Protodioscin levels in Brachiaria spp. in a sheep production system and a brief review of the literature of Brachiaria spp. poisoning in ruminants

ABSTRACT: Plants of the genus Brachiaria, used in several countries as forage, are poisonous to some livestock species. Their toxic principle is protodioscin, and the main form of clinical presentation of the toxicosis is hepatogenous photosensitization. Here we compare protodioscin levels in B. decumbens and B. brizantha and review the literature on the concentrations and methodologies of collection and analysis of the toxic principle in Brachiaria spp. and the risk of contamination of pastures by more toxic species that may facilitate poisoning by plants of this genus in sheep. The experiment was conducted in pastures originally formed by B. brizantha, with many B. decumbens invasion points. The occurrence of cases of poisoning by Brachiaria spp. was the criterion for confirming pasture toxicity. The forage samples were collected at ten random points every 28 days through manual grazing simulation. The samples were analyzed for protodioscin by high-performance liquid chromatography (HPLC) with light scattering by evaporation (ELSD) after being dried and crushed. In the flock of 69 sheep, five poisoning cases occurred, three sheep died, and two recovered. The protodioscin levels found in the evaluated pastures ranged from 0.70 to 0.45%; higher levels appeared in B. decumbens (7.09%) compared to 1.04% in B. brizantha. We suggest that Brachiaria spp. should be avoided in pastures where sheep are grazing.

RESUMO: Plantas do gênero Brachiaria, utilizadas em vários países como forragem, são tóxicas para várias espécies pecuárias. Seu princípio tóxico é a protodioscina, e a principal forma de apresentação clínica da toxicose é a fotossensibilização hepatógena. Este estudo teve como objetivo comparar os níveis de protodioscina em B. decumbens e B. brizantha e revisar a literatura sobre as concentrações e metodologias de coleta e análise do princípio tóxico em Brachiaria spp. e o risco de contaminação das pastagens por espécies mais tóxicas que podem facilitar a intoxicação por plantas desse gênero em ovinos. O experimento foi conduzido em pastagens originalmente formadas por B. brizantha, com diversos pontos de invasão por B. decumbens. Ocorrência de casos de intoxicação por Brachiaria spp. foi o critério para confirmação da toxicidade da pastagem. As amostras de forragem foram coletadas a cada 28 dias em dez pontos aleatórios por meio de simulação de pastejo manual. As amostras foram analisadas para protodioscina por cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC) com dispersão de luz por evaporação (ELSD) após serem secadas e trituradas. No rebanho de 69 ovelhas, cinco desenvolveram a intoxicação, três morreram e duas se recuperaram. Os níveis de protodioscina encontrados nas pastagens avaliadas variaram de 0,70 a 0,45%; níveis mais elevados apareceram em B. decumbens (7,09%) em comparação com 1,04% em B. brizantha. Sugerimos que Brachiaria spp. deve ser evitada no pasto de ovelhas em pastejo.

Protodioscin levels in Brachiaria spp. in a sheep production system and a brief review of the literature of Brachiaria spp. poisoning in ruminants / Níveis de protodioscina em Brachiaria spp. em um sistema de produção de ovinos e uma breve revisão da literatura da intoxicação por Brachiaria spp. em ruminantes

Plants of the genus Brachiaria, used in several countries as forage, are poisonous to some livestock species. Their toxic principle is protodioscin, and the main form of clinical presentation of the toxicosis is hepatogenous photosensitization. Here we compare protodioscin levels in B. decumbens and B. brizantha and review the literature on the concentrations and methodologies of collection and analysis of the toxic principle in Brachiaria spp. and the risk of contamination of pastures by more toxic species that may facilitate poisoning by plants of this genus in sheep. The experiment was conducted in pastures originally formed by B. brizantha, with many B. decumbens invasion points. The occurrence of cases of poisoning by Brachiaria spp. was the criterion for confirming pasture toxicity. The forage samples were collected at ten random points every 28 days through manual grazing simulation. The samples were analyzed for protodioscin by high-performance liquid chromatography (HPLC) with light scattering by evaporation (ELSD) after being dried and crushed. In the flock of 69 sheep, five poisoning cases occurred, three sheep died, and two recovered. The protodioscin levels found in the evaluated pastures ranged from 0.70 to 0.45%; higher levels appeared in B. decumbens (7.09%) compared to 1.04% in B. brizantha. We suggest that Brachiaria spp. should be avoided in pastures where sheep are grazing.(AU)

