High-definition ultrasonography for evaluation of embryonic and fetal development in bitch / Ultrassonografia de alta-definição para avaliação do desenvolvimento embrionário e fetal em cadelas

In women, high-definition ultrasonography provides high-quality images of normal and diseased tissues throughout pregnancy, however there are no veterinary studies describing the use of this technology in pregnant dogs. The objective was to evaluate pregnant female dogs daily, using high-definition ultrasonography (HD) in brachycephalic, documenting daily findings of maternal-fetal structures. Twelve healthy brachycephalic females were evaluated daily by HD ultrasound until delivery. It was possible to identify and categorize all maternal, embryonic, and fetal structures and their development, including some fetal tissues not yet described in the literature. The HD exam is an excellent method to monitor the pregnancy of female dogs and identify structures early, providing safe and complete information regarding fetal development.

Em mulheres, a ultrassonografia de alta definição fornece imagens de alta qualidade de tecidos normais e alterados durante a gravidez, entretanto não existem estudos veterinários que descrevam o uso dessa tecnologia em cadelas prenhas. O objetivo deste estudo foi avaliar diariamente cadelas braquicefálicas gestantes, por meio de ultrassonografia de alta definição (HD), documentando achados diários das estruturas materno-fetais. Doze cadelas braquicefálicas saudáveis foram avaliadas diariamente por ultrassonografia HD, desde a inseminação até o parto. Foi possível identificar e categorizar todas as estruturas maternas, embrionárias e fetais e seu desenvolvimento, incluindo alguns tecidos fetais ainda não descritos na literatura. O exame de HD é um excelente método para monitorar a gestação de cadelas e identificar precocemente as estruturas, fornecendo informações seguras e completas sobre o desenvolvimento fetal.

Morphogenesis of the rhea (Rhea americana) respiratory system in different embryonic and foetal stages / Morfogênese do sistema respiratório da ema (Rhea americana) em diferentes estágios embrionários e fetais

The rhea (Rhea americana) is an important wild species that has been highlighted in national and international livestock. This research aims to analyse embryo-foetal development in different phases of the respiratory system of rheas. Twenty-three embryos and foetuses were euthanized, fixed and dissected. Fragments of the respiratory system, including the nasal cavity, larynx, trachea, syrinx, bronchi and lungs, were collected and processed for studies using light and scanning electron microscopy. The nasal cavity presented cubic epithelium in the early stages of development. The larynx exhibited typical respiratory epithelium between 27 and 31 days. The trachea showed early formation of hyaline cartilage after 15 days. Syrinx in the mucous membrane of 18-day foetuses consisted of ciliated epithelium in the bronchial region. The main bronchi had ciliated epithelium with goblet cells in the syringeal region. In the lung, the parabronchial stage presented numerous parabronchi between 15 and 21 days. This study allowed the identification of normal events that occur during the development of the rhea respiratory system, an important model that has not previously been described. The information generated here will be useful for the diagnosis of pathologies that affect this organic system, aimed at improving captive production systems.(AU)

A ema (Rhea americana) representa importante espécie silvestre que vem se destacando na pecuaria nacional e internacional. Esta pesquisa objetiva analisar o desenvolvimento embrionário-fetal, em diferentes fases, do sistema respiratório de emas. Vinte e três embriões e fetos foram eutanasiados, fixados e dissecados. Fragmentos do sistema respiratório: cavidade nasal, laringe, traqueia, siringe, brônquios e pulmões, foram coletados e processados para estudos por meio de microscopia de luz e microscopia eletrônica de varredura. A cavidade nasal apresentou, nas primeiras fases de desenvolvimento, epitélio estratificado cúbico. A laringe exibiu epitélio respiratório típico entre 27 e 31 dias. A traqueia aos 15 dias apresentou início de formação da cartilagem hialina. Na siringe a túnica mucosa de fetos de 18 dias e formada por epitélio estratificado ciliado na região bronquial. Os brônquios principais apresentavam epitélio estratificado ciliado com células caliciformes na região siringeal. No pulmão, o estágio parabronquial apresentou numerosos parabrônquios entre 15 a 21 dias. Este estudo permitiu a identificação de eventos normais que ocorrem durante o desenvolvimento do sistema respiratório de emas, importante modelo ainda não descrito. As informações geradas serão úteis para o diagnóstico de patologias que acometem este sistema orgânico, visando a melhoria dos sistemas de produção em cativeiro.(AU)

Morphogenesis of the rhea (Rhea americana) respiratory system in different embryonic and foetal stages / Morfogênese do sistema respiratório da ema (Rhea americana) em diferentes estágios embrionários e fetais

The rhea (Rhea americana) is an important wild species that has been highlighted in national and international livestock. This research aims to analyse embryo-foetal development in different phases of the respiratory system of rheas. Twenty-three embryos and foetuses were euthanized, fixed and dissected. Fragments of the respiratory system, including the nasal cavity, larynx, trachea, syrinx, bronchi and lungs, were collected and processed for studies using light and scanning electron microscopy. The nasal cavity presented cubic epithelium in the early stages of development. The larynx exhibited typical respiratory epithelium between 27 and 31 days. The trachea showed early formation of hyaline cartilage after 15 days. Syrinx in the mucous membrane of 18-day foetuses consisted of ciliated epithelium in the bronchial region. The main bronchi had ciliated epithelium with goblet cells in the syringeal region. In the lung, the parabronchial stage presented numerous parabronchi between 15 and 21 days. This study allowed the identification of normal events that occur during the development of the rhea respiratory system, an important model that has not previously been described. The information generated here will be useful for the diagnosis of pathologies that affect this organic system, aimed at improving captive production systems.(AU)

