Embryonic loss, abortion, and malformations in ewes caused by the ingestion of hay leaves of Cenostigma pyramidale / Perda embrionária, aborto e malformações em ovinos por ingestão de Cenostigma pyramidale na forma fenada

Determining if reproductive failures in ewes at the semiarid region in the state of Bahia are related to the consumption of the species Cenostigma pyramidale (Tul.) Gagnon & G.P. Lewis, and this study was developed using pregnant ewes divided into six groups: G1, G2, G3, G4 with six animals each, G5 and G6 with ten animals. Each group received fence leaves in the proportion of 1%, 2%, 0.5%, and 0.25% of live weight (LW) respectively; G5 and G6, with ten animals each, receiving 0.25% and 0.5% of the LW, respectively, and the Control Group, comprising 16 ewes, were grass feeding (Cynodon dactylon). Ewes from G1 to G4 were the same, except for two, and started ingestion of the plant four days after ending of natural mating on the 80th day of gestation, while those regarding from G5 to G6 groups started ingestion on the 26th day of gestation ending on the 98 day. The ultrasonographic test was performed weekly. In G1 ewes (1%), there was an embryonic loss on the 32nd and 39th days of gestation and abortion on the 46th day. In G2 (2%), the embryo loss was earlier (on the 26th day of gestation), and abortion on the 46th day of gestation. In G3 group (0.5%), there was an embryonic loss around the 40th day of gestation. In G4 group (0.25%), it was observed the occurrence of one death lamb with bone malformations. In G6 (0.5%), abortion occurred later (108 days), followed by retained placenta. This was also verified in G5 group (0.25%). The presence of fetal malformation was found in death lambs born in G4 group, born alive from G5 and G6 groups, and one aborted from G6. In G5 and G6 groups, there were also genetic alterations on surviving lambs. In addition to these results, recurrent estrus was observed without gestation in G1, G2, G3, and G4 ewes. From the Control Group, 13 normal lambs were born without genetic alterations; furthermore, concerning a quadruple birth, three lambs were born dead. The results infer that species of C. pyramidale in low doses causes reproductive losses in pregnant ewes, therefore it is not recommended for sheep diet over the first 60 days of gestation.(AU)

Para determinar se falhas reprodutivas em ovelhas na região semiárida da Bahia estão relacionadas ao consumo de Cenostigma pyramidale (Tul.) Gagnon & G.P. Lewis, foi realizado um estudo utilizando-se ovelhas prenhes divididas em seis grupos e dois Grupos Controle. Os grupos G1, G2, G3 e G4 com seis animais cada. Cada grupo recebeu folhas fenadas na proporção de 1%, 2%, 0,5% e 0,25% do peso vivo (PV) respectivamente; G5 e G6, com 10 animais cada, que receberam 0,25% e 0,5% do PV respectivamente. Os Grupos Controle foram alimentados com ração e capim (Cynodon dactylon). Ovelhas dos grupos 1 a 4 iniciaram ingestão da planta quatro dias após monta natural com término aos 80 dias de gestação, enquanto as dos grupos 5 a 6 iniciaram ingestão no 26º dia de gestação com término aos 98 dias. Avaliação ultrassonográfica foi realizada semanalmente. Nos animais do G1 (1%), verificou-se perda embrionária aos 32 e 39 dias de gestação, e aborto aos 46 dias. Nos do G2 (2%) a perda embrionária foi mais precoce (26 dias), e aborto aos 46 dias. No G3 (0,5%), houve perda embrionária em torno dos 40 dias. No G4 (0,25%), verificou-se ocorrência de natimorto com malformações aos 150 dias de gestação. No G6 (0,5%) o aborto ocorreu mais tardiamente (108 dias), seguido de retenção de placenta. Essa ocorrência também foi verificada no G5 (0,25%). A presença de malformação fetal foi encontrada em fetos natimorto do G4, nascidos vivos do G5 e G6, e um abortado do G6. No G5 e G6 também foram observadas alterações de aprumos em cordeiros sobreviventes. Do Grupo Controle nasceram 13 borregos normais, porém uma ovelha apresentou gestação quádrupla com três natimortos. Os resultados inferem que C. pyramidale fenada em baixas doses causa perdas reprodutivas em ovelhas gestantes, não sendo por isso recomendada para a dieta de ovelhas durante os primeiros 60 dias de gestação.(AU)

Embryonic loss, abortion, and malformations in ewes caused by the ingestion of hay leaves of Cenostigma pyramidale / Perda embrionária, aborto e malformações em ovinos por ingestão de Cenostigma pyramidale na forma fenada

