Restrição intrauterina de crescimento: conhecendo seus efeitos sobre o plantel de reprodução / Intrauterine growth restriction: knowing its effects on the breeding herd

A restrição intrauterina de crescimento (RIUC) é a condição na qual o feto não expressa o seu potencial de crescimento de acordo com a idade gestacional. Tal condição ocorre naturalmente na espécie suína, no entanto apresenta forma muito severa, trazendo sérios prejuízos à cadeia suinícola. Os efeitos deletérios da RIUC sobre parâmetros zootécnicos estão bem estabelecidos. No entanto, o conhecimento de tais efeitos sobre parâmetros reprodutivos em machos e fêmeas ainda é limitado. Portanto, a presente revisão tem por objetivo compilar os estudos sobre efeitos da RIUC em parâmetros reprodutivos em machos e fêmeas, bem como intervenções propostas para a diminuição da incidência da condição e de seus efeitos. Achados nesse assunto fornecerão informações valiosas acerca da morfofisiologia reprodutiva de suínos RIUC, estabelecendo estratégias para minimizar as perdas econômicas para o sistema de produção.(AU)

Intrauterine growth restriction (IUGR) is the condition in which the fetus does not express its growth potential according to the gestational age. This condition naturally occurs in the swine species. However, it is very severe and can cause serious losses to the swine production chain. The deleterious effects of IUGR on zootechnical parameters are well established. However, the knowledge of such effects on reproductive parameters in males and females is still limited. Therefore, the present review aims to compile the studies on the effects of IUGR on reproductive parameters in males and females, as well as proposed interventions to decrease the incidence of the condition and its effects. Findings on this issue will provide valuable information about the reproductive morphophysiology of IUGR pigs, establishing strategies to minimize economic losses to the production system.(AU)

Celioscopy and partial salpingectomy in a pregnant bitch / Celioscopia e salpingectomia parcial em fêmea canina gestante

This case report presents a celioscopy procedure followed by partial salpingectomy (PS) in a pregnant bitch referred to elective video assisted ovariohysterectomy. Through celioscopy it was visualized the embryonic vesicles and PS was performed after conversion to minioceliotomy. The puppies were born by eutocic delivery without clinical alterations. The case suggested that short and regular pneumoperitoneum is not deleterious to dog fetus and video surgery could be used in pregnant bitches. PS allows the fetus development and promotes bitch neutering.

Este trabalho relata um caso de celioscopia seguido de salpingectomia parcial (SP) em fêmea canina gestante encaminhada à ovariohisterectomia eletiva videoassistida. Por celioscopia foram identificadas vesículas gestacionais e a SP foi aplicada após conversão para miniceliotomia. Não foram observadas alterações clínicas nos filhotes, os quais nasceram por parto eutócico. Sugere-se que o pneumoperitônio regular por tempo reduzido não seja deletério para fetos caninos e a videocirurgia pode ser aplicada em caninos gestantes. A SP permite a continuidade do desenvolvimento fetal e a esterilização de fêmeas caninas.

Celioscopy and partial salpingectomy in a pregnant bitch / Celioscopia e salpingectomia parcial em fêmea canina gestante

This case report presents a celioscopy procedure followed by partial salpingectomy (PS) in a pregnant bitch referred to elective video assisted ovariohysterectomy. Through celioscopy it was visualized the embryonic vesicles and PS was performed after conversion to minioceliotomy. The puppies were born by eutocic delivery without clinical alterations. The case suggested that short and regular pneumoperitoneum is not deleterious to dog fetus and video surgery could be used in pregnant bitches. PS allows the fetus development and promotes bitch neutering.(AU)

Este trabalho relata um caso de celioscopia seguido de salpingectomia parcial (SP) em fêmea canina gestante encaminhada à ovariohisterectomia eletiva videoassistida. Por celioscopia foram identificadas vesículas gestacionais e a SP foi aplicada após conversão para miniceliotomia. Não foram observadas alterações clínicas nos filhotes, os quais nasceram por parto eutócico. Sugere-se que o pneumoperitônio regular por tempo reduzido não seja deletério para fetos caninos e a videocirurgia pode ser aplicada em caninos gestantes. A SP permite a continuidade do desenvolvimento fetal e a esterilização de fêmeas caninas.(AU)

PAPEL DA KISSPEPTINA E SEU POTENCIAL TERAPÊUTICO NA DISFUNÇÃO FETO-PLACENTÁRIA DE RATAS HIPOTIREOIDEAS: AVALIAÇÃO DE FATORES DE CRESCIMENTO PLACENTÁRIO E MEDIADORES DE ESTRESSE CELULAR E DO INFLAMASSOMA

Alterações no nível plasmático e/ou placentário de kisspeptina (Kp) estão associadas 9 com doenças gestacionais. No entanto, embora estudos tenham sugerido que Kp 10 apresenta efeito antioxidante e imunomodulatório na interface materno-fetal e outros 11 tenham demonstrado que o hipotireoidismo causa disfunção gestacional e estresse 12 placentário, ainda não há informações sobre o papel da kisspeptina na disfunção 13 placentária causada pelo hipotireoidismo materno. Por isso, o objetivo deste trabalho 14 foi avaliar o papel da kisspeptina e seu potencial terapêutico na disfunção feto- 15 placentária de ratas hipotireoideas. Foram utilizadas Ratas Wistar adultas e o 16 hipotireoidismo foi induzido pela administração diária de propiltiouracil (PTU) 17 (4mg/Kg/dia). No Experimento 1, os animais foram divididos nos grupos controle 18 (N=18) e hipotireoideo (N=20) e foram avaliados o desenvolvimento feto-placentário e 19 a expressão gênica e proteica de Kiss1 e seu receptor (Kiss1R) na decídua e placenta 20 aos 14 e 18 dias de gestação (DG). O hipotireoidismo reduziu o peso fetal e 21 uteroplacentário, além de reduzir a expressão de mRNA de Kiss1 na decídua e 22 placenta aos 14 e 18 DG, respectivamente. Para Kiss1R, o hipotireoidismo não 23 somente reduziu a imunomarcação no triângulo Metrial e camada de células gigantes 24 aos 14 DG, como reduziu a expressão gênica na decídua e placenta no mesmo 25 período gestacional. Considerando que teve redução do sistema Kiss1/Kiss1R na 26 interface materno-fetal das ratas hipotireoideas, no Experimento 2 foi avaliado o 27 potencial terapêutico de Kisspeptina-10 (Kp10) na disfunção feto-placentária desses 28 animais. Os animais foram divididos nos grupos controle (N=8), hipotireoideo (N=8) e 29 hipotireoideo tratado com Kp10 (8µg/Kg/dia) dia sim/dia não (KpT1) (N=8) ou 30 diariamente (KpT2) (N=8). O tratamento iniciou no 8º DG e no 18º DG foram avaliados 31 o desenvolvimento feto-placentário, a histomorfometria placentária e a expressão 32 gênica e/ou proteica de fatores de crescimento (VEGF, PLGF, IGF1, IGF2 e GLUT1), 33 mediadores inflamatórios (TNF, IL10 e IL6), mediadores de estresse oxidativo (HIF, 34 SOD1, Cat, GPx1), mediadores de estresse de retículo endoplasmático (ATF4, 35 GRP78 e CHOP) e mediadores do inflamassoma (NLRP3, IL1, IL18) e piroptose 36 (Caspase1, Gasdermina D). O tratamento diário com Kp10 aumentou o peso fetal e 37 reverteu o crescimento fetal assimétrico causado pelo hipotireoidismo materno. 38 Ambos os tratamentos reestabeleceram parcialmente a morfologia da zona juncional 39 e aumentaram a vascularização no labirinto placentário. O tratamento diário com Kp10 40 aumentou a expressão gênica de fatores de crescimento (Plgf, Igf1) e de transporte 41 (Glut1) na placenta dos animais hipotireoideos, além de aumentar a expressão 42 proteica e de mRNA de enzimas antioxidantes (SOD1, Cat, GPx1). Embora o 43 tratamento diário com Kp10 não tenha alterado a maior expressão gênica e/ou 44 proteica de VEGF, HIF1, IL10, GRP78 e CHOP causada pelo hipotireoidismo, 45 especialmente na zona juncional, reduziu a imunomarcação desses mediadores na 46 zona do labirinto quando comparado ao grupo hipotireoideo. Além disso, o tratamento 47 com Kp10 bloqueou o aumento da expressão gênica placentária de mediadores do1 inflamassoma (Nlrp3, Il18) causado pelo hipotireoidismo materno. No entanto, o 2 tratamento com Kp10 aumentou a imunomarcação placentária de TNF e a expressão 3 gênica de Il1 e Caspase1 em relação aos grupos controle e hipotireoideo, enquanto 4 não foi observado diferenças na expressão placentária de Gasdermina D entre os 5 grupos experimentais. Conclui-se que a restrição de crescimento feto-placentária 6 observada em ratas com hipotireoidismo materno está associada com uma redução 7 do sistema kisspeptina/Kiss1R na interface materno-fetal. Além disso, o tratamento 8 diário com Kp10 em ratas gestantes hipotireoideas não somente melhora o 9 desenvolvimento feto-placentário e a vascularização placentária, como aumenta a 10 expressão de fatores de crescimento e enzimas antioxidantes e bloqueia a ativação 11 do inflamassoma causado pelo hipotireoidismo. 12