A ema (Rhea americana) representa importante espécie silvestre que vem se destacando na pecuaria nacional e internacional. Esta pesquisa objetiva analisar o desenvolvimento embrionário-fetal, em diferentes fases, do sistema respiratório de emas. Vinte e três embriões e fetos foram eutanasiados, fixados e dissecados. Fragmentos do sistema respiratório: cavidade nasal, laringe, traqueia, siringe, brônquios e pulmões, foram coletados e processados para estudos por meio de microscopia de luz e microscopia eletrônica de varredura. A cavidade nasal apresentou, nas primeiras fases de desenvolvimento, epitélio estratificado cúbico. A laringe exibiu epitélio respiratório típico entre 27 e 31 dias. A traqueia aos 15 dias apresentou início de formação da cartilagem hialina. Na siringe a túnica mucosa de fetos de 18 dias e formada por epitélio estratificado ciliado na região bronquial. Os brônquios principais apresentavam epitélio estratificado ciliado com células caliciformes na região siringeal. No pulmão, o estágio parabronquial apresentou numerosos parabrônquios entre 15 a 21 dias. Este estudo permitiu a identificação de eventos normais que ocorrem durante o desenvolvimento do sistema respiratório de emas, importante modelo ainda não descrito. As informações geradas serão úteis para o diagnóstico de patologias que acometem este sistema orgânico, visando a melhoria dos sistemas de produção em cativeiro.(AU)

Morphogenesis of the rhea (Rhea americana) respiratory system in different embryonic and foetal stages

ABSTRACT: The rhea (Rhea americana) is an important wild species that has been highlighted in national and international livestock. This research aims to analyse embryo-foetal development in different phases of the respiratory system of rheas. Twenty-three embryos and foetuses were euthanized, fixed and dissected. Fragments of the respiratory system, including the nasal cavity, larynx, trachea, syrinx, bronchi and lungs, were collected and processed for studies using light and scanning electron microscopy. The nasal cavity presented cubic epithelium in the early stages of development. The larynx exhibited typical respiratory epithelium between 27 and 31 days. The trachea showed early formation of hyaline cartilage after 15 days. Syrinx in the mucous membrane of 18-day foetuses consisted of ciliated epithelium in the bronchial region. The main bronchi had ciliated epithelium with goblet cells in the syringeal region. In the lung, the parabronchial stage presented numerous parabronchi between 15 and 21 days. This study allowed the identification of normal events that occur during the development of the rhea respiratory system, an important model that has not previously been described. The information generated here will be useful for the diagnosis of pathologies that affect this organic system, aimed at improving captive production systems.

RESUMO: A ema (Rhea americana) representa importante espécie silvestre que vem se destacando na pecuaria nacional e internacional. Esta pesquisa objetiva analisar o desenvolvimento embrionário-fetal, em diferentes fases, do sistema respiratório de emas. Vinte e três embriões e fetos foram eutanasiados, fixados e dissecados. Fragmentos do sistema respiratório: cavidade nasal, laringe, traqueia, siringe, brônquios e pulmões, foram coletados e processados para estudos por meio de microscopia de luz e microscopia eletrônica de varredura. A cavidade nasal apresentou, nas primeiras fases de desenvolvimento, epitélio estratificado cúbico. A laringe exibiu epitélio respiratório típico entre 27 e 31 dias. A traqueia aos 15 dias apresentou início de formação da cartilagem hialina. Na siringe a túnica mucosa de fetos de 18 dias e formada por epitélio estratificado ciliado na região bronquial. Os brônquios principais apresentavam epitélio estratificado ciliado com células caliciformes na região siringeal. No pulmão, o estágio parabronquial apresentou numerosos parabrônquios entre 15 a 21 dias. Este estudo permitiu a identificação de eventos normais que ocorrem durante o desenvolvimento do sistema respiratório de emas, importante modelo ainda não descrito. As informações geradas serão úteis para o diagnóstico de patologias que acometem este sistema orgânico, visando a melhoria dos sistemas de produção em cativeiro.

Induction of in vitro shoots of Billbergia euphemiae E. Morren (Bromeliaceae) from leaf explants / Indução in vitro de brotos de Billbergia euphemiae E. Morren (Bromeliaceae) a partir de explantes foliares

Bromeliads are an important group for the maintenance of the Atlantic Forest, with many threatened species due to exacerbated extraction and destruction of their natural habitats. Considering the need of developing protocols for the conservation of these species, the aim of this work was to evaluate the effect of different growth regulators in the in vitro induction of shoots of Billbergia euphemiae. Leaf explants were excised from seedlings derived from in vitro germination and grown on MS medium supplemented with NAA (0, 1 or 2 μM) and BA (0, 2, 4 or 6 μM) combinations. The evaluation of the number of shoots per explant, shoot length, number of leaves per shoot and longest leaf length average was carried out after 30 and 60 days of culture. The best in vitro responses were observed in the presence of 1 μM NAA after 60 days of culture, which induced the best production of shoots per explant (16.39), as well as the highest rates of shoot length (1.08 cm), number of leaves per shoot (5.00) and the longest leaf length (0.56 cm). This work determined the best conditions for shoot production from leaf explants of B. euphemiae, being the first report on micropropagation of this species.(AU)

As bromélias constituem um importante grupo para a manutenção da Floresta Atlântica, com várias espécies ameaçadas de extinção pelo extrativismo exacerbado e a destruição dos habitats naturais. Considerando a necessidade do desenvolvimento de protocolos para a conservação destas espécies, este trabalho teve como objetivo avaliar o efeito de diferentes reguladores de crescimento na indução de brotos de Billbergia euphemiae. Explantes foliares foram excisados de plântulas derivadas da germinação in vitro e inoculados em meio MS suplementado com combinações de ANA (0, 1 ou 2 μM) e BA (0, 2, 4 ou 6 μM). O número de brotos por explantes, comprimento dos brotos, número médio de folhas por broto e comprimento médio da maior folha foram avaliados após 30 e 60 dias de cultura. As melhores respostas foram observadas na presença de ANA a 1 μM, após 60 dias de cultura, que induziu a maior produção de brotos por explante (16,39), assim como as maiores taxas de comprimento dos brotos (1,08 cm), número médio de folhas por broto (5,00) e comprimento da maior folha (0,56 cm). Este trabalho determinou as melhores condições para produção de brotos de B. euphemiae a partir de explantes foliares, representando o primeiro relato de micropropagação desta espécie.(AU)

