Aflatoxins and fumonisins in feed from a broiler operation system from São Paulo state, Brazil / Aflatoxinas e fumonisinas em rações de um sistema de produção de frangos de corte no estado de São Paulo, Brasil

The aim of the present study was to assess the occurrence of aflatoxins (AFs) and fumonisins (FBs) in feed ingredients (corn and soybean meal) and finishing feed in a broiler operation system, as well was to evaluate their effect on the productivity of 20 batches of broilers produced and the histology status of broilers liver after slaughter. Corn samples presented the highest frequencies of AFs and FBs, at mean levels of 29.1 and 2,100µg/kg, respectively. Soybean samples presented mean levels of 1.5 and 70µg/kg for AFs and FBs, respectively. Batches of broilers receiving feed containing FB levels higher than 1,000µg/kg had lower weight gain and higher mortality rates, while those fed rations with AFs equal or above the limit of quantification (LOQ) of the analytical method presented higher scores of histological changes in the liver. A dilution effect was observed for AFs and FBs from ingredients, especially corn, to feed during manufacture, whilst not enough to prevent losses in productivity. Results of this trial highlighted the need for strict control of mycotoxins in corn intended for broilers.(AU)

O objetivo do presente trabalho foi verificar a ocorrência de aflatoxinas (AFs) e fumonisinas (FBs) em ingredientes (milho e farelo de soja) e na ração de abate sobre a produtividade de uma empresa integradora de frangos de corte, bem como avaliar seus efeitos sobre produtividade de 20 lotes de frangos produzidos pela empresa e a histologia dos fígados dos frangos após o abate. As amostras de milho apresentaram as maiores frequências de AFs e FBs, em concentrações médias de 29,1 e 2.100µg/kg, respectivamente. As amostras de farelo de soja apresentaram níveis médios de 1,5 e 70µg/kg para AFs e FBs, respectivamente. Os lotes de aves que receberam ração contendo níveis de FBs maiores que 1,000µg/kg apresentaram menor ganho de peso e maior percentual de mortalidade, enquanto que as que receberam ração com AFs iguais ou superiores ao limite de quantificação (LQ) do método analítico apresentaram maior grau de alteração histopatológica no fígado. Houve efeito de diluição de AFs e FBs dos ingredientes, especialmente o milho, à ração no processo de fabricação, porém não suficiente para evitar perdas na produtividade. Os resultados do estudo reforçam a necessidade do controle estrito de micotoxinas no milho destinado à alimentação de frangos de corte.(AU)

Mycobiota and occurrence of Fumonisin B1 in wheat harvested in Southern Brazil / Micobiota e ocorrência de Fumonisina B1 em trigo colhido no Sul do Brasil

Although fumonisin B1 (FB1) is a mycotoxin poorly studied in wheat, the Fusarium genus fungi have been frequently detected in this cereal, especially in subtropical regions such as southern Brazil, thus studies on their occurrence are required. This study evaluated the mycobiota, water activity and the presence of FB1 in 11 wheat cultivars grown in the northeastern and northwestern of Rio Grande do Sul. The mycobiota was identified by morphological and molecular techniques and FB1 was determined by liquid chromatography with fluorescence detection (HPLC-FL). Microbial counts lower than 103CFU were found in the samples, and the fungi genera Phoma, Cladosporium and Fusarium were the most frequent. Despite this, 54% of the samples were contaminated with FB1 at levels ranging from 958 to 4,906µg FB1 kg-1.(AU)

Embora Fumonisina B1 (FB1) seja uma micotoxina pouco estudada em trigo, os fungos do gênero Fusarium são frequentemente detectados neste cereal, principalmente em regiões subtropicais, como o Sul do Brasil, o que justifica a necessidade de avaliar sua ocorrência. Neste estudo, foram avaliadas a micobiota, atividade de água e a presença de FB1 em 11 cultivares de trigo cultivados nas regiões nordeste e noroeste do Rio Grande do Sul. A micobiota foi identificada por técnicas morfológicas e moleculares e a FB1 foi determinada por cromatografia líquida e detecção por fluorescência (HPLC-FL). Nas amostras analisadas, foi verificada uma contagem inferior a 103UFC, e os fungos dos gêneros Phoma, Cladosporium e Fusarium foram os mais frequentes. Apesar disso, 54% das amostras estavam contaminadas com FB1 em níveis variando de 958 a 4906µg de FB1 kg-1.(AU)

Ganho de peso, consumo de ração e histologia de órgãos de leitões alimentados com rações contendo baixos níveis de fumonisina B1 / Weight gain, feed consumption and histology of organs from piglets fed rations containing low levels of fumonisin B1

A fumonisina B1 (FB1) é um metabólito secundário produzido principalmente por Fusarium verticilioides em diversos tipos de alimentos, principalmente o milho, o qual constitui a base para composição de rações para várias espécies de animais domésticos. A FB1é particularmente tóxica para suínos, cujas manifestações clínicas são evidentes em animais expostos a altas concentrações de FB1 na ração (em geral, acima de 30mg/kg). No entanto, são escassos os estudos sobre os efeitos da FB1em suínos alimentados com rações contendo baixas concentrações de fumonisinas, as quais são mais prováveis de serem encontradas em condições de campo. O objetivo do estudo foi avaliar os efeitos da exposição de leitões a baixos níveis de FB1 na ração, durante 28 dias, sobre o ganho de peso, consumo de ração, peso relativo de órgãos e aspectos histológicos do baço, fígado, pulmões, rins e coração. Vinte e quatro leitões foram distribuídos em 4 grupos experimentais e alimentados com rações contendo 0mg (controle), 3,0mg, 6,0mg ou 9,0mg FB1/kg de ração. As diferentes dietas não afetaram (P>0,05) o ganho de peso e nem o peso relativo dos órgãos analisados. Não foram constatadas lesões macroscópicas ou histopatológicas no baço, fígado, rins e coração. No entanto, foram observadas lesões histopatológicas nos pulmões de todos os suínos alimentados com rações contaminadas com fumonisinas, indicando que nenhum dos níveis de FB1 usados no experimento poderia ser considerado como seguro para suínos. São necessários novos estudos sobre os mecanismos de ação tóxica da FB1 em suínos, sobretudo em condições de exposição prolongada a baixos níveis de contaminação na ração.(AU)

