Micropropagation of Calophyllum brasiliense (Cambess. ) from nodal segments / Micropropagação de Calophyllum brasiliense (Cambess. ) a partir de segmentos nodais

Micropropagation of Calophyllum brasiliense Cambess. (Clusiaceae) is a way to overcome difficulties in achieving large-scale plant production, given the recalcitrant nature of the seeds, irregular fructification and absence of natural vegetative propagation of the species. Cultures were established using nodal segments 2 cm in length, obtained from 1-2 year old seedlings, maintained in a greenhouse. Mercury chloride and Plant Preservative Mixture were used in the surface sterilizing stage, better results being achieved with Plant Preservative Mixture incorporation in culture medium, at any concentration. Polyvinylpyrrolidone, activated charcoal, cysteine, ascorbic acid or citric acid were added to the culture medium to avoid oxidation. After 30 days of culture, polyvinylpirrolidone and ascorbic acid gave better results, eliminating oxidation in most explants. For shoot multiplication, benzylaminopurine was used in concentrations of 4.4 and 8.8 µM in Woody Plant Medium, resulting in an average of 4.43 and 4.68 shoots per explant, respectively, after 90 days. Indole-3-butyric acid and -naphthalene acetic acid were used to induce root formation, reaching a maximum rooting rate of 24% with 20µM -naphthalene acetic acid. For acclimatization. the rooted plants were transferred to Plantmax® substrate and cultured in a greenhouse, reaching 79% of survival after 30 days and 60% after one year.(AU)

A micropropagação de Calophyllum brasiliense Cambess. (Clusiaceae) é uma maneira de superar dificuldades para sua produção em larga escala, devido à natureza recalcitrante das sementes, frutificação irregular e ausência de propagação vegetativa natural da espécie. Culturas foram estabelecidas utilizando segmentos nodais com 2 cm de comprimento, obtidos de plantas com 1 a 2 anos de idade, mantidas em casa de vegetação. Cloreto de mercúrio e Plant Preservative Mixture foram utilizados durante a etapa de desinfestação, com melhores resultados alcançados com a incorporação de Plant Preservative Mixture ao meio de cultura. Polivinilpirrolidona, carvão ativado, cisteína, ácido ascórbico ou ácido cítrico foram adicionados ao meio de cultura para evitar a oxidação dos explantes. Após 30 dias de cultivo, o uso de polivinilpirrolidona ou ácido ascórbico proporcionou melhores resultados, eliminando a oxidação na maioria dos explantes. Para multiplicação das brotações, benzilaminopurina foi usada em concentrações de 4.4 e 8.8 µM em meio WPM, resultando em uma média de 4.43 e 4.68 brotações por explante, respectivamente, após 90 dias. Ácido indol-3-butírico e ácido -naftaleno acético foram usados para a indução de raízes, alcançando um enraizamento máximo de 24% com o uso de 20µM de ácido -naftaleno acético. As plantas enraizadas foram transferidas para substrato Plantmax® e cultivadas em casa de vegetação, alcançando 79% de sobrevivência após 30 dias e 60% após um ano.(AU)

Micropropagation of Calophyllum brasiliense (Cambess.) from nodal segments

Abstract Micropropagation of Calophyllum brasiliense Cambess. (Clusiaceae) is a way to overcome difficulties in achieving large-scale plant production, given the recalcitrant nature of the seeds, irregular fructification and absence of natural vegetative propagation of the species. Cultures were established using nodal segments 2 cm in length, obtained from 1-2 year old seedlings, maintained in a greenhouse. Mercury chloride and Plant Preservative Mixture were used in the surface sterilizing stage, better results being achieved with Plant Preservative Mixture incorporation in culture medium, at any concentration. Polyvinylpyrrolidone, activated charcoal, cysteine, ascorbic acid or citric acid were added to the culture medium to avoid oxidation. After 30 days of culture, polyvinylpirrolidone and ascorbic acid gave better results, eliminating oxidation in most explants. For shoot multiplication, benzylaminopurine was used in concentrations of 4.4 and 8.8 µM in Woody Plant Medium, resulting in an average of 4.43 and 4.68 shoots per explant, respectively, after 90 days. Indole-3-butyric acid and -naphthalene acetic acid were used to induce root formation, reaching a maximum rooting rate of 24% with 20µM -naphthalene acetic acid. For acclimatization. the rooted plants were transferred to Plantmax® substrate and cultured in a greenhouse, reaching 79% of survival after 30 days and 60% after one year.

Resumo A micropropagação de Calophyllum brasiliense Cambess. (Clusiaceae) é uma maneira de superar dificuldades para sua produção em larga escala, devido à natureza recalcitrante das sementes, frutificação irregular e ausência de propagação vegetativa natural da espécie. Culturas foram estabelecidas utilizando segmentos nodais com 2 cm de comprimento, obtidos de plantas com 1 a 2 anos de idade, mantidas em casa de vegetação. Cloreto de mercúrio e Plant Preservative Mixture foram utilizados durante a etapa de desinfestação, com melhores resultados alcançados com a incorporação de Plant Preservative Mixture ao meio de cultura. Polivinilpirrolidona, carvão ativado, cisteína, ácido ascórbico ou ácido cítrico foram adicionados ao meio de cultura para evitar a oxidação dos explantes. Após 30 dias de cultivo, o uso de polivinilpirrolidona ou ácido ascórbico proporcionou melhores resultados, eliminando a oxidação na maioria dos explantes. Para multiplicação das brotações, benzilaminopurina foi usada em concentrações de 4.4 e 8.8 µM em meio WPM, resultando em uma média de 4.43 e 4.68 brotações por explante, respectivamente, após 90 dias. Ácido indol-3-butírico e ácido -naftaleno acético foram usados para a indução de raízes, alcançando um enraizamento máximo de 24% com o uso de 20µM de ácido -naftaleno acético. As plantas enraizadas foram transferidas para substrato Plantmax® e cultivadas em casa de vegetação, alcançando 79% de sobrevivência após 30 dias e 60% após um ano.