AVALIAÇÃO DA TOXICIDADE PRÉ-NATAL: ESTUDO DE TERATOGENICIDADE (SEGMENTO II) DA OLEUROPEINA EM RATOS WISTAR

A Olea europaea pertence à família das Oleaceas, e é uma planta conhecida mundialmente pela produção de azeite. E a oleuropeina é o principal constituinte da Oliveira (Olea europaea). Seus benefícios como sua atividade antimicrobiana, antioxidante, anticancerígena, sua eficácia no tratamento de doenças crônicas como alterações cardiovasculares e diabetes, vêm sendo estudada há muitas décadas por cientistas do mundo inteiro. Considerando-se escassos os dados disponíveis sobre a toxicidade do uso da oleuropeina em fêmeas gestantes, este trabalho tem como objetivo a avaliação da toxicidade pré-natal em ratas Wistar e detecção de possíveis malformações externas e alterações esqueléticas na progênie exposta durante a fase da organogênese. Os animais foram divididos em quatro grupos experimentais: G1 (oleuropeina 500mg/kg-1), G2 (oleuropeina 1000mg/kg-1), G3 (oleuropeina 2000mg/kg-1) e GC (controle). As fêmeas foram tratadas por gavagem, com auxílio de sonda orogástrica, do 6º ao 15º dia de gestação, conforme segmento II, recomendados pela Organization for Economic Cooperation and Development (2001) e Food and Drug Administration (1994). Durante a gestação, as progenitoras foram monitoradas quanto às alterações de massa corporal relativa, consumo de água e ração. No 21º dia de gestação, as fêmeas foram eutanasiadas para avaliação reprodutiva, teratogênica e de variáveis sistêmicas. Os fetos foram avaliados quanto à embriotoxicidade e à presença de malformações externas e alterações esqueléticas. Os resultados demonstraram que apesar de não terem apresentado diarréia, piloereção, tremores, hemorragias ou outras alterações sistêmicas, o grupo que recebeu 2000 mg/kg-1 demonstrou um grau de toxicidade materna. Não foram detectadas alterações teratogênicas, nem malformações externas nos fetos avaliados, no entanto, ficou evidente que os animais tratados com oleuropeina apresentaram aumento significativo de alterações esqueléticas sugestivas de retardo de desenvolvimento ósseo. Diante dos resultados encontrados pode-se concluir que o uso de oleuropeina na fase de organogênese em progenitoras de ratos Wistar, pode provocar um retardo no desenvolvimento ósseo dos fetos. Além de apresentar um potencial de toxicicidade materna na dose de 2000 mg/kg-1. Frente aos resultados obtidos com o presente trabalho, é recomendado cautela no uso de oleuropeina nas doses de 500 a 2000mg/kg em fêmeas no período de gestação.

Olea europaea belongs to the Oleaceas family, is a plant known worldwide for the production of olive oil and oleuropein is the main constituent of Oliveira (Olea europaea). Its benefits such as its antimicrobial, antioxidant, anticancer activity, effectiveness on treatment of chronic diseases such as cardiovascular disorders and diabetes, have been studied for many decades by scientists worldwide. Considering the lack of available data on the toxicity of the use of oleuropein in pregnant females, this study aims to assess prenatal toxicity in Wistar rats and detect possible external malformations and skeletal changes in the progeny exposed during the phase of organogenesis. The animals were divided into four experimental groups: G1 (oleuropein 500mg / kg-1), G2 (oleuropein 1000mg / kg1), G3 (oleuropein 2000mg / kg-1) and CG (control). The females were treated by gavage, with the aid of an orogastric tube, from the 6th to the 15th day of pregnancy, according to segment II, recommended by the Organization for Economic Cooperation and Development (2001) and Food and Drug Administration (1994). During pregnancy, parents were monitored for changes in relative body mass, water consumption and feed. On the 21st day of pregnancy, the females were euthanized for reproductive, teratogenic and systemic variables evaluation. The fetuses were evaluated for embryotoxicity and for the presence of external malformations and skeletal changes. The results showed that despite not having diarrhea, piloerection, tremors, hemorrhages or other systemic changes, the group that received 2000 mg / kg-1 demonstrated a degree of maternal toxicity. No teratogenic changes or external malformations were detected in the evaluated fetuses; However, it was evident that animals treated with oleuropein showed a significant increase in skeletal changes suggestive of delayed bone development. In view of the results found, it can be concluded that the use of oleuropein in the organogenesis phase in progenitors of Wistar rats, may cause a delay in the bone development of fetuses. In addition to presenting a potential for maternal toxicity at a dose of 2000 mg / kg-1. Based on the results obtained with the present study, caution is recommended in the use of oleuropein in doses between 500 to 2000mg / kg in females during pregnancy. Keywords: Toxicology. Teratogeny. Oliveira. Organogenesis.

DESENVOLVIMENTO EMBRIONÁRIO DO COMPLEXO GÔNADA-NÉFRON DE Kinosternon scorpioides

O capítulo I é uma revisão da literatura sobre as principais características da espécie Kinosternon scorpioides nos âmbitos biológico, ecológico, reprodutivo e morfológico, além de comparações destas características com as de outras espécies filogeneticamente próximas. O capítulo II compreende a descrição histológica do desenvolvimento embrionário de rins e gônadas de K. scorpioides criado em cativeiro. Utilizou-se estereomicroscópio para efinição de estágios de desenvolvimento embrionário, baseado na fenotipia dos embriões. Para análise do complexo gônada-néfron, usou-se da técnica de microscopia de luz com coloração hematoxilina-eosina. Foram utilizados 105 ovos, sendo cinco de cada estágio embrionário, de um total de 15 estágios. A formação e degeneração do pronefro não foi constatada. A partir do estágio II, percebeu-se o aparecimento dos túbulos contorcidos proximais e distais no tecido mesonéfrico. Os corpúsculos renais foram observados a partir do estágio V. A partir do estágio VII foi possível observar as gônadas macroscopicamente. Até o estágio X, as gônadas foram observadas indiferenciadas. O mesonefro acompanhou o embrião até a fase de eclosão, ou estágio XV, com desenvolvimento progressivo de suas estruturas e vascularização. Não foi evidenciada definição clara das camadas cortical e medular renais. Sugere-se que: o surgimento e degeneração do pronefro ocorre antes do estágio II de desenvolvimento; o mesonefro permanece funcional na vida juvenil do animal; o metanefro inicia seu desenvolvimento após o nascimento do animal e permanece funcional na vida adulta.