Changes in the plasma and / or placental level of kisspeptin (Kp) are associated with 9 pregnancy disorders. However, although studies have suggested that Kp has an 10 antioxidant and immunomodulatory effect at the maternal-fetal interface and others 11 have shown that hypothyroidism causes gestational dysfunction and placental stress, 12 there is still no information on the role of kisspeptin in placental dysfunction caused by 13 maternal hypothyroidism. Therefore, the objective of this work was to evaluate the role 14 of kisspeptin and its therapeutic potential in the fetal-placental dysfunction of 15 hypothyroid rats. Adult Wistar rats were used and hypothyroidism was induced by daily 16 administration of propylthiouracil (PTU) (4mg/Kg/day). In Experiment 1, the animals 17 were divided into the control (N=18) and hypothyroid (N=20) groups and the fetal- 18 placental development and the gene and protein expression of Kiss1 and its receptor 19 (Kiss1R) in the decidua and placenta were evaluated at 14 and 18 days of gestation 20 (DG). Hypothyroidism reduced fetal and uteroplacental weight, in addition to reducing 21 Kiss1 mRNA expression in the decidua and placenta at 14 and 18 DG, respectively. 22 For Kiss1R, hypothyroidism not only reduced immunostaining in the Metrial triangle 23 and giant cell layer at 14 DG, but also reduced gene expression in the decidua and 24 placenta in the same gestational period. Considering that there was a reduction in the 25 Kiss1/Kiss1R system in the maternal-fetal interface of the hypothyroid rats, in 26 Experiment 2 the therapeutic potential of Kisspeptin-10 (Kp10) in the fetal-placental 27 dysfunction of these animals was evaluated. The animals were divided into the control 28 (N=8), hypothyroid (N=8) and hypothyroid groups treated with Kp10 (8µg/Kg/day) 29 every other day (KpT1) (N=8) or daily (KpT2) (N=8). The treatment started in the 8th 30 DG and the fetal-placental development, the placental histomorphometry and the gene 31 and/or protein expression of growth factors (VEGF, PLGF, IGF1, IGF2 and GLUT1), 32 inflammatory mediators (TNF, IL10 and IL6), oxidative stress mediators (HIF, SOD1, 33 Cat, GPx1), endoplasmic reticulum stress mediators (ATF4, GRP78 and CHOP) and 34 inflammasome (NLRP3, IL-1, IL-18) and pyroptosis (Caspase1, Gasdermin D) 35 mediators were evaluated at 18 GD. Daily treatment with Kp10 increased fetal weight 36 and reversed asymmetric fetal growth caused by maternal hypothyroidism. Both 37 treatments partially reestablished the morphology of the junctional zone and increased 38 vascularization in the placental labyrinth. Daily treatment with Kp10 increased the gene 39 expression of growth factors (Plgf, Igf1) and transport (Glut1) in the placenta of 40 hypothyroid animals, in addition to increasing protein and mRNA expression of 41 antioxidant enzymes (SOD1, Cat, GPx1). Although daily treatment with Kp10 did not 42 alter the greater VEGF, HIF1, IL10, GRP78 and CHOP expression caused by 43 hypothyroidism, especially in the junctional zone, it reduced the immunostaining of 44 these mediators in the labyrinth zone when compared to the hypothyroid group. In 45 addition, treatment with Kp10 blocked the increase in placental gene expression of 46 inflammasome mediators (Nlrp3, Il18) caused by maternal hypothyroidism. However, 47 treatment with Kp10 increased the placental immunostaining of TNF and the gene 48 expression of Il1 and Caspase1 in relation to the control and hypothyroid groups, 49 while no differences were observed in the placental expression of Gasdermin D 50 between the experimental groups. It is concluded that the fetal-placental growth1 restriction observed in rats with maternal hypothyroidism is associated with a reduction 2 in the kisspeptin/Kiss1R system at the maternal-fetal interface. In addition, daily 3 treatment with Kp10 in hypothyroid pregnant rats not only improves fetal placental 4 development and placental vascularization but increases the expression of growth 5 factors and antioxidant enzymes and blocks the activation of the inflammasome 6 caused by hypothyroidism. 7

Estudo de ovários fetais equinos: uma abordagem histológica / Study of fetal equine ovary: an histological approach

O estudo do desenvolvimento embriológico de órgãos reprodutivos representa uma ferramenta importante para a compreensão das particularidades da espécie equina, assim como ampliar os conhecimentos sobre o desenvolvimento de folículos antrais que podem ser utilizados para produção in vitro de embriões. O presente trabalho teve como objetivo descrever as alterações morfológicas de ovários fetais equinos ocorrentes durante o desenvolvimento gestacional. Foram utilizados fetos equinos provenientes de abatedouro. Imediatamente após o abate foi realizada medição da distância cefalococcígea para o cálculo da idade gestacional em dias (dias de gestação - DG) e dissecação dos fetos para a retirada e fixação dos ovários. Foram realizadas avaliações macroscópicas e histológicas pelas técnicas de Hematoxilina-eosina e PAS. Foram utilizados 19 fetos com idade de 50-269 dias de gestação, distribuídos em 9 grupos de DG. Na avaliação macroscópica foi observada diferença entre o volume dos ovários de acordo com a idade gestacional, sendo observado maior volume ovariano entre os dias 210 a 269 de desenvolvimento gestacional. Na avaliação histológica foi observado epitélio de revestimento cúbico e distinção entre as camadas cortical e medular nos ovários fetais a partir de 50-89 DG. As principais características identificadas foram à distinção morfológica entre as camadas cortical e medular nos ovários fetais equinos: os cordões ovígeros surgiram no intervalo de 150-179 DG; o córtex iniciada como uma camada delgada e por volta do 210º dia de gestação apresentou espessamento pelo aumento da quantidade de tecido conjuntivo rico em vasos sanguíneos, o qual se manteve até os estágios finais da gestação; a região medular adquiriu uniformidade estrutural por volta do 150º dia, mostrando células similares em tamanho e vasos sanguíneos de calibre maior. A partir desta etapa, as células medulares diminuíram em tamanho e feixes de tecido conjuntivo denso tornaram esta zona parcialmente dividida.(AU)

The study of embryological development of reproductive organs is an important tool for understanding the particularities of the equine species. Also it is important for increasing knowledge about the development of antral follicles that can be used for in vitro production of embryos. This study aimed to describe the morphological changes of fetal equine ovaries occurring during gestational development. It was used equine fetuses from a slaughterhouse. After slaughter, it was performed the measurement of cefalococcígea distance to calculate the gestational age (days of pregnancy - DP). Afterwards, the ovaries were grossly evaluated, removed and fixed. Then, they were histologically assessed by hematoxylin-eosin and PAS techniques. It was used 19 fetuses aged 50 to 269 days of gestation, distributed in 9 groups divided according to DP. In the grossly evaluation, it was observed differences between the volume of the ovaries according to gestational age, being observed bigger/larger ovarian volume between 210 days to 269 DP. During the histological evaluation, it was observed a simple cuboidal epithelium and a distinction between the cortical and medullary layers in fetal ovaries from 50-89 DP. The main characteristics identified were: the morphological distinction between the cortical and medullary layers in equine fetal ovaries; the ovigerous cords emerged in the interval between 150 and 179 DP; the cortex initiated as a thin layer with an increased amount of connective tissue rich in blood vessels by the 210 DP, structural uniformity acquired in the medular region by the 150 DP, showing similar cells in size and blood vessels of larger caliber. From this stage, the cells in this region had decreased in size and dense connective tissue bundles, which made this zone partially divided.(AU)

Estudo de ovários fetais equinos: uma abordagem histológica / Study of fetal equine ovary: an histological approach

The study of embryological development of reproductive organs is an important tool for understanding the particularities of the equine species. Also it is important for increasing knowledge about the development of antral follicles that can be used for in vitro production of embryos. This study aimed to describe the morphological changes of fetal equine ovaries occurring during gestational development. It was used equine fetuses from a slaughterhouse. After slaughter, it was performed the measurement of cefalococcígea distance to calculate the gestational age (days of pregnancy - DP). Afterwards, the ovaries were grossly evaluated, removed and fixed. Then, they were histologically assessed by hematoxylin-eosin and PAS techniques. It was used 19 fetuses aged 50 to 269 days of gestation, distributed in 9 groups divided according to DP. In the grossly evaluation, it was observed differences between the volume of the ovaries according to gestational age, being observed bigger/larger ovarian volume between 210 days to 269 DP. During the histological evaluation, it was observed a simple cuboidal epithelium and a distinction between the cortical and medullary layers in fetal ovaries from 50-89 DP. The main characteristics identified were: the morphological distinction between the cortical and medullary layers in equine fetal ovaries; the ovigerous cords emerged in the interval between 150 and 179 DP; the cortex initiated as a thin layer with an increased amount of connective tissue rich in blood vessels by the 210 DP, structural uniformity acquired in the medular region by the 150 DP, showing similar cells in size and blood vessels of larger caliber. From this stage, the cells in this region had decreased in size and dense connective tissue bundles, which made this zone partially divided.(AU)

O estudo do desenvolvimento embriológico de órgãos reprodutivos representa uma ferramenta importante para a compreensão das particularidades da espécie equina, assim como ampliar os conhecimentos sobre o desenvolvimento de folículos antrais que podem ser utilizados para produção in vitro de embriões. O presente trabalho teve como objetivo descrever as alterações morfológicas de ovários fetais equinos ocorrentes durante o desenvolvimento gestacional. Foram utilizados fetos equinos provenientes de abatedouro. Imediatamente após o abate foi realizada medição da distância cefalococcígea para o cálculo da idade gestacional em dias (dias de gestação - DG) e dissecação dos fetos para a retirada e fixação dos ovários. Foram realizadas avaliações macroscópicas e histológicas pelas técnicas de Hematoxilina-eosina e PAS. Foram utilizados 19 fetos com idade de 50-269 dias de gestação, distribuídos em 9 grupos de DG. Na avaliação macroscópica foi observada diferença entre o volume dos ovários de acordo com a idade gestacional, sendo observado maior volume ovariano entre os dias 210 a 269 de desenvolvimento gestacional. Na avaliação histológica foi observado epitélio de revestimento cúbico e distinção entre as camadas cortical e medular nos ovários fetais a partir de 50-89 DG. As principais características identificadas foram à distinção morfológica entre as camadas cortical e medular nos ovários fetais equinos: os cordões ovígeros surgiram no intervalo de 150-179 DG; o córtex iniciada como uma camada delgada e por volta do 210º dia de gestação apresentou espessamento pelo aumento da quantidade de tecido conjuntivo rico em vasos sanguíneos, o qual se manteve até os estágios finais da gestação; a região medular adquiriu uniformidade estrutural por volta do 150º dia, mostrando células similares em tamanho e vasos sanguíneos de calibre maior. [...](AU)

Suplementação de L-arginina para fêmeas suínas nulíparas no terço final de gestação

A suplementação materna com L-arginina vem sendo avaliada como alternativa capaz de contribuir para maior desenvolvimento muscular fetal durante o período gestacional, podendo influenciar os mecanismos moleculares relacionados a miogênese fetal, fator especialmente importante para a progênie de porcas nulíparas. Entretanto, ainda é questionado se a suplementação desse aminoácido no terço final da gestação, período de rápido crescimento fetal, é capaz de promover alterações na miogênese dos fetos. Dessa forma, o presente estudo foi realizado com o objetivo de avaliar os efeitos da suplementação com L-arginina, durante o terço final de gestação, nos mecanismos moleculares relacionados a miogênese fetal, bem como avaliar o desenvolvimento muscular dos leitões e as características da leitegada ao nascimento. Foram utilizadas 23 fêmeas suínas nulíparas, com peso médio de 205,37 kg ± 11,50 kg. Os animais foram distribuídos em delineamento inteiramente casualizado, em duas dietas: dieta controle (CON) atendendo às exigências nutricionais de porcas em gestação ou dieta CON suplementada com 1,0% de L-arginina (ARG). As dietas experimentais foram fornecidas em quantidades iguais às 09:00h e 16:00h, totalizando 2,5 kg/dia. Aos 110 dias de gestação as porcas foram pesadas e transferidas para as gaiolas de maternidade, onde foram coletadas amostras de sangue para obtenção do soro e do plasma para análise da concentração de insulina, ureia e estradiol. Após a identificação do final do parto, por meio da expulsão das placentas, foi registrado o número de leitões nascidos totais, nascidos vivos, mumificados e natimortos. Em seguida, foi realizada a pesagem das fêmeas e dos leitões para o cálculo do peso total de nascidos, peso total dos nascidos vivos, peso médio ao nascimento, desvio padrão da média, coeficiente de variação do peso ao nascimento e incidência de leitões com crescimento intrauterino retardado (CIUR, peso < 1,00 kg). O leitão com peso mais próximo do peso médio da leitegada foi insensibilizado por eletronarcose e abatido por sangramento para coleta de amostras dos músculos Longissimus dorsi e Semitendinoso, para análise histomorfométrica e molecular. Os dados foram submetidos à análise de variância (ANOVA), com exceção dos dados das variáveis: nascidos totais, nascidos vivos, natimortos e mumificados, além da estratificação das classes de peso dos leitões, as quais foram analisadas pelo teste não paramétrico de Kruskal-Wallis. O valor de P 0,05 foi considerado para indicar significância estatística e valores de P entre 0,05 e 0,10 foram considerados tendência. Leitões nascidos de porcas ARG tiveram maior expressão (P 0,05) de mRNA dos genes MyoD e MYOG e tendência (P=0,06) de maior expressão do gene IGF-2 no músculo Longissimus dorsi, em relação ao grupo CON. Entretanto, não houve diferenças (P > 0,05) nas variáveis histomorfométricas do músculo Longissimus dorsi e Semitendinoso. O peso total de nascidos, o peso total dos leitões nascidos vivos, o peso médio do leitão ao nascimento, o desvio padrão da média, o coeficiente de variação do peso ao nascimento e a incidência de leitões CIUR não apresentaram diferenças (P > 0,05) em relação ao CON. Foi verificada ausência (P 0,05) de leitões natimortos nas porcas do grupo ARG, porém não foram observadas diferenças (P 0,05) no número de leitões nascidos totais, nascidos vivos e mumificados em relação ao grupo CON. O nível de estradiol e ureia foram superiores (P 0,05) nas fêmeas alimentadas com ARG. A concentração de insulina não foi influenciada (P > 0,05) pela suplementação de L-arginina. A suplementação com 1,0% de L-arginina para porcas nulíparas, dos 85 aos 114 dias de gestação, influenciou os mecanismos moleculares relacionados à miogênese fetal, aumentando a expressão do mRNA dos fatores de reguladores miogênicos MyoD e MYOG e do IGF-2 no Longissimus dorsi dos leitões. Além disso, a suplementação com L-arginina resultou na não ocorrência de leitões natimortos e no aumento dos níveis plasmáticos de estradiol nas porcas

