First microscopic and molecular parasitological survey of Strongylus vulgaris in Brazilian ponies / Primeiro levantamento parasitológico microscópico e molecular de Strongylus vulgaris em pôneis brasileiros

The frequency of gastrointestinal parasites with an emphasis on Strongylus vulgaris was investigated among the Brazilian Pony breed kept on farms in the municipality of Teresópolis, state of Rio de Janeiro. Fecal samples were collected in three stud farms: A (n= 22 animals), B (n= 3), and C (n= 2). Fecal samples were subjected to the quantitative Mini-FLOTAC technique, using three different solutions, and to qualitative techniques. The parasite prevalence was found to be 81.4%. Eggs from strongylids were identified in 74% of the ponies. Eggs of Parascaris spp. were detected in 22.7% of the animals, which were all females of farm A. At this locality, mares were kept with their foals in fenced paddocks all the time. The NaCl solution of d = 1.200 g/ml was generally the one that presented the highest frequency of diagnosis of nematode eggs and the highest mean of fecal eggs per gram. The fecal samples were also subjected to the polymerase chain reaction for amplification of DNA from the ITS2 region for Strongylus vulgaris. Twelve samples presented nucleotide sequences for S. vulgaris. In the end, this study revealed the high frequency (96.3%) of S. vulgaris among ponies on farms in Teresópolis, Rio de Janeiro, Brazil.(AU)

A frequência de parasitos gastrointestinais, com ênfase na pesquisa de Strongylus vulgaris, foi investigada entre os Pôneis Brasileiros criados em haras na cidade de Teresópolis, no estado do Rio de Janeiro. Amostras fecais foram coletadas em três haras: A (n=22 animais), B (n=3) e C (n=2). Amostras fecais foram submetidas à técnica quantitativa de Mini-FLOTAC utilizando três diferentes soluções e técnicas qualitativas. A prevalência de parasitos foi de 81,4%. Ovos de estrôngilos foram identificados em 74% dos pôneis. Ovos de Parascaris spp. foram detectados em 22,7% dos animais, sendo todos fêmeas do haras A. Nesta propriedade, as éguas eram mantidas com os pôneis em piquetes cercados durante todo o tempo. A solução de NaCl, com densidade de 1.200 g/ml, foi a que apresentou a maior frequência diagnóstica de ovos de nematoides e a maior contagem de ovos por grama de fezes. As amostras também foram submetidas à reação de polimerase em cadeia para amplificar DNA da região ITS2 de Strongylus vulgaris. Doze amostras fecais apresentaram sequências nucleotídicas de S. vulgaris. Ao final, este estudo demonstrou a alta frequência (96.3%) de S. vulgaris em pôneis mantidos em haras na cidade de Teresópolis, Rio de Janeiro, Brazil.(AU)

First molecular description of autochthonous urban cases of canine visceral leishmaniasis in the city of Belém, Pará, Brazil / Primeira descrição molecular de casos autóctones urbanos de leishmaniose visceral canina na cidade de Belém, Pará, Brasil

Leishmaniasis is an anthropozoonosis transmitted by vectors, with dogs being the main domestic reservoirs. Brazil is one of the countries most affected by this disease, and it has been described in humans and dogs in every region in the country. In the northern region leishmaniasis cases in humans have been described in more than 100 municipalities in the State, including the capital, Belém. This study involves two cases of canine visceral leishmaniasis in which the animals developed clinical signs compatible with the disease in urban areas in Belém, the Pará state capital. The diagnosis was confirmed via polymerase chain reaction (PCR) to detect SSUr-rDNA and kDNA of Leishmania sp. and Leishmania infantum, respectively. In one of the cases the animal died and in the other the animal underwent treatment with medicines prescribed for dogs. Through this treatment, parasitemia in the second animal has been kept under control and is being monitored through molecular tests. Previously, no canine cases had been notified from urban neighborhoods in the city of Belém, but only on the island of Cotijuba, at a distance of 29 kilometers from the city. Cases of canine and human leishmaniasis have been recorded close to the capital, Belém, which has areas of conserved vegetation and where the presence of disease vectors has been described. Thus, as has been done in several other Brazilian cities, this study uses clinical and laboratory findings to confirm the presence of autochthonous cases of canine visceral leishmaniasis in the city of Belém.

A leishmaniose é uma antropozoonose transmitida por vetores, sendo os cães os principais reservatórios domésticos. O Brasil é um dos países mais acometidos por esta doença, sendo descrita em humanos e cães em todas as regiões do país. Na região norte casos de leishmaniose em humanos foram descritos em mais de 100 municípios do Estado, incluindo a capital, Belém. Este estudo envolve dois casos de leishmaniose visceral canina em que os animais desenvolveram sinais clínicos compatíveis com a doença em áreas urbanas de Belém, capital do estado do Pará. O diagnóstico foi confirmado pela reação em cadeia da polimerase (PCR) para detectar o SSUr-rDNA e kDNA de Leishmania sp e Leishmania infantum, respectivamente. Em um dos casos o animal veio a óbito e no outro o animal foi submetido a tratamento com medicamentos prescritos para cães. Por meio desse tratamento, a parasitemia no segundo animal foi mantida sob controle e está sendo monitorada por meio de testes moleculares. Anteriormente, nenhum caso canino havia sido notificado em bairros urbanos da cidade de Belém, apenas na ilha de Cotijuba, distante 29 quilômetros da cidade. Casos de leishmaniose canina e humana foram registrados próximo à capital, Belém, que possui áreas de vegetação conservada e onde foi descrita a presença de vetores de doenças. Assim, como tem sido registrado em várias outras cidades brasileiras, este estudo utiliza achados clínicos e laboratoriais para confirmar a presença de casos autóctones de leishmaniose visceral canina na cidade de Belém.

