The in vitro effects of n-3 fatty acids on immune response regulation of bovine ex vivo endometrial explants / Os efeitos in vitro dos ácidos graxos n-3 na regulação da resposta imune de explantes endometriais bovinos ex vivo

Fatty acids are considered metabolic intermediaries, although new facts indicate they also work as signaling molecules with different roles in the immune response. Based on that, in this study, we investigated the anti-inflammatory effects of n-3 polyunsaturated fatty acids (PUFAs) as eicosapentaenoic acid (EPA), docosahexaenoic acid (DHA), and α-linolenic acid (LNA) in ex vivo bovine endometrial explants. For this, two groups were formed: (1) LPS-challenged and (2) control, both to evaluate the accumulation of proinflammatory cytokines as interleukin 1ß (IL1B) and interleukin 6 (IL6). To develop the study, bovine female reproductive tracts from non-pregnant Angus heifers without evidence of reproductive diseases were selected. Endometrial explants were processed and treated for 24 h with EPA, DHA, and LNA in five different concentrations (0µM, 50µM, 100 µM, 200µM and 400 µM) and then, challenged with LPS for 24 h. Supernatants were collected to evaluate the concentration of IL1B and IL6 by ELISA. Explants treated with EPA from control groups reduced the concentrations of ILB (200µM) and IL6 (400 µM), and IL6 (50 µM; 100 µM) from the LPS-challenged group. DHA decreased the accumulation of IL1B and IL6 at 200 µM on explants from the LPS-challenged group, and 200 µM reduced IL6 from the control group. In contrast, explants treated with LNA only reduced the accumulation of IL1B to 400µM (from both groups). In conclusion, the EPA acid is the best anti-inflammatory option to decrease the concentration of both pro-inflammatory cytokines (IL1B and IL6) from LPS-challenged and control groups in bovine endometrial explants; while LNA evidence to be the last option to promote an anti-inflammatory response.(AU)

Os ácidos graxos são considerados intermediários metabólicos, embora novos fatos indiquem que eles também atuem como moléculas sinalizadoras com diferentes papéis na resposta imune. Dessa forma, este estudo investigou os efeitos anti-inflamatórios de ácidos graxos poliinsaturados n-3 (PUFAs) como ácido eicosapentaenóico (EPA), ácido docosahexaenóico (DHA) e ácido α-linolênico (LNA) em explantes endometriais ex vivo de bovinos. Para tal, o experimento foi divido em dois grupos: (1) Desafiado-LPS e (2) Controle, para que então pudesse avaliar o acúmulo de citocinas pró-inflamatórias como interleucina 1ß (IL1B) e interleucina 6 (IL6). Foram selecionados tratos reprodutivos de fêmeas bovinas de novilhas Angus não prenhes sem evidência de doenças reprodutivas. Explantes endometriais foram processados e tratados por 24h com EPA, DHA e LNA em cinco concentrações diferentes (0µM, 50µM, 100 µM, 200µM e 400 µM) e, em seguida, desafiados com LPS por mais 24h. Os sobrenadantes foram colhidos para avaliar a concentração de IL1B e IL6 pelo teste de ELISA. Os explantes tratados com EPA dos grupos de controle reduziram as concentrações de ILB (200 µM) e IL6 (400 µM) e no grupo desafiado com LPS houve redução das concentrações de IL6 (50 µM; 100 µM). Nos explantes do grupo desafiado com LPS, o DHA diminuiu o acúmulo de IL1B e IL6 nas concentrações de 200 µM, e no grupo controle reduziu IL6 nas concentrações de 200 µM, enquanto os explantes tratados com LNA reduziram apenas o acúmulo de IL1B a 400 µM (de ambos os grupos). Em conclusão, o ácido EPA provou ser a melhor opção anti-inflamatória para diminuir a concentração de ambas as citocinas pró-inflamatórias (IL1B e IL6) de grupos desafiados com LPS e controle em explantes endometriais bovinos; enquanto o LNA evidencia ser a opção menos viável para promover uma resposta anti-inflamatória.(AU)

Detection of respiratory viruses and expression of inflammatory cytokines in patients with acute exacerbation chronic obstructive pulmonary disease in Mongolia China / Detecção de vírus respiratórios e expressão de citocinas inflamatórias em pacientes com doença pulmonar obstrutiva crônica de exacerbação aguda na Mongólia, China

Chronic obstructive pulmonary disease (COPD) was estimated to be the third cause of global mortality by 2020. Acute exacerbation COPD (AECOPD) is a sudden worsening of COPD symptoms and could be due to virus/bacterial infections and air pollution. Increased expression of inflammatory markers in patients with AECOPD is associated with viral infection. This study aimed to detect different viruses and analyze the expression of various inflammatory markers associated with AECOPD patients. Three hundred and forty-seven patients diagnosed with COPD according to GOLD criteria were included in this study. Swab samples and blood were collected for the detection of viruses by RT-PCR and expression of inflammatory markers, respectively. Of the swab samples, 113 (32.6%) of samples were positive for virus detection. Of these, HRV (39.8%) was the predominant virus detected followed by FluB (27.4%) and FluA (22.1%). The presence of HRV was significantly higher (p=0.044) among the other detected viruses. When compared to healthy controls the expression levels of TNF-α, IL-6 and IL-8 were significantly higher (p<0.05) in virus-positive patients. The IL-6 and IL-8 were the next predominantly expressed in markers among the samples. The higher expression rate of IL-8 was significantly (p<0.05) associated with patients having COPD GOLD III severity level and smoking history. Although HRV was the predominant virus detected the combined prevalence of Influenza A and B surpassing the rate of HRV. The high-level expression of well known inflammatory markers of AECOPD, TNF-α, IL-6 and IL-8 indicates a chronic severe illness. These markers play an important role and could be used as a marker for determining the severity of AECOPD.

Estima-se que a doença pulmonar obstrutiva crônica (DPOC) seja a terceira causa de mortalidade global em 2020. A exacerbação aguda DPOC (AECOPD) é um agravamento súbito dos sintomas da DPOC e pode ser devido a infecções por vírus/bactérias e poluição do ar. O aumento da expressão de marcadores inflamatórios em pacientes com AECOPD está associado à infecção viral. Este estudo teve como objetivo detectar diferentes vírus e analisar a expressão de vários marcadores inflamatórios associados a pacientes com AECOPD. Trezentos e quarenta e sete pacientes com diagnóstico de DPOC de acordo com os critérios GOLD foram incluídos neste estudo. Amostras de swab e sangue foram coletadas para detecção de vírus por RT-PCR e expressão de marcadores inflamatórios, respectivamente. Das amostras de esfregaço, 113 (32,6%) amostras foram positivas para detecção de vírus. Nestas, o HRV (39,8%) foi o vírus predominante detectado, seguido do FluB (27,4%) e do FluA (22,1%). A presença de VFC foi significativamente maior (p = 0,044) entre os demais vírus detectados. Quando comparados a controles saudáveis, os níveis de expressão de TNF-α, IL-6 e IL-8 foram significativamente maiores (p <0,05) em pacientes com vírus positivo. A IL-6 e a IL-8 foram as próximas predominantemente expressas em marcadores entre as amostras. A maior taxa de expressão de IL-8 foi significativamente (p <0,05) associada a pacientes com grau de gravidade GOLD III da DPOC e história de tabagismo. Embora o HRV tenha sido o vírus predominante, a prevalência combinada de Influenza A e B ultrapassou a taxa de HRV. O alto nível de expressão de marcadores inflamatórios bem conhecidos de AECOPD, TNF-α, IL-6 e IL-8 indica uma doença crônica grave. Esses marcadores desempenham um papel importante e podem ser usados como um marcador para determinar a gravidade da AECOPD.

Detection of respiratory viruses and expression of inflammatory cytokines in patients with acute exacerbation chronic obstructive pulmonary disease in Mongolia China

Abstract Chronic obstructive pulmonary disease (COPD) was estimated to be the third cause of global mortality by 2020. Acute exacerbation COPD (AECOPD) is a sudden worsening of COPD symptoms and could be due to virus/bacterial infections and air pollution. Increased expression of inflammatory markers in patients with AECOPD is associated with viral infection. This study aimed to detect different viruses and analyze the expression of various inflammatory markers associated with AECOPD patients. Three hundred and forty-seven patients diagnosed with COPD according to GOLD criteria were included in this study. Swab samples and blood were collected for the detection of viruses by RT-PCR and expression of inflammatory markers, respectively. Of the swab samples, 113 (32.6%) of samples were positive for virus detection. Of these, HRV (39.8%) was the predominant virus detected followed by FluB (27.4%) and FluA (22.1%). The presence of HRV was significantly higher (p=0.044) among the other detected viruses. When compared to healthy controls the expression levels of TNF-, IL-6 and IL-8 were significantly higher (p 0.05) in virus-positive patients. The IL-6 and IL-8 were the next predominantly expressed in markers among the samples. The higher expression rate of IL-8 was significantly (p 0.05) associated with patients having COPD GOLD III severity level and smoking history. Although HRV was the predominant virus detected the combined prevalence of Influenza A and B surpassing the rate of HRV. The high-level expression of well known inflammatory markers of AECOPD, TNF-, IL-6 and IL-8 indicates a chronic severe illness. These markers play an important role and could be used as a marker for determining the severity of AECOPD.