Maternal supplementation with L-arginine has been evaluated as an alternative capable of contributing to greater fetal muscle development during the gestational period, which may influence the molecular mechanisms related to fetal myogenesis, an especially important factor for the offspring of nulliparous sows. However, it is still questioned whether the supplementation of this amino acid in the last third of gestation, a period of rapid fetal growth, is capable of promoting changes in fetal myogenesis. Thus, the present study was carried out with the aim of evaluating the effects of L-arginine supplementation during the last third of gestation on molecular mechanisms related to fetal myogenesis, as well as evaluating the muscle development of piglets and litter traits at birth. Twenty-three nulliparous sows with 205.37 ± 11.50 kg of body weight were used. The animals were assigned in a completely randomized design, in two diets: control diet (CON) meeting the nutritional requirements of pregnant sows or CON supplemented with 1.0% L-arginine (ARG). The experimental diets were provided in equal amounts at 09:00h and 16:00h, totalizing 2,5 kg/day. At 110 days of gestation, the sows were weighed and transferred to individual farrowing crates, where blood samples were collected to obtain serum and plasma for analysis of insulin, urea and estradiol concentrations. After the identification of the end of farrowing, through the expulsion of the placenta, the number of total piglets born, born alive, mummified and stillborn were recorded. Then, the sows and piglets were weighed to calculate the following variables: total weight of born piglets, total weight of born alive piglets, average of piglet body weight at birth, standard deviation of the mean, within-litter variation of piglets birth weight and the incidence of intrauterine growth retarded piglet (IUGR, weight < 1,00 kg). The piglet with body weight closest to the average of litters piglet weight was electrically stunned followed by exsanguination to collect Longissimus dorsi and Semitendinosus muscles samples for histological and molecular analysis. The data were subjected to analysis of variance (ANOVA), with the exception for the following variables: total born, born alive, stillborn, mummified and the stratifications of piglets weight classes, which were analyzed by the Kruskal-Wallis non-parametric test. The P-value (P 0,05) was considered to indicate statistical significance and P-values between 0.05 and 0.10 were considered as trend. Piglets born from sows fed ARG diet had greater (P 0.05) mRNA expression of MyoD and MYOG genes and tendency to present greater expression (P = 0.06) of IGF-2 gene compared to CON sows in Longissimus dorsi muscle. However, there were no differences (P> 0.05) in the histomorphometric variables of the Longissimus dorsi and Semitendinosus muscles.The total weight of born piglets, total weight of born alive piglets, average piglet body weight at birth, standard deviation of the mean, the within-litter birth weight coefficient of variation and the incidence of IUGR piglets did not differ (P> 0.05) compared to CON. Absence (P 0.05) of stillborn piglets was verified in the ARG sows. There were no differences (P 0.05) in the number of totals born, born alive and mummified piglets compared to CON. The levels of estradiol and urea were higher (P 0.05) in ARG sows. Insulin concentration was not influenced (P> 0.05) by L-arginine supplementation. Supplementation of 1.0% L-arginine for nulliparous sows, from 85 to 114 days of gestation, influenced the molecular mechanisms related to fetal myogenesis, increasing the expression of mRNA of myogenic regulatory factors MyoD and MYOG and IGF-2 in Longissimus dorsi of piglets. In addition, ARG supplementation resulted in absence stillborn piglets and increased plasma estradiol levels in sows.

Histomorphological evaluation of the digital coronary region at different fetal development stages of Holstein cattle / Avaliação histomorfológica da região coronária digital em diferentes fases de desenvolvimento fetal de bovinos da raça Holandesa

The scientific literature lacks detailed morphological descriptions of the histological development and cell differentiation of fetal bovine hoof. In this study, 40 extremity members of Holstein bovine fetuses were collected and divided into four groups (G1 to G4) based on the estimated age. Fragments were removed from wall and sole, processed and stained with hematoxylin - eosin (HE) for light microscopy observation. In G1, it was found that the epidermis was very thin, including keratinocyte layers and clusters of mesenchymal cells. In group G2 it was observed that the thickness of the epidermis covering the limbs remained variable and laminar corium developed in the germinal layer. In group G3 it was noted that in the germinal epithelium there were papillae in little advanced development and cells of the stratum corneum in the initial process of keratinization. In G4, the epidermis was well developed with layers distributed homogeneously, containing symmetrical and long papillae and intense production of keratin. In this work, the most important cellular events for the formation of the fetal hoof in Holstein cattle were first described in different stages of their formation.(AU)

A literatura científica carece de descrições morfológicas detalhadas sobre o desenvolvimento histológico e diferenciação celular do casco fetal bovino. Neste estudo, 40 extremidades de membros de fetos bovinos da raça Holandesa foram coletados e divididos em quatro grupos (G1 a G4) com base na estimativa da idade. Desses membros, foram retirados fragmentos da parede e sola, processados e corados por hematoxilina-eosina (HE) para observação em microscopia óptica. No grupo G1, observou-se que a epiderme era bastante delgada, incluindo camadas de queratinócitos e conjuntos de células mesenquimais. No grupo G2, foi observado que a espessura da epiderme, cobrindo as extremidades dos membros, permaneceu variável, e o cório laminar desenvolveu-se na camada germinativa. No grupo G3, notou-se, no epitélio germinal, papilas em desenvolvimento pouco avançado e células da camada córnea no processo inicial de queratinização. No grupo G4, a epiderme apresentava-se bem desenvolvida, com camadas distribuídas de forma homogênea, contendo papilas simétricas e longas e com intensa produção de queratina. Neste trabalho, os eventos celulares mais importantes para a formação do casco fetal em bovinos da raça Holandesa foram descritos pela primeira vez, em diferentes etapas da sua formação.(AU)

A SUPLEMENTAÇÃO DIETÉTICA DE L-ARGININA, A POSIÇÃO FETAL E O AMBIENTE UTERINO DE PORCAS NO INÍCIO DA GESTAÇÃO

Dois experimentos foram conduzidos para avaliar os efeitos da suplementação com L-arginina e da posição fetal no ambiente uterino de porcas aos 36 dias de gestação. No primeiro experimento (Exp1), 16 fêmeas suínas de linhagem comercial foram distribuídas em delineamento experimental inteiramente casualizado, em dois tratamentos, porcas alimentadas com ração controle (CON) a base de milho e farelo de soja ou ração CON suplementada com 1,0% de L- arginina (ARG). No segundo experimento (Exp2), oito porcas de linhagem comercial, alimentadas com ração a base de milho e farelo de soja, foram distribuídas em delineamento experimental inteiramente casualizado, com medidas repetidas no espaço (posições de implantação fetal no corno uterino). Em ambos os experimentos, as rações foram fornecidas em quantidades iguais às 07:30 e 16:00 h, totalizando 1,8 kg de ração/dia até o dia 4 de gestação e 2,2 kg de ração/dia do dia 5 até o dia 36 de gestação. Aos 36 dias de gestação, as fêmeas suínas foram insensibilizadas por eletronarcose e abatidas. No Exp1, foram avaliadas as características fenotípicas das fêmeas e fetos, as concentrações sanguíneas de metabólitos da arginina, o estresse oxidativo das porcas e a vascularização placentária e endometrial nas posições extremas do corno uterino (região útero-tubária/cranial ou região da cérvix/caudal). No Exp2, foram coletadas amostras de tecidos uterinos referentes aos dois primeiros (região útero-tubária, 1 e 2) e dois últimos fetos (região da cérvix, 3 e 4) localizados nas regiões extremas do corno uterino direito e foram avaliadas as diferenças fenotípicas dos fetos e a vascularização da interface materno-fetal. No Exp1, houve redução (P=0,008) da concentração de serina e tendência de redução (P=0,07) da concentração de glutamina no plasma das porcas alimentadas com a ração ARG comparado as porcas alimentadas com a ração CON. A concentração de ureia no soro sanguíneo foi maior (P=0,04) para fêmeas ARG. Porcas alimentadas com a ração ARG tenderam (P=0,07) a ter aumentada a atividade de SOD no plasma sanguíneo. A produção de H2O2 foi maior (P=0,02) nas porcas ARG. Maior concentração (P=0,007) de NO foi observada no plasma de fêmeas ARG. A expressão dos genes eNOS, ANG1 e ANG2 foi maior (P<0,001) nos tecidos placentários craniais ao corno uterino das fêmeas ARG. Houve aumento (P=0,05) da expressão do gene PIGF e tendência ao aumento (P=0,10) da expressão do gene ODC nos tecidos placentários caudais das fêmeas ARG. Na região cranial do corno uterino, maior número de vasos (P=0,01) e maior percentagem (P=0,03) de glândulas uterinas foram observados no tecido uterino materno (endométrio adjacente) de porcas alimentadas com a ração CON. Entretanto, nos tecidos dos fetos das fêmeas ARG foi observada maior proporção (P=0,007) de vasos sanguíneos. Na região caudal do corno uterino, maior número de vasos (P<0,0001), maior percentagem de vasos sanguíneos (P<0,001) e menor percentagem de tecido conjuntivo (P=0,03) foram observados nos tecidos uterinos fetais de porcas ARG. Para a mesma região, a proporção volumétrica de vasos sanguíneos no tecido uterino materno foi maior (P=0,05) em porcas ARG. No Exp2, a expressão do gene ANG1 foi aumentada (P,0,05) no tecido placentário coletado nas posições 1 e 2, comparado às posições 3 e 4. Também foi observado aumento (P0,05) da expressão do gene ANG2 nas posições 1 e 2, comparado as posições 3 e 4. A razão entre a expressão da ANG2:ANG1 foi maior (P,0,05) em tecidos placentários localizados nas regiões 1 e 2 comparado às regiões 3 e 4. Para o gene TIE2, houve tendência ao aumento (P=0.10) da expressão em tecidos placentários localizados na posição 3 comparado a posição 2. Em comparação as posições uterinas 1 e 2, menor expressão foi observada para o gene eNOS nas posições 3 e 4. Menor número de vasos/mm² foi observado nos tecidos uterinos fetais na posição 4 do corno uterino direito das porcas, comparado a posição 1. Tecidos placentários fetais localizados na posição 1 do corno uterino tiverem tendência ao aumento (P=0,08) e aumento (P=0.01) da expressão do gene ODC em comparação a tecidos localizados nas regiões 3 e 4, respectivamente. Para o mesmo gene, houve redução da expressão em tecidos placentários localizados nas posições 3 (P=0,01) e 4 (P=0,001) se comparado a posição 2. Em conclusão, no Exp1, a suplementação com 1,0% de L-arginina nos primeiros 36 dias de gestação influencia na redução do estresse oxidativo da porca e no aumento da vascularização na interface maternofetal em tecidos localizados nos extremos do corno uterino, atuando de forma singular nas regiões craniais ou caudais ao corno. No Exp2, maior expressão de fatores proangiogênicos e relacionados a proliferação celular foram observados em tecidos placentários coletados da região útero-tubária de fêmeas suínas aos 36 dias de gestação, comparado a região da cérvix.