Fumonisin B1 (FB1) is a secondary metabolite produced mainly by Fusarium verticilioides in several types of foods, particularly corn, which is the basis for composition of feed for several domestic animals. FB1 is particularly toxic to pigs, being the clinical manifestations evident in animals exposed to high concentrations of FB1 in the diet (generally above 30mg/kg). However, there are few studies on the effects of FB1 on pigs fed rations containing low concentrations of fumonisin, which are most probably found under field conditions. The aim of the study was to evaluate the effects of a 28-day exposure of piglets to low levels of FB1 in the feed on the weight gain, feed consumption, organ weights and histological aspects of the spleen, liver, lungs, kidneys and heart. Twenty-four pigs were assigned into 4 experimental groups and fed diets containing 0mg (control), 3.0mg, 6.0mg or 9.0mg FB1/kg diet. The different diets did not affect (P>0.05) the weight gain or the weight of organs examined. There were no macroscopic or histological lesions in the spleen, liver, kidneys and heart. However, histological lesions were found in the lungs from all animals fed rations containing fumonisin, hence indicating that none of the FB1 levels used in the experiment could be considered as safe for piglets. Further studies on the mechanisms of toxic action of FB1 in pigs are needed, particularly under conditions of prolonged exposure to low contamination levels in the diet.(AU)

Efeitos da administração prolongada de baixos níveis de fumonisina B1 em suínos: avaliação de parâmetros de desempenho, histologia de órgãos, resposta imunológica e resíduos em materiais biológicos

A fumonisina B1 (FB1) é um metabólito secundário produzido principalmente por Fusarium verticilioides em diversos tipos de alimentos, principalmente o milho, o qual constitui a base para composição de rações para várias espécies de animais domésticos. A FB1 é particularmente tóxica para suínos, cujas manifestações clínicas são evidentes em animais expostos a altas concentrações de FB1 na ração (em geral, acima de 30 mg/kg). No entanto, são escassos os estudos sobre os efeitos da FB1 em suínos alimentados com rações contendo baixas concentrações de fumonisinas, as quais são mais prováveis de serem encontradas em condições de campo. O objetivo do estudo foi avaliar os efeitos da exposição de suínos a baixos níveis de FB1 na ração, durante 28 dias, sobre o ganho de peso, consumo de ração, peso relativo de órgãos e aspectos histológicos do baço, fígado, pulmões, rins, coração e esôfago, a resposta imune e a determinação do resíduo de FB1 em materiais biológicos como plasma, urina e fezes. Vinte e quatro suínos foram distribuídos em 4 grupos experimentais e alimentados com rações contendo 0 mg (controle), 3,0 mg, 6,0 mg ou 9,0 mg FB1/kg de ração. As diferentes dietas não afetaram (P>0,05) o ganho de peso e nem o peso relativo dos órgãos analisados. Não foram constatadas lesões macroscópicas ou histopatológicas no esôfago, rins, coração e fígado. No entanto, foram observadas lesões histopatológicas nos pulmões de todos os suínos alimentados com rações contaminadas com fumonisinas, indicando que nenhum dos níveis de FB1 usados no experimento poderia ser considerado como seguro para suínos. Ainda, a FB1 não alterou as concentrações de imunoglobulinas totais, por outro lado, diminuiu a resposta imunológica dos suínos vacinados com Stellamune®, como também reduziu a expressão de citocinas pro-inflamatórias. As concentrações plasmáticas de FB1 residual encontradas permaneceram constantes ao longo dos 28 dias de exposição, nos suínos que se alimentaram com 3,0 mg FB1/kg de ração. Por outro lado, os níveis de FB1 no plasma variaram de 400,3 ± 19,6 pg/mL a 260,6 ± 61,6 pg/mL nos animais expostos a 6,0 mg FB1/kg de ração, e de 1127 ± 494,5 pg/mL a 460,7 ± 69,5 pg/mL nos animais expostos a 9,0 mg FB1/kg de ração, entre os dias 7 e 28 dias de exposição, respectivamente. Em relação aos níveis residuais de FB1 eliminados na urina, embora com variações ao longo dos 28 dias de exposição, foram encontrados níveis que variaram de 28,53 ± 17,9 ng/mL a 16,1 ± 22 ng/ml na urina dos suínos expostos com 3,0 mg FB1/kg de ração, de 47,4 ± 26,4 ng/mL a 24,12 ± 26 ng/mL nos suínos expostos a 6,0 mg FB1/kg de ração e de 75,05 ± 55,2 ng/mL a 18,9 ± 4,4 ng/mL nos suínos expostos a 9,0 mg FB1/kg de ração. Os níveis de FB1 residual eliminados nas fezes permaneceram constantes nos animais expostos com 3,0 mg FB1/kg de ração entre 2,26 ± 1,6 mg/kg e 3,25 ± 2,26 mg/kg, variando de 5,18 ± 1,6 mg/kg a 10,6 ± 2,3 mg/kg, e de 8,16 ± 6,8 mg/kg a 13,8 ± 4,8 mg/kg, nos suínos expostos a 6,0 mg FB1/kg de ração e 9,0 mg FB1/kg de ração, respectivamente. Os resíduos de FB1 encontrados nas fezes decaíram a partir de 21 dias de exposição a FB1 em suínos expostos a 6,0 mg FB1/kg de ração, porém, estes níveis permaneceram constantes entre o dia 21 e 28 em suínos expostos 9,0 mg FB1/kg de ração, indicando uma baixa absorção da toxina em todos os tratamentos. As correlações entre a FB1 eliminada nas fezes (mg/kg) e os níveis de FB1 ingeridos por suínos (mg FB1/animal) foram significativas (P<0,05) em todos os dias. Foram observadas correlações significativas (P<0,05) entre a ingestão de FB1 nos diferentes tratamentos e as concentrações de FB1 na urina e no plasma aos 7 e 28 dias, respectivamente. Deste modo, a quantificação de FB1 na urina e plasma é adequada como biomarcador da ingestão de baixos níveis FB1 no início (7 dias) e no final (28 dias) do período de intoxicação, respectivamente. São necessários novos estudos sobre os mecanismos de ação tóxica da FB1 em suínos, sobretudo em condições de exposição prolongada a níveis baixos de contaminação na ração.