Resumo Estima-se que a doença pulmonar obstrutiva crônica (DPOC) seja a terceira causa de mortalidade global em 2020. A exacerbação aguda DPOC (AECOPD) é um agravamento súbito dos sintomas da DPOC e pode ser devido a infecções por vírus/bactérias e poluição do ar. O aumento da expressão de marcadores inflamatórios em pacientes com AECOPD está associado à infecção viral. Este estudo teve como objetivo detectar diferentes vírus e analisar a expressão de vários marcadores inflamatórios associados a pacientes com AECOPD. Trezentos e quarenta e sete pacientes com diagnóstico de DPOC de acordo com os critérios GOLD foram incluídos neste estudo. Amostras de swab e sangue foram coletadas para detecção de vírus por RT-PCR e expressão de marcadores inflamatórios, respectivamente. Das amostras de esfregaço, 113 (32,6%) amostras foram positivas para detecção de vírus. Nestas, o HRV (39,8%) foi o vírus predominante detectado, seguido do FluB (27,4%) e do FluA (22,1%). A presença de VFC foi significativamente maior (p = 0,044) entre os demais vírus detectados. Quando comparados a controles saudáveis, os níveis de expressão de TNF-, IL-6 e IL-8 foram significativamente maiores (p 0,05) em pacientes com vírus positivo. A IL-6 e a IL-8 foram as próximas predominantemente expressas em marcadores entre as amostras. A maior taxa de expressão de IL-8 foi significativamente (p 0,05) associada a pacientes com grau de gravidade GOLD III da DPOC e história de tabagismo. Embora o HRV tenha sido o vírus predominante, a prevalência combinada de Influenza A e B ultrapassou a taxa de HRV. O alto nível de expressão de marcadores inflamatórios bem conhecidos de AECOPD, TNF-, IL-6 e IL-8 indica uma doença crônica grave. Esses marcadores desempenham um papel importante e podem ser usados como um marcador para determinar a gravidade da AECOPD.

Mecanismos inflamatórios da obesidade: o que sabemos em gatos? / Inflammatory mechanisms in obesity: what is known in cats?

O objetivo deste trabalho foifornecer uma visão geral dos mecanismos inflamatórios envolvidos no processo da obesidade, com enfoque nas respostas imunes pró-inflamatórias e no papel das adipocinas nas reações inflamatórias, em humanos e animais, bem como a correlação com a espécie felina. A obesidade é considerada uma doença endócrina cada vez mais prevalente na espécie felina, causada por uma desordem nutricional de balanço energético negativo. É definida como um acúmulo excessivo de tecido adiposo que afeta negativamente a saúde do animal e está associada à diminuição da expectativa de vida, sendo que as causas que a desencadeiam são multifatoriais, sendo atreladas a diversos fatores genéticos e ambientais. O tecido adiposo é um órgão endócrino que participa ativamente do metabolismo energético e concentra fatores hormonais que são secretados pelos adipócitos, os quais modulam o metabolismo e exercem capacidade de envolver diretamente as respostas imunes inatas e adaptativas por meio da atividade dos principais tipos celulares, incluindo adipócitos e macrófagos responsáveis pela ativação e liberação de citocinas que afetam a função fisiológica normal, influenciando no desenvolvimento da inflamação crônica. A produção alterada de adipocinas na obesidade tem sido envolvida na fisiopatologia de diversos grupos de doenças e tem sido relatada sua possível contribuição para o desenvolvimento de resistência insulínica e diabetes mellitus. Apesar do incompleto compreendimento dos fatores desencadeantes da inflamação no tecido adiposo de gatos, sugere-se que estejam envolvidos aspectos associados à disfunção mitocondrial, hipóxia ou, ainda, que estejam associados fatores intrínsecos do adipócito.

This study aimed to provide an overview of the inflammatory mechanisms involved in the obesity process focusing on pro-inflammatory immune responses and the role of adipokines in inflammatory reactionsm in animals and humans, as well as the correlation with the feline specie. Obesity is considered an increasingly prevalent endocrine disease in feline species, caused by a nutritional disorder with negative energy balance. It is defined as an excessive accumulation of adipose tissue that negatively affects the animal's health and is associated with a decrease in life expectancy and as triggering causes are multifactorial, being linked to several genetic and environmental factors. Adipose tissue is an endocrine organ that actively participates in energy metabolism and concentrates hormonal factors that are secreted by adipocytes, which modulate metabolism and exert the ability to directly involve innate and adaptive immune responses through the activity of the main cell types, including adipocytes and macrophages responsible for the activation and release of cytokines that affect normal physiological function, influencing the development of chronic inflammation. The altered production of adipokines in obesity has been implicated in the pathophysiology of several groups of diseases and their possible contribution to the development of insulin resistance and diabetes mellitus. Despite the incomplete understanding of the triggering factors of inflammation in the adipose tissue of cats, it is suggested that aspects associated with mitochondrial dysfunction, hypoxia, or even intrinsic factors of the adipocyte are involved.

Acute and chronic immunomodulatory response mechanisms against Toxocara canis larvae infection in mice / Mecanismos da resposta imunomoduladora aguda e crônica contra a infecção por larvas de Toxocara canis em camundongos

The objective of this work was to evaluate the early and late immunological modulation of an experimental infection of T. canis larvae in mice. Mice were infected with 100 infective larvae and euthanized at different period: 24, 48 hours post infection (HPI), 15- and 30 days post infection (DPI). The humoral response was evaluated by indirect ELISA. Quantitative RT-PCR (qPCR) was used to quantify the mRNA transcription of cytokines IL4, IL10, IL12 and Ym1 in the early and late infection periods. Infection with T. canis was able to generate specific total IgG at 15- and 30- DPI. Analyzing the IgG isotype revealed a significant differentiation for IgG1 compared with IgG2a, IgG2b and IgG3, characterizing a Th-2 response. Evaluating the gene transcription at the early phase of infection, higher transcription levels of IL10, IL4 and Ym1 and a downregulation of IL12 were observed. By the late phase, increased transcription levels of IL4, Ym1 and IL12 were observed, and downregulation of IL-10 transcription was observed. The data obtained suggest that during experimental infection with T. canis, the participation of the IL4, IL10, IL12 cytokines and Ym1 can play an important role in T. canis immunomodulation.(AU)

O objetivo deste trabalho foi avaliar a modulação imunológica precoce e tardia da infecção experimental de larvas de T. canis em camundongos. Estes foram infectados com 100 larvas infectantes e eutanasiados em diferentes períodos: 24 e 48 horas pós infecção (HPI), 15 e 30 dias após a infecção (DPI). A resposta humoral foi avaliada por ELISA indireto. RT-PCR quantitativo (qPCR) foi usado para quantificar a transcrição de mRNA das citocinas IL4, IL10, IL12 e Ym1 nos períodos de infecção precoce e tardia. A infecção por T. canis foi capaz de gerar IgG total específico aos 15 e 30 DPI. A análise do isótipo IgG revelou uma diferenciação significativa para IgG1 em comparação com IgG2a, IgG2b e IgG3, caracterizando uma resposta Th-2. Avaliando-se a transcrição gênica na fase inicial da infecção, foram observados níveis mais elevados de transcrição de IL10, IL4 e Ym1 e a regulação negativa de IL12. Na fase tardia, foram observados níveis aumentados de transcrição de IL4, Ym1 e IL12, e foi observada regulação negativa da transcrição de IL-10. Os dados obtidos sugerem, que durante a infecção experimental com T. canis, a participação das citocinas IL4, IL10, IL12 e Ym1 podem desempenhar um papel importante na imunomodulação de T. canis.(AU)

Detection of respiratory viruses and expression of inflammatory cytokines in patients with acute exacerbation chronic obstructive pulmonary disease in Mongolia China / Detecção de vírus respiratórios e expressão de citocinas inflamatórias em pacientes com doença pulmonar obstrutiva crônica de exacerbação aguda na Mongólia, China

