Grossly, all goats had pulmonary consolidation, predominantly affecting the cranioventral lung region, associated to a severe fibrin deposition, with pleural thickening and pleural adhesion in 90% (36/40) of the cases and hydrothorax in 37.5% (15/40) of the cases. Histologically, lesions in all goats were composed by a fibrinosupurative pleuropneumonia, characterized by a diffuse inflammatory infiltration of neutrophils involving the pleura, alveoli, bronchi and bronchioli, associated with a severe fibrin deposition and alveolar edema. Mannheimia genus bacteria were isolated in all cases. The polymerase chain reaction (PCR) for the 16S rDNA gene of Mannheimia spp. was performed in 26 samples, and a positive result was obtained. Through molecular sequencing an identity of 98% for the 16 rDNA gene and 98% resemblance to Mannheimia haemolytica in all isolates were observed. M. haemolytica is the main bacteria causing pleuropneumonia in goats subjected to stress.

Estudo da ocorrência de infecção hospitalar em cães e gatos em um centro cirúrgico veterinário universitário / Study of nosocomial infections in dogs and cats in an academic veterinary surgical center

Infecção hospitalar ou nosocomial é aquela adquirida durante a hospitalização do paciente, e que pode ser relacionada os procedimentos hospitalares invasivos realizados durante o internamento. O presente trabalho teve como objetivos estudar a ocorrência de infecção hospitalar em animais atendidos em um Centro Cirúrgico Veterinário Universitário de Pequenos Animais submetidos a procedimentos cirúrgicos e/ou invasivos; discutir as possíveis causas de infecção, detectar as bactérias presentes quando possível e verificar a sensibilidade antimicrobiana destes agentes. O trabalho foi desenvolvido através do acompanhamento diário de 131 animais internados neste setor e busca ativa de casos de infecção hospitalar. Em 104 animais (91 cães e 13 felinos), foram realizados 113 procedimentos cirúrgicos e em 27 animais condutas não cirúrgicas tais como acompanhamento de parto e pós-parto, desobstrução uretral e colocação de talas. Todos os animais foram submetidos à colocação de cateter para fluidoterapia e/ou aplicação de medicamentos e/ou anestésicos em algum momento durante o internamento. O índice de infecção do sítio cirúrgico foi de 7,96% sendo 4,54% nas cirurgias limpas, 4,25% nas cirurgias limpa-contaminadas, 10,53% nas cirurgias contaminadas e 16% nas cirurgias infectadas. A taxa de infecção hospitalar não cirúrgica no paciente cirúrgico foi de 2,88% e 3,7% no paciente não cirúrgico. Foram cultivados sete isolados bacterianos, sendo Pseudomonas sp. (3), Streptococcus sp. (2), Acinetobacter sp. (1) e bacilo Gram negativo (1), constatando-se multirresistência bacteriana alta em todos os isolados. A duração da cirurgia e os tempos de internamento pré e pós-operatório não influenciaram na ocorrência de infecção hospitalar, mas os fatores que provavelmente colaboraram para a ocorrência de infecções no presente trabalho foram a própria gravidade da doença que motivou o tratamento, o tipo de procedimento realizado e a gravidade das lesões concomitantes.(AU)

Hospital or nosocomial infections are infections acquired during patient hospitalization, and that can be related to surgical and invasive procedures performed during the hospital admission. The present study aimed to investigate the occurrence of nosocomial infection in animals treated at a Veterinary Surgical Center of Small Animals, submitted to surgical or invasive procedures, to discuss the possible causes of infection, to detect the bacteria present when possible, and to verify the antimicrobial sensitivity of these agents. The study was developed through daily monitoring of 131 animals admitted in this surgical center and doing active surveillance of cases of nosocomial infection. In 104 animals (91 dogs and 13 cats), 113 surgical procedures were performed, and in 27 animals were performed non-surgical procedures such monitoring of delivery and postpartum, urethral catheterization and placement of splints. All animals were submitted to catheter placement for fluid therapy and application of medications and/or anesthetic at some point during hospitalization. The rate of surgical site infection was 7.96%, and by categories was 4.54% in clean surgeries, 4.25% in clean-contaminated surgeries, 10.53% in contaminated surgeries, and 16% in infected surgeries. The rate of non-surgical nosocomial infection in surgical patients was 2.88% and in the non-surgical patient was 3.7%. Bacteria were cultured as follows: Pseudomonas sp. (3), Streptococcus sp. (2), Acinetobacter sp. (1) and Gram negative bacilli (1), and high bacterial multidrug resistance were observed in all isolates. The duration of surgery and pre and postoperative time of hospitalization did not affect the occurrence of nosocomial infection, but factors that probably contributed to the occurrence of infections in this study were the severity of the condition responsible for the treatment, the kind of procedure performed and the severity of lesions.(AU)