In vitro multiplication of pear tree cultivar Cascatense / Multiplicação in vitro de pereira cultivar Cascatense

One main obstacle to the development and expansion of pear tree cultivation in Brazil has been the lack of cultivars adapted to the edaphoclimatic conditions of regions with the potential for pear production. Intending to overcome this hindrance, Embrapa Clima Temperado (Embrapa Temperate Climate) developed and released the cultivar Cascatense, with a low cold requirement (~400 h) better suited for Rio Grande do Sul`s and Santa Catarina`s climate. Still, seedlings of high genetic and sanitary quality are necessary for the establishment of a high-yield orchard. Plants with both sanitary quality and uniformity can be obtained through in vitro micropropagation. Thus, the present study aimed to assess the influence of different culture media (MS, MS¾, WPM, QL, and Himédia), concentrations of sucrose (0, 15, 30, 45, and 60 g L-1), and concentrations of benzylaminopurine (BAP) (0, 0.4, 0.8, 1.2, and 1.6 mg L-1) upon the in vitro multiplication of cultivar Cascatense, to establish an efficient protocol to enhance its propagation and reproducibility. The study included three sequential experiments in which the number of shoots per explant, the length of shoots, the number of axillary buds per shoot, fresh mass, and dry mass of shoots were evaluated. Cultivar Cascatense can be best propagated in vitro with the use of Himédia medium, supplemented with 0.8 mg L-1 of BAP and 30 g L-1 of sucrose.(AU)

Um dos principais entraves ao desenvolvimento e expansão da cultura da pereira no Brasil tem sido a falta de cultivares adaptadas às condições edafoclimáticas das regiões potencialmente produtoras. Visando sanar esta dificuldade, a Embrapa Clima Temperado desenvolveu e lançou a cv. Cascatense, com baixa exigência em frio (~400 h), mais adequada ao clima do Rio Grande do Sul e de Santa Catarina. No entanto, mudas com alta qualidade genética e sanitária são necessárias para garantir a boa formação de um pomar produtivo. Plantas com qualidade sanitária e uniformidade podem ser obtidas através da micropropagação in vitro. Assim, o presente trabalho teve como objetivo verificar a influência de diferentes meios de cultivo (MS, MS¾, WPM, QL e Himédia), concentrações de sacarose (0, 15, 30, 45 e 60 g L-1) e benzilaminopurina BAP (0; 0,4; 0,8; 1,2 e 1,6 mg L-1) na multiplicação in vitro da cv. Cascatense, visando obter um protocolo eficiente para potencializar sua propagação e reprodutibilidade. Os estudos foram conduzidos em três experimentos sequenciais, nos quais foram avaliados o número de brotações por explante, o comprimento das brotações, o número de gemas axilares por brotação, massa fresca e massa seca das brotações. A cv. Cascatense pode ser propagada in vitro com a utilização do meio Himédia suplementado com 0,8 mg L-1 de BAP e 30 g L-1 de sacarose.(AU)

Armazenamento a frio e aplicação de reguladores vegetais no enraizamento de estacas radiculares e caulinares de framboeseira / Cold storage and treatment with plant growth regulators in rooting of root and stems cutting of raspberry

O objetivo deste trabalho foi verificar o potencial rizogênico de estacas caulinares e radiculares da framboeseira (Rubus idaeusL.). Estacas da cultivar 'Batum' foram armazenadas a frio (4ºC) por 10, 20 e 30 dias, além do controle sem armazenamento. Posteriormente, as estacas caulinares foram tratadas com ácido indolilbutírico (AIB) a 0, 1000, 2000, 3000 e 4000mg L-1 e as estacas radiculares com benzilaminopurina (BAP) a 0, 300, 600, 900, 1200 e 1500mg L-1 por 10s. As estacas caulinares foram enterradas em 2/3 de seu comprimento, na posição vertical e as radiculares foram totalmente enterradas na posição horizontal, a três centímetros de profundidade. Utilizou-se vermiculita de grânulos médios como substrato, e estes experimentos foram conduzidos sob telado com sombreamento de 50%. As avaliações foram feitas após 75 dias do plantio das estacas. Concluiu-se que o uso de estacas caulinares não é viável e que as estacas radiculares não necessitam ser estimuladas pelo armazenamento a frio ou do tratamento com BAP.(AU)

The objective of this research was to verify the potential rhizogenic stem cuttings and root of raspberry (Rubus idaeus L.). Cuttings of ‘Batum cultivar was stored cold (4°C) for 10, 20 and 30 days, and a control without storage. Subsequently, the cuttings were treated with indolebutyric acid (IBA) at 0, 1000, 2000, 3000 and 4000mg L-1 and root cuttings with benzylaminopurine (BAP) at 0, 300, 600, 900, 1200 and 1500mg L-1 by 10 seconds. The cuttings were buried in 2/3 of its length in the vertical position, and root was completely buried in the horizontal position at three inches deep. It was used vermiculite medium as substrate, and these experiments were conducted in a greenhouse with 50% shading. Evaluations were made 75 days after planting the cuttings. It was concluded that the use of cuttings is not feasible and that the root cuttings need not be stimulated by cold storage or treatment with BAP.(AU)

Diodos emissores de luz e concentrações de BAP na multiplicação in vitro de morangueiro

The objective of this research was to evaluate the effect of different sources of light in strawberry micropropagation, under increasing levels of BAP in culture medium. 'Sabrosa' shoots were inoculated in MS medium supplemented with 30g L-1 sucrose, 100mg L-1 myo-inositol, 7 agar g L-1 and BAP (0; 0.3; 0.6; 0.9; e 1.5mg L-1), pH 5.8. The explants were cultivated at 25+2°C, 16 hours photoperiod and 20µmol m-2 s-1. The luminosity was supplied by different sources of light (blue-EDEB 3LA1 LED, green-EDET 3LA1 LED, red-EDER 3LA3 LED, Growlux fluorescent lamp and white fluorescent lamp). The experimental design was a factorial entirely randomized (5 concentrations of BAP x 5 light sources) with six replications. The experiment was repeated in three successive subcultures of 35 days each, being evaluated the shoot number per explant and shoot height. The carotenoids and chlorophyll a and b determinations were carried out after the third subculture, independently of BAP concentration. Shoot number per explant was higher under red and green LEDs. BAP concentrations between 0.82 and 1.22mg L-1 in culture medium showed higher multiplication rate depending on the light source. Shoot length was highest in culture medium without BAP under all light sources. Shoots cultivated under red LEDs showed higher concentration of photosynthetic pigments, while those under green LEDs and Growlux light bulbs showed the lowest.