Fumonisin B1 (FB1) is a secondary metabolite produced mainly by Fusarium verticilioides in various types of foods, particularly corn, which is the basis for various feed composition for domestic animals. FB1 is particularly toxic to swine, which clinical manifestations are clearly observed in animals exposed to high concentrations of FB1 in the diet (generally above 30 mg/kg). However, there are few studies on the effects of FB1 in pigs fed diets containing low concentrations of fumonisin, which are more probable to be found in field conditions. The objective of the study was to evaluate the effects of piglets exposed to low levels of FB1 in the feed for 28 days on weight gain, feed intake, relative weight of organs and histological aspects of the spleen, liver, lungs, kidneys, heart and esophagus, immune response and the determination of FB1 residue in biological materials such as plasma, urine and feces. Twenty-four pigs were divided into 4 experimental groups and fed diets containing 0 mg (control), 3.0 mg, 6.0 mg or 9.0 mg FB1/kg diet. The different diets did not affect (P> 0.05) weight gain or the relative weight of the analyzed organs. Macroscopic and microscopic lesions were not observed in the esophagus, liver, kidneys and heart. However, histopathological lesions were observed in the lungs of all pigs fed diets contaminated with fumonisin, indicating that none of FB1 levels used in the experiment could be considered as safe for pigs. Furthermore, the dietary FB1 did not alter the concentrations of total immunoglobulins, although it decreased the immune response of pigs vaccinated with Stellamune® and also reduced the expression of pro-inflammatory cytokines. The FB1 concentrations in plasma of pigs fed 3.0 mg FB1/kg diet remained constant over the 28 days of exposure. Moreover, FB1 plasma levels ranged from 400.3 ± 19.6 pg/ mL to 260.6 ± 61.6 pg/mL in animals exposed to 6.0 mg FB1/kg of diet and 1,127 ± 494.5 pg/mL to 460.7 ± 69.5 pg/mL in animals exposed to 9.0 mg FB1/kg diet, between 7 and 28 days of exposure, respectively. In relation to residual FB1 eliminated in urine, although a variation over the 28 days of exposure was observed, the levels ranged from 17.9 ± 28.53 ng/mL to 16.1 ± 22 ng/mL in urine of pigs exposed with 3.0 mg FB1/kg, 47.4 ± 26.4 ng/mL to 24.12 ± 26 ng/mL in pigs exposed to 6.0 mg FB1/kg, and 75.05 ± 55.2 ng/mL to 18.9 ± 4.4 ng/mL in pigs exposed to 9.0 mg FB1/kg of feed. Residual FB1 levels eliminated in the feces remained constant in animals exposed to 3.0 mg FB1/kg diet, with values of 2.26 ± 1.6 mg/g to 3.25 ± 2.26 mg/kg; in pigs fed 6.0 or 9.0 mg FB1/kg feed, the levels found in feces were 5.18 ± 1.6 mg/kg to 10.6 ± 2.3 mg/kg and 8.16 ± 6.8 mg/kg to 13.8 ± 4.8 mg/kg, respectively. The FB1 residues found in feces decreased from 21 days in pigs exposed to 6.0 mg FB1/kg of feed; however, these levels remained constant between 21 and 28 in pigs exposed to 9.0 mg FB1/kg of feed, indicating a low absorption of toxin in all treatments. Significant (P<0,.05) correlations were found between the FB1 excreted in feces (mg/kg) and the FB1 ingested (mg FB1/animal). The correlations between the ingested FB1 in the different treatments and the residual FB1 levels in urine or plasma were also significant (P<0.05) on days 7 and 28 of intoxication, respectively. Thus the quantification of FB1 in urine or plasm is suitable as biomarker of ingestion of low levels of FB1 at the beginning (7 days) or at the end (28 days) of the intoxication period, respectively. Further studies are needed on the mechanisms of toxic action of FB1 in pigs especially under conditions of prolonged exposure to low levels of contamination in the feed.