Chronic obstructive pulmonary disease (COPD) was estimated to be the third cause of global mortality by 2020. Acute exacerbation COPD (AECOPD) is a sudden worsening of COPD symptoms and could be due to virus/bacterial infections and air pollution. Increased expression of inflammatory markers in patients with AECOPD is associated with viral infection. This study aimed to detect different viruses and analyze the expression of various inflammatory markers associated with AECOPD patients. Three hundred and forty-seven patients diagnosed with COPD according to GOLD criteria were included in this study. Swab samples and blood were collected for the detection of viruses by RT-PCR and expression of inflammatory markers, respectively. Of the swab samples, 113 (32.6%) of samples were positive for virus detection. Of these, HRV (39.8%) was the predominant virus detected followed by FluB (27.4%) and FluA (22.1%). The presence of HRV was significantly higher (p=0.044) among the other detected viruses. When compared to healthy controls the expression levels of TNF-α, IL-6 and IL-8 were significantly higher (p<0.05) in virus-positive patients. The IL-6 and IL-8 were the next predominantly expressed in markers among the samples. The higher expression rate of IL-8 was significantly (p<0.05) associated with patients having COPD GOLD III severity level and smoking history. Although HRV was the predominant virus detected the combined prevalence of Influenza A and B surpassing the rate of HRV. The high-level expression of well known inflammatory markers of AECOPD, TNF-α, IL-6 and IL-8 indicates a chronic severe illness. These markers play an important role and could be used as a marker for determining the severity of AECOPD.(AU)

Estima-se que a doença pulmonar obstrutiva crônica (DPOC) seja a terceira causa de mortalidade global em 2020. A exacerbação aguda DPOC (AECOPD) é um agravamento súbito dos sintomas da DPOC e pode ser devido a infecções por vírus/bactérias e poluição do ar. O aumento da expressão de marcadores inflamatórios em pacientes com AECOPD está associado à infecção viral. Este estudo teve como objetivo detectar diferentes vírus e analisar a expressão de vários marcadores inflamatórios associados a pacientes com AECOPD. Trezentos e quarenta e sete pacientes com diagnóstico de DPOC de acordo com os critérios GOLD foram incluídos neste estudo. Amostras de swab e sangue foram coletadas para detecção de vírus por RT-PCR e expressão de marcadores inflamatórios, respectivamente. Das amostras de esfregaço, 113 (32,6%) amostras foram positivas para detecção de vírus. Nestas, o HRV (39,8%) foi o vírus predominante detectado, seguido do FluB (27,4%) e do FluA (22,1%). A presença de VFC foi significativamente maior (p = 0,044) entre os demais vírus detectados. Quando comparados a controles saudáveis, os níveis de expressão de TNF-α, IL-6 e IL-8 foram significativamente maiores (p <0,05) em pacientes com vírus positivo. A IL-6 e a IL-8 foram as próximas predominantemente expressas em marcadores entre as amostras. A maior taxa de expressão de IL-8 foi significativamente (p <0,05) associada a pacientes com grau de gravidade GOLD III da DPOC e história de tabagismo. Embora o HRV tenha sido o vírus predominante, a prevalência combinada de Influenza A e B ultrapassou a taxa de HRV. O alto nível de expressão de marcadores inflamatórios bem conhecidos de AECOPD, TNF-α, IL-6 e IL-8 indica uma doença crônica grave. Esses marcadores desempenham um papel importante e podem ser usados como um marcador para determinar a gravidade da AECOPD.(AU)

Detection of respiratory viruses and expression of inflammatory cytokines in patients with acute exacerbation chronic obstructive pulmonary disease in Mongolia China / Detecção de vírus respiratórios e expressão de citocinas inflamatórias em pacientes com doença pulmonar obstrutiva crônica de exacerbação aguda na Mongólia, China

Chronic obstructive pulmonary disease (COPD) was estimated to be the third cause of global mortality by 2020. Acute exacerbation COPD (AECOPD) is a sudden worsening of COPD symptoms and could be due to virus/bacterial infections and air pollution. Increased expression of inflammatory markers in patients with AECOPD is associated with viral infection. This study aimed to detect different viruses and analyze the expression of various inflammatory markers associated with AECOPD patients. Three hundred and forty-seven patients diagnosed with COPD according to GOLD criteria were included in this study. Swab samples and blood were collected for the detection of viruses by RT-PCR and expression of inflammatory markers, respectively. Of the swab samples, 113 (32.6%) of samples were positive for virus detection. Of these, HRV (39.8%) was the predominant virus detected followed by FluB (27.4%) and FluA (22.1%). The presence of HRV was significantly higher (p=0.044) among the other detected viruses. When compared to healthy controls the expression levels of TNF-α, IL-6 and IL-8 were significantly higher (p<0.05) in virus-positive patients. The IL-6 and IL-8 were the next predominantly expressed in markers among the samples. The higher expression rate of IL-8 was significantly (p<0.05) associated with patients having COPD GOLD III severity level and smoking history. Although HRV was the predominant virus detected the combined prevalence of Influenza A and B surpassing the rate of HRV. The high-level expression of well known inflammatory markers of AECOPD, TNF-α, IL-6 and IL-8 indicates a chronic severe illness. These markers play an important role and could be used as a marker for determining the severity of AECOPD.

Estima-se que a doença pulmonar obstrutiva crônica (DPOC) seja a terceira causa de mortalidade global em 2020. A exacerbação aguda DPOC (AECOPD) é um agravamento súbito dos sintomas da DPOC e pode ser devido a infecções por vírus/bactérias e poluição do ar. O aumento da expressão de marcadores inflamatórios em pacientes com AECOPD está associado à infecção viral. Este estudo teve como objetivo detectar diferentes vírus e analisar a expressão de vários marcadores inflamatórios associados a pacientes com AECOPD. Trezentos e quarenta e sete pacientes com diagnóstico de DPOC de acordo com os critérios GOLD foram incluídos neste estudo. Amostras de swab e sangue foram coletadas para detecção de vírus por RT-PCR e expressão de marcadores inflamatórios, respectivamente. Das amostras de esfregaço, 113 (32,6%) amostras foram positivas para detecção de vírus. Nestas, o HRV (39,8%) foi o vírus predominante detectado, seguido do FluB (27,4%) e do FluA (22,1%). A presença de VFC foi significativamente maior (p = 0,044) entre os demais vírus detectados. Quando comparados a controles saudáveis, os níveis de expressão de TNF-α, IL-6 e IL-8 foram significativamente maiores (p <0,05) em pacientes com vírus positivo. A IL-6 e a IL-8 foram as próximas predominantemente expressas em marcadores entre as amostras. A maior taxa de expressão de IL-8 foi significativamente (p <0,05) associada a pacientes com grau de gravidade GOLD III da DPOC e história de tabagismo. Embora o HRV tenha sido o vírus predominante, a prevalência combinada de Influenza A e B ultrapassou a taxa de HRV. O alto nível de expressão de marcadores inflamatórios bem conhecidos de AECOPD, TNF-α, IL-6 e IL-8 indica uma doença crônica grave. Esses marcadores desempenham um papel importante e podem ser usados como um marcador para determinar a gravidade da AECOPD.

Wound-healing and cytokine-modulating potential of medicinal oil formulation comprising leaf extract of Murraya koenigii and olive oil / Potencial de cicatrização de feridas e modulação de citocinas de formulação de óleo medicinal compreendendo extrato de folhas de Murraya koenigii e azeite de oliva

The study investigated the wound healing effect of medicinal oil (MO) formulation prepared from Murraya koenigii leaves extract (methanolic) incorporated in olive oil. The MO was visually transparent, homogenous, smooth in texture, the viscosity grade was observed as 140 cP and easily spreadable. Pro-inflammatory cytokines IL-1ß, IL-6, and TNF-α were significantly reduced to 82.3 ± 3.5, 156 ± 6.2, 137.3. ± 5.5 pg/ml, respectively after treatment with MO when compared to disease control animals that showed IL-1ß, IL-6, and TNF-α levels of 170 ± 6, 265 ± 7, and 288.6 ± 11, pg/ml respectively. The level of pro-inflammatory cytokine in povidone iodine solution (PIS) group was 95.3 ± 3, 162 ± 6, 177.6 ± 8.9 pg/ml of IL-1ß, IL-6, and TNF-α respectively. Interestingly, the wound-healing efficacy of MO was found better as compared to povidone iodine treated standard group and concluded that MO has excellent wound healing effect.