Plantas do gênero Brachiaria, utilizadas em vários países como forragem, são tóxicas para várias espécies pecuárias. Seu princípio tóxico é a protodioscina, e a principal forma de apresentação clínica da toxicose é a fotossensibilização hepatógena. Este estudo teve como objetivo comparar os níveis de protodioscina em B. decumbens e B. brizantha e revisar a literatura sobre as concentrações e metodologias de coleta e análise do princípio tóxico em Brachiaria spp. e o risco de contaminação das pastagens por espécies mais tóxicas que podem facilitar a intoxicação por plantas desse gênero em ovinos. O experimento foi conduzido em pastagens originalmente formadas por B. brizantha, com diversos pontos de invasão por B. decumbens. Ocorrência de casos de intoxicação por Brachiaria spp. foi o critério para confirmação da toxicidade da pastagem. As amostras de forragem foram coletadas a cada 28 dias em dez pontos aleatórios por meio de simulação de pastejo manual. As amostras foram analisadas para protodioscina por cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC) com dispersão de luz por evaporação (ELSD) após serem secadas e trituradas. No rebanho de 69 ovelhas, cinco desenvolveram a intoxicação, três morreram e duas se recuperaram. Os níveis de protodioscina encontrados nas pastagens avaliadas variaram de 0,70 a 0,45%; níveis mais elevados apareceram em B. decumbens (7,09%) em comparação com 1,04% em B. brizantha. Sugerimos que Brachiaria spp. deve ser evitada no pasto de ovelhas em pastejo.(AU)

Protodioscin levels in Brachiaria spp. in a sheep production system and a brief review of the literature of Brachiaria spp. poisoning in ruminants / Níveis de protodioscina em Brachiaria spp. em um sistema de produção de ovinos e uma breve revisão da literatura da intoxicação por Brachiaria spp. em ruminantes

Plants of the genus Brachiaria, used in several countries as forage, are poisonous to some livestock species. Their toxic principle is protodioscin, and the main form of clinical presentation of the toxicosis is hepatogenous photosensitization. Here we compare protodioscin levels in B. decumbens and B. brizantha and review the literature on the concentrations and methodologies of collection and analysis of the toxic principle in Brachiaria spp. and the risk of contamination of pastures by more toxic species that may facilitate poisoning by plants of this genus in sheep. The experiment was conducted in pastures originally formed by B. brizantha, with many B. decumbens invasion points. The occurrence of cases of poisoning by Brachiaria spp. was the criterion for confirming pasture toxicity. The forage samples were collected at ten random points every 28 days through manual grazing simulation. The samples were analyzed for protodioscin by high-performance liquid chromatography (HPLC) with light scattering by evaporation (ELSD) after being dried and crushed. In the flock of 69 sheep, five poisoning cases occurred, three sheep died, and two recovered. The protodioscin levels found in the evaluated pastures ranged from 0.70 to 0.45%; higher levels appeared in B. decumbens (7.09%) compared to 1.04% in B. brizantha. We suggest that Brachiaria spp. should be avoided in pastures where sheep are grazing.(AU)

Plantas do gênero Brachiaria, utilizadas em vários países como forragem, são tóxicas para várias espécies pecuárias. Seu princípio tóxico é a protodioscina, e a principal forma de apresentação clínica da toxicose é a fotossensibilização hepatógena. Este estudo teve como objetivo comparar os níveis de protodioscina em B. decumbens e B. brizantha e revisar a literatura sobre as concentrações e metodologias de coleta e análise do princípio tóxico em Brachiaria spp. e o risco de contaminação das pastagens por espécies mais tóxicas que podem facilitar a intoxicação por plantas desse gênero em ovinos. O experimento foi conduzido em pastagens originalmente formadas por B. brizantha, com diversos pontos de invasão por B. decumbens. Ocorrência de casos de intoxicação por Brachiaria spp. foi o critério para confirmação da toxicidade da pastagem. As amostras de forragem foram coletadas a cada 28 dias em dez pontos aleatórios por meio de simulação de pastejo manual. As amostras foram analisadas para protodioscina por cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC) com dispersão de luz por evaporação (ELSD) após serem secadas e trituradas. No rebanho de 69 ovelhas, cinco desenvolveram a intoxicação, três morreram e duas se recuperaram. Os níveis de protodioscina encontrados nas pastagens avaliadas variaram de 0,70 a 0,45%; níveis mais elevados apareceram em B. decumbens (7,09%) em comparação com 1,04% em B. brizantha. Sugerimos que Brachiaria spp. deve ser evitada no pasto de ovelhas em pastejo.(AU)

Comparison of two collection methods to determine protodioscin concentrations in Brachiaria spp. and to monitor Brachiaria spp. poisoning / Comparação entre dois métodos de coleta para determinar as concentrações de protodioscina em Brachiaria spp. e monitorar a intoxicação por Brachiaria spp

