Epizootiology of canine distemper in naturally infected dogs in Goiânia, Brazil / Epizootiologia da cinomose em cães naturalmente infectados em Goiânia, Brasil

Although the epizootiological profile of canine distemper in Goiânia is unknown, there is clinical evidence for a high incidence of canine distemper virus (CDV) infection among dogs. Therefore, this study determined the epizootiological characteristics of canine distemper in naturally infected dogs. Data of 46 dogs that tested positive for the CDV based on immunochromatography or reverse transcription-polymerase chain reaction were collected. Data on the sex, breed, age, and vaccination status were obtained from these dogs, and extraneural and neural sign analyses were performed. Although, the infected dogs belonged to both sexes, different breeds, and different age groups, a greater proportion of cases were seen in adults (1-6 years), undefined breeds, and unvaccinated dogs. Among the CDV-positive dogs, 10.87% had been vaccinated. In addition, 4.35% showed neural signs, 8.69% showed extraneural signs, and 86.96% showed both. High lethality was observed, with viral antigen and/or DNA detected in 82.61% dead dogs. Only 8.70% of the total CDV-infected dogs remained alive at the time of their assessment.

Embora o perfil epizootiológico da cinomose canina em Goiânia seja desconhecido, há evidencia clínica para alta incidência da infecção pelo vírus da cinomose (CDV) nos cães. Este estudo objetivou determinar as características epizootiológicas da cinomose em cães naturalmente infectados. Dados de 46 cães positivos por imunocromatografia ou reação em cadeia da polimerase via transcriptase reversa para o CDV foram coletados. Dados sobre sexo, raça, idade, estado vacinal foram obtidos desses cães, e os sinais extraneurais e neurais foram analisados. Animais de ambos os sexos, diferentes raças e idades foram acometidos. A maior proporção de casos foi vista em adultos (de um a seis anos), sem raça definida e não vacinados. Dentre os cães positivos, 10,87% haviam sido vacinados. Em adição, 4,35% apresentaram sinais neurais, 8,69% sinais extraneurais e 86,96% mostraram ambos. Alta letalidade foi observada, com o antígeno viral e/ou DNA identificado em 82,61% dos cães que foram a óbito. Apenas 8,7% dos cães infectados permaneceram vivos até o momento da avaliação.

Occurrence of Babesia vogeli, Mycoplasma spp., Ehrlichia canis and Anaplasma spp. in a hospital dog population of western Paraná / Ocorrência de Babesia vogeli, Mycoplasma spp., Ehrlichia canis e Anaplasma spp. em uma população hospitalar de cães do Oeste do Paraná

Ehrlichia canis, Anaplasma platys, and Babesia vogeli are frequently detected in the veterinary routine with varied pathogenesis that can lead to death, mainly in co-infections. Although canine hemotropic mycoplasmas are considered of low clinical importance, they have recently gained prominence in molecular research. The present study aimed to analyze two hospital populations of dogs, randomly selected from the year 2013 and 2015, from the municipalities of Toledo (n=68) and Cascavel (n=107). Direct examination of blood smears, serology, and PCR were used to detect the presence of E. canis, A. platys, B. vogeli and Mycoplasma sp. Direct blood smear examination was negative for the investigated agents in all samples. Serum immunochromatography (SensPERT ™, VetAll Laboratories, Korea) in 175 animals showed that only 4% (n = 7) had anti-E. canis antibodies, while 60% (n = 105) were positive for Anaplasma sp. All PCR samples were negative for E. canis, while 18.28% (n = 32) were positive for A. platys, 3.42% (n = 6) positive for Babesia vogeli, and 7.41% (n = 13) positive for Mycoplasma sp. The study revealed the presence of A. platys in Toledo and Cascavel by PCR, which accentuates the need to monitor vector populations and usual hosts and to evaluate the potential risk of infection in humans.

Ehrlichia canis, Anaplasma platys e Babesia vogeli são frequentemente detectados na rotina veterinária com patogênese variada que pode levar à morte, principalmente em coinfecções. Embora os micoplasmas hemotrópicos caninos sejam considerados de baixa importância clínica, recentemente ganharam destaque na pesquisa molecular. O presente estudo teve como objetivo analisar duas populações hospitalares de cães, selecionadas aleatoriamente no ano de 2013 e 2015, dos municípios de Toledo (n = 68) e Cascavel (n = 107). O exame direto de esfregaços de sangue, sorologia e PCR foram usados para detectar a presença de E. canis, A. platys, B. vogeli e Mycoplasma sp. O esfregaço sanguíneo direto foi negativo para os agentes investigados em todas as amostras. A imunocromatografia sérica (SensPERT ™, VetAll Laboratories, Coréia) em 175 animais mostrou que apenas 4% (n = 7) tinham anticorpos contra E.canis, enquanto 60% (n = 105) foram positivos para Anaplasma sp. Todas as amostras de PCR foram negativas para E. canis, enquanto 18,28% (n = 32) foram positivas para A. platys, 3,42% (n = 6) positivas para Babesia vogeli e 7,41% (n = 13) positivas para Mycoplasma sp. O estudo revelou a presença de A. platys em Toledo e Cascavel por PCR, o que acentua a necessidade de monitorar populações de vetores e hospedeiros usuais e avaliar o risco potencial de infecção em humanos.