Dogs naturally infected by Rangelia vitalii, Babesia canis vogeli, and Ehrlichia canis in São Paulo, Brazil / Cães naturalmente infectados por Rangelia vitalii, Babesia canis vogeli, e Ehrlichia canis em São Paulo, Brasil

Several agents can cause hemoparasitic diseases in dogs, and blood-sucking arthropods transmit these diseases. These agents can cause several clinical manifestations and, in some cases, can kill the host. Because these agents are essential in animal health, this study aims to detect the frequency of Ehrlichia canis, Rickettsia rickettsii, Anaplasma platys, and Rangelia vitalii by real-time PCR and Babesia vogeli in dogs in the southern region of the city of São Paulo, São Paulo. Of the 98 dog samples, 18 (18.4%) tested positive with real-time polymerase chain reaction for at least one studied agent. Of these 18 samples, 17 tested positive for a single agent (11.2% for B. canis vogeli, 1.02% for R. vitalii, and 5.1% for E. canis), and one showed co-infection with B. canis vogeli and R. vitalii. The results demonstrate the presence of hemoparasites in the studied animals, which can influence the quality and life expectancy of these animals. The Rangeliadetection warns small animal clinicians to include it as a differential diagnosis for hemoparasitosis.(AU)

As hemoparasitoses em cães podem ser causadas por diversos agentes, sendo essas doenças transmitidas por artrópodes hematófagos. Esses agentes podem causar diversas manifestações clínicas e, em alguns casos, podem matar o hospedeiro. Este estudo teve como objetivo detectar por PCR em tempo real a frequência de Ehrlichia canis, Rickettsia rickettsii, Anaplasma platys, Rangelia vitalii e Babesia canis vogeli em amostras de cães da zona sul da cidade de São Paulo, Brasil. Das 98 amostras de cães, 18 (18,4%) testaram positivo com reação em cadeia da polimerase em tempo real para pelo menos um agente estudado. Destas 18 amostras, 17 testaram positivo para um único agente (11,2% para B. canis vogeli, 1,02% para R. vitalii e 5,1% para E. canis), e uma apresentou coinfecção com B. canis vogeli e R. vitalii. Os resultados demonstram a presença de hemoparasitas nos animais estudados, o que pode influenciar a qualidade e a expectativa de vida desses animais. Além disso, é o primeiro relato da detecção de R. vitalli na zona sul de São Paulo e serve de alerta para os clínicos de pequenos animais incluírem esse agente como diagnóstico diferencial para as hemoparasitoses.(AU)

Detecção do vírus da imunodeficiência felina em gatos domésticos (Felis catus) pela técnica de reação em cadeia da polimerase / Detection of feline immunodeficiency virus in domestic cats (Felis catus) by polymerase chain reaction technique

O objetivo deste trabalho foi detectar a presença de DNA do Vírus da Imunodeficiência Felina (FIV) em gatos domesticos (Feliz catus) assintomáticos. Foi realizada a tecnica de reação em cadeia da polimerase (PCR) em 50 animais. Para tal, foram coletadas amostras de sangue, por venopunção da jugular, de forma asséptica para armazenamento de 1-2 mL de sangue total. Os animais que participaram do estudo fizeram parte do projeto de castração "Vida digna" da Universidade Federal Rural da Amazônia. E a escolha dos animais foi realizada de maneira aleatória, sem distinção por sexo ou idade, resultando em 29 foram fêmeas e 21 machos. Para o diagnóstico, foi realizada a extração do DNA, em seguida as amostras foram testadas em duas reações de PCR utilizando- se dois conjuntos de primers do Gene gag de FIV. Achou-se uma prevalência de 2% (1/50), confirmando assim a presença do vírus na cidade de Belém. Assim, evidenciando a importância de testar os felinos mesmo sendo assintomáticos. Desta forma, faz-se necessário a realização de trabalhos futuros que amplie o número amostral dos animais testados para assim elucidar o perfil epidemiológico da doença na região de Belém do Pará, considerando a relevância clínica desta infecção e a correta conduta médica veterinária para evitar novas infecções.

The objective of this work was to detect the presence of Feline Immunodeficiency Virus (FIV) proviral DNA in asymptomatic domestic cats (Feliz catus). The polymerase chain reaction technique was performed from 50 animals. For this, blood samples were collected by jugular venipuncture, aseptically for storage of 1-2 mL of whole blood. The animals that participated in the study were part of the castration project "Vida digna" at the Universidade Federal Rural da Amazônia. And the choice of animals was performed randomly, without distinction by sex or age, resulting in 29 females and 21 males. For diagnosis, DNA extraction was performed, then the samples were tested in two PCR reactions using two sets of FIV gag gene primers. A prevalence of 2% (1/50) was observed, thus confirming the presence of the virus in the city of Belém. Thus, highlighting the importance of testing the felines even if they are asymptomatic. Therefore, it is necessary to carry out future work that expands the sample number of animals tested in order to elucidate the epidemiological profile of the disease in the region of Belém do Pará, considering the clinical relevance of this infection and the correct veterinary medical conduct to avoid new infections.

The Rv2807 target gene: a determining factor to directly detect Mycobacterium bovis from suspected bovine tuberculosis lesions / Gene alvo Rv2807: um fator determinante para detectar Mycobacterium bovis diretamente de lesões suspeitas de tuberculose bovina

Bovine tuberculosis (bTB) is a zoonosis caused by Mycobacterium bovis, a species belonging to the Mycobacterium tuberculosis complex (MTC) group. Direct bTB diagnosis from suggestive lesions can be performed by nested q-PCR targeting the Rv2807 gene present in the MTC group, as well as the TbD1 gene, present in M. bovis. In this context, the aim of the present study was to assess the importance of considering positive MTC results for the Rv2807 target gene obtained through the nested real time polymerase chain reaction (nested q-PCR) applied to samples obtained directly from suspected bTB lesions. A total of 174 samples of suggestive bTB caseous lesions were obtained during cattle slaughter in slaughterhouses in the state of Mato Grosso, Brazil. DNA was extracted from the lesions and nested q-PCR was performed to detect both MTC and M. bovis. Both samples positive for the Rv2807 (41/174) and TbD1 (29/174) were submitted to bacterial culturing (23/41), and the DNA of the isolates (23) was extracted and submitted again to nested q-PCR. The Rv2807 gene (MTC) was previously amplified by nested q-PCR directly from the lesions, although the TbD1 gene specific for M. bovis was not amplified previously in four of the successfully isolated samples (4/23), only following isolation, and only the Rv2807 gene was amplified before and after isolation. In conclusion, the target gene Rv2807(MTC) exhibited higher positivity in the analyzed samples compared to the TbD1 gene (M. bovis).