Two experiments were conducted to evaluate the effects of L-arginine supplementation and fetal position in uterine environment of sows at 36 days of gestation. In the first experiment (Exp1), 16 commercial sows were randomly assigned in two treatments, sows fed with control diet (CON) based on corn and soybean meal or CON diet supplemented with 1.0% L-arginine (ARG). In the second experiment (Exp2), eight commercial sows, fed a diet based on corn and soybean meal, were allotted in a completely randomized design with repeated measurements in space (positions of fetal implantation in the uterine horn). In both experiments, the diets were supplied in equal quantities at 07:30 and 16:00 h, totaling 1.8 kg of diet/day between days 1 and 4 of gestation and 2.200 kg of diet/day between days 5 and 36 of gestation. At 36 days of gestation, the females were desensitized by electronarcosis and slaughtered. In Exp1, the phenotypic characteristics of females and fetuses, blood concentrations of arginine metabolites, oxidative stress of sows, placental and endometrial vascularization in the extreme positions of the uterine horn (utero-tubal/cranial or toward the cervix/caudal) were evaluated. In Exp2, uterine tissues samples were collected referring to the first two (uterus-tubal region, 1 and 2) and two last fetuses (cervix region, 3 and 4) located in the extreme regions of the right uterine horn. Phenotypic differences of the fetuses and the vascularization of the maternal-fetal interface were evaluated. In Exp1, there was a reduction (P=0.008) in the serine concentration and a trend of decrease (P=0.07) in the plasma glutamine concentration of ARG fed sows compared to CON fed sows. The concentration of urea in the blood serum was higher (P = 0.04) for ARG females. Sows fed with ARG diets tended (P = 0.07) to have increased SOD activity in blood plasma. H2O2 production was higher (P=0.02) in ARG sows. Higher concentration (P=0.007) of NO was observed in the plasma of ARG females. The expression of the eNOS, ANG1 and ANG2 genes was higher (P<0.001) in the cranial placental tissues of ARG sows. There was an increase (P=0.05) in the expression of the PIGF gene and a tendency to increase (P=0.10) the expression of ODC gene in placental tissues positioned towards the cervix of the ARG fed sows. In the cranial region of the right uterine horn, a higher number of vessels (P=0.01) and a higher percentage (P=0.03) of uterine glands were observed in the maternal uterine tissue (adjacent endometrium) of sows fed with CON diet. However, in the tissues of the fetuses of the ARG females, a higher proportion (P = 0.007) of blood vessels was observed. In the caudal region of the right uterine horn, a higher number of vessels (P <0.0001), a higher percentage of blood vessels (P <0.001) and a lower percentage of connective tissue (P = 0.03) were observed in the fetal uterine tissues of ARG sows. For the same region, the volumetric proportion of blood vessels in maternal uterine tissue was higher (P = 0.05) in ARG fed sows. In Exp2, the expression of the ANG1 gene was increased (P0.05) in the placental tissues collected in positions 1 and 2 compared to positions 3 and 4. There was an increase (P0.05) in the expression of the ANG2 gene at positions 1 and 2, compared to positions 3 and 4. The ratio between the expression of ANG2:ANG 1 was higher (P <0.01) in placental tissues located in regions 1 and 2, compared to regions 3 and 4. For the TIE2 gene, there was a tendency to increase (P=0.10) the expression in placental tissues located in position 3 compared to position 2. Greater expression (P <0.05) for the eNOS gene was observed in placental tissues located in positions 1 and 2, compared to positions 3 and 4. Lesser number of vessels/mm² was observed in fetal uterine tissues in position 4 of the right uterine horn of sows, compared to position 1. Fetal placental tissues located in position 1 of the uterine horn tend to increase (P = 0.08) and increase (P = 0.01) of the expression of the ODC gene compared to tissues located in regions 3 and 4, respectively. For the same gene, there was a reduction in expression in placental tissues located at positions 3 (P = 0.01) and 4 (P = 0.001) when compared to position 2. In Exp1, supplementation with 1.0% L-arginine in first 36 days of gestation influences the reduction of oxidative stress of the sow and the increase of vascularization at the maternal-fetal interface in tissues located at the ends of the uterine horn, acting singularly in the cranial or caudal regions to the horn. In Exp2, greater expression of proangiogenic factors and related to cell proliferation were observed in placental tissues collected from the uterus-tubal region of sows at 36 days of gestation, compared to the cervix region.

Uso de farelo de mamona (Ricinus communis L.) como fonte de proteína na dieta de caprinos durante o período de monta: impacto sobre a resposta reprodutiva e metabólica / Use of castor meal (Ricinus communis L. ) as a source of dietary protein in goats during the mating period: impact on reproductive and metabolic responses

O objetivo do presente estudo foi avaliar o efeito da substituição total do farelo de soja por farelo de mamona detoxificado ou não sobre a resposta à sincronização do estro, taxa de concepção, desenvolvimento fetal inicial, presença de IgG e resposta metabólica-hormonal. Sessenta cabras mestiças foram alimentadas sem farelo de mamona (SFM), com farelo de mamona detoxificado (FMD) e com farelo de mamona (FM) durante a gestação inicial. Todos os animais tiveram o estro sincronizado e depois foram acasaladas por monta natural. A partir do 25º dia após a monta, foi determinado o número de fetos e realizado o acompanhado do desenvolvimento dos mesmos por ultrassonografia até os 60 dias de gestação. Foi avaliado o perfil de progesterona (P4), os níveis de metabólitos e a resposta imunológica. A partir do 15º dia de alimentação a imunoglobulina G (IgG) foi marcada através da técnica de Western Blotting, apenas em animais que receberam farelo de mamona não detoxificado. Não houve efeito (p>0,05) do tipo de dieta sobre a resposta à sincronização do estro, níveis plasmáticos de P4, taxa de gestação e desenvolvimento embrionário/fetal. Em cabras gestantes, observou-se um efeito da dieta (p 0,001) sobre os níveis plasmáticos de uréia em animais de gestação múltipla, de gama-glutamil transferase (GGT) em gestação simples e de lactato desidrogenase (LDH) em ambos os tipos de gestação.(AU)

The aim of the present study was to evaluate the effects of the total substitution of soybean meal with castor meal, detoxified or non-detoxified, on the response to estrous synchronization, conception rate, early fetal development, presence of IgG, and metabolic-hormonal response. Sixty mixed goats were fed diets without castor meal (WCM), with detoxified castor meal (DCM), and with castor meal (CM) during early pregnancy. The goats had their estrous synchronized and were then submitted to the mating season. The number of fetuses was determined by ultrasonography after 25 days of mating and their development was followed until 60 days of gestation. Plasma levels of progesterone (P4), liver enzymes, and urea were determined along with the evaluation of the immunological response. After 15 days of experimental feeding, immunoglobulin G (IgG) was detected by western blotting only in goats that received non-detoxified castor meal. There was no effect (p > 0.05) of type of diet on response to estrous synchronization, plasma P4 levels, conception rate, or embryonic/fetal development. In pregnant goats, there was an effect of diet (p 0.001) on plasma urea levels in multiple-birth pregnancy, gamma-glutamyltransferase (GGT) in single-birth pregnancy, and lactate dehydrogenase (LDH) in both types of pregnancy. In non-pregnant goats, there were increased urea levels in all types of diet were higher in non-pregnant goats than pregnant goats. In conclusion, it can be inferred that the inclusion of 15% castor meal, whether or not it is detoxified, to the diet of goats does not affect the reproductive performance, embryonic and early fetal development, or blood metabolites.(AU)

ULTRASSONOGRAFIA MODO B E DOPPLER NA AVALIAÇÃO GESTACIONAL DE CABRAS

Este estudo teve como objetivo avaliar a eficácia da ultrassonografia modo B e Doppler na avaliação gestacional em cabras, descrevendo as características de tecidos materno-fetais e determinando equações preditivas de idade gestacional, além de avaliar as características dopplerfluxometricas das artérias umbilical e uterina. De forma adicional, foram correlacionadas as alterações na impedância do muco vaginal, temperatura vulvar e medidas ecobiométricas com o momento do parto. Foram utilizadas 25 cabras das raças Saanen multíparas, com peso entre 30 e 60 kg e idades entre dois e cinco anos, hígidas e sem histórico de doenças reprodutivas. Os animais foram submetidos a protocolo de sincronização de estro e monta natural. As avaliações foram realizadas semanalmente do dia 21 de gestação até a parturição. O teste de Shapiro foi utilizado para determinar a normalidade dos dados e o teste de Spearman para determinar correlações de medidas reais ou transformadas à medida que a gestação avançou. Se houve uma diferença significativa detectada, ajustes variáveis e semanas gestacionais foram testados usando modelos de regressão. Também foram realizados teste de correlação entre o numero de fetos e as variáveis estudadas e de comparação pela análise de variância e pós-teste de Tukey. O nível de significância foi estabelecido em 5%. Os diâmetros abdominal, torácico, biparietal; os comprimentos cefalococcígeo, nuca ao focinho, úmero, rádio-ulna, metacarpo, fêmur, tíbia, metatarso, placentomas, órbita ocular, rins; e área do coração foram mensurados; além do índice de resistividade (IR) e pulsatilidade (IP) das artérias uterina e umbilical. A frequência cardíaca foi obtida utilizando o modo Doppler pulsado. Os maiores coeficientes de determinação (R²) foram obtidos para o comprimento do úmero (UMC; 96,2%), área do coração (ACOR; 95,6%) e distância da nuca ao focinho (DNF; 95,3%). Apenas placentomas e frequência cardíaca fetal apresentaram baixos coeficientes de determinação (R²=54,3 e R²=45,0). O fluxo da artéria uterina não variou ao longo das avaliações enquanto a umbilical apresentou baixa correlação com a idade gestacional (R² 33,7%). A frequência cardíaca se correlaciona negativamente com as horas antes do parto (p<0,001; r-Pearson= -0,451), assim como a temperatura vaginal (p= 0,001; rPearson= -0,275), enquanto a espessura da cérvix se correlacionou positivamente (p<0,001; r-Pearson= 0,490); a impedância do muco vaginal, não variou ao longo das avaliações e não se correlacionou com o momento do parto. As avaliações biométricas indicaram correlações significativas entre as medidas das estruturas materno-fetais e a idade gestacional, que podem ser usadas como valores de referência e detecção de anormalidades no desenvolvimento e o monitoramento da frequência cardíaca, temperatura vaginal e mensuração da espessura cervical na última semana gestacional fornecem informações adequadas acerca da proximidade do momento do parto.

