Cerebrospinal fluid analysis in 58 ruminants showing neurological disorders / Análise do líquido cefalorraquidiano em 58 ruminantes com distúrbios neurológicos

Ruminants may be affected by a wide variety of central nervous system (CNS) diseases. Cerebrospinal fluid (CSF) analysis forms the basis for ante mortem diagnostic evaluation of ruminants with clinical signs involving the CNS. Despite its importance as a tool to aid diagnosis, data regarding CSF examinations in spontaneous cases of CNS diseases in ruminants from Brazil are limited, and most reports involve experimental studies. Therefore, this study aimed to report the results of CSF analysis in 58 ruminants showing signs of neurological disorders. CSF samples for analysis were obtained from 32 cattle, 20 sheep, and 6 goats by cerebello-medullary cistern (n=54) or lumbosacral space (n=4) puncture. These ruminants showed neurological signs related to viral (n=13), mycotic (n=3), or bacterial (n=15) infections, and toxic (n=21), traumatic (n=4), or congenital disorders (n=2). CSF analysis from ruminants with viral infections presented lymphocytic pleocytosis, even though CSF showed no changes in several cases of rabies. Neutrophilic pleocytosis, cloudiness, presence of fibrin clots, and abnormal coloration were evident in the CSF of most cases of CNS bacterial infection, such as meningoencephalitis, meningitis, abscesses, myelitis, and a case of conidiobolomycosis. On the other hand, CSF was unchanged in most cases of toxic disorders, as botulism and hepatic encephalopathy. Elevated CSF density was observed in 60% of ruminants diagnosed with polioencephalomalacia. Our findings show that evaluation of CSF is a valuable diagnostic tool when used in association with epidemiological, clinical and pathological findings for diagnosis of CNS diseases in ruminants.(AU)

Os ruminantes podem ser afetados por uma grande variedade de doenças do sistema nervoso central (SNC). A análise do líquido cefalorraquidiano (LCR) constitui a base da avaliação diagnóstica ante mortem de ruminantes com sinais clínicos envolvendo o SNC. Apesar de sua importância como ferramenta para auxiliar no diagnóstico, os dados referentes aos exames do LCR em casos espontâneos de doenças do SNC em ruminantes no Brasil são limitados, e, a maioria dos relatos envolve estudos experimentais. Portanto, este trabalho teve como objetivo relatar os resultados da análise do LCR em 58 ruminantes com distúrbios neurológicos. Amostras do LCR foram obtidas de 32 bovinos, 20 ovinos e 6 caprinos por punção da cisterna cerebelo-medular (n=54) ou espaço lombossacro (n=4) para posterior análise. Esses ruminantes apresentaram sinais neurológicos relacionados a infecções virais (n=13), micóticas (n=3) ou bacterianas (n=15), e desordens tóxicas (n=21), traumáticas (n=4) ou congênitas (n=2) A análise do LCR de ruminantes com infecções virais apresentou pleocitose linfocítica, embora, em vários casos de raiva, o LCR não tenha apresentado alterações. Pleocitose neutrofílica, turbidez, presença de coágulos de fibrina e coloração anormal foram evidentes no LCR da maioria dos casos de infecções bacterianas do SNC, como meningoencefalites, meningites, abscessos, mielite e um caso de conidiobolomicose. Por outro lado, o LCR não foi alterado na maioria dos casos dos distúrbios tóxicos, como botulismo e encefalopatia hepática. A densidade elevada no LCR foi observada em 60% dos ruminantes diagnosticados com polioencefalomalácia. Nossos resultados mostram que a avaliação do LCR é uma valiosa ferramenta de diagnóstico, quando usada em associação com os achados epidemiológicos, clínicos e patológicos para o diagnóstico de doenças do SNC em ruminantes.(AU)

Cerebrospinal fluid analysis in 58 ruminants showing neurological disorders / Análise do líquido cefalorraquidiano em 58 ruminantes com distúrbios neurológicos

Ruminants may be affected by a wide variety of central nervous system (CNS) diseases. Cerebrospinal fluid (CSF) analysis forms the basis for ante mortem diagnostic evaluation of ruminants with clinical signs involving the CNS. Despite its importance as a tool to aid diagnosis, data regarding CSF examinations in spontaneous cases of CNS diseases in ruminants from Brazil are limited, and most reports involve experimental studies. Therefore, this study aimed to report the results of CSF analysis in 58 ruminants showing signs of neurological disorders. CSF samples for analysis were obtained from 32 cattle, 20 sheep, and 6 goats by cerebello-medullary cistern (n=54) or lumbosacral space (n=4) puncture. These ruminants showed neurological signs related to viral (n=13), mycotic (n=3), or bacterial (n=15) infections, and toxic (n=21), traumatic (n=4), or congenital disorders (n=2). CSF analysis from ruminants with viral infections presented lymphocytic pleocytosis, even though CSF showed no changes in several cases of rabies. Neutrophilic pleocytosis, cloudiness, presence of fibrin clots, and abnormal coloration were evident in the CSF of most cases of CNS bacterial infection, such as meningoencephalitis, meningitis, abscesses, myelitis, and a case of conidiobolomycosis. On the other hand, CSF was unchanged in most cases of toxic disorders, as botulism and hepatic encephalopathy. Elevated CSF density was observed in 60% of ruminants diagnosed with polioencephalomalacia. Our findings show that evaluation of CSF is a valuable diagnostic tool when used in association with epidemiological, clinical and pathological findings for diagnosis of CNS diseases in ruminants.(AU)

Os ruminantes podem ser afetados por uma grande variedade de doenças do sistema nervoso central (SNC). A análise do líquido cefalorraquidiano (LCR) constitui a base da avaliação diagnóstica ante mortem de ruminantes com sinais clínicos envolvendo o SNC. Apesar de sua importância como ferramenta para auxiliar no diagnóstico, os dados referentes aos exames do LCR em casos espontâneos de doenças do SNC em ruminantes no Brasil são limitados, e, a maioria dos relatos envolve estudos experimentais. Portanto, este trabalho teve como objetivo relatar os resultados da análise do LCR em 58 ruminantes com distúrbios neurológicos. Amostras do LCR foram obtidas de 32 bovinos, 20 ovinos e 6 caprinos por punção da cisterna cerebelo-medular (n=54) ou espaço lombossacro (n=4) para posterior análise. Esses ruminantes apresentaram sinais neurológicos relacionados a infecções virais (n=13), micóticas (n=3) ou bacterianas (n=15), e desordens tóxicas (n=21), traumáticas (n=4) ou congênitas (n=2) A análise do LCR de ruminantes com infecções virais apresentou pleocitose linfocítica, embora, em vários casos de raiva, o LCR não tenha apresentado alterações. Pleocitose neutrofílica, turbidez, presença de coágulos de fibrina e coloração anormal foram evidentes no LCR da maioria dos casos de infecções bacterianas do SNC, como meningoencefalites, meningites, abscessos, mielite e um caso de conidiobolomicose. Por outro lado, o LCR não foi alterado na maioria dos casos dos distúrbios tóxicos, como botulismo e encefalopatia hepática. A densidade elevada no LCR foi observada em 60% dos ruminantes diagnosticados com polioencefalomalácia. Nossos resultados mostram que a avaliação do LCR é uma valiosa ferramenta de diagnóstico, quando usada em associação com os achados epidemiológicos, clínicos e patológicos para o diagnóstico de doenças do SNC em ruminantes.(AU)