Chapter I is a literature review about the main characteristics of the species Kinosternon scorpioides in the biological, ecological, reproductive and morphological fields, in addition to comparisons of these haracteristics with those of other phylogenetically close species. Chapter II includes the histological description of the embryonic development of kidneys and gonads of captive K. scorpioides. A stereomicroscope was used to define the stages of embryonic development, based on the phenotype of the embryos. For the analysis of the gonad-nephron complex, the light microscopy technique with hematoxylin-eosin staining was used. It was utilized 105 eggs, five from each embryonic stage, total of 15 stages. The formation and degeneration of the pronephros was not observed. From stage II onwards, the appearance of proximal and distal convoluted tubules in the mesonephric tissue was noticed. Renal corpuscles were observed from stage V. From stage VII it was possible to observe the gonads macroscopically. Until stage X, the gonads were observed undifferentiated. The mesonephros followed the embryo to the hatching phase, or stage XV, with progressive development of its structures and vascularization. There was no clear definition of the renal cortical and medullary layers. It is suggested that: the appearance and degeneration of the pronephros occurs before stage II of development; the mesonephro remains functional in the animal's youthful life; the metanephros begins its development after the animal is born and remains functional in adulthood.

Somaclones em batata identificados pelos descritores mínimos de broto / Potato somaclones identified by minimum descriptors sprout

Este estudo objetivou verificar a estabilidade fenotípica das cultivares de batata 'Asterix' e 'Macaca', avaliar o efeito do tipo de explante (organogênese direta e indireta) e do tempo de subcultivo (12 e 70 meses) em meio nutritivo MS sobre a ocorrência de somaclones nas duas cultivares na produção de batata semente, mediante o emprego de sete descritores mínimos de broto. Em 'Asterix' e 'Macaca' ocorreram somaclones em quatro dos sete descritores, contudo, apenas no formato e pubescência da base do broto houve variação, simultaneamente, em ambas. Os dois genótipos são suscetíveis à ocorrência de variação somaclonal. Registrou-se somaclonesnos dois tempos de subcultivo nas duas cultivares. Diferente do amplamente registrado, identificaram-se somaclones em segmentos apicais caulinares e nodais originados de organogênese direta em 'Asterix' e 'Macaca'.(AU)

It was examined the phenotypic stability of potato cultivars 'Asterix' and 'Macaca', evaluated the effect of explant type (direct and indirect organogenesis) and subculture time (12 and 70 months) in MS nutrient medium on the occurrence of somaclonal variation in both cultivars in seed potato production through the use of seven minimum descriptors sprout. In 'Asterix' and 'Macaca' somaclones have occurred in four of the seven descriptors, however, only in the shape and in the base of the bud pubescence that somaclonal variation occurred simultaneously in both cultivars. Both genotypes are susceptible to the occurrence of somaclonal variation. It was identify the occurrence of somaclones both at 12 months and 70 months of subculture in both genotypes. Unlike the widely recorded, somaclones were identified in shoot apical segments and nodal segments derived from direct organogenesis in 'Asterix' and 'Macaca'.(AU)

Análise transcricional do desenvolvimento pré-natal de suínos

A trajetória do desenvolvimento dos conceptos (embriões e fetos) é caracterizada como um evento biológico altamente regulado a nível transcricional, podendo ser influenciada pelo dimorfismo sexual e nutrição materna. O dimorfismo sexual no início do desenvolvimento pré-natal, período no qual a diferenciação sexual com base no fenótipo é dificultada, está principalmente associado à expressão de genes ligados aos cromossomos sexuais. A nutrição materna é o principal fator extrínseco que afeta a programação do desenvolvimento, dada a influência que as moléculas resultantes do metabolismo dietético exercem sobre o ambiente intrauterino, as quais são importantes não apenas por proporcionar nutrientes para o crescimento dos conceptos, mas também por regular a transcrição de genes relacionados ao desenvolvimento da placenta e dos conceptos. Neste contexto, os efeitos da suplementação de fêmeas suínas gestantes com aminoácidos funcionais como a arginina sob aspectos produtivos e reprodutivos têm sido bem estudados. Entretanto, a influência dessa suplementação sobre a expressão gênica global durante o desenvolvimento dos conceptos ainda é pouco conhecida. O adequado desenvolvimento e funcionalidade de órgãos e tecidos são eventos determinados principalmente durante a embriogênese e o período fetal, e requerem um ajustado controle da expressão gênica. Embora em espécies acometidas por restrição do crescimento intrauterino, como os suínos, o conhecimento da expressão de genes relacionados a organogênese possa auxiliar no melhor entendimento de vários aspectos da biologia do desenvolvimento pré-natal este ainda tem sido pouco explorado. Atualmente, o conhecimento da expressão gênica bem como dos processos biológicos e vias envolvidas na regulação gênica tem sido possibilitada pela análise do transcriptoma por meio do sequenciamento de RNA (RNA-Seq) e análises funcionais. Dessa forma, no presente trabalho, a partir do RNA-seq de embriões aos 25 dias de gestação e fetos suínos aos 35 dias de gestação, nós objetivamos (1) determinar o sexo desses conceptos em estágios iniciais do desenvolvimento; (2) elucidar os efeitos da suplementação de marrãs gestantes com L-arginina sobre o transcriptoma dos conceptos; e, (3) evidenciar os principais mecanismos moleculares envolvidos na organogênese em suínos, por meio da identificação de genes diferencialmente expressos entre embriões e fetos. Os resultados desta tese mostraram que os genes ligados ao cromossomo Y (DDX3Y, KDM5D, ZFY, EIF2S3Y, EIF1AY, LOC110255320, LOC110257894, LOC396706, LOC100625207 e LOC110255257) apresentaram contagens discrepantes entre as amostras de embriões e fetos suínos as quais foram utilizadas para a determinação do sexo dos conceptos. A suplementação dietética de marrãs com 1% de L-arginina provocou redução na expressão de genes mitocondriais (ND1, ND2, CYTB, COX2, ATP8, e mt-rRNA type) e aumento na expressão do gene CYP1A1 em embriões, evidenciando um ajustado controle transcricional a nível metabólico, enquanto não provocou alterações transcricionais durante o desenvolvimento fetal. Durante a organogênese em suínos, 1705 genes foram diferencialmente expressos entre embriões e fetos, a partir dos quais várias vias e processos biológicos relacionados à organogênese renal, muscular esquelética e óssea, bem como o desenvolvimento dos sistemas cardiovascular e neuronal, foram evidenciados. Esta tese proporcionou relevantes informações sobre o desenvolvimento pré-natal de suínos que podem ser aplicados em estudos relacionados à eficiência na produção de suínos, bem como no maior entendimento da biologia do desenvolvimento.