This study aimed to evaluate the efficacy of B- mode and Doppler ultrasonography in gestational evaluation in goats, describing the characteristics of maternal-fetal tissues and determining predictive equations for gestational age, besides evaluating dopplerfluxometric characteristics of the umbilical and uterine arteries. In addition, changes in vaginal mucus impedance, vulvar temperature and ecobiometric measurements were correlated with the time of delivery. 25 multiparous Saanen goats were used, weighing between 30 and 60 kg and aged between two and five years, healthy and with no history of reproductive diseases. The animals were submitted to a protocol of estrus synchronization and natural breeding. The evaluations were carried out weekly from the 21st day of gestation until parturition. The Shapiro test was used to determine the normality of the data and the Spearman test to determine correlations of real or transformed measurements as the pregnancy progressed. If there was a significant difference detected, variable adjustments and gestational weeks were tested using regression models. Correlation tests were also carried out between the number of fetuses and the variables studied and for comparison by analysis of variance and Tukey's post-test. The level of significance was set at 5%. The abdominal, thoracic, biparietal diameters; cephalococcygeal lengths, neck to snout, humerus, radius-ulna, metacarpal, femur, tibia, metatarsus, placentomas, eye socket, kidneys; and heart area were measured; in addition to the resistivity (IR) and pulsatility (IP) index of the uterine and umbilical arteries. Heart rate was obtained using the pulsed Doppler mode. The highest coefficients of determination (R²) were obtained for the length of the humerus (UMC; 96.2%), heart area (ACOR; 95.6%) and distance from the neck to the muzzle (DNF; 95.3%). Only placentomas and fetal heart rate showed low determination coefficients (R² = 54.3 and R² = 45.0). The flow of the uterine artery did not vary during the evaluations while the umbilical presented a low correlation with gestational age (R² 33.7%). Heart rate is negatively correlated with the hours before parturition (p <0.001; r-Pearson = -0.451), as well as vaginal temperature (p = 0.001; r-Pearson = -0.275), while the thickness of the cervix was correlated positively (p <0.001; r-Pearson = 0.490); the impedance of the vaginal mucus, did not vary during the evaluations and did not correlate with the moment of delivery. Biometric evaluations indicated significant correlations between the measures of the maternal-fetal structures and the gestational age, which be used as reference values and detecting abnormalities in development and monitoring heart rate, vaginal temperature and measuring cervical thickness in the last gestational week provide adequate information about the moment of delivery.

ULTRASSONOGRAFIA EM ALTA DEFINIÇÃO (HD) NO DIAGNÓSTICO E ACOMPANHAMENTO GESTACIONAL DE CADELAS BRAQUICEFÁLICAS

O objetivo deste estudo foi realizar o estudo da ultrassonografia de alta definição (HD)para descrever a formação dos tecidos materno, fetais e embrionários.Doze fêmeas braquicefálicas, consideradas hígidas, com peso de 7 a 13kg e idade de 1 a 4 anos, foram utilizadas. Realizou-se exame ultrassonográfico modo B e HD das fêmeas gestantes, diariamente, após oito dias da inseminação artificial, até a data de parição. Utilizou-se aparelho ultrassonográfico ACUSON S2000/SIEMENS e softwares específicos. Foram obtidas medidas das estruturas embrionárias e fetais como o diâmetro da vesícula embrionária, comprimento do embrião, diâmetro biparietal e abdominal, comprimento e altura renal, comprimento do fêmur, úmero, escápula, rádio e tíbia, espessamento da parede estomacal, comprimento da adrenal, além de medidas cardíacas. Adicionalmente, foram descritos os achados ultrassonográficos das estruturas materno, embrionárias e fetais. Os resultados significativos (P < 0.001), obtidos para diâmetro lateral da vesícula gestacional (r2 = 81,8%), comprimento do embrião (r2 = 85,7%), diâmetro biparietal (r2 = 99,1%), diâmetro abdominal (r2 = 97,2%),espessura da parede gástrica (r2 = 86,9%), comprimento do fêmur (r2 = 96,6%), comprimento do rádio (r2 = 97,5%), comprimento do úmero (r2 = 96,5%), comprimento da escápula (r2 = 95,8%), comprimento da tíbia (r2 = 97,3%), comprimento (r2 = 95,8%) e altura (r2 = 96,0%) do rim, comprimento da adrenal (r2 = 89,6%), comprimento (r2 = 93,0%) e altura (r2 = 91,5%) do coração dos fetos caninos mostraram correlação significativa com os dias gestacionais e permitem a estimativa da idade gestacional com acurácia variável em diferentes períodos. Após análise estatística descritiva, se apresentam e descrevem os dias em que a gestação, placentação e cada um dos sistemas orgânicos embrionárias e fetais foi detectado. A gestação confirmou-seprecocemente do 10º ao 13º dia, o embrião apareceu no 17º dia, batimentos cardíacos no 18º dia, rins no 24º dia entre outras observações, foi possível identificar e categorizar todas as estruturas maternas, embrionárias e fetais. Conclui-se que o exame ultrassonográfico HD, pode detectar precocemente o processo gestacional, o desenvolvimento de sistemas orgânicos embrionários e fetais, além da formação de alguns órgãos que nunca foram descritos por meio da ultrassonografia. As medidas ecobiométricas permitem a estimativa da idade gestacional em diferentes períodos com acurácia.

The purpose of this study was to perform the study of high resolution (HD) ultrasonography in addition to the formation of some organs that have never been described in the literature. Twelve healthy females, weighing 7-13 kg and age 1-4 years, of brachycephalic races were used. Conventional ultrasound and HD ultrasonography of the fetuses were performed daily after eight days of artificial insemination until parturition using the ACUSON S2000/SIEMENS ultrasound apparatus and specific softwares. Measurements were made of embryonic and fetal structures, embryonic vesicle diameter, embryo length, biparietal diameter and abdominal; renal length and height; femur, humerus, scapula, radius and tibia length; thickening of the stomach wall; adrenal length; measurements, the description of maternal and fetal findings was analyzed. The significant results (P <0.001), obtained for lateral diameter of the gestational vesicle (r2 = 81.8%), embryo length (r2 = 85.7%), biparietal diameter (r2 = 99.1%), abdominal diameter (r2 = 97.2%), gastric wall thickness (r2 = 86.9%), femoral length (r2 = 96.6%), radius length (r2 = 97.5%), humeralengthl (r2 = 96.5%), length of the scapula (r2 = 95.8%), length of the tibia (r2 = 97.3%), length (r2 = 95.8%) and height (r2 = 96.0 (r2 = 93.0%) and height (r2 = 91.5%) of the heart of the canine fetuses showed a significant correlation with the gestational days and allowed the estimation of gestational age with variable accuracy and in different periods. After descriptive statistical analysis, we present and describe the days in which gestation, placentation and each of the embryonic and fetal organ systems were detected. Gestation was confirmed early in the 10th to the 13th day, the embryo appeared on the 17th day, heart beats on the 19th day, kidneys on the 24th day among other observations, it was possible to identify and categorize all maternal, embryonic and fetal structures. It is concluded that HD ultrasonography can detect the gestational process early, the development of embryonic and fetal organ systems, and the formation of some organs that have never been described by ultrasonography.The ecobiometric measures allow the estimation of gestational age in different periods with accuracy

ASPECTOS RELACIONADOS À ALTRICIALIDADE E PRECOCIALIDADE EM MACACOS BARRIGUDO (Lagothrix poepigii) E QUEIXADAS (Tayassu pecari): REVISÃO DE LITERATURA

Macacos-barrigudo (Lagothrix sp.) e queixadas (Tayassu pecari) sofrem alta pressão de caça na região Amazônica e apresentam desenvolvimento fetal diferenciado, classificando-os como altriciais (maior dependência parental) e precociais (menor dependência parental), respectivamente. Barrigudos organizam-se em grupos heterossexuais coesos, multi-macho/multi-fêmeas com 20-40 indivíduos; são frugívoros, dispersores de sementes, com ceco e cólon desenvolvidos; o ciclo ovariano dura 21 dias e gestação cerca de 225 dias, com média de 1 filhote/parto, intervalo entre partos de 22.3-25.2 meses e amamentação de 12-24 meses. Queixadas formam bandos com 25-130 indivíduos, alimentam-se de raízes, frutas e caules, com ingestão ocasional de artrópodes e anelídeos, possuem estômago multicavitário fermentador; não apresentam sazonalidade reprodutiva em vida livre na Amazônia, mas parem no período chuvoso; gestação entre 156-162 dias, média de 1.60-1.67 filhotes e intervalo entre partos de 250-253 dias. Barrigudos possuem desenvolvimento fetal mais lento quando comparado aos queixadas (velocidade de crescimento fetal a = 0. 042 e a = 0.084, respectivamente), permitindo que os neonatos de queixadas possuam maior autonomia em relação aos cuidados parentais. Os barrigudos, apesar de produzirem neonatos com maior dependência, contam com o alto investimento parental no período pós-natal para garantir a sobrevivência da prole. Fetos de barrigudos apresentam maior desenvolvimento visceral em relação aos queixadas quando comparados os volumes relativos de órgãos em fetos e animais adultos. As informações contidas nesta revisão contribuem para melhorar o entendimento das estratégias reprodutivas adotadas por essas espécies e fornecem dados que auxiliam o manejo reprodutivo destas espécies.

