The dynamics of genome size and GC contents evolution in genus Nicotiana / A dinâmica do tamanho do genoma e a evolução dos conteúdos de GC no gênero Nicotiana

Hybridization and Polyploidization are most common of the phenomenon observed in plants, especially in the genus Nicotiana leading to the duplication of genome. Although genomic changes associated with these events has been studied at various levels but the genome size and GC content variation is less understood because of absence of sufficient genomic data. In this study the flow cytometry technique was used to uncover the genome size and GC contents of 46 Nicotiana species and we compared the genomic changes associated with the hybridization events along evolutionary time scale. The genome size among Nicotiana species varied between 3.28 pg and 11.88 pg whereas GC contents varied between 37.22% and 51.25%. The tetraploid species in genus Nicotiana including section Polydiclae, Repandae, Nicotiana, Rustica and Sauveolentes revealed both up and downsizing in their genome sizes when compared to the sum of genomes of their ancestral species. The genome sizes of three homoploid hybrids were found near their ancestral species. Loss of large genome sequence was observed in the evolutionary more aged species (>10 Myr) as compared to the recently evolved one’s (<0.2 Myr). The GC contents were found homogenous with a mean difference of 2.46% among the Nicotiana species. It is concluded that genome size change appeared in either direction whereas the GC contents were found more homogenous in genus Nicotiana.

A hibridização e a poliploidização são os fenômenos mais comuns observados em plantas, principalmente no gênero Nicotiana, levando à duplicação do genoma. Embora as mudanças genômicas associadas a esses eventos tenham sido estudadas em vários níveis, o tamanho do genoma e a variação do conteúdo de GC são menos compreendidos devido à ausência de dados genômicos suficientes. Neste estudo, a técnica de citometria de fluxo foi usada para descobrir o tamanho do genoma e o conteúdo de GC de 46 espécies de Nicotiana, e comparamos as mudanças genômicas associadas aos eventos de hibridização ao longo da escala de tempo evolutiva. O tamanho do genoma entre as espécies de Nicotiana variou entre 3,28 pg e 11,88 pg, enquanto os conteúdos de GC variaramentre 37,22% e 51,25%. As espécies tetraploides do gênero Nicotiana, incluindo as seções Polydiclae, Repandae, Nicotiana, Rustica e Sauveolentes, revelaram aumento e redução do tamanho do genoma quando comparados à soma dos genomas de suas espécies ancestrais. Os tamanhos do genoma de três híbridos homoploides foram encontrados perto de suas espécies ancestrais. A perda da grande sequência do genoma foi observada nas espécies evolutivas mais velhas (> 10 Myr) em comparação com as que evoluíram recentemente (< 0,2 Myr). Os teores de GC foram homogêneos com diferença média de 2,46% entre as espécies de Nicotiana. Conclui-se que a mudança no tamanho do genoma apareceu em ambas as direções, enquanto os conteúdos de GC foram encontrados mais homogêneos no gênero Nicotiana.

The dynamics of genome size and GC contents evolution in genus Nicotiana

Abstract Hybridization and Polyploidization are most common of the phenomenon observed in plants, especially in the genus Nicotiana leading to the duplication of genome. Although genomic changes associated with these events has been studied at various levels but the genome size and GC content variation is less understood because of absence of sufficient genomic data. In this study the flow cytometry technique was used to uncover the genome size and GC contents of 46 Nicotiana species and we compared the genomic changes associated with the hybridization events along evolutionary time scale. The genome size among Nicotiana species varied between 3.28 pg and 11.88 pg whereas GC contents varied between 37.22% and 51.25%. The tetraploid species in genus Nicotiana including section Polydiclae, Repandae, Nicotiana, Rustica and Sauveolentes revealed both up and downsizing in their genome sizes when compared to the sum of genomes of their ancestral species. The genome sizes of three homoploid hybrids were found near their ancestral species. Loss of large genome sequence was observed in the evolutionary more aged species (>10 Myr) as compared to the recently evolved ones ( 0.2 Myr). The GC contents were found homogenous with a mean difference of 2.46% among the Nicotiana species. It is concluded that genome size change appeared in either direction whereas the GC contents were found more homogenous in genus Nicotiana.

Resumo A hibridização e a poliploidização são os fenômenos mais comuns observados em plantas, principalmente no gênero Nicotiana, levando à duplicação do genoma. Embora as mudanças genômicas associadas a esses eventos tenham sido estudadas em vários níveis, o tamanho do genoma e a variação do conteúdo de GC são menos compreendidos devido à ausência de dados genômicos suficientes. Neste estudo, a técnica de citometria de fluxo foi usada para descobrir o tamanho do genoma e o conteúdo de GC de 46 espécies de Nicotiana, e comparamos as mudanças genômicas associadas aos eventos de hibridização ao longo da escala de tempo evolutiva. O tamanho do genoma entre as espécies de Nicotiana variou entre 3,28 pg e 11,88 pg, enquanto os conteúdos de GC variaram entre 37,22% e 51,25%. As espécies tetraploides do gênero Nicotiana, incluindo as seções Polydiclae, Repandae, Nicotiana, Rustica e Sauveolentes, revelaram aumento e redução do tamanho do genoma quando comparados à soma dos genomas de suas espécies ancestrais. Os tamanhos do genoma de três híbridos homoploides foram encontrados perto de suas espécies ancestrais. A perda da grande sequência do genoma foi observada nas espécies evolutivas mais velhas (> 10 Myr) em comparação com as que evoluíram recentemente ( 0,2 Myr). Os teores de GC foram homogêneos com diferença média de 2,46% entre as espécies de Nicotiana. Conclui-se que a mudança no tamanho do genoma apareceu em ambas as direções, enquanto os conteúdos de GC foram encontrados mais homogêneos no gênero Nicotiana.

The dynamics of genome size and GC contents evolution in genus Nicotiana / A dinâmica do tamanho do genoma e a evolução dos conteúdos de GC no gênero Nicotiana

Abstract Hybridization and Polyploidization are most common of the phenomenon observed in plants, especially in the genus Nicotiana leading to the duplication of genome. Although genomic changes associated with these events has been studied at various levels but the genome size and GC content variation is less understood because of absence of sufficient genomic data. In this study the flow cytometry technique was used to uncover the genome size and GC contents of 46 Nicotiana species and we compared the genomic changes associated with the hybridization events along evolutionary time scale. The genome size among Nicotiana species varied between 3.28 pg and 11.88 pg whereas GC contents varied between 37.22% and 51.25%. The tetraploid species in genus Nicotiana including section Polydiclae, Repandae, Nicotiana, Rustica and Sauveolentes revealed both up and downsizing in their genome sizes when compared to the sum of genomes of their ancestral species. The genome sizes of three homoploid hybrids were found near their ancestral species. Loss of large genome sequence was observed in the evolutionary more aged species (>10 Myr) as compared to the recently evolved one's (<0.2 Myr). The GC contents were found homogenous with a mean difference of 2.46% among the Nicotiana species. It is concluded that genome size change appeared in either direction whereas the GC contents were found more homogenous in genus Nicotiana.