Occurrence of Babesia vogeli, Mycoplasma spp., Ehrlichia canis and Anaplasma spp. in a hospital dog population of western Paraná / Ocorrência de Babesia vogeli, Mycoplasma spp., Ehrlichia canis e Anaplasma spp. em uma população hospitalar de cães do Oeste do Paraná

Ehrlichia canis, Anaplasma platys, and Babesia vogeli are frequently detected in the veterinary routine with varied pathogenesis that can lead to death, mainly in co-infections. Although canine hemotropic mycoplasmas are considered of low clinical importance, they have recently gained prominence in molecular research. The present study aimed to analyze two hospital populations of dogs, randomly selected from the year 2013 and 2015, from the municipalities of Toledo (n=68) and Cascavel (n=107). Direct examination of blood smears, serology, and PCR were used to detect the presence of E. canis, A. platys, B. vogeli and Mycoplasma sp. Direct blood smear examination was negative for the investigated agents in all samples. Serum immunochromatography (SensPERT ™, VetAll Laboratories, Korea) in 175 animals showed that only 4% (n = 7) had anti-E. canis antibodies, while 60% (n = 105) were positive for Anaplasma sp. All PCR samples were negative for E. canis, while 18.28% (n = 32) were positive for A. platys, 3.42% (n = 6) positive for Babesia vogeli, and 7.41% (n = 13) positive for Mycoplasma sp. The study revealed the presence of A. platys in Toledo and Cascavel by PCR, which accentuates the need to monitor vector populations and usual hosts and to evaluate the potential risk of infection in humans.(AU)

Ehrlichia canis, Anaplasma platys e Babesia vogeli são frequentemente detectados na rotina veterinária com patogênese variada que pode levar à morte, principalmente em coinfecções. Embora os micoplasmas hemotrópicos caninos sejam considerados de baixa importância clínica, recentemente ganharam destaque na pesquisa molecular. O presente estudo teve como objetivo analisar duas populações hospitalares de cães, selecionadas aleatoriamente no ano de 2013 e 2015, dos municípios de Toledo (n = 68) e Cascavel (n = 107). O exame direto de esfregaços de sangue, sorologia e PCR foram usados para detectar a presença de E. canis, A. platys, B. vogeli e Mycoplasma sp. O esfregaço sanguíneo direto foi negativo para os agentes investigados em todas as amostras. A imunocromatografia sérica (SensPERT ™, VetAll Laboratories, Coréia) em 175 animais mostrou que apenas 4% (n = 7) tinham anticorpos contra E.canis, enquanto 60% (n = 105) foram positivos para Anaplasma sp. Todas as amostras de PCR foram negativas para E. canis, enquanto 18,28% (n = 32) foram positivas para A. platys, 3,42% (n = 6) positivas para Babesia vogeli e 7,41% (n = 13) positivas para Mycoplasma sp. O estudo revelou a presença de A. platys em Toledo e Cascavel por PCR, o que acentua a necessidade de monitorar populações de vetores e hospedeiros usuais e avaliar o risco potencial de infecção em humanos.(AU)

Caracterização molecular do vírus da cinomose canina, aspectos epizootiológicos, clínicos e do diagnóstico em cães naturalmente infectados

