Identificação de Extratos Vegetais da Região Amazônica com Ação Antifúngica contra Candida albicans

Candida albicans faz parte da microbiota normal e está presente em mucosas do trato digestivo, sistema reprodutor e na boca. Esses microrganismos se tornam patogênicos quando há alterações no mecanismo de defesa, quando há resistência imunológica baixa, ou por alterações em fatores hormonais, causando a candidíase, muitas vezes pela presença de leveduras resistentes a tratamentos convencionais. Por isso, há a necessidade de se introduzir novos fármacos antifúngicos, e a natureza é uma importante fonte de novos produtos. Método: Neste projeto, 2.240 extratos foram pesquisados quanto às suas propriedades antifúngicas, a partir de técnicas de disco difusão em ágar (DDA), microdiluição em caldo (MDC), difusão em bioautografia (DeB) e a toxicidade dos extratos ativos foi verificada pelo ensaio de toxicidade a artêmia (TAS). Resultados: A partir da DDA, foram identificados seis extratos ativos que apresentaram halos de inibição entre 8,32 mm e 14,90 mm (e anfotericina B, halo de inibição de 16,05 mm de diâmetro (anfotericina B>NC>NA>NDNE=NB=NF). NA, NB e ND apresentaram atividade inibitória em DeB nos volumes de 2 µL, 5 µL e 10 µL, tomados de uma solução a 100 mg/mL. A concentração fungicida mínima (CFM) mais baixa foi dos extratos NA e NC, que correspondeu ao mesmo valor da anfotericina B, de 3,91x10-2 mg/mL. A toxicidade à artêmia dos extratos selecionados foi NA

Candida albicans is part of the normal microbiota and is present in mucous membranes of the digestive tract, reproductive system and in the mouth. These microorganisms become pathogenic when there are changes in the defense mechanism, When there is low immune resistance, or by changes in hormonal factors, causing candidiasis, often due to the presence of yeast resistance to conventional treatments. Therefore, there is a need to introducing new antifungal drugs, and nature is an important source of new products. In this projetct, 2,240 extracts for their antifungal properties, using disk agar diffusion (DDA), broth microdilution (MDC), bioautography diffusion (DeB) techniques, and the toxicity of the active extracts was verified by the Artemia toxicity (TAS). From the DDA, six active extracts were identified that presented inhibition halos between 8.32 mm and 14.90 mm and amphotericin B, 16.05 mm diameter inhibition halo (amphotericin B>NC>NA>ND NE=NB=NF) NA, NB and ND showed inhibitory activity in DeB in the volumes of 2 µL, 5 µL and 10 µL, taken from a 100 mg / mL solution, the lowest minimum fungicidal concentration (CFM) was NA and NC extracts, which corresponded to the same value of amphotericin B, of 3.91x10-2 mg/mL. The artemia toxicity of the selected extracts was NA

Susceptibility of dermatophytic fungi to commonly used disinfectants / Suscetibilidade de fungos dermatófitos a desinfetantes comumente utilizados

This study aimed evaluate the antidermatophytic activity of three commercial disinfectants commonly used for environmental control of microorganisms in veterinary medicine. Sodium hypochlorite at 40 L/mL, chloro-phenol derived at 30 L/mL and chlorhexidine digluconate at 66.7 L/mL were tested against 14 strains of dermatophytes, identified as Microsporum canis (n: 3) and Microsporum gypseum (n: 11). The tests was performed in accordance with guidelines of the Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI), documents M38-A2 and M51-A, adapted to disinfectants. In the microdilution broth test, chlorhexidine digluconate had MIC values (Minimum Inhibitory Concentration) of 4.16 L/mL and MCF (Minimum Fungicidal Concentration) from 4.16 to 8.33 L/mL, while chloro-phenol derived obtained MIC and MCF of 1.87 L/mL, and both disinfectants had fungicidal activity at concentrations below the recommended. Sodium hypochlorite obtained MIC from 10 to 80 L/mL and MFC of 40 to 80 L/mL, requiring at most isolates twice the recommended concentration to achieve same activity. In the disc diffusion test, the mean inhibition zones for chlorhexidine digluconate was 10.53 mm, for chloro-phenol of 9.9 mm and for sodium hypochlorite was 6.2 mm.  Chlorhexidine digluconate and chloro-phenol presented a significant reduction in the growth of dermatophytes, while sodium hypochlorite in concentration recommended showed a low antifungal activity against tested isolates.

