Influence of Pine Bark Tannin on Bacterial Pathogens Growth and Nitrogen Compounds on Changes in Composted Poultry Litter

To study the antimicrobial and uric acid-preserving activity of pine bark tannin on poultry litter composting, antibiotic-free wood chip-based poultry litter was distributed (11 g) to 50-mL conical centrifuge tubes and immediately amended with 1.3 mL0.4 M sodium phosphate buffer (control) or with 1.3 mL condensed tannins from pine bark (Pinus palustris; 9 % tannin wt/vol in water). All tubes (n = 3 tubes/treatment) were inoculated with a novobiocin and naladixic acid-resistant Salmo-nella typhimurium (STNN) to achieve 3.0 log10 CFU/g and incubated at 37oC for 3 days to simulate an initial compost period. Wildtype E. coli and the challenge STNN strain as well as concentrations of ammonia, uric acid and urea were measured on days 0 and 3. Pine bark tannin treatment decreased (p 0.01) STNN populations in the litter by 0.6 log units compared to the controls. Wildtype E. coli populations were unaffected by tannin treatment (p>0.05). Ammonia accumulation decreased (p 0.01) 23% in tannin-treated litter compared to the control (2.8 ± 0.1 µmol/g). Conversely, the residual uric acid concentration was 1.6-fold higher (p=0.02) in litter treated with the pine bark tannin than in the control litter. Urea concentrations were unaffected by tannin treatment (p>0.05). Results suggest that pine bark tannin treatment may preserve uric acid and reduce ammonia volatilization in composted litter while aiding Salmonella control.(AU)

Influence of Pine Bark Tannin on Bacterial Pathogens Growth and Nitrogen Compounds on Changes in Composted Poultry Litter

To study the antimicrobial and uric acid-preserving activity of pine bark tannin on poultry litter composting, antibiotic-free wood chip-based poultry litter was distributed (11 g) to 50-mL conical centrifuge tubes and immediately amended with 1.3 mL0.4 M sodium phosphate buffer (control) or with 1.3 mL condensed tannins from pine bark (Pinus palustris; 9 % tannin wt/vol in water). All tubes (n = 3 tubes/treatment) were inoculated with a novobiocin and naladixic acid-resistant Salmo-nella typhimurium (STNN) to achieve 3.0 log10 CFU/g and incubated at 37oC for 3 days to simulate an initial compost period. Wildtype E. coli and the challenge STNN strain as well as concentrations of ammonia, uric acid and urea were measured on days 0 and 3. Pine bark tannin treatment decreased (p 0.01) STNN populations in the litter by 0.6 log units compared to the controls. Wildtype E. coli populations were unaffected by tannin treatment (p>0.05). Ammonia accumulation decreased (p 0.01) 23% in tannin-treated litter compared to the control (2.8 ± 0.1 µmol/g). Conversely, the residual uric acid concentration was 1.6-fold higher (p=0.02) in litter treated with the pine bark tannin than in the control litter. Urea concentrations were unaffected by tannin treatment (p>0.05). Results suggest that pine bark tannin treatment may preserve uric acid and reduce ammonia volatilization in composted litter while aiding Salmonella control.

Assessment and incidence of fish associated bacterial pathogens at hatcheries of Azad Kashmir, Pakistan / Avaliação e incidência de patógenos bacterianos associados a peixes em incubadoras da Caxemira de Azad, Paquistão

Fish is the most indispensable source of proteins for individuals and have high nutritional value. On the other hand, the fish culturing raised issues of fish health due to close contact between the aquatic environment and the fish pathogens. So, the aim of the current study was to identify the bacterial pathogens and screen the injured Rainbow trout rearing in different trout hatcheries run under fisheries department of the government of Azad Jammu and Kashmir, Pakistan. Seven bacterial pathogens such as Shigella flexneri, Enterobacter amnigenus, Salmonella Typhimurium, Serratia odorifera, Pseudomonas aeruginosa, Streptococcus pyogenes, and Bacillus cereus were isolated and identified. Results revealed that the injury of fish specimens was due to overcrowding. Instead of rainbow coloration, specimens have darker black in color. The water of ponds was not clean and clear and such conditions was because of the greater quantity of feed thrown in the water. It was concluded that poor hygienic water condition and overloading allowed the opportunistic bacterial contaminations to succeed which cause a serious threat to hatcheries.(AU)