Avaliação de biomarcadores da exposição humana à fumonisina B1 nos alimentos em municípios dos estados de São Paulo e Santa Catarina, Brasil

A fumonisina B1 (FB1) é uma micotoxina produzida pelo metabolismo secundário de espécies de Fusarium, principalmente F. verticillioides e F. proliferatum, os quais contaminam diversos alimentos antes e após o processamento, sobretudo o milho e derivados, gerando graves problemas para a Saúde Pública e a qualidade dos alimentos. O objetivo deste trabalho foi avaliar a exposição humana à FB1 presente nos alimentos através da estimativa de ingestão da toxina na dieta e da análise de diferentes biomarcadores presentes em amostras de sangue, urina e cabelo. Além disso, foram investigados os efeitos da toxina através da avaliação de ácido fólico presentes em alimentos e em soro, e os níveis de uréia e creatinina presentes em soro. O estudo foi realizado em dois municípios dos Estados de São Paulo e Santa Catarina, cujos respectivos voluntários foram categorizados como de baixo consumo de derivados de milho (Grupo A, voluntários de Pirassununga/SP) e de alto consumo de derivados de milho (Grupo B, voluntários de Erval Velho/SC). As amostras de alimentos do Grupo A (Pirassununga/SP) foram fornecidas pelos voluntários (n=100) nos meses de Junho/2011, Setembro/2011, Dezembro/2011 e Março/2012. Os voluntários do Grupo B (Erval Velho/SC) (n=20) forneceram amostras de alimentos no mês de Abril/2012. Em cada grupo, uma lista com 20 alimentos à base de milho foi entregue aosvoluntários, para fornecimento de amostras daqueles disponíveis em suas respectivas residências em cada mês de amostragem, totalizando 122 amostras de derivados de milho no Grupo A e 17 amostras no Grupo B coletadas durante o estudo. Adicionalmente, aplicouse um Questionário de Frequência Alimentar (QFA) e um Inquérito Recordatório de 24 horas (QIR - 24 h) no momento das coletas de amostras. Em cada mês de amostragem de alimentos, foram coletadas amostras de sangue, urina (somente Grupo A) e cabelo dos voluntários, sendo as amostras armazenadas a -20ºC (urina e cabelo) ou -80ºC (sangue) até o momento das análises. As amostras de alimentos foram submetidas à análise de FB1, sendo que as de farinha de milho foram também analisadas quanto ao teor de ácido fólico. Ambas as análises foram feitas através de cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE). Em soro, foram avaliadas a relação esfinganina/esfingosina (Sa/So), resíduos de FB1, ácido fólico, uréia e creatinina. Em urina, foram analisados os níveis de FB1, creatinina para correção do volume urinário e a relação Sa/So. Em cabelo, foram analisados os resíduos de FB1 através de CLAE acoplada à espectrometria de massas. Todos os métodos de análise foram submetidos a procedimento de otimização e validação intra--laboratorial. A incidênciade FB1 nos alimentos foi, em média, 72% (n=122) nas amostras do Grupo A (Pirassununga/SP) e 35% (n=17) no Grupo B (Erval Velho/SC). Os maiores níveis foram encontrados em amostras de pipoca provenientes do Grupo B, com uma amostra excedendo o limite de tolerância estabelecido no Brasil (2,500 Sg kg-1). A ingestão diária provável média (IDPM) de FB1 no Grupo A foi de 63,3 ng kg-1 peso corpóreo (p.c.) dia-1, que corresponde a 3,1% da ingestão provisória máxima tolerável (IPMT) recomendada para fumonisinas (2.000 ng kg-1 p.c. dia-1). A IDPM do Grupo B apresentou uma média de 190,1 ng kg-1 p.c. dia-1 o que corresponde a 9,5% da IDMT. As concentrações de ácido fólico nas amostras de farinha de milho variaram de < 0,3 Sg kg-1 (limite de quantificação do método) a 1.705 Sg kg-1, com média de 713 ± 435 Sg kg-1. Somente uma amostra apresentou nível de ácido fólico acima do valor mínimo estabelecido pela ANVISA. Em urina, a incidência de FB1 foi de 33,4% (n=251), com níveis médios de 3,19 ± 3,15 ng mg-1 de creatinina. Não houve correlação (P>0,05) entre as concentrações de FB1 na urina e nos alimentos. Os níveis de esfinganina foram mais elevados em mulheres, com 25,0% (n=116) de amostras positivas, em comparação à urina de homens, 10,4% (n=96). A relação Sa/So apresentou em média 0,91, 0,77 e 0,89 para urina de mulheres, homens e em combinação, respectivamente. Em soro, os níveis de esfingosina foram em média 2,48 ng mL-1 para o Grupo A e 5,01 ng mL-1 para o Grupo B. A relação Sa/So variou de 0,06 a 3,19 com média de 0,79 para o Grupo A e 0,78 para o Grupo B. Embora tenha havido correlação positiva (r=0,574, P<0,05) entre arelação Sa/So no soro e os dados de consumo de milho e derivados obtidos no QIR-24 h, não foram observadas correlações (P>0,05) entre a ingestão de FB1 e a relação Sa/So na urina ou soro. A concentração de ácido fólico no soro variou de 6,7 a 24,0 ng mL-1 (média de 13,4 ± 5,4 ng mL-1), com ambos os grupos (A e B) apresentando resultados dentro dos valores de referências. Não foram observados níveis detectáveis de FB1 nas amostras de soro. No entanto, FB1 foi detectada em 4 amostras de cabelo humano (7,2%) dos Grupos A e B, cuja concentração média foi de 21,3 ± 12,1 ng g-1. Em síntese, os resultados obtidos nas análises de biomarcadores de FB1 no presente trabalho estão de acordo com os valores de IDPM encontrados, indicando que a exposição à FB1 nas populações estudadas não representa um risco a saúde.