O estudo investigou o efeito cicatrizante da formulação de óleo medicinal (MO) preparado a partir do extrato de folhas de Murraya koenigii (metanol) incorporado ao azeite de oliva. O MO era visualmente transparente, homogêneo, de textura lisa, o grau de viscosidade observado foi de 140 cP e facilmente espalhável. As citocinas pró-inflamatórias IL-1ß, IL-6 e TNF-α foram significativamente reduzidas para 82,3 ± 3,5, 156 ± 6,2, 137,3. ± 5,5 pg/ml, respectivamente, após o tratamento com MO quando comparados aos animais controle da doença que apresentaram níveis de IL-1ß, IL-6 e TNF-α de 170 ± 6, 265 ± 7 e 288,6 ± 11, pg/ml, respectivamente . O nível de citocina pró-inflamatória no grupo solução de iodopovidona (PIS) foi de 95,3 ± 3, 162 ± 6, 177,6 ± 8,9 pg/ml de IL-1ß, IL-6 e TNF-α, respectivamente. Curiosamente, a eficácia de cicatrização de feridas de MO foi encontrada melhor em comparação com o grupo padrão tratado com iodopovidona e concluiu que a preparação de MO tem efeito de cicatrização de feridas.

Innate immunity gene expression profiles in conjunctival membrane biopsies from Amazonian buffalo / Perfis de expressão de genes da imunidade inata em biopsias de membrana conjuntival de búfalos da Amazônia

Domestic buffalo production plays an economically important role in the Brazilian Amazon, but they are susceptible to many diseases favored by the tropical climate and annually flooded habitats, including ocular diseases. In this context, it is important to select genotypes that maximize innate ocular immunity in Amazonian herds. We aimed to characterise, for the first time, gene expression profiles of the innate immune system in the conjunctival membrane of buffalo. Ocular conjunctival tissue samples were collected from 60 clinically healthy slaughtered animals in the northern Brazilian state of Amapá. The samples were histologically processed for classification into three groups according to the quantitative degree of lymphoid tissue associated with the conjunctiva (discrete, G1; slight, G2; and moderate, G3 presence of lymphoid tissue). RT-PCR was used to quantify gene expression of inflammatory cytokine (IL6, IL10, TNFA, IFNG), Toll-like receptor 4 (TLR4), and Defensin beta 110 (DEFB110), relative to the endogenous GAPDH gene. G1 animals presented low expression for IL6, IL10, TNFA, and DEFB110, while G2 exhibited high expression for IL6, IL10, IFNG, and TLR4. All G3 animals showed high expression for all tested genes. These results suggest a greater resistance to pathogenic microorganisms of buffalos in the G3 group, and the proportion of lymphoid tissue associated with the conjunctiva may be related to the immune resistance of individuals.(AU)

A produção de búfalos domésticos desempenha um papel economicamente importante na Amazônia brasileira, mas eles são suscetíveis a muitas doenças favorecidas pelo clima tropical e habitats inundados anualmente, incluindo doenças oculares. Nesse contexto, é importante selecionar genótipos que maximizem a imunidade ocular inata em rebanhos amazônicos. Objetivamos caracterizar, pela primeira vez, perfis de expressão gênica do sistema imune inato na membrana conjuntival de búfalos. Amostras de tecido conjuntival ocular foram coletadas de 60 animais clinicamente saudáveis abatidos no estado do Amapá, norte do Brasil. As amostras foram processadas histologicamente para classificação em três grupos de acordo com o grau quantitativo de tecido linfoide associado à conjuntiva (discreta, G1; leve, G2; e moderada, G3 presença de tecido linfoide). RT-PCR foi utilizado para quantificar a expressão gênica de citocinas inflamatórias (IL6, IL10, TNFA, IFNG), receptor Toll-like 4 (TLR4) e Defensina beta 110 (DEFB110), em relação ao gene GAPDH endógeno. Os animais do G1 apresentaram baixa expressão para IL6, IL10, TNFA e DEFB110, enquanto G2 exibiu alta expressão para IL6, IL10, IFNG e TLR4. Todos os animais do G3 apresentaram alta expressão para todos os genes testados. Esses resultados sugerem maior resistência aos microrganismos patogênicos dos búfalos do grupo G3, e a proporção de tecido linfoide associado à conjuntiva pode estar relacionada à resistência imunológica dos indivíduos.(AU)

Evaluation of cell damage and modulation of cytokines TNF-, IL-6 and IL-10 in macrophages exposed to PpIX-mediated photodynamic therapy / Avaliação do dano celular e da modulação das citocinas TNF-alpha, IL-6 e IL-10 em macrófagos expostos à terapia fotodinâmica mediada pela PpIX

Little is known regarding whether photodynamic therapy (PDT)-induced cell death can substantially compromise macrophages (M), which are important cells in PDT-induced immune responses. Here, parameters of PDT-mediated M cytotoxicity and cytokine production in response to protoporphyrin IX (PpIX) were evaluated. Peritoneal M from BALB/c mice were stimulated in vitro with PDT, light, PpIX, or lipopolysaccharide (LPS). After that, cell viability, lipid peroxidation, Nitric Oxide (NO), DNA damage, TNF-, IL-6 and IL-10 were evaluated. Short PDT exposure reduced cell viability by 1030%. There was a two-fold increase in NO and DNA degradation, despite the non-increase in lipoperoxidation. PDT increased TNF- and IL-10, particularly in the presence of LPS, and decreased the production of IL-6 to 10-fold. PDT causes cellular stress, induces NO radicals and leads to DNA degradation, generating a cytotoxic microenvironment. Furthermore, PDT modulates pro- and anti-inflammatory cytokines in M(AU)

Pouco se sabe se a morte celular induzida pela terapia fotodinâmica (PDT) compromete os macrófagos (M), envolvidos nas respostas imunes induzidas pela PDT. Neste estudo, foram avaliados parâmetros de citotoxicidade dos M mediada pela PDT e a produção de citocinas, frente à protoporfirina IX (PpIX). M peritoneais de camundongos BALB/c foram estimulados in vitro com PDT, luz, PpIX ou lipopolissacarídeo (LPS). Após isto, a viabilidade celular (VC), a lipoperoxidação, os níveis de óxido nítrico (NO), de DNA degradado, de TNF-, IL-6 e IL-10 foram avaliados. A exposição curta à PDT reduziu a VC em 10-30%. Os níveis de NO e de DNA degradado duplicaram, sem aumento da lipoperoxidação. Houve aumento de TNF- e IL-10, sendo maior na presença de LPS. Já a produção de IL-6 reduziu em dez vezes. A PDT induz estresse celular, gera radicais NO e causa dano ao DNA, tornando o microambiente citotóxico. Ainda, modula citocinas pró e anti-inflamatórias em M(AU)

Histomorphometric and immunohistochemical evaluation of the frontal cerebral cortex in diabetic rats after treatment with melatonin / Avaliação histomorfométrica e imuno-histoquímica do córtex cerebral frontal em ratos diabéticos após o tratamento com melatonina

The central nervous system is vulnerable to complications caused by diabetes. These complications lead to increased oxidative stress in the brain, resulting in damage to the cerebral cortex, among other regions. Insulin and hypoglycemic agents are still the most widely used treatments. However, current research with an experimental model of diabetes suggests the use of antioxidants, such as melatonin. Thus, we tested the hypothesis that exogenous melatonin may decrease or prevent the effects of diabetes in the frontal cortex of the rat brain. Fifty albino rats were allocated into five groups: GC = rats without diabetes induction, GD = diabetic rats induced by streptozotocin, GDM = streptozotocin-induced and melatonin-treated diabetic rats, GDI = diabetic rats induced by streptozotocin and treated with insulin, GDMI = diabetic rats induced by streptozotocin and treated with melatonin and insulin simultaneously. Diabetes was induced by intraperitoneal administration of streptozotocin (60mg/kg). Insulin (5U/day) was administered subcutaneously and melatonin (10mg/kg) by drinking water; both treatments last days after. We analyzed animals' weight, the cytokines IL-6 and TNF-α, apoptosis, glycogen, and did morphometry and histopathology of the frontal cortex were analyzed. The results showed that the cerebral cortex of the diabetic animals presented axonal degeneration, reduced number of neurons in the cortex, reduced glycogen, increased IL-6 and TNF-α expression, high apoptotic index, and reduced animal weight and the brain. Treatment with melatonin associated or not with insulin prevented such effects. Thus, we conclude that melatonin associated with insulin may be an alternative for avoiding the impact of diabetes in the brain's frontal cortex.(AU)

