EMPREGO DA AMITRIPTILINA EM RELAÇÃO AO ESTRIOL SISTÊMICO NO CONTROLE DA INCONTINÊNCIA URINÁRIA PÓSOVARIOHISTERECTOMIA EM CADELAS

A incontinência urinária (IU) decorrente da incompetência do mecanismo do esfíncter uretral (IMEU) é uma complicação que pode acometer até 20% das cadelas submetidas à cirurgia de castração. Condições multifatoriais como baixas concentrações de estrógenos, altos níveis de LH e FSH, alterações na proporção de colágenos e outros componentes do trato urinário tem sido pesquisados e apontados como possíveis causas da afecção. Os tratamentos disponíveis apresentam diferentes mecanismos de ação, com eficácia e efeitos colaterais distintos. O objetivo deste trabalho foi comparar o desempenho e segurança da amitriptilina em relação ao tratamento com estriol por via oral, considerado o fármaco de eleição no tratamento da IU por IMEU, e também avaliar clínica e laboratorialmente cadelas castradas incontinentes atendidas no Hospital de Clínicas Veterinárias da Universidade Federal do Rio Grande do Sul (HCV/UFRGS) no período de dois meses. Para isto, foram avaliadas 15 cadelas com diagnóstico clínico de IU pós-castração, durante um período de 60 dias em um ensaio clínico randomizado não-cego. Todos os pacientes foram incluídos no estudo após uma avaliação clínica composta de anamnese, exame físico, e exames complementes (hemograma, bioquímica sérica, urinálise e ultrassonografia abdominal). O grupo amitriptilina (AMT) foi composto de oito cadelas, as quais receberam a dose inicial de 1 mg/kg a cada 12 horas, ao passo que o grupo estriol (EST) foi composto por sete pacientes tratadas inicialmente com a dose de 1 mg/animal a cada 24 horas. As pacientes foram reavaliadas clinicamente após 7 dias, e posteriormente aos 21 e 60 dias de tratamento (exame clínico, hemograma e bioquímica sérica) para avaliação da segurança, eficácia e eventuais ajustes de dose. Uma escala de grau de incontinência urinária foi utilizada para avaliar a resposta terapêutica. Tanto a amitriptilina como o estriol foram eficazes em controlar os sinais clínicos da IU com poucos ou nenhum efeito adverso, com redução significativa do escore de IU das cadelas avaliadas. Durante o período observado, o estriol apresentou uma eficácia plena de 70% e a amitriptilina, de 60%. Ambas as medicações demonstraram segurança no tratamento medicamentoso da IMEU, com sinais adversos tais quais sonolência (AMT, n = 5) e atração de machos (EST, n = 1). A amitriptilina apresentou resultados que suportam sua indicação no tratamento da IMEU em substituição ao estriol.

Urinary incontinence due to urethral sphincter mechanism incompetence (USMI) is a complication that can affect up to 20% of bitches that undergo spaying surgery. Multifactorial conditions such as low estrogen concentration, high levels of LH and FSH, alterations in the proportion of collagen and other components of the urinary tract have been studied and demonstrated to be the likely cause of the affection. The available treatments present different mechanisms of action, with different efficacy and side effects. The aim of this study was to assess efficacy and safety of amitriptyline when compared to estriol orally, considered the drug of choice in the treatment of urinary incontinence (UI) due to USMI, and also to evaluate patients clinical condition and laboratorial profile in bitches evaluated in the Hospital de Clínicas Veterinárias da UFRGS (HCV-UFRGS) during the period of two months. Amitriptyline is a tricyclic antidepressant whose side effect is urinary retention. For this, 15 bitches with clinical diagnosis of post-spaying UI were evaluated during a period of 60 days in a non-blind randomized clinical trial. All patients were enrolled in the study after clinical evaluation consisting of anamnesis, physical examination, complementary exams (hemogram, biochemical parameters, urinalysis, and abdominal ultrasound). The amitriptyline (AMT) group consisted of 8 female dogs, which received the initial dose of 1mg/kg every 12 hours, whereas the estriol (EST) group consisted of 7 female dogs which initially treated with 1mg/animal every 24 hours. Patients underwent clinical evaluation at 7 days, and then at 21 and 60 days of treatment (clinical examination, hemogram and serum biochemical parameters) in order to assess safety and efficacy, as well as adjustments of dose when necessary. A urinary incontinence scale was used to assess the level of incontinence and therapeutic response to treatment. During the period of the study, estriol showed a full effectiveness of 70%, and amitriptyline of 60%. Both drugs proved safe in the medical treatment of USMI, with adverse effects such as somnolence (AMT, n=5) and male attraction (EST, n=1). Amitriptyline has shown results that support its use and recommendation in the treatment of USMI as a substitute for estriol.

Estrógeno e prostaglandina f2 alfa no controle de funções reprodutivas em fêmeas bovinas