Hidrocefalia congênita bilateral total em felino: relato de caso / Total Congenital Bilateral Hydrocephalus in Feline: case report

O objetivo deste trabalho foi relatar um caso raro de hidrocefalia em um felino doméstico, da raça Persa, de 30 dias de idade. O animal foi atendido com histórico de impossibilidade de manter-se em estação, incoordenação motora, inabilidade para se alimentar sozinho e sustentar o peso da cabeça. No exame clínico, foi observada presença de fontanela aberta, aumento de calota craniana, ataxia, estrabismo unilateral e secreção ocular. A realização de ultrassonografia do crânio levou à confirmação do diagnóstico de hidrocefalia. O paciente permaneceu internado, sendo o protocolo de tratamento empregado constituído de corticosteroide, diurético e protetor gástrico em alta dose, além de alimentação por via oral e fluidoterapia. O animal veio a óbito após 24 horas, sendo encaminhado para realização de necropsia.(AU)

The objective of this work was to report a rare case of hydrocephalus in a domestic Persian feline, 30 days old. The animal was attended with a history of inability to keep in season, incoordination of the motor, inability to feed itself and support the weight of the head. In the clinical examination, the presence of an open fontanelle, an increase in the skull cap, ataxia, unilateral strabismus and ocular secretion were observed. The ultrasound examination of the skull led to confirmation of the diagnosis of hydrocephalus. The patient remained hospitalized, and the treatment protocol consisted of a corticosteroid, diuretic and gastric protector in high dose, besides oral feeding and fluid therapy. The animal died after 24 hours, being referred for necropsy.(AU)

Do fibrolytic, proteolytic and amylolytic enzymes influence the in vitro fermentation characteristics of forage? / Enzimas fibrolíticas, amilolíticas e proteolíticas influenciam as características de fermentação in vitro de forragem?

The effects of increasing doses of three exogenous enzymes preparations with fibrolytic activity (FIB- 0, 0.6, 1.2, 1.8, and 2.4 mg mL-¹liquid volume incubated), amylolytic activity (AMZ - 0, 0.05, 0.10,0.15, and 0.20 mg mL-¹liquid volume incubated), and proteolytic activity (PRO - 0, 0.05, 0.10, 0.15, and 0.20 mg mL-¹ liquid volume incubated ) on gas production (GP), kinetic parameters, and fermentation profile of Brachiaria brizantha cv. Marandu were evaluated using the in vitro gas production technique. Ruminal liquid was obtained from two rumen-cannulated Santa Inês sheep maintained on pasture. Accumulated gas production was measured during 96 hours of incubation, measured at 18 different time points. The determined parameters were pH, asymptotic gas production (mL g-¹), rate of gas production (h-¹), lag time (h), organic matter digestibility (OMD, g g-¹ DM), metabolizable energy (ME, MJ kg-¹DM), and neutral detergent fiber digestibility (NDFD, mg g-¹ DM). Increasing the FIB dose linearly increased (P < 0.05) the asymptotic gas production. However, the rate of gas production and the lagtime showed linear decreases (P < 0.05). Addition of FIB also linearly increased (P < 0.05) the GP at all incubation times, as well as the OMD, NDFD and ME. Addition of AMZ linearly increased (P <0.05) the asymptotic gas production, but GP linear increased (P < 0.05) only at the 6-hour and 12-hour time points. The rate of gas production and the lag time decreased linearly (P < 0.05) in response to increasing AMZ addition. Inclusion of PRO did not affect (P > 0.05) asymptotic gas production, but there was quadratic effect (P < 0.05) on the rate of gas production, the lag time, and the GP at the 6-hour and 12-hour time points. The OMD, NDFD and ME were not affected by PRO addition. Thus, fibrolytic, amylolytic and proteolytic enzymes are effective in reducing the lag time and increasing thein vitro gas production from Brachiaria Brizantha cv.[...](AU)

Avaliou-se os efeitos de doses crescentes de três enzimas exógenas: fibrolíticas (FIB), 0; 0,6; 1,2; 1,8 e 2,4 mg mL-¹ volume de líquido incubado; amilolíticas (AMZ), 0; 0,05; 0,10; 0,15 e 0,20 mg mL-¹ volume de líquido incubado, proteolíticas (PRO), 0; 0,05; 0,10; 0,15 e 0,20 mg mL-¹ volume de líquido incubado, sobre a produção de gases (PG), parâmetros cinéticos e perfil da fermentação da Brachiaria brizantha cv. Marandu usando a técnica in vitro de produção de gases. O líquido ruminal foi obtido de dois ovinos Santa Inês canulados no rúmen, mantidos em regime de pastejo. A produção de gases acumulada foi obtida durante 96h00 de incubação, mensurada em 18 tempos. Ao final da incubação foram determinados o pH, produção de gás assintótica (mL g-¹), taxa de degradação fracional (h-¹), lag time (h), digestibilidade da matéria orgânica (DMO, g/g MS incubada por 24h00), energia metabolizável (EM, MJ kg-¹ MS) e a digestibilidade da fibra insolúvel em detergente neutro (DFDN, mg g-¹ MS). As doses de FIB aumentaram linearmente (P < 0,05) a produção de gases assintótica. Entretanto, a taxa de degradação fracional e lag time reduziram linearmente (P < 0,05). A adição de FIB também aumentou linearmente (P < 0,05) a PG em todos os tempos de incubação, DMO, DFDN e EM. A inclusão de AMZ aumentou linearmente (P < 0,05) a produção de gases assintótica, e a PG somente nos tempos 6 e 12 horas após a incubação. A taxa de degradação fracional e lag time reduziu linearmente (P < 0,05) com a inclusão de AMZ. A inclusão de PRO não modificou (P > 0,05) a produção de gás assintótica, mas promoveu efeito quadrático (P < 0,05) na taxa de degradação fracional, lag time, e PG nos tempos 6 e 12. No entanto, PRO não afetou DMO, DFDN e EM. As enzimas fibrolíticas, amilolíticas e proteolíticas são efetivas em reduzir o lag time e aumentar a produção de gases in vitro da Brachiaria Brizantha cv.[...](AU)