Woolly monkeys (Lagothrix sp.) and whitte-lipped peccary (Tayassu pecari) suffer from high hunting pressure in the Amazon region and present differentiated fetal development, classifying them as altricial (greater parental dependency) and precocial (less parental dependence), respectively. Woolly monkeys are organized into cohesive, multi-male / multi-female heterosexual groups with 20-40 individuals; are frugivorous, seed dispersers, with developed cecum and colon; the ovarian cycle lasts for 21 days and gestation for about 225 days, with a mean of 1 pup / calving, a calving interval of 22.3-25.2 months and a calving of 12-24 months. whitte-lipped peccary form flocks with 25-130 individuals, feeding on roots, fruits and stems, with occasional ingestion of arthropods and annelids, have a multicavity fermenting stomach; do not present reproductive seasonality in the Amazon, but stop in the rainy season; gestation between 156-162 days, mean of 1.60-1.67 pups and interval between births of 250-253 days. Woolly monkeys have slower fetal development when compared to whitte-lipped peccary (fetal growth rate a = 0. 042 and a = 0.084, respectively), allowing the newborns of whitte-lipped peccary to have greater autonomy regarding parental care. The potbellied, despite producing more dependent neonates, rely on the high parental investment in the postnatal period to ensure the survival of the offspring. Bellied fetuses show greater visceral development compared to jaws when comparing the relative volumes of organs in fetuses and adult animals. The information contained in this review contributes to improve the understanding of the reproductive strategies adopted by these species and provides data that support the reproductive management of these species.

Corticosteroid effect upon intestinal and hepatic interleukin profile in a gastroschisis rat model / Efeito do corticoesteróide sobre o perfil das interleucinas intestinais e hepáticas no modelo de gastrosquise em ratos

PURPOSE: To evaluate the effect of corticosteroids on intestinal and liver interleukin profile in an experimental model of gastroschisis in fetal rats. METHODS: Sprague-Dawley rats at 19.5 days of gestation had its fetuses operated for the creation of gastroschisis. Two groups of fetuses were studied with and without maternal administration of dexamethasone. Each group was composed of fetuses who underwent gastroschisis (G), control fetuses without manipulation (C) and sham fetuses (S). A dosage of the following interleukins was carried out in fetal intestinal and liver tissues: IL-1, IL-6, IL-10, tumor necrosis factor-alpha (TNF-α) and interferon-gamma (IFN-γ). The differences between the groups and subgroups were tested by ANOVA with Tukey post-test, with significant values of p<0.05. RESULTS: Dexamethasone led to an increase in intestinal and liver IL-6 (p<0.05) and a decrease in intestinal TNF-α (p<0.001) in fetuses with gastroschisis. CONCLUSION: Corticosteroids had an effect on the intestinal interleukin profile and a small effect on the liver interleukin profile due to immunological immaturity of the fetus, and also of fetuses with gastroschisis. The steroid action may not be exclusively anti-inflammatory, but also pro-inflammatory, varying with time of pregnancy.(AU)

OBJETIVO: Avaliar a ação do corticosteroide no perfil de interleucinas intestinais e hepáticas no modelo experimental de gastrosquise em fetos de ratos. MÉTODOS: Ratas Sprague-Dawley com 19,5 dias de gestação tiveram fetos operados para criação de gastrosquise. Dois grupos de fetos foram estudados: com e sem administração materna de dexametasona. Cada grupo foi composto por fetos submetidos a gastrosquise (G), fetos controles sem manipulação (C) e fetos sham (S). Realizou-se a dosagem das seguintes interleucinas no tecido intestinal e hepático fetal: IL-1, IL-6, IL-10, fator de necrose tumoral-alfa (TNF-α) e interferon-gama (IFN-γ). As diferenças entre os grupos e subgrupos foram testadas pelo teste de ANOVA com pós-teste de Tukey, com valores significativos de p<0,05. RESULTADOS: A dexametasona levou a um aumento da IL-6 intestinal e hepática (p<0,05) e a uma diminuição do TNF-α intestinal (p<0,001) em fetos com gastrosquise. CONCLUSÃO: O corticosteróide apresentou efeito sobre o perfil de IL intestinal e pouco na hepática, devido a imaturidade imunológica dos fetos e também dos fetos com gastrosquise a ação do esteróide pode não ser exclusivamente anti-inflamatória, mas também pró inflamatória.(AU)

Efeitos da exposição gestacional à fumaça decorrente da queima de Cannabis sativa na placenta murina

RESUMO SILVA, I. A. N. Efeitos da exposição gestacional à fumaça decorrente da queima de Cannabis sativa na placenta murina. 2018. 100 f. Dissertação (Mestrado em Ciências) Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Universidade de São Paulo, São Paulo, 2018. A Cannabis sativa, genericamente conhecida por maconha é uma das drogas ilícitas mais utilizadas no mundo. Por ser considerado inofensiva em alguns países seu uso recreativo é liberado, o que tem aumentado em grandes proporções do uso desta substância, incluindo mulheres gestantes. A gestação é um período em que ocorrem alterações dinâmicas fisiológicas consideráveis na mãe, placenta e feto e com isso, os processos de absorção, distribuição e eliminação de drogas utilizadas pode ser muito variável. O que torna a utilização de desta droga mais perigosa nesse período. Diversos desfechos gestacionais negativos estão associados a seu uso, porém pouco se sabe sobre os mecanismos envolvidos nesta associação. Assim, neste estudo avaliamos experimentalmente utilizando um modelo animal, se os desfechos gestacionais negativos podem estar associados a alterações placentárias. Resumidamente, fêmeas gestantes de camundongos foram expostas a fumaça proveniente da queima da Cannabis diariamente durante a gestação via inalação, mimetizando o uso por humanos. No 18,5° dia da gestação (a termo) foram eutanasiadas e as placentas coletadas apara avaliação estereológica. Os resultados mostram que a o consumo da cannabis em baixa dose pode provocar alterações na estrutura da placenta. Há um aumento significativo em seu volume total decorrente do aumento no volume do labirinto, além disto o volume de capilares fetais está aumentados e a barreira inter-hemal fica mais fina. Estas alterações apesar de sugerirem um mecanismo compensatório, o crescimento fetal normal não é mantido. Palavras chave: placenta, Cannabis sativa, drogas de abuso, desenvolvimento fetal

ABSTRACT SILVA, IAN. Effects of gestational exposure to smoke from burning Cannabis sativa on the murine placenta. 2018. 100 f. Dissertação (Mestrado em Ciências) Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Universidade de São Paulo, São Paulo, 2018. Cannabis sativa, commonly known as marijuana or pot, is one of the most used ilicit drug in the world. In some countries its recreational use is legal because this drug is not considered harmful to health. Legalization of its use has increased the number of users of this drug including pregnant women. Gestation is a period of physiological dynamic changes in the mother, fetus and placenta, thus the process of absorption, metabolism and excretion is different. Association between negative gestational and fetal outcomes and gestational exposure to marijuana is described in the medical literature, however little is known about the mechanisms involved. Taking this into account, in this study we investigated experimentally, using in a animal model that mimics human use, if the negative gestational outcomes could be associated to placental structural and functional changes. Briefly, pregnant mice were exposed during gestation to either filtered or marijuana smoke by inhalation and at gestational Day 18 (at term) they were euthanized and placentas collected for stereological analysis. Our preliminary results indicate that the use of cannabis sativa during pregnancy is associated to structural changes in the placenta. Placental total volume is increased and is due to increases in the volume of the labyrinth. In the labyrinth the volume of fetal capillaries and their surface area are increased and the interhemal membrane thickness decreased. These changes suggest a compensatory mechanism however, they fail to support the fetal normal growth. Keywords: placenta, Cannabis sativa, drugs, fetal development

The role of gut-liver axis in the restriction of intrauterine growth in a model of experimental gastroschisis / O papel do eixo intestino-fígado na restrição de crescimento intra-uterino em um modelo de gastrosquise experimental

PURPOSE: To evaluate the intrauterine growth restriction (IUGR) by the expression of IR-β, IRS-1, IRS-2, IGF-IRβ and Ikappaβ in experimental model of gastroschisis. METHODS: Pregnant rats at 18.5 days of gestation were submitted to surgery to create experimental fetal gastroschisis (term = 22 days) were divided in three groups: gastroschisis (G), control (C) and sham (S). Fetuses were evaluated for body weight (BW), intestinal (IW), liver (LW) and their relations IW/BW and LW/BW. IR-β and IGF-IRβ receptors, IRS-1 and IRS-2 substrates and Ikappaβ protein were analyzed by western blotting. RESULTS: BW was lower in G, the IW and IW / BW were greater than C and S (p<0.05) groups. The liver showed no differences between groups. In fetuses with gastroschisis, compared with control fetuses, the expression of IGF-IRβ (p<0.001) and Ikappaβ (p<0.001) increased in the liver and intestine, as well as IR-β (p<0.001) which decreased in both. In contrast to the intestine, IRS-1 (p<0.001) increased in the liver and IRS-2 decreased (p<0.01). CONCLUSION: The axis of the intestine liver has an important role in inflammation, with consequent changes in the metabolic pathway of glucose can contribute to the IUGR in fetuses with gastroschisis.(AU)

OBJETIVO: Avaliar a restrição de crescimento intra-uterino (RCIU) pela expressão de IR-β, IRS-1, IRS-2, IGF-IRβ e a via inflamatória do Ikappaβ no modelo de gastrosquise experimental. MÉTODOS: Ratas grávidas com 18,5 dias de gestação foram submetidas a cirurgia experimental para criar gastrosquise fetal (termo = 22 dias) e os fetos foram divididos em três grupos: gastrosquise (G), controle (C) e sham (S). Os fetos foram avaliados quanto ao peso corporal (BW), intestinal (IW), fígado (LW) e suas relações IW/BW e LW/BW. Os receptores IR-β e IGF-IRβ, os substratos IRS-1 e IRS-2 e a proteína Ikappaβ foram analisados por western blotting. RESULTADOS: O BW de G foi menor, o IW e IW/BW foram superiores a C e S (p < 0.05). O fígado não apresentou diferenças entre os grupos. Nos fetos com gastrosquise, quando comparados com fetos controles, a expressão de IGF-IRβ (p<0.001) e Ikappaβ (p<0.001) aumentou no fígado e intestino, assim como IR-β (p<0.001) que diminuiu em ambos. Inversamente ao intestino, IRS-1 (p<0.001) aumentou no fígado e IRS-2 diminuiu (p<0.01). CONCLUSÃO: O eixo do intestino fígado tem um papel importante na inflamação, com consequentes alterações na via metabólica de glicose que pode contribuir para a RCIU em fetos com gastrosquise.(AU)

AVALIAÇÃO DA TOXICIDADE REPRODUTIVA DO ÓLEO ESSENCIAL DE Rosmarinus officinalis L. EM RATOS WISTAR