O sistema nervoso central é vulnerável a complicações originadas pelo diabetes estresse oxidativo no cérebro e resultando em lesões no córtex cerebral, dentre outras regiões. A insulina e hipoglicemiantes ainda são os tratamentos mais utilizados, entretanto, pesquisas atuais com modelo experimental do diabetes sugerem a utilização de antioxidantes como, por exemplo, a melatonina. Assim, testamos a hipótese de que a melatonina exógena pode diminuir ou prevenir os efeitos do diabetes no córtex frontal do cérebro de ratos. Foram utilizados 50 ratos albinos, divididos em 5 grupos: GC = ratos sem indução ao diabetes, GD = ratos induzidos ao diabetes pela estreptozotocina, GDM = ratos induzidos ao diabetes pela estreptozotocina e tratados com melatonina, GDI = ratos induzidos ao diabetes pela estreptozotocina e tratados com insulina, GDMI = ratos induzidos ao diabetes pela estreptozotocina e tratados com melatonina e insulina simultaneamente. O diabetes foi induzido pela administração intraperitoneal de estreptozotocina (60mg/kg). A insulina (5U/dia) foi administrada por via subcutânea e a melatonina (10mg/kg) pela água de beber. Ambos tratamentos foram realizados durante 30 dias após a indução. Foram analisados o peso dos animais, do cerebro, as citocinas IL-6 e TNF-α, apoptose, glicogênio, além da morfometria e histopatologia do córtex frontal. Os resultados mostraram que o córtex cerebral dos animais diabéticos apresentou degeneração axonal, redução do número de neurônios no córtex, redução do glicogênio, aumento da expressão do IL-6 e TNF-α, elevação do índice apoptótico, além da redução do peso dos animais e do cérebro. O tratamento com melatonina associada ou não a insulina preveniu tais efeitos. Assim, concluímos que a melatonina associada ou não a insulina pode ser uma alternativa na prevenção dos efeitos do diabetes no córtex frontal do cérebro.(AU)

Markers of inflammation and insulin resistance in dogs before and after weight loss versus lean healthy dogs / Marcadores de inflamação e resistência à insulina em cães antes e depois da perda de peso versus cães saudáveis e magros

Chronic low-grade inflammation in obesity is characterized by an increased production of pro-inflammatory cytokines that contribute to insulin resistance. For this study body composition, markers of inflammation and of insulin resistance in dogs before and after weight loss were compared to those of lean dogs. Eleven client-owned obese adult dogs underwent a weight loss program with commercial dry food for weight loss and reached an ideal body condition score (BCS) six months after the beginning of the weight loss program. A Control Group of nine dogs with ideal BCS were selected for the comparison. Shapiro-Wilk test was used to test for normality, Mann Whitney were used for non-normally distributes data, and Student t-test was used for normally distributed parameters. In the Obese Group body fat decreased from 41.6% (30.7-58.6) to 29.1% (18.6-46.3) (P<0.01) and dogs maintained lean body mass throughout the weight loss program (P>0.05). Obese dogs presented higher concentration of fructosamine, triglycerides, insulin, IGF-1 and leptin than the Control Group before weight reduction (P<0.05). Serum concentrations of triglycerides, IL-2, IL-6, TNF-α, insulin, leptin and IGF-1 decreased after weight loss (P<0.01), and these concentrations were similar to the Control Group (P>0.05), except for leptin (P<0.001). No alteration on peptide YY was found. Leptin (r=0.60, P=0.01), fructosamine (r=0.44, P=0.02) and triglycerides (r=0.40, P=0.04) concentrations correlated with the reduction of body fat. Weight loss reduced the concentrations of inflammatory and insulin resistance markers and most parameters became similar to dogs that have always been lean, reinforcing the importance of weight loss in small animal practice.(AU)

A inflamação crônica de baixo grau na obesidade é caracterizada pela produção aumentada de citocinas pró-inflamatórias que contribuem para a resistência à insulina. Para este estudo a composição corporal e os marcadores de inflamação e de resistência à insulina em cães antes e após a perda de peso foram comparados aos de cães magros. Onze cães adultos obesos pertencentes a tutores foram incluídos em um programa de perda de peso com ração comercial hipocalórica e alcançaram escore de condição corporal (ECC) ideal seis meses após o início do regime. Um Grupo Controle de nove cães com ECC ideal foi selecionado para a comparação. O teste de Shapiro-Wilk foi usado para testar a normalidade, Mann Whitney foi usado para análise dos dados que não atenderam distribuição normal e o teste t de Student foi usado para parâmetros que atenderam a normalidade. No Grupo Obesidade, a gordura corporal diminuiu de 41,6% (30,7-58,6) para 29,1% (18,6-46,3) (P<0,01) e os cães mantiveram massa magra ao longo do programa de perda de peso (P>0,05). Cães obesos apresentaram maior concentração de frutosamina, triglicérides, insulina, IGF-1 e leptina do que o Grupo Controle antes da redução de peso (P<0,05). As concentrações séricas de triglicerídeos, IL-2, IL-6, TNF-α, insulina, leptina e IGF-1 diminuíram após a perda de peso (P<0,01) e, essas concentrações foram semelhantes ao Grupo Controle (P>0,05), com exceção da leptina (P<0,001). Nenhuma alteração no peptídeo YY foi encontrada. As concentrações de leptina (r=0,60; P=0,01), frutosamina (r=0,44; P=0,02) e triglicerídeos (r=0,40; P=0,04) correlacionaram-se com a redução da gordura corporal. A perda de peso reduziu as concentrações de marcadores inflamatórios e de resistência à insulina e a maioria dos parâmetros tornaram-se semelhante aos dos cães que sempre foram magros, reforçando a importância da perda de peso na prática clínica de pequenos animais.(AU)

Histomorphometric and immunohistochemical evaluation of the frontal cerebral cortex in diabetic rats after treatment with melatonin / Avaliação histomorfométrica e imuno-histoquímica do córtex cerebral frontal em ratos diabéticos após o tratamento com melatonina

The central nervous system is vulnerable to complications caused by diabetes. These complications lead to increased oxidative stress in the brain, resulting in damage to the cerebral cortex, among other regions. Insulin and hypoglycemic agents are still the most widely used treatments. However, current research with an experimental model of diabetes suggests the use of antioxidants, such as melatonin. Thus, we tested the hypothesis that exogenous melatonin may decrease or prevent the effects of diabetes in the frontal cortex of the rat brain. Fifty albino rats were allocated into five groups: GC = rats without diabetes induction, GD = diabetic rats induced by streptozotocin, GDM = streptozotocin-induced and melatonin-treated diabetic rats, GDI = diabetic rats induced by streptozotocin and treated with insulin, GDMI = diabetic rats induced by streptozotocin and treated with melatonin and insulin simultaneously. Diabetes was induced by intraperitoneal administration of streptozotocin (60mg/kg). Insulin (5U/day) was administered subcutaneously and melatonin (10mg/kg) by drinking water; both treatments last days after. We analyzed animals' weight, the cytokines IL-6 and TNF-α, apoptosis, glycogen, and did morphometry and histopathology of the frontal cortex were analyzed. The results showed that the cerebral cortex of the diabetic animals presented axonal degeneration, reduced number of neurons in the cortex, reduced glycogen, increased IL-6 and TNF-α expression, high apoptotic index, and reduced animal weight and the brain. Treatment with melatonin associated or not with insulin prevented such effects. Thus, we conclude that melatonin associated with insulin may be an alternative for avoiding the impact of diabetes in the brain's frontal cortex.(AU)

O sistema nervoso central é vulnerável a complicações originadas pelo diabetes estresse oxidativo no cérebro e resultando em lesões no córtex cerebral, dentre outras regiões. A insulina e hipoglicemiantes ainda são os tratamentos mais utilizados, entretanto, pesquisas atuais com modelo experimental do diabetes sugerem a utilização de antioxidantes como, por exemplo, a melatonina. Assim, testamos a hipótese de que a melatonina exógena pode diminuir ou prevenir os efeitos do diabetes no córtex frontal do cérebro de ratos. Foram utilizados 50 ratos albinos, divididos em 5 grupos: GC = ratos sem indução ao diabetes, GD = ratos induzidos ao diabetes pela estreptozotocina, GDM = ratos induzidos ao diabetes pela estreptozotocina e tratados com melatonina, GDI = ratos induzidos ao diabetes pela estreptozotocina e tratados com insulina, GDMI = ratos induzidos ao diabetes pela estreptozotocina e tratados com melatonina e insulina simultaneamente. O diabetes foi induzido pela administração intraperitoneal de estreptozotocina (60mg/kg). A insulina (5U/dia) foi administrada por via subcutânea e a melatonina (10mg/kg) pela água de beber. Ambos tratamentos foram realizados durante 30 dias após a indução. Foram analisados o peso dos animais, do cerebro, as citocinas IL-6 e TNF-α, apoptose, glicogênio, além da morfometria e histopatologia do córtex frontal. Os resultados mostraram que o córtex cerebral dos animais diabéticos apresentou degeneração axonal, redução do número de neurônios no córtex, redução do glicogênio, aumento da expressão do IL-6 e TNF-α, elevação do índice apoptótico, além da redução do peso dos animais e do cérebro. O tratamento com melatonina associada ou não a insulina preveniu tais efeitos. Assim, concluímos que a melatonina associada ou não a insulina pode ser uma alternativa na prevenção dos efeitos do diabetes no córtex frontal do cérebro.(AU)

