Solar Tunnel Drying: Pretreatment on drying kinetic of plum tomatoes / Secagem de Túnel Solar: O efeito do pré-tratamento na secagem cinética de tomates de ameixa

Drying of thin layer tomato was studied using a solar tunnel dryer under the ecological conditions of Isparta, Turkey. During drying process, solar irradiation, drying air temperature, relative humidity, and air velocity were measured constantly in different parts of the dryer. Drying runs were performed using plum tomatoes, characterized by an oval shape, intense red color. The change of tomatoes mass was measured daily. The color measurements of dried products were determined at the beginning and end of experiment. In this study, the fresh tomato samples were sorted, graded, washed in water and then sliced into quarters and halves before pretreated. Sun drying behavior of half and quarter sliced tomatoes pretreated with 10% NaCl solution and non-pretreated was investigated. Results showed that the drying time for pretreated and non-pretreated samples was not significantly different. However, drying time and drying rates were affected by number of tomato slices (quarter and half). Drying characteristic curves were evaluated against thirteen mathematical models and the Midilli et al model was the best descriptive model for solar tunnel drying of thin layer tomato. Color analysis emphasized that if tomatoes are pretreated with 10% NaCl solution, they should be sliced in quarter for better quality.(AU)

A secagem do tomate de camada fina foi estudada usando um secador de túnel solar sob as condições ecológicas de Isparta, na Turquia. Durante o processo de secagem, a irradiação solar, a temperatura do ar de secagem, a umidade relativa e a velocidade do ar foram medidas constantemente em diferentes partes do secador. As operações de secagem foram realizadas com tomates ameixa, caracterizados por uma forma oval, cor vermelha intensa. A mudança de massa de tomates foi medida diariamente. As medidas de cor dos produtos secos foram determinadas no início e no final da experiência. Neste estudo, as amostras de tomate fresco foram classificadas, lavadas em água e depois cortadas em quartos e metades antes do pré-tratamento. O comportamento de secagem ao sol do tomate em fatias de meio e quarto pré-tratadas com solução de NaCl a 10% e sem pré-tratamento foi investigado. Os resultados mostraram que o tempo de secagem para amostras pré-tratadas e não pré-tratadas não foram significativamente diferentes. No entanto, o tempo de secagem e as taxas de secagem foram afetadas pelo número de fatias de tomate (trimestre e meio). As curvas características de secagem foram avaliadas contra treze modelos matemáticos, sendo que o modelo de Midilli et al foi o melhor modelo descritivo para secagem em túnel solar de tomate de camada fina. A análise de cores enfatizou que se os tomates forem pré-tratados com solução de NaCl a 10%, eles devem ser cortados em fatias para melhor qualidade.(AU)

Qualidade ambiental de um estuário no delta amazônico utilizando análises imunohistoquímicas e morfológicas de brânquias como biomarcadores / Environmental quality of an estuary in Amazon delta using immunohistochemical and morphological analyses of gill as biomarkers

Neste estudo foram utilizados biomarcadores histológicos, ultraestruturais e imunohistoquímicos em tecidos brânquiais de duas espécies de peixes, Plagioscion squamosissimus e Lithodoras dorsalis, para avaliar a situação ecológica em um estuário amazônico relacionando a saúde do peixe com a qualidade ambiental. O tecido branquial foi analisado qualitativamente e semiquantitativamente. Foram verificadas diferenças entre as espécies selecionadas e as áreas de estudo, no que se refere ao tipo e severidade das lesões no tecido branquial. Foi detectada uma variedade de alterações histopatológicas severas somente nos peixes capturados nas áreas B e C, tais como: Aneurisma, elevação epitelial e intensa hiperplasia. As análises de microscopia eletrônica e de imunohistoquímica confirmaram danos mais prejudiciais nas brânquias apenas nestas áreas de estudo. Enquanto que na área A poucos peixes apresentaram alterações leves nos tecidos e pouca marcação de apoptose. Estes resultados confirmam a necessidade de um efetivo controle dos dejetos de poluentes assim como um planejamento urbano eficaz nesta região, uma vez que esta área possui um complexo industrial importante próximo à área urbana.(AU)

In this study, histological, ultrastructural, and immunohistochemical observations of the gill tissue of two fish species (Plagioscion squamosissimus and Lithodoras dorsalis) were used as biomarkers to assess the ecological conditions of an estuary in the Amazon delta, by relating the health status of the fishes to environmental quality. The gill tissue was analyzed both qualitatively and semi-quantitatively. Marked differences in the type and severity of lesions were verified between species and among study sites. A variety of severe damages were confirmed histologically in specimens from the two impacted areas (B and C), including aneurysms, epithelial lifting, and intense hyperplasia. Electron microscopy and immunohistochemical analyses also revealed injuries in the gill tissue of specimens from these two areas. While, on area A only few specimens showed mild changes in gill tissues and rare marking of apoptosis. These results confirm the urgent need for the more effective control of the discharge of pollutants into the estuary as well as more effective urban planning, given the close proximity of a major industrial complex to residential areas.(AU)

Effect of ovarian tissue transportation in Amburana cearensis extract on the morphology and apoptosis of goat preantral follicles

The aim of the present study was to evaluate the effect of Amburana cearensis extract during caprine ovarian tissue transportation on the survival of preantral follicles in vitro. HPLC was used to determine the fingerprint chromatogram of the ethanolic extract. Five goat ovarian pairs were divided into fragments. One fragment was fixed for histology and TUNEL Analysis (fresh control). The other fragments were placed in MEM or A. cearensis extract (0.1; 0.2 or 0.4 mg/ml) and stored at 4oC for 6, 12 or 24 h. Preserved Fragments were also fixed for histology and TUNEL analysis. The presence of phenolic compounds (protocatechuic acid, epicatechin, p-coumaric acid, gallic acid and kaempferol) in the extract was confirmed using HPLC. Thepercentage of normal follicles preserved in 0.2 mg/ml A. cearensis for 6 h was similar to that observed in the fresh control. Moreover, the percentage of normal follicles was higher after preservation in 0.2 mg/ml A. cearensisFor 6 h than the other A. cearensis treatments and similar to that found in MEM. There were no differences in the percentage of apoptotic cells between fresh control and those preserved for 6 h in MEM or 0.2 mg/ml A. cearensis. In conclusion, both 0.2 mg/ml A. cearensis or MEM can be used for the preservation of goat preantral follicles for up to 6 h. The use of A. cearenses is recommended due to the higher cost of MEM.