CARACTERIZAÇÃO DO OVO DE EMA (Rhea americana), QUALIDADE FÍSICO-QUÍMICA, MICROBIOLÓGICA E PROTEÔMICA

A produção comercial de grandes aves no Brasil começou a se tornar significativa na década de 1980. O desenvolvimento das fazendas emas para produção de ovos representa uma alternativa para a diversificação das atividades agropecuárias, alinhando-se aos projetos estabelecidos pela FAO para a Gestão Sustentável dos Recursos Naturais, que estabelece a introdução de uma matriz de produção agroecológica para sustentabilidade socioambiental. Com a finalidade de agregar conhecimento sobre ovos de emas para uso comercial, este trabalho foi realizado com a determinação da composição físico-química, o perfil de contaminação bacteriana natural e experimental com Salmonella Gallinarum, o estudo das proteínas no albúmen e na gema e a avaliação reológica características dos ovos de emas armazenados por 28 dias a uma temperatura de 10ºC e analisados nos períodos de um, sete, 14, 21 e 28 dias. Os resultados indicaram variabilidade dos pesos, dimensões, espessura e porosidade das cascas, relacionadas a aves silvestres que não sofreram processos de seleção e melhoramento para características de uniformidade destes ovos, porém esta variabilidade não apresenta interferência na qualidade dos ovos armazenados em diferentes períodos. A qualidade avaliada em Unidade Haugh permanece satisfatória até 21 dias. O pH do albúmen sofre alteração significativa em um período menor (14 dias), comparado às gemas (21 dias). As proteínas totais seguem a mesma tendência da alteração do pH, com alterações relacionadas à degradação proteica aos 14 dias para o albúmen e aos 21 dias para a gema de ovos de emas. Relacionado à contaminação microbiológica, os ovos de emas apresentam perfil de contaminação de acordo com a ocorrência em locais de postura. A irradiação de ultravioleta UVC não é eficiente na descontaminação das cascas destes ovos. As bactérias (Citrobacterfreundii e Pseudomonas spp.) Gram-negativas aeróbicas mesófilas não são inibidas eficientemente em temperatura de 10oC em ovos de emas. Ovos de emas devem ser armazenados por período de até 21 dias. A membrana interna da casca desempenha uma barreira eficiente à contaminação por Salmonella Gallinarum até os 14 dias. Aos 28 dias ocorre a inativação dessa bactéria nos ovos de emas.Nos estudos proteômicos foram identificadas 125 proteínas, das quais a ovalbumina é expressa em 17 isoformas, a proteína TENP é expressa em nove isoformas no albúmen e uma presente na gema, a lisozima expressa em sete isoformas. Na gema, as proteínas relacionadas aos processos alergênicos apresentam menor abundância comparada à ocorrência destas em ovos de outras espécies de aves. Outras proteínas estão presentes no ovo de ema e novos estudos devem ser realizados para compreensão de suas funcionalidades. No armazenamento dos ovos a degradação proteica na fração do albúmen ocorre a partir dos 14 dias e na gema a partir de 21 dias indicando o período maior para utilização desta fração sem alteração das qualidades proteicas. A temperatura de estruturação do gel (gelificação) para o albúmen e para a gema são superiores aos observados em ovos comerciais, e não sofrem variações significativas no armazenamento.Os resultados obtidos no presente experimento indicaram um produto diferenciado nos aspectos estudados e corroboram para o promissor crescimento da raticultura como uma atividade pecuária sustentável, novas matérias-primas para a indústria alimentícia e produção de proteína animal de alta qualidade para consumo humano.