The objective of this study was to evaluate the methods of collecting Brachiaria spp. (Simulated Grazing vs. Total Collection) for the determination of protodioscin concentrations and to monitor the intoxication in sheep susceptible and resistant to poisoning by Brachiaria spp. The collection of Brachiaria spp. was done through two different methods. The first one consisted in throwing a metallic square at 10 random picket points. The second was performed simulating, with the hands, the grazing behavior of sheep. The leaf blades obtained by the two methods were conditioned in a forced ventilation oven. The extraction and quantification of protodioscin from the dry milled plant material was done by reverse-phase high-performance liquid chromatography (HPLC). The collections were carried out at three stages of the life of experimental lamb (suckling, rearing, and finishing). The lambs were divided into resistant and susceptible to intoxication by Brachiaria spp. The criterion for a lamb to be considered sensitive was to present some clinical signs at some stage of its life. No significant differences were observed between the general averages of the two collections when the evaluation was done in the whole period. However, a significant difference was found at the onset of the clinical signs. The concentrations of protodioscin in this period were higher in Brachiaria spp. collected by the simulating grazing method. Both methodologies were efficient to determine the level of protodioscin in the pastures of Brachiaria spp. However, during the periods when the outbreaks occurred, the simulated grazing method was more reliable.(AU)

Objetivou-se avaliar dois métodos de coleta de Brachiaria spp. (Pastejo Simulado vs Coleta Total) para determinação das concentrações de protodioscina e efetuar o monitoramento da intoxicação em rebanhos sensíveis e resistentes à intoxicação por Brachiaria spp. Foram realizadas coletas de Brachiaria spp. através de duas metodologias. A primeira consistiu em fazer o lançamento de um quadrado metálico em 10 pontos aleatórios do piquete. A segunda foi realizada simulando com as mãos o comportamento de pastejo dos ovinos. As lâminas foliares obtidas pelas duas metodologias foram acondicionadas em estufa de ventilação forçada. O material seco e moído foi encaminhado para extração e quantificação da protodioscina por cromatografia líquida de alto desempenho (HPLC) de fase reversa. As coletas foram realizadas em três fases de vida dos cordeiros (cria, recria e terminação). Os cordeiros foram divididos em resistentes e sensíveis a intoxicação por Brachiaria spp. O critério para o ovino ser considerado sensível foi apresentar algum sinal clínico da intoxicação em alguma fase de sua vida. Não foram observadas diferenças significativas entre a média geral das duas coletas quando a avaliação foi feita no período total. Porém, foi observada diferença significativa no período de aparecimento dos casos. As concentrações de protodioscina neste período foram superiores pelo método do pastejo simulado. Ambas as metodologias mostraram-se eficientes para determinação da concentração da protodioscina nas pastagens de Brachiaria spp. No entanto, nos períodos em que ocorreram os surtos, o método do pastejo simulado foi mais fidedigno.(AU)

Comparison of two collection methods to determine protodioscin concentrations in Brachiaria spp. and to monitor Brachiaria spp. poisoning / Comparação entre dois métodos de coleta para determinar as concentrações de protodioscina em Brachiaria spp. e monitorar a intoxicação por Brachiaria spp

The objective of this study was to evaluate the methods of collecting Brachiaria spp. (Simulated Grazing vs. Total Collection) for the determination of protodioscin concentrations and to monitor the intoxication in sheep susceptible and resistant to poisoning by Brachiaria spp. The collection of Brachiaria spp. was done through two different methods. The first one consisted in throwing a metallic square at 10 random picket points. The second was performed simulating, with the hands, the grazing behavior of sheep. The leaf blades obtained by the two methods were conditioned in a forced ventilation oven. The extraction and quantification of protodioscin from the dry milled plant material was done by reverse-phase high-performance liquid chromatography (HPLC). The collections were carried out at three stages of the life of experimental lamb (suckling, rearing, and finishing). The lambs were divided into resistant and susceptible to intoxication by Brachiaria spp. The criterion for a lamb to be considered sensitive was to present some clinical signs at some stage of its life. No significant differences were observed between the general averages of the two collections when the evaluation was done in the whole period. However, a significant difference was found at the onset of the clinical signs. The concentrations of protodioscin in this period were higher in Brachiaria spp. collected by the simulating grazing method. Both methodologies were efficient to determine the level of protodioscin in the pastures of Brachiaria spp. However, during the periods when the outbreaks occurred, the simulated grazing method was more reliable.(AU)