O vírus da cinomose canina (CDV) é um dos principais agentes infecciosos de cães domésticos e carnívoros silvestres, causando uma doença infecciosa multissistêmicas de alta mortalidade que acomete animais de diferentes faixas etárias, raças, machos e fêmeas e, tanto vacinados quanto não vacinados. A vacinação é o principal método de controle desta doença, no entanto, estudos vêm mostrando a possível existência de falhas vacinais em decorrência de diferença genética entre estirpes circulantes e estirpes vacinais. Dados referentes à epizootiologia são desconhecidos em Goiânia, poucos estudos comparam métodos diagnósticos em diferentes amostras em uma população de cães sintomáticos e às características moleculares do CDV em Goiás ainda não foram documentados. Este estudo objetivou determinar as características epizootiológicas do CDV, comparar os métodos diagnósticos de imunocromatografia (IC) e RT-PCR para a identificação do agente etiológico em diferentes amostras biológicas [swab conjuntival, sangue, urina, fluido cerebroespinal (FCE) e pool de amostras] e identificar as estirpes do CDV circulantes em cães naturalmente infectados e sintomáticos, no município de Goiânia, GO, Brasil, durante os anos de 2017 e 2020. Dados epizootiológicos foram coletados de 74 cães com sinais clínicos extraneurais e/ou neurais compatíveis com cinomose. Destes cães, 46 (62%) foram positivos por meio do teste de imunocromatografia (31%) ou pela técnica de RT-PCR (53%). Cães machos e fêmeas, de diferentes raças e idades foram acometidos, mas houve predominância em cães sem raça definida, adultos de um a seis anos e não vacinados. No entanto, aproximadamente 10,9% dos cães infectados e sintomáticos eram vacinados. Os sinais extraneurais predominantes foram hiporexia ou anorexia, secreção nasal e/ou ocular, desidratação e hiperqueratose de coxins e trufa. Dentre os sinais clínicos neurais os mais frequentes foram alteração de estado mental, déficit motor e mioclonias. Foi observada letalidade de aproximadamente 89% entre os animais com acometimento neurológico. As amostras de swab conjuntival, urina, pool e FCE tiveram maior frequência de positividade no teste de IC enquanto as amostras de urina e sangue, na RT-PCR. Do total de 149 amostras (sangue, urina e FCE) destinadas ao RT-PCR (gene N), o vírus foi identificado em 64 amostras (42,95%) e foram selecionadas 54 positivas para a RT-PCR seguida por Nested PCR para amplificação parcial do gene hemaglutinina (H). A amplificação parcial do gene H foi realizada e oito amostras foram sequenciadas e caracterizadas por meio da análise filogenética como pertencentes ao genótipo América do Sul 1/ Europa. Foram encontrados diferentes locais de substituição de aminoácidos no fragmento do gene H analisado das sequências identificadas e uma estirpe apresentou a mutação Y549H, típica de animais silvestres. Outros locais do fragmento apresentaram substituições em epítopos (resíduos 367, 376, 379, 381, 386 e 388) que podem interferir com a habilidade da vacina em promover proteção adequada contra a infecção pelo CDV, reduzindo sua efetividade. As estirpes isoladas foram geneticamente distante das estirpes vacinais, pertencentes ao genótipo América do Norte 1, com aproximadamente 10% de diferença nucleotídica. A partir da análise do genótipo América do Sul 1/ Europa, foram definidos dez subgenótipos. Esses achados evidenciam a relevância da infecção de cães por cinomose no Brasil, demonstrando a predominância do genótipo América do Sul 1/ Europa na região central do país e suportam a necessidade da realização de estudos epizootiológicos e de identificação molecular do CDV em outras regiões do país, em decorrência de sua grande extensão geográfica, da variabilidade de espécies animais acometidas, das diferenças moleculares entre as estirpes e da alta taxa de letalidade entre os animais infectados sintomáticos.

The canine distemper virus (CDV) is one of the main infectious agents of domestic dogs and wild carnivores, causing a multisystemic infectious disease with high mortality that affects animals of different age groups, breeds, males and females, and both vaccinated and unvaccinated. Vaccination is the main method of controlling this disease, however, studies have shown the possible existence of vaccine failures due to a genetic difference between circulating strains and vaccine strains. Data regarding epizootiology are unknown in Goiânia, few studies compare diagnostic methods in different samples in a population of symptomatic dogs and the molecular characteristics of CDV in Goiás have not yet been documented. This study aimed to determine the epizootiological characteristics of CDV, compare the diagnostic methods of immunochromatography (IC) and RT-PCR for the identification of the etiological agent in different biological samples [conjunctival swab, blood, urine, cerebrospinal fluid (CSF), and sample pool] and identify the circulating CDV strains in naturally infected and symptomatic dogs in the municipality of Goiânia, GO, Brazil, during 2017 and 2020. Epizootiological data were collected from 74 dogs with extraneural and/or neural clinical signs compatible with distemper. Of these dogs, 46 (62%) were positive using the immunochromatography test (31%) or by the RT-PCR technique (53%). Male and female dogs of different breeds and ages were affected, but there was a predominance in mixed breed dogs, adults aged one to six years and not vaccinated. However, approximately 10.9% of infected and symptomatic dogs were vaccinated. Predominant extraneural signs were hyporexia or anorexia, nasal and/or ocular discharge, dehydration, and nasal and digital hyperkeratosis. Among the neural clinical signs, the most frequent were changes in mental status, motor deficit, and myoclonus. A mortality rate of approximately 89% was observed among animals with neurological involvement. Conjunctival swab, urine, pool, and CSF samples had a higher frequency of positivity in the CI test, while urine and blood samples in RT-PCR. From a total of 149 samples (blood, urine, and FCE) destined for RT-PCR (N gene), the virus was identified in 64 samples (42.95%) and 54 positives were selected for RT-PCR followed by Nested PCR for partial amplification of the hemagglutinin (H) gene. Partial amplification of the H gene was performed and eight samples were sequenced and characterized by phylogenetic analysis as belonging to the South America 1/Europe genotype. Different amino acid substitution sites were found in the analyzed H gene fragment of the identified sequences and one strain presented the Y549H mutation, typical of wild animals. Other fragment sites had epitope substitutions (residues 367, 376, 379, 381, 386, and 388) that may interfere with the vaccine's ability to provide adequate protection against CDV infection, reducing its effectiveness. The isolated strains were genetically distant from the vaccine strains, belonging to the North America 1 genotype, with approximately 10% nucleotide difference. From the analysis of the South America 1/ Europe genotype, ten subgenotypes were defined. These findings highlight the relevance of canine distemper infection in Brazil, demonstrating the predominance of the South America 1/ Europe genotype in the central region of the country and support the need to conduct epizootiological and molecular identification studies of CDV in other regions of the country, due to its large geographic extension, the variability of animal species affected, the molecular differences between the strains and the high lethality rate among symptomatic infected animals.