O objetivo do estudo foi avaliar a atividade antidermatofítica de três desinfetantes comerciais frequentemente utilizados no controle ambiental de micro-organismos em medicina veterinária. Hipoclorito de sódio a 40 μL/mL, derivado de clorofenol a 30 μL/mL e digluconato de clorexidine a 66.7 μL/mL foram testados contra 14 cepas de dermatófitos, identificados como Microsporum canis (n: 3) e Microsporum gypseum (n: 11). Foram utilizadas as diretrizes do Clinical and Laboratory Standard Institute (CLSI), documentos M38-A2 e M51-A, com adaptações para desinfetantes. Na microdiluição em caldo, digluconato de clorexidine apresentou valores de CIM (Concentração Inibitória Mínima) de 4.16 μL/mL e CFM (Concentração Fungicida Mínima) entre 4.16 a 8.33 μL/mL; derivado de clorofenol obteve CIM e CFM de 1.87 μL/mL, demonstrando que ambos os desinfetantes apresentaram atividade fungicida em concentrações inferiores às recomendadas. O hipoclorito de sódio demonstrou CIM entre 10 a 80 μL/mL e CFM de 40 a 80 μL/mL, requerendo duas vezes a concentração recomendada pelo fabricante para obter atividade fungicida frente a maioria dos isolados fúngicos testados. No teste de disco-difusão, a média das zonas de inibição do digluconato de clorexidine foi de 10.53 mm; do derivado clorofenol 9.9 mm e do hipoclorito de sódio 6.2 mm. O digluconato de clorexidine e o derivado cloro-fenol apresentaram redução significante no crescimento dos dermatófitos testados, enquanto o hipoclorito de sódio, na concentração recomendada, demonstrou baixa atividade antifúngica contra os dermatófitos testados.(AU)

Comparação de métodos para avaliação da atividade antimicrobiana e determinação da concentração inibitória mínima (cim) de extratos vegetais aquosos e etanólicos / Comparison of methods for evaluation of antimicrobial activity and determination of minimum inhibitory concentration (mic) of aqueous and ethanol plant extracts

Vários estudos estão sendo conduzidos para a descoberta de novos agentes antimicrobianos provenientes de plantas, para que possam ser utilizados em produtos farmacêuticos, cosméticos e na indústria alimentícia. A ausência de padronização de métodos utilizados para a avaliação de extratos vegetais com potencial antimicrobiano dificulta a comparação de resultados. Considerando a necessidade de estabelecer um método com resultados consistentes para avaliar a atividade antimicrobiana dos extratos vegetais, este trabalho propôs-se a avaliar a atividade antimicrobiana e determinar a concentração mínima inibitória de extratos de plantas da família Myrtaceae sobre diferentes micro-organismos, utilizando três métodos para avaliação de antimicrobianos. Os métodos empregados foram microdiluição em caldo e difusão em ágar por disco e poço. Foram avaliados os extratos de Psidium guajava, Myrciaria cauliflora e Syzygium cumini sobre bactérias Gram-positivas, negativas e levedura. Em geral, a inibição promovida pelos extratos no teste de difusão em ágar por poço foi maior do que os valores obtidos por disco, independentemente do extrato vegetal testado. Contudo, a atividade inibitória de todos os micro-organismos só pôde ser determinada com o método de microdiluição em caldo, que também apresentou os resultados mais reprodutíveis, e mostrou-se o mais econômico e confiável para se avaliar a atividade antimicrobiana de extratos vegetais quando comparado aos outros métodos.(AU)