Fumonisin B1 (FB1) is a mycotoxin produced by the secondary metabolism of Fusarium species, mainly F. verticillioides and F. proliferatum, which contaminates foods before and after processing and causes serious problems to public health and food quality. The aim of this study was to evaluate the human exposure to FB1 in food by means of estimated intake of toxin in the diet, and analysis of different biomarkers in serum, urine and hair. In addition, folic acid in food and blood as well urea and creatinin in serum were investigated to evaluate the toxin effects.The study was conducted in two cities of São Paulo and Santa Catarina States, where the respective volunteers were categorized as lowconsumers of corn products (Group A, volunteers from Pirassununga/SP) and highconsumers of corn products (Group B, volunteers from Erval Velho/SC). Food samples from Group A (Pirassununga/SP) were provided by volunteers (n=100) in June/2011, September/2011, December/2011 and March/2012. The volunteers from Group B (Erval Velho/SC) (n=20) provided food samples in April/2012. In each group, a list of 20 corn products was given to volunteers, to allow them to check and collect the food items available in their homes at each sampling time. The total number of samples of corn products provided by the volunteers were 122 and 17 in Group A and Group B, respectively. Addicionally, a Food Frequency Questionnaire (FFQ) and a 24-Hours Dietary Recall Questionnaire (24h- DRQ) were applied by the time of sample collections. In each month of food samplescollection, samples of blood, urine (only Group A) and hair from the volunteers were collected and storage at -20oC (urine and hair) or -80oC (blood) until analysis. Food samples were submitted to determination of FB1, and corn meal samples were also evaluated for folic acid levels. Both analysis were performed by high performance liquid chromatography (HPLC). In serum, analyses included sphinganine/sphingosine ratio (Sa/So), FB1 residue, folic acid, urea and creatinine. In urine, the levels of FB1, creatinine to correct urinary volume and Sa/So ratio were evaluated. In hair, FB1 residues were analysed by HPLC coupled to mass spectrometry. All the analytical methods were submitted to optimization and intralaboratorial validation procedures. The mean incidences of FB1 in corn products were 72% (n=122) in samples of Group A (Pirassununga/SP), and 35% (n=17) of Group B (Erval Velho/SC). The higher levels were found in popcorn from Group B, with one sample exceeding the tolerance limit established in Brazil (2,500 Sg kg-1). The mean probable daily intake (PDIM) of FB1 in Group A was 63.3 ng kg-1 body weigh (b.w.) day-1, which correspondsto 3.1% of provisional maximum tolerable intake (PMTDI) recommended for fumonisins (2,000 ng kg-1 b.w. day-1). PDIM of Group B was 190.1 ng kg-1 b.w. day-1, which represents 9.5% of PMTDI. Folic acid levels in corn meal ranged from < 0,3 Sg kg-1 (quantification limit) to 1.705 Sg kg-1, with a mean of 713 ± 435 Sg kg-1. Only one sample had levels of folic acid above the minimum established by ANVISA. In urine, the incidence of FB1 was 33,4% (n= 251), at mean levels of 3,19 ± 3,15 ng mg-1 of creatinine. There wasnt correlation (P>0.05) between concentrations of FB1 in urine and foods. Sphinganine levels were higher in woman, with 25.0% (n=116) of positive samples in comparison to urine of men, 10.4% (n=96). The mean Sa/So ratios were 0.91, 0.77 and 0.89 for urine of women, men and in combination, respectively. In serum, sphingosine presented a mean of 2.48 ng mL-1 to Group A and 5.01 ng mL-1 to Group B. Sa/So ratio ranged from 0.06 to 3.19 with a mean of 0.79 to Group A and 0.78 to Group B. Although a positive correlation (r=0.574, P<0.05) was found between Sa/So ratio in serum and corn consumption data obtained by 24h-DRQ, no correlation was observed (P>0,05) with FB1 intake and Sa/So ratio in urine or serum. Folic acid concentration in serum ranged from 6.7 to 24.0 ng mL-1 (mean of 13.4 ± 5.4 ng mL-1), with both groups (A and B) presenting levels within the reference valuies. There were no detectable levels of FB1in serum samples. However, FB1 was detected in 4 human hair samples (7.2%) of Groups A and B, at a mean concentration was 21.3 ± 12.1 ng g-1. In summary, the results obtained in the analyses of FB1 biomarkers in the present study are in agreement with the PDIM values found, hence indicating that FB1 exposure in the populations studied do not represent a health concern.

Efeito da ingestão de fumonisina B1 no peso corporal e na histopatologia de codornas japonesas (Coturnix coturnix japonica)

This research was aimed at evaluating the effect of fumonisin B1 (FB1) on body weight and viscera (liver, kidney and heart) of laying Japanese quail (Coturnix coturnix japonica), due to the little toxicological data on this species. Four experimental groups of 32 commercial quails were designed and exposed to ingestion test with feed containing 0 (controls), 10, 50 or 250mg FB1 kg-1 feed, during 28 days. Birds of group 250mg FB1 kg-1 showed lower body weight (P 0.05). Relative weights of kidney and heart were similar (P>0.05) among treatments. However, the relative weight of liver increased (P 0.05) in quail of groups received 50 and 250mg FB1/kg. Histological changes were observed only in the liver of groups receiving 50 and 250mgFB1 kg-1, which caused moderate biliary duct hyperplasia and multiple foci of hepatic necrosis. The data indicated that AFB1 at levels above 50mg kg-1 in laying Japanese quail.

O objetivo do presente trabalho foi estudar o efeito da fumonisina B1 (FB1) sobre o peso corpóreo e as vísceras (fígado, rim e coração) de codorna poedeira japonesa (Coturnix coturnix japonica), devido ao escasso dado toxicológico nesta espécie. Quatro grupos, sendo cada um constituído de 32 codornas de linhagem comercial, receberam ração contendo FB1 nas concentrações de 0 (controle), 10, 50 e 250mg kg-1, durante 28 dias. Observou-se uma redução (P 0,05) no peso corpóreo das aves submetidas ao tratamento 250mg kg-1 de FB1. Os pesos relativos do rim e do coração mantiveram-se semelhantes em todos os tratamentos (P>0,05), porém as aves do grupo 50 e 250mg kg-1 apresentaram aumento no peso relativo de fígado (P 0,05). Alterações histológicas foram constatadas apenas no fígado das aves alimentadas com ração contendo 50 e 250mg kg-1 de FB1, caracterizadas por hiperplasia moderada de ductos biliares e múltiplas áreas de necrose focal, indicando que a FB1 seja tóxica a partir de 50mg kg-1 para codornas de postura.