Determining if reproductive failures in ewes at the semiarid region in the state of Bahia are related to the consumption of the species Cenostigma pyramidale (Tul.) Gagnon & G.P. Lewis, and this study was developed using pregnant ewes divided into six groups: G1, G2, G3, G4 with six animals each, G5 and G6 with ten animals. Each group received fence leaves in the proportion of 1%, 2%, 0.5%, and 0.25% of live weight (LW) respectively; G5 and G6, with ten animals each, receiving 0.25% and 0.5% of the LW, respectively, and the Control Group, comprising 16 ewes, were grass feeding (Cynodon dactylon). Ewes from G1 to G4 were the same, except for two, and started ingestion of the plant four days after ending of natural mating on the 80th day of gestation, while those regarding from G5 to G6 groups started ingestion on the 26th day of gestation ending on the 98 day. The ultrasonographic test was performed weekly. In G1 ewes (1%), there was an embryonic loss on the 32nd and 39th days of gestation and abortion on the 46th day. In G2 (2%), the embryo loss was earlier (on the 26th day of gestation), and abortion on the 46th day of gestation. In G3 group (0.5%), there was an embryonic loss around the 40th day of gestation. In G4 group (0.25%), it was observed the occurrence of one death lamb with bone malformations. In G6 (0.5%), abortion occurred later (108 days), followed by retained placenta. This was also verified in G5 group (0.25%). The presence of fetal malformation was found in death lambs born in G4 group, born alive from G5 and G6 groups, and one aborted from G6. In G5 and G6 groups, there were also genetic alterations on surviving lambs. In addition to these results, recurrent estrus was observed without gestation in G1, G2, G3, and G4 ewes. From the Control Group, 13 normal lambs were born without genetic alterations; furthermore, concerning a quadruple birth, three lambs were born dead. The results infer that species of C. pyramidale in low doses causes reproductive losses in pregnant ewes, therefore it is not recommended for sheep diet over the first 60 days of gestation.(AU)

Para determinar se falhas reprodutivas em ovelhas na região semiárida da Bahia estão relacionadas ao consumo de Cenostigma pyramidale (Tul.) Gagnon & G.P. Lewis, foi realizado um estudo utilizando-se ovelhas prenhes divididas em seis grupos e dois Grupos Controle. Os grupos G1, G2, G3 e G4 com seis animais cada. Cada grupo recebeu folhas fenadas na proporção de 1%, 2%, 0,5% e 0,25% do peso vivo (PV) respectivamente; G5 e G6, com 10 animais cada, que receberam 0,25% e 0,5% do PV respectivamente. Os Grupos Controle foram alimentados com ração e capim (Cynodon dactylon). Ovelhas dos grupos 1 a 4 iniciaram ingestão da planta quatro dias após monta natural com término aos 80 dias de gestação, enquanto as dos grupos 5 a 6 iniciaram ingestão no 26º dia de gestação com término aos 98 dias. Avaliação ultrassonográfica foi realizada semanalmente. Nos animais do G1 (1%), verificou-se perda embrionária aos 32 e 39 dias de gestação, e aborto aos 46 dias. Nos do G2 (2%) a perda embrionária foi mais precoce (26 dias), e aborto aos 46 dias. No G3 (0,5%), houve perda embrionária em torno dos 40 dias. No G4 (0,25%), verificou-se ocorrência de natimorto com malformações aos 150 dias de gestação. No G6 (0,5%) o aborto ocorreu mais tardiamente (108 dias), seguido de retenção de placenta. Essa ocorrência também foi verificada no G5 (0,25%). A presença de malformação fetal foi encontrada em fetos natimorto do G4, nascidos vivos do G5 e G6, e um abortado do G6. No G5 e G6 também foram observadas alterações de aprumos em cordeiros sobreviventes. Do Grupo Controle nasceram 13 borregos normais, porém uma ovelha apresentou gestação quádrupla com três natimortos. Os resultados inferem que C. pyramidale fenada em baixas doses causa perdas reprodutivas em ovelhas gestantes, não sendo por isso recomendada para a dieta de ovelhas durante os primeiros 60 dias de gestação.(AU)