A tuberculose bovina (bTB) é uma zoonose causada pelo Mycobacterium bovis, uma espécie pertencente ao grupo do complexo Mycobacterium tuberculosis (MTC). O diagnóstico direto de bTB a partir de lesões sugestivas pode ser realizado por nested q-PCR visando o gene Rv2807 presente no grupo MTC, bem como o gene TbD1, presente em M. bovis. Nesse contexto, o objetivo do presente estudo foi avaliar a importância de considerar os resultados de MTC positivos para o gene alvo Rv2807 obtidos através da reação em cadeia da polimerase nested real time (nested q-PCR) aplicada a amostras obtidas diretamente de lesões suspeitas de bTB. Um total de 174 amostras de lesões caseosas sugestivas de bTB foram obtidas durante o abate de bovinos em frigoríficos do estado de Mato Grosso, Brasil. DNA foi extraído das lesões e nested q-PCR foi realizado para detectar tanto MTC quanto M. bovis. Ambas as amostras positivas para Rv2807 (41/174) e TbD1 (29/174) foram submetidas a cultura bacteriana (23/41), e o DNA dos isolados (23) foi extraído e submetido novamente à nested q-PCR. O gene Rv2807 (MTC) foi previamente amplificado por nested q-PCR diretamente das lesões, embora o gene TbD1 específico para M. bovis não tenha sido amplificado anteriormente em quatro das amostras isoladas com sucesso (4/23), apenas após o isolamento, e apenas o gene Rv2807 foi amplificado antes e após o isolamento. Em conclusão, o gene alvo Rv2807 (MTC) apresentou maior positividade nas amostras analisadas em relação ao gene TbD1 (M. bovis).

Campylobacter fetus in abomasal fluid from spontaneously aborted bovine and ovine fetuses

Pregnancy losses are a major concern in livestock industry due to their economic impact on producers. Campylobacter fetus subspecies fetus (Cff) and C. fetus subspecies venerealis (Cfv) are directly related to reproductive failures in ruminants. Cff colonizes the gastrointestinal tract of a wide range of hosts leading to abortion, while Cfv is restricted to genital tract being generally associated to infertility in bovine. Considering the great economic losses related to campylobacteriosis in cattle and ovine herds, this study aims to investigate the occurrence of C. fetus, considering Cff and Cfv subspecies, in bovine and ovine spontaneously aborted fetuses in state of Rio Grande do Sul, Brazil. In this study, samples of abomasal fluid collected from 30 spontaneously aborted bovine (n = 18) and ovine (n = 12) fetuses were investigated for the detection of Campylobacter fetus throughout conventional PCR. Positive fetuses for C. fetus presence were further analyzed by molecular assays for Cff and Cfv detection, in order to determine subspecies identification. When available, samples of the main organs of the thoracic and abdominal cavities, as well as the brain, skeletal muscle, eyelid, skin, and placenta were collected for further histopathological analyses and bacterial culture, aiming to assess the presence of infection lesions and pathogens in those sites, respectively. Additionally, RT-qPCR assays were also performed for the detection of ruminant pestivirus, in order to detect bovine viral diarrhea cases. Throughout the present methodology, C. fetus was detected in the abomasal fluid samples of 2 bovine fetuses, being both identified as Cfv subspecies by PCR. Histopathological analyses demonstrated that macroscopic and microscopic changes found in the Cfv-positive animals were not either specific or directly related to Campylobacter infections. Moreover, no significant bacterial growth was observed in microbiological culture from the collected tissues, and both fetuses were negative for ruminant pestivirus. Differently, there was no detection of C. fetus in any of the analyzed ovine fetuses. Considering that abortion diagnosis rates reported in cattle and sheep industry are highly variable among the published studies, and that abortion diagnoses are commonly inconclusive due to difficulties in sampling methodology and inadequate identification of the pathogen involved, it is important to investigate the etiological causes of abortion the herds for better understanding the causes of pregnancy issues and monitoring their occurrence. In addition, the absence of pathognomonic lesions in the tissues investigated in the histopathological analyses observed in this study strongly suggests that well-known etiological agents commonly associated to abortion, such as Leptospira spp., Toxoplasma spp., Chlamydia spp. and Neospora caninum, are unlikely to be the cause of infection of the analyzed fetuses. Taking this into account, the presence of C. fetus in the abomasal fluid samples from two bovine fetuses demonstrated in the present study suggests the possible association of Cfv not only with infertility, but also with cases of bovine abortion, highlighting the importance of investigating unusual causal agents of abortions in sheep and cattle. Overall, an adequate diagnosis is essential for establishing better prevention strategies to avoid the circulation of abortion-related infectious agents in the herds.(AU)

Molecular diagnosis of avian viruses in grassland passerines and captive yellow cardinals Gubernatrix cristata in Brazil

ABSTRACT: Avian influenza viruses (AIVs), Newcastle disease virus (NDV), West Nile virus (WNV), adenovirus (AV) and herpesvirus (HV) play an important role in the health of human and animal populations. However, knowledge of the prevalence of these viruses in wild birds is restricted to some groups (e.g. shorebirds) or regions worldwide. Information on grassland birds of South America, which is essential for their conservation, is scarce. The objectives of the present study were to evaluate occurrences of AIV, NDV, WNV, AV and HV for the first time in a bird community of a unique protected area in southern Brazil, which is home for the critically endangered yellow cardinal (Gubernatrix cristata), and captive yellow cardinals from fauna maintainers of the Brazilian Captive Program of the Yellow Cardinal. Passerine species of wild life were caught, identified and samples (swabs) were collected from the oropharynx and cloaca of 64 passerines of 26 species (including 3 yellow cardinals) and 30 yellow cardinals of captive, for molecular diagnosis. The samples were subjected to RNA and DNA extraction and the real-time polymerase chain reaction (RT-PCR) for AIV, NDV and WNV and nested PCR for AV and HV. One yellow cardinal of captive presented a positive result for AV, this result is important for planning, managing natural attributes and making decisions in relation to integrated conservation of threatened species. This is the first report of AV in yellow cardinal and epidemiological investigation of viruses in wild passerines of the Pampa biome, in Rio Grande do Sul, Brazil.

