Efeito da endometrose no potro / The influence of endometrosis on Foal Health

O presente artigo teve por objetivo revisar o papel da endometrose no ambiente uterino e seus efeitos sobre o potencial atlético dos potros gerado neste ambiente. Possibilidades de tratamento para a endometrose, como a terapia celular e a utilização da transferência de embriões são discutidos.(AU)

This paper aimed to review the role of endometrosis in the uterine environmentand its effects on the athletic potential of foals generated in this environment. Possibilities for treatment, such as cell therapy and the use of embryo transfer are discussed.(AU)

Administration of GnRH on the day of fixed-time artificial insemination (FTAI) and melengestrol acetate (MGA) administration after ftai in non-suckling nelore cattle / Aplicação de GnRH no dia da inseminação artificial em tempo fixo (IATF) e administração de acetato de melengestrol (MGA) após iatf em vacas nelore solteiras

The present study evaluated the effect of administering buserelin acetate (GnRH) at the time of fixed-time artificial insemination (FTAI), along with the effect of oral administration of melengestrol acetate (MGA) after FTAI on conception rates in non-suckling Nelore cattle. In Experiment I, the effect of GnRH application at the time of FTAI was evaluated, as was administration of MGA from the 13th through the 18th day following FTAI (D24 to D29 after the initiation of the FTAI protocol). Experiment I was performed in 215 non-suckling cattle of the Nelore breed, divided into four experimental groups: Control group: 56 cows subjected to FTAI without GnRH injection; GnRH group: 51 cows subjected to GnRH at the time of FTAI; MGA Group: 57 cows subjected to FTAI without the application of GnRH with mineral supplementation and the addition of 2.28 g of MGA® Premix per cow per day from D24 to D29 after the initiation of the FTAI protocol; MGA and GnRH group: 51 cows subjected to GnRH injection at the time of FTAI, with mineral supplementation and the addition of 2.28 g of MGA® Premix per cow per day from D24 to D29 after the initiation of the FTAI protocol. In Experiment II, the effect of providing MGA five to ten days after FTAI was evaluated in 196 non-suckling pluriparous Nelore cows, divided into two groups: Control group: 104 cows subjected to FTAI, not supplemented with MGA; treated group: 92 cows supplemented with the addition of 2.28 g of MGA® Premix per cow per day from D15 to D20 after the initiation of the FTAI protocol. Diagnosis of gestation was carried out 45 days after FTAI. Both experiments were conducted using a completely randomised design and analysed via the SAS MIXED procedure.[...](AU)

Avaliou-se o efeito da aplicação de Acetato de Buserelina (GnRH) no momento da IATF e o efeito do fornecimento, via oral, de Acetato de Melengestrol (MGA) após IATF, sobre a taxa de concepção em vacas solteiras da raça Nelore. No Experimento I, avaliou-se o efeito da aplicação de GnRH no momento da IATF e do fornecimento de MGA do décimo terceiro ao décimo oitavo dia após a IATF (D24 ao D29 após o início do protocolo de IATF), em 215 vacas solteiras da raça Nelore divididas em quatro grupos experimentais; grupo Controle: 56 vacas submetidas à IATF sem aplicação de GnRH; Grupo GnRH: 51 vacas submetidas à aplicação de GnRH no ato da IATF; Grupo MGA: 57 vacas submetidas à IATF sem aplicação de GnRH e suplementação mineral, com adição de 2,28g de MGA® Premix/vaca/dia do D24 ao D29 após o início do protocolo de IATF; Grupo MGA e GnRH: 51 vacas submetidas à aplicação de GnRH no momento da IATF e suplementação mineral com adição de 2,28g MGA® Premix/vaca/dia do D24 ao D29 após o início do protocolo de IATF. No Experimento II, avaliou-se o efeito do fornecimento de MGA cinco a dez dias após a IATF em 196 vacas pluríparas solteiras da raça Nelore, divididas em dois grupos experimentais; grupo Controle: 104 vacas submetidas à IATF sem fornecimento de MGA, e grupo Tratado: 92 vacas suplementadas, com adição de 2,28g de MGA® Premix/vaca/dia do D15 ao D20 após o início do protocolo de IATF. Realizou-se diagnóstico de gestação 45 dias após a IATF. Ambos os Experimentos foram conduzidos em delineamento inteiramente casualizado, analisados através do procedimento MIXED do SAS. No Experimento I, o grupo controle obteve menor taxa de concepção (32,1%) comparado com os demais grupos avaliados quando fornecido MGA após a IATF (45,6%), GnRH no momento da IATF (50,9%), bem como a associação dos dois tratamentos (50,9%) (P<0,05). No experimento II, o grupo controle obteve maior taxa de concepção (40,38%) quando comparado com o grupo que recebeu MGA pós-IATF (18,48%) (P<0,05).[...](AU)

Efeito da endometrose no potro / The influence of endometrosis on Foal Health

O presente artigo teve por objetivo revisar o papel da endometrose no ambiente uterino e seus efeitos sobre o potencial atlético dos potros gerado neste ambiente. Possibilidades de tratamento para a endometrose, como a terapia celular e a utilização da transferência de embriões são discutidos.