DETECÇÃO DE ROTAVIRUS EM PEQUENOS RUMINANTES POR TESTE RÁPIDO IMUNOCROMATOGRÁFICO E RT-PCR

A diarreia é um dos problemas mais recorrentes em pequenos ruminantes e representa a maior queixa dos produtores no Nordeste brasileiro, sendo superior a 78% no Ceará. O Rotavirus é um dos principais agentes envolvidos nas diarreias neonatais, afetando a produtividade do rebanho. A demanda por testes acessíveis levou à busca pelo desenvolvimento de kits de diagnóstico rápidos, visando maior praticidade e menor custo, dentre eles, os testes imunocromatográficos. Uma vez que esses testes para detecção de Rotavirus baseiam-se na ligação de proteína do vírus a anticorpos específicos, essa similaridade genética nas proteínas leva ao questionamento de que testes rápidos confeccionados para humanos podem ser utilizados para detecção viral em caprinos e ovinos. Desse modo, este trabalho teve como objetivo avaliar o teste rápido imunocromatográfico (TIC) como uma ferramenta diagnóstica de triagem para detectar Rotavirus em rebanhos caprinos e ovinos de modo rápido e simples com custo relativo baixo. Foram coletadas amostras de fezes de 60 caprinos e ovinos, sendo 30 diarreicas e 30 de consistência normal, em período de chuvas intermitentes compreendido entre os meses de maio e agosto de 2018, na região metropolitana de Fortaleza, Ceará. Desses animais também foram colhidas amostras de sangue em tubos Vacutainer® com anticoagulante para a realização de hemograma. Foi utilizado TIC One Step Rotavirus Test Device Abon (Biopharm) conforme recomendação do fabricante para a detecção de Rotavirus nas fezes, e para confirmação foi realizado RT-PCR para isolamento do RNA viral. Paralelamente foram confeccionados esfregaços de 30 amostras de fezes diarreicas corados pelo método Ziehl-Neelsen modificado para busca por oocistos de Cryptosporidium parvum. Todas as amostras de fezes foram negativas no TIC e apenas uma amostra de caprino foi positiva na RT-PCR. Não foram encontrados oocistos de Cryptosporidium sp em nenhum dos 30 esfregaços. Linfopenia foi observada no leucograma do animal positivo na RT-PCR, e linfopenia e neutrofilia com desvio à direita foi observada na média dos valores de hemograma dos caprinos diarreicos negativos na RT-PCR. Diante dos resultados obtidos na busca por Rotavirus, não foi possível avaliar a eficácia do TIC como método de triagem para Rotavirus.

Diarrhea is one of the most recurrent problems in small ruminants and represents the biggest complaint of producers in the Northeast of Brazil, being higher than 78% in Ceará. Rotavirus is one of the main agents involved in neonatal diarrhea, affecting herd productivity. The demand for accessible tests led to the search for the development of quick diagnostic kits, aiming at greater practicality and lower cost, among them immunochromatographic tests. Since these Rotavirus detection tests are based on the binding of virus protein to specific antibodies, this genetic similarity in proteins leads to the questioning that rapid tests made for humans can be used for viral detection in goats and sheep. Thus, the objective of this study was to evaluate the rapid immunochromatographic (TIC) test as a diagnostic screening tool to detect Rotavirus in sheep and goats in a fast and simple manner with low relative cost. Fecal samples were collected from 60 goats and sheep, 30 diarrheas and 30 of normal consistency, during intermittent rains between May and August 2018, in the metropolitan region of Fortaleza, Ceará. Blood samples were also collected from the animals in Vacutainer® tubes with anticoagulant for blood counts. One Step Rotavirus Test Device Abon (Biopharm ) was used according to the manufacturer's recommendation for fecal Rotavirus detection, and RT-PCR for viral RNA isolation was used for confirmation. In parallel, smears of 30 samples of diarrheal feces stained by the modified Ziehl-Neelsen method were searched for oocysts of Cryptosporidium parvum. All stool samples were negative in TIC and only one goat sample was positive in RT-PCR. No oocysts of Cryptosporidium sp. were found in any of the 30 smears. Lymphopenia was observed in the positive animal leukogram in RT-PCR, and lymphopenia and neutrophilia with right-sided deviation were observed in the mean hematogram values of negative diarrheic goats on RT-PCR. In view of the results obtained in the search for Rotavirus, it was not possible to evaluate the effectiveness of TIC as a screening method for Rotavirus

Seroepidemiology of Leishmania spp. in dogs residing in Telêmaco Borba, Paraná, Brazil / Soroepidemiologia da Leishmania spp. em cães do município de Telêmaco Borba, Paraná, Brasil