RESUMO: Os vírus da gripe aviária (VGA), vírus da doença de Newcastle (VDN), vírus do Nilo Ocidental (VNO), adenovírus (AV) e herpesvírus (HV) desempenham um papel importante na saúde das populações humana e animal. No entanto, o conhecimento da prevalência desses vírus em aves selvagens é restrito a alguns grupos (por exemplo, aves limícolas) ou regiões em todo o mundo. As informações sobre as aves campestres da América do Sul, essenciais para a sua conservação, são escassas. Os objetivos do presente estudo foram avaliar a ocorrência de VGA, VDN, VNO, AV e HV pela primeira vez em uma comunidade de aves de uma área única protegida no Sul do Brasil, que abriga o cardeal-amarelo (Gubernatrix cristata) criticamente ameaçado de extinção e em cardeais-amarelos de cativeiro dos mantenedores de fauna do Programa Brasileiro de Cativeiro do Cardeal-amarelo. Espécies de passeriformes silvestres foram capturadas, identificadas e amostras (swabs) foram coletadas da orofaringe e cloaca de 64 passeriformes de 26 espécies (incluindo 3 cardeais-amarelos) e 30 cardeais-amarelos de cativeiro, para diagnóstico molecular. As amostras foram submetidas à extração de RNA e DNA e à reação em cadeia da polimerase em tempo real (RT-PCR) para VGA, VDN e VNO e nested PCR para AV e HV. Um cardeal-amarelo de cativeiro apresentou resultado positivo para AV, este resultado é importante para o planejamento, manejo dos atributos naturais e tomada de decisões em relação à conservação integrada de espécies ameaçadas. Este é o primeiro relato de AV em cardeal-amarelo e de investigação epidemiológica de vírus em passeriformes silvestres do bioma Pampa, no Rio Grande do Sul, Brasil.

Molecular diagnosis of avian viruses in grassland passerines and captive yellow cardinals Gubernatrix cristata in Brazil / Diagnóstico molecular de vírus aviários em passeriformes campestres e cardeais-amarelos Gubernatrix cristata cativos no Brasil

Avian influenza viruses (AIVs), Newcastle disease virus (NDV), West Nile virus (WNV), adenovirus (AV) and herpesvirus (HV) play an important role in the health of human and animal populations. However, knowledge of the prevalence of these viruses in wild birds is restricted to some groups (e.g. shorebirds) or regions worldwide. Information on grassland birds of South America, which is essential for their conservation, is scarce. The objectives of the present study were to evaluate occurrences of AIV, NDV, WNV, AV and HV for the first time in a bird community of a unique protected area in southern Brazil, which is home for the critically endangered yellow cardinal (Gubernatrix cristata), and captive yellow cardinals from fauna maintainers of the Brazilian Captive Program of the Yellow Cardinal. Passerine species of wild life were caught, identified and samples (swabs) were collected from the oropharynx and cloaca of 64 passerines of 26 species (including 3 yellow cardinals) and 30 yellow cardinals of captive, for molecular diagnosis. The samples were subjected to RNA and DNA extraction and the real-time polymerase chain reaction (RT-PCR) for AIV, NDV and WNV and nested PCR for AV and HV. One yellow cardinal of captive presented a positive result for AV, this result is important for planning, managing natural attributes and making decisions in relation to integrated conservation of threatened species. This is the first report of AV in yellow cardinal and epidemiological investigation of viruses in wild passerines of the Pampa biome, in Rio Grande do Sul, Brazil.(AU)

Os vírus da gripe aviária (VGA), vírus da doença de Newcastle (VDN), vírus do Nilo Ocidental (VNO), adenovírus (AV) e herpesvírus (HV) desempenham um papel importante na saúde das populações humana e animal. No entanto, o conhecimento da prevalência desses vírus em aves selvagens é restrito a alguns grupos (por exemplo, aves limícolas) ou regiões em todo o mundo. As informações sobre as aves campestres da América do Sul, essenciais para a sua conservação, são escassas. Os objetivos do presente estudo foram avaliar a ocorrência de VGA, VDN, VNO, AV e HV pela primeira vez em uma comunidade de aves de uma área única protegida no Sul do Brasil, que abriga o cardeal-amarelo (Gubernatrix cristata) criticamente ameaçado de extinção e em cardeais-amarelos de cativeiro dos mantenedores de fauna do Programa Brasileiro de Cativeiro do Cardeal-amarelo. Espécies de passeriformes silvestres foram capturadas, identificadas e amostras (swabs) foram coletadas da orofaringe e cloaca de 64 passeriformes de 26 espécies (incluindo 3 cardeais-amarelos) e 30 cardeais-amarelos de cativeiro, para diagnóstico molecular. As amostras foram submetidas à extração de RNA e DNA e à reação em cadeia da polimerase em tempo real (RT-PCR) para VGA, VDN e VNO e nested PCR para AV e HV. Um cardeal-amarelo de cativeiro apresentou resultado positivo para AV, este resultado é importante para o planejamento, manejo dos atributos naturais e tomada de decisões em relação à conservação integrada de espécies ameaçadas. Este é o primeiro relato de AV em cardeal-amarelo e de investigação epidemiológica de vírus em passeriformes silvestres do bioma Pampa, no Rio Grande do Sul, Brasil.(AU)

Molecular diagnosis of avian viruses in grassland passerines and captive yellow cardinals Gubernatrix cristata in Brazil / Diagnóstico molecular de vírus aviários em passeriformes campestres e cardeais-amarelos Gubernatrix cristata cativos no Brasil

Avian influenza viruses (AIVs), Newcastle disease virus (NDV), West Nile virus (WNV), adenovirus (AV) and herpesvirus (HV) play an important role in the health of human and animal populations. However, knowledge of the prevalence of these viruses in wild birds is restricted to some groups (e.g. shorebirds) or regions worldwide. Information on grassland birds of South America, which is essential for their conservation, is scarce. The objectives of the present study were to evaluate occurrences of AIV, NDV, WNV, AV and HV for the first time in a bird community of a unique protected area in southern Brazil, which is home for the critically endangered yellow cardinal (Gubernatrix cristata), and captive yellow cardinals from fauna maintainers of the Brazilian Captive Program of the Yellow Cardinal. Passerine species of wild life were caught, identified and samples (swabs) were collected from the oropharynx and cloaca of 64 passerines of 26 species (including 3 yellow cardinals) and 30 yellow cardinals of captive, for molecular diagnosis. The samples were subjected to RNA and DNA extraction and the real-time polymerase chain reaction (RT-PCR) for AIV, NDV and WNV and nested PCR for AV and HV. One yellow cardinal of captive presented a positive result for AV, this result is important for planning, managing natural attributes and making decisions in relation to integrated conservation of threatened species. This is the first report of AV in yellow cardinal and epidemiological investigation of viruses in wild passerines of the Pampa biome, in Rio Grande do Sul, Brazil.(AU)