A eficiência reprodutiva repercute sobre a produtividade e lucratividade da bovinocultura e pode ser influenciada por diversos fatores, dentre eles os transtornos uterinos e a eficiência na manipulação do ciclo estral e ovulação. No primeiro estudo, objetivou-se revisar e discutir aspectos relacionados à exposição ao estrógeno para prevenção ou terapia de transtornos reprodutivos, com foco no ambiente uterino. Com base nesta revisão, foi possível concluir que o estrógeno possui importante papel no ambiente uterino, porém, quando utilizado em doses isoladas, não se observou efeitos benéficos na terapia ou profilaxia de enfermidades uterinas. Entretanto, quando vacas repetidoras de serviço foram submetidas à exposição prolongada ao estrógeno, em protocolos de indução artificial a lactação, observou-se efeitos benéficos sobre o desempenho reprodutivo desses animais, tornando importante investigar de maneira controlada o efeito do estrógeno sobre a fertilidade. Posteriormente, sabendo que a manipulação do ciclo estral e indução da ovulação é indispensável para o uso de inseminação artificial em tempo fixo (IATF), já foi demonstrado que a prostaglandina F2 (PGF) é importante no processo ovulatório, porém seu mecanismo de ação ainda não foi elucidado, tornando justificável a validação de um modelo in vivo para o estudo da função das prostaglandinas na ovulação. Neste sentido, no segundo estudo buscou-se avaliar o efeito do anti-inflamatório não esteroidal (AINE) flunixina meglumina (FM; 2,2 mg/Kg), inibidor de cicloxigenases, sobre as concentrações de PGF e seu metabólito (13,14-di-hidro-15-ceto-PGF, PGFM) no fluído folicular (FF); verificar se a aplicação por via parenteral de um análogo de PGF (dinoprost trometamina; 25 mg) seria capaz de alterar as concentrações intrafoliculares de PGF e PGFM; e avaliar o efeito do AINE FM sobre a ovulação e função luteal subsequente. Para isso, vacas Jersey cíclicas (n=18) foram submetidas a um protocolo de sincronização de estro, e, após a aplicação de GnRH, foram alocadas em três grupos, de acordo com o diâmetro folicular (>11 mm) CONTROLE (n=6), não tratado; AINE FM (n=6), que recebeu uma aplicação de FM 17 h após o GnRH; e AINE FM + PGF (n=6), no qual foi administrado FM 17 h após o GnRH e PGF 23 h após GnRH. O FF foi coletado 24 h após o GnRH, sendo demonstrado maior concentração de PGFM no grupo AINE FM + PGF e maior concentração de PGF no grupo CONTROLE (P< 0,01). Para avaliar a ovulação e função luteal, vacas Jersey cíclicas (n=19) foram sincronizadas e, após a aplicação de GnRH, distribuídas em dois grupos, de acordo com o diâmetro folicular (>11 mm): CONTROLE (n=10), não tratado; e AINE FM (n=9), submetido a uma dose de FM 17 h após o GnRH. Os folículos foram acompanhados até 42 h após o GnRH e a coleta de sangue para dosagem de progesterona foi realizada cinco dias após o GnRH, todos os animais do controle e seis animais do AINE FM ovularam até 42 h após GnRH e as concentrações de progesterona sérica não diferiram entre os grupos (P>0,05). Com base nos nossos achados, é possível concluir que a FM foi capaz de inibir a síntese de PGF no interior do folículo e que a aplicação parenteral de PGF não alterou as concentrações intrafoliculares de PGF. A administração de uma dose de FM na fase final do processo ovulatório não afetou a ovulação e a síntese de progesterona pelo corpo lúteo subsequente. Por outro lado, é necessário testar outros AINEs para estabelecer um modelo de inibição da ovulação por via sistêmica para o estudo da função das prostaglandinas neste processo na espécie bovina.

The reproductive efficiency has repercussion on productivity and profitability of cattle industry and can be influenced by several factors, as uterine disorders and the efficiency of estrous cycle manipulation and ovulation. In the first study, we reviewed and discussed the aspects regarding the estrogen exposure to prevent or treat reproductive disorders, focusing on the uterine environment. Based on this review, we concluded that the estrogen has an important role in the uterine environment; nevertheless, it did not exhibit beneficial effects to treat or prevent uterine disorders when used in isolated doses. However, when repeat breeding cows were submitted to estrogen of long exposure in protocols of artificial induction of lactation, we observed beneficial effects on reproductive performance in these animals, being important to investigate, in a controlled manner, the effect of estrogen on fertility. Subsequently, given that the manipulation of estrous cycle and ovulation induction are essential to the Fixed-Time Artificial Insemination protocols (FTAI), it was demonstrated that the prostaglandin F2 (PGF) is important in the ovulation process, though the precise mechanism of action has not been elucidated, making the validation of an in vivo model for studying the function of prostaglandins in ovulation considerable. In this respect, in the second study we aimed to: assess the effect of the nonsteroidal anti-inflammatory drug (NSAID) Flunixin Meglumine (FM; 2,2 mg/Kg), a cyclooxygenase inhibitor, on the concentrations of PGF and its metabolite (13,14-di-hydro-15-ceto-PGF, PGFM) in the follicular fluid; to confirm whether the parenteral administration of PGF analogous (dinoprost tromethamine; 25 mg) would be able to alter the intra-follicular concentrations of PGF and PGFM; and to assess the effect of the NSAID FM on ovulation and subsequent luteal function. For that, cyclical Jersey cows (n = 18) were submitted to an estrus synchronization protocol, and, after the application of GnRH, were allocated in three groups, according to the follicular diameter (>11 mm): CONTROL (n = 6), untreated; NSAID FM (n = 6), who received an FM application 17 h after GnRH; and NSAID FM + PGF (n = 6), in which FM was administered 17 h after GnRH and PGF 23 h after GnRH. The FF was collected 24 h after GnRH, with a higher concentration of PGFM in the NSAID FM + PGF group and a higher concentration of PGF in the CONTROL group (P <0.01). To assess ovulation and luteal function, cyclical Jersey cows (n = 19) were synchronized and, after the application of GnRH, distributed into two groups, according to the follicular diameter (>11 mm): CONTROL (n = 10), untreated; and NSAID FM (n = 9), submitted to a dose of FM 17 h after GnRH. Follicles were followed up to 42 h after GnRH and blood collection for progesterone measurement was performed five days after GnRH, all control animals and six animals of the NSAID FM ovulated up to 42 h after GnRH and serum progesterone concentrations did not differ between groups (P> 0.05). Based on our findings, it is possible to concluded that the FM inhibited PGF synthesis within the follicle and the parenteral administration of PGF did not alter the intra-follicular concentrations of PGF. The administration of a single dose of FM in the final phase of the ovulatory process did not affect the ovulation and the subsequent synthesis of progesterone by the corpus luteum. On the other hand, it is necessary to test other NSAIDs to stablish a systemic model of ovulation inhibition in order to investigate the function of prostaglandins in this process