This paper aimed to review the role of endometrosis in the uterine environmentand its effects on the athletic potential of foals generated in this environment. Possibilities for treatment, such as cell therapy and the use of embryo transfer are discussed.

Administration of melengestrol acetate after fixed time artificial insemination in lactating Nelore cows / Administração de acetato de melengestrol após inseminação artificial em tempo fixo em vacas nelore lactantes

The objective of the present study was to assess the effect of administration of Melengestrol Acetate (MGA® Premix) after FTAI, on the conception rate in lactating Nelore breed cows. Experiment I, assessed the effect of administration of 2.28 g MGA/cow/day, from day 13 (D13) until day 18 (D18) after FTAI. The cow were divided into two groups, Group I (n=83, control) that cows were submitted just to FTAI and Group II (n=104, treated) that cows received MGA after FTAI. Experiment II, assessed the effect of administration of 2.28g MGA/cow/day, from day 5 (D5) until day 10 (D10) after FTAI. The cow were divided into two groups, Group I (n=94, control) that cows were submitted just to FTAI and Group II (n=100, treated) that cows received MGA after FTAI. Gestation was diagnosed in both experiments 45 days after FTAI. The conception rates were analyzed by Qui-Square test. In experiment I, The conception rates were 42,16% for control group and 50,0% for treated group (p>0,05). In Experiment II, the conception rate of control group (47,87%) was higher than treated group (28,0%). It was conclude that administration of MGA®Premix from D13 until D18 after FTAI didnt affect the conception rate. However, when administered from D5 until D10, reduced the conception rate in lactating Nelore breed cows.(AU)

Objetivou-se com este estudo avaliar o efeito do fornecimento de Acetato de Melengestrol (MGA®Premix) após IATF (inseminação artificial em tempo fixo), sobre a taxa de concepção em vacas paridas da raça Nelore. Experimento I, avaliou-se o efeito do fornecimento de 2,28g de MGA/ vaca/ dia, do dia 13 (D13) ao dia 18 (D18) após a IATF. As vacas foram divididas em dois grupos, sendo o Grupo I (n=83, controle) que foi realizado apenas IATF e Grupo II (n=104, tratado) que foi fornecido o MGA após a IATF. Experimento II, avaliou-se o efeito do fornecimento de 2,28g de MGA/ vaca/ dia, do dia cinco (D5) ao dia 10 (D10) após a IATF. As vacas foram divididas em dois grupos, sendo o Grupo I (n=94, controle) que foi realizado apenas IATF e Grupo II (n=100, tratado) que foi fornecido o MGA após a IATF. O diagnóstico de gestação foi realizado 45 dias após a IATF em ambos os experimentos. As taxas de concepção foram comparadas pelo teste de Qui-quadrado. No Experimento I, as taxas de concepção foram de 42,16% para o grupo controle e 50,0% para o grupo tratado. No Experimento II, a taxa de concepção do grupo controle (47,87%) foi significativamente maior do que o grupo tratado (28,0%). Conclui-se que o fornecimento de MGA®Premix, administrado do D13 ao D18 após a IATF não afetou a taxa concepção. Entretanto, quando fornecido do D5 ao D10, reduziu a taxa de concepção em vacas Nelore paridas.(AU)

Administração de acetato de melengestrol após inseminação artificial em tempo fixo em vacas Nelore lactantes

The objective of the present study was to assess the effect of administration of Melengestrol Acetate (MGA® Premix) after FTAI, on the conception rate in lactating Nelore breed cows. Experiment I, assessed the effect of administration of 2.28 g MGA/cow/day, from day 13 (D13) until day 18 (D18) after FTAI. The cow were divided into two groups, Group I (n=83, control) that cows were submitted just to FTAI and Group II (n=104, treated) that cows received MGA after FTAI. Experiment II, assessed the effect of administration of 2.28g MGA/cow/day, from day 5 (D5) until day 10 (D10) after FTAI. The cow were divided into two groups, Group I (n=94, control) that cows were submitted just to FTAI and Group II (n=100, treated) that cows received MGA after FTAI. Gestation was diagnosed in both experiments 45 days after FTAI. The conception rates were analyzed by Qui-Square test. In experiment I, The conception rates were 42,16% for control group and 50,0% for treated group (p>0,05). In Experiment II, the conception rate of control group (47,87%) was higher than treated group (28,0%). It was conclude that administration of MGA®Premix from D13 until D18 after FTAI didn't affect the conception rate. However, when administered from D5 until D10, reduced the conception rate in lactating Nelore breed cows.