Markers of inflammation and insulin resistance in dogs before and after weight loss versus lean healthy dogs / Marcadores de inflamação e resistência à insulina em cães antes e depois da perda de peso versus cães saudáveis e magros

Chronic low-grade inflammation in obesity is characterized by an increased production of pro-inflammatory cytokines that contribute to insulin resistance. For this study body composition, markers of inflammation and of insulin resistance in dogs before and after weight loss were compared to those of lean dogs. Eleven client-owned obese adult dogs underwent a weight loss program with commercial dry food for weight loss and reached an ideal body condition score (BCS) six months after the beginning of the weight loss program. A Control Group of nine dogs with ideal BCS were selected for the comparison. Shapiro-Wilk test was used to test for normality, Mann Whitney were used for non-normally distributes data, and Student t-test was used for normally distributed parameters. In the Obese Group body fat decreased from 41.6% (30.7-58.6) to 29.1% (18.6-46.3) (P<0.01) and dogs maintained lean body mass throughout the weight loss program (P>0.05). Obese dogs presented higher concentration of fructosamine, triglycerides, insulin, IGF-1 and leptin than the Control Group before weight reduction (P<0.05). Serum concentrations of triglycerides, IL-2, IL-6, TNF-α, insulin, leptin and IGF-1 decreased after weight loss (P<0.01), and these concentrations were similar to the Control Group (P>0.05), except for leptin (P<0.001). No alteration on peptide YY was found. Leptin (r=0.60, P=0.01), fructosamine (r=0.44, P=0.02) and triglycerides (r=0.40, P=0.04) concentrations correlated with the reduction of body fat. Weight loss reduced the concentrations of inflammatory and insulin resistance markers and most parameters became similar to dogs that have always been lean, reinforcing the importance of weight loss in small animal practice.(AU)

A inflamação crônica de baixo grau na obesidade é caracterizada pela produção aumentada de citocinas pró-inflamatórias que contribuem para a resistência à insulina. Para este estudo a composição corporal e os marcadores de inflamação e de resistência à insulina em cães antes e após a perda de peso foram comparados aos de cães magros. Onze cães adultos obesos pertencentes a tutores foram incluídos em um programa de perda de peso com ração comercial hipocalórica e alcançaram escore de condição corporal (ECC) ideal seis meses após o início do regime. Um Grupo Controle de nove cães com ECC ideal foi selecionado para a comparação. O teste de Shapiro-Wilk foi usado para testar a normalidade, Mann Whitney foi usado para análise dos dados que não atenderam distribuição normal e o teste t de Student foi usado para parâmetros que atenderam a normalidade. No Grupo Obesidade, a gordura corporal diminuiu de 41,6% (30,7-58,6) para 29,1% (18,6-46,3) (P<0,01) e os cães mantiveram massa magra ao longo do programa de perda de peso (P>0,05). Cães obesos apresentaram maior concentração de frutosamina, triglicérides, insulina, IGF-1 e leptina do que o Grupo Controle antes da redução de peso (P<0,05). As concentrações séricas de triglicerídeos, IL-2, IL-6, TNF-α, insulina, leptina e IGF-1 diminuíram após a perda de peso (P<0,01) e, essas concentrações foram semelhantes ao Grupo Controle (P>0,05), com exceção da leptina (P<0,001). Nenhuma alteração no peptídeo YY foi encontrada. As concentrações de leptina (r=0,60; P=0,01), frutosamina (r=0,44; P=0,02) e triglicerídeos (r=0,40; P=0,04) correlacionaram-se com a redução da gordura corporal. A perda de peso reduziu as concentrações de marcadores inflamatórios e de resistência à insulina e a maioria dos parâmetros tornaram-se semelhante aos dos cães que sempre foram magros, reforçando a importância da perda de peso na prática clínica de pequenos animais.(AU)

Concentrations of matrix metalloproteinase-2 and interleukin-1 in the aqueous humor of dogs with normal and cataractous eyes

ABSTRACT: We aimed to determine the concentration of MMP-2 and IL-1 in the aqueous humor of dogs with healthy eyes (n=8) and in those with mature (n=8) and hyper mature cataracts (n=8). Correlations between cytokines, cytokines, and intraocular pressure (IOP), as well as cytokines with ages of patients of each group, were also assessed. In patients with cataract, aqueous humor was collected at the end of the electroretinographic procedure. In healthy dogs, aqueous humor was collected before elective surgeries. Cytokine levels were determined using ELISA. IOP was assessed by applanation tonometry. IOP of patients with mature and hyper mature cataracts were lower than the ones measured in normal eyes (P=0.158). MMP-2 aqueous humor concentration was higher in patients with hyper mature cataracts, in comparisons with healthy patients (P=0.04). Average IL-1 aqueous concentration was higher in patients with cataracts (P 0.0001). Significant higher values of IL-1 were observed in patients with hyper mature, than in the ones with mature cataracts (P=0.0085). Correlations between MMP-2 and IL-1 (r=-0.38, P=0.06), MMP-2 and IOP (r=-0.149, P=0.484), and IL-1 and the ages of patients were not observed (P>0.05). IL-1 and IOP correlated negatively (r=-0.42, P=0.04). MMP-2 and the ages of patients correlated only in dogs with mature cataracts (r=0.772, P=0.02). It can be concluded that the increment in the aqueous humor concentration of IL-1 found in dogs with mature and hyper mature cataracts, in addition to the negative relationship of this cytokine with IOP, suggests that IL-1 is involved in the pathogenesis of LIU. Despite dogs with hypermature cataracts presented significant higher concentrations of MMP-2 in the aqueous humor, such cytokine did not correlate with IL-1 and IOP. In our study, a relationship between aqueous humor cytokines and the ages of patients was only confirmed between MMP-2 and the ages of dogs with mature cataracts.

RESUMO: Objetivou-se determinar as concentrações da metalloprotease-2 (MMP-2) e de interleucina-1 (IL-1 ) em cães com olhos saudáveis (n=8) e naqueles com catarata madura (n=8) e hipermatura (n=8). Correlações entre ambas as citocinas, entre as citocinas e a pressão intraocular (PIO), assim como entre as citocinas e a idade dos pacientes dentro de cada grupo foram averiguadas. Nos pacientes com catarata, o humor aquoso foi colhido ao final da eletrorretinografia. Nos cães saudáveis, o humor aquoso foi colhido antes do início de cirurgias eletivas. Os níveis das citocinas foram determinados por ELISA e a PIO por tonometria de aplanação. A PIO dos pacientes com catarata madura e hipermadura foram mais baixas que aquelas dos pacientes controle (P=0.158). A concentração de MMP-2 no humor aquoso foi maior nos pacientes com catarata hipermtura, comparativamente aos pacientes saudáveis (P=0.04). A concentração de IL-1 no humor aquoso foi mais elevada nos cães com catarata (P 0.0001). Nos pacientes com catarata hipermatura, os valores de IL-1 foram significativamente mais altos que aqueles dosados nos pacientes com catarata madura (P=0.0085). Correlações entre MMP-2 e IL-1 (r=-0.38, P=0.06), MMP-2 e PIO (r=-0.149, P=0.484) e IL-1 e as idades dos pacientes não foram observadas (P>0.05). A IL-1 se correlacionou negativamente com a PIO (r=-0.42, P=0.04). Correlação entre MMP-2 e a idades dos pacientes foi observada apenas nos cães com catarata madura (r=0.772, P=0.02). Conclui-se que o aumento na concentração de IL-1 no humor aquoso de cães com catarata madura e hipermatura, associado à correlação negativa entre essa citocina e a PIO, sugerem que a mesma está envolvida na patogênese da uveíte induzida pela lente. Apesar dos cães com catarata hipermadura apresentarem concentrações significativamente maiores de MMP-2 no humor aquoso, essa citocina não se correlacionou com a IL-1 e a PIO. Em nosso estudo, correlação entre as citocinas dosadas no humor aquoso e a idade dos pacientes foi confirmada apenas entre MMP-2 e a idade dos cães com catarata madura.