Realizou-se um estudo para avaliar o efeito de fontes de luz na micropropagação de morangueiro, com níveis crescentes de BAP no meio de cultivo. Para tanto, inocularam-se gemas de brotações da cultivar 'Sabrosa' em meio MS com 30g L-1 de sacarose, 100mg L-1 de mio-inositol, 7g L-1 de ágar e BAP (0; 0,3; 0,6; 0,9; e 1,5mg L-1), em pH 5,8. Os explantes foram cultivados a 25+2°C, com 16 horas de fotoperíodo e luminosidade de 20µmol m-2 s-1, esta última fornecida por diferentes fontes de luz (LED azul-EDEB 3LA1, LED verde-EDET 3LA1, LED vermelho-EDER 3LA3, lâmpada fluorescente Growlux e lâmpada fluorescente branca). Os tratamentos foram dispostos em delineamento inteiramente ao acaso em um fatorial 5x5 (concentrações de BAP x fontes de luz), com seis repetições. O experimento foi repetido em três subcultivos sucessivos de 35 dias cada. Nestes avaliaram-se o número de brotações por explante e a altura das brotações. Ao final do terceiro subcultivo, determinaram-se, ainda, as concentrações de carotenoides e de clorofilas a e b, independentemente do nível de BAP. Maior número de brotações por explante foi obtido sob LEDs vermelhos e verdes. Concentrações de BAP no meio de cultura entre 0,82 e 1,22mg L-1, dependendo da fonte de luz, proporcionaram maior multiplicação in vitro de brotações. Sob todas as fontes de luz foram obtidas brotações de maior comprimento em meio isento de BAP. Brotações cultivadas sob LEDs vermelhos apresentaram maior quantidade de pigmentos fotossintéticos, enquanto aquelas sob LEDs verdes e lâmpadas Growlux apresentaram a menor.

Diodos emissores de luz e concentrações de BAP na multiplicação in vitro de morangueiro

The objective of this research was to evaluate the effect of different sources of light in strawberry micropropagation, under increasing levels of BAP in culture medium. 'Sabrosa' shoots were inoculated in MS medium supplemented with 30g L-1 sucrose, 100mg L-1 myo-inositol, 7 agar g L-1 and BAP (0; 0.3; 0.6; 0.9; e 1.5mg L-1), pH 5.8. The explants were cultivated at 25+2°C, 16 hours photoperiod and 20µmol m-2 s-1. The luminosity was supplied by different sources of light (blue-EDEB 3LA1 LED, green-EDET 3LA1 LED, red-EDER 3LA3 LED, Growlux fluorescent lamp and white fluorescent lamp). The experimental design was a factorial entirely randomized (5 concentrations of BAP x 5 light sources) with six replications. The experiment was repeated in three successive subcultures of 35 days each, being evaluated the shoot number per explant and shoot height. The carotenoids and chlorophyll a and b determinations were carried out after the third subculture, independently of BAP concentration. Shoot number per explant was higher under red and green LEDs. BAP concentrations between 0.82 and 1.22mg L-1 in culture medium showed higher multiplication rate depending on the light source. Shoot length was highest in culture medium without BAP under all light sources. Shoots cultivated under red LEDs showed higher concentration of photosynthetic pigments, while those under green LEDs and Growlux light bulbs showed the lowest.

Realizou-se um estudo para avaliar o efeito de fontes de luz na micropropagação de morangueiro, com níveis crescentes de BAP no meio de cultivo. Para tanto, inocularam-se gemas de brotações da cultivar 'Sabrosa' em meio MS com 30g L-1 de sacarose, 100mg L-1 de mio-inositol, 7g L-1 de ágar e BAP (0; 0,3; 0,6; 0,9; e 1,5mg L-1), em pH 5,8. Os explantes foram cultivados a 25+2°C, com 16 horas de fotoperíodo e luminosidade de 20µmol m-2 s-1, esta última fornecida por diferentes fontes de luz (LED azul-EDEB 3LA1, LED verde-EDET 3LA1, LED vermelho-EDER 3LA3, lâmpada fluorescente Growlux e lâmpada fluorescente branca). Os tratamentos foram dispostos em delineamento inteiramente ao acaso em um fatorial 5x5 (concentrações de BAP x fontes de luz), com seis repetições. O experimento foi repetido em três subcultivos sucessivos de 35 dias cada. Nestes avaliaram-se o número de brotações por explante e a altura das brotações. Ao final do terceiro subcultivo, determinaram-se, ainda, as concentrações de carotenoides e de clorofilas a e b, independentemente do nível de BAP. Maior número de brotações por explante foi obtido sob LEDs vermelhos e verdes. Concentrações de BAP no meio de cultura entre 0,82 e 1,22mg L-1, dependendo da fonte de luz, proporcionaram maior multiplicação in vitro de brotações. Sob todas as fontes de luz foram obtidas brotações de maior comprimento em meio isento de BAP. Brotações cultivadas sob LEDs vermelhos apresentaram maior quantidade de pigmentos fotossintéticos, enquanto aquelas sob LEDs verdes e lâmpadas Growlux apresentaram a menor.