Hidrocefalia congênita bilateral total em felino: relato de caso / Total Congenital Bilateral Hydrocephalus in Feline: case report

O objetivo deste trabalho foi relatar um caso raro de hidrocefalia em um felino doméstico, da raça Persa, de 30 dias de idade. O animal foi atendido com histórico de impossibilidade de manter-se em estação, incoordenação motora, inabilidade para se alimentar sozinho e sustentar o peso da cabeça. No exame clínico, foi observada presença de fontanela aberta, aumento de calota craniana, ataxia, estrabismo unilateral e secreção ocular. A realização de ultrassonografia do crânio levou à confirmação do diagnóstico de hidrocefalia. O paciente permaneceu internado, sendo o protocolo de tratamento empregado constituído de corticosteroide, diurético e protetor gástrico em alta dose, além de alimentação por via oral e fluidoterapia. O animal veio a óbito após 24 horas, sendo encaminhado para realização de necropsia.(AU)

The objective of this work was to report a rare case of hydrocephalus in a domestic Persian feline, 30 days old. The animal was attended with a history of inability to keep in season, incoordination of the motor, inability to feed itself and support the weight of the head. In the clinical examination, the presence of an open fontanelle, an increase in the skull cap, ataxia, unilateral strabismus and ocular secretion were observed. The ultrasound examination of the skull led to confirmation of the diagnosis of hydrocephalus. The patient remained hospitalized, and the treatment protocol consisted of a corticosteroid, diuretic and gastric protector in high dose, besides oral feeding and fluid therapy. The animal died after 24 hours, being referred for necropsy.(AU)

Análise do líquido cérebro-espinhal de três doenças do sistema nervoso central de cães / Analysis of cerebral-spinal fluid of three central nervous system diseases of dogs

Foi realizado um estudo retrospectivo do líquido cérebro-espinhal de cães (LCE), atendidos pelo Serviço de Neurologia do Hospital Veterinário da Instituição, de 2004 a 2015, com o objetivo de analisar os resultados de cães com sinais neurológicos, comparar as alterações encontradas em dois locais de colheita no mesmo paciente e verificar se esse exame auxiliou o clínico em reforçar a suspeita clínica das principais doenças do sistema nervoso central. A pleocitose linfocítica esteve presente em 78,3% (29/37) das amostras de cães com cinomose e em 23,2% (10/43) de cães com DDIV. Houve dissociação albuminocitológica (DAC) em 73% (19/26) das amostras de cães com tumores IC e em 64,3% (9/14) de cães com tumores envolvendo a ME. Em cães com DDIV, houve significância estatística (p<0,05) entre o grau de disfunção neurológica e o total de células nucleadas (TCN) e total de proteínas (TP). Em 29 cães, houve a colheita do LCE da cisterna magna e da cisterna lombar e em 12 (41,4%) os resultados foram diferentes entre as duas amostras colhidas do mesmo cão, onde dois (6,9%) apresentaram alteração na amostra colhida cranial à lesão. Pode-se concluir que a pleocitose linfocítica foi a principal alteração encontrada no LCE de cães com cinomose e DDIV e DAC nas neoplasias, IC e ME, cães acometidos pela DDIV apresentaram sinais neurológicos mais severos conforme o TCN e o TP aumentaram e o LCE sofreu alteração, mesmo colhido cranial ao local da lesão e auxiliou o clínico em reforçar a suspeita clínica, mas não confirmou, as principais doenças neurológicas em cães.(AU)

A retrospective study including the analysis of the cerebrospinal fluid (CSF) of dogs neurologically affected was conducted by the Neurology Service of the Veterinary Hospital at the Institution, between 2004 and 2015. The aim of this study was to analyze the results of the CSF of dogs with neurological signs, and compare the changes in the CSF in two sampling sites in the same patient and see if this test helped the clinician to strengthen clinical suspicion of the major diseases of the central nervous system. Lymphocytic pleocytosis was present in 78.3% (29/37) of samples from dogs with distemper and in 23.2% (10/43) of samples from dogs with IVDD. The albumin cytologic dissociation (ACD) was found in 73% (19/26) of samples from dogs with IC tumors and in 64.3% (9/14) from dogs with tumors involving the SC. For dogs with IVDD, there was statistical significance (p<0.05) between the degree of neurological dysfunction and the total nucleated cells (TNC) and total protein (TP). In 29 dogs, CSF was collected from the cistern magna and the lumbar and in 12 (41.4%) the results were different between the samples of the same dog, where two cases (6,9%) showed alterations in the sample collected cranial to the injury. It can be concluded that the lymphocytic pleocytosis was the main alteration found in the CSF of dogs with distemper and IVDD and ACD in tumors. Dogs affected by IVDD had more severe neurological signs as TNC and TP increased and the CSF was altered even collected cranial to the lesion site and helped the clinician to strengthen the clinical suspicion, but not confirm, the major neurological diseases in dogs.(AU)

Análise do líquido cérebro-espinhal de três doenças do sistema nervoso central de cães / Analysis of cerebral-spinal fluid of three central nervous system diseases of dogs