Leishmaniasis is an important metazoonosis caused by protozoa of the genus Leishmania and has a heteroxenic life cycle involving invertebrate and vertebrate hosts. Transmission occurs during the blood meal of infected phlebotomine sand flies in wild species, domestic animals, and humans. The dog is a reservoir for the parasite causing visceral leishmaniasis (VL), whereas in American tegumentary leishmaniasis (ATL), dogs are erratic hosts that are accidentally infected, as in humans.Dogs are considered an important indicator of the parasite and its vectors in the environment, thus highlighting the importance of diagnosis in these animals. This study aimed to assess the seroepidemiology of Leishmania spp. in dogs in the municipality of Telêmaco Borba that were part of a castration campaign. Blood samples from 191 dogs were collected, and their owners were surveyed on various epidemiological variables. Serological analysis was performed using indirect immunofluorescence (IIF) and rapid immunochromatography (DPP®). Screening by IIF identified 13 (6.81%) positive animals, none of which were positive for the DPP® test, which is specific for VL. Statistical analysis of the questionnaire responses indicated a significant association between seropositivity and the presence of stacked or composting leaves in the backyard (p = 0.0498), forest areas (squares, woods, parks) near the residence (p = 0.0015), and poorly healing ulcerated or nodular epidermal lesions in the dog (p = 0.0138). This study revealed the presence of anti-Leishmania spp. IgG antibodies in dogs residing in Telêmaco Borba, suggesting the presence of the parasite and vectorin the environment. In addition, the existence of stacked or composting leaves in the backyard, forest areas near the residence, and epidermal lesions in dogs are factors associated with Leishmania spp. infection in pet dogs.(AU)

A leishmaniose é uma importante metazoonose causada por protozoários do gênero Leishmania, com ciclo de vida heteroxênico que envolve hospedeiros invertebrados e vertebrados. A transmissão ocorre durante o repasto sanguíneo do flebotomíneo infectado em animais domésticos e silvestres e no homem.O cão é caracterizado como reservatório do protozoário na leishmaniose visceral, já na leishmaniose tegumentar americana é um hospedeiro errático que, assim como o homem, se infecta acidentalmente. O cão ainda pode ser considerado um importante sinalizador da presença do protozoário e dos vetores no ambiente, assinalando assim a importância do diagnóstico nestes animais. Este trabalho teve como objetivo conhecer a soroepidemiologia da Leishmania spp. em cães do Município de Telêmaco Borbaque participaram de um mutirão de castração. Foram coletadas amostras de sangue de 191 cães e aplicado um questionário epidemiológico a seus proprietários. A análise sorológica foi realizada pelas técnicas Imunofluorescência Indireta (IFI) e Imunocromatografia rápida (DPP®). A triagem realizada pela IFI revelou 13 (6,81%) animais reagentes, destes nenhum apresentou positividade no teste DPP®, específico para leishmaniose visceral. A análise estatística das variáveis presentes no questionário epidemiológico indicou associação significativa entre a sorologia positiva e presença de folhas amontoadas/compostagem no quintal (p=0,0498), áreas de mata (praças, bosques, parques) nos arredores da residência (p=0,0015) e lesões ulceradas e/ou nodulares de difícil cicatrização na pele de animais (p=0,0138). Este estudo revelou que há anticorpos IgG anti-Leishmania spp. em cães do Município de Telêmaco Borba, sugerindo a presença do protozoário e do vetor no ambiente, e que a existência de folhas amontoadas/compostagem no quintal, áreas de mata nos arredores da residência e lesões na pele de animais são fatores associados à infecção por Leishmania spp. nestes cães.(AU)

COMPARAÇÃO DE TESTES IMUNOCROMATOGRÁFICOS COM RTPCR E NESTED-PCR NO DIAGNÓSTICO DE CINOMOSE EM CÃES UTILIZANDO DIFERENTES AMOSTRAS BIOLÓGICAS

A cinomose canina é uma doença infectocontagiosa viral, multissistêmica e de grande importância para a medicina veterinária pela alta morbidade e mortalidade entre cães domésticos. O diagnóstico definitivo para a doença é um desafio para o médico veterinário na rotina clínica sendo necessária a utilização de métodos diagnósticos rápidos e de fácil acesso, sendo essa a proposta dos testes imunocromatográficos. Porém é necessário saber qual melhor material biológico a ser utilizado nesses testes, dependendo da fase clínica do animal para otimização do teste, logo esse trabalho teve por objetivo indicar o melhor material biológico a ser utilizados nos dispositivos, de acordo com a fase clínica do animal doente. Sangue total, urina, swabs conjuntivais, fluido cerebroespinal e um pool de amostras foram coletados de 30 animais suspeitos de cinomose, divididos em grupos de fase aguda e crônica da doença, para aplicação nos dois kits rápidos comercializados do Brasil. A concordância dos resultados dos kits e os do RT-PCR e Nested-PCR de urina e sangue total foram obtidas utilizando índice Kappa. Além disso, foi realizado hemograma e pesquisa de corpúsculos de Lentz nos esfregaços sanguíneos. Cinco e dois animais, de fase aguda e crônica, foram considerados negativos, respectivamente. Concluiu-se que o material com melhor performance foi a urina, em ambas as fases e nos dois kits e foi demonstrado que o sangue total foi o pior material a ser utilizado. O pool de amostras demonstrou ser uma utilização extra bula de valiosa importância quando não se sabe qual teste utilizar. O FCE foi apontado como o material mais sensível aos testes imunocromatográficos.