Efeito da ingestão de fumonisina B1 no peso corporal e na histopatologia de codornas japonesas (Coturnix coturnix japonica)

This research was aimed at evaluating the effect of fumonisin B1 (FB1) on body weight and viscera (liver, kidney and heart) of laying Japanese quail (Coturnix coturnix japonica), due to the little toxicological data on this species. Four experimental groups of 32 commercial quails were designed and exposed to ingestion test with feed containing 0 (controls), 10, 50 or 250mg FB1 kg-1 feed, during 28 days. Birds of group 250mg FB1 kg-1 showed lower body weight (P 0.05). Relative weights of kidney and heart were similar (P>0.05) among treatments. However, the relative weight of liver increased (P 0.05) in quail of groups received 50 and 250mg FB1/kg. Histological changes were observed only in the liver of groups receiving 50 and 250mgFB1 kg-1, which caused moderate biliary duct hyperplasia and multiple foci of hepatic necrosis. The data indicated that AFB1 at levels above 50mg kg-1 in laying Japanese quail.

O objetivo do presente trabalho foi estudar o efeito da fumonisina B1 (FB1) sobre o peso corpóreo e as vísceras (fígado, rim e coração) de codorna poedeira japonesa (Coturnix coturnix japonica), devido ao escasso dado toxicológico nesta espécie. Quatro grupos, sendo cada um constituído de 32 codornas de linhagem comercial, receberam ração contendo FB1 nas concentrações de 0 (controle), 10, 50 e 250mg kg-1, durante 28 dias. Observou-se uma redução (P 0,05) no peso corpóreo das aves submetidas ao tratamento 250mg kg-1 de FB1. Os pesos relativos do rim e do coração mantiveram-se semelhantes em todos os tratamentos (P>0,05), porém as aves do grupo 50 e 250mg kg-1 apresentaram aumento no peso relativo de fígado (P 0,05). Alterações histológicas foram constatadas apenas no fígado das aves alimentadas com ração contendo 50 e 250mg kg-1 de FB1, caracterizadas por hiperplasia moderada de ductos biliares e múltiplas áreas de necrose focal, indicando que a FB1 seja tóxica a partir de 50mg kg-1 para codornas de postura.

Parâmetros hematológicos de frangos de corte alimentados com ração contendo aflatoxina B1 e fumonisina B1

The aim of the present study was to evaluate the effects of dietary aflatoxin B1 (AFB1) and fumonisin B1 (FB1) on the hemogram and leucogram of broilers. The mycotoxins were added to rations, singly and in combination, at levels of 0, 50 and 200mug AFB1/kg, and/or 0, 50 and 200mg FB1/kg. A completely randomized 3 x 3 factorial design was used, with 9 treatments and 12 replications per treatment (total: 108 birds). Broilers were fed the contaminated rations from day-old 8 to 41. All the mycotoxin-treated groups had decreased (P 0.05) values of hematocrit, hemoglobin concentration and erythrocyte counts, which are common characteristics of anemia. The most affected birds were from groups receiving the highest levels of the combined mycotoxins. Lower (P 0.05) white blood cells counts were also noted in all groups fed mycotoxin-contaminated feeds, however, this reduction was more severe in broilers fed 200mug AFB1/kg, alone or in association with FB1. The conclusion is that both AFB1 and FB1, singly or in combination at the levels studied, can negatively affect the hematological parameters of broiler chicks.

O objetivo deste trabalho foi avaliar os efeitos da aflatoxina B1 (AFB1) e da fumonisina B1 (FB1) sobre o hemograma e o leucograma de frangos alimentados com ração contendo as toxinas isoladamente e em associação, nos níveis de 0, 50 e 200mig de AFB1/kg, e/ou 0, 50 e 200mg de FB1/kg. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado, em esquema fatorial 3x3, com 9 tratamentos e 12 repetições, totalizando 108 aves. Os frangos foram alimentados com as rações contaminadas do 8° até o 41° dia de vida. As aves de todos os grupos alimentados com micotoxinas apresentaram redução (P 0,05) nos valores de hematócrito, hemoglobina e número de hemácias, caracterizando um quadro de anemia, sendo que os grupos mais afetados foram os que receberam as maiores concentrações das toxinas em associação. Observou-se um menor (P 0,05) número de leucócitos em todos os tratamentos, porém esta redução foi mais intensa nos grupos tratados com 200mig/kg de AFB1, com ou sem FB1. Conclui-se que a AFB1 e a FB1, isoladas ou em associação, nos níveis utilizados no estudo, podem afetar negativamente os parâmetros hematológicos de frangos de corte.

