Collecting information on estrus in cattle using the internet of things / Recolha de informações sobre o cio em bovinos utilizando a internet of things

Monitoring the movements of ruminant animals is one of the most challenging tasks. In animals that act according to their habits, it is difficult to label such movements and transfer them to farmers. Monitoring and recording the movement and behavior of animals on a farm is an adopted method for successfully determining the duration of the estrus cycle in ruminant animals. The Internet is a technology that offers remarkable solutions for such applications. The aim of this study is to determine the hourly step counts and to find the estrus period in the most accurate way with a circuit design applied to the ankles of animals using an IoT-supported microcontroller. The data is transferred to the web environment wirelessly and monitored via wi-fi communication signals. This wireless wearable and network equipment determines the step count and monitors the animal's abnormal body temperature. An IoT-supported microcontroller provides wireless communication, high-speed data transmission, and low power consumption. Insemination was ensured by testing different animals on the application farm. The data is monitored in real-time, and the system gives an alert. Low cost, high reliability, and being able to be watched over the internet are the advantages of the system. This study helped develop new techniques and provided a low-cost proposition for testing wearable technologies on animals.

A monitorização dos movimentos dos animais ruminantes é uma das tarefas mais difíceis. Em animais que agem de acordo com os seus hábitos, é difícil rotular esses movimentos e transferi-los para os agricultores. A monitorização e o registo dos movimentos e do comportamento dos animais numa exploração é um método adoptado para determinar com êxito a duração do ciclo de cio em animais ruminantes. A Internet é uma tecnologia que oferece soluções notáveis para tais aplicações. O objectivo deste estudo é determinar as contagens horárias de passos e encontrar o período de cio da forma mais precisa possível com um design de circuito aplicado aos tornozelos dos animais utilizando um microcontrolador suportado pela IoT. Os dados são transferidos para o ambiente Web sem fios e monitorizados através de sinais de comunicação wi-fi. Este equipamento vestível e de rede sem fios determina a contagem de passos e monitoriza a temperatura corporal anormal do animal. Um microcontrolador suportado pela IoT fornece comunicação sem fios, transmissão de dados a alta velocidade e baixo consumo de energia. A inseminação foi assegurada através de testes com diferentes animais na quinta de aplicação. Os dados são monitorizados em tempo real e o sistema emite um alerta. O baixo custo, a elevada fiabilidade e a possibilidade de ser observado através da Internet são as vantagens do sistema. Este estudo ajudou a desenvolver novas técnicas e forneceu uma proposta de baixo custo para testar tecnologias vestíveis em animais.

Extracellular vesicles in infectious diseases caused by protozoan parasites in buffaloes

Extracellular vesicles (EVs) are small membrane-bound vesicles of growing interest in vetetinary parasitology. The aim of the present report was to provide the first isolation, quantification and protein characterization of EVs from buffalo (Bubalus bubalis) sera infected with Theileria spp. Methods: Infected animals were identified through optical microscopy and PCR. EVs were isolated from buffalo sera by size-exclusion chromatography and characterized using western blotting analysis, nanoparticle tracking analysis and transmission electron microscopy. Subsequently, the proteins from isolated vesicles were characterized by mass spectrometry. Results: EVs from buffalo sera have shown sizes in the 124-140 nm range and 306 proteins were characterized. The protein-protein interaction analysis has evidenced biological processes and molecular function associated with signal transduction, binding, regulation of metabolic processes, transport, catalytic activity and response to acute stress. Five proteins have been shown to be differentially expressed between the control group and that infected with Theileria spp., all acting in the oxidative stress pathway. Conclusions: EVs from buffaloes infected with Theileria spp. were successfully isolated and characterized. This is an advance in the knowledge of host-parasite relationship that contributes to the understanding of host immune response and theileriosis evasion mechanisms. These findings may pave the way for searching new EVs candidate-markers for a better production of safe biological products derived from buffaloes.(AU)

Extracellular vesicles in infectious diseases caused by protozoan parasites in buffaloes

Background: Extracellular vesicles (EVs) are small membrane-bound vesicles of growing interest in vetetinary parasitology. The aim of the present report was to provide the first isolation, quantification and protein characterization of EVs from buffalo (Bubalus bubalis) sera infected with Theileria spp. Methods: Infected animals were identified through optical microscopy and PCR. EVs were isolated from buffalo sera by size-exclusion chromatography and characterized using western blotting analysis, nanoparticle tracking analysis and transmission electron microscopy. Subsequently, the proteins from isolated vesicles were characterized by mass spectrometry. Results: EVs from buffalo sera have shown sizes in the 124-140 nm range and 306 proteins were characterized. The protein-protein interaction analysis has evidenced biological processes and molecular function associated with signal transduction, binding, regulation of metabolic processes, transport, catalytic activity and response to acute stress. Five proteins have been shown to be differentially expressed between the control group and that infected with Theileria spp., all acting in the oxidative stress pathway. Conclusions: EVs from buffaloes infected with Theileria spp. were successfully isolated and characterized. This is an advance in the knowledge of host-parasite relationship that contributes to the understanding of host immune response and theileriosis evasion mechanisms. These findings may pave the way for searching new EVs candidate-markers for a better production of safe biological products derived from buffaloes.(AU)

Evaluation of left atrial function in asymptomatic dogs with chronic myxomatous mitral valve disease: two-dimensional feature-tracking echocardiography and Simpsons monoplanar methods / Avaliação da função atrial esquerda em cães assintomáticos com degeneração mixomatosa crônica de valva mitral: métodos ecocardiográficos bidimensional feature tracking e monoplanar de Simpson

The present study evaluated the volume and function of the left atrium by two-dimensional echocardiographic feature-tracking imaging (2D-FTI) and Simpson's monoplanar modeling in dogs with asymptomatic degenerative mitral valve disease (DMVD). The study consisted of 80 dogs that were divided into the following three groups: Group 1, 21 dogs (A); Group 2, 30 dogs (B1) and Group 3, 29 dogs (B2). The variable strain (contraction phase) was significantly lower in Group 3 than in Group 1 (12.92±4.54 x 16.69±5.74, p=0.014), and significant differences in the contraction strain index (CSI) were observed between all of the groups that were evaluated (1 = 46.82±8.10, 2 = 39.88±8.03, 3 = 35.25±5.64, p<0.0001). The atrial diastolic volume index (AdVi) that was measured by 2D-FTI was significantly higher in Group 3 than in Group 1 (1.31±0.95 x 0.96±0.31, p=0.038), and the atrial cardiac index (ACI) was also higher in Group 3 than in Group 1 (102.38±80.18 x 78.19±33.38, p=0.030). Atrial function was assessed by Simpson's monoplanar method, which demonstrated an increase in the left atrial systolic volume, while the contractile function decreased with an increasing disease severity (Group 1 0.21±0.06; Group 2 0.25±0.06; Group 3 0.32±0.08, p<0.0001). The intraobserver and interobserver assessments showed low to moderate variability; most of the values for the coefficient of variation for the variables that were analysed with each method were below 25%. Thus, DMVD was determined to cause an alteration in atrial function, especially in the contraction phase, and even in asymptomatic animals, and the methods of 2D-FTI echocardiography and Simpson's monoplanar evaluation are sensitive and early methods for the detection of left atrial dysfunction.(AU)

O presente estudo avaliou o volume e a função atrial esquerda obtidos por meio da ecocardiografia bidimensional feature tracking (2D-FTI) e pelo método monoplanar de Simpson em cães saudáveis e cães com DMVD assintomáticos. Foram avaliados 80 cães distribuídos em três grupos: Grupo 1, 21 cães (classe A); Grupo 2, 30 cães (classe B1) e Grupo 3, 29 cães (classe B2). A variável strain (fase de contração) foi significativamente menor no Grupo 3 que no Grupo 1 (12,92±4,54 x 16,69±5,74, p=0,014) e para a variável índice de strain de contração (CSI), houve diferença estatística entre todos os grupos avaliados (1 = 46,82±8,10; 2 = 39,88±8,03; 3 = 35,25±5,64, p<0,0001). O índice de volume diastólico atrial (iVdA) mensurado por meio do 2D-FTI foi significativamente maior no Grupo 3 que no Grupo 1 (1,31±0,95 x 0,96±0,31, p=0,038), assim como para o índice cardíaco atrial (iCA) também foi maior no Grupo 3 (102,38±80,18 x 78,19±33,38, p=0,030). A função atrial avaliada pelo método monoplanar de Simpson demonstrou um aumento do volume atrial esquerdo e do volume sistólico do átrio esquerdo, enquanto que a função contrátil diminuiu com o aumento da gravidade da doença (Grupo 1 0,21±0,06; Grupo 2 0,25±0,06; Grupo 3 0,32±0,08; p<0,0001). A avaliação intraobservador e interobservador, demonstrou variabilidade baixa a moderada, uma vez que a maioria dos valores de coeficiente de variação se concentraram abaixo de 25% para as variáveis analisadas em ambos os métodos. Dessa forma, conclui-se que a DMVD causa alteração na função atrial, principalmente na fase de contração, mesmo em animais assintomáticos e que a ecocardiografia 2D-FTI e o método monoplanar de Simpson são métodos sensíveis e precoces na detecção da disfunção atrial esquerda.(AU)