Os vírus da gripe aviária (VGA), vírus da doença de Newcastle (VDN), vírus do Nilo Ocidental (VNO), adenovírus (AV) e herpesvírus (HV) desempenham um papel importante na saúde das populações humana e animal. No entanto, o conhecimento da prevalência desses vírus em aves selvagens é restrito a alguns grupos (por exemplo, aves limícolas) ou regiões em todo o mundo. As informações sobre as aves campestres da América do Sul, essenciais para a sua conservação, são escassas. Os objetivos do presente estudo foram avaliar a ocorrência de VGA, VDN, VNO, AV e HV pela primeira vez em uma comunidade de aves de uma área única protegida no Sul do Brasil, que abriga o cardeal-amarelo (Gubernatrix cristata) criticamente ameaçado de extinção e em cardeais-amarelos de cativeiro dos mantenedores de fauna do Programa Brasileiro de Cativeiro do Cardeal-amarelo. Espécies de passeriformes silvestres foram capturadas, identificadas e amostras (swabs) foram coletadas da orofaringe e cloaca de 64 passeriformes de 26 espécies (incluindo 3 cardeais-amarelos) e 30 cardeais-amarelos de cativeiro, para diagnóstico molecular. As amostras foram submetidas à extração de RNA e DNA e à reação em cadeia da polimerase em tempo real (RT-PCR) para VGA, VDN e VNO e nested PCR para AV e HV. Um cardeal-amarelo de cativeiro apresentou resultado positivo para AV, este resultado é importante para o planejamento, manejo dos atributos naturais e tomada de decisões em relação à conservação integrada de espécies ameaçadas. Este é o primeiro relato de AV em cardeal-amarelo e de investigação epidemiológica de vírus em passeriformes silvestres do bioma Pampa, no Rio Grande do Sul, Brasil.(AU)

Direct PCR of lesions suggestive of sporotrichosis in felines / [PCR direta de lesões sugestivas de esporotricose em gatos]

A esporotricose é uma doença emergente e a incidência de esporotricose zoonótica tem aumentado, principalmente no Brasil; a maioria dos casos está relacionada à transmissão de gatos infectados. O diagnóstico definitivo da esporotricose felina é feito por cultura fúngica; no entanto, aguardar o longo período de cultura pode atrasar o início do tratamento. O objetivo deste estudo foi detectar e determinar as espécies de Sporothrix por PCR realizado diretamente das lesões de gatos, provenientes de área endêmica, nos quais a esporotricose fazia parte do diagnóstico diferencial. Um total de 87,1% dos casos foi positivo por PCR ou cultura fúngica para Sporothrix; 81,4% foram confirmados como S. brasiliensis por PCR, 71,4% por isolamento e 65,7% pelos dois métodos. Em conclusão, a análise direta por PCR de lesões sugestivas de esporotricose em gatos é um bom método para confirmar a infecção e determinar as espécies de Sporothrix, garantindo um diagnóstico rápido; esse método tem uma boa concordância com o isolamento fúngico.(AU)

Survey of protozoan vector-borne diseases in dogs from Atlantic Rainforest fragment around Billings dam, São Paulo, Brazil / Levantamento de protozoários transmitidos por vetores em cães de um fragmento de Mata Atlântica nos arredores da barragem Billings, São Paulo, Brasil

Vector-borne diseases are currently one of the biggest public health concerns worldwide. Dogs, being the closest companion animals to humans, are considered the main reservoir of some of these diseases in the urban environment. Therefore, the study of the disease behavior in dogs can help to understand the disease affecting human health. Serological and molecular diagnoses of Babesia vogeli, Rangelia vitalli, Leishmania infantum, and other trypanosomatids, were performed by immunochromatographic and PCR assays, respectively, on dogs in a dog shelter located in an Atlantic Forest fragment near the Billings Dam, São Bernardo do Campo, São Paulo-Brazil. Our molecular diagnostic results showed a high prevalence of Babesia vogeli, at 20.9% (17/81). No other protozoan was detected in any of the tests. Determining the prevalence of major vector-borne diseases is essential to establish preventive and control measures for zoonotic diseases in animals kept in shelters, in order to minimize the impact of vector-borne diseases on animal health.(AU)

As doenças transmitidas por vetores são atualmente um dos maiores problemas de saúde pública. Os cães, sendo os animais de companhia mais próximos dos seres humanos, são considerados os principais reservatórios de algumas dessas doenças no ambiente urbano, e o estudo de seu comportamento em cães ajuda a entender a doença como um todo na saúde humana. Diagnósticos sorológicos e moleculares de Babesia vogeli, Rangelia vitalli, Leishmania infantum e outros tripanossomatídeos, em um abrigo para cães localizado em um fragmento da Mata Atlântica próximo à Barragem Billings, São Bernardo do Campo, São Paulo, Brasil. Foram realizadas sorologias e diagnósticos moleculares, no ensaio de PCR foram utilizados marcadores moleculares de oligonucleotídeos específicos para alguns protozoários de importância na saúde animal, como Babesia vogeli, Rangelia vitalli, Leishmania infantum e outros tripanossomatídeos. Nossos resultados de diagnóstico molecular mostraram uma alta prevalência de 20,9% (17/81) de Babesia vogeli. Nenhum outro protozoário foi detectado em nenhum dos testes. A determinação da prevalência das principais doenças transmitidas por vetores é essencial para estabelecer medidas preventivas e de controle de doenças zoonóticas em animais mantidos em abrigos. Essas medidas devem ser propostas para minimizar o impacto de doenças transmitidas por vetores na saúde animal.(AU)

Evidence of in utero infection by Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis using Multiple-Locus Variable-number tandem-repeat Analysis: first report in Argentina / Evidência de infecção intra-uterina por Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis usando Multiple-Locus Variable-number tandem-repeat Analysis: primeiro relato na Argentina

A pregnant heifer with an advanced clinical stage of paratuberculosis was reported in a herd in Argentina. Thus, the animal was euthanized and samples of organs of the cow and its fetus was taken and cultured for bacteriology in specific medium. Tissues were analyzed by histopathology (hematoxylin-eosin and Ziehl-Neelsen staining). Histopathological analysis of the cow's samples revealed the presence of lesions consistent with paratuberculosis, and Ziehl-Neelsen staining revealed the presence of acid-fast bacilli, whereas the fetal tissues showed absence of lesions but the presence of acid-fast bacilli by Ziehl-Neelsen staining. After growing in specific medium, colonies in tissues from both cow and fetus were positive for IS900-PCR, confirming the presence of Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis (MAP). Finally, the isolates were typed by Multiple-Locus Variable-number tandem-repeat Analysis (MLVA), which confirmed the epidemiological link between them. This study is the first in Argentina to report the detection of MAP that shares an identical MLVA type in a pregnant cow and its fetus. The results of this study are consistent with previous reports and highlight the intra-uterine transmission of MAP as an important source of infection within herds.(AU)