Resumo A hibridização e a poliploidização são os fenômenos mais comuns observados em plantas, principalmente no gênero Nicotiana, levando à duplicação do genoma. Embora as mudanças genômicas associadas a esses eventos tenham sido estudadas em vários níveis, o tamanho do genoma e a variação do conteúdo de GC são menos compreendidos devido à ausência de dados genômicos suficientes. Neste estudo, a técnica de citometria de fluxo foi usada para descobrir o tamanho do genoma e o conteúdo de GC de 46 espécies de Nicotiana, e comparamos as mudanças genômicas associadas aos eventos de hibridização ao longo da escala de tempo evolutiva. O tamanho do genoma entre as espécies de Nicotiana variou entre 3,28 pg e 11,88 pg, enquanto os conteúdos de GC variaram entre 37,22% e 51,25%. As espécies tetraploides do gênero Nicotiana, incluindo as seções Polydiclae, Repandae, Nicotiana, Rustica e Sauveolentes, revelaram aumento e redução do tamanho do genoma quando comparados à soma dos genomas de suas espécies ancestrais. Os tamanhos do genoma de três híbridos homoploides foram encontrados perto de suas espécies ancestrais. A perda da grande sequência do genoma foi observada nas espécies evolutivas mais velhas (> 10 Myr) em comparação com as que evoluíram recentemente (< 0,2 Myr). Os teores de GC foram homogêneos com diferença média de 2,46% entre as espécies de Nicotiana. Conclui-se que a mudança no tamanho do genoma apareceu em ambas as direções, enquanto os conteúdos de GC foram encontrados mais homogêneos no gênero Nicotiana.

The dynamics of genome size and GC contents evolution in genus Nicotiana / A dinâmica do tamanho do genoma e a evolução dos conteúdos de GC no gênero Nicotiana

Hybridization and Polyploidization are most common of the phenomenon observed in plants, especially in the genus Nicotiana leading to the duplication of genome. Although genomic changes associated with these events has been studied at various levels but the genome size and GC content variation is less understood because of absence of sufficient genomic data. In this study the flow cytometry technique was used to uncover the genome size and GC contents of 46 Nicotiana species and we compared the genomic changes associated with the hybridization events along evolutionary time scale. The genome size among Nicotiana species varied between 3.28 pg and 11.88 pg whereas GC contents varied between 37.22% and 51.25%. The tetraploid species in genus Nicotiana including section Polydiclae, Repandae, Nicotiana, Rustica and Sauveolentes revealed both up and downsizing in their genome sizes when compared to the sum of genomes of their ancestral species. The genome sizes of three homoploid hybrids were found near their ancestral species. Loss of large genome sequence was observed in the evolutionary more aged species (>10 Myr) as compared to the recently evolved ones (<0.2 Myr). The GC contents were found homogenous with a mean difference of 2.46% among the Nicotiana species. It is concluded that genome size change appeared in either direction whereas the GC contents were found more homogenous in genus Nicotiana.(AU)

A hibridização e a poliploidização são os fenômenos mais comuns observados em plantas, principalmente no gênero Nicotiana, levando à duplicação do genoma. Embora as mudanças genômicas associadas a esses eventos tenham sido estudadas em vários níveis, o tamanho do genoma e a variação do conteúdo de GC são menos compreendidos devido à ausência de dados genômicos suficientes. Neste estudo, a técnica de citometria de fluxo foi usada para descobrir o tamanho do genoma e o conteúdo de GC de 46 espécies de Nicotiana, e comparamos as mudanças genômicas associadas aos eventos de hibridização ao longo da escala de tempo evolutiva. O tamanho do genoma entre as espécies de Nicotiana variou entre 3,28 pg e 11,88 pg, enquanto os conteúdos de GC variaramentre 37,22% e 51,25%. As espécies tetraploides do gênero Nicotiana, incluindo as seções Polydiclae, Repandae, Nicotiana, Rustica e Sauveolentes, revelaram aumento e redução do tamanho do genoma quando comparados à soma dos genomas de suas espécies ancestrais. Os tamanhos do genoma de três híbridos homoploides foram encontrados perto de suas espécies ancestrais. A perda da grande sequência do genoma foi observada nas espécies evolutivas mais velhas (> 10 Myr) em comparação com as que evoluíram recentemente (< 0,2 Myr). Os teores de GC foram homogêneos com diferença média de 2,46% entre as espécies de Nicotiana. Conclui-se que a mudança no tamanho do genoma apareceu em ambas as direções, enquanto os conteúdos de GC foram encontrados mais homogêneos no gênero Nicotiana.(AU)

Morphogenetic and structural traits of Ipyporã grass subjected to nitrogen fertilization rates under intermittent grazing / Características morfogênicas e estruturais do capim-ipyporã submetido a doses de adubação nitrogenada sob pastejo intermitente

This study examined the effects of annual nitrogen (N) rates of 100 and 200 kg ha-¹ on the morphogenetic and structural traits of Ipyporã grass (Brachiaria brizantha × Brachiaria ruziziensis) under intermittent grazing during the seasons of the year. The experiment was laid out in a randomized-block design with two treatments and three area replicates. Ipyporã grass pastures were grazed by beef cattle. Morphogenetic and structural traits of the forage canopy were evaluated using the marked-tiller technique. Forage accumulation and tiller density (TD) were also evaluated. Significant interaction effects (P < 0.05) between N rates and seasons were observed for the rest period, leaf lifespan (LLS), phyllochron, stem elongation rate (SER) and final leaf length (FLL). During winter, the rest period was shorter (40 vs. 50 days) in the pastures fertilized with 200 kg ha-¹ N. Conversely, in winter, the pastures fertilized with 100 kg ha-¹ N showed higher LLS, SER and phyllochron values, but lower FLL values. There was no isolated effect of N rates (P > 0.05) on forage accumulation rate; leaf appearance, elongation or senescence rates; leaf:stem ratio; or TD. However, the effect of seasons was significant for these variables, with the highest values occurring during spring and summer. The use of 200 kg ha-¹ N in Ipyporã grass pastures reduces the seasonality of forage production.