Effect of ovarian tissue transportation in Amburana cearensis extract on the morphology and apoptosis of goat preantral follicles

The aim of the present study was to evaluate the effect of Amburana cearensis extract during caprine ovarian tissue transportation on the survival of preantral follicles in vitro. HPLC was used to determine the fingerprint chromatogram of the ethanolic extract. Five goat ovarian pairs were divided into fragments. One fragment was fixed for histology and TUNEL Analysis (fresh control). The other fragments were placed in MEM or A. cearensis extract (0.1; 0.2 or 0.4 mg/ml) and stored at 4oC for 6, 12 or 24 h. Preserved Fragments were also fixed for histology and TUNEL analysis. The presence of phenolic compounds (protocatechuic acid, epicatechin, p-coumaric acid, gallic acid and kaempferol) in the extract was confirmed using HPLC. Thepercentage of normal follicles preserved in 0.2 mg/ml A. cearensis for 6 h was similar to that observed in the fresh control. Moreover, the percentage of normal follicles was higher after preservation in 0.2 mg/ml A. cearensisFor 6 h than the other A. cearensis treatments and similar to that found in MEM. There were no differences in the percentage of apoptotic cells between fresh control and those preserved for 6 h in MEM or 0.2 mg/ml A. cearensis. In conclusion, both 0.2 mg/ml A. cearensis or MEM can be used for the preservation of goat preantral follicles for up to 6 h. The use of A. cearenses is recommended due to the higher cost of MEM.(AU)

Investigando a fragmentação não induzida e a susceptibilidade à fragmentação do DNA espermático: refinamento da avaliação espermática. Parte 2 / Investigating not induced fragmentation and susceptibility of sperm DNA: refinement of sperm evaluation. Second part

A integridade do DNA espermático está intimamente relacionada com a fertilidade. Técnicas queavaliam o DNA espermático possuem grande importância e potencial de serem aplicadas nas rotinas dasavaliações andrológicas. No entanto, são necessários maiores conhecimentos sobre as técnicas e seus princípiospara permitir que sejam empregadas apropriadamente de acordo com os objetivos e resultados esperados. Dessaforma, assim como abordado na Parte 1, nesta Parte 2 serão abordadas técnicas de avaliação do DNAespermático: TUNEL, laranja de acridina e Sperm Chromatin Structure Assay (SCSA). A técnica de TUNELfundamenta-se na adição de nucleotídeos modificados marcados com fluorescência às fitas fragmentadas. Atécnica avalia, portanto, diretamente a fragmentação de DNA da amostra. A sonda laranja de acridina é capaz dediferenciar, por meio de diferentes colorações, o DNA fragmentado do não fragmentado. Já a técnica de SCSAbaseia-se na imposição de um desafio ao espermatozoide; esta técnica avalia a susceptibilidade dosespermatozoides à fragmentação de DNA, sendo, portanto, uma avaliação indireta. A presente revisão permiteexpor a opinião dos autores sobre as diferentes técnicas e suas aplicações, mostrando o potencial emprego delasnos exames de rotina e nas pesquisas.(AU)

Sperm DNA integrity is directly related to male fertility. Techniques to assess sperm DNA are importantand have potential to be applied in routine evaluation of semen. However, the techniques and principles need tobe further studied to apply they correctly and to get relevant results. Thus, as discussed in Part 1, Part 2 willaddress evaluation techniques of sperm DNA: TUNEL, acridine orange and Sperm Chromatin Structure Assay(SCSA). TUNEL is based on addition of modified nucleotides labeled with fluorescence to fragmented tapesevaluating, therefore, directly, the DNA fragmentation of the sample. Acridine orange differentiates fragmentedDNA by different colors. On the other hand, SCSA are based on the imposition of a challenge to sperm. Thus,this technique assesses the susceptibility of sperm DNA fragmentation constituting indirect assessment. Thereview allows showing opinion of the authors about different techniques and their applications. Therefore,potential use of these techniques in routine exams and researches are addressed.(AU)

Investigando a fragmentação não induzida e a susceptibilidade à fragmentação do DNA espermático: refinamento da avaliação espermática. Parte 2 / Investigating not induced fragmentation and susceptibility of sperm DNA: refinement of sperm evaluation. Second part

A integridade do DNA espermático está intimamente relacionada com a fertilidade. Técnicas queavaliam o DNA espermático possuem grande importância e potencial de serem aplicadas nas rotinas dasavaliações andrológicas. No entanto, são necessários maiores conhecimentos sobre as técnicas e seus princípiospara permitir que sejam empregadas apropriadamente de acordo com os objetivos e resultados esperados. Dessaforma, assim como abordado na Parte 1, nesta Parte 2 serão abordadas técnicas de avaliação do DNAespermático: TUNEL, laranja de acridina e Sperm Chromatin Structure Assay (SCSA). A técnica de TUNELfundamenta-se na adição de nucleotídeos modificados marcados com fluorescência às fitas fragmentadas. Atécnica avalia, portanto, diretamente a fragmentação de DNA da amostra. A sonda laranja de acridina é capaz dediferenciar, por meio de diferentes colorações, o DNA fragmentado do não fragmentado. Já a técnica de SCSAbaseia-se na imposição de um desafio ao espermatozoide; esta técnica avalia a susceptibilidade dosespermatozoides à fragmentação de DNA, sendo, portanto, uma avaliação indireta. A presente revisão permiteexpor a opinião dos autores sobre as diferentes técnicas e suas aplicações, mostrando o potencial emprego delasnos exames de rotina e nas pesquisas.

Sperm DNA integrity is directly related to male fertility. Techniques to assess sperm DNA are importantand have potential to be applied in routine evaluation of semen. However, the techniques and principles need tobe further studied to apply they correctly and to get relevant results. Thus, as discussed in Part 1, Part 2 willaddress evaluation techniques of sperm DNA: TUNEL, acridine orange and Sperm Chromatin Structure Assay(SCSA). TUNEL is based on addition of modified nucleotides labeled with fluorescence to fragmented tapesevaluating, therefore, directly, the DNA fragmentation of the sample. Acridine orange differentiates fragmentedDNA by different colors. On the other hand, SCSA are based on the imposition of a challenge to sperm. Thus,this technique assesses the susceptibility of sperm DNA fragmentation constituting indirect assessment. Thereview allows showing opinion of the authors about different techniques and their applications. Therefore,potential use of these techniques in routine exams and researches are addressed.

