What is known about Tritrichomonas foetus infection in cats / O que sabemos sobre a infecção por Tritrichomonas foetus em gatos

Tritrichomonas foetus is a parasite that has been definitively identified as an agent of trichomonosis, a disease characterized by chronic diarrhea. T. foetus colonizes portions of the feline large intestine, and manifests as chronic and recurrent diarrhea with mucus and fresh blood, which is often unresponsive to common drugs. Diagnosis of a trichomonad infection is made by either the demonstration of the trophozoite on a direct fecal smear, fecal culture and subsequent microscopic examination of the parasite, or extraction of DNA in feces and amplification by the use of molecular tools. T. foetus is commonly misidentified as other flagellate protozoa such as Giardia duodenalis and Pentatrichomonas hominis. Without proper treatment, the diarrhea may resolve spontaneously in months to years, but cats can remain carriers of the parasite. This paper intends to serve as a source of information for investigators and veterinarians, reviewing the most important aspects of feline trichomonosis, such as trichomonad history, biology, clinical manifestations, pathogenesis, world distribution, risk factors, diagnosis, and treatment.(AU)

Tritrichomonas foetus é um parasito que foi identificado definitivamente como agente de tricomoníase, caracterizada por diarreia crônica. T. foetus coloniza porções do intestino grosso dos felinos e se manifesta como uma diarreia crônica e recorrente, com muco e sangue, geralmente irresponsiva às drogas comumente usadas no tratamento. O diagnóstico da infecção por tricomonadídeos é feito pela demonstração de trofozoítos no exame direto de fezes frescas, cultura fecal e subsequente exame microscópico ou extração do DNA do parasito na amostra fecal e amplificação, utilizando-se técnicas moleculares. T. foetus é comumente confundido com outros protozoários flagelados, como Giardia duodenalis e Pentatrichomonas hominis. Sem tratamento adequado, a diarreia pode cessar espontaneamente em meses ou anos, porém os gatos podem permanecer portadores do parasito. Esse artigo pretende servir como fonte de informação para pesquisadores e veterinários, revisando os mais importantes aspectos da tricomoníase felina, como histórico, biologia, manifestações clínicas, patogênese, distribuição mundial, fatores de risco, diagnóstico e tratamento.(AU)

Prevalence of Tritrichomonas foetus and Campylobacter fetus subsp. venerealis among bulls slaughtered in the state of Minas Gerais, Brazil / Prevalência de Tritrichomonas foetus, Campylobacter fetus subsp. venerealis e de Campylobacter fetus subsp. fetus em touros abatidos no Estado de Minas Gerais, Brasil

Bovine genital campylobacteriosis (BGC) and bovine genital trichomonosis (BGT) are globally widespread, predominantly sexually transmitted diseases that mainly affect herds in which natural mating takes place. Bulls serve as good epidemiological indicators for studying the causative agents of these diseases in cattle herds. The objective of the present work was to determine the prevalence of BGC and BGT among bulls sent to slaughterhouses in southern Minas Gerais, Brazil. Samples of preputial smegma from 200 sexually mature, non-castrated bulls of several ancestries were collected in 2013 from four regional slaughterhouses. The polymerase chain reaction (PCR) was employed to detect Tritrichomonas foetus, Campylobacter fetus subsp. fetus, and C. fetus subsp. venerealis. Isolation also was used aiming to diagnosis of BGT. All smegma samples were negative in culture for T. foetus. Molecular tests revealed 8% (16/200) of animals to be positive for T. foetus, 17.5% (35/200) for Campylobacter. fetus subsp. fetus, and 13.5% (27/200) for C. fetus subsp. venerealis. The results of the present study indicate that T. foetus, C. fetus subsp. venerealis, and C. fetus subsp. fetus are present among bulls slaughtered in southern Minas Gerais, and that BGC and BGT occur in this region. These diseases therefore need to be considered during differential diagnosis of reproductive diseases affecting cattle herds in which natural mating is employed.(AU)