The conceptuses (embryos and fetuses) developmental trajectory is characterized as a highly regulated biological event at the transcriptional level, which may be influenced by sexual dimorphism and maternal nutrition. Sexual dimorphism at early developmental period, in which the phenotypic sex differentiation is not evident, is mainly related to the expression of genes linked to sex chromosomes. Maternal nutrition is the main extrinsic factor that affects developmental programming, since the molecules from dietary metabolism affects the intrauterine environment, which are important not only to provide nutrients to the conceptuses growth, but also for transcriptional regulation of genes related to placental and conceptuses development. In this context, the effects of pregnant females supplementation with functional amino acids, such as arginine, have been well studied under productive and reproductive aspects in pig production. However, the influence of this supplementation on global gene expression during conceptuses development is still poorly understood. The proper development and functionality of organs and tissues are events determined during embryogenesis and the fetal period, which require an adjusted control of gene expression. Although in species affected by intrauterine growth restriction, such as pigs, the knowledge about genes expression related to organogenesis can help to understand various aspects associated with prenatal development, studies addressing this event are still scarce. Currently, the gene expression, as well as the biological processes and pathways involved in its regulation, has been performed by transcriptome analysis from RNA sequencing (RNA-Seq) and functional analyses. Thus, in the present study, from the RNA-seq of pig embryos at 25 days of gestation and fetuses at 35 days of gestation, we aimed (1) the conceptuses sex determination; (2) to elucidate the effects of pregnant gilts supplemented with L-arginine on the conceptuses transcriptome; and, (3) to reveal the main molecular mechanisms involved in pig organogenesis, through the identification of genes differentially expressed between embryos and fetuses. The results of this thesis showed that Y chromosome-linked genes (DDX3Y, KDM5D, ZFY, EIF2S3Y, EIF1AY, LOC110255320, LOC110257894, LOC396706, LOC100625207 and LOC110255257) presented discrepant reads counts between the embryos and fetuses samples, which were used for conceptuses sex determination at early prenatal development. Dietary 1.0% L-arginine supplementation of pregnant gilts resulted in downregulation of mitochondrial genes (ND1, ND2, CYTB, COX2, ATP8, and mt-rRNA type) and upregulation of the CYP1A1 gene in embryos, showing an adjusted transcriptional control at the metabolic level, while the transcriptional program during fetal development was not affected. During the pig organogenesis, 1,705 genes were differentially expressed between embryos and fetuses, from which several biological pathways and processes related to renal, skeletal and bone muscular organogenesis, as well as the development of the cardiovascular and neuronal systems were evidenced. This thesis provided relevant information about the pig prenatal development, which can be applied in studies related to pig production efficiency, as well as greater understanding of developmental biology.

Micropropagação de umburana de cheiro

Umburana de cheiro is a species native to the Caatinga, widely used by local people, because the value of timber, ornamental, forage and especially medicinal. Considering the significant risk of extinction and the ausence of studies related to the cultive and propagation, the aim of this work was to establish a protocol for micropropagation Amburana cearensis. For this, we evaluated the influence of plant growth regulator BAP at five different concentrations (0.0, 2.22, 4.44, 8.88 and 17.76mM) on the in vitro multiplication of different explants (nodal segments, apex cotyledon and stem segment) and the rooting stage we tested different concentrations of IBA (0.0, 2.5, 5.0 and 10.0mM) in the presence and absence of 1.0g L-1 of activated charcoal. Highest number of shoots (2.36) was obtained in 4.44mM of BAP from cotyledonary segment and higher rooting percentage (92.0%) ocurred in 10.0mM of IBA in the absence of activated charcoal. There were no difficulties to the establishment of micropropagation protocol A. cearensis.

Umburana-de-cheiro é uma espécie nativa da Caatinga, amplamente utilizada pela população local, devido o valor madeireiro, ornamental, forrageiro e, principalmente medicinal. Considerando o significativo risco de extinção e a inexistência de estudos relacionados ao cultivo e propagação, objetivou-se com este trabalho estabelecer um protocolo para micropropagação de Amburana cearensis. Para isso, avaliou-se a influência do regulador vegetal 6-benzilaminopurina (BAP) em cinco concentrações (0,0; 2,22; 4,44; 8,88 e 17,76µM) sobre a multiplicação in vitro de diferentes explantes (segmento nodal, ápice caulinar e segmento cotiledonar) e na etapa de enraizamento testou-se diferentes concentrações de ácido indol butírico (AIB) (0,0; 2,5; 5,0 e 10,0µM) na presença e ausência de 1,0g L-1 de carvão ativado. Maior número de brotos (2,36) foi obtido na presença de 4,44µM de BAP, a partir do segmento cotiledonar e maior porcentagem de enraizamento (92,0%) ocorreu na presença de 10,0µM de AIB na ausência de carvão ativado. Não existiram dificuldades para o estabelecimento do protocolo de micropropagação de A. cearensis.