Diversidade genética e identificação de polimorfismos de DNA associados com produção in vitro de embriões em vacas doadoras de oócitos

Métodos de seleção artificial para características de interesse na pecuária podem acarretar fixação de alelos e consequentemente, perda da diversidade genética em populações sob seleção artificial. Na pecuária bovina mundial, o Brasil é atualmente o país com maior produção embrionária. Com a progressão do segmento comercial da produção in vitro de embriões, também se tornaram evidentes algumas lacunas acadêmicas relacionadas a variabilidade nos resultados dos diferentes trabalhos no que se refere aos índices de produção oocitária e taxas de prenhez. O objetivo do presente estudo foi avaliar a diversidade genética em populações de vacas doadoras de oócitos atuantes em programas comerciais de produção de embriões, assim como analisar via sequenciamento, variantes de DNA em diferentes regiões do gene da aromatase bovina (CYP19A1) e sua associação com características de produção in vitro de embriões. Utilizando abordagens da genética e ecologia de populações baseadas em marcadores microssatélites, foi avaliada a diversidade genética entre e dentro de populações de vacas participantes em programas comercias de produção de embriões. A endogamia dentro de populações variou de zero até 8%. Análise molecular da variância mostrou variação de 1% entre populações, 8% entre indivíduos e 91% dentro de indivíduos. O método de redução da dimensionalidade utilizado indicou falta de estrutura nas populações analisadas, identificando dois grupos principais nas três populações. Foram avaliadas via sequenciamento de Sanger regiões codificadoras e não codificadoras de proteína no gene CYP19A1 bovino. Duas mutações tipo SNP de efeito significativo associadas com produção e viabilidade oocitária, desenvolvimento embrionário e taxa de prenhez aos 30 dias foram encontradas (T>C na região flanqueadora do exon alternativo 1 ([GenBank: AJ250379.1]: rs718446508 T>C), e T>C na região 5´ do promotor 1.1) ([GenBank: AC_000167.1]: rs41651668 T>C). O papel dos sítios de ligação de fatores de transcrição criados devido à variação da sequência de DNA e seu possível efeito na expressão gênica também foram avaliados via abordagem In silico. Baixa diversidade genética entre populações foi evidenciada. Níveis de endogamia variáveis dentro das populações foram observados. Abordagens da genética populacional assim como de diversidade ecológica podem ser implementadas na tentativa de estimar, de maneira mais abrangente, a diversidade genética em populações animais de interesse na pecuária. O gene CYP19A1 pode contribuir para a variação genética de características de produção in vitro embriões em bovinos, as mutações identificadas podem ser utilizadas na melhora dos índices de produção embrionária em escala comercial, no entanto sua utilização esta sujeita à comprovação do efeito via estudos de expressão génica e ou em populações de validação nos seguintes passos da seleção assistida por marcadores.

Methods of artificial selection for characteristics of interest in livestock can lead to allele fixation and, consequently, loss of genetic diversity in populations under artificial selection. In world cattle ranching, Brazil is currently the country with the highest embryo production. As the commercial segment of the in vitro production of embryos, have also been evident some academic gaps related to variability in the results of the different studies on oocyte production of pregnancy. The objective of the present study was to evaluate the genetic populations of oocyte-donor cows that are active in commercial production of embryos, as well as to analyze via sequencing, DNA variants in different regions of the bovine aromatase (CYP19A1) gene and its association with characteristics of in vitro production of embryos. Using genetics and ecology of populations based on microsatellite markers, was evaluated the genetic diversity between and within populations of cows participating in commercial programs for the production of embryos. Inbreeding within population ranged from zero to 8%. Molecular analysis of variance showed variation of 1% among populations, 8% between individuals and 91% within individuals. The method of the dimensionality used indicated a lack of structure in the populations analyzed, identifying two main groups in the three populations. Were evaluated by sequencing of Sanger coding and non-coding regions of protein in the bovine CYP19A1 gene. Two effect SNP type mutations associated with oocyte production and viability, development embryonic and pregnancy rate at 30 days were found (T> C in the region flanking the alternative exon 1 ([GenBank: AJ250379.1]: rs718446508 T> C), and T> C in the 5'-region of the promoter 1.1) ([GenBank: AC_000167.1]: rs41651668 T> C). O role of transcription factor binding sites created due to the variation of the DNA sequence and its possible effect on the gene expression were also evaluated using the In silico approach. Low genetic diversity among populations was evidenced. Variable levels of inbreeding within the populations were observed. Approaches to population genetics as well as diversity can be implemented in an attempt to estimate, in a more genetic diversity in animal populations of livestock. The CYP19A1 gene may contribute to the genetic variation of characteristics of in vitro embryos production in bovines, the mutations identified can be used to improve the rates of embryo production at scale commercial use, however its use is subject to proof of effect via gene expression studies and / or in validation populations in the following steps of marker-assisted selection.