Evaluation of left atrial function in asymptomatic dogs with chronic myxomatous mitral valve disease: two-dimensional feature-tracking echocardiography and Simpsons monoplanar methods / Avaliação da função atrial esquerda em cães assintomáticos com degeneração mixomatosa crônica de valva mitral: métodos ecocardiográficos bidimensional feature tracking e monoplanar de Simpson

The present study evaluated the volume and function of the left atrium by two-dimensional echocardiographic feature-tracking imaging (2D-FTI) and Simpson's monoplanar modeling in dogs with asymptomatic degenerative mitral valve disease (DMVD). The study consisted of 80 dogs that were divided into the following three groups: Group 1, 21 dogs (A); Group 2, 30 dogs (B1) and Group 3, 29 dogs (B2). The variable strain (contraction phase) was significantly lower in Group 3 than in Group 1 (12.92±4.54 x 16.69±5.74, p=0.014), and significant differences in the contraction strain index (CSI) were observed between all of the groups that were evaluated (1 = 46.82±8.10, 2 = 39.88±8.03, 3 = 35.25±5.64, p<0.0001). The atrial diastolic volume index (AdVi) that was measured by 2D-FTI was significantly higher in Group 3 than in Group 1 (1.31±0.95 x 0.96±0.31, p=0.038), and the atrial cardiac index (ACI) was also higher in Group 3 than in Group 1 (102.38±80.18 x 78.19±33.38, p=0.030). Atrial function was assessed by Simpson's monoplanar method, which demonstrated an increase in the left atrial systolic volume, while the contractile function decreased with an increasing disease severity (Group 1 0.21±0.06; Group 2 0.25±0.06; Group 3 0.32±0.08, p<0.0001). The intraobserver and interobserver assessments showed low to moderate variability; most of the values for the coefficient of variation for the variables that were analysed with each method were below 25%. Thus, DMVD was determined to cause an alteration in atrial function, especially in the contraction phase, and even in asymptomatic animals, and the methods of 2D-FTI echocardiography and Simpson's monoplanar evaluation are sensitive and early methods for the detection of left atrial dysfunction.(AU)

O presente estudo avaliou o volume e a função atrial esquerda obtidos por meio da ecocardiografia bidimensional feature tracking (2D-FTI) e pelo método monoplanar de Simpson em cães saudáveis e cães com DMVD assintomáticos. Foram avaliados 80 cães distribuídos em três grupos: Grupo 1, 21 cães (classe A); Grupo 2, 30 cães (classe B1) e Grupo 3, 29 cães (classe B2). A variável strain (fase de contração) foi significativamente menor no Grupo 3 que no Grupo 1 (12,92±4,54 x 16,69±5,74, p=0,014) e para a variável índice de strain de contração (CSI), houve diferença estatística entre todos os grupos avaliados (1 = 46,82±8,10; 2 = 39,88±8,03; 3 = 35,25±5,64, p<0,0001). O índice de volume diastólico atrial (iVdA) mensurado por meio do 2D-FTI foi significativamente maior no Grupo 3 que no Grupo 1 (1,31±0,95 x 0,96±0,31, p=0,038), assim como para o índice cardíaco atrial (iCA) também foi maior no Grupo 3 (102,38±80,18 x 78,19±33,38, p=0,030). A função atrial avaliada pelo método monoplanar de Simpson demonstrou um aumento do volume atrial esquerdo e do volume sistólico do átrio esquerdo, enquanto que a função contrátil diminuiu com o aumento da gravidade da doença (Grupo 1 0,21±0,06; Grupo 2 0,25±0,06; Grupo 3 0,32±0,08; p<0,0001). A avaliação intraobservador e interobservador, demonstrou variabilidade baixa a moderada, uma vez que a maioria dos valores de coeficiente de variação se concentraram abaixo de 25% para as variáveis analisadas em ambos os métodos. Dessa forma, conclui-se que a DMVD causa alteração na função atrial, principalmente na fase de contração, mesmo em animais assintomáticos e que a ecocardiografia 2D-FTI e o método monoplanar de Simpson são métodos sensíveis e precoces na detecção da disfunção atrial esquerda.(AU)

Evaluation of left atrial function in asymptomatic dogs with chronic myxomatous mitral valve disease: two-dimensional feature-tracking echocardiography and Simpsons monoplanar methods

ABSTRACT: The present study evaluated the volume and function of the left atrium by two-dimensional echocardiographic feature-tracking imaging (2D-FTI) and Simpsons monoplanar modeling in dogs with asymptomatic degenerative mitral valve disease (DMVD). The study consisted of 80 dogs that were divided into the following three groups: Group 1, 21 dogs (A); Group 2, 30 dogs (B1) and Group 3, 29 dogs (B2). The variable strain (contraction phase) was significantly lower in Group 3 than in Group 1 (12.92±4.54 x 16.69±5.74, p=0.014), and significant differences in the contraction strain index (CSI) were observed between all of the groups that were evaluated (1 = 46.82±8.10, 2 = 39.88±8.03, 3 = 35.25±5.64, p 0.0001). The atrial diastolic volume index (AdVi) that was measured by 2D-FTI was significantly higher in Group 3 than in Group 1 (1.31±0.95 x 0.96±0.31, p=0.038), and the atrial cardiac index (ACI) was also higher in Group 3 than in Group 1 (102.38±80.18 x 78.19±33.38, p=0.030). Atrial function was assessed by Simpsons monoplanar method, which demonstrated an increase in the left atrial systolic volume, while the contractile function decreased with an increasing disease severity (Group 1 0.21±0.06; Group 2 0.25±0.06; Group 3 0.32±0.08, p 0.0001). The intraobserver and interobserver assessments showed low to moderate variability; most of the values for the coefficient of variation for the variables that were analysed with each method were below 25%. Thus, DMVD was determined to cause an alteration in atrial function, especially in the contraction phase, and even in asymptomatic animals, and the methods of 2D-FTI echocardiography and Simpsons monoplanar evaluation are sensitive and early methods for the detection of left atrial dysfunction.

RESUMO: O presente estudo avaliou o volume e a função atrial esquerda obtidos por meio da ecocardiografia bidimensional feature tracking (2D-FTI) e pelo método monoplanar de Simpson em cães saudáveis e cães com DMVD assintomáticos. Foram avaliados 80 cães distribuídos em três grupos: Grupo 1, 21 cães (classe A); Grupo 2, 30 cães (classe B1) e Grupo 3, 29 cães (classe B2). A variável strain (fase de contração) foi significativamente menor no Grupo 3 que no Grupo 1 (12,92±4,54 x 16,69±5,74, p=0,014) e para a variável índice de strain de contração (CSI), houve diferença estatística entre todos os grupos avaliados (1 = 46,82±8,10; 2 = 39,88±8,03; 3 = 35,25±5,64, p 0,0001). O índice de volume diastólico atrial (iVdA) mensurado por meio do 2D-FTI foi significativamente maior no Grupo 3 que no Grupo 1 (1,31±0,95 x 0,96±0,31, p=0,038), assim como para o índice cardíaco atrial (iCA) também foi maior no Grupo 3 (102,38±80,18 x 78,19±33,38, p=0,030). A função atrial avaliada pelo método monoplanar de Simpson demonstrou um aumento do volume atrial esquerdo e do volume sistólico do átrio esquerdo, enquanto que a função contrátil diminuiu com o aumento da gravidade da doença (Grupo 1 0,21±0,06; Grupo 2 0,25±0,06; Grupo 3 0,32±0,08; p 0,0001). A avaliação intraobservador e interobservador, demonstrou variabilidade baixa a moderada, uma vez que a maioria dos valores de coeficiente de variação se concentraram abaixo de 25% para as variáveis analisadas em ambos os métodos. Dessa forma, conclui-se que a DMVD causa alteração na função atrial, principalmente na fase de contração, mesmo em animais assintomáticos e que a ecocardiografia 2D-FTI e o método monoplanar de Simpson são métodos sensíveis e precoces na detecção da disfunção atrial esquerda.

Analysis of different tracking intervals for parabolic trough collectors for water disinfestation in agricultural applications / Análise de diferentes intervalos de rastreamento de coletores solares parabólicos para desinfestação de água em aplicações agrícolas

The use of renewable energy is growing every year as an alternative to fossil fuel technology. Solar energy presents itself as a good alternative due to its great availability and energy potential. Solar thermal energy uses heat to warm fluids, and can also generate electricity, as well as being used in industrial processes and water desalination. The research and use of Parabolic Trough Collectors (PTCs) has been growing in recent years due to their ability to heat fluids at high temperatures in a relatively small area. In this work, two small PTCs were manufactured and tests were performed to improve the arrangements in order to increase the absorbed energy to reach temperature values for water disinfestation, aiming at the control of phytopathogens to control soil pathogens in small and medium farms. To control the automatic tracker, a low-cost system with Arduino, Light Dependent Resistors (LDRs) and step motors was used. The tracking times intervals analyzed were 1, 5 and 15 minutes. For the 1-minute tracking interval, the PTCs presented a thermal efficiency of 25.87%, with temperatures between 45 and 70 C and an average of 63.73 C. For the 5-minute tracking interval, the thermal efficiency was 18.48%, reaching temperatures between 41 and 68 ºC and an average of 57.9 ºC. For the 15-minute tracking interval, the PTCs presented a thermal efficiency of 14.80%, with temperatures between 39 and 62 °C and an average of 51.88 °C. The results showed that the tracking intervals of 1 and 5 minutes present more values between the lethal temperature range of 45 and 60 °C for phytopathogens. For agricultural application, the usage of a tracking interval of 5 minutes could be a good option for reducing the waste of system energy compared to the interval of 1 minute.