Objetivou-se com este estudo avaliar o efeito do fornecimento de Acetato de Melengestrol (MGA®Premix) após IATF (inseminação artificial em tempo fixo), sobre a taxa de concepção em vacas paridas da raça Nelore. Experimento I, avaliou-se o efeito do fornecimento de 2,28g de MGA/ vaca/ dia, do dia 13 (D13) ao dia 18 (D18) após a IATF. As vacas foram divididas em dois grupos, sendo o Grupo I (n=83, controle) que foi realizado apenas IATF e Grupo II (n=104, tratado) que foi fornecido o MGA após a IATF. Experimento II, avaliou-se o efeito do fornecimento de 2,28g de MGA/ vaca/ dia, do dia cinco (D5) ao dia 10 (D10) após a IATF. As vacas foram divididas em dois grupos, sendo o Grupo I (n=94, controle) que foi realizado apenas IATF e Grupo II (n=100, tratado) que foi fornecido o MGA após a IATF. O diagnóstico de gestação foi realizado 45 dias após a IATF em ambos os experimentos. As taxas de concepção foram comparadas pelo teste de Qui-quadrado. No Experimento I, as taxas de concepção foram de 42,16% para o grupo controle e 50,0% para o grupo tratado. No Experimento II, a taxa de concepção do grupo controle (47,87%) foi significativamente maior do que o grupo tratado (28,0%). Conclui-se que o fornecimento de MGA®Premix, administrado do D13 ao D18 após a IATF não afetou a taxa concepção. Entretanto, quando fornecido do D5 ao D10, reduziu a taxa de concepção em vacas Nelore paridas.

Administration of melengestrol acetate after fixed time artificial insemination in lactating Nelore cows / Administração de acetato de melengestrol após inseminação artificial em tempo fixo em vacas nelore lactantes

The objective of the present study was to assess the effect of administration of Melengestrol Acetate (MGA® Premix) after FTAI, on the conception rate in lactating Nelore breed cows. Experiment I, assessed the effect of administration of 2.28 g MGA/cow/day, from day 13 (D13) until day 18 (D18) after FTAI. The cow were divided into two groups, Group I (n=83, control) that cows were submitted just to FTAI and Group II (n=104, treated) that cows received MGA after FTAI. Experiment II, assessed the effect of administration of 2.28g MGA/cow/day, from day 5 (D5) until day 10 (D10) after FTAI. The cow were divided into two groups, Group I (n=94, control) that cows were submitted just to FTAI and Group II (n=100, treated) that cows received MGA after FTAI. Gestation was diagnosed in both experiments 45 days after FTAI. The conception rates were analyzed by Qui-Square test. In experiment I, The conception rates were 42,16% for control group and 50,0% for treated group (p>0,05). In Experiment II, the conception rate of control group (47,87%) was higher than treated group (28,0%). It was conclude that administration of MGA®Premix from D13 until D18 after FTAI didnt affect the conception rate. However, when administered from D5 until D10, reduced the conception rate in lactating Nelore breed cows.

Objetivou-se com este estudo avaliar o efeito do fornecimento de Acetato de Melengestrol (MGA®Premix) após IATF (inseminação artificial em tempo fixo), sobre a taxa de concepção em vacas paridas da raça Nelore. Experimento I, avaliou-se o efeito do fornecimento de 2,28g de MGA/ vaca/ dia, do dia 13 (D13) ao dia 18 (D18) após a IATF. As vacas foram divididas em dois grupos, sendo o Grupo I (n=83, controle) que foi realizado apenas IATF e Grupo II (n=104, tratado) que foi fornecido o MGA após a IATF. Experimento II, avaliou-se o efeito do fornecimento de 2,28g de MGA/ vaca/ dia, do dia cinco (D5) ao dia 10 (D10) após a IATF. As vacas foram divididas em dois grupos, sendo o Grupo I (n=94, controle) que foi realizado apenas IATF e Grupo II (n=100, tratado) que foi fornecido o MGA após a IATF. O diagnóstico de gestação foi realizado 45 dias após a IATF em ambos os experimentos. As taxas de concepção foram comparadas pelo teste de Qui-quadrado. No Experimento I, as taxas de concepção foram de 42,16% para o grupo controle e 50,0% para o grupo tratado. No Experimento II, a taxa de concepção do grupo controle (47,87%) foi significativamente maior do que o grupo tratado (28,0%). Conclui-se que o fornecimento de MGA®Premix, administrado do D13 ao D18 após a IATF não afetou a taxa concepção. Entretanto, quando fornecido do D5 ao D10, reduziu a taxa de concepção em vacas Nelore paridas.

Mediadores inflamatórios e estradiol: regulação e efeitos sobre o trato reprodutivo de ruminantes