Foi realizado um estudo retrospectivo do líquido cérebro-espinhal de cães (LCE), atendidos pelo Serviço de Neurologia do Hospital Veterinário da Instituição, de 2004 a 2015, com o objetivo de analisar os resultados de cães com sinais neurológicos, comparar as alterações encontradas em dois locais de colheita no mesmo paciente e verificar se esse exame auxiliou o clínico em reforçar a suspeita clínica das principais doenças do sistema nervoso central. A pleocitose linfocítica esteve presente em 78,3% (29/37) das amostras de cães com cinomose e em 23,2% (10/43) de cães com DDIV. Houve dissociação albuminocitológica (DAC) em 73% (19/26) das amostras de cães com tumores IC e em 64,3% (9/14) de cães com tumores envolvendo a ME. Em cães com DDIV, houve significância estatística (p<0,05) entre o grau de disfunção neurológica e o total de células nucleadas (TCN) e total de proteínas (TP). Em 29 cães, houve a colheita do LCE da cisterna magna e da cisterna lombar e em 12 (41,4%) os resultados foram diferentes entre as duas amostras colhidas do mesmo cão, onde dois (6,9%) apresentaram alteração na amostra colhida cranial à lesão. Pode-se concluir que a pleocitose linfocítica foi a principal alteração encontrada no LCE de cães com cinomose e DDIV e DAC nas neoplasias, IC e ME, cães acometidos pela DDIV apresentaram sinais neurológicos mais severos conforme o TCN e o TP aumentaram e o LCE sofreu alteração, mesmo colhido cranial ao local da lesão e auxiliou o clínico em reforçar a suspeita clínica, mas não confirmou, as principais doenças neurológicas em cães.(AU)

A retrospective study including the analysis of the cerebrospinal fluid (CSF) of dogs neurologically affected was conducted by the Neurology Service of the Veterinary Hospital at the Institution, between 2004 and 2015. The aim of this study was to analyze the results of the CSF of dogs with neurological signs, and compare the changes in the CSF in two sampling sites in the same patient and see if this test helped the clinician to strengthen clinical suspicion of the major diseases of the central nervous system. Lymphocytic pleocytosis was present in 78.3% (29/37) of samples from dogs with distemper and in 23.2% (10/43) of samples from dogs with IVDD. The albumin cytologic dissociation (ACD) was found in 73% (19/26) of samples from dogs with IC tumors and in 64.3% (9/14) from dogs with tumors involving the SC. For dogs with IVDD, there was statistical significance (p<0.05) between the degree of neurological dysfunction and the total nucleated cells (TNC) and total protein (TP). In 29 dogs, CSF was collected from the cistern magna and the lumbar and in 12 (41.4%) the results were different between the samples of the same dog, where two cases (6,9%) showed alterations in the sample collected cranial to the injury. It can be concluded that the lymphocytic pleocytosis was the main alteration found in the CSF of dogs with distemper and IVDD and ACD in tumors. Dogs affected by IVDD had more severe neurological signs as TNC and TP increased and the CSF was altered even collected cranial to the lesion site and helped the clinician to strengthen the clinical suspicion, but not confirm, the major neurological diseases in dogs.(AU)

Presença do genoma de BoHV-5 no líquido cefalorraquidiano de bovinos com meningoencefalite herpética / Presence of BoHV-5 genome in cerebrospinal fluid of cattle with herpetic meningoencephalitis

The diagnosis of bovine herpesvirus 5 (BoHV-5) encephalitis is confirmed after death by laboratory methods applied to brain fragments. Alternative methods to confirm ante-mortem diagnosis are important because the disease is not always lethal. The aim of this study was to investigate whether the presence of the virus genome in the cerebrospinal fluid (CSF) detected by polymerase chain reaction (PCR) might be admitted as a method for ante-mortem diagnosis. CSF samples were taken from 14 animals suffering from BoHV-5 encephalitis, diagnosed by characteristic histopathological lesions in the brain and by identification of the virus genome by PCR in different portions of the brain. Virus DNA was detected in the CSF of 21.42% (3/14) of the evaluated animals. Ante-mortem detection of the virus genome in the CSF showed low sensitivity to confirm the diagnosis. The diagnosis is confirmed by a positive result but a negative one does not discard the disease.(AU)

Presença do genoma de BoHV-5 no líquido cefalorraquidiano de bovinos com meningoencefalite herpética / Presence of BoHV-5 genome in cerebrospinal fluid of cattle with herpetic meningoencephalitis

The diagnosis of bovine herpesvirus 5 (BoHV-5) encephalitis is confirmed after death by laboratory methods applied to brain fragments. Alternative methods to confirm ante-mortem diagnosis are important because the disease is not always lethal. The aim of this study was to investigate whether the presence of the virus genome in the cerebrospinal fluid (CSF) detected by polymerase chain reaction (PCR) might be admitted as a method for ante-mortem diagnosis. CSF samples were taken from 14 animals suffering from BoHV-5 encephalitis, diagnosed by characteristic histopathological lesions in the brain and by identification of the virus genome by PCR in different portions of the brain. Virus DNA was detected in the CSF of 21.42% (3/14) of the evaluated animals. Ante-mortem detection of the virus genome in the CSF showed low sensitivity to confirm the diagnosis. The diagnosis is confirmed by a positive result but a negative one does not discard the disease.(AU)

Presença do genoma de BoHV-5 no líquido cefalorraquidiano de bovinos com meningoencefalite herpética

The diagnosis of bovine herpesvirus 5 (BoHV-5) encephalitis is confirmed after death by laboratory methods applied to brain fragments. Alternative methods to confirm ante-mortem diagnosis are important because the disease is not always lethal. The aim of this study was to investigate whether the presence of the virus genome in the cerebrospinal fluid (CSF) detected by polymerase chain reaction (PCR) might be admitted as a method for ante-mortem diagnosis. CSF samples were taken from 14 animals suffering from BoHV-5 encephalitis, diagnosed by characteristic histopathological lesions in the brain and by identification of the virus genome by PCR in different portions of the brain. Virus DNA was detected in the CSF of 21.42% (3/14) of the evaluated animals. Ante-mortem detection of the virus genome in the CSF showed low sensitivity to confirm the diagnosis. The diagnosis is confirmed by a positive result but a negative one does not discard the disease.

Meningoencefalite supurativa por Corynebacterium pseudotuberculosis em cabra com linfadenite caseosa: relato de caso / Suppurative meningoencephalitis by Corynebacterium pseudotuberculosis in a goat with caseous lymphadenitis: case report / Meningoencefalitis supurativa por Corynebacterium pseudotuberculosis en una cabra con linfadenitis caseosa: relato del caso

Lesões supurativas no sistema nervoso central de pequenos ruminantes podem ser causadas por Corynebacterium pseudotuberculosis. Este relato descreve um caso de meningoencefalite supurativa por C. pseudotuberculosis em cabra atendida na Clínica de Grandes Animais da FMVZ-UNESP/Botucatu, SP. O animal apresentava anorexia, linfadenite caseosa (LC), decúbito, opistótono, movimentos de pedalagem e nistagmo. O líquor evidenciou aumento de proteínas e pleocitose linfocítica. Na necropsia havia abscesso localizado no mesencéfalo que, após o cultivo microbiológico, resultou no isolamento de C. pseudotuberculosis.