O uso de energia renovável está crescendo a cada ano como alternativa à tecnologia de combustíveis fósseis. A energia solar apresenta-se como uma boa alternativa devido à sua grande disponibilidade e potencial energético. A energia solar térmica utiliza o calor para aquecer os fluidos e também pode gerar eletricidade, bem como ser usada em processos industriais e dessalinização da água. A pesquisa e o uso de Coletores Solares Parabólicos (PTCs) têm crescido nos últimos anos devido à capacidade de aquecer fluidos em altas temperaturas em uma área relativamente pequena. Neste trabalho, dois pequenos PTCs foram fabricados, e testes foram realizados para melhorar os arranjos, a fim de aumentar a energia absorvida para atingir valores de temperatura para desinfestação de água, visando o controle de fitopatógenos no controle de patógenos de solo em pequenas e médias fazendas. Para controlar o rastreador automático foi utilizado um sistema de baixo custo com Arduino, Resistores de Potência Luminosa (LDRs) e motores de passo. Os intervalos de tempo de rastreamento analisados foram de 1, 5 e 15 minutos. Para o intervalo de rastreamento de 1 minuto, os PTCs apresentaram uma eficiência térmica de 25,87%, com temperaturas entre 45 e 70 ºC e 63,73 ºC de temperatura média. Para o intervalo de rastreamento de 5 minutos, a eficiência térmica foi de 18,48%, atingindo temperaturas entre 41 e 68 ° C e 57,9 ° C de temperatura média. Para o intervalo de rastreamento de 15 minutos, os PTCs apresentaram uma eficiência térmica de 14,80%, com temperaturas entre 39 e 62 ° C e 51,88 ° C de temperatura média. Os resultados mostraram que os intervalos de rastreamento de 1 e 5 minutos apresentam mais valores entre a faixa de temperatura letal de 45 e 60 ° C para fitopatógenos. Para aplicações agrícolas, o uso de um intervalo de rastreamento de 5 minutos poderia ser uma boa alternativa para uma redução no desperdício da energia do sistema em comparação com o intervalo de 1 minuto.

Analysis of different tracking intervals for parabolic trough collectors for water disinfestation in agricultural applications / Análise de diferentes intervalos de rastreamento de coletores solares parabólicos para desinfestação de água em aplicações agrícolas

The use of renewable energy is growing every year as an alternative to fossil fuel technology. Solar energy presents itself as a good alternative due to its great availability and energy potential. Solar thermal energy uses heat to warm fluids, and can also generate electricity, as well as being used in industrial processes and water desalination. The research and use of Parabolic Trough Collectors (PTCs) has been growing in recent years due to their ability to heat fluids at high temperatures in a relatively small area. In this work, two small PTCs were manufactured and tests were performed to improve the arrangements in order to increase the absorbed energy to reach temperature values for water disinfestation, aiming at the control of phytopathogens to control soil pathogens in small and medium farms. To control the automatic tracker, a low-cost system with Arduino, Light Dependent Resistors (LDRs) and step motors was used. The tracking times intervals analyzed were 1, 5 and 15 minutes. For the 1-minute tracking interval, the PTCs presented a thermal efficiency of 25.87%, with temperatures between 45 and 70 C and an average of 63.73 C. For the 5-minute tracking interval, the thermal efficiency was 18.48%, reaching temperatures between 41 and 68 ºC and an average of 57.9 ºC. For the 15-minute tracking interval, the PTCs presented a thermal efficiency of 14.80%, with temperatures between 39 and 62 °C and an average of 51.88 °C. The results showed that the tracking intervals of 1 and 5 minutes present more values between the lethal temperature range of 45 and 60 °C for phytopathogens. For agricultural application, the usage of a tracking interval of 5 minutes could be a good option for reducing the waste of system energy compared to the interval of 1 minute.(AU)

O uso de energia renovável está crescendo a cada ano como alternativa à tecnologia de combustíveis fósseis. A energia solar apresenta-se como uma boa alternativa devido à sua grande disponibilidade e potencial energético. A energia solar térmica utiliza o calor para aquecer os fluidos e também pode gerar eletricidade, bem como ser usada em processos industriais e dessalinização da água. A pesquisa e o uso de Coletores Solares Parabólicos (PTCs) têm crescido nos últimos anos devido à capacidade de aquecer fluidos em altas temperaturas em uma área relativamente pequena. Neste trabalho, dois pequenos PTCs foram fabricados, e testes foram realizados para melhorar os arranjos, a fim de aumentar a energia absorvida para atingir valores de temperatura para desinfestação de água, visando o controle de fitopatógenos no controle de patógenos de solo em pequenas e médias fazendas. Para controlar o rastreador automático foi utilizado um sistema de baixo custo com Arduino, Resistores de Potência Luminosa (LDRs) e motores de passo. Os intervalos de tempo de rastreamento analisados foram de 1, 5 e 15 minutos. Para o intervalo de rastreamento de 1 minuto, os PTCs apresentaram uma eficiência térmica de 25,87%, com temperaturas entre 45 e 70 ºC e 63,73 ºC de temperatura média. Para o intervalo de rastreamento de 5 minutos, a eficiência térmica foi de 18,48%, atingindo temperaturas entre 41 e 68 ° C e 57,9 ° C de temperatura média. Para o intervalo de rastreamento de 15 minutos, os PTCs apresentaram uma eficiência térmica de 14,80%, com temperaturas entre 39 e 62 ° C e 51,88 ° C de temperatura média. Os resultados mostraram que os intervalos de rastreamento de 1 e 5 minutos apresentam mais valores entre a faixa de temperatura letal de 45 e 60 ° C para fitopatógenos. Para aplicações agrícolas, o uso de um intervalo de rastreamento de 5 minutos poderia ser uma boa alternativa para uma redução no desperdício da energia do sistema em comparação com o intervalo de 1 minuto.(AU)

HOMING DE CÉLULAS ESTROMAIS MESENQUIMAIS MULTIPOTENTES CANINAS APÓS TRANSPLANTE PELA VIA EPIDURAL EM MODELO EXPERIMENTAL DE LESÃO RAQUIMEDULAR AGUDA EM COELHOS

As células estromais mesenquimais multipotentes (MSC) têm sido apresentadas pela comunidade científica como uma alternativa promissora no tratamento de doenças inflamatórias, traumáticas, vasculares e degenerativas do sistema nervoso central devido a suas propriedades anti-inflamatórias, imunomoduladoras e neuroregenerativas. Um dos fatores que podem afetar a eficácia da terapia celular é a via de transplante utilizada. O objetivo deste estudo foi avaliar o homing de MSCs derivadas do tecido adiposo caninas (AdMSCs) transplantadas pela via epidural em modelo experimental de lesão raquimedular aguda em coelhos. A lesão raquimedular foi induzida experimentalmente em 8 coelhos por compressão do segmento medular T10, imediatamente após os animais foram submetidos ao transplante de AdMSCs caninas marcadas com nanocristais (Qtracker 655) pela via epidural entre os espaços L7-S1. Sete dias após o transplante, o homing das AdMSCs caninas foi avaliado na medula espinhal, encéfalo, fígado, rins, baço e pulmão por meio de detecção de fluorescência em imageador in vivo. Os segmentos medulares L7-S1 e local de lesão foram analisados em microscopia confocal para a presença de AdMSCs marcadas. Constatou-se a presença de AdMSCs caninas em local de lesão na medula espinhal e segmento L7-S1, houve marcação em encéfalo, pulmão, fígado e rins, não houve marcação em baço. A presença de AdMSCs na medula espinhal comprova a capacidade destas células passarem pela dura mater e atingirem o local de lesão. O transplante epidural é viável e minimamente invasivo, sendo um bom candidato para o uso em terapia celular no contexto de doenças neurológicas.

Multipotent mesenchymal stromal cells (MSC) have been presented by the scientific community as a promising alternative in the treatment of inflammatory, traumatic, vascular and degenerative diseases of the central nervous system due to their anti-inflammatory, immunomodulatory and neuroregenerative properties. One of the aspects that can affect the effectiveness of the stem cell therapy is the transplantation route used. The aim of this study was to evaluate the homing of canine adipose derived MSCs (AdMSCs) transplanted via epidural injection in an experimental model of acute spinal cord injury in rabbits. New Zealand rabbits (n=8) were subjected to the spinal cord injury induced by compression of the 10th thoracic segment. Immediatily after the surgical procedure, the animals were submitted to the transplantation of marked AdMSCs with Qtracker 655 through epidural injection between the L7-S1 spaces. Seven days after the transplant, the brain, spinal cord, lungs, kidney, spleen and liver were collected and evaluated by fluorescence imaging. The spinal cord segments L7-S1 and thoracic injury site were evaluated by confocal microscopy to identify the presence of marked canine AdMSCs. Results shows that AdMSCs migrate to thoracic spinal cord segment, lungs, brain, liver and kidneys, no fluorescence was observed in spleen. The presence of canine AdMSCs in spinal cord indicates the capacity of these cells to overcome the dura mater and reach the injury site. The epidural delivery is feasible and minimally invasive and might be a good candidate for cell transplantation in the context of neurological diseases.