Mediadores inflamatórios estão envolvidos no controle da reprodução em processos fisiológicos como ovulação e luteólise, bem como em processos patológicos, em resposta à lesões e/ou infecções. Em um primeiro estudo, objetivou-se comparar a resposta inflamatória em ovelhas submetidas à coleta de embrião transcervical (TC) ou por laparotomia (LP). Embora as técnicas não tenham diferido quanto à indução de marcadores inflamatórios, observou-se um aumento nos níveis de haptoglobina (D3 e D6), paraoxonase 1 (PON1; D3) e proteínas totais (D9) após as coletas. Conclui-se que ambos procedimentos induzem uma reação inflamatória, sendo a via TC indicada para animais com uma conformação cervical adequada, pois a técnica LP limita o número de procedimentos. Em um segundo estudo, investigou-se o efeito do tratamento com prostaglandina F2 (PGF) sobre marcadores de luteinização/ovulação e expressão gênica do endométrio. Observou-se a presença de RNAm do receptor de PGF (PTGFR) nas células da granulosa (CG) de folículos ao redor da divergência, sendo mais abundante no folículo dominante. Não se observou um efeito da PGF sobre o diâmetro folicular, níveis intrafoliculares de estradiol ou progesterona, bem como sobre a abundância de RNAm de enzimas esteroidogênicas nas CG. A PGF não foi capaz de induzir a ovulação em vacas suplementadas com progesterona e não afetou a expressão dos genes avaliados no endométrio. Além dos mediadores inflamatórios, hormônios esteroides são os principais reguladores das funções reprodutivas. Portanto, em um terceiro estudo, foram identificados genes diferentemente expressos nas células endometriais de vacas com diferentes níveis de estrógeno intrafolicular no proestro/estro como PPARG e OTR. Além disso, observou-se correlação positiva entre a abundância de RNAm de IGFBP3, OTR, LTF e GREB1 e níveis de estradiol intrafoliculares. Para isolar o efeito do estradiol sobre as células epiteliais endometriais, foi utilizada uma linhagem celular. Após identificação dos receptores, o tratamento com estrógeno induziu um aumento (10 min) e posterior diminuição (15 e 30 min) na fosforilação da MAPK, sugerindo ativação da rota. A fosforilação da AKT diminui após (30 e 60 min) o tratamento com estrógeno. Observou-se menor expressão dos genes CCND1 e CCND2 e aumento na expressão de PCNA 12 h após o tratamento com estrógeno, indicando um efeito sobre o ciclo celular, o que foi confirmado através de um ensaio de proliferação. O presente estudo fornece subsídios para mensurar o impacto dos procedimentos de coleta de embriões sobre mediadores inflamatórios em ovelhas. Ainda, contraria a hipótese de que a PGF possui um efeito direto sobre as células foliculares. O modelo in vitro utilizado é apropriado para estudar os efeitos do estrógeno sobre as células epiteliais do endométrio bovino.

Inflammatory mediators are involved in the control of physiological reproductive processes such as ovulation and luteolysis, as well as pathological processes, in response to lesions and/or infections of the first study. The objective was to compare inflammatory responses in sheep submitted to embryo collection by trnascervical (TC) or laparotomy (LP) route. Techniques did not differ in inducting inflammatory markers, but there was an increase in haptoglobin (D3 and D6), paraoxonase 1 (PON1; D3) and total protein (D9) influenced by the collection procedure. Thus, both procedures trigger inflammatory reaction and the TC pathway is indicated for animals with adequate cervical conformation, since the LP technique limits the number of procedures. In a second study, we evaluated the effect of treatment with prostaglandin F2 (PGF) on luteinization/ovulation markers and endometrial gene expression. The presence of PGF receptor mRNA (PTGFR) in the granulosa cells (CG) of follicles near to divergence was observed, being more abundant in the dominant follicle. There was no effect of PGF on follicle diameter, intrafollicular levels of estradiol or progesterone, and on the abundance of mRNA of steroidogenic enzymes in CG. PGF was not able to induce ovulation in cows supplemented with progesterone and did not affect the expression of the evaluated genes in the endometrium. Therefore, besides inflammatory mediators, steroid hormones are the main regulators of reproductive functions. In a third study, genes with distinct expression in the endometrial cells of cows were identified, with different levels of intrafollicular estrogen in proestrus/estrus, such as PPARG and OTR. In addition, a positive correlation was observed between the relative abundance of IGFBP3, OTR, LTF and GREB1 mRNA and intrafollicular estradiol levels. A cell line culture was used to isolate the effect of estradiol on endometrial epithelial cells. After the identification of the estradiol receptor, treatment with estrogen induced an increase (10 min) and a subsequent decrease (15 and 30 min) in phosphorylation of the MAPK signaling pathway. The phosphorylation of the AKT route decreases after (30 and 60 min) estrogen treatment. There was a decrease in the expression of the CCND1 and CCND2 genes and an increase in the PCNA expression 12 h after estrogen treatment, indicating an effect on the cell cycle, which was confirmed by a proliferation assay. The present study provides subsidies to measure the impact of embryo collection procedures on inflammatory mediators in sheep. Furthermore, it contradicts the hypothesis that PGF has a direct effect on follicular cells. The tested in vitro model is appropriate to study the effects of estrogen on bovine endometrial epithelial cells.