FREQUÊNCIA ALÉLICA DA MUTAÇÃO APAF1 EM BOVINOS DA RAÇA HOLANDESA (HOLSTEIN-FRIESIAN) NO BRASIL

A mutação APAF1 é uma enfermidade autossômica recessiva, associada ao haplótipo 1 (HH1) e caracterizada pela substituição de uma citosina (C) por uma timina (T) na posição p.Q579X (c.1741C>T) do cromossomo 5 (BTA5). A mutação está associada com a raça Holandesa e causa perda fetal e embrionária, durante o 60º e 200º dia de gestação, e redução nas taxas de concepção. Estudos demonstram uma prevalência de 1.48% a 65%, entretanto, não se há estudos e conhecimento sobre ocorrência da mutação no Brasil. O objetivo deste estudo é verificar a prevalência da mutação APAF1 em bovinos holandeses no Brasil. Um total de 248 amostras de DNA (210 vacas e 38 touros) foram utilizadas neste estudos, obtidas de quatro propriedades de leite e três Centrais de Reprodução dos estados do Paraná e São Paulo. As amostras foram submetidas às técnicas de PCR e ARMS-PCR, analisadas por eletroforese em gel de agarose, purificadas e submetidas ao sequenciamento direto de Sanger, para confirmação do genótipo e comparação e possível validação do método e primers desenvolvidos para a técnica de ARMS-PCR. Todos os animais analisados neste estudos foram classificados como não carreadores da mutação, ou seja, homozigotos para o alelo C (wild-type) tanto na técnica de ARMS-PCR quanto no sequenciamento Sanger. Concluímos que a mutação associada ao gene APAF1 não teve prevalência na população brasileira de Holandeses sob a qual este estudo foi realizado e que aparenta ser extremante rara.

The APAF1 mutation is an autosomal recessive inherited disease, associated with the haplotype 1 (HH1) and characterized by a substitution of a cytosine (C) for a thymine (T) in p.Q579X (c.1741C>T) position of chromosome 5 (BTA5). The mutation is associated with the Holstein cattle breed and causes fetal and embryonic loss, during the 60th and 200th day of gestation, and reduced conception rate. Studies demonstrated prevalence from 1.48% to 65%, however, there are no studies and knowledge about the mutation in Brazil. This study aimed to verify the prevalence of the APAF1 mutation in Brazilian Holstein cattle. A total of 248 Holstein DNA samples (210 cows and 38 bulls) were used in this study, obtained from four dairy farms and three animal reproduction centers from Paraná and São Paulo states. DNA samples were submitted to PCR and ARMS-PCR techniques, analyzed via agarose gel electrophoresis, purified, and subjected to Sanger direct sequencing, for confirmation of the genotype and comparison and possible validation of the method and primers developed for ARMS-PCR. All animals assessed in this study were identified as non-carriers or, allelic C homozygous (wild-type) for APAF1 mutation, by ARMS-PCR technique and Sanger direct sequencing. We concluded that the mutation associated with the APAF1 gene was not prevalent in the Brazilian Holstein population under which this study was carried out and it appears to be extremely rare.

Efeito da idade sobre a fertilidade e perdas embrionárias de éguas inseminadas com sêmen asinino diluído e resfriado a 5ºC por 12 horas de armazenamento / Effect of age on fertility and embryonic loss of mares inseminated with jackass semen diluted and cooled at 5ºC for 12 hours

Estudou-se o efeito da idade sobre a fertilidade de éguas inseminadas com sêmen asinino diluído, resfriado e armazenado. Os ciclos foram acompanhados por palpação transretal e rufiação, sendo as inseminações realizadas às terças, quintas e sábados, a partir da detecção de um folículo de 3,0 a 3,5cm de diâmetro, em um dos ovários, até a ovulação. O sêmen de cinco jumentos da raça Pêga foi diluído nos diluidores de leite em pó desnatado-glicose ou glicina-gema de ovo, resfriado a 5ºC e armazenado por 12 horas, sendo a dose inseminante de 400 x 106 espermatozoides móveis (no momento da diluição final, pré-resfriamento). Os resultados de 195 ciclos estrais, referentes a 141 éguas, foram agrupados em classes, de acordo com a idade das éguas: 2,5 a 6 anos, 6,5 a 10 anos, 10,5 a 14 anos e 14,5 a 19 anos. As taxas de concepção, ao primeiro ciclo, foram de 68,42%, 50,75%, 46,88% e 52,17% e, após quatro ciclos, de 69,57%, 47,92%, 46,34% e 45,71% para as faixas etárias de 2,5 a 6, 6,5 a 10, 10,5 a 14 e 14,5 a 19 anos, respectivamente (P>0,05). A idade não teve efeito sobre a fertilidade das éguas inseminadas com sêmen asinino diluído e resfriado. (AU)