Micropropagação de umburana de cheiro

Umburana de cheiro is a species native to the Caatinga, widely used by local people, because the value of timber, ornamental, forage and especially medicinal. Considering the significant risk of extinction and the ausence of studies related to the cultive and propagation, the aim of this work was to establish a protocol for micropropagation Amburana cearensis. For this, we evaluated the influence of plant growth regulator BAP at five different concentrations (0.0, 2.22, 4.44, 8.88 and 17.76mM) on the in vitro multiplication of different explants (nodal segments, apex cotyledon and stem segment) and the rooting stage we tested different concentrations of IBA (0.0, 2.5, 5.0 and 10.0mM) in the presence and absence of 1.0g L-1 of activated charcoal. Highest number of shoots (2.36) was obtained in 4.44mM of BAP from cotyledonary segment and higher rooting percentage (92.0%) ocurred in 10.0mM of IBA in the absence of activated charcoal. There were no difficulties to the establishment of micropropagation protocol A. cearensis.

Umburana-de-cheiro é uma espécie nativa da Caatinga, amplamente utilizada pela população local, devido o valor madeireiro, ornamental, forrageiro e, principalmente medicinal. Considerando o significativo risco de extinção e a inexistência de estudos relacionados ao cultivo e propagação, objetivou-se com este trabalho estabelecer um protocolo para micropropagação de Amburana cearensis. Para isso, avaliou-se a influência do regulador vegetal 6-benzilaminopurina (BAP) em cinco concentrações (0,0; 2,22; 4,44; 8,88 e 17,76µM) sobre a multiplicação in vitro de diferentes explantes (segmento nodal, ápice caulinar e segmento cotiledonar) e na etapa de enraizamento testou-se diferentes concentrações de ácido indol butírico (AIB) (0,0; 2,5; 5,0 e 10,0µM) na presença e ausência de 1,0g L-1 de carvão ativado. Maior número de brotos (2,36) foi obtido na presença de 4,44µM de BAP, a partir do segmento cotiledonar e maior porcentagem de enraizamento (92,0%) ocorreu na presença de 10,0µM de AIB na ausência de carvão ativado. Não existiram dificuldades para o estabelecimento do protocolo de micropropagação de A. cearensis.

Micropropagação de umburana de cheiro

Umburana de cheiro is a species native to the Caatinga, widely used by local people, because the value of timber, ornamental, forage and especially medicinal. Considering the significant risk of extinction and the ausence of studies related to the cultive and propagation, the aim of this work was to establish a protocol for micropropagation Amburana cearensis. For this, we evaluated the influence of plant growth regulator BAP at five different concentrations (0.0, 2.22, 4.44, 8.88 and 17.76mM) on the in vitro multiplication of different explants (nodal segments, apex cotyledon and stem segment) and the rooting stage we tested different concentrations of IBA (0.0, 2.5, 5.0 and 10.0mM) in the presence and absence of 1.0g L-1 of activated charcoal. Highest number of shoots (2.36) was obtained in 4.44mM of BAP from cotyledonary segment and higher rooting percentage (92.0%) ocurred in 10.0mM of IBA in the absence of activated charcoal. There were no difficulties to the establishment of micropropagation protocol A. cearensis.

Umburana-de-cheiro é uma espécie nativa da Caatinga, amplamente utilizada pela população local, devido o valor madeireiro, ornamental, forrageiro e, principalmente medicinal. Considerando o significativo risco de extinção e a inexistência de estudos relacionados ao cultivo e propagação, objetivou-se com este trabalho estabelecer um protocolo para micropropagação de Amburana cearensis. Para isso, avaliou-se a influência do regulador vegetal 6-benzilaminopurina (BAP) em cinco concentrações (0,0; 2,22; 4,44; 8,88 e 17,76µM) sobre a multiplicação in vitro de diferentes explantes (segmento nodal, ápice caulinar e segmento cotiledonar) e na etapa de enraizamento testou-se diferentes concentrações de ácido indol butírico (AIB) (0,0; 2,5; 5,0 e 10,0µM) na presença e ausência de 1,0g L-1 de carvão ativado. Maior número de brotos (2,36) foi obtido na presença de 4,44µM de BAP, a partir do segmento cotiledonar e maior porcentagem de enraizamento (92,0%) ocorreu na presença de 10,0µM de AIB na ausência de carvão ativado. Não existiram dificuldades para o estabelecimento do protocolo de micropropagação de A. cearensis.

Fitorreguladores e posição de explantes foliares na indução à calogênese em cerejeira-do-mato

The aim of this research was to evaluate the effect of different forms of leaf explants inoculation in nutritive medium of Eugenia involucrata DC., an native forest species with diverse economic potentials. Inoculations were evaluated at abaxial and adaxial positions, with and without cuts on the leaf surface in the MS nutritive medium supplemented with 10 µM NAA or combination, in µM, of 2.4-D and BAP: 5-5 and 5-10. The explants position inoculation affects the callus induction and organogenesis in E. involucrata leaf segments, being the abaxial the most suitable position, without cuts in the leaf surface. The combination of growth regulators 2.4-D and BAP, at concentrations of 5-10( µM) was most promising of callus obtaining, especially nodular callus, putative at somatic embryogenesis.

O presente trabalho objetivou avaliar o efeito de diferentes formas de inoculação, no meio nutritivo, de explantes foliares de Eugenia involucrata DC., uma espécie florestal nativa com diversas potencialidades econômicas. Foram avaliadas as posições abaxial, adaxial, com e sem cortes no limbo foliar. Foi utilizado o meio de cultura MS acrescido de 10 µM de ANA isolado ou das combinações, em µM, de 2,4-D e BAP: 5-5 e 5-10. A posição dos explantes afeta a calogênese e a organogênese em segmentos foliares de E. involucrata, sendo mais adequada a abaxial sem cortes na região do limbo. A associação dos reguladores de crescimento 2,4-D + BAP na concentração de 5-10 µM foi mais promissora para a obtenção de calos, especialmente os nodulares, putativos à embriogênese somática.

Protocol optimization and histological analysis of in vitro plant regeneration of RB92579 and RB93509 sugarcane cultivars

The objectives of this study were to establish appropriate conditions for obtaining plant regeneration and acclimatization of the 'RB92579' and 'RB93509' sugarcane cultivars and to elucidate the shoots origin through histological analysis. For both cultivars, obtaining shoots showed better results with the culture of explants on a callus induction medium containing 2.0mg L-1 2,4-dichlorophenoxyacetic acid, followed by cultivation on a shoot induction medium containing 0.1mg L-1 kinetin and 0.2mg L-1 benzilaminopurine. The MS medium without growth regulators proved to be appropriate for elongation and rooting of shoots and the use of the composed substrate of vermiculite + MS salts was effective for acclimatization. Histological analysis revealed that the origin of the shoots in both cultivars occurred through indirect organogenesis.