The commercial production of large birds in Brazil began to become significant in the 1980s. The development of egg-producing farms represents an alternative for the diversification of agricultural activities, in line with projects established by FAO for the Sustainable Management of Natural Resources, which establishes the introduction of an ecological production matrix for environmental sustainability. With the purpose of adding knowledge about emas eggs for commercial use, this work was carried out with the determination of the physical and chemical composition, the profile of natural and experimental bacterial contamination bySalmonella Gallinarum, the study of proteins in albumen and yolk and the rheological evaluation of the eggs of emas stored for 28 days at a temperature of 10ºC and analyzed in the periods up to 28 days. The results indicated variability of the weights, dimensions, thickness and porosity of the eggshells, related to wild birds that did not undergo selection and breeding procedures for uniformity characteristics of these eggs, but this variability does not interfere in the quality of the eggs stored in different periods. The quality assessed in Haugh Unit remains satisfactory for up to 21 days. The albumin pH changes significantly over a shorter period (14 days) compared to the buds (21 days). Total proteins follow the same trend of pH change, with alterations related to protein degradation at 14 days for albumen and at 21 days for egg yolk. Related to the microbiological contamination, the eggs present a profile of contamination according to the occurrence in places of posture. Ultraviolet UVC irradiation is not efficient in the decontamination of eggshells. Gram-negative aerobic mesophilic bacteria (Citrobacterfreundii and Pseudomonas spp.) Are not efficiently inhibited at 10oC in emas eggs. Emus eggs should be stored for up to 21 days. The inner shell membrane plays an effective barrier to Salmonella Gallinarum contamination up to 14 days. At 28 days the inactivation of this bacterium occurs in the eggs. In the proteomic studies 125 proteins were identified, of which ovalbumin is expressed in 17 isoforms, the TENP protein is expressed in nine isoforms in the albumen and one in the yolk, the lysozyme expressed in seven isoforms. In the yolk, the proteins related to the allergenic processes present smaller abundance compared to the occurrence of these in eggs of other species of birds. Other proteins are present in the egg of ema and new studies must be carried out to understand its functionalities. In egg storage protein degradation in the albumen fraction occurs from 14 days and in the yolk from 21 days indicating the longer period to use this fraction without changing the protein qualities. The gel structuring temperature (gelation) for albumin and yolk are higher than those observed in commercial eggs, and do not suffer significant variations in storage. The results obtained in the present experiment indicated a differentiated product in the aspects studied and corroborate for the promising growth of raticulture as a sustainable livestock activity, new raw materials for the food industry and production of high quality animal protein for human consumption.

Avaliação bacteriológica e histopatológica de pleurites crônicas no abate de suínos

As aderências de pleura estão entre as principais causas de desvios de carcaças para o Departamento de Inspeção Final (DIF) em abatedouro de suínos. As carcaças desviadas para o DIF recebem um carimbo de Não Exportar (NE) que impossibilita a exportação, trazendo significativos prejuízos aos abatedouros. A maioria das lesões de pleura encontradas no abate são sequelas de infecções bacterianas. As pleurites podem ou não estar acompanhadas de lesões pneumônicas que podem estar associadas a diferentes bactérias como Actinobacillus pleuropneumoniae (A. pleuropneumoniae), Haemophilus parasuis (H. parasuis), Mycoplasma hyorhinis (M. hyorhinis), Pasteurella multocida A e D (P. multocida A e P. multocida D) e Streptococcus suis (S. suis). O objetivo do estudo foi avaliar as lesões de pleurites crônicas através de exames bacteriológicos e histopatológicos, fornecendo embasamento para subsidiar os agentes de inspeção quanto aos critérios de inspeção. Também foi analisada a correspondência entre o exame macroscópico dos inspetores e o exame patológico quanto a evolução das lesões e realizado uma análise do impacto econômico da não exportação de carcaças com lesões cicatriciais de pleurites. Foram estudadas 200 carcaças em abatedouro de suínos com Serviço de Inspeção Federal. As pleurites foram classificadas visualmente quanto ao estágio evolutivo como pleurite crônica quando havia aderência firme do pulmão à caixa costal, sem evidência de exsudato na lesão. O primeiro estudo analisou bacteriologicamente e histopatologicamente 100 carcaças, sendo 50 com lesões de pleurite crônica com lesão pulmonar adjacente e 50 com lesões crônicas sem lesão pulmonar. O segundo estudo avaliou 100 carcaças sendo 50 com pleurite crônica e 50 sem lesão, quanto a presença de agentes viáveis através do isolamento bacteriológico e PCR, para todos agentes já acima citados acrescentando o M. hyorhinis. Não houve isolamento bacteriano a partir do suabe de pleura (0/200), independente da presença de lesão pulmonar adjacente, evidenciando a ausência de bactérias nas aderências entre as pleuras parietal e visceral. O isolamento ficou restrito às lesões pulmonares adjacentes em 35/50 (70%), sendo que os agentes isolados foram : P. multocida A 21/50 (42%); P. multocida D 06/50 (12%); S. suis 02/50 (4%); A. pleuropneumoniae 02/50 (4%); P. multocida A + S. suis 03/50 (6%); A. pleuropneumoniae + S. suis 01/50 (2%). Levando em consideração a evolução das lesões o exame macroscópico teve uma relação de 100% com o exame histológico. No segundo estudo não houve isolamento de agentes etiológicos das pleurites nos suabes de pleura, havendo identificação nas carcaças com lesão crônica uma amostra PCR positiva para S. suis 1/50 (2%) e quatro amostras positivas para S. suis 4/50 (8%). Considerando uma condição hipotética o impacto econômico com a não exportação é de R$ 2,57 por suíno abatido. A ausência de bactérias viáveis nas lesões crônicas de aderências firmes entre as pleuras em suínos sem qualquer outra repercussão na carcaça, independente de apresentarem lesão pulmonar, suporta a avaliação macroscópica como ferramenta confiável para a tomada de decisão quanto ao destino da carcaça no momento da inspeção.