Use of the male effect associated with different durations of mating season in goats in the semiarid of Pernambuco / Uso do efeito macho associado a diferentes durações de estação de monta em caprinos no semiárido pernambucano

Background: The goat rearing is practiced mainly in the Northeast region with semiarid climate, since climate conditionsand vegetation are extremely favorable to the species, but it has low productivity due to the low level of technology employed. Management alternatives aimed at maximizing productivity at low cost are essential tools for the reversal of thisframework. Aiming to focus the onset of estrus for females at low cost is common to use the male effect with the breedingseason, representing a practical, inexpensive and efficient methodology for the producer Thus, this study is to evaluate theeffect of different durations of mating season associated with the male effect on reproductive performance of multiparousAlpine goats during the dry and rainy seasons.Materials, Methods & Results: The survey was conducted in the municipality of Serra Talhada-PE from October 2011 toMay 2013. A total of 160 multiparous females aged between 22 and 74 months and four breeders aged between 24 and 38months were used. In the first step, we tested the mating season durations 25 (MS-25) and 45 days (MS-45). In the secondstep, the mating seasons were 25 (MS-25) and 15 days (MS-15) in different climate periods, each experimental groupconsisting of 20 females and one breeder that has been away from females for 15 days before starting the season in orderto stimulate the male effect and thus synchronizing the estrus. The lots were observed at 6:00 and 16:00 pm by qualifiedpersonnel to identify the mated females and after 45 days of the last mating, an ultrasound examination was performed todetect the matrices that had positive pregnancy, assessing the data by the Chi-square test at 5% significance. The estrusresults obtained during the first stage of...(AU)

Use of the male effect associated with different durations of mating season in goats in the semiarid of Pernambuco / Uso do efeito macho associado a diferentes durações de estação de monta em caprinos no semiárido pernambucano

Background: The goat rearing is practiced mainly in the Northeast region with semiarid climate, since climate conditionsand vegetation are extremely favorable to the species, but it has low productivity due to the low level of technology employed. Management alternatives aimed at maximizing productivity at low cost are essential tools for the reversal of thisframework. Aiming to focus the onset of estrus for females at low cost is common to use the male effect with the breedingseason, representing a practical, inexpensive and efficient methodology for the producer Thus, this study is to evaluate theeffect of different durations of mating season associated with the male effect on reproductive performance of multiparousAlpine goats during the dry and rainy seasons.Materials, Methods & Results: The survey was conducted in the municipality of Serra Talhada-PE from October 2011 toMay 2013. A total of 160 multiparous females aged between 22 and 74 months and four breeders aged between 24 and 38months were used. In the first step, we tested the mating season durations 25 (MS-25) and 45 days (MS-45). In the secondstep, the mating seasons were 25 (MS-25) and 15 days (MS-15) in different climate periods, each experimental groupconsisting of 20 females and one breeder that has been away from females for 15 days before starting the season in orderto stimulate the male effect and thus synchronizing the estrus. The lots were observed at 6:00 and 16:00 pm by qualifiedpersonnel to identify the mated females and after 45 days of the last mating, an ultrasound examination was performed todetect the matrices that had positive pregnancy, assessing the data by the Chi-square test at 5% significance. The estrusresults obtained during the first stage of...

GUIA DE PERFURAÇÃO TIBIO-FEMORAL NO TRATAMENTO DE RUPTURA DO LIGAMENTO CRUZADO CRANIAL (RLCCr) EM CÃES

O objetivo deste trabalho foi confeccionar um guia ajustável para perfuração tíbio-femoral em cadáveres de cães a partir de mensurações ex-vivo e impressão 3D de protótipos. Foram utilizados 43 cadáveres de cães independentes de sexo ou raça com articulações femorotibiopatelares macroscopicamente saudáveis, divididos em três grupos de massa corporal: G1: 10 a 20,9 kg; G2: 21 e 30,9 Kg; G3: 31 e 40 kg. Foram utilizadas as articulações femorotibiopatelares dos membros pélvicos direito e esquerdo. Com auxílio de um paquímetro analógico foram mensuradas as larguras dos côndilos femorais nos terços proximal médio e distal, a altura do côndilo, a extensão da superfície troclear e a extensão dos orifícios de perfuração no fêmur e na tíbia. Com auxílio de uma furadeira e broca específicas foram perfurados o fêmur e a tíbia concomitantemente com vistas à passagem pelas áreas de inserção do LCCr em ambos ossos. Com ajuda de um goniômetro foram mensurados os ângulos de flexão da articulação femorotibiopatelar (A), e o ângulo da broca (AE), no fêmur e na tíbia, em relação ao eixo do membro. Foi realizada uma fotografia da superfície medial do côndilo lateral do fêmur (prévio corte sagital) e da superfície articular da tíbia. Foi colocado sobre as fotografias um quadro 4x4 no caso do fêmur e 6x6 na tíbia para delimitar as áreas de inserção do LCCr e as respectivas perfurações. Os dados obtidos foram analisados por diferentes testes estatísticos. Para todas as análises foi considerado o nível de significância de 5%. As análises estatísticas foram realizadas por meio do software SAS 9.4. Observou-se de forma geral forte correlação entre as dimensões condilares e a extensão das perfurações com a massa corporal de cadáveres de cães. Não houve correlação entre os ângulos A e AE e a massa corporal. Houve correlação forte entre o acerto vs erro em relação a angulação de flexão femorotibiopatelar. A partir dos resultados desde estudo pode se concluir que o ângulo adequado de flexão da articulação FTP e o ângulo da broca em relação ao eixo femoral cranial são imprescindíveis para se obter uma perfuração femorotibial nas inserções do LCCr. A ausência de um fixador estático para manter a flexão FTP constante induz a falha na perfuração.

The objective of this work was to prepare an adjustable guide for tibio-femoral perforation in dogs' cadavers from ex-vivo measurements and 3D prototype printing. We used 43 cadaver´s dogs with sex or race no defined, with macroscopically normal femorotibiopatellar joints, divided into three groups of body weight: G1: 10 to 20.9 kg; G2: 21 and 30.9 kg; G3: 31 and 40 kg. The femorotibiopatellar joints of the right and left pelvic limbs were used. The width of the femoral condyles in the proximal and medial proximal thirds, the height of the condyle, the extension of the trochlear surface and the extension of the perforation holes in the femur and the tibia were measured using an analog caliper. With the aid of a specific drill and drill, the femur and the tibia were drilled concomitantly for passage through the LCCr insertion areas in both bones. With the help of a goniometer, the flexion angles of the femorotibiopatellar joint and the angle of the drill in the femur and the tibia were measured with respect to the axis of the limb. A photograph was taken of the lateral surface of the intercondylar incision of the lateral condyle of the femur (previous sagittal cut) and of the articular surface of the tibia. A 4x4 frame in the case of the femur and 6x6 in the tibia were placed on the photographs to delineate the areas of insertion of the LCCr and their respective perforation. The data obtained were analyzed by different statistical tests. For all analyzes, the level of significance considered was 5%. Statistical analyzes were performed using SAS 9.4 software. A strong correlation was observed between the condylar dimensions and the extent of perforations with body mass of cadavers of dogs. There was no correlation between the angles and the body mass. There was a strong correlation between the fit vs error in relation to the angle of femorotibiopatellar flexion. From the results from the study it can be concluded that the proper angle of flexion of the FTP joint and the angle with respect to the cranial femoral axis are essential to obtain a femorotibial perforation in the LCCr insertions. The absence of a static fixator aiming to maintain constant FTP bending induces failure in drilling.