Habitat use and movements of Glossophaga soricina and Lonchophylla dekeyseri (Chiroptera: Phyllostomidae) in a Neotropical savannah

The greatest current threat to terrestrial fauna is continuous and severe landscape modification that destroys and degrades animal habitats. This rapid and severe modification has threatened species, local biological communities, and the ecological services that they provide, such as seed dispersal, insect predation, and pollination. Bats are important pollinators of the Cerrado (woodland savanna) because of their role in the life cycles of many plant species. However, there is little information about how these bat species are being affected by habitat loss and fragmentation. We used radio-tracking to estimate the home ranges of Glossophaga soricina (Pallas, 1776) and Lonchophylla dekeyseri Taddei, Vizotto & Sazima, 1983. The home range of G. soricina varies from 430 to 890 ha. They combine shortrange flights of up to 500 m to nearby areas with longer flights of 2 to 3 km that take them away from their core areas. The maximum flight distance tracked for L. dekeyseri was 3.8 km, and its home range varies from 564 to 640 ha. The average distance travelled by this species was 1.3 km. Our data suggest that G. soricina and L. dekeyseri are able to explore the fragmented landscape of the Central Brazilian Cerrado and that they are likely to survive in the short- to medium-term. The natural dispersal ability of these two species may enable them to compensate for continued human disturbance in the region.

Habitat use and movements of Glossophaga soricina and Lonchophylla dekeyseri (Chiroptera: Phyllostomidae) in a Neotropical savannah

The greatest current threat to terrestrial fauna is continuous and severe landscape modification that destroys and degrades animal habitats. This rapid and severe modification has threatened species, local biological communities, and the ecological services that they provide, such as seed dispersal, insect predation, and pollination. Bats are important pollinators of the Cerrado (woodland savanna) because of their role in the life cycles of many plant species. However, there is little information about how these bat species are being affected by habitat loss and fragmentation. We used radio-tracking to estimate the home ranges of Glossophaga soricina (Pallas, 1776) and Lonchophylla dekeyseri Taddei, Vizotto & Sazima, 1983. The home range of G. soricina varies from 430 to 890 ha. They combine shortrange flights of up to 500 m to nearby areas with longer flights of 2 to 3 km that take them away from their core areas. The maximum flight distance tracked for L. dekeyseri was 3.8 km, and its home range varies from 564 to 640 ha. The average distance travelled by this species was 1.3 km. Our data suggest that G. soricina and L. dekeyseri are able to explore the fragmented landscape of the Central Brazilian Cerrado and that they are likely to survive in the short- to medium-term. The natural dispersal ability of these two species may enable them to compensate for continued human disturbance in the region.(AU)

FUNÇÃO MIOCÁRDICA PELA ECOCARDIOGRAFIA FEATURE TRACKING BIDIMENSIONAL EM CÃES SUBMETIDOS À ANESTESIA PARA PROCEDIMENTOS CIRÚRGICOS ORTOPÉDICOS

O sistema locomotor dos cães é comumente acometido por doenças ortopédicas e muitas vezes são necessários procedimentos anestésicos-cirúrgicos complexos para tratamento dessas afecções. Sabe-se que vários anestésicos utilizados nos cães possuem efeitos depressores sobre o sistema cardiovascular, podendo levar a alterações na pressão arterial, débito cardíaco, ritmo cardíaco e na função miocárdica. O presente trabalho avaliou a função miocárdica ventricular esquerda em cães submetidos à diferentes protocolos anestésicos para procedimentos cirúrgicos ortopédicos, utilizando o ecocardiograma convencional e o feature tracking bidimensional. Foram avaliados 22 cães, os quais foram divididos em três grupos, de acordo com as medicações utilizadas durante a anestesia: FOPI (fenotiazínicos, opióides, propofol, isofluorano), FOPBI (fenotiazínicos, opióides, propofol, benzodiazepínicos, isofluorano) e OPI (opióides, propofol, isofluorano). Foram realizadas quatro avaliações em cada animal: antes da anestesia (tempo 1 -T1), imediatamente após a anestesia (tempo 2 -T2), 12 horas após o procedimento anestésico-cirúrgico (tempo 3 -T3) e com 10 dias (tempo 4 - T4). Foram obtidas variáveis ecocardiográficas convencionais, por meio dos modos bidimensional, modo-M e Doppler (em cores, pulsado, contínuo e tecidual), além das variáveis strain e strain rate global nos sentidos longitudinal, circunferencial e radial. De modo geral, não houve diferença significativa nas variáveis ecocardiográficas convencionais quando comparados os grupos de anestesia. Nas análises de cada grupo, as variáveis índice de volume sistólico e diastólico final, relação E/A do fluxo mitral, relação E/A e fração de ejeção apresentaram diferenças entre os tempos de avaliação, embora os resultados permaneceram dentro dos valores de referência para a espécie. A média global do strain e strain rate longitudinal e circunferencial não demonstrou diferença entre os grupos anestésicos utilizados, embora houve redução significativa nos valores encontrados para strain rate circunferencial no período após anestesia, nos cães do grupo FOPI (T2: -0,83 ± 0,29; T3: -1,06 ± 0,26; p=0,0292) e FOPBI (T2: -0,74 ± 0,41; T4: -1,07 ± 0,31; p=0,0037). Nas análises entre os grupos, houve diferença no strain radial na quarta avaliação (FOPI:14,15 ± 6,98; FOPBI: 24,60 ± 5,74; OPI:13,94 ± 6,58; p=0,0386). Strain rate radial apresentou-se reduzido na segunda avaliação dos cães do grupo FOPI (T2: 1,22 ± 0,42; T3: 1,57 ± 0,29; p=0,0266) e na terceira avaliação dos grupos FOPBI (T3: 1,48 ± 0,44; T4: 2,28 ± 0,55; p=0,0012) e OPI (T1: 1,73 ± 0,23; T3: 1,34 ± 0,38; p=0,0291). Embora tenha sido observada redução transitória na função miocárdica nos cães anestesiados, não houve disfunção miocárdica importante. Na avaliação interobservador, a variabilidade foi baixa para strain e strain rate longitudinal e circunferencial e moderada para radial. Dessa maneira, conclui-se que (1) a anestesia causa uma redução transitória na função ventricular esquerda em cães devido aos efeitos depressores dos fármacos sobre o sistema cardiovascular; e que (2) a ecocardiografia feature tracking bidimensional é sensível na determinação da função miocárdica em cães submetidos à anestesia.

Dogs locomotor system is often affected by orthopedic diseases and complex anesthesicsurgical procedures are commonly necessary to treat these conditions. It is known that several anesthetics used in dogs have depressor effects on the cardiovascular system, leading to changes in the blood pressure, cardiac output, cardiac rhythm and myocardial function. The present study evaluated left ventricular myocardial function in dogs submitted to different anesthetic protocols for orthopedic surgical procedures using conventional echocardiogram and two-dimensional feature tracking. Twenty-two dogs were divided into three groups according to the medications used during anesthesia: FOPI (phenothiazines, opioids, propofol, isoflurane), FOPBI (phenothiazines, opioids, propofol, benzodiazepines, isoflurane) and OPI, propofol, isoflurane). Four evaluations were performed in each animal: before anesthesia (time 1-T1), immediately after (time 2-T2), 12 hours after anesthesia (time 3-T3) and with 10 days (time 4-T4). Conventional echocardiographic variables were obtained through twodimensional, M-mode and Doppler modes (color, pulsed, continuous and tissue), besides the strain and strain rate global variables in the longitudinal, circumferential and radial directions. Overall, there was no significant difference in conventional echocardiographic variables when compared to anesthesia groups. In the analyzes of each group, the variables index of final systolic and diastolic volume, E / A ratio of the mitral flow, E '/ A' ratio and ejection fraction presented differences between the evaluation times, although the results remained within the values of reference for the species. The overall mean of the longitudinal and circumferential strain rates did not show any difference between the anesthetic groups used, although there was a significant reduction in the values found for circumferential strain rate in the period after anesthesia in dogs of group FOPI (T2: -0.83 ± 0, 29: T3: -1.06 ± 0.26, p = 0.0292) and FOPBI (T2: -0.74 ± 0.41, T4: -1.07 ± 0.31, p = 0.0037). In the analyzes between the groups, there was difference in radial strain in the fourth evaluation (FOPI: 14.15 ± 6.98, FOPBI: 24.60 ± 5.74, OPI: 13.94 ± 6.58, p = 0.0386). Strain rate was reduced in the second evaluation of the dogs of group FOPI (T2: 1.22 ± 0.42, T3: 1.57 ± 0.29, p = 0.0266) and in the third evaluation of groups FOPBI (T3: 1.48 ± 0.44, T4: 2.28 ± 0.55, p = 0.0012) and OPI (T1: 1.73 ± 0.23, T3: 1.34 ± 0.38; = 0.0291). Although transient reduction in myocardial function has been observed in anesthetized dogs, there was no significant myocardial dysfunction. In the interobserver evaluation, the variability was low for strain and strain rate longitudinal and circumferential and moderate for radial. Thus, it is concluded that (1) anesthesia causes a transient reduction in left ventricular function in dogs due to the depressor effects of drugs on the cardiovascular system; and that (2) two-dimensional feature tracking echocardiography seems is sensitive in the determination of myocardial function in dogs undergoing anesthesia.