A Campilobacteriose Genital Bovina (CGB) e a Tricomonose Genital Bovina (TGB) são doenças de transmissão predominantemente venérea, de ampla disseminação mundial, acometendo principalmente rebanhos submetidos à monta natural. Touros constituem bons indicadores epidemiológicos para a pesquisa destes agentes nos rebanhos. O objetivo deste estudo foi determinar a prevalência da CGB e da TGB em touros encaminhados a abatedouros da região sul de Minas Gerais, Brasil. Amostras de esmegma prepucial de 200 touros (machos não castrados em idade compatível com a monta) de diversas genealogias foram coletadas em quatro abatedouros da região, no ano de 2013. A reação em cadeia da polimerase (PCR) foi utilizada para detecção dos patógenos Tritrichomonas foetus, Campylobacter fetus subsp. fetus e Campylobacter fetus subsp. venerealis. O isolamento também foi utilizado para o diagnóstico da TGB. Todas as amostras analisadas apresentaram resultado negativo na cultura para isolamento de T. foetus. Por meio dos testes moleculares, verificaram-se prevalências de 8% (16/200) de animais positivos para T. foetus; 17,5% (35/200) para C. fetus subsp. fetus e de 13,5% (27/200) para C. fetus subsp. venerealis. Os dados do presente estudo apontaram a presença de T. foetus, C. fetus subsp. venerealis e C. fetus subsp. fetus em touros abatidos na região sul de Minas Gerais, evidenciando a ocorrência da TGB e da CGB nesta região e a necessidade de inclusão destas enfermidades no diagnóstico diferencial das doenças da reprodução em rebanhos bovinos submetidos à monta natural.(AU)

Pesquisa de Campylobacter fetus subsp. venerealis e Tritrichomonas foetus em sêmen de centrais de inseminação artificial e touros de propriedades destinadas à reprodução

Objetivou-se com este estudo pesquisar a ocorrência de Campylobacter fetus subsp. venerealis e Tritrichomonas foetus em touros. Foram coletadas 162 amostras de esmegma prepucial de reprodutores da raça nelore, procedentes de dez propriedades rurais do estado de Alagoas, 60 amostras de sêmen congelado procedentes de seis centrais de coleta e processamento de sêmen (CCPS) do País e 50 amostras de sêmen fresco procedentes de touros de propriedades destinadas à reprodução nos estados de Alagoas e Pernambuco. Para a pesquisa de DNA de C. fetus subsp. venerealis e Tritrichomonas foetus as amostras foram submetidas à técnica de Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) e para isolamento de Tritrichomonas foetus as amostras foram cultivadas em Meio Diamond Modificado (DMM). Para as amostras de esmegma prepucial, observou-se a ocorrência do DNA de C. fetus subsp. venerealis em 4,9% (8/162) dos touros analisados e 3,0% (5/162) para T. foetus. Não foi isolado T. foetus em nenhum dos touros analisados. Nas amostras de sêmen congelado e fresco não foi detectado DNA de nenhum dos agentes pesquisados. Os resultados deste estudo confirmam a presença de DNA de C. fetus subsp. venerealis e T. foetus em amostras de esmegma de touros no estado de Alagoas, Brasil. Desta forma, constata-se a necessidade da realização de exames laboratoriais em propriedades de bovinos destinadas à reprodução para um monitoramento e controle desses agentes.