Efeitos de citocininas sobre a anatomia foliar e o crescimento de Annona glabra L. durante o cultivo in vitro e ex vitro / Effects of cytokinins on the leaf anatomy and growth of Annona glabra L. during in vitro and ex vitro culture

O efeito de diferentes fontes de citocininas durante o cultivo in vitro de A. glabra sobre características anatômicas de folhas e crescimento das plantas foi avaliado neste trabalho. BAP (6-benzilaminopurina) e KIN (cinetina) induziram aumento na espessura do mesofilo, enquanto que ZEA (zeatina) promoveu aumento na densidade e no índice estomático e no desenvolvimento do sistema vascular de folhas. A utilização de KIN e BAP proporcionou maior desenvolvimento e taxa de sobrevivência das plantas durante as fases de enraizamento e aclimatização.(AU)

The effect of different sources of cytokinins during the in vitro cultivation of A. glabra on anatomical characteristics of leaves and plant growth was evaluated in this work. BAP (6-benzilaminopurine) and KIN (kinetin) induced an increase in leaf mesophyll thickness, while the ZEA (zeatin) promoted an increase in density and stomatic index and development of leaves vascular system. The utilization of KIN and BAP improved higher plant development and survival rate during the acclimatization and rooting phases.(AU)

Crescimento de plantas de Salvia officinalis sob ação de reguladores de crescimento vegetal

The objective of this study was to estimate the effects of different plant regulators on the index growth analysis application of sage plants. An experiment was conducted in a greenhouse with controlled temperature and relative humidity, at the Departmento de Botânica, Instituto de Biociências, Universidade Estadual Paulista, UNESP, Botucatu, SP, Brazil. The experimental design was completely randomized, with five treatments containing three replicates. Treatments consisted of the spraying of the solution of 100mg L-1 of gibberellic acid (GA3); 100mg L-1 of benzylaminopurine (BAP); 100mg L-1 of 2-chloroethyl phosphonic acid (ethephon); Stimulate® at 2% (90mg L-1 of kinetin, 50mg L-1 of gibberellic acid and 50mg L-1 of indolylbutyric acid) and water (control). Applications of plant growth regulators were performed in 3 times, at 15, 25, and 35 days after transplanting, and growth was evaluated in five successive harvests at 21-day intervals, performed at 47, 68, 89, 110, and 131 days after transplanting. The following growth index were determined: leaf area ratio (LAR), specific leaf area (SLA), net assimilation rate (NAR), and relative growth rate (RGR). These results suggest that the plant growth regulators influence the index growth analysis. The plants treated with BAP presented increase values of LAR to the 47 days after transplanting. The plants treated with GA3 to NAR presented increase until the 131 days after transplanting. The RGR is decreasing for all the treatments with vegetal regulators tested and the control.

O objetivo deste trabalho foi estimar os parâmetros da análise de crescimento em função de diferentes reguladores vegetais aplicados na parte aérea de plantas de Salvia officinalis L. Para tanto,o experimento foi instalado em casa de vegetação do Departamento de Botânica, Instituto de Biociências, da Universidade Estadual Paulista, Botucatu, SP. Os tratamentos consistiram na pulverização da solução de 100mg L-1 de ácido giberélico (GA3); 100mg L-1 de benzilaminopurina (BAP); 100mg L-1 de ácido 2-cloroetil-fosfônico (ethephon); Stimulate® a 2% (90mg L-1 de cinetina, 50mg L-1 de ácido giberélico e 50mg L-1 de ácido indolilbutírico) e água (testemunha). As aplicações foram realizadas em três épocas, aos 15, 25 e 35 dias após o transplante (d.a.t.) e o crescimento foi avaliado em cinco épocas de coletas a intervalos de 21 dias, sendo a primeira realizada aos 47 (d.a.t.). Foram determinados os parâmetros fisiológicos da análise de crescimento: razão de área foliar (RAF), área foliar específica (AFE), taxa assimilatória líquida (TAL) e taxa de crescimento relativo (TCR). Os resultados mostram que os reguladores de crescimento vegetal influenciaram os parâmetros fisiológicos da análise de crescimento. As plantas tratadas com BAP apresentaram maiores valores de RAF aos 47 d.a.t., já as plantas tratadas com GA3, a TAL apresentou aumento até o 131 d.a.t. A TCR é decrescente para todos os tratamentos com reguladores de crescimento vegetal testados e a testemunha.

Crescimento de plantas de Salvia officinalis sob ação de reguladores de crescimento vegetal

The objective of this study was to estimate the effects of different plant regulators on the index growth analysis application of sage plants. An experiment was conducted in a greenhouse with controlled temperature and relative humidity, at the Departmento de Botânica, Instituto de Biociências, Universidade Estadual Paulista, UNESP, Botucatu, SP, Brazil. The experimental design was completely randomized, with five treatments containing three replicates. Treatments consisted of the spraying of the solution of 100mg L-1 of gibberellic acid (GA3); 100mg L-1 of benzylaminopurine (BAP); 100mg L-1 of 2-chloroethyl phosphonic acid (ethephon); Stimulate® at 2% (90mg L-1 of kinetin, 50mg L-1 of gibberellic acid and 50mg L-1 of indolylbutyric acid) and water (control). Applications of plant growth regulators were performed in 3 times, at 15, 25, and 35 days after transplanting, and growth was evaluated in five successive harvests at 21-day intervals, performed at 47, 68, 89, 110, and 131 days after transplanting. The following growth index were determined: leaf area ratio (LAR), specific leaf area (SLA), net assimilation rate (NAR), and relative growth rate (RGR). These results suggest that the plant growth regulators influence the index growth analysis. The plants treated with BAP presented increase values of LAR to the 47 days after transplanting. The plants treated with GA3 to NAR presented increase until the 131 days after transplanting. The RGR is decreasing for all the treatments with vegetal regulators tested and the control.