Adherences of pleura are among the main causes of deviations of carcasses for the Department of Final Inspection (DIF) in pigs slaughterhouse. These carcasses sent to the DIF receive an NE stamp that makes it impossible to export, bringing up significant losses to the slaughterers. Most of the pleura lesions found at slaughter are sequels of bacterial infections. The pleuritis may be or may not be accompanied by pneumonic lesions that may be associated with different bacterias such as Actinobacillus pleuropneumoniae (A. pleuropneumoniae), Haemophilus parasuis (H. parasuis), Mycoplasma hyorhinis (M. hyorhinis), Pasteurella multocida A and D (P. multocida A and P. multocida D) and Streptococcus suis (S. suis). The objective of the study was the bacteriological and histopathological evaluation of the chronic lesions of the pleuritis in order to verify if there is the presence of viable bacteria in these lesions, providing basement to subsidize the inspection agents regarding to the inspection criteria. It was also analyzed the correspondence between the macroscopic examination of the inspectors and the pathological exam regarding the evolution of the lesions and it was done an analysis of the economic impact of the non-export of carcasses with cicatricial lesions of pleuritis. In swine slaughterhouse 200 carcasses were studied with Federal Inspection Service. The Pleuritis were visually classified for the evolutionary stage as chronic pleuritis when there was firm adherence of the lung to the costal chest, without evidence of exudate in the lesion. The first study analyzed bacteriologically and histopatologically 100 carcasses, 50 of them with chronic pleuritis lesions with adjacent lung lesions and the other 50 with chronic lesions without pulmonary lesion. The second study evaluated 100 carcasses, 50 with chronic pleuritis and 50 without lesions, as well as the presence of viable agents through the bacteriological isolation and PCR, for all agents mentioned, before adding M. hyorhinis. There was not bacterial isolation from the pleuras swab (0/200), regardless of the presence of adjacent lung lesion, evidencing the absence of bacteria in the adhesions between the parietal and visceral pleura. The isolation was restricted to adjacent lung lesions in 35/50 (70%), and the isolated agents were: P. multocida A 21/50 (42%); P. multocida D 06/50 (12%); S. suis 02/50 (4%); A. pleuropneumoniae 02/50 (4%); P. multocida A + S. suis 03/50 (6%); A. pleuropneumoniae + S. suis 01/50 (2%). The macroscopic exam had a 100% relation with the histopathological examination taking into consideration the evolution of the lesions. In the second study there was not isolation of etiological agents of pleuritis in the pleuras swab, getting the identification in the carcasses with chronic lesions a positive PCR sample for S. suis 1/50 (%), and four positive samples for S. suis 4/50 (%). Considering a hypothetical condition to the economic impact with non-exportation is R$ 2.57 per slaughtered swine. The absence of viable bacteria in the chronic lesions of firm adherenses pleura in swines without any other repercussion in the carcass, regardless of the presence of lung lesions, it supports the macroscopic evaluation as a reliable tool to take the decision for the destination of the carcass at the inspection time.