The aim of this study was to investigate the occurrence of Campylobacter fetus subsp. venerealis and Tritrichomonas foetus in bulls. A total of 162 samples of preputial smegma of Nellore breeders were collected from ten rural properties in the state of Alagoas, 60 samples of frozen semen from six semen collection and processing centers (CCPS) from Brazil and 50 samples of fresh bull semen in the states of Alagoas and Pernambuco. For the DNA research of C. fetus subsp. venerealis and Tritrichomonas foetus, the samples were submitted to the Polymerase Chain Reaction (PCR) technique and for the isolation of Tritrichomonas foetus the samples were cultured in Modified Diamond Medium (DMM). From the preputial smegma samples, the DNA of C. foetus subsp. venerealis were identified in 4.9% (8/162) of the analyzed bulls and 3.0% (5/162) of T. foetus. T. foetus was not isolated in any of the samples bulls. In both frozen and fresh semen samples, no DNA was detected from any of the investigated agents. The results of this study confirm the presence of C. fetus subsp. venerealis and T. foetus in samples of smegma from bulls from Alagoas state, Brazil. Therefore, it is necessary perform out laboratory tests on breeding bulls for monitoring and control of these agents.

SITUAÇÃO EPIDEMIOLÓGICA DAS INFECÇÕES POR Tritrichomonas foetus E Campylobacter fetus subsp. venerealis EM BOVINOS NA MICRORREGIÃO GEOGRÁFICA DO BREJO PARAIBANO

Objetivou-se com este estudo determinar a situação epidemiológica das infecções por Tritrichomonas foetus e Campylobacter fetus subsp. venerealis em bovinos na microrregião do Brejo Paraibano, região Nordeste do Brasil, identificando os possíveis fatores de risco associados à infecção por T. foetus. Para pesquisa de T. foetus foram coletadas 349 amostras de muco cérvico vaginal e esmegma em bovinos de corte e leite (290 fêmeas e 59 machos) em 31 propriedades e para pesquisa de C. fetus subsp. venerealis foram coletadas 273 amostras de muco cérvico vaginal de vacas leiteiras procedentes de 19 propriedades. Para a pesquisa do DNA dos agentes utilizou-se a Reação em Cadeia da Polimerase e cultivo com meio Diamond Modificado para isolamento de T. foetus. Para análise dos fatores de risco associados à infecção por Tritrichomonas foetus na espécie bovina, foi realizada uma análise univariada das variáveis de interesse pelo teste qui-quadrado de Pearson, ou Exato de Fisher, quando necessário. Posteriormente foi realizada uma regressão logística considerando como variável dependente para Tricomonose a PCR (positivo ou negativo). Foram elaborados mapas temáticos com as distribuições das prevalências na área estudada. A prevalência da infecção por C. fetus subsp. venerealis em vacas foi 7,7% (21/273) (I.C. 95%; 4,8 - 11,5%) e 31,6% (6/19) das propriedades apresentaram ao menos um animal positivo. A prevalência da infecção por T. foetus foi 3,7% (13/349) (I.C. 95%; 2,1 6,4%). Em relação ao sexo, observou-se uma prevalência da infecção por T. foetus de 4,5% (fêmeas) e 0,0% (machos). A porcentagem de propriedades que apresentaram ao menos um animal positivo para T. foetus foi de 19,3% (6/31). No cultivo, nenhuma amostra foi positiva para T. foetus. O fator de risco associado à infecção por T. foetus identificado neste estudo foi contato de fêmeas com touros de outras propriedades (OR 5,9; I.C. 1,5 22,4). Este é o primeiro relato da infecção por C. fetus subsp. venerealis em vacas leiteiras nesta região do Brasil e o primeiro na microrregião do Brejo Paraibano a analisar a infecção por T. foetus em bovinos. Para diminuir os riscos de infecção, recomenda-se a adoção de um programa de inseminação artificial nas propriedades com sêmen de touros negativos, bem como um programa de vacinação contra a Campilobacteriose Genital Bovina para estimular a imunidade, com o intuito de reduzir a ocorrência da infecção e possíveis problemas reprodutivos. O contato das fêmeas com machos de outras propriedades deve ser evitado, principalmente quando não se conhece o status sanitário desses touros em relação a estas duas infecções.