O objetivo deste trabalho foi estimar os parâmetros da análise de crescimento em função de diferentes reguladores vegetais aplicados na parte aérea de plantas de Salvia officinalis L. Para tanto,o experimento foi instalado em casa de vegetação do Departamento de Botânica, Instituto de Biociências, da Universidade Estadual Paulista, Botucatu, SP. Os tratamentos consistiram na pulverização da solução de 100mg L-1 de ácido giberélico (GA3); 100mg L-1 de benzilaminopurina (BAP); 100mg L-1 de ácido 2-cloroetil-fosfônico (ethephon); Stimulate® a 2% (90mg L-1 de cinetina, 50mg L-1 de ácido giberélico e 50mg L-1 de ácido indolilbutírico) e água (testemunha). As aplicações foram realizadas em três épocas, aos 15, 25 e 35 dias após o transplante (d.a.t.) e o crescimento foi avaliado em cinco épocas de coletas a intervalos de 21 dias, sendo a primeira realizada aos 47 (d.a.t.). Foram determinados os parâmetros fisiológicos da análise de crescimento: razão de área foliar (RAF), área foliar específica (AFE), taxa assimilatória líquida (TAL) e taxa de crescimento relativo (TCR). Os resultados mostram que os reguladores de crescimento vegetal influenciaram os parâmetros fisiológicos da análise de crescimento. As plantas tratadas com BAP apresentaram maiores valores de RAF aos 47 d.a.t., já as plantas tratadas com GA3, a TAL apresentou aumento até o 131 d.a.t. A TCR é decrescente para todos os tratamentos com reguladores de crescimento vegetal testados e a testemunha.

Germinação e propagação in vitro de porongo / In vitro germination and propagation of bottlegourd

O objetivo foi desenvolver um protocolo de germinação e propagação in vitro de porongo (Lagenaria siceraria). Foram conduzidos experimentos de desinfestação e germinação de sementes inteiras e sem tegumento. O meio MS suplementado de 30g L-1 de sacarose foi utilizado para a propagação de explantes cotiledonares, ápices caulinares e segmentos nodais. Sementes inteiras de porongo somente germinaram sobre papel germitest. Sementes sem tegumento, desinfestadas pela imersão em álcool 70 por cento por 1min. e em solução de 3 a 4 por cento de hipoclorito de sódio por 10min, germinaram em meio de cultura contendo água destilada e 30g L-1 de sacarose, possibilitando o estabelecimento in vitro plântulas de porongo. Explantes cotiledonares produzem brotações adventícias, e ápices caulinares e segmentos nodais crescem e enraízam em meio MS, sem a adição de reguladores de crescimento. A organogênese direta a partir de explantes cotiledonares associada à regeneração de ápices caulinares e segmentos nodais facilita a propagação in vitro do porongo, o que oferece uma excelente oportunidade para explorar a cultura de tecidos, entre outras aplicações, como ferramenta auxiliar no melhoramento genético desta espécie.(AU)

The objective was to develop a protocol of 'in vitro' germination and propagation of bottlegourd (Lagenaria siceraria). Experiments of 'in vitro' disinfestation and germination were carried out with intact seeds and seeds without tegument. Cotyledonary explants, apical and nodal segments were propagated in MS medium, supplemented with 30g L-1 of sucrose. Bottlegourd intact seeds only germinated on germitest paper. Seeds without tegument, disinfected in alcohol 70 percent for 1min. and sodium hypochlorite (3 to 4 percent) for 10min., geminated in a culture medium of distilled water and 30g L-1 of sucrose, making possible the 'in vitro' establishment of bottlegourd seedlings. Cotyledonary explants produce adventitious shoots and apical and nodal segments grow and root in MS medium without growth regulators. Direct organogenesis of cotyledonary explants and regeneration of apical and nodal segments make easy bottlegourd 'in vitro' propagation and offer a good opportunity to use tissue culture as a complementary tool for breeding and genetics or other applications.(AU)

Organogênese direta de explantes cotiledonares e regeneração de plantas de mogango

The objectives were to induce direct organogenesis of squash cotyledons and to study the regeneration of complete plantlets from adventitious shoot. Cotyledon explants of 20-day seedlings were cultured in MS (MURASHIGE & SKOOG, 1962) medium supplemented with 30g L-1 of sucrose and 7g L-1 of agar. The 6-benzilaminopurina (BAP) concentrations of 0, 0.5, 1.0 and 2.0mg L-1 were tested. Apical and nodal explants from adventitious shoots were transferred to MS medium supplemented with 30g L-1 of sucrose and 7g L-1 of agar. Increasing BAP concentrations in the MS medium enhance the percentage of adventitious shoot and reduce the percentage of root organogenesis of squash cotyledon explants. Apical and nodal explants from adventitious shoot regenerated plantlets with roots in MS medium without growth regulators. High percentage of plantlet rooting depends upon the size of the explants.

Os objetivos foram induzir a organogênese direta de explantes cotiledonares de mogango e estudar a regeneração de plântulas completas a partir das brotações adventícias. Foram utilizados cotilédones como explantes, originados das plântulas de mogango com 20 dias após a semeadura. O meio basal utilizado foi o MS (MURASHIGE & SKOOG, 1962) suplementado com 30g L-1 de sacarose e 7g L-1 de agar. Foram testadas as concentrações de 6-benzilaminopurina (BAP) de 0; 0,5; 1,0 e 2,0mg L-1. Explantes de ápices caulinares e segmentos nodais de brotações adventícias foram então cultivados em meio MS suplementado com 30g L-1 de sacarose e 7g L-1 de agar. Maiores concentrações de BAP no meio MS promoveram um aumento da percentagem de explantes cotiledonares com brotações adventícias e uma redução da percentagem de enraizamento. Explantes de segmentos nodais e ápices caulinares oriundos de brotações adventícias cresceram e enraizaram em meio MS sem reguladores de crescimento. Altas percentagens de enraizamento dependem do tamanho dos explantes utilizados.