CONSTRUÇÃO DE COMPOST BARN: TRADICIONAL X TÚNEL DE VENTO NUTRIÇAO E MANEJO NO PERÍODO DE TRANSIÇÃO

CALDATO, André, M.Sc., Universidade Federal de Viçosa, agosto de 2019. CONSTRUÇÃO DE COMPOST BARN: TRADICIONAL X TÚNEL DE VENTO; NUTRIÇÃO E MANEJO NO PERÍODO DE TRANSIÇÃO. Orientadora: Polyana Pizzi Rotta. Coorientador: Marcos Inácio Marcondes. Os confinamentos de vacas leiteiras vêm ganhando espaço no Brasil, com o intuito de alcançar maiores produtividades. Desse modo os dois sistemas mais comumente utilizados são o Free Stall e o Compost Barn. Nos EUA o Compost Barn ganhou espaço por ser uma alternativa de confinamento que traria maior conforto aos animais nele alojados, reduzindo problemas de casco e lesões de jarrete, que eram comuns do Free Stall. Hoje já existe literatura que indica os principais aspectos que devem ser respeitados em uma construção de Compost Barn. Estes envolvem principalmente o espaçamento de cama por animal (mínimo 8 m²), espaçamento de cocho por animal (mínimo 91 cm a cada 15 vacas) e espaçamento de cocho (mínimo 60 cm por animal). Vacas leiteiras muito produtivas tendem a produzir maior calor metabólico, por este fato estes se tornam mais susceptíveis ao estresse térmico, que irá impactar fortemente na produção, reprodução e saúde. Para atenuar o estresse térmico dos animais, existem hoje muitos sistemas de ventilação natural através de ventiladores e aspersores que são utilizados em Free Stall e Compost Barn. No entanto, em Free Stall existem também outros dois sistemas mais recentes de resfriamento que são os galpões de ventilação cruzada e túnel de vento. Desse modo o sistema foi adequado para o Compost Barn e em 2015 no Brasil foi montado o primeiro galpão de Compost Barn em túnel de vento, para maximizar o conforto animal, em épocas onde as temperaturas são elevadas. Embora recente os primeiros resultados de campo se mostram satisfatórios, sendo observados principalmente aumentos de produtividade e redução de custos com medicamentos. Juntamente a um adequado conforto térmico é preciso ter atenção quando ao manejo e nutrição dos animais lactantes. Portanto grande importância deve ser dada ao período de transição da vaca leiteira, que se define como as três últimas semanas de gestação e as três primeiras semanas de lactação. Parte do período seco da vaca leiteira pertence ao período de transição, este é um período de descanso entre uma lactação e outra onde há na glândula mamária um processo de renovação celular, sendo essencial para o sucesso da lactação seguinte. A duração do período seco deve ser de no mínimo 45 dias, quando se trata de animais de alta produção. A forma de secagem pode ser abrupta ou gradativa, pois o modo como é feita não apresentou grande influência em infecções posteriores bem como aumentos em CCS (contagem 4 de células somáticas). A realização de cultura bacteriana antes da secagem para definir o melhor tratamento e se há necessidade de utilizar antibióticos é tendência mundial para reduzir o uso dos mesmos. Durante o período de transição, o animal tem uma grande queda no consumo de matéria seca (CMS), associado a diversas alterações metabólicas e aumentos nos requisitos de energia e proteína nos últimos 60 dias de gestação. Ademais, no pós-parto imediato a exigência para a produção de leite aumenta consideravelmente. Por este fato o animal entra em um estado chamado de balanço energético negativo (BEN), onde há um aumento significativo de produção juntamente com um baixo CMS. O escore de condição corporal (ECC) tem grande influência em doenças que poderão surgir no período de transição, desse modo é preciso avaliar o ECC pelo menos em 4 fases da vida produtiva da vaca leiteira, que são na secagem, ao parto, no pico de lactação e no momento da inseminação. Este fator é importante, porque animais que secam com altos ECC tendem no pós-parto realizar maior mobilização de AGNE (ácidos graxos não esterificados) e consequentemente geram maiores concentrações de BHBO (betahidoxibutirato), esses dois fatores podem influenciar diretamente em atrasos a primeira inseminação. Outro fator ligado a perdas grande de condição corporal no pós-parto é a elevação dos níveis de leptina que atua no centro da saciedade reduzindo ainda mais o CMS, além de interferir no pico de LH da primeira ovulação. O BPN (balanço proteico negativo) também pode ocorrer no pós-parto para suprir as demandas de AA e glicose da glândula mamaria, para evitar que isso ocorra é necessário que as dietas pós-parto possuam maiores níveis de proteína metabolizáveis. Como consequência de várias desordens metabólicas, existem algumas doenças que são comuns nesta fase, que são a cetose clinica e subclínica, deslocamento de abomaso, hipocalacemia clinica e subclínica. Estas doenças podem ser evitadas com diversos manejos empregados no período de transição. Um deles são estratégias nutricionais voltadas para o período de transição, como dietas com baixo cálcio, dietas acidogênicas, uso de inonófos, precursores gliconeogênicos, niacina, lipídeos, metionina e colina. No entanto estas estratégias nutricionais devem ser combinadas como estratégias de manejo, de modo que complicações nesta fase sejam raras, tendo assim rebanhos mais saudáveis e produtivos.

CALDATO, André, M.Sc., Universidade Federal de Viçosa, agosto de 2019. COMPOST BARN CONSTRUCTION: TRADITIONAL X WIND TUNNEL; NUTRITION AND MANAGEMENT IN THE TRANSITION PERIOD. Adviser: Polyana Pizzi Rotta. Coadviser Marcos Inácio Marcondes. The confinement of dairy cows has been gaining ground in Brazil, aiming to achieve higher productivity. Thus the two most commonly used systems are Free Stall and Compost Barn. In the US Compost Barn has gained ground as a confinement alternative that would bring greater comfort to the animals housed there, reducing hoof problems and hock injuries that were common to Free Stall. Today there is already literature indicating the main aspects that must be respected in a Compost Barn construction. These mainly involve bed spacing per animal (minimum 8 m²), trough spacing per animal (minimum 91 cm per 15 cows) and trough spacing (minimum 60 cm per animal). Very productive dairy cows tend to produce higher metabolic heat, so they become more susceptible to heat stress, which will strongly impact production, reproduction and health. To alleviate the heat stress of animals, there are now many natural ventilation systems through fans and sprinklers that are used in Free Stall and Compost Barn. However, in Free Stall there are also two other newer cooling systems which are the cross ventilation sheds and wind tunnel. Thus the system was suitable for Compost Barn and in 2015 in Brazil the first Compost Barn shed was set up in a wind tunnel to maximize animal comfort in times of high temperatures. Although recent the first field results are satisfactory, mainly observed productivity increases and cost reduction with medicines. Along with adequate thermal comfort, attention must be paid to the management and nutrition of lactating animals. Therefore great importance must be given to the transition period of the dairy cow, which is defined as the last three weeks of gestation and the first three weeks of lactation. Part of the dry period of the dairy cow belongs to the transition period, this is a rest period between one lactation and another where there is a cell renewal process in the mammary gland, being essential for the success of the next lactation. The length of the dry period should be at least 45 days for high-production animals. The form of drying can be abrupt or gradual, as the way it is done did not have much influence on later infections as well as increases in somatic cell count (CCS). Bacterial culture prior to drying to define the best treatment and whether antibiotics are needed is a worldwide trend to reduce their use. During the transition period, the animal has a large drop in dry matter intake (CMS), associated with several metabolic changes and increases in energy and protein requirements in the last 60 days of gestation. Moreover, in the immediate postpartum period the requirement for milk production increases considerably. Because of this 6 fact the animal enters a state called negative energy balance (BEN), where there is a significant increase in production along with a low CMS. The body condition score (ECC) has a great influence on diseases that may arise during the transition period, so it is necessary to evaluate the ECC in at least 4 phases of the dairy cow's productive life, which are drying, calving, peak of lactation and at the time of insemination. This factor is important, because animals that dry with high ECC tend to postpartum mobilization of higher AGNE (non-esterified fatty acids) and consequently generate higher concentrations of BHBO (betahydroxybutyrate), these two factors can directly influence delays in the first insemination. . Another factor linked to major postpartum loss of body condition is the elevation of leptin levels that act at the center of satiety, further reducing CMS and interfering with the LH peak of first ovulation. BPN (negative protein balance) may also occur postpartum to meet the demands of AA and glucose in the mammary gland, to prevent this from occurring postpartum diets have higher levels of metabolizable protein. As a consequence of various metabolic disorders, there are some diseases that are common at this stage, which are clinical and subclinical ketosis, displacement of abomasum, clinical and subclinical hypocalacemia. These diseases can be prevented with various managements employed during the transition period. One of them are transition-period nutritional strategies such as low calcium diets, acidogenic diets, use of inonophones, gluconeogenic precursors, niacin, lipids, methionine and choline. However, these nutritional strategies should be combined as management strategies so that complications at this stage are rare, thus having healthier and more productive herds.