Objetivou-se avaliar dois métodos de coleta de Brachiaria spp. (Pastejo Simulado vs Coleta Total) para determinação das concentrações de protodioscina e efetuar o monitoramento da intoxicação em rebanhos sensíveis e resistentes à intoxicação por Brachiaria spp. Foram realizadas coletas de Brachiaria spp. através de duas metodologias. A primeira consistiu em fazer o lançamento de um quadrado metálico em 10 pontos aleatórios do piquete. A segunda foi realizada simulando com as mãos o comportamento de pastejo dos ovinos. As lâminas foliares obtidas pelas duas metodologias foram acondicionadas em estufa de ventilação forçada. O material seco e moído foi encaminhado para extração e quantificação da protodioscina por cromatografia líquida de alto desempenho (HPLC) de fase reversa. As coletas foram realizadas em três fases de vida dos cordeiros (cria, recria e terminação). Os cordeiros foram divididos em resistentes e sensíveis a intoxicação por Brachiaria spp. O critério para o ovino ser considerado sensível foi apresentar algum sinal clínico da intoxicação em alguma fase de sua vida. Não foram observadas diferenças significativas entre a média geral das duas coletas quando a avaliação foi feita no período total. Porém, foi observada diferença significativa no período de aparecimento dos casos. As concentrações de protodioscina neste período foram superiores pelo método do pastejo simulado. Ambas as metodologias mostraram-se eficientes para determinação da concentração da protodioscina nas pastagens de Brachiaria spp. No entanto, nos períodos em que ocorreram os surtos, o método do pastejo simulado foi mais fidedigno.(AU)

Comparison of two collection methods to determine protodioscin concentrations in Brachiaria spp. and to monitor Brachiaria spp. Poisoning

ABSTRACT: The objective of this study was to evaluate the methods of collecting Brachiaria spp. (Simulated Grazing vs. Total Collection) for the determination of protodioscin concentrations and to monitor the intoxication in sheep susceptible and resistant to poisoning by Brachiariaspp. The collection of Brachiaria spp. was done through two different methods. The first one consisted in throwing a metallic square at 10 random picket points. The second was performed simulating, with the hands, the grazing behavior of sheep. The leaf blades obtained by the two methods were conditioned in a forced ventilation oven. The extraction and quantification of protodioscin from the dry milled plant material was done by reverse-phase high-performance liquid chromatography (HPLC). The collections were carried out at three stages of the life of experimental lamb (suckling, rearing, and finishing). The lambs were divided into resistant and susceptible to intoxication by Brachiaria spp. The criterion for a lamb to be considered sensitive was to present some clinical signs at some stage of its life. No significant differences were observed between the general averages of the two collections when the evaluation was done in the whole period. However, a significant difference was found at the onset of the clinical signs. The concentrations of protodioscin in this period were higher in Brachiaria spp. collected by the simulating grazing method. Both methodologies were efficient to determine the level of protodioscin in the pastures of Brachiaria spp. However, during the periods when the outbreaks occurred, the simulated grazing method was more reliable.

RESUMO: Objetivou-se avaliar dois métodos de coleta de Brachiariaspp. (Pastejo Simulado vs Coleta Total) para determinação das concentrações de protodioscina e efetuar o monitoramento da intoxicação em rebanhos sensíveis e resistentes à intoxicação por Brachiaria spp. Foram realizadas coletas de Brachiariaspp. através de duas metodologias. A primeira consistiu em fazer o lançamento de um quadrado metálico em 10 pontos aleatórios do piquete. A segunda foi realizada simulando com as mãos o comportamento de pastejo dos ovinos. As lâminas foliares obtidas pelas duas metodologias foram acondicionadas em estufa de ventilação forçada. O material seco e moído foi encaminhado para extração e quantificação da protodioscina por cromatografia líquida de alto desempenho (HPLC) de fase reversa. As coletas foram realizadas em três fases de vida dos cordeiros (cria, recria e terminação). Os cordeiros foram divididos em resistentes e sensíveis a intoxicação por Brachiaria spp. O critério para o ovino ser considerado sensível foi apresentar algum sinal clínico da intoxicação em alguma fase de sua vida. Não foram observadas diferenças significativas entre a média geral das duas coletas quando a avaliação foi feita no período total. Porém, foi observada diferença significativa no período de aparecimento dos casos. As concentrações de protodioscina neste período foram superiores pelo método do pastejo simulado. Ambas as metodologias mostraram-se eficientes para determinação da concentração da protodioscina nas pastagens de Brachiaria spp. No entanto, nos períodos em que ocorreram os surtos, o método do pastejo simulado foi mais fidedigno.

The effect of ensiling and haymaking on the concentrations of steroidal saponin in two Brachiaria grass species / O efeito da ensilagem e fenação sobre as concentrações de saponina esteroide em duas espécies de gramínea Brachiaria

Brachiaria (signalgrass) is now the most widely used tropical grass genus in Central and South America. However, Brachiaria spp. can cause hepatogenous photosensitization in livestock. Steroidal saponins, specifically protodioscin, present in Brachiaria spp. may be responsible for liver injury and subsequent photosensitization. The objective of this study was to determine the effect of ensiling Brachiaria decumbens and Brachiaria brizantha or making hay from Brachiaria decumbens on the concentrations of steroidal saponin in these grasses. Brachiaria grass had no detectable levels of the saponin protodioscin after 24 days of ensiling. In addition, in Brachiaria decumbens, the concentration of the protodioscin decreased 48% over the first three days after haymaking and then remained constant. These results suggest that livestock consuming Brachiaria either as silage or hay may have reduced risk of intoxication by protodioscin. .(AU)