Organogênese direta de explantes cotiledonares e regeneração de plantas de mogango

The objectives were to induce direct organogenesis of squash cotyledons and to study the regeneration of complete plantlets from adventitious shoot. Cotyledon explants of 20-day seedlings were cultured in MS (MURASHIGE & SKOOG, 1962) medium supplemented with 30g L-1 of sucrose and 7g L-1 of agar. The 6-benzilaminopurina (BAP) concentrations of 0, 0.5, 1.0 and 2.0mg L-1 were tested. Apical and nodal explants from adventitious shoots were transferred to MS medium supplemented with 30g L-1 of sucrose and 7g L-1 of agar. Increasing BAP concentrations in the MS medium enhance the percentage of adventitious shoot and reduce the percentage of root organogenesis of squash cotyledon explants. Apical and nodal explants from adventitious shoot regenerated plantlets with roots in MS medium without growth regulators. High percentage of plantlet rooting depends upon the size of the explants.

Os objetivos foram induzir a organogênese direta de explantes cotiledonares de mogango e estudar a regeneração de plântulas completas a partir das brotações adventícias. Foram utilizados cotilédones como explantes, originados das plântulas de mogango com 20 dias após a semeadura. O meio basal utilizado foi o MS (MURASHIGE & SKOOG, 1962) suplementado com 30g L-1 de sacarose e 7g L-1 de agar. Foram testadas as concentrações de 6-benzilaminopurina (BAP) de 0; 0,5; 1,0 e 2,0mg L-1. Explantes de ápices caulinares e segmentos nodais de brotações adventícias foram então cultivados em meio MS suplementado com 30g L-1 de sacarose e 7g L-1 de agar. Maiores concentrações de BAP no meio MS promoveram um aumento da percentagem de explantes cotiledonares com brotações adventícias e uma redução da percentagem de enraizamento. Explantes de segmentos nodais e ápices caulinares oriundos de brotações adventícias cresceram e enraizaram em meio MS sem reguladores de crescimento. Altas percentagens de enraizamento dependem do tamanho dos explantes utilizados.

Regeneração in vitro de Passiflora suberosa a partir de discos foliares

In vitro regeneration of plantlets was obtained from Passiflora suberosa leaf discs. Leaves from plants germinated in the greenhouse were collected and immersed in commercial sodium hypochlorite solution (3:1), during 20 minutes. Leaf discs (0.5 cm in diameter) were obtained and placed with the adaxial side in contact with the culture medium in petri dishes. Organogenesis was obtained when MS medium was supplemented with 0.5 or 1.0 mg L-1 BAP (6-benzylaminopurine), after four to eight weeks, callus proliferated from the edge of the discs. After induction, calli were transferred to modified MS media supplemented with1.0 mg L-1 GA3, under 16-hour photoperiod. Development of adventitious shoots was obtained from the callus tissues and the shoots were elongated and rooted in the same culture medium and acclimatized in the greenhouse.

A regeneração in vitro de plantas de Passiflora suberosa foi obtida a partir de discos foliares. Folhas foram retiradas de plantas germinadas em casa de vegetação, imersas em solução comercial de hipoclorito de sódio (3:1), durante 20 minutos. Discos foliares de 0,5 cm de diâmetro, com a face adaxial em contato com o meio de cultura, foram introduzidos em placa de petri. Organogênese foi obtida utilizando-se meio MS acrescido de 0,5 ou 1,0 mg L-1 de BAP (6-benzilaminopurina). Após 4 a 8 semanas, observou-se formação de calos nas bordas dos discos foliares. Os calos formados foram transferidos para meio MSM, acrescido de 1,0 mg L-1 de GA3 (ácido giberélico), sob fotoperíodo de 16 horas. Desenvolvimento de gemas adventícias foi obtido a partir dos calos, sendo estas alongadas e enraizadas no mesmo meio de cultura, após periódicas repicagens, e aclimatadas em casa de vegetação.

Regeneração in vitro de Passiflora suberosa a partir de discos foliares

In vitro regeneration of plantlets was obtained from Passiflora suberosa leaf discs. Leaves from plants germinated in the greenhouse were collected and immersed in commercial sodium hypochlorite solution (3:1), during 20 minutes. Leaf discs (0.5 cm in diameter) were obtained and placed with the adaxial side in contact with the culture medium in petri dishes. Organogenesis was obtained when MS medium was supplemented with 0.5 or 1.0 mg L-1 BAP (6-benzylaminopurine), after four to eight weeks, callus proliferated from the edge of the discs. After induction, calli were transferred to modified MS media supplemented with1.0 mg L-1 GA3, under 16-hour photoperiod. Development of adventitious shoots was obtained from the callus tissues and the shoots were elongated and rooted in the same culture medium and acclimatized in the greenhouse.

A regeneração in vitro de plantas de Passiflora suberosa foi obtida a partir de discos foliares. Folhas foram retiradas de plantas germinadas em casa de vegetação, imersas em solução comercial de hipoclorito de sódio (3:1), durante 20 minutos. Discos foliares de 0,5 cm de diâmetro, com a face adaxial em contato com o meio de cultura, foram introduzidos em placa de petri. Organogênese foi obtida utilizando-se meio MS acrescido de 0,5 ou 1,0 mg L-1 de BAP (6-benzilaminopurina). Após 4 a 8 semanas, observou-se formação de calos nas bordas dos discos foliares. Os calos formados foram transferidos para meio MSM, acrescido de 1,0 mg L-1 de GA3 (ácido giberélico), sob fotoperíodo de 16 horas. Desenvolvimento de gemas adventícias foi obtido a partir dos calos, sendo estas alongadas e enraizadas no mesmo meio de cultura, após periódicas repicagens, e aclimatadas em casa de vegetação.