Evaluation of apoptosis as a mechanism of follicular cell atresia in the ovaries of cattle (bos indicus) and buffalo (bubalus bubalis) fetuses

The objective of this study was to investigate the occurrence of apoptosis in the ovaries of cattle and buffalo fetuses between 4 and 8 months old by the terminal deoxynucleotidyltransferase - mediated dUTP nick end labeling (TUNEL) assay . Histological analysis of the ovarian t issue showed that apoptosis occurred at all ages evaluated , presenting a similar pattern among different fetal stages in both species . Within species, secondary follicles displayed a higher (P 0.05) of apoptotic follicular cells among the three follicular classes compared . C omparing resul ts between species, secondary follicles had a higher (P < 0.05) mean number of TUN EL positive cells in bovine fetuses; however , this difference was proportional to the larger number of follicular cells present in secondary follicles in this species . In summary, the TUNEL method was effective for the detection of apoptosis in the support ing cells of ovarian follicles from bovine and buffalo fetuses with apoptosis occurring at similar rates in both species between 4 and 8 months of gestational age. Further studies are needed to better understand the dynamics of apoptosis as a regulator of follicular atresia in fetal ovaries from these species, as well as the potential involvement of the oocyte in this process.

Evaluation of apoptosis as a mechanism of follicular cell atresia in the ovaries of cattle (bos indicus) and buffalo (bubalus bubalis) fetuses

The objective of this study was to investigate the occurrence of apoptosis in the ovaries of cattle and buffalo fetuses between 4 and 8 months old by the terminal deoxynucleotidyltransferase - mediated dUTP nick end labeling (TUNEL) assay . Histological analysis of the ovarian t issue showed that apoptosis occurred at all ages evaluated , presenting a similar pattern among different fetal stages in both species . Within species, secondary follicles displayed a higher (P < 0.05) mean number of apoptotic follicular cells than primordi al or primary follicles in cattle . In buffalo there was a similar number (P > 0.05) of apoptotic follicular cells among the three follicular classes compared . C omparing resul ts between species, secondary follicles had a higher (P < 0.05) mean number of TUN EL positive cells in bovine fetuses; however , this difference was proportional to the larger number of follicular cells present in secondary follicles in this species . In summary, the TUNEL method was effective for the detection of apoptosis in the support ing cells of ovarian follicles from bovine and buffalo fetuses with apoptosis occurring at similar rates in both species between 4 and 8 months of gestational age. Further studies are needed to better understand the dynamics of apoptosis as a regulator of follicular atresia in fetal ovaries from these species, as well as the potential involvement of the oocyte in this process.(AU)

Influência das estações seca e chuvosa na capacidade de desenvolvimento de oócitos e produção in vitro de embriões da espécie caprina / Influence of dry and rainy seasons on oocyte maturation and in vitro embryo production in goats

Objetivou-se com este estudo determinar a influência das estações seca e chuvosa na maturação de oócitos e produção in vitro (PIV) de embriões na espécie caprina. Os ovários das cabras nas estações seca (outubro a março) e chuvosa (abril a setembro) foram colhidos em abatedouro e transportados ao Laboratório de Biotécnicas da Reprodução da UFRPE. Os complexos cumulus oophorus (CCOs) foram colhidos pela técnica de "slicing" dos folículos entre 2 a 6 mm de diâmetro e selecionados com base na classificação morfológica. Foram realizadas 12 repetições, nas quais os CCOs foram submetidos à maturação, fertilização e cultivo in vitro dos embriões. A média e desvio padrão da taxa de clivagem foi determinada no dia 3 (D-3) e dos embriões que se desenvolveram aos estádios de 8-16 células, mórula e blastocisto foi determinada nos dias 4 (D-4), 5 (D-5) e 8 (D-8) após a fecundação, respectivamente. A quantidade de blastômeros foi determinada com o corante DAPI e os blastômeros positivos para apoptose por meio do teste de TUNEL. A produção de embriões no D-3 e mórulas foram inferiores ao obtido no período chuvoso (P 0,05) quanto às fases de maturação, fertilização, cultivo no D-4 e blastocisto. Os embriões produzidos na estação seca apresentaram maior incidência de apoptose (P < 0,05). Nas condições descritas neste estudo, os resultados permitem concluir que as fases iniciais do desenvolvimento embrionário sofrem maior impacto negativo durante a estação seca em protocolos de PIV na espécie caprina.

This study aimed to determine the influence of dry and rainy seasons on oocyte maturation and in vitro production (IVP) of embryos in goats. The ovaries of does in dry (October to March) and rainy season (April-September) were collected at a slaughterhouse and transported to the Laboratory of Biotechnical Reproduction of UFRPE. The cumulus oophorus complexes (COCs) were collected by the technique of slicing of the follicles from 2 to 6 mm in diameter, and selected based on morphologic classification. We used 12 replicates, in which the COCs were submitted to maturation, fertilization and in vitro culture. The cleavage rate was determined on day 3 (D-3) and embryos that developed to 8-16 cells (D-4), morulae (D-5) and blastocyst (D-8) stages after fertilization. The number of blastomeres was assessed with DAPI staining, and the determination of apoptotic blastomeres was performed by TUNEL assay. In the dry season, D-3 embryos and morulae development was lower than that obtained in the rainy season (P0.05) were observed on oocyte maturation, fertilization, D-4 embryo yield and blastocyst development. Embryos produced during the dry season had a higher incidence of apoptosis on D- 3 and at the morulae stage (P<0.05). Under the conditions described in this study, the results suggest that the early stages of embryonic development suffer greater negative impact during the dry season in IVP protocols in goats.