Brachiaria atualmente é o gênero de gramínea tropical mais amplamente utilizado na América Central e do Sul. Entretanto, as espécies de Brachiaria podem causar fotossensibilização hepatógena em animais de produção. Saponinas esteroides, especificamente protodioscina, presentes em Brachiaria, podem ser responsáveis pelo dano hepático e consequentemente fotossensibilização. O objetivo deste estudo foi determinar o efeito da ensilagem de Brachiaria decumbens e Brachiaria brizantha e fenação de Brachiaria decumbens sobre a concentração de saponina esteroide. As amostras de Brachiaria ensiladas não tiveram concentrações detectáveis de saponina protodioscina depois de 24 dias de ensilagem. Assim como em Brachiaria decumbens, a concentração de protodioscina reduziu 48% nos três primeiros dias após a fenação e posteriormente manteve-se constante. Estes resultados sugerem que animais de produção, ao consumirem Brachiaria tanto como silagem ou feno, podem ter o risco de intoxicação por protodioscina reduzido.(AU)

GRAMÍNEAS DO GÊNERO BRACHIARIA PARA PRODUÇÃO DE FENO EM DIFERENTES INTERVALOS DE CORTE

No Brasil as gramíneas do gênero Brachiaria são predominantes nos sistemas de produção. O estudo foi realizado com o objetivo de avaliar a Brachiaria brizantha cultivar Marandu e BRS Paiaguás e Brachiaria ruziziensis cultivar Kennedy em diferentes idades de corte para produção de feno por meio de suas características morfogênicas, estruturais, morfológicas, composição quimica, digestibilidade in vitro, quantificação da protodioscina e produção acumulada de gás. Foram realizados três experimentos (artigo I com a cultivar Marandu, artigo II com a cultivar BRS Paiaguás e artigo III com a cultivar Kennedy). Os tratamentos experimentais foram constituídos pelas idades de corte: 21, 35, 49 e 63 dias com quatro repetições. O delineamento utilizado foi em blocos casualizados, foram utilizadas 16 parcelas de 5m x 10m (50 m2). Foram realizadas as mensurações do número de folhas verdes, comprimento da lâmina foliar, do colmo para avaliação das características morfogênicas em todos os canteiros experimentais. A partir dessas informações foram calculadas as variáveis: taxa de aparecimento de folha (TApF), taxa de alongamento de folha (TAlF), filocrono (FILO), duração de vida da folha (DVF), número de folhas vivas (NFV), taxa de senescência de folhas (TSeF) e comprimento final da folha (CFF). A determinação da composição quimica da forragem e do feno foi realizada após o corte em cada intervalo entre cortes, sendo analisados os teores de: matéria seca (MS), matéria orgânica (MO), proteína bruta (PB), fibra em detergente neutro (FDN), fibra em detergente ácido (FDA), lignina (LIG) e também foram realizadas análises de digestibilidade da matéria orgânica (DIVMO), produção de gás in vitro e teores de protodioscina. Na cultivar Marandu houve efeito linear e quadrático (P < 0.05) dos intervalos entre cortes sobre as características estruturais e morfológicas. Os intervalos entre cortes influenciam positivamente na composição química, digestibilidade e produção de gás da folha e colmo da matéria natural. O teor de protodioscina da folha aos 35 dias foi de 3,63 g kg-1 de MS. matéria seca= 802.48 e 796.48 g kg-1 de MS; proteína bruta=91.98 e 88.59 g kg-1 de MS; fibra em detergente neutro=731.90 e 790.60 g kg-1 de MS; digestibilidade in vitro da matéria orgânica=705.75 e 724.23 g kg-1 de MS e produção cumulativa de gás in vitro=11.98 e 10.48 mL de gás 100 mg-1 de MS. A concentração de protodioscina do feno reduziu quatro vezes o teor (3.93 e 3.73 g kg-1 da MS). Na cultivar BRS Paiaguás, verificou efeito linear e quadrático (P< 0.05) dos intervalos entre cortes sobre as características morfológicas e estruturais, composição química, digestibilidade e produção de gás da folha e colmo da matéria natural. O feno com intervalo de 21 e 35 dias resultaram em: matéria orgânica= 915.20 e 913.58 g kg-1 de MS; proteína bruta= 102.33 e 80.80 g kg-1 de MS; fibra em detergente neutro= 696.83 e 771.70 g kg-1 de MS; digestibilidade in vitro da matéria orgânica=769.83 e 715.03 g kg-1 de MS; produção de gás= 13.55 e 11.52 mL de gás 100 mg-1 de MS e a concentração de protodioscina de 3.42 e 44.33g kg-1 de MS. O intervalo de corte de 21 e 35 dias é a melhor época para a produção do feno da cv. BRS Paiaguás. Na cultivar Kennedy, houve efeito linear e quadrático (P< 0.05) do intervalo entre cortes sobre as características morfológicas e estruturais, composição química, digestibilidade e produção de gás da folha e colmo in natura. O feno com 21 dias resultou em maiores composição química (matéria seca e proteína bruta= 799.30 e 115.45 g kg-1 de MS), digestibilidade (digestibilidade in vitro da matéria orgânica=822.38 g kg-1 de MS), produção acumulada de gás in vitro (12.11 mL de gás 100 mg de MS) e menor concentração de protodioscina (3.27 g kg-1 de MS). O intervalo de corte de 21 dias é o adequado para produção do feno de cv. Kennedy