O peixe é a fonte mais indispensável de proteínas para os indivíduos e tem alto valor nutricional. Por outro lado, a cultura dos peixes levantou questões sobre a saúde dos peixes devido ao próximo contato entre o ambiente aquático e os agentes patogênicos desses peixes. Assim, o objetivo do presente estudo foi identificar os patógenos bacterianos e rastrear a criação da truta arco-íris que apresentou lesões em diferentes incubadoras de trutas, com supervisão do departamento de pesca do governo de Azad Jammu e Caxemira, Paquistão. Sete patógenos bacterianos foram isolados e identificados, tais como: Shigella flexneri, Enterobacter amnigenus, Salmonella typhimurium, Serratia odorifera, Pseudomonas aeruginosa, Streptococcus pyogenes e Bacillus cereus. Os resultados revelaram que a lesão de espécimes de peixes foi devido à superlotação. Em vez da coloração do arco-íris, os espécimes tiveram uma coloração preta mais escura. A água das lagoas não era limpa e nem clara, e tais condições ocorreram devido a maior quantidade de alimento lançada na água. Concluiu-se que a precária condição higiênica da água e também a sobrecarga permitiram que as contaminações bacterianas oportunistas fossem bem-sucedidas, causando séria ameaça às incubadoras.(AU)

Assessment and incidence of fish associated bacterial pathogens at hatcheries of Azad Kashmir, Pakistan

Abstract Fish is the most indispensable source of proteins for individuals and have high nutritional value. On the other hand, the fish culturing raised issues of fish health due to close contact between the aquatic environment and the fish pathogens. So, the aim of the current study was to identify the bacterial pathogens and screen the injured Rainbow trout rearing in different trout hatcheries run under fisheries department of the government of Azad Jammu and Kashmir, Pakistan. Seven bacterial pathogens such as Shigella flexneri, Enterobacter amnigenus, Salmonella Typhimurium, Serratia odorifera, Pseudomonas aeruginosa, Streptococcus pyogenes, and Bacillus cereus were isolated and identified. Results revealed that the injury of fish specimens was due to overcrowding. Instead of rainbow coloration, specimens have darker black in color. The water of ponds was not clean and clear and such conditions was because of the greater quantity of feed thrown in the water. It was concluded that poor hygienic water condition and overloading allowed the opportunistic bacterial contaminations to succeed which cause a serious threat to hatcheries.

Resumo O peixe é a fonte mais indispensável de proteínas para os indivíduos e tem alto valor nutricional. Por outro lado, a cultura dos peixes levantou questões sobre a saúde dos peixes devido ao próximo contato entre o ambiente aquático e os agentes patogênicos desses peixes. Assim, o objetivo do presente estudo foi identificar os patógenos bacterianos e rastrear a criação da truta arco-íris que apresentou lesões em diferentes incubadoras de trutas, com supervisão do departamento de pesca do governo de Azad Jammu e Caxemira, Paquistão. Sete patógenos bacterianos foram isolados e identificados, tais como: Shigella flexneri, Enterobacter amnigenus, Salmonella typhimurium, Serratia odorifera, Pseudomonas aeruginosa, Streptococcus pyogenes e Bacillus cereus. Os resultados revelaram que a lesão de espécimes de peixes foi devido à superlotação. Em vez da coloração do arco-íris, os espécimes tiveram uma coloração preta mais escura. A água das lagoas não era limpa e nem clara, e tais condições ocorreram devido a maior quantidade de alimento lançada na água. Concluiu-se que a precária condição higiênica da água e também a sobrecarga permitiram que as contaminações bacterianas oportunistas fossem bem-sucedidas, causando séria ameaça às incubadoras.