The objective of this study was to determine the epidemiological situation of infection by Tritrichomonas foetus and Campylobacter fetus subsp. venerealis in cattle at Brejo Paraibano microregion, Northeastern Brazil, identifying the possible risk factors associated with T. foetus infection. For the study of T. foetus, 349 samples of cervico-vaginal mucus and smegma were collected in beef and dairy cattle (290 females and 59 males) in 31 farms and for C. fetus subsp. venerealis, 273 samples of cervico-vaginal mucus from dairy cows from 19 farms were collected. Polymerase Chain Reaction was used to identify the DNA of the agents and culture with Modified Diamond medium for isolation of T. foetus. For analysis of risk factors associated with Tritrichomonas foetus infection in bovine species, univariate analysis of the variables of interest was performed by the Pearson chi-squared test, or Fisher's exact test, when necessary. Subsequently, logistic regression was performed considering PCR (positive or negative) as the dependent variable for trichomoniasis. Thematic maps were prepared with prevalence distributions in the studied area. The prevalence of C. fetus subsp. venerealis infection in cows was 7.7% (21/273) (CI 95% 4.8% 11.5%), and 31.6% (6/19) of the farms showed at least one positive animal. The prevalence of T. foetus infection was 3.7% (13/349) (CI 95%, 2.1 - 6.4%). Regarding the gender, a prevalence of T. foetus infection of 4.5% (females) and 0.0% (males) was observed. The percentage of farms that had at least one positive animal for T. foetus was 19.3% (6/31). In culture, no samples were positive for T. foetus. The risk factor associated with T. foetus infection identified in this study was contact of females with bulls of other farms (OR 5.9; CI 1.5 - 22.4). This is the first report of C. fetus subsp. venerealis infection in dairy cows in this region of Brazil and the first in Brejo Paraibano microregion that analyzed T. foetus infection in cattle. To reduce risk of infection, it is recommended to adopt an artificial insemination program on the farms with negative bull semen, as well as a vaccination program against Bovine Genital Campylobacteriosis to stimulate immunity to reduce the occurrence of infection and possible reproductive problems. Contact of females with males of other farms should be avoided, especially when the health status of these bulls is not known regarding these two infections.

Construção de iniciadores e otimização de ensaios de PCR e de nested-PCR para a detecção específica de Tritrichomonas foetus

Tritrichomonas foetus is a pathogenic protozoan that causes a venereal disease in cattle known as bovine genital tricomonosis. In spite of the efficacy to recognize the target genomic DNA, the protocols so far developed for the diagnosis of this organism by PCR promote some inespecific amplifications or they are unable to discriminate T. foetus against other species within the genus. The objective of this study was to assess and optimize PCR and nested-PCR assays for the specific diagnosis of T. foetus, using novel primers selected from the alignment of sequences of the genes 18S rRNA, 5.8S rRNA, 28S rRNA and of the internal transcribed spacers of the rDNA (ITS1 and ITS2). A pair of primers was constructed for the genus-specific amplification of a 648 bp fragment and two others to amplify T. foetus species-specific fragments of 343 and 429 bp. No cross amplification was observed against Bos taurus genomic DNA neither against the DNA of usual bovine genital pathogens. Both, single and nested-PCR assays, presented analytical sensitivity to detect at least two T. foetus organisms.

Tritrichomonas foetus é um protozoário patogênico responsável por doença venérea em bovinos conhecida por tricomonose genital bovina. A tricomonose bovina é uma doença venérea causada pelo protozoário cujo habitat natural é o trato genital. Os protocolos já desenvolvidos para o diagnóstico deste parasito por PCR, apesar de serem eficazes na identificação do DNA genômico alvo, promovem algumas amplificações inespecíficas ou são incapazes de distinguir T. foetus das outras espécies do gênero. O presente trabalho foi desenvolvido com o objetivo de estabelecer e otimizar protocolos de ensaio de PCR e nested-PCR para o diagnóstico específico de T. foetus, empregando-se novos iniciadores, selecionados do alinhamento das seqüências dos genes 18S rRNA, 5,8S rRNA, 28S rRNA e dos espaços transcritos do rDNA (ITS1 e ITS2). Um par de iniciadores foi construído para amplificação gênero-específica de um fragmento de 648 pares de base e outros dois para a obtenção de produtos espécie- específicos de 343 e 429 pb. Nenhuma reação cruzada foi observada frente ao DNA genômico de Bos taurus ou de microrganismos responsáveis por infecções genitais. A sensibilidade dos ensaios de PCR e de nested-PCR apresentados neste estudo permitiu um limiar de detecção de até dois parasitos.