Concentrations of matrix metalloproteinase-2 and interleukin-1 beta in the aqueous humor of dogs with normal and cataractous eyes / Concentração de metaloprotease-2 e de interleucina-1 beta no humor aquoso de cães com olhos normais e cataratosos

We aimed to determine the concentration of MMP-2 and IL-1ß in the aqueous humor of dogs with healthy eyes (n=8) and in those with mature (n=8) and hyper mature cataracts (n=8). Correlations between cytokines, cytokines, and intraocular pressure (IOP), as well as cytokines with ages of patients of each group, were also assessed. In patients with cataract, aqueous humor was collected at the end of the electroretinographic procedure. In healthy dogs, aqueous humor was collected before elective surgeries. Cytokine levels were determined using ELISA. IOP was assessed by applanation tonometry. IOP of patients with mature and hyper mature cataracts were lower than the ones measured in normal eyes (P=0.158). MMP-2 aqueous humor concentration was higher in patients with hyper mature cataracts, in comparisons with healthy patients (P=0.04). Average IL-1 ß aqueous concentration was higher in patients with cataracts (P<0.0001). Significant higher values of IL-1 ß were observed in patients with hyper mature, than in the ones with mature cataracts (P=0.0085). Correlations between MMP-2 and IL-1 ß (r=-0.38, P=0.06), MMP-2 and IOP (r=-0.149, P=0.484), and IL-1 ß and the ages of patients were not observed (P>0.05). IL-1 ß and IOP correlated negatively (r=-0.42, P=0.04). MMP-2 and the ages of patients correlated only in dogs with mature cataracts (r=0.772, P=0.02). It can be concluded that the increment in the aqueous humor concentration of IL-1 ß found in dogs with mature and hyper mature cataracts, in addition to the negative relationship of this cytokine with IOP, suggests that IL-1 ß is involved in the pathogenesis of LIU. Despite dogs with hypermature cataracts presented significant higher concentrations of MMP-2 in the aqueous humor, such cytokine did not correlate with IL-1 ß and IOP. In our study, a relationship between aqueous humor cytokines and the ages of patients was only confirmed between MMP-2 and the ages of dogs with mature cataracts.(AU)

Objetivou-se determinar as concentrações da metalloprotease-2 (MMP-2) e de interleucina-1 ß (IL-1 ß) em cães com olhos saudáveis (n=8) e naqueles com catarata madura (n=8) e hipermatura (n=8). Correlações entre ambas as citocinas, entre as citocinas e a pressão intraocular (PIO), assim como entre as citocinas e a idade dos pacientes dentro de cada grupo foram averiguadas. Nos pacientes com catarata, o humor aquoso foi colhido ao final da eletrorretinografia. Nos cães saudáveis, o humor aquoso foi colhido antes do início de cirurgias eletivas. Os níveis das citocinas foram determinados por ELISA e a PIO por tonometria de aplanação. A PIO dos pacientes com catarata madura e hipermadura foram mais baixas que aquelas dos pacientes controle (P=0.158). A concentração de MMP-2 no humor aquoso foi maior nos pacientes com catarata hipermtura, comparativamente aos pacientes saudáveis (P=0.04). A concentração de IL-1 ß no humor aquoso foi mais elevada nos cães com catarata (P<0.0001). Nos pacientes com catarata hipermatura, os valores de IL-1 ß foram significativamente mais altos que aqueles dosados nos pacientes com catarata madura (P=0.0085). Correlações entre MMP-2 e IL-1 ß (r=-0.38, P=0.06), MMP-2 e PIO (r=-0.149, P=0.484) e IL-1 ß e as idades dos pacientes não foram observadas (P>0.05). A IL-1 ß se correlacionou negativamente com a PIO (r=-0.42, P=0.04). Correlação entre MMP-2 e a idades dos pacientes foi observada apenas nos cães com catarata madura (r=0.772, P=0.02). Conclui-se que o aumento na concentração de IL-1 ß no humor aquoso de cães com catarata madura e hipermatura, associado à correlação negativa entre essa citocina e a PIO, sugerem que a mesma está envolvida na patogênese da uveíte induzida pela lente. Apesar dos cães com catarata hipermadura apresentarem concentrações significativamente maiores de MMP-2 no humor aquoso, essa citocina não se correlacionou com a IL-1 ß e a PIO. Em nosso estudo, correlação entre as citocinas dosadas no humor aquoso e a idade dos pacientes foi confirmada apenas entre MMP-2 e a idade dos cães com catarata madura.(AU)

Concentrations of matrix metalloproteinase-2 and interleukin-1 beta in the aqueous humor of dogs with normal and cataractous eyes / Concentração de metaloprotease-2 e de interleucina-1 beta no humor aquoso de cães com olhos normais e cataratosos

We aimed to determine the concentration of MMP-2 and IL-1ß in the aqueous humor of dogs with healthy eyes (n=8) and in those with mature (n=8) and hyper mature cataracts (n=8). Correlations between cytokines, cytokines, and intraocular pressure (IOP), as well as cytokines with ages of patients of each group, were also assessed. In patients with cataract, aqueous humor was collected at the end of the electroretinographic procedure. In healthy dogs, aqueous humor was collected before elective surgeries. Cytokine levels were determined using ELISA. IOP was assessed by applanation tonometry. IOP of patients with mature and hyper mature cataracts were lower than the ones measured in normal eyes (P=0.158). MMP-2 aqueous humor concentration was higher in patients with hyper mature cataracts, in comparisons with healthy patients (P=0.04). Average IL-1 ß aqueous concentration was higher in patients with cataracts (P<0.0001). Significant higher values of IL-1 ß were observed in patients with hyper mature, than in the ones with mature cataracts (P=0.0085). Correlations between MMP-2 and IL-1 ß (r=-0.38, P=0.06), MMP-2 and IOP (r=-0.149, P=0.484), and IL-1 ß and the ages of patients were not observed (P>0.05). IL-1 ß and IOP correlated negatively (r=-0.42, P=0.04). MMP-2 and the ages of patients correlated only in dogs with mature cataracts (r=0.772, P=0.02). It can be concluded that the increment in the aqueous humor concentration of IL-1 ß found in dogs with mature and hyper mature cataracts, in addition to the negative relationship of this cytokine with IOP, suggests that IL-1 ß is involved in the pathogenesis of LIU. Despite dogs with hypermature cataracts presented significant higher concentrations of MMP-2 in the aqueous humor, such cytokine did not correlate with IL-1 ß and IOP. In our study, a relationship between aqueous humor cytokines and the ages of patients was only confirmed between MMP-2 and the ages of dogs with mature cataracts.(AU)

Objetivou-se determinar as concentrações da metalloprotease-2 (MMP-2) e de interleucina-1 ß (IL-1 ß) em cães com olhos saudáveis (n=8) e naqueles com catarata madura (n=8) e hipermatura (n=8). Correlações entre ambas as citocinas, entre as citocinas e a pressão intraocular (PIO), assim como entre as citocinas e a idade dos pacientes dentro de cada grupo foram averiguadas. Nos pacientes com catarata, o humor aquoso foi colhido ao final da eletrorretinografia. Nos cães saudáveis, o humor aquoso foi colhido antes do início de cirurgias eletivas. Os níveis das citocinas foram determinados por ELISA e a PIO por tonometria de aplanação. A PIO dos pacientes com catarata madura e hipermadura foram mais baixas que aquelas dos pacientes controle (P=0.158). A concentração de MMP-2 no humor aquoso foi maior nos pacientes com catarata hipermtura, comparativamente aos pacientes saudáveis (P=0.04). A concentração de IL-1 ß no humor aquoso foi mais elevada nos cães com catarata (P<0.0001). Nos pacientes com catarata hipermatura, os valores de IL-1 ß foram significativamente mais altos que aqueles dosados nos pacientes com catarata madura (P=0.0085). Correlações entre MMP-2 e IL-1 ß (r=-0.38, P=0.06), MMP-2 e PIO (r=-0.149, P=0.484) e IL-1 ß e as idades dos pacientes não foram observadas (P>0.05). A IL-1 ß se correlacionou negativamente com a PIO (r=-0.42, P=0.04). Correlação entre MMP-2 e a idades dos pacientes foi observada apenas nos cães com catarata madura (r=0.772, P=0.02). Conclui-se que o aumento na concentração de IL-1 ß no humor aquoso de cães com catarata madura e hipermatura, associado à correlação negativa entre essa citocina e a PIO, sugerem que a mesma está envolvida na patogênese da uveíte induzida pela lente. Apesar dos cães com catarata hipermadura apresentarem concentrações significativamente maiores de MMP-2 no humor aquoso, essa citocina não se correlacionou com a IL-1 ß e a PIO. Em nosso estudo, correlação entre as citocinas dosadas no humor aquoso e a idade dos pacientes foi confirmada apenas entre MMP-2 e a idade dos cães com catarata madura.(AU)

Concentrations of matrix metalloproteinase-2 and interleukin-1 in the aqueous humor of dogs with normal and cataractous eyes

ABSTRACT: We aimed to determine the concentration of MMP-2 and IL-1 in the aqueous humor of dogs with healthy eyes (n=8) and in those with mature (n=8) and hyper mature cataracts (n=8). Correlations between cytokines, cytokines, and intraocular pressure (IOP), as well as cytokines with ages of patients of each group, were also assessed. In patients with cataract, aqueous humor was collected at the end of the electroretinographic procedure. In healthy dogs, aqueous humor was collected before elective surgeries. Cytokine levels were determined using ELISA. IOP was assessed by applanation tonometry. IOP of patients with mature and hyper mature cataracts were lower than the ones measured in normal eyes (P=0.158). MMP-2 aqueous humor concentration was higher in patients with hyper mature cataracts, in comparisons with healthy patients (P=0.04). Average IL-1 aqueous concentration was higher in patients with cataracts (P 0.0001). Significant higher values of IL-1 were observed in patients with hyper mature, than in the ones with mature cataracts (P=0.0085). Correlations between MMP-2 and IL-1 (r=-0.38, P=0.06), MMP-2 and IOP (r=-0.149, P=0.484), and IL-1 and the ages of patients were not observed (P>0.05). IL-1 and IOP correlated negatively (r=-0.42, P=0.04). MMP-2 and the ages of patients correlated only in dogs with mature cataracts (r=0.772, P=0.02). It can be concluded that the increment in the aqueous humor concentration of IL-1 found in dogs with mature and hyper mature cataracts, in addition to the negative relationship of this cytokine with IOP, suggests that IL-1 is involved in the pathogenesis of LIU. Despite dogs with hypermature cataracts presented significant higher concentrations of MMP-2 in the aqueous humor, such cytokine did not correlate with IL-1 and IOP. In our study, a relationship between aqueous humor cytokines and the ages of patients was only confirmed between MMP-2 and the ages of dogs with mature cataracts.