Bacterial pathogens of the lower respiratory tract of calves from Brazilian rural settlement herds and their association with clinical signs of bovine respiratory disease / Patógenos bacterianos do trato respiratório inferior de bezerros criados em rebanhos de assentamentos brasileiros e sua associação com os sinais clínicos da doença respiratória dos bovinos

Bovine respiratory disease (BRD) is considered the major cause of economic losses in dairy and beef cattle production. The study aimed to detect the most important bacteria related to respiratory disease in tracheobronchial fluid samples of healthy and dairy calves with clinical signs of BRD in Brazilian rural settlements. Hundred and forty-one mongrel dairy calves were randomly selected from 42 family farm dairy herds from Brazilian settlements. Physical examination was performed and calves were classified as healthy (n=100) and BRD (n=41). Tracheobronchial fluid samples were collected. Isolation and molecular detection of Mycoplasma dispar, M. bovis and M. mycoides subsp. mycoides SC besides isolation of other aerobic bacteria were performed. Abnormal lung sounds (crackle/snoring/whistle), mucopurulent/purulent nasal discharge, body temperature >39.5°C and respiratory rate >40 breaths/min were higher in BRD calves compared to healthy calves (P<0.05). Bacillus sp., Staphylococcus intermedius and non-fermentative Gram-negative were the most prevalent bacteria isolated. Non-identified species from Enterobacteriaceae family was higher in BRD calves compared to healthy calves (P<0.05). Mollicutes were isolated in 7.4% of samples and only M. dispar was detected. Mollicutes was associated with purulent/mucopurulent nasal discharge (P=0.017). Pantoea agglomerans was associated to tachypnea (P=0.020), and Streptococcus spp. was associated with hyperthermia. Statistical tendencies were observed to M. dispar and tachypnea (P=0.066), and P. agglomerans and tachycardia (P=0.066). The obtained results describe the microorganisms found in tracheobronchial fluid of calves with BRD in some herds of Brazilian family farming and their relation to clinical signs of BRD.(AU)

A doença respiratória dos bovinos (DRB) é considerada a principal causa de perdas econômicas nas produções de leite e carne. O objetivo deste estudo foi detectar as mais importantes bactérias relacionadas a doença respiratória presentes em amostras de lavado traqueobrônquico de bezerros sadios e com sinais clínicos da DRB de assentamentos brasileiros. Cento e quarenta e um bezerros leiteiros sem raça definida foram randomicamente selecionados de 42 rebanhos leiteiros de assentamentos brasileiros. Exame físico foi realizado e os animais foram classificados em sadios (n=100) e com DRB (n=41). Amostras de lavado traqueobrônquico foram coletadas. Foram realizados o isolamento e a detecção molecular de Mycoplasma dispar, M. bovis e M. mycoides subsp. mycoides SC além de isolamento de outras bactérias aeróbias. Ruídos pulmonares anormais (crepitação/ ronco/sibilo), secreção nasal mucopurulenta/purulenta, temperatura corporal >39.5°C e frequência respiratória >40 movimentos respiratórios/min foram observados com maior frequência em bezerros com DRB comparado aos animais sadios (P<0.05). Bacillus sp, Staphylococcus intermedius e bactérias Gram-negativas não fermentadoras foram as bactérias mais prevalentes. Bactérias da família Enterobacteriaceae cuja espécie não fora identificada foram mais frequentes em bezerros com DRB comparado aos bezerros sadios (P<0.05). Mollicutes foram isolados em 7,4% das amostras e somente M. dispar foi detectado. Mollicutes foi associado à secreção nasal purulenta/mucopurulenta (P=0.017). Pantoea agglomerans foi associada a taquipneia (P=0.020), e Streptococcus spp. Foi associado a hipertermia. Tendência estatística foi observada para M. dispar e taquipneia (P=0.066), e P. agglomerans e taquicardia (P=0.066). Os resultados obtidos descrevem os micro-organismos encontrados no lavado traqueobrônquico de bezerros com DRB em rebanhos de agricultura familiar brasileira e sua relação com as manifestações clínicas da DRB.(AU)

Bacterial pathogens of the lower respiratory tract of calves from Brazilian rural settlement herds and their association with clinical signs of bovine respiratory disease / Patógenos bacterianos do trato respiratório inferior de bezerros criados em rebanhos de assentamentos brasileiros e sua associação com os sinais clínicos da doença respiratória dos bovinos