Prevalence of Tritrichomonas foetus and Campylobacter fetus subsp. venerealis among bulls slaughtered in the state of Minas Gerais, Brazil / Prevalência de Tritrichomonas foetus, Campylobacter fetus subsp. venerealis e de Campylobacter fetus subsp. fetus em touros abatidos no Estado de Minas Gerais, Brasil

Bovine genital campylobacteriosis (BGC) and bovine genital trichomonosis (BGT) are globally widespread, predominantly sexually transmitted diseases that mainly affect herds in which natural mating takes place. Bulls serve as good epidemiological indicators for studying the causative agents of these diseases in cattle herds. The objective of the present work was to determine the prevalence of BGC and BGT among bulls sent to slaughterhouses in southern Minas Gerais, Brazil. Samples of preputial smegma from 200 sexually mature, non-castrated bulls of several ancestries were collected in 2013 from four regional slaughterhouses. The polymerase chain reaction (PCR) was employed to detect Tritrichomonas foetus, Campylobacter fetus subsp. fetus, and C. fetus subsp. venerealis. Isolation also was used aiming to diagnosis of BGT. All smegma samples were negative in culture for T. foetus. Molecular tests revealed 8% (16/200) of animals to be positive for T. foetus, 17.5% (35/200) for Campylobacter. fetus subsp. fetus, and 13.5% (27/200) for C. fetus subsp. venerealis. The results of the present study indicate that T. foetus, C. fetus subsp. venerealis, and C. fetus subsp. fetus are present among bulls slaughtered in southern Minas Gerais, and that BGC and BGT occur in this region. These diseases therefore need to be considered during differential diagnosis of reproductive diseases affecting cattle herds in which natural mating is employed.

A Campilobacteriose Genital Bovina (CGB) e a Tricomonose Genital Bovina (TGB) são doenças de transmissão predominantemente venérea, de ampla disseminação mundial, acometendo principalmente rebanhos submetidos à monta natural. Touros constituem bons indicadores epidemiológicos para a pesquisa destes agentes nos rebanhos. O objetivo deste estudo foi determinar a prevalência da CGB e da TGB em touros encaminhados a abatedouros da região sul de Minas Gerais, Brasil. Amostras de esmegma prepucial de 200 touros (machos não castrados em idade compatível com a monta) de diversas genealogias foram coletadas em quatro abatedouros da região, no ano de 2013. A reação em cadeia da polimerase (PCR) foi utilizada para detecção dos patógenos Tritrichomonas foetus, Campylobacter fetus subsp. fetus e Campylobacter fetus subsp. venerealis. O isolamento também foi utilizado para o diagnóstico da TGB. Todas as amostras analisadas apresentaram resultado negativo na cultura para isolamento de T. foetus. Por meio dos testes moleculares, verificaram-se prevalências de 8% (16/200) de animais positivos para T. foetus; 17,5% (35/200) para C. fetus subsp. fetus e de 13,5% (27/200) para C. fetus subsp. venerealis. Os dados do presente estudo apontaram a presença de T. foetus, C. fetus subsp. venerealis e C. fetus subsp. fetus em touros abatidos na região sul de Minas Gerais, evidenciando a ocorrência da TGB e da CGB nesta região e a necessidade de inclusão destas enfermidades no diagnóstico diferencial das doenças da reprodução em rebanhos bovinos submetidos à monta natural.