O objetivo foi avaliar os efeitos das doses anuais de 100 e 200 kg ha-¹ de nitrogênio (N) sobre as características morfogênicas e estruturais do capim-ipyporã, em lotação intermitente durante as estações do ano. O delineamento experimental foi em blocos ao acaso, com dois tratamentos e três repetições de área. Os pastos de capim-ipyporã foram submetidos ao pastejo por bovinos de corte. Foram avaliadas as características morfogênicas e estruturais do dossel forrageiro por meio da técnica de perfilhos marcados. Também foi avaliado o acúmulo de forragem e a densidade populacional de perfilhos (DPP). Foi observada interação significativa (P < 0,05) das doses de N e estações do ano para o período de descanso (PD), duração de vida das folhas (DVF), filocrono, taxa de alongamento de colmos (TAlC) e comprimento final das folhas (CFF). Durante o inverno, o PD foi menor (40 vs 50 dias) nos pastos adubados com 200 kg ha-¹ de N. Em contra partida, no inverno, os pastos adubados com 100 kg ha-¹ de N apresentaram maiores valores para DVF, filocrono e TAlC, e menores para o CFF. Não foi observado efeito isolado de doses de N (P > 0,05) para as taxas de acúmulo de forragem; de aparecimento, alongamento e de senescência de folhas, relação folha:colmo e para a DPP. No entanto, o efeito das estações foi significativo para estas variáveis, com os maiores valores observados durante a primavera e verão. O uso de 200 kg ha-¹ de N para pastos de capim-ipyporã promove redução da estacionalidade de produção da forrageira.

Rheological characterization of rhea (Rhea americana) eggs subjected to different storage periods / Caracterização reológica de ovos rhea (Rhea americana) submetidos a diferentes períodos de armazenamento

Eggs are used as food industry ingredients due to their functional properties. Eggs from different bird species are used in industrial processing; therefore, rheological experiments were carried out at steady state to obtain the flow curves and also at a dynamic state to study the rheological properties of greater rhea eggs. The viscoelastic behavior of the fluids as a function of the coagulation temperatures for albumen and yolk and of the oscillatory shear frequency was studied. Fifteen rhea eggs stored for up to 28 days at 10 °C were analyzed at 1, 7, 14, 21, and 28 days. The albumen and yolk fractions showed pseudoplastic rheological behavior with small initial flow shear and dependence on shear time, with albumen demonstrating thixotropy and the yolk showing rheopexy. In low shear rheological tests, thermal gelation of albumen was observed, presenting a first change in the elastic modulus around 56 °C, and a second from 78 °C. In the yolk, a change was observed from 66 °C, with more structural variations in the development of the gel at higher temperatures. For rhea eggs, the gel structuring (gelation) temperature of albumen (80 °C) and egg yolk (69 °C) did not undergo variations during the storage periods. Compared to commercial eggs, the higher viscosity and gelation temperatures presented by the rhea eggs can help determine the size of the industrial processing system as they can be submitted to higher temperatures without modifying protein structures and hindering the process.

Os ovos são usados como ingredientes da indústria alimentícia devido às suas propriedades funcionais. Ovos de diferentes espécies de aves podem ser usados no processamento industrial. Foram realizados experimentos reológicos em estado estacionário para obtenção das curvas de fluxo e também em estado dinâmico para estudar as propriedades reológicas dos ovos de emas Rhea americana. O comportamento viscoelástico dos fluidos em função das temperaturas de coagulação para albúmen e gema e da frequência oscilatória foi estudado. Foram analisados 15 ovos de rhea armazenados por até 28 dias a 10 °C em 1, 7, 14, 21 e 28 dias. As frações de albumina e gema mostraram comportamento reológico pseudoplástico com pequeno cisalhamento de fluxo inicial e dependência do tempo de cisalhamento, com albúmen demonstrando tixotropia e a gema mostrando reopexia. Em testes reológicos de cisalhamento baixo, observou-se gelificação térmica de albúmen, apresentando uma primeira mudança no módulo elástico em torno de 56 °C, e um segundo de 78 °C. Na gema, observou-se uma mudança a partir de 66 °C, com variações mais estruturais no desenvolvimento do gel a temperaturas mais elevadas. Para os ovos de rhea, a temperatura estruturante de gel (gelificação) de albumen (80 °C) e gema de ovo (69 °C) não sofreu variações durante os períodos de armazenamento. Em comparação com os ovos comerciais, as maiores temperaturas de viscosidade e gelificação apresentadas pelos ovos rhea podem ajudar a determinar o tamanho do sistema de processamento industrial, pois podem ser submetidos a temperaturas mais altas sem modificar estruturas proteicas e dificultar o processo.

Variability and genetic structure in fragments of Eugenia involucrata De Candolle established through microsatellite markers / Variabilidade e estruturação genética em fragmentos de Eugenia involucrata de Candolle utilizando marcadores microssatélites

Eugenia involucrata DC. is a forest species with high environmental and economic potential. The objective of this study was to quantify the genetic variability and analyzed the genetic structure of three natural fragments located in the central region of the Rio Grande do Sul state, Brazil. We used four microsatellite loci developed for the congener species Eugenia uniflora and using GenAlEx 6.5 software, parameters of genetic variability and its partition among and within fragments were estimated for each locus. We observed high levels of genetic variability (3.67 alleles per locus; HO = 0.815; HE = 0.625; FIS = 0.294), most of which (93%) were distributed within the fragments, suggesting that these individuals came from a single original population. Gene flow between fragments was high (2.35 to 4.56 migrants per generation), resulting in low genetic differentiation indexes (FST values ranging from 0.052 to 0.096). The fragments showed high genetic variability, distributed within the remnants themselves, and low genetic differentiation. Our results have repercussions for planning locally adapted germplasm collections for forest restoration programs, thereby avoiding the implantation of populations with an exogamous depression.(AU)

Eugenia involucrata DC. é uma espécie florestal com elevado potencial ambiental e econômico. O presente trabalho teve por objetivo quantificar a variabilidade e analisar a estruturação genética em três fragmentos naturais localizados na região central do estado do Rio Grande do Sul, Brasil. Com o emprego de quatro locos microssatélites desenvolvidos para a espécie congênere Eugenia uniflora e usando-se o software GenAlEx 6.5, foram estimados parâmetros de variabilidade genética, para cada loco, e sua partição entre e dentro dos fragmentos. Foram observados altos índices de variabilidade genética (3,67 alelos por loco; HO = 0,815; HE = 0,625; FIS = -0,294), com a maior proporção (93%) distribuída dentro dos fragmentos, sugerindo que os indivíduos estudados são provenientes de uma única população original. O fluxo gênico foi elevado entre os fragmentos, variando de 2,35 a 4,56 migrantes por geração, resultando em baixo índice de diferenciação genética (FST), entre 0,052 a 0,096. Os fragmentos estudados apresentam elevada variabilidade genética, a maior parte distribuída dentro dos próprios remanescentes, e baixa diferenciação genética. Os resultados observados têm repercussões no planejamento de coleta de germoplasma com adaptação local para programas de restauração florestal, assim evitando a implantação de populações com depressão exogâmica.(AU)

A comparative evaluation of methods for estimating the colostrum quality in sows / Avaliação comparativa de métodos para estimar a qualidade do colostro em porcas