Efeito do letrozol no hipotálamo e gônadas de preás durante o desenvolvimento sexual

O letrozol é usado como terapêutico em desordens reprodutivas provocadas pelos altos níveis de estrógenos. A enzima citocromo P450 aromatase biossintetiza estrógenos a partir dos andrógenos em tecidos com capacidade esteroidogênica, como o cérebro, testículo e ovário. O objetivo do nosso estudo foi avaliar se o letrozol afeta o desenvolvimento das principais vias de controle reprodutivo de preás machos e fêmeas. Para tanto, consideramos o ganho de peso corporal, do testículo, do ovário e do cérebro, a progressão morfológica da espermatogênese e da foliculogênese, bem como a atividade enzimática da citocromo P450 aromatase nesses tecidos, comparado-os entre os grupos experimentais de machos e fêmeas. Os preás receberam 0,01 g/kg-1 de letrozol diluído, via oral, semanalmente, até as idades de 30, 45, 90 e 120 dias. O letrozol aumentou o ganho de peso corporal, das gônadas e do cérebro. Também, prejudicou a formação do epitélio germinativo testicular e estratificou o epitélio de revestimento do ovário. Ainda, o inibidor pode alterar os campos neurais relacionados às zonas de aromatização. E alterou os sítios de atuação da aromatase nas gônadas. Concluímos que o uso prolongado do letrozol pode ocasionar efeito anabólico, infertilidade de machos, induzir a displasia ovariana em fêmeas e alterar os sítios de atuação da aromatase.

Letrozole is used as a therapeutic in reproductive disorders caused by high estrogen levels. The enzyme cytochrome P450 aromatase biosynthesizes estrogens from androgens on tissues with steroidogenic capacity such as brain, testis and ovary. The objective of our study was to evaluate whether letrozole affects the development of the main reproductive control pathway of male and female spixs yellow-toothed cavy. For this, we considered body weight, testis, ovary and brain gain, spermatogenesis and folliculogenesis, as well as the enzymatic activity of cytochrome P450 aromatase in these tissues compared to experimental groups of males and females. The cavies received dilute letrozole orally (0,01 g/kg-1), once a week, until 30, 45, 90 and 120 days. Letrozole increased body weight, gonad and brain gain. Also, it impaired the formation of the testicular germinal epithelium and epithelium of ovary. Furthermore, the inhibitor may alter the neural fields related to the aromatization zones and changed the sites of aromatase in the gonads. We concluded that prolonged use of letrozole may result in an anabolic effect, male infertility, induce ovarian dysplasia in females, and alter the sites of aromatase activity.

Determinação dos perfis de estrógenos e progestinas fecais durante o ciclo estral e gestação de paca (Cuniculus paca)

Considerando-se a importância da paca, roedor histricomorfo componente da fauna silvestre brasileira, diante de seu potencial zootécnico e ainda da possibilidade de tornar-se uma nova opção de animal experimental e sopesando-se também o valor da aplicação de técnicas não invasivas na para elucidar fatores reprodutivos, visa-se com esta pesquisa, neste roedor, caracterizar as flutuações hormonais de progestinas e estrógenos fecais durante o ciclo estral e período gestacional, validar um método não invasivo para diagnóstico da gestação, bem como avaliar o uso de miçangas como forma de marcar e individualizar as amostras fecais. Nove fêmeas adultas, não nulíparas, diagnosticadas não prenhes mediante exame ultrassonográfico, tiveram suas fezes marcadas, por meio da ingestão de miçangas, e colhidas diariamente durante 43 dias consecutivos; após este período, machos foram adicionados aos grupos das fêmeas que tiveram as fezes colhidas, apenas uma vez por semana, até o parto. Os valores de progestágenos fecais observados durante o ciclo foram de 0,37 a 7,9 ng/g de fezes secas e de estrógenos fecais de 5,08 a 37,72 ng/g de fezes secas e não foi possível observar flutuações de progestágenos que caracterizassem fase lútea e que fosse compatível com picos de estradiol entre elevações de progestágenos. Durante a gestação os valores de progestágenos oscilaram de 1,33 a 6,42 ng/g de fezes secas; os valores de estrógenos fecais variaram de 8,97 a 1964 ng/g de fezes secas com acentuado aumento no segundo terço de gestação. Um diagnóstico de gestação pode ser confirmado com observação de níveis de estrógenos fecais acima de 41,06 ng/g de fezes por duas semanas consecutivas. O marcador plástico é item seguro e sem contraindicações na marcação e individualização das fezes de paca

Considering the importance of Cuniculus paca, a hystricomorph rodent component of Brazilian wildlife, its livestock potential besides the possibility that it might become a new option for animal experimentation and also the value of non invasive techniques to elucidation of reproductive parameters, the aim of this study was to characterize, for this rodent, hormonal fluctuations of fecal progestins and estrogens during estrous cycle and pregnancy, validate a non-invasive method for pregnancy diagnosis and evaluate the use of plastic beads as a fecal marker. Nine adult females, non nulliparous, non-pregnancy diagnosed by ultrasound, had their feaces marked, through the ingestion of beads, and collected daily for 43 days, after this period, males were added to female groups and the feaces were collected only once a week until parturition. The values of fecal progestagens observed throughout the cycle were 0.37 to 7.9 ng/g of dry feces and fecal estrogens were 5.08 to 37.72 ng/g dry feces; no progestins fluctuation that characterize luteal phase compatible with estradiol peak was observed. During pregnancy, progesterone values ranged from 1.33 to 6.42 ng/g dry feces, fecal estrogen values vary from 8.97 to 1964 ng/g dry feces with a sharp rise in the second third of gestation. A pregnancy diagnosis can be confirmed by observation of fecal estrogen levels up to 41.06 ng/g of feces for two consecutive weeks. The plastic marker was found to be safe and effective at yielding readily identifiable stools in pacas