Evaluation of goat oocytes subjected to heat stress induced during maturation in vitro / Avaliação de oócitos caprinos submetidos à estresse calórico induzido durante a maturação in vitro

Background: The low productivity of Northeast goat herds has been circumvented by the importation of exotic species; however, caution is needed due to the susceptibility of these breeds to the high temperatures found in this region. It is now known that the oocyte and the embryo are the primary targets of the deleterious effects induced by heat stress, causing cellular damage that triggers the cascade of apoptosis. Therefore, the purpose of this study was to evaluate the effect of thermal heat stress during in vitro maturation of oocytes and its effects on embryo production in goats. Materials, Methods & Results: The ovaries were collected in a slaughterhouse and transported to the Laboratory of Biotechnical Reproduction of UFRPE. The cumulus oophorus complexes (COCs) were collected by the technique of slicing the follicles from 2 to 6 mm in diameter, selected based on morphology and placed in a basic medium for maturation. In 10 replications, the COCs were submitted to the thermal heat stress at 41C for 0 (thermoneutrality at 39C), 3, 6, 12, 18, and 24 h of maturation in vitro. The data was evaluated in maturation, fertilization, cleavage (D-3), stage of 8-16 cells (D- 4), morula (D-5), and blastocyst (D-8) after fertilization and blastocysts positive for apoptosis through the TUNEL test. For statistics, the results were expressed as mean and standard deviation. Also con

O rebanho caprino no país se concentra principalmente na região Nordeste com 9,3 milhões de cabeças, destacando-se os estados da Bahia (29,2%) e Pernambuco (20,5%). Apesar de deter praticamente todo o rebanho caprino, o Nordeste necessita de pesquisas e tecnologias para minimizar a relação custo/benefício do sistema de produção, estimulando o desenvolvimento e criando novas possibilidades de agronegócio. A baixa produtividade dos rebanhos locais tem sido contornada através da importação de raças exóticas para o Semiárido nordestino, porém, é preciso cautela devido à susceptibilidade destas raças às temperaturas elevadas encontrada nesta região. [...]

Avaliação de oócitos caprinos submetidos à estresse calórico induzido durante a maturação in vitro / Evaluation of Goat Oocytes Subjected to Heat Stress Induced During Maturation In Vitro

Background: The low productivity of Northeast goat herds has been circumvented by the importation of exotic species; however, caution is needed due to the susceptibility of these breeds to the high temperatures found in this region. It is now known that the oocyte and the embryo are the primary targets of the deleterious effects induced by heat stress, causing cellular damage that triggers the cascade of apoptosis. Therefore, the purpose of this study was to evaluate the effect of thermal heat stress during in vitro maturation of oocytes and its effects on embryo production in goats. Materials, Methods & Results: The ovaries were collected in a slaughterhouse and transported to the Laboratory of Biotechnical Reproduction of UFRPE. The cumulus oophorus complexes (COCs) were collected by the technique of slicing the follicles from 2 to 6 mm in diameter, selected based on morphology and placed in a basic medium for maturation. In 10 replications, the COCs were submitted to the thermal heat stress at 41°C for 0 (thermoneutrality at 39°C), 3, 6, 12, 18, and 24 h of maturation in vitro. The data was evaluated in maturation, fertilization, cleavage (D-3), stage of 8-16 cells (D4), morula (D-5), and blastocyst (D-8) after fertilization and blastocysts positive for apoptosis through the TUNEL test. For statistics, the results were expressed as mean and standard deviation. Also considering the measurements addressed in percentages, a comparison of variances was carried out, F-test for variances to the level of signifi cance 5% (P < 0.05). Then, a t-test to compare averages was conducted, to the significance level of 5%, for equivalent variances or distinct variances, according to what was observed in the F-test for variances. A signifi cant difference (P < 0.05) was observed during all time periods studied for heat stress on maturation, fertilization, D-3, D-4, and D-5. On D-8 no significant difference (P > 0.05) was observed between the periods of 3 vs 6 and 18 vs 24 h, and in the blastocysts positive by the TUNEL test for the periods of 0 vs 3, 3 vs 6, 12 vs 18, and 18 vs 24 h of heat stress. Discussion: When applying a thermal shock that produces damage to the oocyte maturation in vitro, the characteristic membrane, chromatin configuration, and meiotic spindles are changed, and thus, the developmental potential of oocytes after fertilization is compromised. It was observed in this study that there was a gradual reduction in the number of oocytes as the time of exposure to heat shock increased, reflecting directly on each stage of IVP embryos. These stages are most vulnerable during maturation in vivo (ovulation), fertilization, within two days after fertilization, and in the first division of cleavage, as evidenced in this study in vitro after heat stress, reducing the number of blastocysts. This suggests that apoptosis can be induced in pre-implantation of embryos exposed to maternal hyperthermia. Moreover, the degree of apoptosis experienced by IVP embryos generally reflects the severity of thermal shock. In this study, the percentage of cells that were TUNEL positive increased with the prolongation of thermal shock. Induction of apoptosis was time dependent and the number of apoptotic cells increased proportionally after 6, 12, 18, and 24 h of exposure. Under the conditions observed in this study, the results indicate that the time in which the oocyte is exposed to heat stress during maturation in vitro is of great importance for embryonic development and their level of apoptotic cells.

Influência das estações seca e chuvosa na capacidade de desenvolvimento de oócitos e produção in vitro de embriões da espécie caprina / Influence of dry and rainy seasons on oocyte maturation and in vitro embryo production in goats

Objetivou-se com este estudo determinar a influência das estações seca e chuvosa na maturação de oócitos e produção in vitro (PIV) de embriões na espécie caprina. Os ovários das cabras nas estações seca (outubro a março) e chuvosa (abril a setembro) foram colhidos em abatedouro e transportados ao Laboratório de Biotécnicas da Reprodução da UFRPE. Os complexos cumulus oophorus (CCOs) foram colhidos pela técnica de "slicing" dos folículos entre 2 a 6 mm de diâmetro e selecionados com base na classificação morfológica. Foram realizadas 12 repetições, nas quais os CCOs foram submetidos à maturação, fertilização e cultivo in vitro dos embriões. A média e desvio padrão da taxa de clivagem foi determinada no dia 3 (D-3) e dos embriões que se desenvolveram aos estádios de 8-16 células, mórula e blastocisto foi determinada nos dias 4 (D-4), 5 (D-5) e 8 (D-8) após a fecundação, respectivamente. A quantidade de blastômeros foi determinada com o corante DAPI e os blastômeros positivos para apoptose por meio do teste de TUNEL. A produção de embriões no D-3 e mórulas foram inferiores ao obtido no período chuvoso (P < 0,05). Não apresentaram diferenças (P > 0,05) quanto às fases de maturação, fertilização, cultivo no D-4 e blastocisto. Os embriões produzidos na estação seca apresentaram maior incidência de apoptose (P < 0,05). Nas condições descritas neste estudo, os resultados permitem concluir que as fases iniciais do desenvolvimento embrionário sofrem maior impacto negativo durante a estação seca em protocolos de PIV na espécie caprina.(AU)