Bovine respiratory disease (BRD) is considered the major cause of economic losses in dairy and beef cattle production. The study aimed to detect the most important bacteria related to respiratory disease in tracheobronchial fluid samples of healthy and dairy calves with clinical signs of BRD in Brazilian rural settlements. Hundred and forty-one mongrel dairy calves were randomly selected from 42 family farm dairy herds from Brazilian settlements. Physical examination was performed and calves were classified as healthy (n=100) and BRD (n=41). Tracheobronchial fluid samples were collected. Isolation and molecular detection of Mycoplasma dispar, M. bovis and M. mycoides subsp. mycoides SC besides isolation of other aerobic bacteria were performed. Abnormal lung sounds (crackle/snoring/whistle), mucopurulent/purulent nasal discharge, body temperature >39.5°C and respiratory rate >40 breaths/min were higher in BRD calves compared to healthy calves (P<0.05). Bacillus sp., Staphylococcus intermedius and non-fermentative Gram-negative were the most prevalent bacteria isolated. Non-identified species from Enterobacteriaceae family was higher in BRD calves compared to healthy calves (P<0.05). Mollicutes were isolated in 7.4% of samples and only M. dispar was detected. Mollicutes was associated with purulent/mucopurulent nasal discharge (P=0.017). Pantoea agglomerans was associated to tachypnea (P=0.020), and Streptococcus spp. was associated with hyperthermia. Statistical tendencies were observed to M. dispar and tachypnea (P=0.066), and P. agglomerans and tachycardia (P=0.066). The obtained results describe the microorganisms found in tracheobronchial fluid of calves with BRD in some herds of Brazilian family farming and their relation to clinical signs of BRD.(AU)

A doença respiratória dos bovinos (DRB) é considerada a principal causa de perdas econômicas nas produções de leite e carne. O objetivo deste estudo foi detectar as mais importantes bactérias relacionadas a doença respiratória presentes em amostras de lavado traqueobrônquico de bezerros sadios e com sinais clínicos da DRB de assentamentos brasileiros. Cento e quarenta e um bezerros leiteiros sem raça definida foram randomicamente selecionados de 42 rebanhos leiteiros de assentamentos brasileiros. Exame físico foi realizado e os animais foram classificados em sadios (n=100) e com DRB (n=41). Amostras de lavado traqueobrônquico foram coletadas. Foram realizados o isolamento e a detecção molecular de Mycoplasma dispar, M. bovis e M. mycoides subsp. mycoides SC além de isolamento de outras bactérias aeróbias. Ruídos pulmonares anormais (crepitação/ ronco/sibilo), secreção nasal mucopurulenta/purulenta, temperatura corporal >39.5°C e frequência respiratória >40 movimentos respiratórios/min foram observados com maior frequência em bezerros com DRB comparado aos animais sadios (P<0.05). Bacillus sp, Staphylococcus intermedius e bactérias Gram-negativas não fermentadoras foram as bactérias mais prevalentes. Bactérias da família Enterobacteriaceae cuja espécie não fora identificada foram mais frequentes em bezerros com DRB comparado aos bezerros sadios (P<0.05). Mollicutes foram isolados em 7,4% das amostras e somente M. dispar foi detectado. Mollicutes foi associado à secreção nasal purulenta/mucopurulenta (P=0.017). Pantoea agglomerans foi associada a taquipneia (P=0.020), e Streptococcus spp. Foi associado a hipertermia. Tendência estatística foi observada para M. dispar e taquipneia (P=0.066), e P. agglomerans e taquicardia (P=0.066). Os resultados obtidos descrevem os micro-organismos encontrados no lavado traqueobrônquico de bezerros com DRB em rebanhos de agricultura familiar brasileira e sua relação com as manifestações clínicas da DRB.(AU)

Assessment and incidence of fish associated bacterial pathogens at hatcheries of Azad Kashmir, Pakistan

Abstract Fish is the most indispensable source of proteins for individuals and have high nutritional value. On the other hand, the fish culturing raised issues of fish health due to close contact between the aquatic environment and the fish pathogens. So, the aim of the current study was to identify the bacterial pathogens and screen the injured Rainbow trout rearing in different trout hatcheries run under fisheries department of the government of Azad Jammu and Kashmir, Pakistan. Seven bacterial pathogens such as Shigella flexneri, Enterobacter amnigenus, Salmonella Typhimurium, Serratia odorifera, Pseudomonas aeruginosa, Streptococcus pyogenes, and Bacillus cereus were isolated and identified. Results revealed that the injury of fish specimens was due to overcrowding. Instead of rainbow coloration, specimens have darker black in color. The water of ponds was not clean and clear and such conditions was because of the greater quantity of feed thrown in the water. It was concluded that poor hygienic water condition and overloading allowed the opportunistic bacterial contaminations to succeed which cause a serious threat to hatcheries.