Colostrum is the main source of immunoglobulins (Ig) for neonate piglets and plays a crucial role within the health and growth of the piglet. Currently in pig farming, there are still no widespread practical methods for measuring the Ig concentration in colostrum at herd level. We evaluated sows' colostrum IgG concentration using an optical and a digital Brix refractometer and their performance was correlated to an IgG ELISA test, and flow cytometry. Colostrum concentrations of IgG and IgA averaged 74.05 ± 21.37mg/mL and 20.2 ± 5.32mg/mL respectively. The mean value of the Brix percentages for optical refractometer was 26.32%, and for digital was 28.32%. The Brix refractometer measurements of colostrum samples presented high correlation for IgG content analyzed by ELISA (Optical = 0.74, Digital = 0.87; P <0.001). Considering the immunophenotyping, the values for IgG and IgA lymphoblasts indicated a highly significant relationship to ELISA (IgG=0.77, IgA=0.84; P<0.001). The Brix refractometer can be considered a useful tool to be included in a colostrum monitoring program to improve potentially neonatal health. In addition, we demonstrated that flow cytometry can be an important tool to analyze and characterize the immunological potential of sow colostrum.(AU)

O colostro é a principal fonte de imunoglobulinas (Ig) para leitões recém-nascidos e desempenha um papel crucial na saúde e no crescimento dos leitões. Atualmente, na suinocultura, ainda não existem métodos amplamente utilizados na prática de produção para medir a concentração de imunoglobulinas no colostro suíno. Avaliou-se a concentração de IgG no colostro de porcas usando refratômetros Brix óptico e digital, e o desempenho foi comparado com ELISA e citometria de fluxo. As concentrações de IgG e IgA no colostro foram 74,05 ± 21,37mg/mL e 20,2 ± 5,32mg/mL, respectivamente. A percentagem de Brix média das amostras de colostro para o refratômetro óptico foi 26,32%, e para o digital foi 28,32%. As medições dos refratômetros de Brix apresentaram elevada correlação com a concentrações de IgG medidas por ELISA (óptico=0,74, digital=0,87; P<0,001). Considerando a imunofenotipagem, os valores dos linfoblastos IgG e IgA apresentaram alta correlação com o ELISA (IgG=0,77, IgA=0,84; P<0,001). O refratômetro Brix pode ser considerado uma ferramenta útil para ser incluída em um programa de monitoramento de colostro para melhorar a saúde neonatal. Além disso, foi demonstrado que a citometria de fluxo pode ser uma ferramenta importante para analisar e caracterizar o potencial imunológico do colostro de porcas.(AU)

Cytometric blood phenotyping in free-living white-eyed parakeet (Psittacara leucophthalmus)

ABSTRACT: This study aimed at performing cytometric phenotyping of the blood samples from free-living, young white-eyed parakeets (Psittacara leucophthalmus), stained with 3,3-dihexyloxacarbocyanine [DiOC6(3)]. DiOC6(3)-stained whole blood samples from 19 free-living, young white-eyed parakeets were analyzed by flow cytometry and cell types were distinguished by their typical fluorescence in blue laser channel (FL-1) and SSC (side scatter). It was possible to differentiate erythrocytes (58.3±13.6) from leukocytes (32.4±13.1) and some of the leucocyte subpopulations: lymphocytes/thrombocytes (29.7±7.7), monocytes (30.6±8.5), and granulocytes (5.9-26). However, lymphocytes and thrombocytes could not be sorted in the plots. Our study determined that the predominant population in white-eyed parakeet (P. leucophthalmus) was lymphocytes, thrombocytes, and monocytes in the leucocytes gates in comparison to the granulocyte population. The cytometry method and use of DiOC6(3) stain was available for parakeets blood samples and can be studied and applied to other species of parrots.

RESUMO: Este estudo teve como objetivo realizar a fenotipagem citométrica com 3,3-di-hexiloxacarbocianina [DiOC6 (3)] de amostras de sangue de maritacas jovens de vida-livre (Psittacara leucophthalmus). As amostras de sangue total, coradas com DiOC6(3) de 19 maritacas de vida livre, foram analisadas por citometria de fluxo e os tipos de células foram distinguidos por sua fluorescência típica no canal laser azul (FL-1) e SSC (dispersão lateral). Foi possível diferenciar eritrócitos (58,3±13,6) de leucócitos (32,4±13,1) e algumas subpopulações de leucócitos: linfócitos/trombócitos (29,7±7,7), monócitos (30,6±8,5) e granulócitos (5,9-26), entretanto, linfócitos e trombócitos não puderam ser diferenciados em duas populações distintas. Nosso estudo determinou que a população predominante P. leucophthalmus foi mononuclear agranulocítica em comparação com a taxa de aquisição da população granulocítica. A metodologia de citometria de fluxo com uso da coloração de DiOC6(3) foi aplicável a amostras sanguíneas das maritacas e pode ser estudado e aplicado para outras espécies de psitacídeos.

Cytometric blood phenotyping in free-living white-eyed parakeet (Psittacara leucophthalmus) / Fenotipagem citométrica do sangue de maritacas jovens de vida-livre (Psittacara leucophthalmus)

This study aimed at performing cytometric phenotyping of the blood samples from free-living, young white-eyed parakeets (Psittacara leucophthalmus), stained with 3,3-dihexyloxacarbocyanine [DiOC6(3)]. DiOC6(3)-stained whole blood samples from 19 free-living, young white-eyed parakeets were analyzed by flow cytometry and cell types were distinguished by their typical fluorescence in blue laser channel (FL-1) and SSC (side scatter). It was possible to differentiate erythrocytes (58.3±13.6) from leukocytes (32.4±13.1) and some of the leucocyte subpopulations: lymphocytes/thrombocytes (29.7±7.7), monocytes (30.6±8.5), and granulocytes (5.9-26). However, lymphocytes and thrombocytes could not be sorted in the plots. Our study determined that the predominant population in white-eyed parakeet (P. leucophthalmus) was lymphocytes, thrombocytes, and monocytes in the leucocytes gates in comparison to the granulocyte population. The cytometry method and use of DiOC6(3) stain was available for parakeets blood samples and can be studied and applied to other species of parrots.(AU)

Este estudo teve como objetivo realizar a fenotipagem citométrica com 3,3-di-hexiloxacarbocianina [DiOC6 (3)] de amostras de sangue de maritacas jovens de vida-livre (Psittacara leucophthalmus). As amostras de sangue total, coradas com DiOC6(3) de 19 maritacas de vida livre, foram analisadas por citometria de fluxo e os tipos de células foram distinguidos por sua fluorescência típica no canal laser azul (FL-1) e SSC (dispersão lateral). Foi possível diferenciar eritrócitos (58,3±13,6) de leucócitos (32,4±13,1) e algumas subpopulações de leucócitos: linfócitos/trombócitos (29,7±7,7), monócitos (30,6±8,5) e granulócitos (5,9-26), entretanto, linfócitos e trombócitos não puderam ser diferenciados em duas populações distintas. Nosso estudo determinou que a população predominante P. leucophthalmus foi mononuclear agranulocítica em comparação com a taxa de aquisição da população granulocítica. A metodologia de citometria de fluxo com uso da coloração de DiOC6(3) foi aplicável a amostras sanguíneas das maritacas e pode ser estudado e aplicado para outras espécies de psitacídeos.(AU)