Parâmetros hematológicos de frangos de corte alimentados com ração contendo aflatoxina B1 e fumonisina B1

The aim of the present study was to evaluate the effects of dietary aflatoxin B1 (AFB1) and fumonisin B1 (FB1) on the hemogram and leucogram of broilers. The mycotoxins were added to rations, singly and in combination, at levels of 0, 50 and 200mug AFB1/kg, and/or 0, 50 and 200mg FB1/kg. A completely randomized 3 x 3 factorial design was used, with 9 treatments and 12 replications per treatment (total: 108 birds). Broilers were fed the contaminated rations from day-old 8 to 41. All the mycotoxin-treated groups had decreased (P 0.05) values of hematocrit, hemoglobin concentration and erythrocyte counts, which are common characteristics of anemia. The most affected birds were from groups receiving the highest levels of the combined mycotoxins. Lower (P 0.05) white blood cells counts were also noted in all groups fed mycotoxin-contaminated feeds, however, this reduction was more severe in broilers fed 200mug AFB1/kg, alone or in association with FB1. The conclusion is that both AFB1 and FB1, singly or in combination at the levels studied, can negatively affect the hematological parameters of broiler chicks.

O objetivo deste trabalho foi avaliar os efeitos da aflatoxina B1 (AFB1) e da fumonisina B1 (FB1) sobre o hemograma e o leucograma de frangos alimentados com ração contendo as toxinas isoladamente e em associação, nos níveis de 0, 50 e 200mig de AFB1/kg, e/ou 0, 50 e 200mg de FB1/kg. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado, em esquema fatorial 3x3, com 9 tratamentos e 12 repetições, totalizando 108 aves. Os frangos foram alimentados com as rações contaminadas do 8° até o 41° dia de vida. As aves de todos os grupos alimentados com micotoxinas apresentaram redução (P 0,05) nos valores de hematócrito, hemoglobina e número de hemácias, caracterizando um quadro de anemia, sendo que os grupos mais afetados foram os que receberam as maiores concentrações das toxinas em associação. Observou-se um menor (P 0,05) número de leucócitos em todos os tratamentos, porém esta redução foi mais intensa nos grupos tratados com 200mig/kg de AFB1, com ou sem FB1. Conclui-se que a AFB1 e a FB1, isoladas ou em associação, nos níveis utilizados no estudo, podem afetar negativamente os parâmetros hematológicos de frangos de corte.

Efeitos da aflatoxina b 1 e fumonisina b1 sobre os níveis séricos de aspartato amino-transferase e proteína total de frangos de corte / Effects of aflatoxin b 1 and fumonisin b1 on the levels of serum aspartate amino-transferase and total protein of broilers

RESUMO O objetivo do presente trabalho foi avaliar os efeitos da aflatoxina B 1 (AFB1) e da fumonisina B1 (FB1) sobre os níveis séricos da enzima aspartato amino-transferase (AST) e de proteínas totais de frangos de corte alimentados com ração contendo as toxinas isoladas e em associação, nos níveis de 0, 50 e 200 ?g de AFB1/kg e 0, 50 e 200 mg de FB1/kg. O delineamento experimental foi o inteiramente casualizado em esquema fatorial 3 x 3, com 9 tratamentos e 12 repetições, totalizando 108 aves. As aves foram alimentadas com as rações contaminadas a partir do 8 o dia até o 41o dia de idade. Aos 41 dias de idade, houve um aumento (p < 0,05) nos níveis de AST das aves que receberam dietas contendo AFB1 e FB1, com exceção do grupo que recebeu somente 50 ?g de FB1/kg. Este aumento foi maior quanto mais elevados foram os níveis de AFB1, sendo que um efeito tóxico aditivo foi observado nos tratamentos de associação com 50 mg de AFB1/ kg e 50 ou 200 mg de FB1/kg. Aos 28 dias de idade, observou-se uma redução (p < 0,05) na concentração de proteína dos grupos que receberam ração com 200 ?g de AFB1/kg, com ou sem FB1, porém esta redução não foi observada aos 41 dias de idade. Conclui-se que a intoxicação de frangos de corte com AFB1 e FB1, isoladas ou associadas, causa um aumento na concentração sérica de AST e uma redução nos níveis de proteínas totais após 20 dias de exposição contínua através da ração.

ABSTRACT The aim of the present study was to evaluate the effects of dietary aflatoxin B1 (AFB1) and fumonisin B1 (FB1) on the seric levels of aspartate amino-transferase (AST) and total protein of broiler chicks. The mycotoxins were added to rations, singly and in combination, at levels of 0, 50 and 200 ?g AFB1/kg, and 0, 50 and 200 mg FB1/kg. A completely randomized 3 x 3 factorial design was used, with 9 treatments and 12 replications per treatment (total: 108 birds). Broilers were fed the contaminated rations from days-of-age 8 to 41. At 41 days of age, the concentration of AST increased (p < 0.05) in all groups receiving AFB1 and FB1, with the exception of birds fed 50 mg FB1/kg alone. Higher levels of AST were found in broilers fed the highest levels of AFB1, and an additive effect was observed in the association treatments 50 ?g AFB1/kg and 50 or 200 mg FB1/kg. Total protein decreased (p < 0.05) at 28 days of age in groups receiving 200 ?g AFB1/kg alone or in combination with FB1. However this reduction was not found at 41 days of age. In conclusion, AFB1 and FB1, singly or in combination at the levels studied, cause an increase in the serum levels of AST and a decrease of total proteins after 20 days of continuous exposition through the diet.