Efeito do ambiente endócrino peri-ovulatório na qualidade do ambiente uterino em vacas de corte: regulação no metabolismo das poliaminas, estresse oxidativo e proliferação celular

O objetivo do presente trabalho foi comparar os efeitos dos distintos ambientes endócrinos peri-ovulatórios na proliferação celular, no metabolismo das poliaminas e no ambiente redox do útero bovino durante o diestro inicial. Para isso, controlou-se farmacologicamente o crescimento do folículo objetivando induzir a ovulação de folículos de maior diâmetro (grupo folículo grande-CL grande, FG-CLG) ou de menor diâmetro (grupo folículo pequeno-CL pequeno, FP-CLP). Trinta vacas multíparas Nelore, foram pré-sincronizadas, metade destes animais foram destinados para o grupo FG-CLG e receberam uma dose de prostaglandina F2 (PGF) e um dispositivo de progesterona, juntamente com benzoato de estradiol no D10. No momento da retirada dos dispositivos de progesterona (entre D1,75 e D2,5) todos os animas receberam uma dose de PGF. A ovulação foi induzida com acetato de buserelina (D0). O que diferiu entre os tratamentos foi que os animais do grupo FP-CLP não receberam uma dose de PGF no D10 e o momento da retirada dos dispositivos foi entre D1,25 e o D1,5. No D7 um subgrupo dos animais foi abatido e amostras de endométrio e lavado uterino foram coletadas para as análises laboratoriais. Os animais do grupo FG-CLG apresentaram no D0 um folículo 1,2 vezes maior e estradiol 2,3 vezes maior em relação ao FP-CLP. Consequentemente, as vacas do FG-CLG desenvolveram CL maiores (1,6 vezes) e mais pesados (1,4 vezes) o que proporcionou no D7 concentrações de P4 1,5 vezes maior em relação ao FP-CLP. Primeiramente, uma análise do transcriptoma endometrial foi realizada e indicou que processos celulares como proliferação, composição de matrix extracelular, processos metabólicos e processos de oxirredução foram afetados pelo modelo experimental. Para avaliar a condição proliferativa e/ou apoptótica endometrial análises de imunomarcação foram realizadas (Ki-67, marcador de proliferação e caspase 3 ativada, marcador de apoptose). O número de células positivas para Ki-67 no epitélio luminal foi 4,1 vezes maior no FP-CLP, porém não houve diferença na marcação da caspase 3 ativada. No epitélio glandular tanto o ki-67 (1,4 vezes) como a caspase 3 ativada (2,6) estavam aumentados no grupo FG-CLG. Em relação à síntese das poliaminas não houve diferença entre os grupos nas concentrações das poliaminas e abundância dos transcritos e proteína das enzimas de síntese. Por outro lado, foi detectada uma forte associação entre a expressão do gene SAT1 com o gene ODC1 (r2: 0,73; P<0,01) e também entre os genes AZIN1 e AMD1 (r2: 0,61; P<0,01). Quanto ao ambiente redox não houve diferença entre os tratamentos no lavado uterino mas no endométrio, no grupo FP-CLP, houve redução da atividade das enzimas Catalase (0,5 vs 0,79 U/mg proteína; P<0,01), glutationa peroxidase (2,0 vs 2,43 nmol NADPH/min/mg proteína; P<0,01), aumento da atividade da Superóxido dismutase (44,77 vs 37,76 U; P=0,04) e da peroxidação lipídica (28,5 vs 17,43 nmol/MDA/mg proteína; P<0,001), mas sem alterar as quantidades da espécies reativas. De acordo com os resultados obtidos, pode-se concluir que o ambiente endócrino peri-ovulatório regula a proliferação endometrial mas sem alterar a via de síntese das poliaminas e modula também o ambiente redox uterino.

This work aimed to compare the effects of the different periovulatory endocrine milieu on the several molecular pathways: as cellular proliferation, polyamine metabolism and redox environment of the bovine uterus during the early diestrus. For this, we controlled pharmacologically the follicular growth to induce the ovulation of larger follicle (Large Follicle-Large Corpus lutem group LF-LCL) or smaller follicle (Small follicle-Small Corpus luteum group SF-SCL). Thirty multiparous Nelore cows were synchronized. Fifteen cows were assigned for each group. On the LF-LCL, the cows received a dose of prostaglandin F2 (PGF), a progesterone device and an estradiol benzoate on D10. On the time of progesterone device was withdraw (between D1.75 e D2.5) all the animals received a dose of PGF. The ovulation was induced with buserelin acetate (D0). The unique difference between the groups was that animals of SF-SCL did not received a dose of PGF on D10 and the progesterone device withdraw was between D1.25 e o D1.5. On D7 a subset of animals was slaughtered and the endometrial and uterine washings samples were collected for laboratorial analyses. On D0 the animals of LF-LCL had a 1.2 times larger follicles and 2.3 times higher levels of estradiol than animals of SF-SCL. Firstly, an endometrial transcriptome analyses was realized and suggested that several cellular processes as proliferation, metabolic processes and oxi-reduction processes were affected by experimental model. To evaluate the proliferative and/or apoptotic condition, endometrial immunohistochemistry analyses were realized (ki-67, proliferation marker and caspase 3 activated, apoptose marker). The number of Ki-67 positive cells in the luminal epithelium was 4.1 times higher on SF-SCL. However, there was no difference in caspase 3 activated analyses. On the glandular epithelium both ki-67 (1.4) and caspase 3 activated (2.6) were increased on LF-LCL. About polyamine synthesis pathway there was no difference in polyamines levels and gene and protein expression of synthesis enzymes between the groups. In other hand, it was detected a strong association between SAT1 gene expression and ODC1 gene expression (r2: 0.73; P<0.01) and also between AZIN1 and AMD1 gene expression (r2: 0.61; P<0.01).