Hiperestrogenismo em cadela: dermatose secundária a hormôniosexual relato de caso / Hyperestrogenism in a female dog: dermatosis secondary to sex hormone - case report

O hiperestrogenismo em fêmeas caninas é uma condição raramente descrita que se apresenta como umaalopecia simétrica bilateral com início na região perineogenital e membros pélvicos, podendo se estenderaté o flanco, acompanhada de hipertrofia de vulva e ginecomastia. Seu diagnóstico é realizado atravésdos achados clínicos, exames laboratoriais, histopatologia para confirmação do quadro endócrino e resposta ao tratamento. Este artigo apresenta um caso de hiperestrogenismo em um cão fêmea inteira daraça Pinscher com 7 anos de idade.(AU)

The hyperestrogenism in a female dog is a condition that has rarely been described as a bilaterally symmetricalalopecia beginning in the perineogenital region and hindlimbs, and may extend to the flank, accompanied by hypertrophy of the vulva and gynecomastia. The diagnosis is made by clinical findings,laboratory tests, histopathology for confirmation of endocrine disease and response to treatment. Thisarticle presents a case of hyperestrogenic in a female dog of breed Pinscher, 7 years old, not spayed. (AU)

Hiperestrogenismo em cadela: dermatose secundária a hormôniosexual – relato de caso / Hyperestrogenism in a female dog: dermatosis secondary to sex hormone - case report

O hiperestrogenismo em fêmeas caninas é uma condição raramente descrita que se apresenta como umaalopecia simétrica bilateral com início na região perineogenital e membros pélvicos, podendo se estenderaté o flanco, acompanhada de hipertrofia de vulva e ginecomastia. Seu diagnóstico é realizado atravésdos achados clínicos, exames laboratoriais, histopatologia para confirmação do quadro endócrino e resposta ao tratamento. Este artigo apresenta um caso de hiperestrogenismo em um cão fêmea inteira daraça Pinscher com 7 anos de idade.

The hyperestrogenism in a female dog is a condition that has rarely been described as a bilaterally symmetricalalopecia beginning in the perineogenital region and hindlimbs, and may extend to the flank, accompanied by hypertrophy of the vulva and gynecomastia. The diagnosis is made by clinical findings,laboratory tests, histopathology for confirmation of endocrine disease and response to treatment. Thisarticle presents a case of hyperestrogenic in a female dog of breed Pinscher, 7 years old, not spayed.

Avaliação hormonal indireta e estudo da preservação folicular em tecido ovariano autólogo transplantado para região inguinal em ratos

PURPOSE: To analyse the effectivity technique of the subcutaneous autologous bisseccionated ovarian transplantation technique in inguinal region of the albine rats, close to the femoral vases, through the indirect study of hormonal production, made by the evaluation of the citology of the vaginal smears and the direct study of the tissue viability, carried out by histologic analysis. METHODS: 30 rats were analysed which suffered bilateral ooforectomy, being 15 of them intended for control and 15 of them suffered the ovarian transplantation. After 28 days, the grafting were recovered and evaluated. The analysis of the cytology of the vaginal smears were made in the moment 0, that is to say, pre-transplantation, and in the moment 1, post-transplantation, for all the animals and the histologic evaluation was accomplished at the moment 0 for the two groups and at the moment 1 for the animals that suffered transplantation. RESULTS: The results of the experiment demonstrated the viability and functionality of the grafts in 100% of the laminas evaluated, that were observed through the vaginal smears in estrous phase to all the rats of the experience group and by the presence of follicles in various stages of maturation, observed in the recovered grafts, indicating, directly, the viability of the ovarian tissue. CONCLUSION: Allowing to conclude that the ovarian transplantation is a viable alternative, in the conditions of the experiment, to the hormonal and follicular preservation in rats.

OBJETIVO: O transplante autólogo de tecido ovariano tem sido objeto de estudo de diversos pesquisadores pela perspectiva de manter a funcionalidade deste órgão, mesmo não localizado em seu sítio habitual, sendo daí removido, a fim de minimizar os efeitos causados, por exemplo, pela radioterapia. Este trabalho visa a analisar a efetividade da técnica de autotransplante subcutâneo de tecido ovariano bisseccionado em região inguinal de ratas albinas, próximo aos vasos femorais, através do estudo indireto da produção hormonal, feita pela avaliação da citologia de esfregaços vaginais e do estudo direto da viabilidade tecidual, realizado por meio da análise histológica. MÉTODOS: Analisaram-se 30 ratas, que sofreram ooforectomia bilateral, sendo 15 delas destinadas ao controle e 15 submetidas ao transplante ovariano. Decorridos 28 dias, recuperaram-se e avaliaram-se os enxertos. As análises da citologia dos esfregaços vaginais efetuaram-se no momento 0, ou seja, pré-transplante, e no momento 1, pós-transplante, para os animais de ambos os grupos e a avaliação histológica realizou-se no momento 0 para os dois grupos e no momento 1 para os animais transplantados. RESULTADOS: Os resultados do experimento demonstraram a viabilidade e funcionalidade dos enxertos em 100% das lâminas analisadas, isso verificado através da obtenção de esfregaços em fase de estro para todas as ratas do grupo experimento e da presença de folículos em vários estágios de desenvolvimento, observados nos enxertos recuperados, indicando diretamente a viabilidade do tecido ovariano. CONCLUSÃO: o transplante de tecido ovariano é uma alternativa viável, nas condições do experimento, para a preservação hormonal e folicular, em ratas.