Influência da qualidade de imagens e técnicas de rastreamento nos resultados de análise espermática assistida por computador (CASA-Mot) em peixes

Esta tese baseia-se na elaboração de dois artigos científicos e um processo que padroniza etapas especificas de execução em um software CASA-Mot: 1) o primeiro artigo trata e avalia diferentes técnicas de aprimoramento de imagens disponíveis no software ImageJ que tem potencial de tratar as imagens espermáticas ao utilizar o plugin CASA-Mot. Para os testes, foram gravados vídeos do movimento espermático de jundiá cinza (Rhamdia quelen) sob diferentes condições de contraste (alto, médio e baixo) nas imagens espermáticas, através da mudança no condensador do microscópio. Os efeitos de sete técnicas de aprimoramento de imagens foram verificados sob os resultados de número de espermatozoides rastreados, taxa de motilidade e velocidade curvilínea. As técnicas de aprimoramento de imagens Median, Bandpass e Rolling-Ball melhoraram significativamente o contraste entre os espermatozoides e o plano de fundo em todos os níveis de contraste, produzindo resultados confiáveis; 2) o segundo artigo trata e avalia os efeitos das técnicas de rastreamento espermático vizinho mais próximo (Nearest Neighbor - NN) nativo do plugin CASA-Mot, uma técnica robusta de rastreamento de múltiplas hipóteses (Multiple Hypothesis Tracking - MHT) em vídeos simulados do movimento espermático de peixes, contendo diferentes números de espermatozoides no campo visual (50, 100, 200 e 300 espermatozoides) e diferentes taxas de motilidade (30, 60 e 90%). Avaliou-se os resultados apresentados pelos diferentes rastreadores sobre as taxas de motilidade, número de espermatozoides rastreados, quantidade de erros de rastreamento e tempo de análise. Todos os resultados foram influenciados (p < 0,05) pela técnica de rastreamento utilizada; 3) É descrito o processo analítico do movimento espermático o qual compreende sete etapas: importar as cenas de vídeo, aplicar técnica de aprimoramento de imagens conforme os resultados do primeiro artigo, segmentar as imagens espermáticas, rastrear os espermatozoides utilizando as técnicas NN ou MHT, calcular os parâmetros de motilidade e fornecer resultados organizados em diretórios específicos. Adicionalmente são apresentadas as telas do software desenvolvido para facilitar e automatizar as análises.

This doctoral dissertation is based on the elaboration of two scientific articles and a process that normalize specific execution steps in a CASA-Mot software: 1) the first article discusses and evaluates different image enhancement techniques available in ImageJ software wich has the potential to treat spermatic images when using the CASA-Mot plugin. For the tests, were recorded videos of the spermatic movement of gray jundiá (Rhamdia quelen) under different contrast conditions (high, medium and low) in the spermatic images, through the change in the condenser of the microscope. The effects of seven images enhancement techniques were checked under the results of the number of spermatozoa tracked, motility rate and curvilinear velocity. The images enhancement techniques Median, Bandpass and Rolling-Ball significantly improved the contrast between sperm and background at all contrast levels, producing reliable results; 2) the second article treats and evaluates the effects of spermatic tracking techniques of the Nearest Neighbor (NN) native from CASA-Mot plugin, and a robust Multiple Hypothesis Tracking (MHT) technique in simulated motion videos of the spermatic movement of fishes, containing different numbers of spermatozoa in the visual field (50, 100, 200 and 300 sperm) and different motility rates (30, 60 and 90%). The results presented by the different trackers were evaluated under motility rates, number of spermatozoa traces, number of tracking errors and time of analysis. All results were influenced (p < 0.05) by the tracking technique used; 3) The analytical process of sperm movement is described which comprises seven steps: importing video scenes, applying image enhancement technique according to the results of the first article, segmenting sperm images, tracking sperm using NN or MHT techniques, calculating motility parameters and provide results organized in specific directories. Additionally, the software screens developed to facilitate and automate the analysis are presented. Keywords: . .. . .

título "Listeria monocytogenes IN A BRAZILIAN PORK PRODUCTION CHAIN AND ADHESION FEATURES OF ISOLATES

L. monocytogenes está presente em baixas frequências em animais a serem abatidos, mas pode persistir por longos períodos no ambiente de processamento de alimentos. No presente estudo, a contaminação por L. monocytogenes foi avaliada em diferentes etapas de uma cadeia produtiva de carne suína no Estado de Minas Gerais. Dez lotes de suínos foram amostrados em diferentes etapas da cadeia de produção, abrangendo amostras de galpão de terminação, abate (após sangria, após chamuscamento, após evisceração e após lavagem final), processamento (facas, mesas de desossa e mão de manipuladores) e produtos finais (costelas, paleta, pernil e linguiça) totalizando 670 amostras. Todas as amostras foram submetidas à detecção de L. monocytogenes, e os isolados obtidos foram caracterizados por análises bioquímicas, sorogrupos, genes de virulência, PFGE, susceptibilidade à antibióticos e habilidade de adesão. Os resultados revelaram a baixa ocorrência de Listeria spp. na cadeia de produção de suínos avaliada. No entanto, quatro amostras de linguiça testadas (40%) foram positivas para Listeria spp., Sendo L. monocytogenes identificada em duas (20%). Dez isolados foram identificados como L. monocytogenes (oito de serogrounp 1/2a ou 3a e dois de sorogrupo 4b, 4d ou 4e), todos positivos para genes relacionados a virulência hlyA, iap, plcA, actA, inlA, inlB, inlC e inlJ e suscetíveis aos antibióticos testados. Uma amostra de linguiça foi contaminada por ambos os sorogrupos 1/2a ou 3a e 4b, 4d ou 4e. Os isolados do sorogrupo 1/2a ou 3a obtidos nas visitas 5 e 6 apresentaram perfis genéticos distintos por PFGE, sugerindo que a contaminação pode vir de fonte diferente. O potencial de adesão exibido por Listeria spp. isolados (n = 18) variaram de fraco (sorogrupo 4b, 4d ou 4e) a moderado (L. innocua e L. monocytogenes sorogrupo 1/2a ou 3a). Apesar da baixa ocorrência de L. monocytogenes, foram detectados sorogrupos patogênicos em linguiça, exigindo medidas de controle por parte da indústria. Uma vez que L. monocytogenes é um patógeno capaz de aderir a variadas superfícies e formar biofilmes, o que pode explicar sua persistência em ambientes de processamento de alimentos este trabalho também avaliou a capacidade de adesão de L. monocytogenes e a interferência de fatores estressantes na capacidade de adesão de cepas selecionadas (cepas de L. monocytogenes pertencentes às linhagens I e II, também provenientes do ambiente de processamento de carnes, caraterizadas em trabalhos paralelos por forte potencial adesão (1 isolado) e capacidade de persistência no ambiente de processamento por 3 anos (2 isolados)), estes isolados foram incorporados a este trabalho e testados junto a 3 isolados provenientes de linguiça. Estes isolados foram submetidos a testes de potencial de adesão e concentração inibitória mínima contra quatro desinfetantes. A capacidade de adesão dos isolados selecionados também foi testada considerando: diluições de desinfetantes, concentrações de NaCl e sais de cura, tempo de incubação e temperatura. Cada isolado foi classificado de acordo com sua capacidade de adesão como fraco, moderado ou forte. Os quatro desinfetantes testados foram eficazes na eliminação de L. monocytogenes. Os isolados selecionados para testes de estresse apresentaram maior capacidade de adesão a 37 °C/ 72 horas, e os meios com 5% de NaCl e amônia quaternária (1:1,024) foram ineficazes na inibição da adesão ao poliestireno. Os dados coletados permitiram a identificação do potencial de adesão de L. monocytogenes, da eficácia dos sanitizantes testados no controle da contaminação por este patógeno e a capacidade de adesão na presença de amônio quaternário (1:1024) e sais de alguns isolados. Considerando sua habilidade de adesão em condições estressantes nos testes descritos acima e o fato de terem o genoma sequênciado por (cg) MLST em estudos paralelos quatro isolados de L. monocytogenes pertencentes às linhagens I e II provenientes do ambiente de processamento de carne foram ainda investigados para capacidade de formação de biofilme em aço inoxidável na presença de sal de cura 7.5% (linhagem I) e amônio quaternário (1:1,024) (linhagem II). Adicionalmente foi realizada uma análise preditiva da expressão dos genes relacionados à formação de biofilme e adaptação a condições estressantes por ensaios qPCR (previamente detectados por análise in silico do genoma dos isolados selecionados, caracterizado por cg MLST em trabalhos paralelos). A formação de biofilme de L. monocytogenes em aço inoxidável foi testada em dois sistemas diferentes (microplaca e cupons) a 37 °C por 72 horas. Os ensaios foram realizados como triplicatas biológicas e incluíram os controles apropriados para verificar diferenças significativas pela análise de variância (p < 0,05). Foi possível observar que as linhagens testadas (I e II) foram capazes de formar biofilme em aço inoxidável. Embora os tratamentos utilizados em cada linhagem tenham sido significativos na redução do biofilme formado (p < 0,05), os isolados foram capazes de formar biofilme na condição de estresse avaliada. As suspensões de biofilme de L. monocytogenes a partir de testes em cupons de aço inoxidável deram resultados positivos em ensaios de qPCR para onze genes alvo testados. De maneira geral este trabalho demonstrou que o suíno não pareceu ser um portador representativo deste patógeno. Mesmo que não tenha sido possível a obtenção de amostras positivas para L.monocytogenes oriundas do ambiente de abate e processamento amostrado, a obtenção de produtos finais (linguiça) contaminados com sorogrupos patogênicos evidencia o risco de saúde ao consumidor final e a capacidade deste patógeno em persistir no ambiente de processamento de carne suína, uma vez que sua presença foi detectada no produto final. Os isolados de L. mococytogenes obtidos pertencem às linhagens filogêneticas reconhecidas por serem altamente adptadas ao ambiente de processamento de alimentos, e apresentaram habilidade em aderir às superfícies testadas sob condições de estresse. A reconhecida capacidade deste patógeno em formar biofilme em superfícies comumente encontradas no ambiente de processamento de carnes também pôde ser demonstrada, os isolados testados foram capazes de formar biofilme em aço inoxidável na presença de agentes usualmente utilizados para preparações de embutidos e também nos procedimentos de limpeza e desinfecção da planta de processamento. A analise in silico do cg MLST destes isolados permitiu a identificação de regiões genômicas relacionadas à formação de biofilme e adaptação a condições ambientais estrassantes, em isolados das linhagens I e II, sendo ainda possível detectar a ação desta maquinaria genética na formação de biofilme em aço inoxidável sob ação de agentes estressantes, pela predição da expressão de onze gene alvo realizada por qPCR.