ISOLAMENTO E CARACTERIZAÇÃO MOLECULAR DE Campylobacter TERMOTOLERANTES DE ORIGEM AVÍCOLA

As espécies termotolerantes de Campylobacter são frequentemente relatadas como uma das mais importantes causas de gastroenterite humana, ocasionada principalmente pelo consumo de produtos avícolas contaminados. O conhecimento da prevalência do patógeno nesses produtos e a correlação genética entre os isolados são de extrema importância epidemiológica. Diante disso, foi proposto avaliar a prevalência das espécies termorresistentes, com a utilização de método molecular para identificação de Campylobacter jejuni, Campylobacter coli e Campylobacter lari e a utilização de marcadores moleculares de genotipagem no intuito de compreender a diversidade genética das espécies patogênicas. Para isso, foram avaliadas 300 carcaças de frangos refrigeradas coletadas em sete indústrias frigoríficas submetidas ao Serviço de Inspeção Federal (SIF). Utilizou-se primeiramente a técnica de isolamento bacteriano, sendo possível determinar a prevalência de Campylobacter em 34 carcaças, totalizando 11,3% do total de amostras avaliadas. Verificou-se que, das sete indústrias, duas (A e C representando 28,5%) apresentaram Campylobacter, destas, apenas uma (indústria A) foi verificada a presença do patógeno em mais de uma coleta e em diferentes estações do ano. Foi possível obter 48 isolados de Campylobacter os quais foram submetidos à análise de PCR em tempo real para confirmação do gênero e determinação da espécie, além disso, foi necessário realizar a análise de PCR convencional para determinação da espécie em alguns isolados. Após a realização das técnicas moleculares observou-se que 34 isolados (70,8%) pertenciam à espécie Campylobacter jejuni; 08 isolados (16,6%) identificados como Campylobacter coli e 06 isolados (12,5%) identificados como Campylobacter lari. Após a identificação das espécies, os isolados foram genotipados com base na análise dos polimorfismos dos fragmentos de restrição do gene flaA por meio da técnica de RFLP-flaA e em seguida também foram avaliados pela técnica de sequenciamento da pequena região variável do gene flaA (SVR-flaA). Observou-se neste trabalho que alguns isolados estudados apresentam alta similaridade genômica, o que corrobora a hipótese de que os isolados de diferentes empresas tenham uma fonte de contaminação em comum. Além disso, a similaridade genética entre as espécies termotolerantes do patógeno fornece suporte para o entendimento da dificuldade de se determinar a epidemiologia da campilobacteriose. Os diferentes genótipos e diferentes perfis de restrição encontrados demonstraram que no mesmo abatedouro podem existir diferentes fontes de contaminação das carcaças. A quantidade de isolados encontrados neste explicita o que ocorre no restante do planeta; a bactéria está presente nos planteis avícolas e deve ser monitorada. Adicionalmente, o presente estudo mostrou que o sequenciamento da região SVR-flaA e a análise do RFLP-flaA foram métodos eficientes e adequados para a subtipificação de estirpes de Campylobacter, vale ressaltar que este é o primeiro trabalho envolvendo a subtipificação molecular de Campylobacter jejuni, Campylobacter coli e Campylobacter lari na região centro-oeste do Brasil.

Campylobacter thermotolerant species are frequently reported as one of the most important causes of human gastroenteritis, mainly caused by the consumption of contaminated poultry products. The knowledge of the pathogen prevalence in these products and the genetic correlation between the isolates are of extreme epidemiological importance. Therefore, it was proposed to evaluate the prevalence of thermoresistant species using a molecular method for the identification of Campylobacter jejuni, Campylobacter coli and Campylobacter lari and the use of molecular markers of genotyping in order to understand the genetic diversity of pathogenic species. For this, 300 carcases of refrigerated chickens collected in seven cold stores submitted to the Federal Inspection Service (SIF) were evaluated. The bacterial isolation technique was used first, and it was possible to determine the prevalence of Campylobacter in 34 carcases, totaling 11.3% of the total samples. It was verified that of the seven industries, two (A and C representing 28.5%) presented Campylobacter, of which only one (industry A) was verified the presence of the pathogen in more than one collection and in different seasons of the year. It was possible to obtain 48 Campylobacter isolates, which were submitted to real-time PCR analysis for genus confirmation and species determination. In addition, it was necessary to perform the conventional PCR analysis to determine the species in some isolates. After the molecular techniques were performed, 34 isolates (70.8%) belonged to the species Campylobacter jejuni; 08 isolates (16.6%) identified as Campylobacter coli and 06 isolates (12.5%) identified as Campylobacter lari. After identification of the species, the isolates were genotyped based on the analysis of restriction fragment polymorphisms of the flaA gene by the RFLP-flaA technique and were also evaluated by the small variable region sequencing technique of the flaA gene (SVR -FlaA). It was observed in this work that some isolates studied have high genomic similarity, which corroborates the hypothesis that the isolates of different companies have a source of contamination in common. In addition, the genetic similarity between thermotolerant species of the pathogen provides support for understanding the difficulty of determining the epidemiology of campylobacteriosis. The different genotypes and different restriction profiles found showed that in the same slaughterhouse there may be different sources of contamination of the carcasses. The number of isolates found here explains what is happening on the rest of the planet; the bacterium is present in poultry plants and should be monitored. In addition, the present study showed that SVR-flaA region sequencing and RFLP-flaA analysis were efficient and suitable methods for the subtyping of Campylobacter strains, it is worth mentioning that this is the first work involving the molecular subtyping of Campylobacter jejuni, Campylobacter coli and Campylobacter lari in the central-western region of Brazil.