Estudo endócrino não invasivo e comportamental da gestação, parto e lactação da jaguatirica (Leopardus pardalis) em cativeiro / Noninvasive endocrine and behavioral study of the pregnancy, birth and lactation of ocelots (Leopardus pardalis) in captivity

Os perfis longitudinais dos metabólitos dos esteróides sexuais, progesterona e estrógenos, e dos glicocorticóides foram analisados para 22 eventos (gestação, parto e lactação) de 8 jaguatiricas mantidas em cativeiro. Três eventos foram oriundos da Transferência de Embrião (TE) e foram comparados àquelas que gestaram por fertilização natural. As análises estatísticas demonstraram haver diferenças altamente significativas para metabólitos de progesterona na fase inicial (P<0001) e média (P< 0,007) da gestação, bem como, no período da lactação (P<0,0015). As análises descritivas sugeriram uma atividade ovariana para a espécie no período de lactação, uma vez detectado picos de metabólitos de estrógenos para alguns eventos. Foi realizado ainda, um estudo do comportamento materno de 3 fêmeas através do sistema de vídeo-monitoramento dos primeiros meses da lactação (n=3989,5 horas observadas). A espécie em cativeiro despendeu mais tempo cuidando do seu filhote e descansando durante o dia, entrando na caixa de abrigo entre 5:00h e 8:00h (61,3%) e nela permanecendo por um tempo médio de 8 horas seguidas. Outras análises comportamentais sugerem que o estresse é um fator preponderante na determinação do sucesso da criação do filhote. A variável comportamental executada pela fêmea de entrar e sair da caixa por repetidas vezes foi associada ao estresse, sendo possível avaliar a resposta da adrenal pela secreção dos glicocorticóides e realizar sua validação fisiologicamente. Espera-se desta forma, contribuir para uma mudança no quadro bastante crítico da população em cativeiro, considerando a baixa taxa de natalidade e a alta taxa de mortalidade dos filhotes, principalmente, no seu primeiro mês de vida

The longitudinal profiles of the sexual steroid\'s metabolites, progesterone and estrogen, and glucocorticoids were analyzed for 22 events (pregnancy, birth and breastfeeding) of 8 ocelots kept in captivity. Three events came from the Embryo Transfer (TE) and were compared against the ones that were gestated by natural fertilization. The statistical analysis demonstrated that the differences were highly significative during the initial (P<0001) and middle stages (P< 0,007) of pregnancy and lactation (P<0,0015) periods for the progesterone metabolites. The descriptive analysis suggests a ovarian activity for the species during the lactation period, once detected the estrogen metabolites peaks during some events. A study was also performed, concerning the maternal behavior of 3 female through video-monitoring of the first months of lactation (n=3989,5 hours observed). The species that were kept in captivity spent more time resting and caring the puppy, entering it\'s shelter between 5:00h and 8:00h (61,3%) and there staying during 8 hours average. Other behavior analysis suggests that the stress level is a predominant fact in the success of the establishment of the puppy. A behavior variable performed by the female, by entering the shelter for a repeated number of times was linked to the stress level, being possible to assess the adrenal response by the secretion of glucorticoids and perform it\'s phisiological validation. It is expected by this means, a contribution for a change in the critical scene of the population that is kept in captivity, considering the puppies\' low birth rate and high mortality rate, specially during it\'s first months

Detection of illegal estrogen administration through immunohistochemical markers in the bovine prostate

The immunodetection of diverse cell markers was evaluated in prostatic samples from bullocks, and bullocks showing epithelial hyperplasia-metaplasia, with oestrogen-induced changes, and in experimental samples from bullocks inoculated with dietylstilbestrol (DES). Antigen-retrieval procedures allowed the use of tissues that had been fixed in formalin for long periods. Three tissue markers were chosen for the study: cytokeratins 13 and 16, vimentin and desmin. Monoclonal antibody K8.12 (specific for cytokeratins 13 and 16) stained basal cells and hyperplastic-metaplastic epithelium; monoclonal antivimentin, and desmin, allowed the definition of fibromuscular changes.

A imunodeteccão de marcadores celulares foi avaliada em amostras prostáticas de bovinos com hiperplasia ou hiperplasia-metaplasia epiteliais, induzidas por estrógenos administrados ilegalmente e em próstatas de bovinos inoculados com dietilstilbestrol (DES). A técnica de recuperacão antigênica permitiu o uso de tecidos fixados em formalina, por longos períodos. Foram utilizados os anticorpos monoclonais K8.12, anti-vimentina e anti-desmina para determinação de células basais coradas/epitélio hiperplásico-metaplásico, células do estroma e células musculares, respectivamente. As alterações tissulares observadas nos casos de campo e nos experimentais foram semelhantes, através do que se concluiu que houve administração ilegal de estrógenos. O teste imuno-histoquímico com esses marcadores específicos foi útil ao exame histológico da próstata, uma vez que a análise das imagens permite maior e melhor quantificação das alterações observadas. Os testes bioquímicos, entretanto, são necessários para uma avaliação mais precisa.