L. monocytogenes is present at low frequencies in animals to be slaughtered but may persist for long periods in the food processing environment. In the present study, L. monocytogenes contamination was evaluated at different stages of a pork meat production chain in the state of Minas Gerais. Ten lots of pigs were sampled at different stages of the production chain, covering samples from termination sheds, slaughtering (after bleeding, after singeing, after evisceration and after final washing), processing (knives, deboning tables and hand handlers) and end products (ribs, shoulder, ham and sausage) totaling 670 samples. All samples were submitted to L. monocytogenes detection, and the isolates obtained were characterized by biochemical analyzes, serogroups, virulence genes, PFGE, antibiotic susceptibility and adhesion ability. The results revealed the low occurrence of Listeria spp. in the pork production chain evaluated. However, four sausage samples tested (40%) were positive for Listeria spp., with L. monocytogenes identified in two (20%). Ten isolates were identified as L. monocytogenes (eight from serogrounp 1/2a or 3a and two from serogrounp 4b, 4d or 4e), all positive for virulence-related genes hlyA, iap, plcA, actA, inlA, inlB, inlC and inlJ and susceptible to the tested antibiotics. A sausage sample was contaminated by both serogroups 1/2a or 3a and 4b, 4d or 4e. Isolates from serogroup 1/2a or 3a obtained at visits 5 and 6 showed distinct genetic profiles by PFGE, suggesting that contamination may come from a different source. The adhesion potential exhibited by Listeria spp. isolates (n = 18) ranged from weak (serogroup 4b, 4d or 4e) to moderate (L. innocua and L. monocytogenes serogroup 1/2a or 3a). Despite the low occurrence of L. monocytogenes, pathogenic serogroups were detected in sausage, requiring industry control measures. Since L. monocytogenes is a pathogen capable of adhering to various surfaces and forming biofilms, which may explain its persistence in food processing environments, this work also evaluated L. monocytogenes adhesion capacity and the interference of stress factors on adhesion capacity of selected strains (L. monocytogenes strains belonging to lineages I and II, also coming from the meat processing environment, characterized in parallel work by strong adhesion potential (one isolate) and persistence capacity in the processing environment for 3 years (two isolates)), were incorporated into this work and tested with 3 selected isolates from sausage samples. These isolates were submitted to adhesion potential and minimum inhibitory concentration tests against four disinfectants. The adhesion capacity of the selected isolates was also tested considering: disinfectant dilutions, NaCl concentrations and curing salts, incubation time and temperature. Each isolate was classified according to its adherence capacity as weak, moderate or strong. The four disinfectants tested were effective in eliminating L. monocytogenes. The isolates selected for stress tests showed greater adhesion capacity at 37 °C/72 hours, and the BHI broth with 5% NaCl and quaternary ammonia (1: 1,024) were ineffective in inhibiting polystyrene adhesion. The collected data allowed the identification of the adhesion potential of L. monocytogenes, the efficacy of the sanitizers tested in the control of contamination by this pathogen and the adhesion capacity in the presence of quaternary ammonium (1: 1,024) and salts of some isolates. Considering their ability to adhere to stressful conditions in the tests described above and the fact that they have the genome sequenced by (cg) MLST in parallel studies four isolates of L. monocytogenes belonging to strains I and II from the meat processing environment were further investigated for stainless steel biofilm formation capacity in the presence of curing salt 7.5% (lineage I) and quaternary ammonium (1: 1,024) (lineage II). Additionally, a predictive analysis of gene expression related to biofilm formation and adaptation to stressful conditions was performed by qPCR assays (previously detected by in silico genome analysis of selected isolates, characterized by (cg) MLST in parallel work). L. monocytogenes biofilm formation in stainless steel was tested in two different systems (microplate and coupons) at 37 °C for 72 hours. Assays were performed as biological triplicates and included appropriate controls to verify significant differences by analysis of variance (p < 0.05). It was observed that the tested strains (I and II) were able to form stainless steel biofilm. Although the treatments used in each strain were significant in reducing the biofilm formation (p < 0.05), the isolates were able to form biofilm under the stress condition evaluated. L. monocytogenes biofilm suspensions from stainless steel coupon testing gave positive results in qPCR assays for eleven target genes tested. In general this work showed that the pig did not appear to be a representative carrier of this pathogen. Even though it was not possible to obtain positive samples for L. monocytogenes from the slaughtered and processing environment, obtaining final products (sausage) contaminated with pathogenic serogroups shows the health risk to the final consumer and the ability of this pathogen to persist in the pork meat processing environment once its presence has been detected in the final product. The isolates of L. mococytogenes obtained belong to phylogenetic lineages recognized for being highly adapted to the food processing environment, and showed ability to adhere to the tested surfaces under stress conditions. The recognized ability of this pathogen to form biofilm on surfaces commonly found in the meat processing environment could also be demonstrated, the tested isolates were able to form stainless steel biofilm in the presence of agents usually used for sausage preparations and also in the processing plant cleaning / disinfection procedures. The in silico analysis of cg MLST allowed the identification of genomic regions related to biofilm formation and adaptation to stressful environmental conditions in lineages I and II isolates. It is also possible to detect the action of this genetic machinery in the stainless steel biofilm formation under action of stress factors, by predicting the expression of eleven target genes performed by qPCR.

Assessment of longitudinal systolic function using Tissue Motion Annular Displacement and Global Longitudinal Strain in healthy dogs and dogs with mitral valve disease

Nessa dissertação foi avaliada a função sistólica longitudinal do ventrículo esquerdo em cães saudáveis e em cães com doença valvar mitral por meio do deslocamento tecidual do anel mitral (TMAD) e Strain Longitudinal Global (GLS). O TMAD é uma técnica de ecocardiografia baseada em Speckle Tracking que avalia a competência das fibras miocárdicas longitudinais por meio do deslocamento do anulo mitral em direção ao ápice durante a sístole ventricular. Para tanto, esse trabalho foi subdividido em introdução e dois capítulos. O primeiro capítulo investigou a utilização do TMAD como método diagnóstico da função longitudinal em cães saudáveis. Para isso, foram avaliados 153 cães de diversas raças, pesos e idades. Os resultados mostraram que o TMAD é uma excelente técnica para avaliação da função longitudinal em cães, com correlação com diversas variáveis de função sistólica obtidas pela ecocardiografia convencional e com o GLS, além de ser rapidamente executado e com baixa variabilidade intra e interobservador. No segundo capítulo, foram recrutados 126 cães em diversos estágios da doença valvar mitral e 46 cães saudáveis como grupo controle, a fim de comparar e avaliar o comportamento da função sistólica longitudinal durante a evolução da doença para quadros de insuficiência cardíaca. Os resultados mostraram que não houve disfunção sistólica longitudinal evidente com a progressão da doença valvar mitral, visto que os valores de TMAD foram maiores nos estágios B2 e no grupo sintomático que no grupo controle e no estágio B1 da referida afecção cardíaca. O TMAD e o GLS apresentaram boa repetibilidade e se correlacionaram com diversos parâmetros ecocardiográficos, como AE/Ao, diâmetro interno do ventrículo esquerdo em sístole e diástole, onda E mitral e relação E/TRIV, sugerindo que essas técnicas são influenciadas por pré e pós carga. O TMAD é uma técnica mais rápida para ser realizada e pode ser uma alternativa ao GLS para avaliar a função sistólica longitudinal em cães saudáveis e em cães com doença valvar mitral.