Canine distemper is a viral infectious disease, multisystemic with a great importance for veterinary medicine due to high morbidity and mortality within domestic dogs. The definitive diagnosis for the disease is a challenge for the veterinarian in the clinical routine, requiring the use of fast and easily accessible diagnostic methods, which is the proposal of immunochromatographic tests. However, it is necessary to know the best biological material to be used in these tests, depending on the clinical stage of the animal to optimize the test, so this work aimed to indicate the best biological material to be used in the devices, according to the clinical stage of the animal sick. Total blood, urine, conjunctival swabs, cerebrospinal fluid and a pool of samples were collected for use in the two commercial kits from Brazil from a total of 30 suspected cases of distemper, divided into acute and chronic disease groups. The agreement of the results of the kits and of the RT-PCR and Nested-PCR of urine and whole blood were obtained using Kappa index. In addition, blood counts were performed and Lentz corpuscles were searched in blood smears. Five and two animals, both acute and chronic, were considered negative, respectively. It was concluded that the material with the best performance was urine in both phases and in both kits and it was demonstrated that whole blood was the worst material to be used. The sample pool has proved to be an extrabule use of valuable importance when it is not known which test to use. FCE was pointed as the most sensitive material for immunochromatographic tests.

Canine heartworm disease in Porto Velho: first record, distribution map and occurrence of positive mosquitoes

The aim of this study was to make the first report on canine heartworm disease in the state of Rondônia and confirm its transmission in this state. Blood samples were randomly collected from 727 dogs in the city of Porto Velho. The samples were analyzed to search for microfilariae and circulating antigens, using three different techniques: optical microscopy on thick blood smears stained with Giemsa; immunochromatography; and PCR. Mosquitoes were collected inside and outside the homes of all the cases of positive dogs and were tested using PCR to search for DNA of Dirofilaria immitis. Ninety-three blood samples out of 727 (12.8%) were positive according to the immunoassay technique and none according to the thick smear method. Among the 93 positive dogs, 89 (95.7%) were born in Porto Velho. No difference in the frequency of infection was observed between dogs raised indoors and in the yard. PCR on the mosquitoes resulted in only one positive pool. This result shows that the transmission of canine heartworm disease is occurring in the city of Porto Velho and that there is moderate prevalence among the dogs. The techniques of immunochromatography and PCR were more effective for detecting canine heartworm than thick blood smears. The confirmation of canine heartworm disease transmission in Porto Velho places this disease in the ranking for differential diagnosis of pulmonary nodules in humans in Rondônia.

O objetivo deste estudo foi de registrar pela primeira vez a dirofilariose canina no estado de Rondônia e confirmar sua transmissão neste estado. Amostras de sangue de 727 cães foram colhidas aleatoriamente na cidade de Porto Velho. As amostras foram analisadas em busca de microfilárias e antígenos circulantes usando três técnicas diferentes: microscopia ótica de gota espessa corada com Giemsa e imunocromatografia de fluxo lateral e PCR. Mosquitos foram colhidos no domicilio e peridomicílio de todos os casos de cães positivos, estes mosquitos foram testados pela PCR na detecção de DNA de Dirofilaria immitis. Noventa e três das 727 amostras de sangue foram positivas na técnica de imunoensaio (12,8%). Nenhuma amostra foi positiva na gota espessa. Entre os 93 cães positivos, 89 (95,7%) foram nascidos em Porto Velho. Nenhuma diferença na frequencia de infecção foi observada entre cães criados dentro da casa ou no quintal. O PCR dos mosquitos resultou em apenas um pool positivo. Este resultado mostra que a transmissão de dirofilariose canina está ocorrendo na cidade de Porto Velho e a frequência que ocorre nos cães é considerada moderada. As técnicas de imunocromatografia e PCR são mais eficazes na detecção de dirofilariose comparadas a gota espessa. A confirmação de transmissão de dirofilariose canina em Porto Velho, coloca esta doença no ranking de diagnóstico diferencial de nódulos pulmonares em seres humanos em Rondônia.

Análise do diagnóstico da leishmaniose visceral canina no Brasil, com ênfase no uso dos métodos sorológicos: teste imunocromatográfico, ELISA e reação de imunofluorescência indireta – revisão de literatura / Analysis of the diagnosis of canine visceral leishmaniasis in Brazil, with emphasis on the use of immunochromatography, ELISA and IFAT – a review / Análisis del diagnóstico de la leishmaniasis visceral canina en Brasil, con énfasis en el uso de métodos serológicos: inmunocromatografía, ELISA e inmunofluorescencia indirecta – revisión de la literatura

O diagnóstico da leishmaniose visceral canina é complexo e desafiador, pois não existem testes 100% sensíveis e específicos. O serviço público brasileiro utiliza a eutanásia como método de controle em cães sorologicamente positivos. Além disso, os médicos veterinários têm dificuldade em padronizar o diagnóstico sorológico de rotina em razão da falta de técnicas e métodos padronizados e do uso de testes sorológicos exclusivamente qualitativos. Esse cenário requer a busca detestes mais confiáveis e padronizados, para evitar o abate de cães falso-positivos e a vacinação de infectados, bem como tratamentos desnecessários por interpretações equivocadas decorrentes dos resultados de exames. Esta revisão propõe apresentar e discutir as vantagens e desvantagens dos testes sorológicos empregados para o diagnóstico da doença no Brasil.