Uma novilha prenha em estado clínico avançado de paratuberculose foi observada em um rebanho bovino na Argentina. O animal foi eutanasiado e foram colhidas amostras dos seus órgãos e dos órgãos feto as quais foram cultivadas para bacteriologia em meio específico. Os tecidos foram examinados por histopatologia (coloração de hematoxilina-eosina e Ziehl-Neelsen). Na histopatologia das amostras colhidas da novilha foram observadas lesões compatíveis com paratuberculose e a coloração de Ziehl-Neelsen revelou a presença de bacilos álcool-ácido resistentes, nos tecidos fetais não foram observadas lesões, porém a coloração de Ziehl-Neelsen revelou a presença de bacilos álcool-ácido resistentes. Após o crescimento em meio específico, as colônias foram positivas para o teste IS900-PCR nos tecidos de ambos, vaca e feto, confirmando a presença de Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis. Por fim, os isolados foram tipados por Multiple-Locus Variable-number tandem-repeat Analysis, confirmando a relação epidemiológica entre eles. Este estudo relata a primeira detecção de Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis na Argentina em que houve o compartilhamento de um tipo idêntico de MLVA em uma vaca prenhe e no seu feto. Os resultados deste estudo são consistentes com relatos anteriores e destacam a transmissão intra-uterina de Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis como importante fonte de infecção nos rebanhos de bovinos.(AU)

Fatal systemic Mortierella wolfii infection in a neonatal calf in southern Brazil / Infecção sistêmica fatal por Mortierella wolfii em um bezerro neonato na região Sul do Brasil

This study described the pathological and microbiological aspects of a fatal systemic Mortierella wolfii infection in a neonatal calf in southern Brazil. The calf was born clinically normal, but on the third day of life it presented apathy, unilateral hypopyon, and neurological signs, and in the next day it was euthanized. At necropsy, multiple soft, and white-yellow nodules were observed in the liver, spleen, kidneys, mesenteric lymph nodes, heart, and lungs. In the brain, reddish, and friable areas were found. In the eye, there were anterior and posterior synechiae, diffuse thickening of choroid, and anterior chamber filled by whitish and friable material. Microscopically, areas of necrosis, pyogranulomatous inflammation, vasculitis, thrombosis, and intralesional fungal hyphae were observed, and the latter were better evidenced through Grocott Methenamine Silver technique. The fungus was identified as M. wolfii through mycological culture and molecular methods. To our knowledge, this is the first description of systemic disease caused by M. wolfii in a neonatal calf outside of Oceania.(AU)

Descrevem-se os aspectos patológicos e microbiológicos de uma infecção sistêmica fatal por Mortierella wolfii em um bezerro neonato na região Sul do Brasil. O bezerro nasceu clinicamente normal, porém no terceiro dia de vida apresentou apatia, hipópion unilateral e sinais neurológicos, e no dia seguinte foi submetido à eutanásia. Na necropsia, foram observados múltiplos nódulos macios e branco-amarelados no fígado, baço, rins, linfonodos mesentéricos, coração e pulmões. No encéfalo, havia áreas avermelhadas e friáveis. No olho, notou-se sinéquia anterior e posterior, espessamento difuso da coroide, e câmara anterior preenchida por material brancacento e friável. Histologicamente, foram observadas áreas de necrose, inflamação piogranulomatosa, vasculite, trombose e hifas fúngicas intralesionais, que foram melhor visualizadas por meio da técnica de Prata Metenamina de Grocott. O fungo foi identificado como M. wolfii por meio da cultura micológica e técnicas moleculares. Com base no conhecimento dos autores, este é o primeiro relato de doença sistêmica causada por M. wolfii em um bezerro neonato fora da Oceania.(AU)

Evidence of in utero infection by Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis using Multiple-Locus Variable-number tandem-repeat Analysis: first report in Argentina / Evidência de infecção intra-uterina por Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis usando Multiple-Locus Variable-number tandem-repeat Analysis: primeiro relato na Argentina

A pregnant heifer with an advanced clinical stage of paratuberculosis was reported in a herd in Argentina. Thus, the animal was euthanized and samples of organs of the cow and its fetus was taken and cultured for bacteriology in specific medium. Tissues were analyzed by histopathology (hematoxylin-eosin and Ziehl-Neelsen staining). Histopathological analysis of the cow's samples revealed the presence of lesions consistent with paratuberculosis, and Ziehl-Neelsen staining revealed the presence of acid-fast bacilli, whereas the fetal tissues showed absence of lesions but the presence of acid-fast bacilli by Ziehl-Neelsen staining. After growing in specific medium, colonies in tissues from both cow and fetus were positive for IS900-PCR, confirming the presence of Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis (MAP). Finally, the isolates were typed by Multiple-Locus Variable-number tandem-repeat Analysis (MLVA), which confirmed the epidemiological link between them. This study is the first in Argentina to report the detection of MAP that shares an identical MLVA type in a pregnant cow and its fetus. The results of this study are consistent with previous reports and highlight the intra-uterine transmission of MAP as an important source of infection within herds.(AU)

Uma novilha prenha em estado clínico avançado de paratuberculose foi observada em um rebanho bovino na Argentina. O animal foi eutanasiado e foram colhidas amostras dos seus órgãos e dos órgãos feto as quais foram cultivadas para bacteriologia em meio específico. Os tecidos foram examinados por histopatologia (coloração de hematoxilina-eosina e Ziehl-Neelsen). Na histopatologia das amostras colhidas da novilha foram observadas lesões compatíveis com paratuberculose e a coloração de Ziehl-Neelsen revelou a presença de bacilos álcool-ácido resistentes, nos tecidos fetais não foram observadas lesões, porém a coloração de Ziehl-Neelsen revelou a presença de bacilos álcool-ácido resistentes. Após o crescimento em meio específico, as colônias foram positivas para o teste IS900-PCR nos tecidos de ambos, vaca e feto, confirmando a presença de Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis. Por fim, os isolados foram tipados por Multiple-Locus Variable-number tandem-repeat Analysis, confirmando a relação epidemiológica entre eles. Este estudo relata a primeira detecção de Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis na Argentina em que houve o compartilhamento de um tipo idêntico de MLVA em uma vaca prenhe e no seu feto. Os resultados deste estudo são consistentes com relatos anteriores e destacam a transmissão intra-uterina de Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis como importante fonte de infecção nos rebanhos de bovinos.(AU)