Ocorrência de aflatoxinas e fumonisinas em sistema de produção de frangos de corte no Estado de São Paulo / Occurrence of aflatoxin and fumonisin in a poultry productive system in the state of São Paulo

O objetivo deste estudo foi verificar a ocorrência de aflatoxina e fumonisina no sistema de produção de frango de corte e o impacto destas micotoxinas nos índices produtivos em uma empresa integradora localizada no Estado de São Paulo. Adicionalmente, foram identificados os principais fatores para a produção de micotoxinas em rações e a ocorrência de resíduos de aflatoxinas e fumonisinas em tecidos comestíveis de frango (músculo peitoral, fígado e moela). Foram realizadas as contagens de fungos e leveduras totais, de fungos dos gêneros Aspergillus ssp. e Fusarium ssp. e quantificação de aflatoxina e fumonisina nas principais matérias-primas da ração (milho e farelo de soja), na ração de abate e na cama de frango. O isolamento de fungos nas amostras de milho, farelo de soja e ração foi realizado em ágar DG18, enquanto que, para as amostras de cama de frango, utilizou-se o ágar PDA. Para a extração de aflatoxinas e fumonisinas, foram utilizadas colunas de imunoafinidade (Neogen®) e colunas SAX de troca iônica, respectivamente. A quantificação das aflatoxinas e fumonisinas foi realizada através de cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE). O milho foi o alimento onde foi observada a maior frequência de Aspergillus ssp. e Fusarium ssp., e também maior positividade para aflatoxinas e fumonisinas, sendo que uma das amostras ultrapassou o limite de aflatoxinas recomendado pelo Ministério da Agricultura Pecuária e Abastecimento (MAPA). As quantidades de aflatoxinas e fumonisinas encontradas na ração não influenciaram significativamente os índices produtivos. Não foram encontrados níveis detectáveis de resíduos de aflatoxinas e fumonisinas nos tecidos analisados. Embora não tenham sido observadas lesões macroscópicas no fígado e bursa das aves, foram constatadas alterações histopatológicas nessas vísceras, as quais são compatíveis com lesões causadas pela ingestão de aflatoxinas e fumonisinas

The objective of this study was to verify the occurrence of aflatoxin and fumonisin in poultry feed and their influence on poultry productivity at company located in São Paulo State. Supplementary, were identified the main factors that cause mycotoxin production in poultry feed and determine the occurrence of aflatoxins and fumonisins residues in edible parts of poultry (breast, liver and gizzard). The total mold and yeast counting of Aspergillus ssp. and Fusarium ssp. genus and quantification of aflatoxin and fumonisin were determined in the main feed ingredients (corn and soybean meal), in finishing diets and bedding. The fungi from corn, soybean meal and feed were isolated in DG18 agar, whereas, the fungi from bedding was used PDA agar. Aflatoxins and fumonisins, were extracted using an immunoaffinity column (Neogen®) and a SAX column, respectively. Aflatoxins and fumonisins were quantified by high performance liquid chromatografy (HPLC). The corn showed the highest frequency of Aspergillus ssp. and Fusarium ssp. and also the highest positivity for aflatoxins and fumonisins, there was one corn sample that exceeded the recommendations of the Brazilian Ministry of Agriculture. The levels of aflatoxins and fumonisins in the feed did not significantly influence productivity. There were not detectable levels of aflatoxins and fumonisins on analysed tissues. Although macroscopic lesions were not observed in liver and bursa, histopathological changes were observed in these organs, which are consistent with injuries caused by the aflatoxin and fumonisin consumption

Efeitos da administração de aflatoxina B1 e fumonisina B1 sobre frangos de corte

O presente trabalho teve por objetivo avaliar, através de exames hematológicos, sorológicos e histopatológicos, os efeitos tóxicos da aflatoxina B1 (AFB1) e da fumonisina B1 (FB1) em frangos de corte, administradas isoladamente e em associação através das rações nos níveis de 0, 50 e 200 µg de AFB1/kg, e 0, 50 e 200 mg de FB1/kg. O delineamento experimental utilizado foi o inteiramente casualizado em esquema fatorial 3 x 3, com 9 tratamentos e 12 repetições, totalizando 108 aves. Os frangos foram alimentados com as rações contaminadas a partir do 7° dia de idade, vacinados contra a doença de Newcastle, cepa LaSota, no 14° dia de vida e sacrificados aos 41 dias de idade. Os resultados mostraram que as aves tratadas apresentaram redução no peso corporal no final do período de criação. As aves que receberam dietas contendo 50 µg de AFB1 + 200 mg de FB1/kg apresentaram aumento nos pesos relativos do figado, coração e "bursa de Fabricius". Diferenças significativas (p<0,05) foram observadas nos valores do hemograma com a interação das micotoxinas em todas as idades pesquisadas. Verificou-se redução nos valores do hematócrito, hemoglobina, contagem total de eritrócitos, caracterizando um quadro de anemia. Os efeitos tóxicos nestes parâmetros foram mais intensos quanto mais elevados os níveis de micotoxina utilizados. Nos valores do leucograma os efeitos tóxicos causados pela interação da AFB1 e FBI1 em todas as idades pesquisadas foram: leucopenia, linfapenia e heteropenia. As médias geométricas dos títulos (GMT) de anticorpos foram reduzidos nas aves que receberam dietas contendo 50 µg de AFB1 + 200 mg de FB1/kg aos 14 dias de idade. As GMT de anticorpos aos 28 dias foram reduzidos significantemente (p<0,05) nas aves que receberam dietas contendo níveis de 200 µg de AFB1 + 50 mg de FB1/kg. Aos 35 e 41 dias as GMT de anticorpos das aves que receberam níveis de 50 e 200 µg de AFB1, e 50 mg/kg de FB1, apresentaram significativa redução. As dosagens da enzima aspartato amino transferase (AST) apresentaram aumento (p<0,05) aos 41 dias. As análises histopatológicas mostraram alterações no figado com proliferação celular e infiltrado mononuclear e heterofilico e nos rins, apresentando túbulos renais com degeneração hidrópica nas aves tratadas, estes efeitos foram mais intensos quanto mais elevados os níveis de AFB, e FB, utilizados. Conclui-se que a AFB1, e a FB1, isoladas ou em associação, nos níveis utilizados no presente estudo, diminuem a resposta humoral de frangos de corte, além de alterar parâmetros hematológicos e histopatológicos nas aves intoxicadas