This study aimed to determine the influence of dry and rainy seasons on oocyte maturation and in vitro production (IVP) of embryos in goats. The ovaries of does in dry (October to March) and rainy season (April-September) were collected at a slaughterhouse and transported to the Laboratory of Biotechnical Reproduction of UFRPE. The cumulus oophorus complexes (COCs) were collected by the technique of slicing of the follicles from 2 to 6 mm in diameter, and selected based on morphologic classification. We used 12 replicates, in which the COCs were submitted to maturation, fertilization and in vitro culture. The cleavage rate was determined on day 3 (D-3) and embryos that developed to 8-16 cells (D-4), morulae (D-5) and blastocyst (D-8) stages after fertilization. The number of blastomeres was assessed with DAPI staining, and the determination of apoptotic blastomeres was performed by TUNEL assay. In the dry season, D-3 embryos and morulae development was lower than that obtained in the rainy season (P<0.05). However, no differences (P>0.05) were observed on oocyte maturation, fertilization, D-4 embryo yield and blastocyst development. Embryos produced during the dry season had a higher incidence of apoptosis on D- 3 and at the morulae stage (P<0.05). Under the conditions described in this study, the results suggest that the early stages of embryonic development suffer greater negative impact during the dry season in IVP protocols in goats.(AU)

Apoptose na infecção experimental de cães domésticos com Ehrlichia canis

Some dogs infected with Ehrlichia canis become asymptomatic while others develop an acute illness followed by quick death. Apoptosis may be an important mechanism for elimination of intracellular pathogens. Also, Ehrlichia sp. and Anaplasma sp. can modulate apoptosis to extend their survival. To evaluate the role of apoptosis in canine ehrlichiosis, 7 dogs were assigned into 2 groups, one with 4 animals inoculated intravenously with blood infected with Ehrlichia canis (Jaboticabal isolate) and a control with 3 dogs, inoculated with sterile PBS. Blood samples were collected weekly and 35 days post-inoculation to confirm the infection by nPCR and immunofluorescence. Thirty-six days after inoculation the animals were euthanized and samples from spleen, lymph nodes, kidney and liver were collected to carry out the TUNEL technique and immunohistochemistry (Bcl-2, Bax). Inoculated animals became positive for E. canis by nPCR already in the second week and by immunofluorescence in the third week after inoculation. The control group showed negative for E. canis in all tests. The TUNEL reaction showed a higher incidence of apoptosis in the inoculated group, with stronger labeling in the spleen and lymph nodes. The results of immunohistochemistry for Bcl-2 and Bax suggest that the intrinsic pathway of apoptosis is not important in the analyzed organs.

A Erliquiose canina é uma zoonose causada pela Ehrlichia canis, bactéria Gram negativa de distribuição mundial. Alguns cães com erliquiose se tornam portadores assintomáticos enquanto outros desenvolvem uma doença aguda com morte rápida. A apoptose pode ser importante na eliminação de patógenos intracelulares, podendo, nas infecções por Ehrlichia sp. e Anaplasma sp., ocorrer modulação da apoptose celular para prolongar a sobrevivência desses organismos. Para avaliação do papel da apoptose na erliquiose canina, sete cães foram distribuídos em dois grupos. No Grupo inoculado, realizou-se a infecção por via intravenosa com sangue infectado com E. canis (isolado Jaboticabal), sendo realizada a inoculação com PBS estéril nos animais pertencentes ao Grupo Controle. Semanalmente e até 35 dias pós-inoculação, amostras de sangue foram coletadas e submetidas a n-PCR e reação de imunofluorescência (RIFI) para confirmação da infecção. No 36° dia pós-inoculação, os animais foram eutanasiados, sendo as amostras de baço, linfonodo, rim e fígado coletadas e processadas para as técnicas de TUNEL e imunohistoquímica (Bcl-2, Bax). Verificou-se pela n-PCR que os animais inoculados se tornaram positivos para E. canis a partir da segunda semana. Pela RIFI, verificou-se animais com sorologia positiva a partir da terceira semana pós-inoculação. No grupo controle, todos os testes realizados foram negativos para E. canis. Apesar da reação de TUNEL mostrar maior incidência de apoptose no Grupo Inoculado, sendo o baço e os linfonodos os órgãos que apresentaram maior marcação, os resultados da imunohistoquímica para Bcl-2 e Bax indicam que a via intrínseca de apoptose não é importante nos órgãos analisados.

Apoptosis in experimental infection with Ehrlichia canis in domestic dogs / Apoptose na infecção experimental de cães domésticos com Ehrlichia canis

Some dogs infected with Ehrlichia canis become asymptomatic while others develop an acute illness followed by quick death. Apoptosis may be an important mechanism for elimination of intracellular pathogens. Also, Ehrlichia sp. and Anaplasma sp. can modulate apoptosis to extend their survival. To evaluate the role of apoptosis in canine ehrlichiosis, 7 dogs were assigned into 2 groups, one with 4 animals inoculated intravenously with blood infected with Ehrlichia canis (Jaboticabal isolate) and a control with 3 dogs, inoculated with sterile PBS. Blood samples were collected weekly and 35 days post-inoculation to confirm the infection by nPCR and immunofluorescence. Thirty-six days after inoculation the animals were euthanized and samples from spleen, lymph nodes, kidney and liver were collected to carry out the TUNEL technique and immunohistochemistry (Bcl-2, Bax). Inoculated animals became positive for E. canis by nPCR already in the second week and by immunofluorescence in the third week after inoculation. The control group showed negative for E. canis in all tests. The TUNEL reaction showed a higher incidence of apoptosis in the inoculated group, with stronger labeling in the spleen and lymph nodes. The results of immunohistochemistry for Bcl-2 and Bax suggest that the intrinsic pathway of apoptosis is not important in the analyzed organs.