O alecrim (Rosmarinus officinalis L.) é uma planta comum de jardim, estudada por suas diversas atividades biológicas. O óleo essencial de alecrim (OEA) é composto por substâncias químicas que interagem entre si e com o organismo de forma complexa, portanto, para que possa ser utilizado pela indústria farmacêutica é necessário avaliar minuciosamente a sua segurança. Os testes de toxicidade reprodutiva são recomendados pela ANVISA, OECD e FDA como parâmetros a serem avaliados em relação aos efeitos de desenvolvimento reprodutivo. Tendo em vista a importância de estabelecer segurança ao usar esta planta, este estudo investigou a toxicidade reprodutiva do óleo essencial de Rosmarinus officinalis e seu composto majoritário (1,8 cineol) em ratos Wistar, avaliando machos e fêmeas adultos, efeitos sobre o desenvolvimento fetal e parâmetros comportamentais da prole. Os animais foram divididos em cinco grupos experimentais: CN (controle negativo Tween 80), C3 (OEA 300 mg.kg-1), C6 (OEA 600 mg.kg-1), C12 (OEA 1200 mg.kg-1) e CE (1,8 cineol 134,55 mg.kg-1). Os machos foram tratados antes (70 dias) e durante o acasalamento (21 dias) e as fêmeas antes (14 dias) e durante o acasalamento (21 dias), gestação (21 dias) e lactação (21 dias). Para o estudo dos efeitos teratogênicos sobre as ninhadas, somente fêmeas foram tratadas do 6° ao 15° dia de gestação. Para identificar alterações no sistema reprodutivo dos machos e da fêmeas foram avaliados: consumo relativo de água e ração, peso relativo de órgãos, histopatologia, taxas reprodutivas e sinais de toxicidade; além disso, para os machos ainda foram estudados número e morfologia dos espermatozoides. Na prole, foram avaliados: comportamento e sinais de toxicidade materna, parâmetros reprodutivos e comportamentos em campo aberto e sexual. E para o potencial teratogênico, os fetos passaram pelo processo de diafanização, coloração e em seguida avaliados individualmente para a presença de alterações esqueléticas. O composto majoritário identificado e quantificado no óleo foi 1,8-cineol (44,85 %). Na avaliação dos efeitos reprodutivos de machos e fêmeas adultos, as fêmeas do grupo CE apresentaram redução no número de fetos por ninhada (8,3) e aumento da massa corporal (7,1g) dos mesmos, sugerindo embrioletalidade. Os animais não apresentaram sinais de toxicidade sistêmica. Para a prole avaliada, houve aumento da testosterona sérica (7,98 ng/mL) e do número de espermatozoides (624,37 x 106) para o grupo CE. No PPD 2 os animais dos grupos C6 (27,8s) e C12 (28,73s) levaram mais tempo para concluir o reflexo de endireitamento em superfície, o que também ocorreu para os animais do grupo C6 (12,27s) no PPD4. Os animais do grupo C6 (19,45s) e C12 (20,70s) também tiveram aumento do tempo no reflexo de geotaxia no PPD2. O grupo C3 demonstrou maior comportamento exploratório no teste de campo aberto, com aumento da frequência de entrada no centro (14,73) e diminuição de grooming (0,54) quando comparados ao grupo controle. Não foram observados sinais de toxicidade materna. Na avaliação dos fetos expostos durante o período de organogênese, houve uma tendência para o aumento das perdas pós-implantação, quanto maior a dose testada, para os grupos que receberam OEA. Os tratamentos interferiram no desenvolvimento fetal demonstrado pelo retardo no desenvolvimento esquelético em todos os grupos, sugerindo que a exposição à estas doses do óleo essencial e 1,8 cineol devem ser evitadas em gestantes. Os grupos C6, C12 e CE apresentaram maior proporção de fetos com anormalidades no esqueleto (78,31%, 100% e 95,06%, respectivamente).

The Rosemary (Rosmarinus officinalis L.) is an ordinary plant from the yard studied for its several biological activities. The Rosemary essential oil (REO) is composed by chemical substances which interact with each other and with the organism of complex form, therefore, its necessary to evaluate its safety deeply for making its usage possible for the industry. The reproductive toxicity tests are recommended by ANVISA, OECD and FDA as parameters to be evaluated regarding the effects of reproductive development. Aiming at the importance of establishing confidence on this plant usage, the present study investigated the reproductive toxicity of the Rosmarinus officinalis essential oil and its majority component (1,8 cineol) in Wistar rats considering male and female adults, effects on the fetal development and behavior parameters of the offspring. The animals were divided into five experimental groups: NC (negative control - Tween 80), C3 (REO 300 mg.kg-1), C6 (REO 600 mg.kg-1), C12 (REO 1200 mg.kg-1) e CE (1,8 cineol 134,55 mg.kg-1). The male samples were fed before (70 days) and during the mating (21 days) and the female ones were fed before (14 days) and during the mating (21 days), pregnancy (21 days) and lactation (21 days). For studying teratogenic effects on the offspring, just female samples were fed from the sixth to the fifteenth day of pregnancy. In order to identify modifications on the reproductive system of male and female samples it was analyzed: relative water and feed consumption, relative weight of organs, histopathology, reproductive taxes and toxicity signs; besides, for the male ones, number and morphology of sperm were also studied. About the offspring, maternal behavior and signs of toxicity, reproductive parameters and open and sexual field were studied. For the teratogenic potential, the offspring were submitted to a diaphanous process, coloring and next were evaluated separately for checking the existence of skeletal changes. The majority component identified and qualified into the oil was 1,8-cineol (44,85 %). In evaluating the reproductive effects of adults males and females, the females of the CE group presented a reduction in the number of fetuses per litter (8,3) and increased body mass (7,1g), suggesting embryoletality. The animals showed no signs of systemic toxicity. For the evaluated offspring, there was an increase in serum testosterone (7,98 ng / mL) and the number of spermatozoa (624.37 x 106) for the CE group. In PPD 2 the animals of groups C6 (27,8s) and C12 (28,73s) took longer to complete the surface righting reflex, which also occurred for the animals of the C6 group (12,27s) in PPD4. The animals of group C6 (19,45s) and C12 (20,70s) also had increased time in the geotaxia reflex in PPD2. The C3 group showed higher exploratory behavior in the open field test, with an increase in the entrance frequency in the center (14,73) and a decrease in grooming (0,54), when compared to the control group. No signs of maternal toxicity were observed. In the evaluation of the fetuses exposed during the period of organogenesis, there was a tendency for the increase in the post-implantation losses, the larger the dose tested, for the groups that received REO. Treatments interfered in fetal development demonstrated by delayed skeletal development in all groups, suggesting that exposure to these doses of essential oil and 1,8-cineol should be avoided in pregnant women. Groups C6, C12 and CE presented a higher proportion of fetuses with skeletal abnormalities (78,31%, 100% and 95,06%, respectively).

Associação do uso recreacional da maconha durante a gestação com desfechos gestacionais e comportamentais em camundongos

A maconha é a droga ilícita mais consumida entre gestantes. Entretanto, os efeitos do uso materno sobre a gestação e o desenvolvimento fetal não são bem esclarecidos. Estudos experimentais e epidemiológicos apresentam resultados conflitantes devido à via de administração, tempo de exposição, dose e como a toxicidade da Cannabis é testada. Neste estudo experimental foram investigados o efeitos da inalação materna da fumaça de Cannabis sativa, aproximando as reais condições de uso da droga por humanos. Camundongas gávidas (n=20) foram expostas diariamente durante 5 minutos à fumaça decorrente da queima de maconha ( 0,2 g de Cannabis), ou ao ar filtrado, a partir do 5,5° dia gestacional (DG) ao 17,5° DG. A ingestão de alimentos e o peso materno foram registrados. Análise por ultrassom foram realizadas entre o 10,5° e o 16,5° DG. No 18,5° DG metade das fêmeas foram eutanasiadas para a a avaliação dos fetos a termo, reabsorções e placentas. A duração da gestação, desfechos neonatais e comportamentais em neonatos e adultos foram avaliados na outra metade. A exposição diária de 5 min (dose baixa) durante e gestação resultou em redução do peso ao nascer mas o tamanho da prole não foi alterado; no entanto, o número de filhotes machos por prole foi maior. Além disso, o peso líquido da placenta foi aumentado e a proporção feto\placenta foi diminuída em machos, mostrando um efeito específico do sexo. A exposição também alterou a força muscular e reflexos em neonatos, além de causar prejuízos na memória e efeito ansiolítico na prole exposta. Em conclusão, nossos resultados indicam que o fumo da maconha durante a gestação, mesmo em doses baixas, pode ser embriotóxico, fetotóxico e pode alterar o comportamento em neonatos e adultos.

Marijuana is the most used illegal drug among pregnant women. However, the effects of maternal use on pregnacy and fetal development are not well understood. Experimental and epidemiologicals studies have show conflicting results due to the route of administration, duration of exposure, dose, and a toxicity of Cannabis is tested. In this experimental study we investigated the effects of maternal inhalation of smoke Cannbis sativa , approaching the actual drug use conditons for humans. Pregnant mice (n=20) were exposed (only noise) daily for 5 min to smoke resulting from burning marijuana (0.2g Cannabis), or filtered air, from gestational day (GD) 5.5° to GD 17.5°. Food intake and maternal weight were recorded. Ultrasound analysis was performed on 10.5 and 16.5° GD. On 18.5° GD half the mice were euthanized for evaluation of term fetus, resorptions and placenta. The duration of pregnancy nad neonatal outcomes were assessed in the other half. The daily exposure of 5 min (low dose) during pregnancy resulted in reduced brth weiht but the size of the offspring was not changed; however, the number of males per offspring pups was higher. In addition, the liquid was increased placental weight and fetal ratio placenta was decreased in males, showing a particular effect of sex.The exposure also altered muscle strength and reflexes in newborns and cause impars in memory and anxiolytic effects in exposed offspring. In conclusion, our results indicate that smoking marijuana during pregnancy, even in low doses, can be embryotoxic, foetotoxic and may change in the behavior in neonates and adults.

ESTUDO DE TOXICIDADE REPRODUTIVA E GENOTOXICIDADE DO ÓLEO ESSENCIAL DE Origanum majorana

Origanum majorana L., planta rica em óleos essenciais, apresenta atividade antifúngica in vitro contra Malassezia pachydermatis, Candida spp e Trichosporon asahii, entre outras atividades. No entanto, a exposição a produtos químicos, incluindo medicamentos à base de plantas, podem causar mutagenicidade, infertilidade, toxicidade materna e embriofetotoxicidade. Visando avaliar esses efeitos, este estudo investigou toxicidade reprodutiva do óleo essencial de Origanum majorana (Omeo) e compostos majoritários em ratos Wistar, os efeitos sobre o desenvolvimento fetal e parâmetros comportamentais da prole, e atividade mutagênica in vitro. As doses testadas in vivo foram 33mg/kg, 100mg/kg, 300mg/kg Omeo, 77mg/kg -terpineno ou 52mg/kg terpinen-4-ol, estabelecidas de acordo com estudos prévios. Ratos machos foram tratados durante 70 dias e fêmeas por 14 dias antes do acasalamento, durante a gravidez e lactação. Para identificar alterações no sistema reprodutivo de machos foram avaliados: peso relativo de órgãos, histopatologia, número e morfologia de espermatozóides, taxas reprodutivas, ganho de peso, ingestão de água e alimento, e sinais de toxicidade. Comportamento e sinais de toxicidade materna, parâmetros reprodutivos, comportamento em campo aberto e sexual da prole também foram avaliados. O potencial teratogênico foi observado na progênie de machos não tratados e fêmeas tratadas apenas durante a prenhez. No dia 21, após cesárea, os fetos foram diafanizados, corados e avaliados individualmente para a presença de alterações esqueléticas. A exposição reduziu de maneira dose dependente taxas reprodutivas, número e produção diária de espermatozóides, além de induzir aumento de defeitos em espermatozoides (Omeo e terpinen-4-ol), e reduzir peso relativo de testículos e epidídimos com 300mg/kg Omeo. Não foi observada prenhez com esta dose e com terpinen-4-ol. O comportamento materno relacionado ao ninho foi reduzido com 100mg/kg Omeo, mas a capacidade de resposta materna foi mantida pelo comportamento de amamentação e cuidados. Esta dose induziu redução do número de descendentes, aumento do tempo de prenhez e retardo na separação prepucial de filhotes. Outros parâmetros reprodutivos e comportamentais da prole não foram afetados. Observou-se atraso do desenvolvimento esquelético em todos os grupos tratados e malformações do esqueleto com as doses máximas de Omeo e terpinen-4-ol. Mutagenicidade in vitro foi avaliada pelo teste de Salmonella/microssoma utilizando o procedimento de pré-incubação das linhagens TA98, TA97, TA100, TA102 e TA1535 de S. typhimurium, com ou sem ativação metabólica. Não se observou mutação gênica. Para o teste de micronúcleos em células de mamíferos in vitro, foi utilizado células V79 de fibroblastos de pulmão de hamster chinês e Omeo não induziu mutação cromossômica. Concluindo, Omeo não é capaz de induzir in vitro mutações gênicas ou cromossómicas, no entanto, o tratamento contínuo em doses elevadas de Omeo e compostos majoritários afetam a fertilidade masculina, induzem alterações nas taxas reprodutivas e causam malformação e efeitos adversos sobre a descendência, não devendo ser utilizado nessas doses durante a gravidez e lactação