Molecular methodology for the detection of the Leishmania genus in different biological samples extracted from dogs

Background: The leishmaniases are a group of parasitic diseases caused by trypanosomatids belonging to the genus Leishmania, members of the class Kinetoplastida, order Trypanosomatidae, family Trypanosomatidae. Despite innumerous wildspecies that are infected, the domestic dog is a potential reservoir of Leishmania infantum in urban areas, which expandsthe transmission pathway to humans. When infected, the dog becomes Visceral Canine Leishmaniasis (CVL), which ischaracterized by a diverse clinical picture that ranges from asymptomatic to non-specific signs, such as skin lesions, lymphadenomegaly, weight loss, splenomegaly, and/or ocular lesions, thus impairing accurate and rapid diagnosis. In Brazil, itis considered a public health problem since it is endemic in certain regions. Therefore, parasitological, serological, andmolecular methods can be used for the detection of the disease. However, the possibility of serological cross-reaction andthe occurrence of co-infection with other trypanosomatids decreases the specificity rate to below 100%, which suggeststhe use of more accurate diagnostic tools. Several molecular targets and starting samples for leishmaniasis diagnosis arealready standardized, but there is lack of data allowing the evaluation of the target, as well as which biological material ismore efficient for the molecular diagnosis of CVL. The sensitivity of PCR may vary with DNA quality, primer type, parasitemia level, and number of target copies per cell. The spleen, blood, liver, aspirate of bone marrow and lymph nodes arethe most frequently used for molecular diagnosis of CVL. The present study aimed to evaluate and compare three protocolsof the polymerase chain reaction (PCR) for the molecular diagnosis of CVL in different biological samples removed fromanimals...

Molecular methodology for the detection of the Leishmania genus in different biological samples extracted from dogs

Background: The leishmaniases are a group of parasitic diseases caused by trypanosomatids belonging to the genus Leishmania, members of the class Kinetoplastida, order Trypanosomatidae, family Trypanosomatidae. Despite innumerous wildspecies that are infected, the domestic dog is a potential reservoir of Leishmania infantum in urban areas, which expandsthe transmission pathway to humans. When infected, the dog becomes Visceral Canine Leishmaniasis (CVL), which ischaracterized by a diverse clinical picture that ranges from asymptomatic to non-specific signs, such as skin lesions, lymphadenomegaly, weight loss, splenomegaly, and/or ocular lesions, thus impairing accurate and rapid diagnosis. In Brazil, itis considered a public health problem since it is endemic in certain regions. Therefore, parasitological, serological, andmolecular methods can be used for the detection of the disease. However, the possibility of serological cross-reaction andthe occurrence of co-infection with other trypanosomatids decreases the specificity rate to below 100%, which suggeststhe use of more accurate diagnostic tools. Several molecular targets and starting samples for leishmaniasis diagnosis arealready standardized, but there is lack of data allowing the evaluation of the target, as well as which biological material ismore efficient for the molecular diagnosis of CVL. The sensitivity of PCR may vary with DNA quality, primer type, parasitemia level, and number of target copies per cell. The spleen, blood, liver, aspirate of bone marrow and lymph nodes arethe most frequently used for molecular diagnosis of CVL. The present study aimed to evaluate and compare three protocolsof the polymerase chain reaction (PCR) for the molecular diagnosis of CVL in different biological samples removed fromanimals...(AU)

Isolation and identification of Yersinia enterocolitica in bovine milk samples of bulk tanks from dairy farms in São Paulo, Brazil / Isolamento e identificação de Yersinia enterocolitica em amostras de leite cru bovino a partir de tanques de expansão, São Paulo, Brasil

Milk and its derivatives are good substrates for the proliferation of pathogenic and quality-deteriorating microorganisms, demanding rigorous care with milking, processing, and storage. Among the various bacteria that can grow in raw refrigerated milk, Yersinia enterocolitica, is an invasive enteropathogen of humans. This bacterium can cause a number of intestinal and extraintestinal clinical symptoms, ranging from mild gastroenteritis to mesenteric lymphadenitis, similar to appendicitis. To evaluate the prevalence of pathogenic Yersinia enterocolitica in raw milk from bulk milk tanks located in the State of São Paulo, 102 bovine milk samples (one per dairy farm) were evaluated by microbiological analyses, followed by biochemical tests PCR and genetic sequencing. Microbiological testing did not isolate Y. enterocolitica. However, PCR analysis revealed six samples that were positive for Y. enterocolitica (5.9%), confirmed by genetic sequencing. Only the inv gene was detected, which is present in virulent and avirulent Y. enterocolitica strains. There was great difficulty in microbiological isolation due to the difficulty of competitiveness of Y. enterocolitica in a very rich microbiota of raw milk. Although virulence genes known to be present in potentially pathogenic strains of Y. enterocolitica have not been identified, the presence of this pathogen in milk from expansion tanks...(AU)

O leite e seus derivados possuem substratos que favorecem o desenvolvimento de micro-organismos patogênicos e deteriorantes, devido a isso, cuidados rigorosos são exigindo durante a ordenha, processamento e seu armazenamento. Dentre os vários grupos de bactérias que podem contaminar o leite refrigerado cru está Yersinia enterocolitica. Esta bactéria pode causar a uma série de sintomas clínicos intestinais e extraintestinais, variando de gastroenterite leve a linfadenite mesentérica, semelhante à apendicite. Para avaliar a prevalência de Y. enterocolitica patogênica no leite cru de tanques de expansão localizados no estado de São Paulo, foram avaliadas 102 amostras de leite bovino, por análises microbiológicas, seguido de provas bioquímicas; a Reação em Cadeia de Polimerase (PCR) e sequenciamento genético. Não houve o isolamento de Y. enterocolitica pelas provas microbiológicas clássicas. No entanto, a análise de PCR, realizada diretamente do leite, revelou seis (6) amostras positivas para Y. enterocolitica (5,9%), confirmadas por sequenciamento genético. Somente o gene inv, foi detectado, que pode estar presente em cepas virulentas e avirulentas. Houve dificuldade de isolamento microbiológico devido à dificuldade de competitividade da Y. enterocolitica em uma microbiota muito rica do leite cru. Ainda que não tenham sido identificados os genes de virulência que sabidamente estão...(AU)