Detection of illegal estrogen administration through immunohistochemical markers in the bovine prostate

A imunodeteccão de marcadores celulares foi avaliada em amostras prostáticas de bovinos com hiperplasia ou hiperplasia-metaplasia epiteliais, induzidas por estrógenos administrados ilegalmente e em próstatas de bovinos inoculados com dietilstilbestrol (DES). A técnica de recuperacão antigênica permitiu o uso de tecidos fixados em formalina, por longos períodos. Foram utilizados os anticorpos monoclonais K8.12, anti-vimentina e anti-desmina para determinação de células basais coradas/epitélio hiperplásico-metaplásico, células do estroma e células musculares, respectivamente. As alterações tissulares observadas nos casos de campo e nos experimentais foram semelhantes, através do que se concluiu que houve administração ilegal de estrógenos. O teste imuno-histoquímico com esses marcadores específicos foi útil ao exame histológico da próstata, uma vez que a análise das imagens permite maior e melhor quantificação das alterações observadas. Os testes bioquímicos, entretanto, são necessários para uma avaliação mais precisa (AU)

Estudos complementares sobre a toxidez de Lantana camara (Verbenaceae) em bovinos / Complementary studies on the toxicity of Lantana camara (Verbenaceae) in cattle

Descreve-se, no município de Quatis, RJ, a ocorrência de um surto de intoxicação por Lantana camara var. aculeata em bovinos, caracterizado por acentuada icterícia, lesões de fotossensibilização, constipação e edema subcutâneo dos membros. A reprodução experimental da doença, com êxito letal, através da administração de dose única de 40 g/kg de L. camara var. aculeata, confirmou a planta como causa do surto; doses únicas de 20 g/kg, 10 g/kg e 5 g/kg causaram respectivamente, grave intoxicação, leve intoxicação e ausência de sintomas. Experimentos com doses repetidas permitem concluir que essa planta apresenta efeito acumulativo, quando ingerida em doses diárias de 10 g/kg (1/4 da dose letal); a administração de quatro doses de 5 g/kg (1/8 da dose letal) ou de oito doses de 2,5 g/kg (1/16 da dose letal) reproduziram o quadro grave de intoxicação. Subdoses menores, de 1,25 g/kg (1/32 da dose letal), administradas durante 34 dias, não produziram quaisquer sinais clínicos. Os exames histológicos dos casos naturais e experimentais revelaram, além de bilestase, alterações regressivas nos hepatócitos e no epitélio dos túbulos renais (AU)

Detection of illegal estrogen administration through immunohistochemical markers in the bovine prostate

The immunodetection of diverse cell markers was evaluated in prostatic samples from bullocks, and bullocks showing epithelial hyperplasia-metaplasia, with oestrogen-induced changes, and in experimental samples from bullocks inoculated with dietylstilbestrol (DES). Antigen-retrieval procedures allowed the use of tissues that had been fixed in formalin for long periods. Three tissue markers were chosen for the study: cytokeratins 13 and 16, vimentin and desmin. Monoclonal antibody K8.12 (specific for cytokeratins 13 and 16) stained basal cells and hyperplastic-metaplastic epithelium; monoclonal antivimentin, and desmin, allowed the definition of fibromuscular changes.

A imunodeteccão de marcadores celulares foi avaliada em amostras prostáticas de bovinos com hiperplasia ou hiperplasia-metaplasia epiteliais, induzidas por estrógenos administrados ilegalmente e em próstatas de bovinos inoculados com dietilstilbestrol (DES). A técnica de recuperacão antigênica permitiu o uso de tecidos fixados em formalina, por longos períodos. Foram utilizados os anticorpos monoclonais K8.12, anti-vimentina e anti-desmina para determinação de células basais coradas/epitélio hiperplásico-metaplásico, células do estroma e células musculares, respectivamente. As alterações tissulares observadas nos casos de campo e nos experimentais foram semelhantes, através do que se concluiu que houve administração ilegal de estrógenos. O teste imuno-histoquímico com esses marcadores específicos foi útil ao exame histológico da próstata, uma vez que a análise das imagens permite maior e melhor quantificação das alterações observadas. Os testes bioquímicos, entretanto, são necessários para uma avaliação mais precisa.

A remoção do folículo dominante como estratégia anti-luteolítica em bovinos / The removal of the dominant follicle as antiluteolytic strategy in cattle

O estradiol secretado pelo folículo dominante (DOM) desempenha importante papel na luteólise da vaca. Em adição, o reconhecimento materno da prenhez (MRP) requer um ambiente uterino otimizado, o qual por sua vez depende da função luteínica e de adequadas concentrações de progesterona circulante. Os objetivos do presente estudo foi testar diferentes estratégias para otimizar a função luteínica e prevenir a influência de um DOM durante o período crítico (CP) para o MRP (de D13 a D20 após o estro o estro). Diferentes abordagens foram testadas. No exp.1, 23 vacas Nelore foram tratadas com o protocolo ovsynch para induzir um cio sincronizado (D0). As vacas receberam: Gc (n=7) - nada mais; ThCG (n=5) - 3000 IU de hCG no D5; TE2 (n=6) - 5mg de 17b-estradiol (E2) no D12; ThCG/E2 (n=5) - hCG/D5 + E2/D12. Ultra-sonografias e dosagens de progesterona plasmática durante o ciclo estral permitiram determinar que o E2 reprogramou o ciclo ovariano ao prevenir a presença (P⁢0,05) de um DOM durante quase todo CP (0,6±0,7 dias entre D15 e D20), porém o E2 induziu a luteólise. As vacas que receberam a hCG desenvolveram corpo lúteo acessório e tiveram [P4] mais alta até o D13 (P⁢0,05). Portanto, a fase luteínica não foi prolongada No exp.2, os mesmos tratamentos foram impostos a 220 vacas Nelore (55 por grupo) após uma inseminação artificial em tempo fixo (TAI). As taxas de prenhez (PR) à TAI ou às inseminais de repasse durante uma estação com 64 dias de duração foram diminuídas (P⁢0,05) quando o E2 foi usado e a hCG não foi capaz de aumentar aquelas PR. No exp.3, vacas Red Angus no pós-parto tiveram seu estro sincronizado (D0) e receberam: nada mais (GCT, n=5) ou 200mg de gonadorrelina no D5 mais 3000 IU hCG no D13 (GRF, n=5); ou ablação de todos folículos ³7mm através de aspiração folicular em D14, D17 e D20 (GRM, n=5). GRF teve luteólise retardada (18,2±1,0b dias, 23,6±1,0a dias e 18,7±1,2b dias para GCT, GRF e GRM, respectivamente) e maior [P4] que os outros grupos. Folículos maiores que 7mm foram observados quando das aspirações. Foi possível concluir que: a) E2 permitiu consistentemente reprogramar o desenvolvimento folicular, porém causou luteólise e o seu uso trouxe efeitos negativos sobre as PR; b) a hCG melhorou a função luteínica mas não aumentou as PR; c) a ablação dos folículos ³7mm não preveniu a presença do DOM no CP para o MRP e d) a associação GnRH/hCG otimizou a função luteínica, retardou a luteólise e prolongou a fase luteínica de modo que todo o CP esteve sob influência da progesterona