Diagnosis of Canine Visceral Leishmaniasis is complex and challenging, because no test is 100% sensitive and specific. The Brazilian public service employs the euthanasia of seropositive dogs as a control method. Additionally, veterinarians have difficulty in standardizing the serological diagnostic routine, due to the lack of technical and standardized methods and the use of exclusively qualitative serological tests for diagnosis. This scenario requires the search for more reliable and standardized tests in order to prevent the slaughter of false-positive dogs, vaccination of infected animals and unnecessary treatments as a result of test misinterpretation. This review aims to present and discuss the advantages and disadvantages of serologic tests used to diagnose the disease in Brazil.

El diagnóstico de la leishmaniasis visceral canina es complejo y desafiante, ya que no existen testes 100% sensibles y específicos. El servicio público brasileño utiliza la eutanasia como método de control de perros seropositivos. Además, los médicos veterinarios tienen dificultades para estandarizar el diagnóstico serológico de rutina debido a la falta de técnicas y métodos estandarizados, y porque los testes serológicos son exclusivamente cualitativos. Este escenario evidencia la necesidad de tests más confiables y estandarizados, para evitar la eutanasia de perros falsos positivos, la vacunación de animales infectados, así como la realización de tratamientos innecesarios por interpretaciones erróneas de los exámenes. Esta revisión propone presentar y discutir las ventajas y desventajas de los testes serológicos utilizados para el diagnóstico de la enfermedad en Brasil.

Detecção de anticorpos anti-Leishmania infantum syn chagasi em cães de São José do Rio Preto, São Paulo / Anti-Leishmania infantum syn chagasi antibodies in dogs from São José do Rio Preto, São paulo

A leishmaniose visceral (LV) é uma zoonose que vem se expandido por todo o território paulista desde 1998, quando foi identificado o primeiro caso canino autóctone, no município de Araçatuba. O objetivo do presente estudo foi determinar a ocorrência de anticorpos anti-Leishmania infantum syn chagasi em amostras de soro de 584 cães de São José do Rio Preto, São Paulo, área não endêmica para a doença. Cinco cães (0,86%) foram soro reagentes pela técnica de ELISA e um (0,17%) por imunocromatografia. A reação de imunofluorescência indireta, realizada em 138 animais que possuíam densidades ópticas acima ou próximas ao ponto de corte do ELISA evidenciou dois cães (1,45%) com títulos acima de 1:40. Apenas um animal foi sororeagente nas três técnicas sorológicas. Apesar deste cão não apresentar histórico de deslocamento para áreas endêmicas, havia sido adquirido em região com casos caninos e humanos de LV. Os resultados obtidos no presente estudo fazem supor que não existiam casos autóctones de LV canina na população estudada.(AU)

Visceral leishmaniasis (VL) has been a widespread zoonosis in São Paulo since 1998, when the first autochthonous canine case was identified in Araçatuba. The aim of this study was to determine the occurrence of anti–Leishmania infantum syn chagasi antibodies in serum samples of 584 dogs from São José do Rio Preto, São Paulo, a non endemic area for the disease. Five dogs (0.86%) seroconverted by ELISA and one (0.17%) by immunochromatography. The indirect immunofluorescent reaction, carried out in 138 animals whose optical densities were above or close to ELISAs cutt-off point, evidenced two dogs (1.45%) with titers above 1:40. Only one dog was serum-reactive on the three techniques. Although there was not a history of displacing this animal to endemic areas, the dog had been acquired in a region with canine and human cases of VL. These results suggests that there were no autochthonous cases of canine VL in this population.(AU)

Análise do diagnóstico da leishmaniose visceral canina no Brasil, com ênfase no uso dos métodos sorológicos: teste imunocromatográfico, ELISA e reação de imunofluorescência indireta revisão de literatura / Analysis of the diagnosis of canine visceral leishmaniasis in Brazil, with emphasis on the use of immunochromatography, ELISA and IFAT a review / Análisis del diagnóstico de la leishmaniasis visceral canina en Brasil, con énfasis en el uso de métodos serológicos: inmunocromatografía, ELISA e inmunofluorescencia indirecta revisión de la literatura

O diagnóstico da leishmaniose visceral canina é complexo e desafiador, pois não existem testes 100% sensíveis e específicos. O serviço público brasileiro utiliza a eutanásia como método de controle em cães sorologicamente positivos. Além disso, os médicos veterinários têm dificuldade em padronizar o diagnóstico sorológico de rotina em razão da falta de técnicas e métodos padronizados e do uso de testes sorológicos exclusivamente qualitativos. Esse cenário requer a busca detestes mais confiáveis e padronizados, para evitar o abate de cães falso-positivos e a vacinação de infectados, bem como tratamentos desnecessários por interpretações equivocadas decorrentes dos resultados de exames. Esta revisão propõe apresentar e discutir as vantagens e desvantagens dos testes sorológicos empregados para o diagnóstico da doença no Brasil.(AU)