Quantificação do interferon-tau durante o reconhecimento materno da gestação em fêmeas bovinas Bos taurus indicus / Quantification of interferon-tau during the maternal recognition of pregnancy in Bos taurus indicus cows

Durante o período crítico do reconhecimento materno, compreendidoentre o 15º e 19º dias da gestação, o concepto deve sintetizarcompetentemente moléculas capazes de bloquear a síntese deprostaglandina F2α (PGF2α) e a luteólise. Em bovinos, a principalmacromolécula protéica envolvida em tal bloqueio é o interferon-tau(IFN-τ). Durante o período crítico, falhas neste reconhecimentodeterminam à mortalidade embrionária em até 40% das fêmeasinseminadas. Informações sobre o IFN-τ em animais Bos taurus indicus,ainda são restritas. Este estudo objetivou uma avaliação quantitativado IFN-τ durante o período crítico do reconhecimento materno, emlavados uterinos obtidos por sonda de Foley (dias 14, 16 e 18 pósestro) ou post-mortem (dia 18 pós-estro). Para tanto, foram utilizadasfêmeas multíparas azebuadas (Bos taurus indicus), cíclicas ou prenhes,nos dias 14, 16 e 18 pós-estro. Para a obtenção dos lavados, os úterosforam infundidos com solução de Ringer Simples. Os lavados foramconcentrados por ultra-filtração e liofilizados. As macromoléculasprotéicas foram separadas por Eletroforese Unidimensional SDSPAGE, em gel com 15% de poliacrilamida. A quantificação doIFN-τ nos lavados uterinos foi realizada por Western-Blotting edensitometria. Tanto nos lavados obtidos por sonda de Foley quantonos post-mortem foi possível observar bandas de proteínas queapresentaram reação cruzada com os anticorpos utilizados no WesternBlotting. O IFN-τ foi detectado apenas nos lavados uterinospost-mortem de vacas prenhes (P<0,05). A densidade óptica não foiafetada pelo dia do período crítico, estado (cíclico ou prenhe) ouinteração dia x estado. Nos lavados post-mortem não houve efeito depeso do concepto ou concentração de progesterona plasmática no diado lavado na densidade da banda protéica referente ao IFN-τ .(AU)

During the critical period of the maternal recognition, which occursbetween days 15 and 19 of pregnancy, the conceptus must competentlysynthesize molecules capable of blocking the synthesis ofprostaglandin F2α (PGF2α) and luteolysis. In cattle, the majormacromolecule involved in suck blockage is the protein interferontau (IFN-τ). During the critical period, failures in the recognition ofpregnancy determine embryonic mortality on up to 40% ofinseminated cows. Data about IFN-τ in Bos taurus indicus are stillscarce. Objective of this study was to quantitatively evaluate the presenceof IFN-τ during the critical period for maternal recognition ofpregnancy in uterine flushings obtained in vivo by Foley catheter (Days14, 16 and 18 post estrus) or post-mortem (Day 18 post estrus).Multiparous, cyclic or pregnant zebu cows (Bos taurus indicus) on days14, 16 and 18 post estrus were used for in vivo or post mortem uterineflushing collection. In both cases, a Ringer solution was used to washthe uterus of cows. Uterine flushings were concentrated by ultrafiltration and lyophilized. Proteins were separated by one-dimensionalelectrophoresis (SDS-PAGE) in a 15% polyacrilamide gel. Interferontau quantification in uterine flushings was performed by westernblotting and densitometry. Non-specific protein bands were observedin both in vivo and post mortem uterine flushings. Interferon-tau wasdetected only in uterine flushings obtained from pregnant cowspost-mortem (P<0.05). Optical density of protein bands was not affectedby the day of the critical period, state (cyclic or pregnant) or interactionday x state. There was no effect of the conceptus weight orprogesterone concentration on the day of uterine flushing collectionin the optical density of the IFN-τ protein band.(AU)

Caracterização protéica do micro-ambiente uterino durante o período crítico em bovinos / Characterization of the protein profile of the uterine environment during the critical period in cattle