Origanum majorana L., a plant rich in essential oils, presents antifungal activity in vitro against Malassezia pachydermatis, Candida spp and Trichosporon asahii, among other activities. However, exposure to chemicals, including herbal medicines, can cause mutagenicity, infertility, maternal toxicity, embryotoxic effects on offspring. Therefore, this study investigated in vivo reproductive toxicity of the Origanum majorana essential oil (Omeo) and major compounds on rats Wistar, effects on the fetal development and behavioral parameters of the offspring, and in vitro mutagenic activity. The in vivo tested doses were 33mg/kg, 100mg/kg or 300mg/kg Omeo, 77mg/kg -terpinene or 52mg/kg terpinen-4-ol, established according to previous studies. Male parents were treated for 70 days and females for 14 days prior to mating, during pregnancy and lactation. To identify alterations in reproductive system of males were evaluated organs relative weight, histology, sperm number and morphology of spermatozoa. Reproductive index, body weight gain, intake water and food, and toxicity signs were evaluated. Signs of maternal toxicity, maternal behavior, offspring reproductive parameters, open field behavior and sexual behavior were observed. To evaluated the teratogenic potential, female rats Wistar were treated only during pregnancy and males were not treated. At 21th was performed cesarean, fetuses were diaphanized, stained and evaluated individually for the presence of skeletal alterations. The exposure induced dose-dependent way reduction in reproductive index, reduction in sperm number, reduction in daily sperm production, increase in sperm defects to males treated with Omeo and Terpinen-4-ol, reduction in testis and epididymis relative weight to 300mg/kg Omeo, and no pregnancy at this dose and terpinen-4-ol. Maternal toxicity was not observed. The maternal behavior related to the nest was reduced with 100 mg/kg Omeo, but the maternal responsiveness was maintained by the nursing behavior. This dose induced reduction in the number of offspring per parent, increase in the time of pregnancy and changes in the development of males characterized by delayed preputial separation. Other reproductive and behavioral parameters of the male offspring were not affected. However, it was observed skeletal development delay in all treated groups and skeletal malformation at the highest doses of Omeo and terpinen-4-ol. Mutagenicity in vitro was evaluated by the Salmonella/microsome test using the preincubation procedure on TA98, TA97a, TA100, TA102 and TA1535 Salmonella typhimurium strains, with or without metabolic activation. No gene mutation increase was observed. For the in vitro mammalian cell micronucleus test, it was used V79 Chinese hamster lung fibroblasts and Omeo was not able to induce chromosome mutation. In conclusion, Omeo is not able to induce in vitro gene and chromosome mutations, however, the continuous treatment with high doses Omeo and major compounds affect male fertility, induce changes in reproductive rates, cause malformation and adverse effects on the developing offspring, and should not be used during pregnancy and lactation.

Estudo sobre a migração transuterina e a razão sexual de conceptos em bovinos da raça Nelore (Bos taurus indicus)

A bovinocultura de corte é uma das atividades do agronegócio brasileiro que mais movimentam capitais, bens e serviços, sendo que, segundo dados das associações de criadores e exportadores, cerca de 80% dos bovinos criados no país são oriundos de raças zebuínas (Bos taurus indicus), e destes, a maioria é pertencente à raça Nelore ou seus cruzamentos. Os trabalhos conduzidos com a utilização de dados obtidos em frigoríficos podem ser considerados bastante fiéis e valorosos, já que representam uma amostra do que ocorre nos rebanhos comerciais, e entre os dados que podem ser extraídos nessas investigações estão aqueles relacionados à fisiologia da reprodução, como a ocorrência de migração transuterina dos conceptos, simetria da frequência gestacional entre os cornos uterinos, razão sexual e existência de predileção cornual para o sexo do concepto, e associação e estabelecimento de medidas comumente utilizadas em fetometria, que foram os objetivos da presente pesquisa. Foram avaliados 5431 tratos reprodutivos de vacas e novilhas da raça Nelore em um frigorifico no Mato Grosso do Sul, deste total, 1030 animais (19,0%) se encontravam prenhes no momento do abate (sendo 2 casos de gestações gemelares). Para os casos de gestações simples (n=1028), observou-se que em 39,5% delas, o concepto encontrava-se no corno uterino esquerdo (CE), e nos demais 60,5% no direito (CD), frequências estas que diferiram estatisticamente. Em todos os 1028 casos (100%) do presente estudo, havia a presença de um único corpo lúteo no ovário ipsilateral ao corno uterino gestante (seja ele direito ou esquerdo), mostrando a inexistência, ou mesmo a raridade da migração transuterina do concepto. Quanto à frequência de sexos obtida do número total de gestações simples, 46,5% eram de machos e 43,9% de fêmeas, sendo os 9,6% restantes (n=99) referentes aos fetos os quais não se obteve sucesso da determinação do sexo, pela metodologia aplicada. A distribuição dos sexos entre os cornos uterinos ocorreu da seguinte forma: CE com frequências de 47,3%, 45,8% e 6,9% para fêmeas, machos e de sexo indeterminado respectivamente. Para CD, 46,9%, 41,6% e 11,4% dos achados, para machos, fêmeas e indeterminados respectivamente. A razão sexual encontrada foi de 51,5%, considerando apenas as gestações com sexo do concepto identificado, não diferindo estatisticamente o número de machos do número de fêmeas. A suposta predileção de sexo pelos cornos uterinos, não foi verificada, uma vez que a diferença entre os números de machos e fêmeas para um mesmo corno uterino não foram significativas para =0,05. Já entre os cornos uterinos o mesmo sexo apresentou diferença estatística em sua distribuição, sendo essa diferença maior significativamente para os machos (² 23,50) do que para as fêmeas (² 9,95). As medidas de crown-rump (CR) e crown-nose (CN), dos conceptos com tamanho de CR entre 2,00 cm e 15,00 cm apresentaram um coeficiente de correlação linear alto, no valor de r=0,990865, sendo CN = (0,3027 x CR) + 0,4491 r2 = 0,9818 equação que descreve o comportamento das variáveis no intervalo. Para a estimativa das idades gestacionais (IG), foi considerada a equação, CR = -10,76 + 0,0199 x IG2 nos quais foram obtidos valores mínimos e máximos de 28,6 dias e 89,9 dias, para o menor embrião encontrado (CR=0,55 cm) e para aqueles com CR=15,00 cm, respectivamente. Sendo assim, a migração transuterina do concepto inexiste, ou mesmo consiste de um evento raro para a raça Nelore, além das razões e predileções sexuais não serem distintas da distribuição simétrica, observada ainda uma maior atividade funcional do ovário direito em relação ao contralateral, e ainda podendo ser estabelecida uma equação com variáveis CR e CN que possa auxiliar, sobretudo na rotina para avaliação reprodutiva veterinária de campo.

Beef cattle is one of the wealthiest activities of Brazilian agribusiness, involving goods and services, and according to the breeders' and exporters associations, around 80% of cattle raised in the country 2 come from Zebu breeds (Bos taurus indicus) and of these, most of them are Nellore or their crossbreeding. The abattoir material retrieves reliable information on reproductive parameters in food animals as they represent a sample of what occurs in commercial herds. Data related to the physiology of reproduction can be extracted from these investigations, like the occurrence of transuterine migration of fetuses, symmetry of gestational frequency between uterine horns, sex ratio and sexual segregation in the uterine horns, and establishment of measures commonly used in fetometry, being all of them the objectives of this study. In this study 5,431 reproductive tracts of Nellore cows and heifers were evaluated in an abattoir in the state of Mato Grosso do Sul, from these, 1,030 animals (19.0%) were pregnant at the time of slaughter (including 2 cases of twin pregnancies). Regarding singleton pregnancies (n = 1,028), we observed that in 39.5% of them, the fetus was located in the left uterine horn (LH), and the remaining 60.5% in the right (RH), these frequencies differed statistically. In all 1,028 (100%) cases the presence of a single corpus luteum was perceived in the ovary ipsilateral (whether right or left) to the pregnant uterine horn, indicating the absence of intrauterine migration of the conceptus. The sex ratios obtained from the total number of singleton pregnancies were 46.5% of males, 43.9% of females, the remaining 9.6% (n = 99) from fetuses which, by the methodology applied, were not successfully sex determinate. The distribution of sexes between the uterine horns was as follows: LH with frequencies of 47.3%, 45.8% and 6.9% for females, males, and unknown gender respectively. For RH, 46.9%, 41.6% and 11.4% of the findings for males, females and unknown, respectively. The sex ratio found was 51.5%, considering only pregnancies with sex identified, not differing significantly between the number of males and the number of females. The supposed sex predilection for uterine horns was not observed, since the difference between the numbers of males and females for the same uterine horn were not significant at = 0.05. Among the uterine horns the same sex showed statistical difference in distribution, and this difference was significantly higher for males (² 23.50) than females (² 9.95). The crown-rump (CR) and crown-nose (CN) measures, for the conceptus with CR length between 2.00 cm and 15.00 cm, showed a high linear correlation coefficient (r=0.990865), being CN = (0.3027 x CR) + 0.4491, r2 = 0.9818, the equation that describes the behavior between the variables in this range. About the prediction of gestational age (GA), was considered the equation CR = -10,76 + 0,0199 x IG2 that gave minimum and maximum values of 28.6 days and 89.9 days for the smaller embryo found (CR = 0.55 cm) and those with CR = 15.00 cm, respectively. Thus, in Nellore the transuterine migration of conceptus may not exist, or consists of a rare event, in addition, the sex ratio and predilection are not distinguished from the symmetrical distribution, still keeping in mind the higher functional activity of the right ovary compared to the left, and the establishment of fetometry equation being CR and CN as variables, that can be useful, especially in reproductive evaluation, the veterinary field routine.