Os objetivos deste estudo foram estabelecer condições apropriadas para a obtenção de regeneração de plantas e aclimatização das cultivares 'RB92579' e 'RB93509' de cana-de-açúcar e elucidar a origem das brotações através da análise histológica. Em ambas as cultivares, as brotações obtidas apresentaram os melhores resultados com a cultura dos explantes em um meio de indução de calo contendo 2,0mg L-1 de ácido 2,4-diclorofenoxiacético, seguido do cultivo em meio indutor de brotações, contendo 0,1mg L-1 de cinetina e 0,2mg L-1 benzilaminopurina. O meio MS sem reguladores de crescimento foi adequado para o alongamento e enraizamento das brotações e da utilização do substrato composto de vermiculite + sais do meio MS, foi eficaz para a aclimatização. A análise histológica revelou que a origem das brotações em ambas as cultivares ocorreu via organogênese indireta.

Protocol optimization and histological analysis of in vitro plant regeneration of RB92579 and RB93509 sugarcane cultivars

The objectives of this study were to establish appropriate conditions for obtaining plant regeneration and acclimatization of the 'RB92579' and 'RB93509' sugarcane cultivars and to elucidate the shoots origin through histological analysis. For both cultivars, obtaining shoots showed better results with the culture of explants on a callus induction medium containing 2.0mg L-1 2,4-dichlorophenoxyacetic acid, followed by cultivation on a shoot induction medium containing 0.1mg L-1 kinetin and 0.2mg L-1 benzilaminopurine. The MS medium without growth regulators proved to be appropriate for elongation and rooting of shoots and the use of the composed substrate of vermiculite + MS salts was effective for acclimatization. Histological analysis revealed that the origin of the shoots in both cultivars occurred through indirect organogenesis.

Os objetivos deste estudo foram estabelecer condições apropriadas para a obtenção de regeneração de plantas e aclimatização das cultivares 'RB92579' e 'RB93509' de cana-de-açúcar e elucidar a origem das brotações através da análise histológica. Em ambas as cultivares, as brotações obtidas apresentaram os melhores resultados com a cultura dos explantes em um meio de indução de calo contendo 2,0mg L-1 de ácido 2,4-diclorofenoxiacético, seguido do cultivo em meio indutor de brotações, contendo 0,1mg L-1 de cinetina e 0,2mg L-1 benzilaminopurina. O meio MS sem reguladores de crescimento foi adequado para o alongamento e enraizamento das brotações e da utilização do substrato composto de vermiculite + sais do meio MS, foi eficaz para a aclimatização. A análise histológica revelou que a origem das brotações em ambas as cultivares ocorreu via organogênese indireta.

Protocol optimization and histological analysis of in vitro plant regeneration of RB92579 and RB93509 sugarcane cultivars

The objectives of this study were to establish appropriate conditions for obtaining plant regeneration and acclimatization of the 'RB92579' and 'RB93509' sugarcane cultivars and to elucidate the shoots origin through histological analysis. For both cultivars, obtaining shoots showed better results with the culture of explants on a callus induction medium containing 2.0mg L-1 2,4-dichlorophenoxyacetic acid, followed by cultivation on a shoot induction medium containing 0.1mg L-1 kinetin and 0.2mg L-1 benzilaminopurine. The MS medium without growth regulators proved to be appropriate for elongation and rooting of shoots and the use of the composed substrate of vermiculite + MS salts was effective for acclimatization. Histological analysis revealed that the origin of the shoots in both cultivars occurred through indirect organogenesis.

Os objetivos deste estudo foram estabelecer condições apropriadas para a obtenção de regeneração de plantas e aclimatização das cultivares 'RB92579' e 'RB93509' de cana-de-açúcar e elucidar a origem das brotações através da análise histológica. Em ambas as cultivares, as brotações obtidas apresentaram os melhores resultados com a cultura dos explantes em um meio de indução de calo contendo 2,0mg L-1 de ácido 2,4-diclorofenoxiacético, seguido do cultivo em meio indutor de brotações, contendo 0,1mg L-1 de cinetina e 0,2mg L-1 benzilaminopurina. O meio MS sem reguladores de crescimento foi adequado para o alongamento e enraizamento das brotações e da utilização do substrato composto de vermiculite + sais do meio MS, foi eficaz para a aclimatização. A análise histológica revelou que a origem das brotações em ambas as cultivares ocorreu via organogênese indireta.

Fitorreguladores e posição de explantes foliares na indução à calogênese em cerejeira-do-mato

The aim of this research was to evaluate the effect of different forms of leaf explants inoculation in nutritive medium of Eugenia involucrata DC., an native forest species with diverse economic potentials. Inoculations were evaluated at abaxial and adaxial positions, with and without cuts on the leaf surface in the MS nutritive medium supplemented with 10 µM NAA or combination, in µM, of 2.4-D and BAP: 5-5 and 5-10. The explants position inoculation affects the callus induction and organogenesis in E. involucrata leaf segments, being the abaxial the most suitable position, without cuts in the leaf surface. The combination of growth regulators 2.4-D and BAP, at concentrations of 5-10( µM) was most promising of callus obtaining, especially nodular callus, putative at somatic embryogenesis.

O presente trabalho objetivou avaliar o efeito de diferentes formas de inoculação, no meio nutritivo, de explantes foliares de Eugenia involucrata DC., uma espécie florestal nativa com diversas potencialidades econômicas. Foram avaliadas as posições abaxial, adaxial, com e sem cortes no limbo foliar. Foi utilizado o meio de cultura MS acrescido de 10 µM de ANA isolado ou das combinações, em µM, de 2,4-D e BAP: 5-5 e 5-10. A posição dos explantes afeta a calogênese e a organogênese em segmentos foliares de E. involucrata, sendo mais adequada a abaxial sem cortes na região do limbo. A associação dos reguladores de crescimento 2,4-D + BAP na concentração de 5-10 µM foi mais promissora para a obtenção de calos, especialmente os nodulares, putativos à embriogênese somática.