Cytometric blood phenotyping in free-living white-eyed parakeet (Psittacara leucophthalmus) / Fenotipagem citométrica do sangue de maritacas jovens de vida-livre (Psittacara leucophthalmus)

This study aimed at performing cytometric phenotyping of the blood samples from free-living, young white-eyed parakeets (Psittacara leucophthalmus), stained with 3,3-dihexyloxacarbocyanine [DiOC6(3)]. DiOC6(3)-stained whole blood samples from 19 free-living, young white-eyed parakeets were analyzed by flow cytometry and cell types were distinguished by their typical fluorescence in blue laser channel (FL-1) and SSC (side scatter). It was possible to differentiate erythrocytes (58.3±13.6) from leukocytes (32.4±13.1) and some of the leucocyte subpopulations: lymphocytes/thrombocytes (29.7±7.7), monocytes (30.6±8.5), and granulocytes (5.9-26). However, lymphocytes and thrombocytes could not be sorted in the plots. Our study determined that the predominant population in white-eyed parakeet (P. leucophthalmus) was lymphocytes, thrombocytes, and monocytes in the leucocytes gates in comparison to the granulocyte population. The cytometry method and use of DiOC6(3) stain was available for parakeets blood samples and can be studied and applied to other species of parrots.(AU)

Este estudo teve como objetivo realizar a fenotipagem citométrica com 3,3-di-hexiloxacarbocianina [DiOC6 (3)] de amostras de sangue de maritacas jovens de vida-livre (Psittacara leucophthalmus). As amostras de sangue total, coradas com DiOC6(3) de 19 maritacas de vida livre, foram analisadas por citometria de fluxo e os tipos de células foram distinguidos por sua fluorescência típica no canal laser azul (FL-1) e SSC (dispersão lateral). Foi possível diferenciar eritrócitos (58,3±13,6) de leucócitos (32,4±13,1) e algumas subpopulações de leucócitos: linfócitos/trombócitos (29,7±7,7), monócitos (30,6±8,5) e granulócitos (5,9-26), entretanto, linfócitos e trombócitos não puderam ser diferenciados em duas populações distintas. Nosso estudo determinou que a população predominante P. leucophthalmus foi mononuclear agranulocítica em comparação com a taxa de aquisição da população granulocítica. A metodologia de citometria de fluxo com uso da coloração de DiOC6(3) foi aplicável a amostras sanguíneas das maritacas e pode ser estudado e aplicado para outras espécies de psitacídeos.(AU)

Blood typing in positive DEA 1 dogs: comparative analysis between immunochromatography, hemagglutination and flow cytometry / Tipificação sanguínea em cães AEC 1 positivo: análise comparativa entre a imunocromatografia, hemoaglutinação e citometria de fluxo

Blood typing techniques have been improved to ensure greater safety for transfusion procedures. Typification for the DEA 1 antigen through flow cytometry should offer more reliability to routine immunohematology in donor and recipient dogs. Currently, the DEA 1 group is starting to be an autosomal dominant allelic system with the DEA 1 negative type and its variations of positivity. The present study investigated the DEA 1 antigen using the techniques of immunochromatography, hemagglutination and flow cytometry. Among the positive animals for the DEA 1 group, typified by flow cytometry, medium intensities of fluorescence were found, which are indicative of weak, moderate and strong antigenicity. This enabled the division of the DEA 1 group into weak positive, moderate positive and strong positive. The blood typing techniques for the DEA 1 group by flow cytometry, agglutination and immunochromatography had positive (Spearman r=0.70) and statistically significant (p>0.0001) correlations.

As técnicas de tipificação sanguínea vêm sendo aperfeiçoadas para garantir maior segurança aos procedimentos transfusionais. A tipificação para o antígeno AEC 1 com o emprego da citometria de fluxo poderá oferecer mais confiabilidade à rotina da imunohematologia em cães doadores e receptores. Na atualidade, o grupo AEC 1 passou a ser denominado como um sistema alélico autossômico dominante com o tipo AEC 1 negativo e suas variações de positividade. O presente trabalho comparou os resultados de três técnicas utilizadas para a pesquisa do antígeno AEC 1: cromatografia; hemoaglutinação e citometria de fluxo. Dentro dos indivíduos positivos para o grupo AEC 1, tipificados pela citometria de fluxo, foram encontradas intensidades médias de fluorescência indicadoras de antigenicidade fraca, moderada e forte, podendo-se dividir o grupo AEC 1 em positivo fraco, positivo moderado e positivo forte. As técnicas de tipificação sanguínea para o grupo AEC 1 por cromatografia, hemoaglutinação e citometria de fluxo apresentaram correlação positiva (Spearman r=0,70) e estatisticamente significativa (p<0,0001).

Infrared thermography and Doppler ultrasonography to evaluate the effects of scrotal insulation on testicular blood flow dynamics in bulls / Termografia infravermelho e ultrassonografia Doppler na avaliação dos efeitos da insulação escrotal sobre o fluxo sanguíneo testicular em touros

The aim of this study was to evaluate the dynamics of the scrotal temperature, sperm quality and testicular blood flow by using infrared thermography and Doppler ultrasonography in bulls submitted to scrotal insulation. Braford bulls (n = 8) at 18 months of age, were assigned into the following groups: insulated for 72 h (G 72; n = 2), 96 h (G 96, n = 2), 120 h (G 120, n = 2), and control animals (CON; n = 2) that remained without insulation. Infrared thermography and Doppler ultrasonography parameters were measured at four different time points: immediately after the scrotal insulation (M0), within 10 min (M10), 30 min (M30) and 60 min (M60) after scrotal insulation. The sperm quality was evaluated weekly (S1/S12). The data were analyzed by ANOVA, t-test (paired) and Pearson's correlation with a significance level of 5%. None of the observed variables were different between the insulated groups (P > 0.05). Insulated animals showed higher scrotal temperature in M0 compared to that in the M10, M30 and M60 periods (P < 0.05). There was no difference in the pulsatility and resistive indexes after scrotal insulation. However, blood flow velocity was higher in M10 compared to that in the M0, M30 and M60 periods (P < 0.05). The sperm quality was higher (P < 0.05) in all twelve collections from the control group compared with the insulated groups. Scrotal insulation resulted in changes in the sperm quality, scrotal temperature and testicular blood flow velocity.(AU)