In this dissertation tissue motion annular displacement (TMAD) and global longitudinal strain (GLS) were used to assess the left ventricular longitudinal systolic function in healthy dogs and in dogs with mitral valve disease. TMAD is an echocardiography technique based on Speckle Tracking that evaluates the competence of the longitudinal myocardial fibers by displacement of the mitral annulus toward the apex during ventricular systole. This dissertation is subdivided in introduction and two chapters. The first chapter investigated the use of TMAD as a diagnostic method for evaluation of longitudinal function in healthy dogs. For this, 153 dogs of different breeds, varying body weights and ages were recruited. TMAD was demonstrated to be an excellent technique for the evaluation of longitudinal function in dogs. It correlated with GLS and with several surrogates of systolic function obtained by conventional echocardiography. Also, it was quickly obtained and had a low intra- and inter-observer variability. In the second chapter, 126 dogs at various stages of mitral valve disease and 46 healthy dogs as a control group were enrolled in order to compare and evaluate the behavior of longitudinal systolic function along the progression of mitral valve disease to a heart failure status. The results showed no evident longitudinal systolic dysfunction as the disease progressed. TMAD was higher in stage B2 and in the symptomatic dogs as compared to stage B1 and control groups. TMAD and GLS had a good repeatability and correlated with several echocardiographic parameters, such as LA/Ao, left ventricular internal diameter in systole and diastole, mitral E wave and E/IVRT, suggesting that changes in preload and afterload play a role in such parameters. TMAD is a faster technique to perform and may be an alternative to GLS to assess longitudinal systolic function in healthy dogs and in dogs with mitral valve disease.

AVALIAÇÃO ECOCARDIOGRÁFICA DA FUNÇÃO DO VENTRÍCULO DIREITO DE CÃES DA RAÇA BOXER COM CARDIOMIOPATIA ARRITMOGÊNICA DO VENTRÍCULO DIREITO: ESTUDO CASO-CONTROLE

A cardiomiopatia arritmogênica do ventrículo direito (CAVD) é uma doença de origem genética, muito prevalente em cães da raça Boxer. Histologicamente ocorre atrofia dos cardiomiócitos do ventrículo direito (VD) e consequente infiltração fibroadiposa, levando ao aparecimento de arritmias ventriculares. Mesmo sendo as alterações miocárdicas microscópicas em sua maioria, estudos recentes têm identificado disfunção contrátil do ventrículo direito, mesmo em estágios iniciais da doença em humanos, tanto por técnicas convencionais de ecocardiografia quanto por técnicas mais avançadas, como no caso do speckle tracking. Por isso, o objetivo deste estudo foi avaliar se há disfunção miocárdica de VD detectável pela ecocardiografia convencional e pela técnica de speckle tracking bidimensional em cães da raça Boxer portadores da CAVD. Para tanto, utilizou-se cães da raça Boxer com idade superior a quatro anos, distribuídos em dois grupos de acordo com o resultado da avaliação Holter (GC: < 50 EVs/24h, n=11 e GD: > 100 EVs/24h, n=11). Os animais foram submetidos a ecocardiografia e avaliou-se diâmetro e comprimento interno do VD em sístole e diástole, encurtamento fracional da área do VD (FAC), excursão sistólica do plano anular da tricúspide (TAPSE), velocidade miocárdica sistólica do ânulo lateral da tricúspide derivada do Doppler tecidual (S) e deformação (strain) e taxa de deformação (strain rate) longitudinal global da parede livre do VD, derivados da análise por speckle tracking. As variáveis foram comparadas entre os grupos pelo teste t de Student e de Mann-Whitney e a correlação entre variáveis ecocardiográficas convencionais e de speckle tracking e o número e severidade das arritmias pelo teste de correlação de Pearson, com nível de significância de 5%. Os grupos não foram estatisticamente diferentes e não houve correlação entre os dados. Os resultados da pesquisa demonstraram que a ecocardiografia, tanto na avaliação do VD por índices sistólicos convencionais quanto por aqueles derivados da técnica de speckle tracking não foram capazes de detectar disfunção miocárdica do VD em Boxers portadores de CAVD.

Arrhythmogenic right ventricular cardiomyopathy (ARVC) is a genetic disease with a high prevalence in Boxer dogs. Histologically, right ventricle (RV) cardiomyocytes atrophy occurs, and thus fibrofatty infiltration, triggering ventricular arrhythmias. Although the myocardial changes are mostly microscopic, recent studies in human beings have identified right ventricular systolic dysfunction even in the early stages of ARVC, both by conventional echocardiographic techniques and advanced methods, such as speckle tracking. Therefore, the aim of this study was to investigate if RV myocardial dysfunction is present in Boxers affected by ARVC, evaluated by conventional echocardiography and bidimensional speckle tracking technique. For this purpose, Boxers older than four years were recruited, and based on 24-hour Holter recording were divided in groups: GC:< 50 VPC/24h (n=11), or GD: > 100 VPC/24h (n=11). The following echocardiographic parameters were analyzed: RV internal dimension during systole and diastole; RV fractional area change (FAC); tricuspid annular plane systolic excursion (TAPSE); myocardial systolic velocity of lateral tricuspid annulus (S), and global longitudinal strain and strain rate. Groups were compared by Student t-test or Mann-Whitney test according distribution, and correlation between conventional and speckle tracking echocardiographic variables, as well as number and severity of the ventricular arrhythmias were accomplished by the Pearson test, assuming a level of significance at 5%. Groups were considered similar, and there was no correlation among the evaluated parameters. Our findings suggesting that the echocardiographic evaluation of RV, either by conventional and speckle tracking techniques, were not able to detect systolic myocardial dysfunction in Boxers affected by ARVC.

Fatores de risco associados à transmissão da cisticercose bovina em propriedades rurais rastreadas a partir de estabelecimento de abate

A cisticercose bovina é uma enfermidade de distribuição cosmopolita e de caráter zoonótico, causada pela forma larval Taenia saginata. A prevalência dessa zoonose em estabelecimentos de abate é responsável por consideráveis perdas econômicas para o país devido à condenação e ao aumento do custo de processamento das carcaças submetidas a aproveitamento condicional de bovinos infectados. Apesar da importância da cisticercose bovina para a saúde pública, para a saúde animal e para economia, a realidade epidemiológica da ocorrência dessa zoonose no Brasil é pouco conhecida. Dessa forma, esta pesquisa teve por objetivo realizar um levantamento epidemiológico e avaliar os principais fatores de risco relacionados com a transmissão da cisticercose bovina em animais enviados para abate provenientes de propriedades localizadas na região do Triângulo Mineiro, com base no rastreamento dos casos de cisticercose bovina detectados em um estabelecimento de abate do município de Uberlândia-MG. Foi realizado um estudo de corte transversal em 87 propriedades. A partir da Guia de Trânsito Animal (GTA) foram obtidos os endereços das propriedades incluídas no estudo e realizadas as coletas de sangue de 1024 bovinos. O diagnóstico sorológico realizado por triagem pelo teste Elisa indireto e Immunoblot para confirmação. Foi aplicado também um questionário epidemiológico sobre as condições sanitárias das propriedades, em relação ao sistema de criação animal, como por exemplo, manejo, origem dos animais, atividade predominante, fonte de abastecimento de água, higiene pessoal, padrão de alimentação e moradia das propriedades, a fim de determinar os possíveis fatores de risco associados a transmissão T. saginata. A prevalência encontrada foi de 5,1% (IC 95%= 3,74-6,42). Os fatores de risco identificados na área de estudo foram a origem dos bovinos (RC= 4,9 IC 95%= 1,5 15,8), sistema de pastejo (RC= 6,4 IC 95%= 2,0-20,2) e destino do esgoto das propriedades (RC= 3,6 IC 95%= 2,3-5,6). A partir da análise espacial foi identificado um aglomerado na região de estudo, com risco de infecção 2,85 vezes maior nas propriedades localizados dentro desse aglomerado quando comparado com as propriedades localizadas fora dessa área. Esses resultados mostram que a região do Triângulo mineiro é endêmica para a doença e medidas preventivas devem ser aplicadas em relação ao sistema de manejo e a estrutura infra sanitária das propriedades.

Bovine cysticercosis is a zoonotic, cosmopolitan disease caused by the larval form of Taenia saginata. The prevalence of this zoonosis in slaughterhouses is responsible for considerable economic losses to the country due to the condemnation and increase of the cost of processing the carcasses subject to the conditional use of infected cattle. Despite the importance of bovine cysticercosis to public health, animal health and economics, the epidemiological reality of the occurrence of this zoonosis in Brazil is poorly understood. Thus, this research aimed to carry out an epidemiological survey and evaluate the main risk factors related to the transmission of bovine cysticercosis in animals sent to slaughter from farms located in the Triângulo Mineiro region, based on the tracing of cases of bovine cysticercosis detected in a slaughter establishment in the municipalitiy of Uberlândia-MG. Conducted a cross-sectional epidemiological study on 87 farms. From the Animal Transit Guide (GTA), obtained the addresses of the farms included in the study and blood samples collected from 1024 cattle. The serological diagnosis performed by screening by the indirect Elisa test and Immunoblot for confirmation. Was also applied an epidemiological questionnaire on the sanitary conditions of farms, in relation to the animal husbandry system, such as management, origin of animals, predominant activity, source of water supply, personal hygiene, and feeding pattern and housing of the farms, in order to determine the possible risk factors associated with the transmission of T. saginata. The prevalence was 5.1% (95% CI = 3.74-6.42). The risk factors identified in the study area were the cattle origin (OR= 4.9/ 95% CI = 1.5 15.8), grazing system (OR= 6.4/ 95% CI = 2.0-20.2) and the destination of the farms' sewage (OR= 3,6/ 95% CI = 2.3-5.6). From the spatial analysis, in the study region identified a cluster, with a risk of infection 2.85 times higher in farms located inside this cluster when compared to farms located elsewhere. These results show that the Triângulo Mineiro region is endemic to the disease and preventive measures should be applied in relation to the management system and the infra-sanitary structure of the farms.