Estradiol secreted from the dominant follicle (DOM) plays a key role in triggering luteolysis in the cow. In addition, maternal recognition of pregnancy (MRP) requires an optimum uterine environment, which directly depends on luteal function and adequate levels of circulating progesterone. The aim of this study was to test different strategies to optimize luteal function and prevent the influence of a DOM throughout the critical period (CP) for MRP (from D13 to D20 after estrus). Different approaches were tested. In exp.1, 23 Nelore cows were treated with the ovsync protocol to induce a synchronized estrus (D0). Cows received: Gc (n=7) - nothing else; ThCG (n=5) - 3000 IU of hCG five days (D5) after estrus; TE2 (n=6) - 5mg of 17b-estradiol (E2) on D12; ThCG/E2 (n=5) - hCG/D5 + E2/D12. Ultrasound evaluation and plasmatic progesterone concentration ([P4]) throughout estrous cycle allowed to conclude: E2 reprogrammed ovarian cycle by preventing the presence (P⁢.05) of a DOM during almost all CP (0.6±.7 days within the D15 to D20 interval) but induced luteolysis; cows receiving hCG developed accessory corpus luteum and had higher [P4] up to D13 (P⁢.05). Therefore, luteolysis was not delayed and luteal phase was not prolonged. In exp.2, same treatments were imposed to 220 Nelore cows (55 per group) after a timed artificial insemination (TAI). Pregnancy rates (PR) at TAI or at AIs thereafter over a 64-day period were reduced (P⁢0.05) by using E2 and hCG was not capable to improve those PR. In exp.3, postpartum Red Angus cows were estrus synchronized (D0) and received: nothing else (GCT, n=5) or 200mg of gonadorrelin on D5 plus 3000 IU hCG on D13 (GRF, n=5); or ablation of all follicles ³7mm through follicular aspiration on D14, D17 and D20 (GRM, n=5). GRF had delayed luteolysis (18.2±1.0b days, 23.6±1.0a days, 18.7±1.2b days for GCT, GRF, GRM, respectively) and higher [P4] than other groups. Follicles larger than 7mm were observed in all occasions of aspiration. In could be concluded that: a) E2 allowed to consistently reschedule follicular development but caused luteolysis and its use was detrimental to PR; b) hCG improved luteal function but did not increase PR; c) ablation of 7mm follicles did not prevent a DOM throughout CP for MRP and d) GnRH/hCG association optimized luteal function, delayed luteolysis and prolonged luteal phase in such a way that all CP was under progesterone influence

Avaliação densitométrica e hormonal de gatas ovariectomizadas e não ovariectomizadas

No presente experimento foram utilizados dezoito gatas (Felis domesticus), fêmeas, sem raça definida sendo nove adultas, entre dois anos e meio a três anos e meio, e nove gatas com quatro meses de idade. Esses animais oriundos de São José do Rio Preto - SP, onde dez gatas (5 adultas e 5 prépúberes) foram ovariectomizadas e as demais permaneceram intactas (normais). O objetivo do trabalho foi investigar as variações densitométricas e hormonais das gatas. Para tanto, no dia da cirurgia, no nono e no décimo segundo meses após, foram realizados exames radiográficos para as medidas densitométricas e coletas de sangue para dosagens hormonais, os quais foram realizados no dia da cirurgia e aos três, seis, nove e doze meses após a cirurgia. Estes resultados foram avaliados estatisticamente utilizando-se Análise de Variância e as médias analisadas pelo teste de Tukey. Observou-se que houve uma grande variabilidade nos níveis de estrógeno sem uma aparente correlação com os valores da densidade mineral óssea, podendo ser atribuída ao comportamento sui generis da gata, havendo, portanto, a necessidade de um tempo maior para avaliar esses parâmetros e correlacionar a osteoporose com a depleção de estrógeno nessa espécie

In this study eighteen female cats (Felis domesticus) defined breed were used, being nine adults with age between two and a half and three and a half years old, and nine were younger with four months old. Ali the animais were originally from the city of São José do Rio Preto, São Paulo State, Brazil. Ten female cats (5 adults and 5 pre-pubescent) were ovariectomized and the other ones were kept intact (controls). The research objective was to investigate the feline female densitometric and hormonal variations. For this, on the day of the surgery, on the ninth and twelfth months after the surgery, blood samples were coleated in order to enable hormone analysis and radiographic tests for densitometric measurements which were made on the day of the surgery as well at with three, six , nine and twelve months after. The surgeries results were evaluated statistically using Variance Analysis and the middle averags analysed by the Test of Tukey. It was observed that there were a large variability on the estrogen levels without an apparent correlation with the values of the bone mineral density and this variability could be related to the sui generis behavior of the female cato Thus, more time would be necessary to evaluate these parameters and correlate the osteoporosis with the estrogen' s depletion in this species