Influência da benzilaminopurina (BAP) NA multiplicação in vitro de kiwi (Actinidia deliciosa)

This trial was carried out in the Tissue Culture Laboratory at EMBRAPA/CPACT, Pelotas, RS, Brazil, aiming to study the influence of different 6-benzylaminopurine (BAP) concentrations in the in vitro multiplication of kiwi, cv. Tomuri. A MS medium was used adding sucrose, myo-inositol, agar and concentrations of BAP as follows: 0.0; 0.5; 1.0; 1.5; 2.0 and 2.5mg/l. The explants consisting of microshoots of 10mm length were obtained from the in vitro collection at the laboratory. The best results of bud and shoot numbers, shoot length and number of leaves were obtained using about 1.5mg/l BAP. Results of this experiment demonstrated that BAP is efficient in the in vitro multiplication of kiwi, cv. Tomuri.

Este experimento foi conduzido no Laboratório de Cultura de Tecidos da EMBRAPA/CPACT, Pelotas, RS, com o objetivo de estudar a influência de diferentes concentrações de 6-benzilaminopurina (BAP) na multiplicação in vitro de kiwi (Actinidia deliciosa), cv. Tomun. Utilizou-se o meio de cultura MS, acrescido de sacarose, mio-inositol, ágar e das seguintes concentrações de BAP: 0,0; 0,5; 1,0; 1,5; 2,0 e 2,5 mg/l. Os explantes foram constituídos de microestacas provenientes da coleção in vitro do Laboratório, com aproximadamente 10mm de comprimento. Verificou-se que, para o número e comprimento de brotações, número de gemas e folhas a concentração em torno de 1,5mg/l de BAP proporcionou os memores resultados. Nas condições em que o trabalho foi realizado, pode-se concluir que o BAP foi eficiente na multiplicação in vitro de kiwi, cv. Tomuri.

Influência da benzilaminopurina (BAP) NA multiplicação in vitro de kiwi (Actinidia deliciosa)

This trial was carried out in the Tissue Culture Laboratory at EMBRAPA/CPACT, Pelotas, RS, Brazil, aiming to study the influence of different 6-benzylaminopurine (BAP) concentrations in the in vitro multiplication of kiwi, cv. Tomuri. A MS medium was used adding sucrose, myo-inositol, agar and concentrations of BAP as follows: 0.0; 0.5; 1.0; 1.5; 2.0 and 2.5mg/l. The explants consisting of microshoots of 10mm length were obtained from the in vitro collection at the laboratory. The best results of bud and shoot numbers, shoot length and number of leaves were obtained using about 1.5mg/l BAP. Results of this experiment demonstrated that BAP is efficient in the in vitro multiplication of kiwi, cv. Tomuri.

Este experimento foi conduzido no Laboratório de Cultura de Tecidos da EMBRAPA/CPACT, Pelotas, RS, com o objetivo de estudar a influência de diferentes concentrações de 6-benzilaminopurina (BAP) na multiplicação in vitro de kiwi (Actinidia deliciosa), cv. Tomun. Utilizou-se o meio de cultura MS, acrescido de sacarose, mio-inositol, ágar e das seguintes concentrações de BAP: 0,0; 0,5; 1,0; 1,5; 2,0 e 2,5 mg/l. Os explantes foram constituídos de microestacas provenientes da coleção in vitro do Laboratório, com aproximadamente 10mm de comprimento. Verificou-se que, para o número e comprimento de brotações, número de gemas e folhas a concentração em torno de 1,5mg/l de BAP proporcionou os memores resultados. Nas condições em que o trabalho foi realizado, pode-se concluir que o BAP foi eficiente na multiplicação in vitro de kiwi, cv. Tomuri.

EFEITO DE REGULADORES DE CRESCIMENTO E TIPO DE EXPLANTES NA MORFOGÊNESE in vitro DE Capsicum annuum L.

SUMMARY Apical, cotiledonary, and hypocotiledonary explants and in vitro regenerated shoots of Capsicum annuum cv. Agronômico 10 were grown in (MURASHIGE & SKOOG, 1962)-MS médium, suppiemented with different concentrations and combinations of BAP, Adenine and Thidiazuron. According to the explant type and growth regulators used different in vitro morphogenetic responses were attained. Generally, culture media having high concentrations of BAP and Thidiazuron promoted induction and yield of calli from seedling explants but rhizogenesis was favored only under low concentrations of BAP. Multiple axilary buds were formed only when the explant in vitro regenerated shoots. BAP at 26.64 and 39.96µM maximized proliferation in 2.08 and 2.23 shoots per explant, respectively.

RESUMO Explantes apicais, cotiledonares, hipocotiledonares e brotações regeneradas in vitro de Capsicum annuum cv. Agronômico 10 foram cultivados em meio (MURASHIGE & SKOOG, 1962)-MS suplementado com diferentes concentrações e combinações de BAP, adenina e tidiazuron. De acordo com o tipo de explante e reguladores de crescimento, foram obtidas diferentes respostas morfogenéticas. De modo geral, meios contendo concentrações mais elevadas de BAP e tidiazuron, promoveram a indução e produção de calos nos explantes provenientes de "seedlings", enquanto que a rizogênese foi favorecida em meios com baixas concentrações de BAP. Múltiplos brotos axilares foram formados somente quando utilizou-se como explante, brotações regeneradas in vitro. Os níveis de 26,64 e 39,96 µM de BAP possiblitaram a maximização da proliferação em aproximadamente 2,08 e 2,17 novas brotações por explante, respectivamente.

EFEITO DE REGULADORES DE CRESCIMENTO E TIPO DE EXPLANTES NA MORFOGÊNESE in vitro DE Capsicum annuum L

SUMMARY Apical, cotiledonary, and hypocotiledonary explants and in vitro regenerated shoots of Capsicum annuum cv. Agronômico 10 were grown in (MURASHIGE & SKOOG, 1962)-MS médium, suppiemented with different concentrations and combinations of BAP, Adenine and Thidiazuron. According to the explant type and growth regulators used different in vitro morphogenetic responses were attained. Generally, culture media having high concentrations of BAP and Thidiazuron promoted induction and yield of calli from seedling explants but rhizogenesis was favored only under low concentrations of BAP. Multiple axilary buds were formed only when the explant in vitro regenerated shoots. BAP at 26.64 and 39.96µM maximized proliferation in 2.08 and 2.23 shoots per explant, respectively.