Suppurative lesions in the central nervous system of small ruminants may be caused by Corynebacterium pseudotuberculosis. This report describes a case of suppurative meningoencephalitis caused by C. pseudotuberculosis in goats treated in the Large Animal Clinic of FMVZ-UNESP/Botucatu, SP. The animal had anorexia, caseous lymphadenitis (CL), recumbency, opisthotonus, paddling movements and nystagmus. The CSF showed increased protein and lymphocytic pleocytosis. At necropsy there were localized abscess in the midbrain that after the microbiological culture, resulted in the isolation of C. pseudotuberculosis.

Lesiones supurativas en el sistema nervioso central de los pequeños rumiates pueden ser causados por Corynebacterium pseudotuberculosis. En este informe se describe un caso de meningoencefalitis supurativa causada por C. pseudotuberculosis en cabras tratadas en el Large Animal Clinic FMVZ-UNESP/Botucatu, SP. El animal tenía anorexia, linfadenitis caseosa (CL), decúbito, opistótonos, movimientos de remo y nistagmo. El LCR mostró um aumento de proteínas y pleocitosis linfocitaria. En la necropsia había absceso localizado en el cerebro medio que después de que el cultivo microbiológico, dio como resultado el aislamiento de C. pseudotuberculosis.

Extracellular production of avicelase by the thermophilic soil bacterium Bacillus sp. SMIA-2 / Produção de avicelase extracelular pela bactéria termofílica Bacillus sp. SMIA-2

Nowadays, the isolation of new bacterial strains that produce enzymes with novel properties is a subject of great relevance to the scientific community. This study, in order to search for producers of new cellulase strains, investigated the avicelase production by thermophilic Bacillus sp. strain SMIA-2. The best avicelase activity was observed in a culture medium containing 0.5% (w v-1) avicel and 0.5% (w v-1) corn steep liquor with initial pH 7.5-8.0 incubated at 50oC. When avicel was replaced in the medium by the treated sugarcane bagasse (0.5%, w v-1) the avicelase activity levels were not affected. Studies on the avicelase characterization revealed that the optimum pH of the enzyme was found to be 8.5 and the enzyme retained more than 80% of its activity after incubation at room temperature for 2h at pH 6.5-8.5. The optimum temperature of this enzyme was 70oC and the enzyme retained 67% of the original activity after 20 min. of heat treatment at 70oC. Avicelase was stimulated by Mn2+ and Co2+, whereas Hg2+ greatly inhibited the enzyme activity.(AU)

Atualmente, o isolamento de estirpes de bactérias que produzem enzimas com novas propriedades é um tema de grande relevância para a comunidade científica. Este trabalho, buscando por novas cepas produtoras de celulases, investigou a produção de avicelases pelo termofílico Bacillus sp. cepa SMIA-2. A melhor atividade da enzima foi obtida em uma cultura contendo 0,5% (p v-1) avicel e 0,5% (p v-1) água de maceração de milho com pH inicial de pH 7,5-8,0 e incubada a 50oC. A substituição da avicel no meio de cultura pelo bagaço de cana- de- açúcar tratado (0,5%, p v-1) não afetou os níveis de atividade da avicelase. Estudos sobre a caracterização da avicelase revelaram que o pH para atividade ótima da enzima foi 8,5 e que a mesma reteve mais de 80% de sua atividade após ser incubada à temperatura ambiente por 2 h a pH 6,5- 8,5. A temperatura ótima da avicelase foi 70oC e a enzima reteve 67% da sua atividade original após 20 min. de incubação a 70oC. A avicelase foi estimulada pelos íons Mn2+ e Co2+, ao passo que Hg2+ inibiu a atividade da enzima.(AU)

Penicillin production by wild isolates of Penicillium chrysogenum in Pakistan

The present study was aimed at exploring the native wild isolates of Penicillium chrysogenum series in terms of their penicillin production potential. Apart from the standard medium, the efforts were made to utilize suitable agro-industrial wastes for the maximum yield of penicillin. Two series of P. chrysogenum were isolated from local sources and named as P. chrysogenum series UAF R1 and P. chrysogenum series UAF R2. The native series were found to possess better penicillin production potential than the already reported series of P. chrysogenum. However, P. chrysogenum series UAF R1 was found to be the best candidate for high yield of penicillin starting at 100 hour as compared to P. chrysogenum series UAF R2 which produced the highest yield of penicillin at 150 hours for a shorter period of time. Addition of Corn Steep Liquor (CSL) to the fermentation medium resulted in the production of 1.20g/L penicillin by P. chrysogenum series UAF R1 and P. chrysogenum series UAF R2. The fermentation medium in which Sugar Cane Bagasse (SCB) was replaced with CSL resulted in the highest yield of penicillin (1.92g/L) by both native series of P. chrysogenum. The penicillin production was increased by 62.5% in medium with SCB as compared to that with CSL. The penicillin yield of medium containing lactose and phenyl acetate was higher than that of control medium. Overall results revealed that P. chrysogenum series UAF R1 and P. chrysogenum series UAF R2 may be recommended for better yield of natural penicillin and this efficiency may be further enhanced by utilizing SCB as substrate in the growth medium.

Linfoma primário de células T no líquido cefalorraquidiano de cão: relato de caso / Characterization of primary t-cell lymphoma (CD3 +) in Csf of a dog: case report

Relata-se o diagnóstico de linfoma primário no sistema nervoso central em um cão Labrador Retrievier, de 10 anos de idade, que apresentava episódios convulsivos, incoordenação nos membros posteriores, head tilt, ataxia e sensibilidade diminuída no lado esquerdo. Constataram-se alterações laterais esquerdas, como ausências de propriocepção e de posicionamento tátil, alterações posteriores nas provas de carrinho de mão e de reação ao pulo e diminuição da extensão da postura e hemilocomoção. No líquido cefalorraquidiano (LCR), houve predomínio de linfócitos atípicos, caracterizados pela presença de anisocitose e anisocariose, nucléolos evidentes e anisonucleose, basofilia e microvacuolização citoplasmáticas, mitoses atípicas e corpúsculos linfoglandulares, compatíveis com linfoma, confirmado pelo exame histológico e imunocitoquímico, o qual revelou origem T, com expressão CD3+ e CD79-. A tomografia computadorizada não foi conclusiva e evidenciou diversas áreas hipodensas e intensificação de contraste na região de sulcos e giros do parênquima encefálico. A coleta do LCR foi essencial na rapidez do diagnóstico definitivo, indicando a natureza rara desta lesão primária.(AU)