Análise Ultrassonográfica em gatas gestantes: estudo da frequência cardíaca e órgãos linfóides fetais

O presente estudo baseia-se na análise ultrassonográfica no terço final da gestação em gatas, abordando avaliações que possa dar suporte ao médico veterinário imaginologista frente às mudanças da frequência cardíaca fetal e novos dados sobre à organogênese. O trabalho foi dividido em dois capítulos independentes. No primeiro capítulo o enfoque da pesquisa foi no monitoramento da frequência cardíaca fetal no terço final da gestação para detecção de acelerações e desacelerações, fenômeno este descrito em humanos e recentemente descrito em cães. Essas mudanças causadas na frequência cardíaca fetal podem estar relacionadas às contrações uterinas e estão fortemente conectadas ao momento pré-parto. Esse trabalho demonstrou que tais oscilações da frequência cardíaca fetal acontecem em fetos felinos e podem ser utilizados como uma ferramenta na previsão do parto. Devido a evolução dos aparelhos ultrassonográficos, a alta resolução melhora a avaliação de estruturas muito pequenas no feto, o que possibilitaria a identificação de órgãos ainda não descritos na literatura. Por esse motivo, o segundo capítulo descreve em qual fase gestacional da gata há o aparecimento de órgãos linfoides. Fizemos uma avaliação descritiva do timo e do baço, o que pode contribuir para avaliação desses órgãos em outras espécies.

The main of research is based on ultrasonographic analysis in the final third of gestation in cats, addressing evaluations that may support the veterinarian's radiologist in the fetal heart rate changes and new data of organogenesis. Therefore, the study was divided into two chapters. In the first chapter, the focus of the research was on the fetal heart rate monitoring in the final third of gestation to detect accelerations and decelerations, a phenomenon described in humans and recently described in dogs. These changes in fetal heart rate may be related to uterine contractions and are strongly connected to the prepartum time. This work has demonstrated that such fetal heart rate oscillations occur in feline fetuses and can be used as a tool in predicting delivery. Due to the evolution of ultrasound devices, the high-resolution image improves the evaluation of tiny structures in the fetus, which would allow the identification of organs not yet described in the literature. For this reason, the second chapter describes in which gestational phase of the cat there is the appearance of lymphoid organs. We made a descriptive evaluation of the thymus and spleen, which may contribute to the assessment of these organs in other species.

In vitro shoot regeneration of boldo from leaf explants

A shoot regeneration system for Plectranthus neochilus was studied from leaf explants. Leaves developed under in vitro conditions were cultured on Wood Plant Medium supplemented with 0.2mg dm-3 -naphthaleneacetic acid (NAA) and different 6-benzilaminopurine (BAP) or thidiazuron (TDZ) concentrations (0, 1.5, 3.0, 4.5 and 6.0mg dm-3). An increase in percentage of responsive explants (85.3%) and in the number of shoots developed per explant (3.2) was observed when the explants were treated with 5.3 and 4.7mg dm-3 BAP, respectively. The leaf explants cultured on media supplemented with TDZ became vitreous and did not form buds. The regeneration system used is efficient for boldo bud induction and shoot development, showing high potential for advanced cellular and molecular studies.

O objetivo do presente trabalho foi adequar um protocolo de regeneração a partir de explantes foliares de Plectranthus neochilus. Folhas desenvolvidas sob condições in vitro foram cultivadas em meio WPM suplementado com 0,2mg L-1 de ácido -naftaleno acético (ANA) e diferentes concentrações (0; 1,5; 3,0; 4,5 e 6,0mg L-1) de 6-benzilaminopurina (BAP) ou thidiazuron (TDZ). Observou-se o aumento na percentagem de explantes regenerantes (85,3%) e no número de brotações por explante (3,2), quando os explantes foliares foram cultivados em meio contendo 5,3 e 4,7mg L-1 de BAP, respectivamente. Os explantes foliares cultivados em TDZ tornaram-se vítreos e não formaram gemas. O protocolo utilizado é eficiente para a indução de gemas e brotações, demonstrando a potencialidade de seu uso para estudos mais avançados de biologia celular e molecular.

In vitro shoot regeneration of boldo from leaf explants

A shoot regeneration system for Plectranthus neochilus was studied from leaf explants. Leaves developed under in vitro conditions were cultured on Wood Plant Medium supplemented with 0.2mg dm-3 -naphthaleneacetic acid (NAA) and different 6-benzilaminopurine (BAP) or thidiazuron (TDZ) concentrations (0, 1.5, 3.0, 4.5 and 6.0mg dm-3). An increase in percentage of responsive explants (85.3%) and in the number of shoots developed per explant (3.2) was observed when the explants were treated with 5.3 and 4.7mg dm-3 BAP, respectively. The leaf explants cultured on media supplemented with TDZ became vitreous and did not form buds. The regeneration system used is efficient for boldo bud induction and shoot development, showing high potential for advanced cellular and molecular studies.

O objetivo do presente trabalho foi adequar um protocolo de regeneração a partir de explantes foliares de Plectranthus neochilus. Folhas desenvolvidas sob condições in vitro foram cultivadas em meio WPM suplementado com 0,2mg L-1 de ácido -naftaleno acético (ANA) e diferentes concentrações (0; 1,5; 3,0; 4,5 e 6,0mg L-1) de 6-benzilaminopurina (BAP) ou thidiazuron (TDZ). Observou-se o aumento na percentagem de explantes regenerantes (85,3%) e no número de brotações por explante (3,2), quando os explantes foliares foram cultivados em meio contendo 5,3 e 4,7mg L-1 de BAP, respectivamente. Os explantes foliares cultivados em TDZ tornaram-se vítreos e não formaram gemas. O protocolo utilizado é eficiente para a indução de gemas e brotações, demonstrando a potencialidade de seu uso para estudos mais avançados de biologia celular e molecular.