In Brazil the grasses of the genus Brachiaria are predominant in the production systems. O This study was carried out with the objective of evaluating Brachiaria brizantha cultivar Marandu and BRS Paiaguás and Brachiaria ruziziensis cultivar Kennedy at different ages of cut for production by their morphogenic, structural, morphological, chemistry, in vitro digestibility, protodioscin quantification and accumulated gas production. Three experiments were carried out (article I with cultivar Marandu, article II with the cultivar BRS Paiaguás and article III with the cultivar Kennedy). The experimental treatments were consisting of cutting ages: 21, 35, 49 and 63 days with four replications. The design was used in randomized blocks, 16 plots of 5m x 10m (50 m2) were used. Were measurements of the number of green leaves, length of leaf blade, to evaluate the morphogenic characteristics in all experimental beds. Starting The following variables were calculated: leaf appearance rate (TApF), rate of leaf elongation (TAlF), phyllochron (FILO), leaf life span (DVF), number of of live leaves (NFV), leaf senescence rate (TSeF) and leaf final length (CFF). The determination of the chemical composition of the forage and hay was performed after the cut in each interval between cuts, being analyzed the contents of: dry matter (DM), matter organic matter (OM), crude protein (PB), neutral detergent fiber (NDF), detergent fiber acid (FDA), lignin (LIG), and also digestibility analysis of matter (IVDMD), in vitro gas production and protodioscin levels. In the cultivar Marandu linear and quadratic effect (P <0.05) of the intervals between cuts on the characteristics structural and morphological. The intervals between cuts positively influence the composition chemical, digestibility and gas production of the leaf and stem of natural matter. The content of leaf protodioscin at 35 days was 3.63 g kg -1 MS. dry matter = 802.48 and 796.48 g kg-1 MS; crude protein = 91.98 and 88.59 g kg-1 of MS; neutral detergent fiber = 731.90 and 790.60 g kg-1 MS; in vitro digestibility of organic matter = 705.75 and 724.23 g kg -1 of DM and cumulative gas production in vitro = 11.98 and 10.48 mL of 100 mg-1 MS gas. THE concentration of hay decreased by four times the content (3.93 and 3.73 g kg -1 of DM). In the cultivar BRS Paiaguás, it verified a linear and quadratic effect (P <0.05) of the intervals between cuts on morphological and structural characteristics, chemical composition, digestibility and leaf gas production and natural material high. The hay with interval of 21 and 35 days resulted in: organic matter = 915.20 and 913.58 g kg-1 DM; crude protein = 102.33 and 80.80 g kg-1 MS; neutral detergent fiber = 696.83 and 771.70 g kg-1 DM; digestibility in vitro organic matter = 769.83 and 715.03 g kg-1 DM; gas production = 13.55 and 11.52 mL of 100 mg-1 of DM and the concentration of protodioscin of 3.42 and 44.33g kg-1 of DM. O cut interval of 21 and 35 days is the best time for the production of cv. BRS Paiaguás. In the Kennedy cultivar, there was a linear and quadratic effect (P <0.05) of the interval between cuts on the morphological and structural characteristics, chemical composition, digestibility and production of gas of the leaf and stem in natura. The 21-day hay resulted in higher chemical composition (dry matter and crude protein = 799.30 and 115.45 g kg -1 of DM), digestibility (digestibility in vitro organic matter = 822.38 g kg-1 of DM), accumulated gas production in vitro (12.11 mL gas 100 mg DM) and lower protodioscin concentration (3.27 g kg -1 DM). The 21-day cut-off interval is adequate for cv. Kennedy.