A primary lymphoma in the central nervous system in a 10 year-old Labrador Retriever presenting seizures, hind limb incoordination, head tilt, ataxia and decreased sensitivity on the left side was reported. Regarding postural reactions, there were changes in the left side such as proprioceptive and tactile positioning defects, and in the posterior reaction tests such as wheelbarrowing and limb hopping, along with a reduction in the extensor postural thrust reaction and hemi-walking response. A cerebrospinal fluid (CSF) analysis showed a predominance of atypical lymphocytes characterized by pleocytosis, marked anisocytosis and anisokaryosis, evident nucleoli and anisonucleosis, cytoplasmic basophilia and microvacuolation, atypical mitotic figures and lymphoglandular bodies. These findings were compatible with lymphoma, which was confirmed by histopathology and immunocytochemistry that showed a T-cell origin, with CD3 + and CD79- expression. A computed tomography scan was inconclusive and showed several hypodense areas and a contrast enhancement in the sulci and gyri region of the brain parenchyma. The CSF analysis was essential for a quicker definitive diagnosis, indicating the nature of this rare primary injury.(AU)

Líquido cerebroespinhal de cães com doenças do sistema nervoso central

Foi realizado um estudo retrospectivo dos resultados do líquido cerebroespinhal (LCE) de cães, atendidos pelo Serviço de Neurologia (SN) do Hospital Veterinário Universitário (HVU) da Universidade Federal de Santa Maria (UFSM), de 2004 a 2015, com o objetivo de analisar os resultados obtidos do LCE de cães com sinais neurológicos, e comparar as alterações encontradas no LCE em dois locais de colheita no mesmo paciente e verificar se esse exame auxiliou o clínico em reforçar a suspeita clínica das principais doenças do sistema nervoso central. Dos 507 pacientes que foram submetidos à análise do LCE, apenas as análises de 144 (26,5%) cães se adequaram aos critérios de inclusão. Dentre estes, cães com cinomose representaram 21,6% (n=31), doença do disco intervertebral (DDIV) 52,7% (n=76), tumores intracranianos (IC) 13,2% (n=19) e tumores envolvendo a medula espinhal (ME) 8,3% (n=12). A pleocitose linfocítica esteve presente em 78,3% (29/37) das amostras de cães com cinomose e em 23,2% (10/43) das amostras de cães com DDIV. Já a dissociação albuminocitológica foi encontrada em 73% (19/26) das amostras de cães com tumores IC e em 64,3% (9/14) das amostras de cães com tumores envolvendo a ME. Para os cães acometidos pela DDIV, houve significância estatística (p < 0,05) entre o grau de disfunção neurológica e o total de células nucleadas e total de proteínas encontrados no LCE destes cães. Em 29 cães, houve a colheita do LCE tanto na cisterna magna (CM) quanto na cisterna lombar (CL) e em 12 (41,4%) os resultados foram diferentes entre as duas amostras colhidas do mesmo cão, onde dois (6,9%) apresentaram alteração na amostra colhida cranial à lesão. Pode-se concluir que a pleocitose linfocítica foi a principal alteração encontrada no LCE de cães com cinomose e DDIV e dissociação albuminocitológica nas neoplasias, intracranianas e medulares, cães acometidos pela DDIV apresentaram sinais neurológicos mais severos conforme o TCN e o TP aumentaram e o LCE sofreu alteração, mesmo colhido cranial ao local da lesão e auxiliou o clínico em reforçar a suspeita clínica, mas não confirmou, as principais doenças neurológicas em

A retrospective study including the analysis of the cerebrospinal fluid (CSF) of dogs neurologically affected was conducted by the Neurology Service (NS) of the Veterinary Teaching Hospital (VTH) at the Federal University of Santa Maria (FUSM), between 2004 and 2015. The aim of this study was to analyze the results of the CSF of dogs with neurological signs, and compare the changes found in the CSF in two sampling sites in the same patient and see if this test helped the clinician to strengthen clinical suspicion of the major diseases of the central nervous system. Of the 507 patients that underwent CSF analysis, only the analysis of 144 (26.5%) dogs were suited to inclusion criteria. The main diagnosed neurological diseases were distemper (21.6% [n=31]), intervertebral disc disease (IVDD) (52.7% [n=76]), intracranial (IC) tumors (13.2% [n=19]) and tumors which affected the spinal cord (SC) (8.3% [n=12]). Lymphocytic pleocytosis was present in 78.3% (29/37) of samples from dogs with canine distemper and in 23.2% (10/43) of samples from dogs with IVDD. The albuminocytologic dissociation was found in 73% (19/26) of samples from dogs with IC tumors and in 64.3% (9/14) of the samples from dogs with tumors involving the SC. For dogs affected by IVDD, there was statistical significance (p <0.05) between the degree of neurological dysfunction and the total nucleated cells (TNC) and total protein (TP). In 29 dogs, CSF was collected from both the cistern magna (CM) and the lumbar cistern (CL) and in 12 (41.4%) the results were different between the samples of the same dog, where two cases (6, 9%) showed alterations in the sample collected cranial to the injury. It can be concluded that the lymphocytic pleocytosis was the main alteration found in the CSF of dogs with distemper and IVDD and albuminocytologic dissociation in tumors, intracranial and affecting the spinal cord. Dogs affected by IVDD had more severe neurological signs as TNC and TP increased and the CSF was altered even collected cranial to the lesion site and helped the clinician to strengthen the clinical suspicion., but not confirm, the major neurological diseases in dogs.

Brewer's spent grain and corn steep liquor as alternative culture medium substrates for proteinase production by Streptomyces malaysiensis AMT-3

Brewer's spent grain and corn steep liquor or yeast extract were used as the sole organic forms for proteinase production by Streptomyces malaysiensis in submerged fermentation. The influence of the C and N concentrations, as well as the incubation periods, were assessed. Eight proteolytic bands were detected through gelatin-gel-electrophoresis in the various extracts obtained from the different media and after different incubation periods, with apparent molecular masses of 20, 35, 43, 50, 70, 100, 116 and 212 kDa. The results obtained suggest an opportunity for exploring this alternative strategy for proteinases production by actinomycetes, using BSG and CSL as economically feasible substrates.