The effect of the mare age on fertility of mares inseminated with diluted, cooled and stored jackass semen was studied. The females were controlled by transrectal palpation and teasing, and inseminated every Tuesday, Thursday and Saturday, since the detection of a 3.0 to 3.5cm follicle diameter, in one of the ovaries, until ovulation. The semen of five Pêga jackasses was diluted in skim milk-glucose or in egg yolk-glicine extender and cooled at 5ºC for 12 hours, with the inseminate dose of 400 x 106 motile spermatozoa (at the moment of the final dilution, before cooling). The results of 195 cycles of 141 mares were grouped, in accordance with the age: 2.5 to 6 years, 6.5 to 10 years, 10.5 to 14 years and 14.5 to 19 years. The pregnancy rates for the first cycle were 68.42%, 50.75%, 46.88% and 52.17%, and after four cycles, the pregnancy rates/cycle were 69.57%, 47.92%, 46.34% and 45.71%, respectively for 2.5 to 6, 6.5 to 10, 10.5 to 14 and 14.5 to 19 years (P>0,05). The mare age had no influence on fertility, using diluted and cooled jackass semen.(AU)

Effects of prostaglandin administration 10 days apart on reproductive parameters of cyclic dairy nulliparous goats / Efeitos da aplicação de prostaglandinas intervaladas de 10 dias sobre características reprodutivas de cabras leiteiras nulíparas cíclicas

This study reported the effects of prostaglandin (PGF2a) administration 10 days apart on reproductive parameters of cyclic artificial inseminated (AI) nulliparous Alpine (n=9) and Saanen (n=9) goats. Animals received two doses of 22.5mg PGF2a 10 days apart. After 1st and 2nd PGF2a administrations, estrus was monitored at 12 h intervals, with a buck teaser. Plasma progesterone concentration (ng/mL) was determined from blood sampled on day 0 (1st PGF2a) and the following 5, 10 (2nd PGF2a), 15, 20, 25 and 30 days. After the onset of the second estrus, females were transrectally (5 MHz probe) scanned at 4 hour intervals until at least 8h after ovulation. Pregnancy was checked through transrectal ultrasound on days 20, 25, 30, 35 and 90 after insemination. All parameters studied did not differ between breeds (P>0.05). Estrous response and interval to estrus, respectively, after 1st (78.9% and 50.6±17.2h) and 2nd PGF2a (88.9% and 50.0±14.8h) administration did not differ (P>0.05). Overall animals ovulating (100.0%), interval to ovulation after 2nd PGF2a (64.5±19.5h) and after estrous onset (18.0±9.1h), ovulation rate (1.3±0.5), diameter of ovulatory follicle (8.1±1.1mm) were recorded. Embryo loss occurred before day 30 of pregnancy. Estrus can be efficiently synchronized in nulliparous Alpine and Saanen goats with two doses of prostaglandin 10 days apart.(AU)

Relataram-se os efeitos da aplicação de prostaglandina sobre características reprodutivas de cabras leiteiras nulíparas cíclicas. Cabras Alpinas (n=9) e Saanen (n=9) receberam duas doses de 22,5mg PGF2a com 10 dias de intervalo. A progesterona plasmática (ng/mL) foi determinada a partir de amostras de sangue coletadas nos dias 0 (primeira dose), 5, 10 (segunda dose), 15, 20, 25 e 30. Após início do segundo estro, as fêmeas foram monitoradas por ultrassonografia transretal a cada quatro horas até oito horas após a ovulação. A gestação foi verificada por ultrassonografia transretal nos dias 20, 25, 30, 35 e 90 após a segunda dose. As características estudadas foram semelhantes entre as raças (P>0,05). Animais em estro e o intervalo parto-estro de, respectivamente, 78,9% e 50,6±17,2h e 88,9% e 50,0±14,8h após a primeira e segunda administrações de prostaglandina, não diferiram (P>0,05). Todas as cabras ovularam e registraram-se valores do intervalo parto-ovulação após a segunda aplicação de prostaglandina de 64,5±19,5h e após início do estro de 18,0±9,1h, a taxa de ovulação de 1,3±0,5 e diâmetro do folículo ovulatório de 8,1±1,1mm. Perda embrionária ocorreu antes de 30 dias de gestação. O estro pode ser eficientemente sincronizado em cabras leiteiras núliparas com duas doses de prostaglandina intervaladas de 10 dias.(AU)

Aspectos reprodutivos dos equídeos criados no Setor de Equideocultura da Prefeitura do Campus Fernando Costa da Universidade de São Paulo