O objetivo deste estudo foi avaliar a dinâmica da temperatura escrotal, a qualidade espermática e o fluxo sanguíneo testicular utilizando a termografia infravermelho e a ultrassonografia Doppler em touros submetidos a insulação escrotal. Touros Braford (n=8) aos 18 meses de idade, foram distribuídos nos seguintes grupos: insulados por 72 h (G 72; n=2), 96 h (G 96; n=2), 120 h (G120, n=2), e animais controle (CON; n=2) que permaneceram sem insulação. Os parâmetros de termografia infravermelha e ultrassonografia Doppler foram medidos em quatro diferentes momentos: imediatamente após a insulação escrotal (M0), aos 10 min (M10), 30 min (M30) e 60 min (M60) após a insulação escrotal. A qualidade espermática foi avaliada semanalmente (S1 / S12). Os dados foram analisados por ANOVA, teste t (pareado) e correlação de Pearson com nível de significância de 5%. Nenhuma das variáveis observadas foi diferente entre os grupos insulados (P > 0,05). Os animais insulados apresentaram maior temperatura escrotal em M0 quando comparados aos M10, M30 e M60 (P < 0,05). Não houve diferença nos índices de pulsatilidade e resistividade após a insulação escrotal. No entanto, a velocidade do fluxo sanguíneo foi maior em M10 em relação aos períodos M0, M30 e M60 (P < 0,05). A qualidade espermática foi maior (P < 0,05) em todas as doze coletas do grupo controle em comparação com os grupos insulados. A insulação escrotal resultou em mudanças na qualidade espermática, temperatura escrotal e na velocidade do fluxo sanguíneo testicular.(AU)

Comparação das artérias carótidas comuns de equinos e muares por ultrassonografia modo-B e Doppler espectral e a relação com a massa corpórea / Comparison of the common carotid arteries of horses and mules by B-mode and Doppler spectral ultrasonography and the relation with body mass

A ultrassonografia convencional e o Doppler espectral nas artérias carótidas comuns em equinos e muares são considerados escassos, diferentemente do que ocorre na medicina humana. Este trabalho propôs comparar as artérias carótidas comuns de equinos e muares por ultrassonografia modo-B e Doppler espectral, além de verificar as diferenças dessas variáveis entre os gêneros desses animais e a relação com a massa corpórea. Foram avaliados os seguintes parâmetros: massa corpórea, diâmetros das artérias, espessura da camada íntima-média (EIM), índice de resistividade (IR), índice de pulsatilidade (IP), velocidade sistólica (VS), velocidade diastólica (VD) e velocidade média (VM). Salvo a massa corpórea, esses parâmetros foram obtidos de três regiões (cranial, médio e caudal) e submetidos à análise conjuntamente. Os diâmetros das artérias carótidas comuns são diferentes entre equinos e muares, com valores menores nos equinos. O IR, o IP, a VS e a VM diferiram entre equinos e muares, sendo maiores nos equinos, e a VD superior nos muares. Não foi observada diferença das variáveis do modo-B e Doppler entre gêneros nos equinos, diferentemente dos muares, cujos machos apresentaram valores maiores do diâmetro, do IR e do IP, mas menores da VS e da VM. A massa corpórea não influenciou as variáveis do modo-B, independentemente do gênero, mas apresenta correlação significativa nas variáveis do modo Doppler. As artérias carótidas comuns de equinos e muares são diferentes pelos exames ultrassonográficos modo-B e Doppler espectral. O gênero não influencia no modo-B e no Doppler nos equinos, porém influencia parcialmente nos muares. A massa corpórea de equinos e de muares, independentemente do gênero, não tem associação com as variáveis do modo-B, apenas com o Doppler.(AU)

Conventional ultrasound and spectral Doppler in the common carotid arteries in horses and mules are considered scarce, different from human medicine. The aim of this study was to compare the common carotid arteries of horses and mules by B-mode ultrasonography and spectral Doppler ultrasonography, as well as to verify the differences of these variables between their genders and the relation with body mass. The following parameters were evaluated: body mass, artery diameter, intima-media thickness (EIM), resistivity index (IR), pulsatility index (IP), systolic velocity (VS), diastolic velocity (VD) and average velocity (VM). Besides the body mass, the other variables were obtained from three regions (cranial, medium and caudal) and analyzed together. The diameters of the common carotid arteries are different between horses and mules, being smaller in horses. The IR, IP, VS and VM differed between horses and mules, being higher in the horses, but the VD was higher in mules. No difference in the variables in B-mode and Doppler between gender were observed in horses, different from mules, in which the diameters, IR and IP values were higher in males and the VS and VM was higher in females. Body mass did not influence B-Mode, both for horses and mules. A significant correlation was observed for Doppler. The common carotid arteries of horses and mules are different by ultrasound scans B-mode and spectral Doppler. Gender does not influence the B-Mode and Doppler variables in horses, but can in mules. The body mass of horses and mules, regardless of gender, is not associated with B-mode variables, but with Doppler variables.(AU)

Eficiência de duas técnicas de recuperação de espermatozoides epididimários de cães e avaliação seminal pós-criopreservação / [Efficiency of two techniques for recovering epididymal spermatozoids from dogs and seminal evaluation post cryopreservation]

O objetivo deste trabalho foi avaliar a recuperação de espermatozoides epididimários de cães castrados, utilizando as técnicas de fluxo retrógrado (FR) e flutuação (FL) em diluidor Tris-gema, antes e após a criopreservação. Foram coletados 30 complexos testículo-epididímos (CTE), sendo 15 para FR e 15 para FL, e, logo após a recuperação dos espermatozoides, foram analisadas as alterações morfológicas nessas células espermáticas. Após a adição do diluidor, foram avaliados os parâmetros de motilidade total (MOT) e vigor (V) espermáticos. O sêmen pós-criopreservado foi submetido ao teste de termorresistência nos tempos T0, T30, T60 e T90 minutos, além da avaliação das membranas plasmática e acrossomal por sondas fluorescentes. Não houve diferença estatística entre as técnicas quanto à MOT e ao vigor no sêmen diluído (FR-MOT: 82,3% e V: 3,4; FL-MOT: 79,6% e V: 3,2) e pós-criopreservado (FR-MOT: 34% e V: 2,8; FL-MOT: 30% e V: 2,7). A partir do T30, houve diferença significativa quanto à MOT e ao vigor nas técnicas utilizadas, e o tempo também prejudicou o acrossoma espermático a partir do T30. Conclui-se que as técnicas de recuperação de espermatozoides epididimários de cães castrados, testadas neste trabalho, podem ser utilizadas para refrigeração e criopreservação de sêmen.(AU)

The objective of this work was to evaluate the recovery of epididymal spermatozoa from castrated dogs using retrograde flow (FL) and flotation (FL) techniques in Tris-egg yolk diluent, before and after cryopreservation. Thirty testicle-epididymal complexes (CTE) were collected, 15 for FR and 15 for FL and soon after spermatozoid recovery, morphological changes in these spermatic cells were analyzed. After addition of the diluent, the parameters of total motility (MOT) and vigor (V) were evaluated. The post-cryopreserved semen was submitted to thermoresistance (TTR) test at T0, T30, T60 and T90 minutes, as well as the plasma and acrosomal membrane evaluation by fluorescent probes. There was no statistically significant difference between techniques tested for MOT and vigor in the diluted semen (FR-MOT: 82.3% and V: 3.4, FL-MOT: 79.6% and V: 3.2) and post-cryopreserved (FR-MOT: 34% and V: 2.8, FL-MOT: 30% and V: 2.7). From the T30 there was a significant difference regarding MOT and vigor in the used techniques, and the time also damaged the spermatic acrosome from the T30. It is concluded that the epididymal spermatozoa recovering techniques from castrated dogs, tested in this study, can be used for semen refrigeration and cryopreservation.(AU)