Detecção precoce e quantificação de vírus da cinomose por PCR quantitativa em tempo real (qPCR) em diferentes tecidos e fluidos de um cão / Early detection and quantification of distemper virus by quantitative real time PCR (qPCR) in different tissues and fluids of a dog / Detección precoz y cuantificación del virus del mosquillo a través de PCR cuantitativo en tiempo real (cPCR) en diferentes tejidos y líquidos de un perro

A cinomose é uma doença de desafio diagnóstico, especialmente quando não há histórico de vacinação. O objetivo deste estudo foi detectar e quantificar partículas virais de cinomose em diferentes fluidos e tecidos biológicos de um cão, determinando o melhor tecido para diagnóstico viral ante mortem na fase de viremia. Atendeu-se um cão adulto com manifestações clínicas inespecíficas e corpúsculos de Sinegaglia Lentz em linfócitos. Amostras post mortem foram submetidas a PCR em tempo real (qPCR), que demonstrou RNA viral em concentrações de (x105) em líquor (1.216), bexiga (1.009), cérebro (605), sangue (572), cerebelo (523), rins (373), fígado (257), pulmões (191), estômago (154), terceira pálpebra (70) e urina (2,1). A técnica de qPCR permitiu confirmar a infecção pelo vírus, descartando vacinação recente. A amostra de líquor mostrou-se representativa para diagnóstico molecular de fase aguda de cinomose no animal estudado.

Canine distemper is a disease of challenging diagnosis, particularly when no vaccination history is available. The aim of this study was to detect and quantify distemper viral particles in different tissues and biological fluids of a dog, thus determining the best sample for ante mortem viral diagnosis during the viremic phase. An adult dog was received with non-specific clinical manifestations and scarce viral inclusions in lymphocytes. Post mortem samples were submitted to real-time PCR (qPCR), which demonstrated the following viral RNA concentrations (x105): cerebrospinal fluid (1,216), bladder (1,009), brain (605), blood (572), cerebellum (523), kidneys (373), liver (257), lungs (191), stomach (154), nictitating membrane (70) and urine (2.1). The qPCR technique allowed confirmation of viral infection, ruling out interference from recent vaccination. The cerebrospinal fluid sample proved to be representative of molecular diagnosis of the acute phase of canine distemper in the animal studied.

El moquillo es una enfermedad desafiante desde el punto de vista diagnóstico, especialmente cuando no existen datos sobre la vacunación. El objetivo de este estudio fue detectar y cuantificar partículas virales de moquillo en diferentes líquidos y tejidos de un perro, determinando el mejor tejido para el diagnóstico viral ante mortem en fase de viremia. Se atendió un perro adulto con manifestaciones clínicas inespecíficas y corpúsculos de Sinegaglia Lentz en linfocitos. Muestras post mortem fueron evaluadas con PCR en tiempo real (cPCR), que mostraron ARN viral en concentraciones de (x105) en líquido cefalorraquídeo (1.216), vejiga (1.009), cerebro (605), sangre (572), cerebelo (523), riñones (373), hígado (257), pulmones (191), estómago (154), tercer párpado (70) y orina (2,1). La técnica de cPCR permitió confirmar la infección viral, descartando una vacunación reciente. La muestra de líquido cefalorraquídeo fue representativa para el diagnóstico molecular en fase aguda de moquillo en el animal estudiado.

Detecção precoce e quantificação de vírus da cinomose por PCR quantitativa em tempo real (qPCR) em diferentes tecidos e fluidos de um cão / Early detection and quantification of distemper virus by quantitative real time PCR (qPCR) in different tissues and fluids of a dog / Detección precoz y cuantificación del virus del mosquillo a través de PCR cuantitativo en tiempo real (cPCR) en diferentes tejidos y líquidos de un perro

A cinomose é uma doença de desafio diagnóstico, especialmente quando não há histórico de vacinação. O objetivo deste estudo foi detectar e quantificar partículas virais de cinomose em diferentes fluidos e tecidos biológicos de um cão, determinando o melhor tecido para diagnóstico viral ante mortem na fase de viremia. Atendeu-se um cão adulto com manifestações clínicas inespecíficas e corpúsculos de Sinegaglia Lentz em linfócitos. Amostras post mortem foram submetidas a PCR em tempo real (qPCR), que demonstrou RNA viral em concentrações de (x105) em líquor (1.216), bexiga (1.009), cérebro (605), sangue (572), cerebelo (523), rins (373), fígado (257), pulmões (191), estômago (154), terceira pálpebra (70) e urina (2,1). A técnica de qPCR permitiu confirmar a infecção pelo vírus, descartando vacinação recente. A amostra de líquor mostrou-se representativa para diagnóstico molecular de fase aguda de cinomose no animal estudado.(AU)

Canine distemper is a disease of challenging diagnosis, particularly when no vaccination history is available. The aim of this study was to detect and quantify distemper viral particles in different tissues and biological fluids of a dog, thus determining the best sample for ante mortem viral diagnosis during the viremic phase. An adult dog was received with non-specific clinical manifestations and scarce viral inclusions in lymphocytes. Post mortem samples were submitted to real-time PCR (qPCR), which demonstrated the following viral RNA concentrations (x105): cerebrospinal fluid (1,216), bladder (1,009), brain (605), blood (572), cerebellum (523), kidneys (373), liver (257), lungs (191), stomach (154), nictitating membrane (70) and urine (2.1). The qPCR technique allowed confirmation of viral infection, ruling out interference from recent vaccination. The cerebrospinal fluid sample proved to be representative of molecular diagnosis of the acute phase of canine distemper in the animal studied.(AU)

El moquillo es una enfermedad desafiante desde el punto de vista diagnóstico, especialmente cuando no existen datos sobre la vacunación. El objetivo de este estudio fue detectar y cuantificar partículas virales de moquillo en diferentes líquidos y tejidos de un perro, determinando el mejor tejido para el diagnóstico viral ante mortem en fase de viremia. Se atendió un perro adulto con manifestaciones clínicas inespecíficas y corpúsculos de Sinegaglia Lentz en linfocitos. Muestras post mortem fueron evaluadas con PCR en tiempo real (cPCR), que mostraron ARN viral en concentraciones de (x105) en líquido cefalorraquídeo (1.216), vejiga (1.009), cerebro (605), sangre (572), cerebelo (523), riñones (373), hígado (257), pulmones (191), estómago (154), tercer párpado (70) y orina (2,1). La técnica de cPCR permitió confirmar la infección viral, descartando una vacunación reciente. La muestra de líquido cefalorraquídeo fue representativa para el diagnóstico molecular en fase aguda de moquillo en el animal estudiado.(AU)

First isolation of equine herpesvirus type 1 from a horse with neurological disease in brazil

ABSTRACT This report describes the first Brazilian equine herpesvirus type 1 (EHV-1) isolation from a single fatal equine herpes myeloencephalopathy case in a mare. The isolation of EHV-1 was confirmed from the first passage of cerebrospinal fluid (CSF) sample in Vero cells by PCR and virus neutralization assay. As virus isolation from CSF is unlikely to be successful, as has been shown in several case reports, this circumstantial evidence suggests that the neurological disease was caused by particularly neurovirulent strain of EHV-1.