Em bovinos, o sucesso no estabelecimento da gestação depende de interações entre o concepto e o útero. Tais interações ocorrem através de moléculas presentes no ambiente uterino. Falhas nesse processo causam 30-40% de perdas de gestação. As proteínas são constituintes desse ambiente e possuem um importante papel nesse processo. Objetivou-se na presente dissertação caracterizar o perfil protéico do ambiente uterino de fêmeas bovinas, ciclando ou prenhes, durante o período crítico, utilizando eletroforese bidimensional. O objetivo específico foi comparar a composição protéica de lavados uterinos obtidos in vivo, por sonda de folley ou post-mortem no dia 18 após o estro de vacas não inseminadas ou gestantes. Para a obtenção das amostras, 48 fêmeas bovinos tiveram seu ciclo estral sincronizado e foram alocadas aleatoriamente para receberem lavagens in vivo por sonda de folley (12 inseminadas e sete não inseminadas) ou para receberem lavagens post-mortem (12 inseminadas e cinco não inseminadas) no dia 18 após o estro. Após a coleta, os lavados foram processados e submetidos à eletroforese bidimensional. Os géis foram analisados utilizando o programa Image Master-2D ELITE V. 4.01 (GE Healthcare) para determinação do ponto isoelétrico (PI) e peso molecular relativo (PMR) das proteínas nos diferentes grupos e análise da densidade óptica. Foram selecionadas 178 proteínas presentes nos lavados. Em relação à distribuição das proteínas de acordo com o ponto isoelétrico, 74% (132/178) apresentaram PI entre 5,5 e 8, em relação ao peso molecular, 44% (79/178) das proteínas possuíam PMR menor que 50KDa enquanto 54% (95/178) entre 50 e 100KDa. Nos lavados realizados por sonda de folley (FC ou FP) foram selecionadas 151 proteínas, sendo 96 nos lavados de animais cíclicos e 86 nos prenhes. Os lavados realizados post-mortem (PMC ou PMP) apresentaram apenas 54 proteínas, das quais 24 estiveram presentes nos lavados PMC e 36 nos lavados PMP. Em relação ao estado reprodutivo 115 proteínas foram encontradas nos lavados dos animais cíclicos (FC ou PMC), enquanto 104 proteínas foram selecionadas nos lavados de animais prenhes (FP e PMP). Entre os lavados realizados por sonda de folley (FC e FP) 31 proteínas foram comuns entre os estados, enquanto entre os lavados realizados post-mortem (PMC e PMP) apenas seis proteínas estiveram presentes em ambos os lavados. Nos lavados realizados em animais ciclando (FC e PMC) cinco proteínas estiveram presentes em ambos os tipos de lavados, enquanto nos lavados realizados em animais prenhes (FP e PMP) 18 proteínas foram comuns em ambos os tipos de lavado. Entre os lavados FC e PMP ou FP e PMC, 15 e 6 proteínas, respectivamente, foram comuns. As proteínas presentes exclusivamente nos lavados de vacas prenhes, possivelmente estão envolvidas no diálogo materno-embrionário durante o processo de estabelecimento da gestação. Proteínas detectadas exclusivamente nos lavados obtidos via sonda de folley podem ser devidas ao influxo de proteínas do soro sanguíneo em resposta à manipulação do trato reprodutivo durante a obtenção dos lavados. Esperava-se uma maior efetividade dos lavados realizados post-mortem em relação aos realizados por sonda de folley. Entretanto os lavados obtidos por sonda de folley foram melhores por identificar um maior numero de proteínas, permitindo identificar diferenças maiores entre os lavados de animais ciclando e prenhes. Concluiu-se que a eletroforese bidimendional constitui um método adequado para avaliar quantitativamente o perfil protéico do ambiente uterino bovino e que tanto o estado reprodutivo quanto o método de obtenção de lavados uterinos modificam sua composição protéica. Novos estudos são necessários para se obter a seqüência de aminoácidos das proteínas localizadas para que se conheça sua identidade e função na gestação inicial de bovinos

In the cattle, the outcome for the establishment of pregnancy depends on interactions between conceptus and uterus. These interactions occur through molecules presents in the uterine environment. Failure in this process causes 30-40% of loss in gestation. The proteins are component of this environment and have a important role in this process. The aim of this dissertation was to characterize the protein profile of the uterine environment in cows, cyclic or pregnant, during the critical period, using two-dimensional electrophoresis. The specific aim was to compare the protein composition of uterine washings recovered in vivo, through a folley catheter, with washings recovered post-mortem at day 18 after estrus of not inseminated or pregnant cows. To obtain the samples 48 cows had their estrous synchronized and here aleatoric put in the group to receive washings in vivo through the folley catheter (12 inseminated and seven not inseminated) or to be washed post-mortem (12 inseminated and five not inseminated) at day 18 after estrus. After the recover, the washings were proceeded and submitted to two-dimensional electrophoresis. The gels were analyzed using the software Image Master-2D ELITE V. 4.01 (GE Heathcare) to determine the isoelectric point (PI) and relative molecular weight (PMR) of the proteins presents in the different groups and analysis of the optical density. One hundred and seventy eight proteins were presents in the washings. The distribution of the proteins according to the PI, 74% (132/178) had PI between 5,5 and 8 and according to the PMR 44% (79/178) of the proteins showed PMR lower than 50KDa, while 54% (95/178) had PMR between 50 and 100KDa. In the washings recovered through the folley catheter (FC and FP) 151 proteins were selected, being 96 from the cyclic cows and 86 from the pregnant cows. The washings recovered post-mortem (PMC and PMP) showed only 54 proteins, from those 24 were present in the cyclic animals and 36 in the pregnant animals. According to the reproductive status 115 proteins were found in the washings from the cyclic animals (FC and PMC), while 104 proteins were selected from the washings of the pregnant animals (FP and PMP). Among the washings recovered through the folley catheter (FC and FP) 31 proteins were the same between the reproductive status. While in the washings recovered post-mortem (PMC and PMP) only six proteins were present in both washings. In washings done in the cyclic animals (FC and PMC) five proteins were presents in both kind of washings, while in washings done in the pregnant animals (FP and PMP) 18 proteins were the same in both kind of washings. Among the washings FC and PMP or FP and PMC, 15 and six proteins, respectively were the same. The proteins presents exclusively in the washings of the pregnant animals are probably involved with the embryo-maternal interplay during the process of pregnancy establishment. Proteins detected exclusively in the washings recovered through the folley catheter may be inflow of proteins from the serum, in response to the uterine manipulation during the process of washing. It was expected a better effect from the washings post-mortem than the ones through the folley catheter. However the washings from the folley catheter had a better result, because they identified a greater number of proteins which allowed identify greater differences between the washings from cyclic and pregnant animals. In conclusion, the two-dimensional electrophoresis is a adequate method to analyze the quantitatively proteins profile of the uterine environment in the cow and that both the reproductive status and the method to obtain the uterine washings modify the proteins composition. New studies are necessary to obtain the amino acids sequence of the proteins found so that we know their identity and function in the beginning of pregnancy in the cow