Comparação das artérias carótidas comuns de equinos e muares por ultrassonografia modo-B e Doppler espectral e a relação com a massa corpórea / Comparison of the common carotid arteries of horses and mules by B-mode and Doppler spectral ultrasonography and the relation with body mass

A ultrassonografia convencional e o Doppler espectral nas artérias carótidas comuns em equinos e muares são considerados escassos, diferentemente do que ocorre na medicina humana. Este trabalho propôs comparar as artérias carótidas comuns de equinos e muares por ultrassonografia modo-B e Doppler espectral, além de verificar as diferenças dessas variáveis entre os gêneros desses animais e a relação com a massa corpórea. Foram avaliados os seguintes parâmetros: massa corpórea, diâmetros das artérias, espessura da camada íntima-média (EIM), índice de resistividade (IR), índice de pulsatilidade (IP), velocidade sistólica (VS), velocidade diastólica (VD) e velocidade média (VM). Salvo a massa corpórea, esses parâmetros foram obtidos de três regiões (cranial, médio e caudal) e submetidos à análise conjuntamente. Os diâmetros das artérias carótidas comuns são diferentes entre equinos e muares, com valores menores nos equinos. O IR, o IP, a VS e a VM diferiram entre equinos e muares, sendo maiores nos equinos, e a VD superior nos muares. Não foi observada diferença das variáveis do modo-B e Doppler entre gêneros nos equinos, diferentemente dos muares, cujos machos apresentaram valores maiores do diâmetro, do IR e do IP, mas menores da VS e da VM. A massa corpórea não influenciou as variáveis do modo-B, independentemente do gênero, mas apresenta correlação significativa nas variáveis do modo Doppler. As artérias carótidas comuns de equinos e muares são diferentes pelos exames ultrassonográficos modo-B e Doppler espectral. O gênero não influencia no modo-B e no Doppler nos equinos, porém influencia parcialmente nos muares. A massa corpórea de equinos e de muares, independentemente do gênero, não tem associação com as variáveis do modo-B, apenas com o Doppler.(AU)

Conventional ultrasound and spectral Doppler in the common carotid arteries in horses and mules are considered scarce, different from human medicine. The aim of this study was to compare the common carotid arteries of horses and mules by B-mode ultrasonography and spectral Doppler ultrasonography, as well as to verify the differences of these variables between their genders and the relation with body mass. The following parameters were evaluated: body mass, artery diameter, intima-media thickness (EIM), resistivity index (IR), pulsatility index (IP), systolic velocity (VS), diastolic velocity (VD) and average velocity (VM). Besides the body mass, the other variables were obtained from three regions (cranial, medium and caudal) and analyzed together. The diameters of the common carotid arteries are different between horses and mules, being smaller in horses. The IR, IP, VS and VM differed between horses and mules, being higher in the horses, but the VD was higher in mules. No difference in the variables in B-mode and Doppler between gender were observed in horses, different from mules, in which the diameters, IR and IP values were higher in males and the VS and VM was higher in females. Body mass did not influence B-Mode, both for horses and mules. A significant correlation was observed for Doppler. The common carotid arteries of horses and mules are different by ultrasound scans B-mode and spectral Doppler. Gender does not influence the B-Mode and Doppler variables in horses, but can in mules. The body mass of horses and mules, regardless of gender, is not associated with B-mode variables, but with Doppler variables.(AU)

Ultrassonografia Dopper em ovelhas / Doppler ultrasonography in sheep

O uso da técnica de ultrassonografia em modo B, como uma ferramenta pouco invasiva na reprodução animal, passou por uma evolução significativa na pesquisa e na prática. Na exploração comercial de animais de produção seu uso é, praticamente, concentrado ao manejo reprodutivo. Embora a ultrassonografia convencional em Modo B tenha passado por avanços tecnológicos esta não possibilita o acesso às informações da função do órgão, demonstradas pela perfusão vascular. Em ovelhas, o estudo da hemodinâmica e funcionalidade do útero, ovário e suas estruturas podem ser úteis para avaliar a viabilidade de programas reprodutivos e, por conseguinte, exibirem impacto econômico diante do uso da modalidade colorida ou pulsada (ou espectral) da ultrassonografia doppler. A ultrassonografia doppler é baseada no efeito Doppler na qual as frequências dos feixes de ultrassom refletidos pelos eritrócitos em movimento variam conforme as células se movem com diferentes velocidades. No tocante a reprodução de ovelhas, uma série de estratégias tem sido apresentadas para uso desta tecnologia, dada a necessidade e intempéries apresentadas a campo. Suas principais aplicações baseiam-se na avaliação da gestação, hemodinâmica uterina, funcionalidade luteal e respostas à superovulação, dentre outras. O presente trabalho teve como objetivo apresentar os aspectos relacionados ao uso e aplicações da ultrassonografia doppler espectral e colorida na reprodução de ovelhas.

The use of B-mode ultrasound technique, as a little invasive tool in animal reproduction, has undergone a significant evolution in research and practice. In farm animals, its use is practically concentrated on reproductive management. Although conventional B-mode ultrasonography has undergone technological advances, it does not allow access to organ function information, as demonstrated by vascular perfusion. In sheep, the study of the hemodynamics and functionality of the uterus, ovary and its structures can be useful to assess reproductive programs viability and, therefore, exhibit economic impact when using the color or pulsed (or spectral) modalityof doppler ultrasound. Doppler ultrasonography is based on the Doppler effect in which the frequencies of the ultrasound beams reflected by the erythrocytes in motion vary as the cells move at different speeds. A lot of strategies have been presented using this technology, related to reproduction of sheep animals, in farm conditions. Applications are based on the evaluation of pregnancy, uterine hemodynamics, luteal functionality and responses to superovulation, among others. This work aimed to present aspects regarding to applications of spectral and color doppler ultrasound in sheep reproduction.