Diagnosis of Canine Visceral Leishmaniasis is complex and challenging, because no test is 100% sensitive and specific. The Brazilian public service employs the euthanasia of seropositive dogs as a control method. Additionally, veterinarians have difficulty in standardizing the serological diagnostic routine, due to the lack of technical and standardized methods and the use of exclusively qualitative serological tests for diagnosis. This scenario requires the search for more reliable and standardized tests in order to prevent the slaughter of false-positive dogs, vaccination of infected animals and unnecessary treatments as a result of test misinterpretation. This review aims to present and discuss the advantages and disadvantages of serologic tests used to diagnose the disease in Brazil.(AU)

El diagnóstico de la leishmaniasis visceral canina es complejo y desafiante, ya que no existen testes 100% sensibles y específicos. El servicio público brasileño utiliza la eutanasia como método de control de perros seropositivos. Además, los médicos veterinarios tienen dificultades para estandarizar el diagnóstico serológico de rutina debido a la falta de técnicas y métodos estandarizados, y porque los testes serológicos son exclusivamente cualitativos. Este escenario evidencia la necesidad de tests más confiables y estandarizados, para evitar la eutanasia de perros falsos positivos, la vacunación de animales infectados, así como la realización de tratamientos innecesarios por interpretaciones erróneas de los exámenes. Esta revisión propone presentar y discutir las ventajas y desventajas de los testes serológicos utilizados para el diagnóstico de la enfermedad en Brasil.(AU)

Seroepidemiology of Leishmania spp. in dogs residing in Telêmaco Borba, Paraná, Brazil / Soroepidemiologia da Leishmania spp. em cães do município de Telêmaco Borba, Paraná, Brasil

Leishmaniasis is an important metazoonosis caused by protozoa of the genus Leishmania and has a heteroxenic life cycle involving invertebrate and vertebrate hosts. Transmission occurs during the blood meal of infected phlebotomine sand flies in wild species, domestic animals, and humans. The dog is a reservoir for the parasite causing visceral leishmaniasis (VL), whereas in American tegumentary leishmaniasis (ATL), dogs are erratic hosts that are accidentally infected, as in humans.Dogs are considered an important indicator of the parasite and its vectors in the environment, thus highlighting the importance of diagnosis in these animals. This study aimed to assess the seroepidemiology of Leishmania spp. in dogs in the municipality of Telêmaco Borba that were part of a castration campaign. Blood samples from 191 dogs were collected, and their owners were surveyed on various epidemiological variables. Serological analysis was performed using indirect immunofluorescence (IIF) and rapid immunochromatography (DPP®). Screening by IIF identified 13 (6.81%) positive animals, none of which were positive for the DPP® test, which is specific for VL. Statistical analysis of the questionnaire responses indicated a significant association between seropositivity and the presence of stacked or composting leaves in the backyard (p = 0.0498), forest areas (squares, woods, parks) near the residence (p = 0.0015), and poorly healing ulcerated or nodular epidermal lesions in the dog (p = 0.0138). This study revealed the presence of anti-Leishmania spp. IgG antibodies in dogs residing in Telêmaco Borba, suggesting the presence of the parasite and vectorin the environment. In addition, the existence of stacked or composting leaves in the backyard, forest areas near the residence, and epidermal lesions in dogs are factors associated with Leishmania spp. infection in pet dogs.

A leishmaniose é uma importante metazoonose causada por protozoários do gênero Leishmania, com ciclo de vida heteroxênico que envolve hospedeiros invertebrados e vertebrados. A transmissão ocorre durante o repasto sanguíneo do flebotomíneo infectado em animais domésticos e silvestres e no homem.O cão é caracterizado como reservatório do protozoário na leishmaniose visceral, já na leishmaniose tegumentar americana é um hospedeiro errático que, assim como o homem, se infecta acidentalmente. O cão ainda pode ser considerado um importante sinalizador da presença do protozoário e dos vetores no ambiente, assinalando assim a importância do diagnóstico nestes animais. Este trabalho teve como objetivo conhecer a soroepidemiologia da Leishmania spp. em cães do Município de Telêmaco Borbaque participaram de um mutirão de castração. Foram coletadas amostras de sangue de 191 cães e aplicado um questionário epidemiológico a seus proprietários. A análise sorológica foi realizada pelas técnicas Imunofluorescência Indireta (IFI) e Imunocromatografia rápida (DPP®). A triagem realizada pela IFI revelou 13 (6,81%) animais reagentes, destes nenhum apresentou positividade no teste DPP®, específico para leishmaniose visceral. A análise estatística das variáveis presentes no questionário epidemiológico indicou associação significativa entre a sorologia positiva e presença de folhas amontoadas/compostagem no quintal (p=0,0498), áreas de mata (praças, bosques, parques) nos arredores da residência (p=0,0015) e lesões ulceradas e/ou nodulares de difícil cicatrização na pele de animais (p=0,0138). Este estudo revelou que há anticorpos IgG anti-Leishmania spp. em cães do Município de Telêmaco Borba, sugerindo a presença do protozoário e do vetor no ambiente, e que a existência de folhas amontoadas/compostagem no quintal, áreas de mata nos arredores da residência e lesões na pele de animais são fatores associados à infecção por Leishmania spp. nestes cães.