ESTIMATIVAS DE CONSUMO POR OVINOS MANEJADOS SOB DIFERENTES OFERTAS DE FOLHA EM PASTAGEM DE BRACHIARIA SPP

Objetivou-se estabelecer um período de coleta, entre 3 ou 5 dias, que consiga validar experimentos de consumo em pastejo de Brachiaria spp. (syn. Brachiaria spp.), que seja capaz de apresentar estimação correta do valor nutritivo da forrageira e os componentes das fezes através de pastejo simulado e coleta retal de fezes única, uma vez ao dia. Avaliar os indicadores internos: matéria seca indigestível; fibra em detergente neutro indigestível; fibra em detergente ácido indigestível; lignina em detergente ácido indigestível; e indicadores externos: óxido crômico e dióxido de titânio (TiO2). Ao realizar as avaliações com o uso do indicador externo TiO2 notou-se dificuldade na aplicação da metodologia, com isso propõe-se uma adaptação, afim de facilitar sua quantificação. Os ovinos são animais selecionadores e preferencialmente escolhem folhas ao pastejarem, baseado nisso foi realizada a determinação do consumo de matéria seca dos animais submetidos a quatro níveis de ofertas de folha 60, 75, 90 e 105 g/kg e dentro dessas ofertas avaliar a concentração de protodioscina, logo sua capacidade de intoxicação. Não houve diferença significativa entre os períodos de coleta avaliados, podendo ser utilizado apenas 3 dias para avaliação em experimentos a pasto. O indicador óxido crômico por ser o mais utilizado em experimentos desse caráter e não diferindo da coleta total de fezes, foi aplicado como referência e com isso os indicadores dióxido de titânio e lignina em detergente ácido indigestível, não diferiam estaticamente entre si, demonstrando serem aptos e acurados para estimação do consumo de matéria seca (CMS) em experimentos a pasto utilizando cordeiros. A concentração de protodioscina variou entre as ofertas apresentando valor médios de 2,23 a 5,29 g/kg, sendo importante ressaltar que durante este experimento, foram relatadas 2 mortes por fotossensibilização. O CMS, foi influenciado negativamente pela concentração de protodioscina, devido a rebrota estimulada pelo pastejo dos animais aumentando sua concentração na forrageira. A digestibilidade e a cinética da degradação in vitro demonstraram a baixa degradação da forrageira e com isso a necessidade de maior tempo de retenção de partículas no rúmen. No Brasil grande parte dos trabalhos avaliando a protodioscina são apenas relatos de casos, mostrando clinicamente o que acontece ao animal, porém poucos discutem a ação da protodioscina dentro do rúmen. No entanto nota-se que sua atuação está associada à qualidade da forrageira. Para que a protodioscina venha a intoxicar os animais, os microrganismos ruminais necessitam realizar a sua degradação e quanto maior o tempo de retenção da partícula no rúmen, maior será a possibilidade de ocorrer a injuria

The objective was to establish a collection period, between 3 or 5 days, that can validate experiments of grazing consumption of Brachiaria spp. (syn. Brachiaria spp.), which is able to present correct estimation of the nutritive value of the forage and the components of the feces through simulated grazing and single rectal collection of feces once a day. Evaluate internal markers: indigestible dry matter; indigestible neutral detergent fiber; indigestible acid detergent fiber; indigestible acid detergent lignin; and external markers: chromium oxide and titanium dioxide (TiO2). When carrying out the evaluations using the external TiO2 indicator, it was noted that the methodology was difficult to apply, so an adaptation is proposed, in order to facilitate its quantification. Sheep are selective animals and prefer to select leaves when grazing. Based on this, the dry matter intake of the animals submitted to four levels of leaf offerings 60, 75, 90 and 105 g / kg was carried out. of protodioscin, thus its intoxication capacity. There was no significant difference between the collection periods evaluated, and only 3 days could be used for evaluation in pasture experiments. The indicator of chromium oxide being the most used in experiments of this character and not differing from the total collection of feces, was applied as reference and with this the indicators titanium dioxide and lignin in indigestible acid detergent did not differ statically among them, proving to be fit and accuracy for dry matter consumption (CMS) estimation in grass experiments using lambs. The concentration of protodioscin varied between the offers presenting average values of 2.23 to 5.29 g / kg, being important to note that during this experiment, 2 deaths were reported by photosensitization. The CMS was negatively influenced by the concentration of protodioscin, due to regrowth stimulated by grazing of the animals increasing their concentration in the forage. The digestibility and the kinetics of in vitro degradation demonstrated the low degradation of the forage and with this the need for a longer retention time of particles in the rumen. In Brazil, most of the studies evaluating protodioscin are only case reports, showing clinically what happens to the animal, but few discuss the action of protodioscin within the rumen. However, it is noted that its performance is associated with forage quality. In order for protodioscin to intoxicate the animals, the ruminal microorganisms need to perform their degradation and the longer the retention time of the particle in the rumen, the greater the possibility of injury.