Apamin-induced alterations in J774 1. 6 macrophage metabolism / [Alterações induzidas por apamina no metabolismo de macrófagos J774 1. 6]

Among the immune system cells, macrophages have an important role. Apamin, a bee venom constituent, is important in the defense of these insects. Thus, we aimed to evaluate the metabolism of J774 1.6 macrophage cell line when exposed to isolated and purified apamin, using cytotoxicity tests by MTT reduction and analysis by flow cytometry (apoptosis / necrosis, production of reactive oxygen species (ROS), membranous lipoperoxidation (LPO), electrical potential of the mitochondrial membrane (mMP) and DNA fragmentation). None of the tested concentrations (10 to 100µg/mL) were cytotoxic according to MTT reductions. Apoptosis rates decreased at concentrations of 2.5, 5.0, and 10.0µg/mL (P<0.05), while necrosis rates increased (P<0.05). However, rates of healthy cells at the highest tested concentration (10µg/mL) did not differ from control (P>0.05). Apamin did not alter ROS, LPO, or DNA fragmentation. Therefore, all analyzed concentrations (1.25 to 10µg/mL) decreased mMP. Such decrease in apoptosis might be due to a suppression of mitochondrial pro-apoptotic messengers, as this peptide causes no oxidative stress, lipid peroxidation, and DNA damage. Highly sensitive techniques are majorly important for proper interpretation of cellular toxicity mechanisms, combined with routine laboratory methods.(AU)

Das células do sistema imunológico, macrófagos desempenham um papel fundamental. Apamina, constituinte do veneno de abelhas, é importante na defesa destas. Objetivou-se avaliar o metabolismo da linhagem de macrófagos J774 1.6 expostos à apamina isolada e purificada, avaliando-se citotoxicidade por redução de MTT e análise por citometria de fluxo (apoptose / necrose, produção de espécies reativas de oxigênio (EROs), lipoperoxidação membranosa (LPO), potencial elétrico da membrana mitocondrial (MMP) e fragmentação do DNA). Nenhuma concentração testada (10 a 100µg / mL) foi citotóxica. As taxas de apoptose diminuíram nas concentrações 2,5, 5,0 e 10,0µg / mL (P<0,05), enquanto as de necrose aumentaram (P<0,05). Entretanto, as taxas de células saudáveis na maior concentração testada (10µg / mL) não diferiram do controle (P>0,05). A apamina não alterou as ERO, a LPO nem a fragmentação do DNA. Portanto, todas as concentrações analisadas (1,25 a 10µg / mL) diminuíram a mMP. Tal diminuição na apoptose pode ser por uma supressão de mensageiros pró-apoptóticos mitocondriais, já que este peptídeo não causa estresse oxidativo, peroxidação lipídica nem dano ao DNA. Técnicas altamente sensíveis são importantes para adequada interpretação dos mecanismos de citotoxicidade.(AU)

Effects of different concentrations of sodium azide and chloramphenicol on the preservation of raw milk samples / Efeitos de diferentes concentrações de azida sódica e cloranfenicol na preservação de amostras de leite cru

The preservation of milk samples for microbiological analyses by the Brazilian Network of Milk Quality Control Laboratories requires the addition of preservatives to maintain the microbiota from the time of sample collection to the moment of analysis. The number of microorganisms can change as a result of the active ingredients and concentration of the preservative, as well as due to interactions between the preservatives, incubation time, and packaging temperature. The objective of this research was to evaluate the conservation potential of different concentrations of sodium azide and chloramphenicol on the analytical shelf life of milk samples. Two farms were selected, one with a low bacterial count and one with a high bacterial count. The milk was dispensed into sterile vials and tested after the addition of the usual concentrations of sodium azide and chloramphenicol, doubled concentrations, tripled concentrations, and as a control, without preservatives. The samples were incubated at 3 ± 1 °C, 6 ± 1 °C, and 9 ± 1 °C for 14 days and analyzed daily for their bacterial count by flow cytometry. The tripled preservative concentrations improved conservation, increasing the timespan of the analytical viability of the samples without altering the results.(AU)

A conservação das amostras de leite destinadas para análises microbiológicas pela Rede Brasileira de Laboratórios de Controle da Qualidade do Leite requer adição de conservantes para a preservação da microbiota existente desde o momento da coleta até as análises. O número de microrganismos pode apresentar alterações decorrentes do princípio ativo e concentração do conservante, e ainda entre as interações conservante, tempo de incubação e temperatura de acondicionamento. O objetivo deste trabalho foi avaliar o potencial de conservação de diferentes concentrações de azida sódica e cloranfenicol sobre a vida útil analítica de amostras de leite. Foram selecionadas duas fazendas, sendo uma com baixa contagem bacteriana e outra com alta contagem bacteriana. O leite foi fracionado em frascos estéreis e testado nas seguintes condições: pastilhas com a concentração usual de azida sódica e cloranfenicol, com dupla concentração, com tripla concentração e sem a adição do conservante. As amostras foram incubadas por quatorze dias a 3 ± 1 °C, 6 ± 1 °C e 9 ± 1 °C, e analisadas diariamente por citometria de fluxo para a determinação da contagem bacteriana. A tripla concentração do conservante demonstrou maior conservação, possibilitando o aumento da viabilidade analítica das amostras sem alteração nos resultados.(AU)

Ultrassonografia Dopper em ovelhas / Doppler ultrasonography in sheep

O uso da técnica de ultrassonografia em modo B, como uma ferramenta pouco invasiva na reprodução animal, passou por uma evolução significativa na pesquisa e na prática. Na exploração comercial de animais de produção seu uso é, praticamente, concentrado ao manejo reprodutivo. Embora a ultrassonografia convencional em Modo B tenha passado por avanços tecnológicos esta não possibilita o acesso às informações da função do órgão, demonstradas pela perfusão vascular. Em ovelhas, o estudo da hemodinâmica e funcionalidade do útero, ovário e suas estruturas podem ser úteis para avaliar a viabilidade de programas reprodutivos e, por conseguinte, exibirem impacto econômico diante do uso da modalidade colorida ou pulsada (ou espectral) da ultrassonografia doppler. A ultrassonografia doppler é baseada no efeito Doppler na qual as frequências dos feixes de ultrassom refletidos pelos eritrócitos em movimento variam conforme as células se movem com diferentes velocidades. No tocante a reprodução de ovelhas, uma série de estratégias tem sido apresentadas para uso desta tecnologia, dada a necessidade e intempéries apresentadas a campo. Suas principais aplicações baseiam-se na avaliação da gestação, hemodinâmica uterina, funcionalidade luteal e respostas à superovulação, dentre outras. O presente trabalho teve como objetivo apresentar os aspectos relacionados ao uso e aplicações da ultrassonografia doppler espectral e colorida na reprodução de ovelhas.(AU)

The use of B-mode ultrasound technique, as a little invasive tool in animal reproduction, has undergone a significant evolution in research and practice. In farm animals, its use is practically concentrated on reproductive management. Although conventional B-mode ultrasonography has undergone technological advances, it does not allow access to organ function information, as demonstrated by vascular perfusion. In sheep, the study of the hemodynamics and functionality of the uterus, ovary and its structures can be useful to assess reproductive programs viability and, therefore, exhibit economic impact when using the color or pulsed (or spectral) modalityof doppler ultrasound. Doppler ultrasonography is based on the Doppler effect in which the frequencies of the ultrasound beams reflected by the erythrocytes in motion vary as the cells move at different speeds. A lot of strategies have been presented using this technology, related to reproduction of sheep animals, in farm conditions. Applications are based on the evaluation of pregnancy, uterine hemodynamics, luteal functionality and responses to superovulation, among others. This work aimed to present aspects regarding to applications of spectral and color doppler ultrasound in sheep reproduction.(AU)