Administration of GnRH on the day of fixed-time artificial insemination (FTAI) and melengestrol acetate (MGA) administration after ftai in non-suckling nelore cattle / Aplicação de GnRH no dia da inseminação artificial em tempo fixo (IATF) e administração de acetato de melengestrol (MGA) após iatf em vacas nelore solteiras

The present study evaluated the effect of administering buserelin acetate (GnRH) at the time of fixed-time artificial insemination (FTAI), along with the effect of oral administration of melengestrol acetate (MGA) after FTAI on conception rates in non-suckling Nelore cattle. In Experiment I, the effect of GnRH application at the time of FTAI was evaluated, as was administration of MGA from the 13th through the 18th day following FTAI (D24 to D29 after the initiation of the FTAI protocol). Experiment I was performed in 215 non-suckling cattle of the Nelore breed, divided into four experimental groups: Control group: 56 cows subjected to FTAI without GnRH injection; GnRH group: 51 cows subjected to GnRH at the time of FTAI; MGA Group: 57 cows subjected to FTAI without the application of GnRH with mineral supplementation and the addition of 2.28 g of MGA® Premix per cow per day from D24 to D29 after the initiation of the FTAI protocol; MGA and GnRH group: 51 cows subjected to GnRH injection at the time of FTAI, with mineral supplementation and the addition of 2.28 g of MGA® Premix per cow per day from D24 to D29 after the initiation of the FTAI protocol. In Experiment II, the effect of providing MGA five to ten days after FTAI was evaluated in 196 non-suckling pluriparous Nelore cows, divided into two groups: Control group: 104 cows subjected to FTAI, not supplemented with MGA; treated group: 92 cows supplemented with the addition of 2.28 g of MGA® Premix per cow per day from D15 to D20 after the initiation of the FTAI protocol. Diagnosis of gestation was carried out 45 days after FTAI. Both experiments were conducted using a completely randomised design and analysed via the SAS MIXED procedure.[...]

Avaliou-se o efeito da aplicação de Acetato de Buserelina (GnRH) no momento da IATF e o efeito do fornecimento, via oral, de Acetato de Melengestrol (MGA) após IATF, sobre a taxa de concepção em vacas solteiras da raça Nelore. No Experimento I, avaliou-se o efeito da aplicação de GnRH no momento da IATF e do fornecimento de MGA do décimo terceiro ao décimo oitavo dia após a IATF (D24 ao D29 após o início do protocolo de IATF), em 215 vacas solteiras da raça Nelore divididas em quatro grupos experimentais; grupo Controle: 56 vacas submetidas à IATF sem aplicação de GnRH; Grupo GnRH: 51 vacas submetidas à aplicação de GnRH no ato da IATF; Grupo MGA: 57 vacas submetidas à IATF sem aplicação de GnRH e suplementação mineral, com adição de 2,28g de MGA® Premix/vaca/dia do D24 ao D29 após o início do protocolo de IATF; Grupo MGA e GnRH: 51 vacas submetidas à aplicação de GnRH no momento da IATF e suplementação mineral com adição de 2,28g MGA® Premix/vaca/dia do D24 ao D29 após o início do protocolo de IATF. No Experimento II, avaliou-se o efeito do fornecimento de MGA cinco a dez dias após a IATF em 196 vacas pluríparas solteiras da raça Nelore, divididas em dois grupos experimentais; grupo Controle: 104 vacas submetidas à IATF sem fornecimento de MGA, e grupo Tratado: 92 vacas suplementadas, com adição de 2,28g de MGA® Premix/vaca/dia do D15 ao D20 após o início do protocolo de IATF. Realizou-se diagnóstico de gestação 45 dias após a IATF. Ambos os Experimentos foram conduzidos em delineamento inteiramente casualizado, analisados através do procedimento MIXED do SAS. No Experimento I, o grupo controle obteve menor taxa de concepção (32,1%) comparado com os demais grupos avaliados quando fornecido MGA após a IATF (45,6%), GnRH no momento da IATF (50,9%), bem como a associação dos dois tratamentos (50,9%) (P<0,05). No experimento II, o grupo controle obteve maior taxa de concepção (40,38%) quando comparado com o grupo que recebeu MGA pós-IATF (18,48%) (P<0,05).[...]