RESUMO O presente relato refere-se ao primeiro isolamento no Brasil do herpesvírus eqüino tipo 1 (HVE-1) proveniente de um caso clínico de mieloncefalopatia herpética em uma égua, que evoluiu para o óbito. O isolado do HVE-1, denominado 07/05, foi obtido a partir de uma amostra de líquor na primeira passagem em células Vero, confirmando-se sua identidade pela PCR e pela prova de neutralização viral. Como o isolamento viral a partir do líquor geralmente não é bem sucedido, conforme demonstrado em vários relatos de casos, o presente achado sugere que a doença neurológica foi causada por uma amostra particularmente neurovirulenta de HVE-1.

Estudo das concentrações de proteína C-reativa sérica e liquórica em cães com epilepsia idiopática / Study of C-reactive protein concentrations in serum and cerebrospinal fluid in dogs with idiopathic epilepsy

A epilepsia compreende um grupo de alterações neurológicas frequentes em humanos e animais, caracterizada pela ocorrência periódica de crises convulsivas. A causa do processo pode ter várias origens sendo necessária a realização de exames complementares para o diagnóstico definitivo. A análise de biomarcadores, em especial as proteínas de fase aguda, como a proteína C-reativa (PCR), auxilia na identificação de doenças neurológicas inflamatórias e infecciosas, já que após serem produzidas pelo fígado conseguem atingir o tecido danificado e ter suas concentrações elevadas rapidamente na circulação. A concentração de PCR está diretamente relacionada à resposta de fase aguda, independentemente da origem ou natureza do estímulo, podendo ser um processo inflamatório, infeccioso ou até mesmo de origem neoplásica. Embora a PCR tenha sido estudada e monitorada em pacientes com as mais variadas doenças, até o momento não foi determinada a presença de PCR no soro e líquor de cães com epilepsia idiopática. O objetivo deste estudo foi avaliar as concentrações de PCR no líquor e soro de cães apresentando epilepsia idiopática e verificar se essa protéina pode ser utilizada como biomarcador para auxiliar no diagnóstico da doença. Para tanto foram compostos três grupos. O primeiro, denominado A, com 23 animais clinicamente normais; o segundo denomindo B, composto por 17 cães manifestando convulsão em até 24 horas anteriores ao momento da coleta de mateiral; e o terceiro denominado C, com 16 cães apresentando convulsões de 24 horas até 120 horas antecedendo o momento da coleta do líquor e do soro. Foram mensuradas as proteínas totais séricas e realizadas as eletroforeses, além da análise do líquor e tomografia computadorizada. Animais com alterações estruturais detectadas na tomografia foram excluidos do estudo. As concentrações de PCR séricas foram avaliadas por meio da técnica ELISA utilizando-se kit comercial Tridelta Development Ltd, espécie específico. Além desta avaliação, os grupos B e C foram alivados quanto à concentração de PCR no liquor. Os resultados foram analisados pelo teste de Kruskal Wallis, seguido pelo teste de Dunn, enquanto para eletroforese e análise de PCR no líquor utilizou-se teste T não pareado. Não houve diferença significante em relação à eletroforese de proteínas séricas nos três grupos, assim como não se observaram alterações na análise do líquor nos grupos B e C. As concentrações séricas de PCR em cães normais variaram níveis não detectáveis a 6,36 µg/mL, com média de 0,98 µg/mL. As concentrações séricas nos animais do grupo B variaram de 1,04 µg/mL a 5,03 µg/mL, com média 2,14 µg/mL, enquanto no grupo C as concentrações foram de níveis não detectáveis a 1,9 µg/mL com média 0,51 µg/mL. A análise estatística demonstrou diferença significante entre os grupos sendo a média do grupo B superior aos demais (p= 0,0002). As concentrações liquóricas de PCR foram muito baixas quando comparadas àquelas observadas em cães com afecções inflamatórias e infecciosas e não foram em sua maioria detectáveis no líquor quando o período entre a convulsão e a coleta foi superior ao período de 24 horas.

Epilepsy is a group of neurological disorders of humans and animals characterized by recurrent seizures. Epilepsy can have a number of causes and some complementary tests can help with a precise diagnosis. Biomarkers analysis, in special acute protein phase such as C reactive protein (PCR) can help identify inflammatory and infection neurological disease. Acute phase proteins are produced by liver and reach damaged tissue increasing blood concentration. Today studies show that increases in the PCR blood concentration is related to acute inflammatory response independent of mint, whether it is inflammatory, neoplastic or infection. Although PCR has been studied in many diseases, in special neurological disorder followed or not by seizures, until now PCR has not been founded in blood or liquor of dogs with idiopathic epilepsy. The purpose of this study is to evaluate PCR concentration in blood and liquor of patients with idiopathic epilepsy and verify if the protein can be considered a biomarker to help its diagnose. The study has 3 groups. The first named control group A, with 23 healthy animals, the second named B with 17 dogs that have had seizures within 24h, and the third named C with 16 dog that have had seizures after 24 to 120 hours from blood or liquor collection. The investigation is based on analyzing total protein and electrophoretic protein profile, liquor analysis and tomography. Patients with structural brain damages detected by tomography were excluded from the study. In the control group PCR concentration were analyzed by ELISA method and kit Tridelta Development Ltd, species specific. In groups B and C were also procedure PCR analyses in liquor sample. The results were analyzed by the Kruskal Wallis test and the Dun test, while electrophorese and PCR of liquor where analyzed by the T test not parried. There was no significant difference in electrophorese in the three groups and there were not found alterations in the liquor analyzes of the groups B and C. PCR blood concentration in healthy dogs vary between not detectable values to 6,36mcg/ml, with an average of 0,98mcg/ml. Blood concentrations from animal of group B vary from 1,04 mcg/ml to 5,03, with and average of 2,14mcg/ml. Meanwhile in group C blood concentration values were from not detectable to 1,9 mcg/dl, with an average 0,50 mcg/ml. Statistic analyses show significant difference between groups. Group B average was higher (p=0,0002).