Several studies have been conducted to discover new antimicrobial agents from plants to be used in pharmaceuticals, cosmetics and in the food industry. The lack of standardized methods for the evaluation of plant extracts with antimicrobial potential complicates the comparison of results. Taking into consideration the need to establish a method with consistent results to evaluate the antimicrobial activity of plant extracts, this study aimed to evaluate the antimicrobial activity of extracts of some plants from the Myrtaceae family on different micro-organisms based on a comparative assay with three methods that are commonly used for the assess antimicrobials. The methods used were broth microdilution, and agar diffusion by disc and well. The evaluated extracts were those of Psidium guajava, Myrciaria cauliflora, and Syzygium cumini for Gram-positive and negative bacteria and yeast. In general, inhibition extracts promoted by the agar diffusion test by well was higher than the values ​​obtained by disc, regardless of the plant extracts tested. However, the inhibitory activity of all micro-organisms was only possible to be determined with the microdilution broth method, which also presented the more reproducible results, and proved to be the most economic and reliable way to evaluate the antimicrobial activity of plant extracts in contrast with other methods.(AU)

Comparação de métodos para avaliação da atividade antimicrobiana e determinação da concentração inibitória mínima (cim) de extratos vegetais aquosos e etanólicos / Comparison of methods for evaluation of antimicrobial activity and determination of minimum inhibitory concentration (mic) of aqueous and ethanol plant extracts

Vários estudos estão sendo conduzidos para a descoberta de novos agentes antimicrobianos provenientes de plantas, para que possam ser utilizados em produtos farmacêuticos, cosméticos e na indústria alimentícia. A ausência de padronização de métodos utilizados para a avaliação de extratos vegetais com potencial antimicrobiano dificulta a comparação de resultados. Considerando a necessidade de estabelecer um método com resultados consistentes para avaliar a atividade antimicrobiana dos extratos vegetais, este trabalho propôs-se a avaliar a atividade antimicrobiana e determinar a concentração mínima inibitória de extratos de plantas da família Myrtaceae sobre diferentes micro-organismos, utilizando três métodos para avaliação de antimicrobianos. Os métodos empregados foram microdiluição em caldo e difusão em ágar por disco e poço. Foram avaliados os extratos de Psidium guajava, Myrciaria cauliflora e Syzygium cumini sobre bactérias Gram-positivas, negativas e levedura. Em geral, a inibição promovida pelos extratos no teste de difusão em ágar por poço foi maior do que os valores obtidos por disco, independentemente do extrato vegetal testado. Contudo, a atividade inibitória de todos os micro-organismos só pôde ser determinada com o método de microdiluição em caldo, que também apresentou os resultados mais reprodutíveis, e mostrou-se o mais econômico e confiável para se avaliar a atividade antimicrobiana de extratos vegetais quando comparado aos outros métodos.(AU)

Several studies have been conducted to discover new antimicrobial agents from plants to be used in pharmaceuticals, cosmetics and in the food industry. The lack of standardized methods for the evaluation of plant extracts with antimicrobial potential complicates the comparison of results. Taking into consideration the need to establish a method with consistent results to evaluate the antimicrobial activity of plant extracts, this study aimed to evaluate the antimicrobial activity of extracts of some plants from the Myrtaceae family on different micro-organisms based on a comparative assay with three methods that are commonly used for the assess antimicrobials. The methods used were broth microdilution, and agar diffusion by disc and well. The evaluated extracts were those of Psidium guajava, Myrciaria cauliflora, and Syzygium cumini for Gram-positive and negative bacteria and yeast. In general, inhibition extracts promoted by the agar diffusion test by well was higher than the values ​​obtained by disc, regardless of the plant extracts tested. However, the inhibitory activity of all micro-organisms was only possible to be determined with the microdilution broth method, which also presented the more reproducible results, and proved to be the most economic and reliable way to evaluate the antimicrobial activity of plant extracts in contrast with other methods.(AU)