RESUMO: Objetivou-se determinar as concentrações da metalloprotease-2 (MMP-2) e de interleucina-1 (IL-1 ) em cães com olhos saudáveis (n=8) e naqueles com catarata madura (n=8) e hipermatura (n=8). Correlações entre ambas as citocinas, entre as citocinas e a pressão intraocular (PIO), assim como entre as citocinas e a idade dos pacientes dentro de cada grupo foram averiguadas. Nos pacientes com catarata, o humor aquoso foi colhido ao final da eletrorretinografia. Nos cães saudáveis, o humor aquoso foi colhido antes do início de cirurgias eletivas. Os níveis das citocinas foram determinados por ELISA e a PIO por tonometria de aplanação. A PIO dos pacientes com catarata madura e hipermadura foram mais baixas que aquelas dos pacientes controle (P=0.158). A concentração de MMP-2 no humor aquoso foi maior nos pacientes com catarata hipermtura, comparativamente aos pacientes saudáveis (P=0.04). A concentração de IL-1 no humor aquoso foi mais elevada nos cães com catarata (P 0.0001). Nos pacientes com catarata hipermatura, os valores de IL-1 foram significativamente mais altos que aqueles dosados nos pacientes com catarata madura (P=0.0085). Correlações entre MMP-2 e IL-1 (r=-0.38, P=0.06), MMP-2 e PIO (r=-0.149, P=0.484) e IL-1 e as idades dos pacientes não foram observadas (P>0.05). A IL-1 se correlacionou negativamente com a PIO (r=-0.42, P=0.04). Correlação entre MMP-2 e a idades dos pacientes foi observada apenas nos cães com catarata madura (r=0.772, P=0.02). Conclui-se que o aumento na concentração de IL-1 no humor aquoso de cães com catarata madura e hipermatura, associado à correlação negativa entre essa citocina e a PIO, sugerem que a mesma está envolvida na patogênese da uveíte induzida pela lente. Apesar dos cães com catarata hipermadura apresentarem concentrações significativamente maiores de MMP-2 no humor aquoso, essa citocina não se correlacionou com a IL-1 e a PIO. Em nosso estudo, correlação entre as citocinas dosadas no humor aquoso e a idade dos pacientes foi confirmada apenas entre MMP-2 e a idade dos cães com catarata madura.

Parasite load, iNOS and cytokine profiles, and histopathological aspects of Leishmania infantum infection in dogs with different clinical presentations / Carga Parasitária, iNOS, citocinas e histopatologia na infecção por Leishmania infantum em cães com apresentações clínicas distintas

Visceral leishmaniasis (VL) is a zoonotic disease with a canine urban reservoir in South America. Dogs from an endemic area within Brazil, which were naturally infected with Leishmania infantum, and those presenting severe clinical (SC), mild, or no clinical (MNC) disease, were evaluated. Parasite load, histopathology, and cytokine and iNOS mRNA expressions were assessed in the spleen and liver in order to determine the potential markers for disease susceptibility or resistance. As a result, dogs with both SC and MNC had high parasite loads; IFN-γ was the most expressive cytokine in both organs, along with IL-6 and IL-4 being detected in the spleen and liver, and IL-10 only in liver. The hepatic tissue presented higher medians for IFN-γ and IL-10, and was the main organ to produce cytokines with hepatic IL-10 suggesting a regulatory follow up. Granulomas were detected in both organs; however, when absent in spleen, they were associated with elevated IL-6 levels, thus highlighting the anti-inflammatory role of IL-6. Microscopic lesions in the spleen were predominantly characterized by an extensively disorganized white pulp and splenic response was suggested as sub optimized. Parasite load, tissue damage, and immunological response may vary in the dogs with similar clinical symptoms, which may not be a good parameter for assessing the animals susceptibility to VL.(AU)

A Leishmaniose visceral (LV) é uma doença zoonótica com reservatório canino na América do Sul. Cães oriundos de área endemica brasileira, naturalmente infectados por Leishmania infantum, apresentando doença clínica severa (CS) ou doença branda ou ausente (BA) foram avaliados. Carga parasitária, histopatologia e expressão de mRNA de citocinas e iNOS foram analisados em baço e fígado, buscando determinar possíveis marcadores de susceptibilidade ou resistência à doença. Como principais resultados, tanto cães CS como BA apresentaram alta carga parasitária. IFN-γ foi a citocina mais expressiva em ambos os órgãos, sendo IL-6 e IL-4 também detectadas em baço e fígado e IL-10 em fígado. No tecido hepático foram encontradas as maiores medianas de IFN-γ e IL-10, sendo o fígado o principal órgão produtor de citocinas, com IL-10 sugerindo acompanhamento regulatório. Granulomas foram detectados em ambos os órgãos. Quando de sua ausência no baço, essa foi associada à elevação dos níveis de IL-6, salientando o papel anti-inflamatório dessa citocina. Alterações microscópicas foram principalmente caracterizadas por extensiva desorganização de polpa branca, com a resposta esplência sendo sugerida como subotimizada. Carga parasitária, dano tecidual e resposta immune variaram mesmo em cães com quadros clínicos similares, não sendo, portanto, a análise clínica um bom parâmetro para avaliação de susceptibilidade animal à LV.(AU)

Evaluation of cell damage and modulation of cytokines TNF-, IL-6 and IL-10 in macrophages exposed to PpIX-mediated photodynamic therapy

Abstract Little is known regarding whether photodynamic therapy (PDT)-induced cell death can substantially compromise macrophages (M), which are important cells in PDT-induced immune responses. Here, parameters of PDT-mediated M cytotoxicity and cytokine production in response to protoporphyrin IX (PpIX) were evaluated. Peritoneal M from BALB/c mice were stimulated in vitro with PDT, light, PpIX, or lipopolysaccharide (LPS). After that, cell viability, lipid peroxidation, Nitric Oxide (NO), DNA damage, TNF-, IL-6 and IL-10 were evaluated. Short PDT exposure reduced cell viability by 1030%. There was a two-fold increase in NO and DNA degradation, despite the non-increase in lipoperoxidation. PDT increased TNF- and IL-10, particularly in the presence of LPS, and decreased the production of IL-6 to 10-fold. PDT causes cellular stress, induces NO radicals and leads to DNA degradation, generating a cytotoxic microenvironment. Furthermore, PDT modulates pro- and anti-inflammatory cytokines in M.

Resumo Pouco se sabe se a morte celular induzida pela terapia fotodinâmica (PDT) compromete os macrófagos (M), envolvidos nas respostas imunes induzidas pela PDT. Neste estudo, foram avaliados parâmetros de citotoxicidade dos M mediada pela PDT e a produção de citocinas, frente à protoporfirina IX (PpIX). M peritoneais de camundongos BALB/c foram estimulados in vitro com PDT, luz, PpIX ou lipopolissacarídeo (LPS). Após isto, a viabilidade celular (VC), a lipoperoxidação, os níveis de óxido nítrico (NO), de DNA degradado, de TNF-, IL-6 e IL-10 foram avaliados. A exposição curta à PDT reduziu a VC em 10-30%. Os níveis de NO e de DNA degradado duplicaram, sem aumento da lipoperoxidação. Houve aumento de TNF- e IL-10, sendo maior na presença de LPS. Já a produção de IL-6 reduziu em dez vezes. A PDT induz estresse celular, gera radicais NO e causa dano ao DNA, tornando o microambiente citotóxico. Ainda, modula citocinas pró e anti-inflamatórias em M.