Em relação à reprodução, notamos que os equídeos, ao contrário dos bovinos e outros animais de produção, não são selecionados para tal característica. Isto se deve ao fomento das competições equestres onde são julgadas características de performance atlética, conformação, pelagem e andamento. Neste contexto, o presente trabalho teve como objetivo avaliar por meio de estudo retrospectivo, durante 10 estações de monta, os aspectos reprodutivos dos equídeos do Setor de Equideocultura da Prefeitura do Campus Fernando Costa da Universidade de São Paulo, localizado na cidade de Pirassununga, SP. Foram utilizados 60 éguas, Puro Sangue Inglês, Brasileiro de Hipismo e mestiças com faixas etárias variando de 2 a 23 anos. Ainda, 13 garanhões e 2 jumentos. Para as análises estatísticas foi utilizado o programa SAS (versão 9.3, SAS Institute Inc., Cary, NC, USA), onde probabilidades de P0,05 e entre P>0,05 e < 0,10 indicaram diferenças significativas e tendências, respectivamente. Os resultados obtidos indicam quais possíveis fatores podem interferir nos aspectos reprodutivos e, consequentemente, na eficiência reprodutiva de criações de equídeos.

Regarding reproduction, it has been noticed that equidae, unlike cattle and other farm animals, are not selected for this characteristic. This is due to the promotion of equestrian competitions where athletic performance, conformation, coat and pace are evaluated. In this context, the present work had as objective to evaluate through the retrospective study along 10 breeding seasons, the reproductive aspects of equidae bred in the equideocultural sector of the Fernando Costa Campus administration of the University of São Paulo, located at Pirassununga, SP. Sixty Thoroughtbred, Brazilian Sport Horse and mixed breed mares were used, with ages varying from 2 to 23 years. Also, 13 stallions and 2 donkeys were used. Statistical analyzes were performed by SAS program (version 9.3, SAS Institute Inc., Cary, NC, USA), where probabilities of P0.05 and between P>0.05 and <0.10 indicated significant differences and tendencies, respectively. The results indicate which possible factors may interfere in the reproductive aspects and, consequently, on the reproductive efficiency of equine breeding.

ALTERAÇÕES REPRODUTIVAS EM RATAS WISTAR E COBAIAS (Cavia porcellus) INTOXICADAS EXPERIMENTALMENTE POR Stryphnodendron fissuratum

Stryphnodendron fissuratum Mart, Leguminosae Mimosoideae, é uma árvore que tem ocorrência registrada apenas no Brasil. Seus frutos são conhecidos popularmente como rosquinha. O curso clínico da intoxicação de ruminantes por esta planta é apresentado através da apatia, pelos eriçados, atonia ou hipomotilidade do rúmen, fezes moles, fétidas de cor escura, decúbito external e ainda surtos de abortos em bovinos a campo. Os efeitos abortivos dessa planta foram comprovados experimentalmente em caprinos e mais recentemente suspeitou-se que a planta também pode ser a causa de malformações fetais. Por este motivo, objetivou-se com esse estudo avaliar malformações fetais em cobaias (Cavia porcellus) e ratas wistar através da intoxicação experimental por S. fissuratum. No primeiro estudo, as cobaias foram divididas em quatro grupos constituídos por 16 animais, sendo um controle e três grupos que receberam ração comercial contendo as favas de S. fissuratum nas concentrações de 10, 20 e 40 g/kg/p.v, durante o período de organogênese. Nos Grupos 1-3, os principais sinais clínicos consistiram em anorexia, prostração, isolamento do grupo, ausência de vocalizações após o estímulo de oferecer alimentos tenros e diarréia. Nesses grupos ocorreram abortos e malformações. Esse estudo confirmou a toxicidade das favas de S. fissuratum para cobaias, com sinais clínicos e lesões similares àquelas relatadas anteriormente em bovinos. A redução significativa no número de crias nascidas e as malformações nos animais dos grupos experimentais sugerem que S. fissuratum afeta o desenvolvimento fetal e que é teratogênica. No segundo estudo, 24 ratas foram separadas aleatoriamente em quatro grupos sendo um controle. As favas maduras de S. fissuratum foram transformadas em um extrato hidroalcoólico a 70% concentrado em rotaevaporador. Nos grupos experimentais os animais receberam o extrato contendo 0,1 e 0,2g/dia/animal de acordo com o grupo, através da técnica de gavagem. As malformações em fetos das ratas que ingeriram o extrato foram observadas no G2 e indicam que a planta é teratogênica. No G3 não houve nascimento de fetos vivos, sugerindo que o aumento da concentração do extrato provocou maior reabsorção ou perda pós-implantação. De acordo com a análise histopatológica as ratas apresentaram alterações hepáticas e renais Estes dados sugerem que a planta afeta o desenvolvimento fetal. Apesar da comprovação de que as vagens de S. fissuratum são teratogênicas para cobaias e ratas wistar, para comprovar a hipótese de que a ingestão de vagens frescas dessa planta também provoca malformações em bovinos, são necessários novos experimentos nessa espécie com doses não tóxicas repetidas durante o período de organogênese.