ASPECTOS COMPORTAMENTAIS RELATIVOS À DISTRIBUIÇÃO ESPACIAL DE CÃES COMUNITÁRIOS

A superpopulação de cães é um desafio para a saúde pública e o bem-estar animal. O objetivo deste trabalho é avançar no conhecimento do comportamento espacial de cães de rua. O estudo divide-se em cinco capítulos: (I) apresentação; (II) Cães de rua no Estado do Paraná: um olhar a partir das Secretarias Municipais de Meio Ambiente e de Saúde; (III) Construção de protótipo para rastreamento de cães nas ruas utilizando arduino; (IV) Características de deslocamento de cães de vizinhança em município de pequeno porte no sul do Brasil e (V) considerações finais. O estudo dos cães nas ruas sob o olhar das Secretarias Municipais de Meio Ambiente e Saúde colaborou no sentido de observar a atuação das secretarias frente ao manejo dos cães nas rua. A construção de um protótipo para rastreamento possibilitou a adequação de uma coleira de rastreamento para estudar a dinâmica espacial dos cães de rua. O estudo sobre as características do deslocamento de cães de vizinhança permitiu conhecer a área espacial dos cães nas ruas, estabelecendo parâmetros reais sobre locais de vida e de circulação dos cães nas ruas que estão sob os cuidados de um mantenedor. Os três estudos representam avanços para a elaboração de estratégias para o manejo de cães nas ruas.

Overpopulation of dogs is a challenge to public health and animal welfare. The objective of this work is to know the spatial behavior of street dogs. The study is divided into five chapters: (I) Presentation; (II) Street dogs in the State of Paraná:Municipal Secretariats of Environment and Health view; (III) Prototype construction to track dogs in the streets using arduino; (IV) Ranging characteristics of neighborhood dogs in a small municipality in southern Brazil and (V) Final considerations. The study of street dogs using Municipal Secretariats of Environment and Health view collaborated to observe about the performance of the secretariats regarding the management of the dogs. The construction of prototype for tracking allowed the adaptation of a tracking collar to study the spatial dynamics of dogs. The study on the characteristics of the displacement of neighboring dogs allowed an advance in the spatial knowledge of the dogs in the streets, establishing real parameters on the living and circulation areas of the dogs that are under the care of a maintainer. The three studies represent advances in the elaboration of strategies for the management of dogs on the streets.

Formação de cães de guarda da raça Pastor Maremano Abruzês na proteção de rebanhos Ovinos

Buscando estabelecer parâmetros acerca de cães da raça Pastor Maremano Abruzês objetivou-se verificar se apenas um bom componente genético é suficiente para obtenção de cães de guarda eficientes ou se existe a demanda por cuidados especiais para que o desempenho de seu ofício seja satisfatório. Foram acompanhados quatro cães de guarda de rebanhos da raça Pastor Maremano Abruzês, os quais foram introduzidos em quatro propriedades rurais produtoras de ovinos da raça Corriedale, onde três dos cães receberam formação e um foi o controle (não recebeu nenhum cuidado especial). Um questionário foi aplicado a ovinocultores da metade sul do Rio Grande do Sul durante uma importante feira de ovinos da região. As demais avaliações foram compostas por etogramas realizados em três fases do desenvolvimento dos cães e no período de parição do rebanho, o rastreamento dos cães com GPS, a contabilidade das perdas causadas por predadores nos três últimos anos antes e no ano seguinte da inserção do cão ao rebanho e o feedback dos produtores em relação aos cães. Os cães que receberam a formação mostraram-se melhores guardiões, prestando mais assistência e percorrendo maiores distâncias no período de parição do rebanho, estando mais atentos e demonstrando maior confiança mútua com os ovinos e sendo classificados como excelente ferramenta por seus donos. Apenas a genética não é suficiente para garantir a eficiência de cães de guarda da raça Pastor Maremano Abruzês, faz necessário lançar mão de técnicas e cuidados especiais para a formação satisfatória dos mesmos.

The objective of this study was to verify if only a good genetic component is sufficient to obtain efficient guard dogs or if there is a demand for special care to make the performance of the office satisfactory. Four shepherd dogs from the herds of the Maremma Abruzese sheep breed were introduced, which were introduced to four rural farms producing Corriedale sheep, where three dogs were trained and one was the control (no special care was given). A questionnaire was applied to sheep farmers in the southern half of Rio Grande do Sul during an important sheep fair in the region. The other evaluations were composed of three stages of development of the dogs and the period of herding, the tracking of dogs with GPS, the accounting of losses caused by predators in the last three years before and the year after the insertion of the dog to the herd and feedback from producers regarding dogs. The trained dogs were better guarded, more assisted and more distant during the lambing period, being more attentive and showing greater mutual confidence with sheep and being classified as an excellent tool by their owners. Only the genetic component is not sufficient to guarantee the efficiency of guard dogs of the Maremma Abruzesse breed, it is necessary to use special techniques and care for the satisfactory training of the dogs. Keywords: Animal

ADAPTAÇÃO VENTRICULAR ESQUERDA EM CÃES DE PASTOREIO

O coração atleta é o termo designado para caracterizar as adaptações cardíacas funcionais e anatômicas secundárias ao treinamento físico intenso e prolongado em humanos e animais. O ecocardiograma desempenha papel fundamental em distinguir as adaptações fisiológicas secundárias ao exercício, outrossim, as recentes técnicas introduzidas como Speckle Tracking (Ste) têm permitido obter informações relevantes a respeito da função cardíaca em humanos atletas. Desta forma, objetivou-se avaliar por meio do ecocardiograma, a estrutura e função sistólica do ventrículo esquerdo de cães praticantes de pastoreio há no mínimo quatro meses, cinco a seis vezes por semana, de quatro a oito horas por dia. Para tanto, 31 cães foram divididos em dois grupos: grupo pastoreio (GP, n=15) e grupo sedentário (GS, n=16), avaliados em um único momento, em repouso, e posteriormente submetidas a análise de variância, multivariada (ANOVA), dois por dois, em nível de significância à 95% (p<0,05) e tendência à 90% (p<0.1). Os cães do GP apresentaram maiores valores de diâmetro interno do ventrículo esquerdo ao final da sístole (GP: 2,72 ± 0,09; GS: 2,43 ± 0,09; P<0,034) indicando predomínio isotônico desta atividade. O volume sistólico apresentou-se maior no GP (GP: 28,51 ± 2,20; GS: 22,13 ± 2,17; P<0,049), enquanto o índice de performance miocárdica do ventrículo esquerdo (GP: 0,37 ± 0,03; GS: 0,46 ± 0,03; P<0,028) e o movimento sistólico septal (GP: 0,13 ± 0,01; GS: 0,15 ± 0,01; P<0,044) foram menores em relação ao GS, indicando melhor função cardíaca sisto-diastólica nos cães de pastoreio. Por meio da técnica Ste foi possível observar diminuição dos valores de strain e ou strain rate de alguns segmentos nos cães do GP, nos sentidos radial, circunferencial, longitudinal e transversal em relação ao GS, indicando menor necessidade de deformação miocárdica para a manutenção da função sistólica. Os resultados encontrados indicam que as variáveis ecocardiográficas convencionais (estruturais e funcionais), teciduais e provenientes da técnica STe, foram complementares e fundamentais para a compreensão das adaptações cardiovasculares em cães de pastoreio.

The "athlete's heart" is the term designed to characterize functional and anatomic cardiac adaptations secondary to intense and prolonged physical training in humans and animals. The echocardiogram plays a fundamental role in distinguishing the physiological adaptations secondary to exercise, also, the recent techniques introduced as Speckle Tracking Echocardiography have allowed us to obtain relevant information regarding cardiac function in human athletes. The aim of this study was to evaluate the structure and systolic function of the left ventricle of dogs practicing herding for at least four months, five to six times a week, from four to eight hours a day using echocardiography. For this, 31 dogs were divided into two groups: herding group (GP, n=15) and sedentary group (GS, n=16), evaluated in a single moment, at rest, and then submitted the multivariate analysis of variance (ANOVA), two by two, at the level of significance at 95% (p<0,05) and tendency to 90% (p<0.1). The GP dogs showed higher values of internal diameter of the ventricle at the end of systole (GP: 2,72 ± 0,09; GS: 2,43 ± 0,09; P<0,034), indicating isotonic predominance of this activity. At respect functional adaptations variables, systolic volume was higher in GP (GP: 28,51 ± 2,20; GS: 22,13 ± 2,17; P<0,049), differently from myocardial performance index of the left ventricle (GP: 0,37 ± 0,03; GS: 0,46 ± 0,03; P<0,028) and septal systolic moviment to GS (GP: 0,13 ± 0,01; GS: 0,15 ± 0,01; P<0,044). By means of the Ste technique, it was possible to observe a decrease in the strain and or strain rate values in GP dogs, in the radial, circumferential, longitudinal and transverse directions in relation to GS, indicating a lower need for myocardial deformation to maintain systolic function. The results indicate that the conventional echocardiographic variables (structural and functional) and tissue, obtained by the STe technique, were complementary and essential for the understanding of cardiovascular adaptations in herding dogs. ; ; ; ;