Toxoplasma gondii molecular and immunological identification and risk factors associated with infection in chicken slaughtered at Triângulo Mineiro region, Minas Gerais, Brazil / Identificação molecular e imunológica de Toxoplasma gondii e fatores de risco associados com infecção em galinhas abatidas na região do Triângulo Mineiro, Minas Gerais, Brasil

This study aimed to determine the occurrence of anti-Toxoplasma gondii antibodies in the serum of slaughtered chickens in the region of Triângulo Mineiro, Minas Gerais, Brazil, to detect the parasite in tissues (heart and brain) of serologically positive chickens, based on molecular analysis, and to investigate risk variables associated with the infection. Sera from 417 chickens raised in extensive, semi-intensive, and intensive production systems were tested by an indirect immunofluorescent antibody test (IFAT) and indirect hemagglutination antibody test (IHA). Polymerase chain reaction (PCR) was performed to detect T. gondii DNA in brain and heart tissues. Antibody anti-T. gondii were found in 37.65% (157/417) of chickens by IFAT, and in 75.06% (313/417) by IHA. The Kappa index showed a weak concordance between the techniques (0.087). Association was observed between seropositivity and the variables, age (p 0.0001), type of feeding (p 0.0001) and collective raising with other animals species (p 0.0001). Association, based on IFAT, was not observed between seropositivity and the variables, sex (p = 0.0526), presence of cats (p > 0.9999), and presence of rats (p > 0.9999). Presence of parasite DNA was detected in brain samples from two chickens, which were raised in intensive and semi-intensive production systems. The results suggest th

O objetivo do presente estudo foi determinar a frequência de anticorpos anti-Toxoplasma gondii em soro de galinhas abatidas na região do Triângulo Mineiro, Minas Gerais, detectar molecularmente o parasito em tecidos (coração e cérebro) de algumas das aves sorologicamente positivas e averiguar variáveis de risco associadas à infecção. Foram testados soros de 417 galinhas, criadas nos sistemas extensivo, semi-intensivo e intensivo. Para a pesquisa de anticorpos anti-T. gondii foi utilizada a Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI) e Hemaglutinação Indireta (HAI). A Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) foi utilizada para detectar o DNA de T. gondii em fragmentos de cérebro e coração. Anticorpos foram detectados no soro de 37,65% (157/417) das aves pela RIFI e em 75,06% (313/417) pela HAI. O índice Kappa mostrou uma fraca concordância entre as técnicas (0,087). Baseado na RIFI, foi verificada associação estatisticamente significativa (p 0,0001) entre a soropositividade e as variáveis: idade, tipo de alimentação e criação em conjunto com outras espécies animais. Não foi observada associação estatística (p > 0,01) entre as variáveis: sexo, presença de gatos e presença de ratos. Pelo diagnóstico molecular DNA do parasito foi detectado em duas amostras de cérebro, de indivíduos diferentes criados em sistema intensivo e semi-intensivo. Os resultados indicam a possib

Clinical, hematological and biochemical profiles of dogs with Leishmania infantum

Background: Canine Visceral Leishmaniasis is a zoonosis affecting dogs worldwide. Its epidemiological importance is observed in Brazil, wherein the largest number of cases originates in the Northeast Region of the country. The disease is caused by the etiologic agent Leishmania chagasi (= infantum) and transmitted by an invertebrate form of sand fly of the genus Lutzomia. Domestic dogs are one of the main reservoirs. The aim of this study was to use molecular analysis to diagnose dogs naturally infected with Leishmania spp. in the city of Jequié, State of Bahia, Brazil, and to describe the clinical signs, as well as the hematological and biochemical profiles associated with these cases.Materials, Methods & Results: In the present study, 198 dogs underwent physical examination and had blood samples collected for hematological, biochemical and PCR tests for Leishmania infantum. Two primers have been used for the molecular diagnostic technique (PCR): first, the ITS-1 specific to Leishmania species followed by the PCR-RFVL to identify the genus; and second, the primer pair RV1/RV2 specific to the Leishmania infantum species in all the samplesAmong the 198 samples collected, four animals tested positive for the Leishmania infantum via PCR, two of which were symptomatic and two asymptomatic. Among the symptomatic animals, animal one presented with diffuse alopecia, ulcerated lesions on the tip of the ears, ophthalmopathy, onychogryphosis, cachexia, anemia and neutrophilic leukocytosis, and animal two presented with alopecia, pustules, crusting, diffusely-spread erythema, anemia, hyperproteinemia, thrombocytopenia and azotemia. Among the two asymptomatic dogs, one animal had anemia, hyperproteinemia, thrombocytopenia, leukocytosis with neutrophilia, and azotemia; the other animal’s laboratory findings revealed hyperproteinemia and leukocytosis with neutrophilia.[...]

Clinical, hematological and biochemical profiles of dogs with Leishmania infantum

Background: Canine Visceral Leishmaniasis is a zoonosis affecting dogs worldwide. Its epidemiological importance is observed in Brazil, wherein the largest number of cases originates in the Northeast Region of the country. The disease is caused by the etiologic agent Leishmania chagasi (= infantum) and transmitted by an invertebrate form of sand fly of the genus Lutzomia. Domestic dogs are one of the main reservoirs. The aim of this study was to use molecular analysis to diagnose dogs naturally infected with Leishmania spp. in the city of Jequié, State of Bahia, Brazil, and to describe the clinical signs, as well as the hematological and biochemical profiles associated with these cases.Materials, Methods & Results: In the present study, 198 dogs underwent physical examination and had blood samples collected for hematological, biochemical and PCR tests for Leishmania infantum. Two primers have been used for the molecular diagnostic technique (PCR): first, the ITS-1 specific to Leishmania species followed by the PCR-RFVL to identify the genus; and second, the primer pair RV1/RV2 specific to the Leishmania infantum species in all the samplesAmong the 198 samples collected, four animals tested positive for the Leishmania infantum via PCR, two of which were symptomatic and two asymptomatic. Among the symptomatic animals, animal one presented with diffuse alopecia, ulcerated lesions on the tip of the ears, ophthalmopathy, onychogryphosis, cachexia, anemia and neutrophilic leukocytosis, and animal two presented with alopecia, pustules, crusting, diffusely-spread erythema, anemia, hyperproteinemia, thrombocytopenia and azotemia. Among the two asymptomatic dogs, one animal had anemia, hyperproteinemia, thrombocytopenia, leukocytosis with neutrophilia, and azotemia; the other animals laboratory findings revealed hyperproteinemia and leukocytosis with neutrophilia.[...](AU)