PADRONIZAÇÃO PARA COLHEITA E CONSERVAÇÃO DE AMOSTRAS DE BRAQUIÁRIA PARA QUANTIFICAÇÃO DE SAPONINA E TOXIDADE SUBCRÔNICA DA DIOSGENINA EM Cavia porcellus

O gênero Brachiaria possui importantes espécies de forrageiras utilizadas em países localizados em regiões tropicais. No entanto, esse gênero de gramíneas está associado à fotossensibilização e intoxicações em animais de produção. Deste modo, objetivou-se com este estudo estabelecer o padrão para colheita, processamento e conservação de amostras de Brachiaria brizantha para quantificação de protodioscina e contagem de esporos de Pithomyces chartarum e a avaliação da Cavia porcellus (cobaias) como modelo experimental na intoxicação por diosgenina. Para a avaliação da Brachiaria brizantha, amostras foram colhidas de oito pastagens as quais foram subdivididas em folhas jovens, folhas maduras, folhas velhas e planta inteira e submetidas a nove diferentes métodos de processamento. Após separação e tratamento das amostras foi realizada a quantificação de saponinas e a contagem de esporos. Observou-se que na maioria dos tratamentos as folhas jovens apresentaram quantidades maiores de protodioscina que as folhas velhas e a planta inteira. Os tratamentos que mantiveram as maiores quantidades de protodioscina foram temperatura ambiente, estufa e estufa com ventilação forçada. Nas amostras das pastagens não foram encontrados esporos do fungo. Desta forma, conclui-se que a concentração de protodioscina é maior nas folhas jovens; a secagem em temperatura ambiente, em estufa ou em estufa de ventilação forçada são os melhores métodos para preservação de protodioscina e o congelamento de plantas para a quantificação de protodioscina não é recomendado. Para a avaliação das cobaias como modelos experimentais na intoxicação por diosgenina foram utilizadas 14 cobaias, divididas em dois grupos, o grupo tratado (GT) e o grupo controle (GC). O GT recebeu 480 mg/kg de diosgenina diluída em óleo vegetal e o GC recebeu somente o óleo vegetal, ambos por 30 dias. Para avaliação do hemograma e análises bioquímicas foram colhidas amostras sanguíneas no dia 0 (M0) e no dia 30 (M30). Na bioquímica plasmática foram realizadas análises para ALT, AST, GGT, ALP, ureia, creatinina, glicose, colesterol, HDL, triglicerídeos, lactato, colinesterase e cálcio. A hematologia e a bioquímica não apresentaram alterações relacionadas à doença hepática causada por saponinas. Na histologia apenas um animal apresentou hiperplasia de ductos biliares, as outras alterações observadas foram de forma geral inespecíficas. Conclui-se que, na dose utilizada, a administração da diosgenina a cobaias não produz lesões hepáticas expressivas nem alterações hematológicas e bioquímicas relacionadas a hepatopatia.

The genus Brachiaria has provided important forage species to the countries located in tropical regions. However, this genus of grass is associated with photosensitization and poisoning in animal production. Thus, the aim of this study was to establish the standard for collection, processing, and conservation of Brachiaria brizantha for protodioscin quantification and spore count from Pithomyces chartarum and the evaluation of guinea pig (Cavia porcellus) as an experimental model of poisoning by diosgenin. For Brachiaria brizantha evaluation, samples were collected from eight pastures, which were subdivided into young leaves, mature leaves, old leaves, and whole plant. After that, the samples were submitted to nine different drying and conservation treatments. After separation and treatment of the samples, saponins were quantified and spores were counted. In most of treatments, the young leaves presented larger amounts of protodioscin than the old leaves and the whole plant. The treatments that maintained the highest amounts of protodioscin were room temperature, oven, and oven with forced air circulation. No fungal spores were found in the pasture samples. Thus, we concluded that the concentration of protodioscin varies with the maturation stage of the leaves; drying at room temperature, in an oven, or in an oven with forced air circulation are the best methods, and freezing plants for preservation of protodioscin is not recommended. In the guinea pigs evaluation, 14 guinea pigs were divided into two groups, the treatment group (TG) and the control group (CG). The TG received 480 mg/kg of diosgenin and the CG received only vegetable oil. Both groups received the treatment for 30 days. Blood samples were collected on day 0 (M0) and day 30 (M30) for blood cell count and biochemical analyzes. In clinical biochemistry, the analyzes were performed for alanine aminotransferase, aspartate aminotransferase, gamma glutamyl trasferase, alkaline phosphatase, urea, creatinine, glucose, cholesterol, HDL, triglycerides, lactate, cholinesterase, and calcium. Hematology and biochemistry did not present alterations, which could not be related to hepatic disease caused by saponins. In histology, only one animal had bile duct hyperplasia, the other alterations observed were generally nonspecific. Therefore, we concluded that the administration of 480 mg/kg of diosgenin to guinea pigs did not produce significant hepatic lesions or hematological and biochemical alterations related to liver disease.