RESUMO Explantes apicais, cotiledonares, hipocotiledonares e brotações regeneradas in vitro de Capsicum annuum cv. Agronômico 10 foram cultivados em meio (MURASHIGE & SKOOG, 1962)-MS suplementado com diferentes concentrações e combinações de BAP, adenina e tidiazuron. De acordo com o tipo de explante e reguladores de crescimento, foram obtidas diferentes respostas morfogenéticas. De modo geral, meios contendo concentrações mais elevadas de BAP e tidiazuron, promoveram a indução e produção de calos nos explantes provenientes de "seedlings", enquanto que a rizogênese foi favorecida em meios com baixas concentrações de BAP. Múltiplos brotos axilares foram formados somente quando utilizou-se como explante, brotações regeneradas in vitro. Os níveis de 26,64 e 39,96 µM de BAP possiblitaram a maximização da proliferação em aproximadamente 2,08 e 2,17 novas brotações por explante, respectivamente.

In vitro multiplication of pear tree cultivar Cascatense / Multiplicação in vitro de pereira cultivar Cascatense

One main obstacle to the development and expansion of pear tree cultivation in Brazil has been the lack of cultivars adapted to the edaphoclimatic conditions of regions with the potential for pear production. Intending to overcome this hindrance, Embrapa Clima Temperado (Embrapa Temperate Climate) developed and released the cultivar Cascatense, with a low cold requirement (~400 h) better suited for Rio Grande do Sul`s and Santa Catarina`s climate. Still, seedlings of high genetic and sanitary quality are necessary for the establishment of a high-yield orchard. Plants with both sanitary quality and uniformity can be obtained through in vitro micropropagation. Thus, the present study aimed to assess the influence of different culture media (MS, MS¾, WPM, QL, and Himédia), concentrations of sucrose (0, 15, 30, 45, and 60 g L-1), and concentrations of benzylaminopurine (BAP) (0, 0.4, 0.8, 1.2, and 1.6 mg L-1) upon the in vitro multiplication of cultivar Cascatense, to establish an efficient protocol to enhance its propagation and reproducibility. The study included three sequential experiments in which the number of shoots per explant, the length of shoots, the number of axillary buds per shoot, fresh mass, and dry mass of shoots were evaluated. Cultivar Cascatense can be best propagated in vitro with the use of Himédia medium, supplemented with 0.8 mg L-1 of BAP and 30 g L-1 of sucrose.

Um dos principais entraves ao desenvolvimento e expansão da cultura da pereira no Brasil tem sido a falta de cultivares adaptadas às condições edafoclimáticas das regiões potencialmente produtoras. Visando sanar esta dificuldade, a Embrapa Clima Temperado desenvolveu e lançou a cv. Cascatense, com baixa exigência em frio (~400 h), mais adequada ao clima do Rio Grande do Sul e de Santa Catarina. No entanto, mudas com alta qualidade genética e sanitária são necessárias para garantir a boa formação de um pomar produtivo. Plantas com qualidade sanitária e uniformidade podem ser obtidas através da micropropagação in vitro. Assim, o presente trabalho teve como objetivo verificar a influência de diferentes meios de cultivo (MS, MS¾, WPM, QL e Himédia), concentrações de sacarose (0, 15, 30, 45 e 60 g L-1) e benzilaminopurina – BAP (0; 0,4; 0,8; 1,2 e 1,6 mg L-1) na multiplicação in vitro da cv. Cascatense, visando obter um protocolo eficiente para potencializar sua propagação e reprodutibilidade. Os estudos foram conduzidos em três experimentos sequenciais, nos quais foram avaliados o número de brotações por explante, o comprimento das brotações, o número de gemas axilares por brotação, massa fresca e massa seca das brotações. A cv. Cascatense pode ser propagada in vitro com a utilização do meio Himédia suplementado com 0,8 mg L-1 de BAP e 30 g L-1 de sacarose.

Organogenesis from internodal segments of yellow passion fruit

Organogenesis induction from internodal segments of yellow passionfruit (Passiflora edulis f. flavicarpa) was obtained in a medium supplemented with 1.0-4.0 mg L-1 benzylaminopurine (BAP). Callus proliferation and adventitious shoot development were analyzed by light and scanning electron microscopy. Callus proliferation and adventitious shoots were observed simultaneously and continuously, with asynchronous development of shoots in the explants. Proliferation of callus was observed in the explant cut ends in all treatments, including the control. The results show that concentrations of 1.0 or 2.0 mg L-1 BAP gave better rate of organogenesis. Higher concentrations were efficient for the induction of adventitious buds and, were, however, detrimental for subsequent shoot development. Growth and rooting of shoots were obtained in half strength medium without growth regulators.

Estudou-se a indução de organogênese em segmentos internodais de maracujá amarelo (Passiflora edulis f. flavicarpa) cultivados em meio contendo 1,0 a 4,0 mg L-1 de benzilaminopurina (BAP). A formação de calo e o desenvolvimento de gemas adventícias foram acompanhados através de microscopia ótica e eletrônica de varredura, que mostrou sua ocorrência simultânea e contínua, com observação de gemas em diversos estádios de desenvolvimento em um mesmo explante. Houve proliferação de calos nas extremidades dos explantes em todos os tratamentos, inclusive no controle. A avaliação dos efeitos do BAP na indução de gemas adventícias mostrou que as concentrações de 1 ou 2 mg L-1 foram mais adequadas. Doses superiores a 2 mg L-1, apesar de eficientes para indução, foram prejudiciais ao crescimento das gemas. Crescimento e enraizamento das gemas adventícias foram obtidos em meio de cultura MS sem reguladores de crescimento e com a concentração de sais reduzida pela metade.