A Erliquiose canina é uma zoonose causada pela Ehrlichia canis, bactéria Gram negativa de distribuição mundial. Alguns cães com erliquiose se tornam portadores assintomáticos enquanto outros desenvolvem uma doença aguda com morte rápida. A apoptose pode ser importante na eliminação de patógenos intracelulares, podendo, nas infecções por Ehrlichia sp. e Anaplasma sp., ocorrer modulação da apoptose celular para prolongar a sobrevivência desses organismos. Para avaliação do papel da apoptose na erliquiose canina, sete cães foram distribuídos em dois grupos. No Grupo inoculado, realizou-se a infecção por via intravenosa com sangue infectado com E. canis (isolado Jaboticabal), sendo realizada a inoculação com PBS estéril nos animais pertencentes ao Grupo Controle. Semanalmente e até 35 dias pós-inoculação, amostras de sangue foram coletadas e submetidas a n-PCR e reação de imunofluorescência (RIFI) para confirmação da infecção. No 36 dia pós-inoculação, os animais foram eutanasiados, sendo as amostras de baço, linfonodo, rim e fígado coletadas e processadas para as técnicas de TUNEL e imunohistoquímica (Bcl-2, Bax). Verificou-se pela n-PCR que os animais inoculados se tornaram positivos para E. canis a partir da segunda semana. Pela RIFI, verificou-se animais com sorologia positiva a partir da terceira semana pós-inoculação. No grupo controle, todos os testes realizados foram negat

Apoptose na infecção experimental de cães domésticos com Ehrlichia canis

Some dogs infected with Ehrlichia canis become asymptomatic while others develop an acute illness followed by quick death. Apoptosis may be an important mechanism for elimination of intracellular pathogens. Also, Ehrlichia sp. and Anaplasma sp. can modulate apoptosis to extend their survival. To evaluate the role of apoptosis in canine ehrlichiosis, 7 dogs were assigned into 2 groups, one with 4 animals inoculated intravenously with blood infected with Ehrlichia canis (Jaboticabal isolate) and a control with 3 dogs, inoculated with sterile PBS. Blood samples were collected weekly and 35 days post-inoculation to confirm the infection by nPCR and immunofluorescence. Thirty-six days after inoculation the animals were euthanized and samples from spleen, lymph nodes, kidney and liver were collected to carry out the TUNEL technique and immunohistochemistry (Bcl-2, Bax). Inoculated animals became positive for E. canis by nPCR already in the second week and by immunofluorescence in the third week after inoculation. The control group showed negative for E. canis in all tests. The TUNEL reaction showed a higher incidence of apoptosis in the inoculated group, with stronger labeling in the spleen and lymph nodes. The results of immunohistochemistry for Bcl-2 and Bax suggest that the intrinsic pathway of apoptosis is not important in the analyzed organs.

A Erliquiose canina é uma zoonose causada pela Ehrlichia canis, bactéria Gram negativa de distribuição mundial. Alguns cães com erliquiose se tornam portadores assintomáticos enquanto outros desenvolvem uma doença aguda com morte rápida. A apoptose pode ser importante na eliminação de patógenos intracelulares, podendo, nas infecções por Ehrlichia sp. e Anaplasma sp., ocorrer modulação da apoptose celular para prolongar a sobrevivência desses organismos. Para avaliação do papel da apoptose na erliquiose canina, sete cães foram distribuídos em dois grupos. No Grupo inoculado, realizou-se a infecção por via intravenosa com sangue infectado com E. canis (isolado Jaboticabal), sendo realizada a inoculação com PBS estéril nos animais pertencentes ao Grupo Controle. Semanalmente e até 35 dias pós-inoculação, amostras de sangue foram coletadas e submetidas a n-PCR e reação de imunofluorescência (RIFI) para confirmação da infecção. No 36° dia pós-inoculação, os animais foram eutanasiados, sendo as amostras de baço, linfonodo, rim e fígado coletadas e processadas para as técnicas de TUNEL e imunohistoquímica (Bcl-2, Bax). Verificou-se pela n-PCR que os animais inoculados se tornaram positivos para E. canis a partir da segunda semana. Pela RIFI, verificou-se animais com sorologia positiva a partir da terceira semana pós-inoculação. No grupo controle, todos os testes realizados foram negativos para E. canis. Apesar da reação de TUNEL mostrar maior incidência de apoptose no Grupo Inoculado, sendo o baço e os linfonodos os órgãos que apresentaram maior marcação, os resultados da imunohistoquímica para Bcl-2 e Bax indicam que a via intrínseca de apoptose não é importante nos órgãos analisados.

In vitro nuclear maturation and cell death by apoptosis in goats oocytes in rainy and dry periods / Maturação nuclear in vitro e morte celular por apoptose em oócitos de caprinos nos períodos seco e chuvoso

This study aimed to determine the in vitro nuclear maturation and cell death by apoptosis in goat oocytes. The ovaries of goats were collected during the dry (October-March) and rainy (April-September) seasons in slaughterhouses and transported to the Laboratory of Reproductive Biotechniques of UFRPE. Twelve repetitions were performed and cumulus oophorus were collected from follicles of 2-6 mm diameter using the technique of "slicing" and selected based on morphology. The experiment contained two groups: Group-1 (not matured), evaluated immediately after collection, and Group-2 (matured in vitro), assessed after 24 hours of maturation in a CO2 incubator, in which 25 oocytes per drop were placed in alkaline maturation (MBM). After collecting the oocytes from G-1 and G-2, the quality was determined by testing the enzyme activity of caspases and DNA fragmentation (TUNEL), using PhiPhiLux-G1D2 reagent, and in group G-2 the quality was only determined after nuclear maturation. During nuclear maturation stages, germinal vesicle, germinal vesicle breakdown and metaphase I and II were evaluated and no significant differences were found (P> 0.05). There was also no significant difference (P> 0.05) in enzymes activity of caspase and DNA fragmentation of oocytes matured and not matured in vitro. Based on the data obtained, it was concluded that rainy and dry seasons have no effect

Este estudo teve como objetivo determinar a maturação nuclear in vitro e a morte celular por apoptose em oócitos caprinos. Os ovários de cabras foram coletados nos períodos seco (outubro a março) e chuvoso (abril a setembro), em abatedouros, e transportados ao Laboratório de Biotécnicas da Reprodução da UFRPE. Foram realizadas 12 repetições e os complexos cumulus oophorus foram colhidos de folículos entre 2 a 6 mm de diâmetro pela técnica de slicing e selecionados com base na morfologia. O experimento continha dois grupos: Grupo-1 (não maturados), avaliados logo após a colheita, e Grupo-2 (maturados in vitro), avaliados após a maturação de 24 horas em incubadora de CO2, na qual 25 oócitos foram colocados por gota em meio básico de maturação (MBM). Após a coleta dos oócitos do G-1 e G-2, foi determinada a qualidade, por meio dos testes de atividade das enzimas caspases e o de fragmentação de DNA (TUNEL), com reagente PhiPhiLux-G1D2, sendo que no grupo G-2 a qualidade só foi determinada após maturação nuclear. Avaliou-se durante os estádios de maturação nuclear as fases de vesícula germinativa, rompimento da vesícula germinativa, metáfase I e II, não havendo diferença significativa (P > 0,05). Também não foi encontrada diferença significativa (P > 0,05) na atividade das enzimas caspases e na fragmentação do DNA dos oócitos não maturados e maturados in vitro. Com base nos