Resumo O peixe é a fonte mais indispensável de proteínas para os indivíduos e tem alto valor nutricional. Por outro lado, a cultura dos peixes levantou questões sobre a saúde dos peixes devido ao próximo contato entre o ambiente aquático e os agentes patogênicos desses peixes. Assim, o objetivo do presente estudo foi identificar os patógenos bacterianos e rastrear a criação da truta arco-íris que apresentou lesões em diferentes incubadoras de trutas, com supervisão do departamento de pesca do governo de Azad Jammu e Caxemira, Paquistão. Sete patógenos bacterianos foram isolados e identificados, tais como: Shigella flexneri, Enterobacter amnigenus, Salmonella typhimurium, Serratia odorifera, Pseudomonas aeruginosa, Streptococcus pyogenes e Bacillus cereus. Os resultados revelaram que a lesão de espécimes de peixes foi devido à superlotação. Em vez da coloração do arco-íris, os espécimes tiveram uma coloração preta mais escura. A água das lagoas não era limpa e nem clara, e tais condições ocorreram devido a maior quantidade de alimento lançada na água. Concluiu-se que a precária condição higiênica da água e também a sobrecarga permitiram que as contaminações bacterianas oportunistas fossem bem-sucedidas, causando séria ameaça às incubadoras.

BATS AND ZOONOTIC BACTERIAL PATHOGENS: A ONE HEALTH APPROACH

As doenças zoonóticas causam grandes impactos na saúde pública e animal, gerando enormes perdas econômicas. Nesse contexto, os morcegos, vêm ganhando destaque como potenciais transmissores de diversas doenças, com conhecida importância em zoonoses virais e emergência em zoonoses bacterianas. Assim, o objetivo desta dissertação foi contribuir para o conhecimento do papel desses animais no ciclo das doenças zoonóticas, focando em sua importância como carreadores de patógenos bacterianos. Para isso, foi realizada uma revisão sistemática de patógenos bacterianos zoonóticos encontrados em morcegos e um estudo transversal investigando a presença de Brucella spp., Leptospira spp. e Salmonella spp. em morcegos de Montes Claros,Minas Gerais, Brasil. A revisão sistemática seguiu as diretrizes do PRISMA (Preferred Reporting Items for Systematic Reviews and Meta-analyses) e recuperou 146 estudos.Cento e um gêneros bacterianos foram detectados em 66,7%(14/21) das famílias de morcegos pesquisadas ao redor do mundo, em uma variedade de amostras clínicas (sangue, coração, pulmão, rim, fígado, baço, fezes, saliva, pele, entre outros). No estudo transversal, a investigação do DNA de patógenos foi realizada por meio de técnicas de biologia molecular em amostras de sangue, fígado e baço de morcegos da área urbana e Silvestre de Montes Claros. A presença de DNA de Salmonella spp. foi identificada em uma amostra de sangue de morcego fêmea insetívora da espécie Lasiurus blossevilli, demonstrando a capacidade dessa espécie animal em hospedar esse patógeno. No geral, nossos resultados mostraram que os morcegos abrigam vários patógenos bacterianos, com potencial para atuar como transmissores ou reservatórios de importantes agentes bacterianos do ponto de vista da saúde pública e animal. Esses resultados podem orientar o desenho de medidas preventivas e de vigilância considerando o contexto da Saúde Única.

Zoonotic diseases cause great impacts on public and animal health, leading to huge economic losses. In this context, bats have gained prominence as potential transmitters of various diseases, with known importance in viral zoonoses and emergence in bacterial zoonoses. Thus, the aim of this dissertation was to contribute to the knowledge of the role of these animals in the cycle of zoonotic diseases, focusing on their importance as a carrier of bacterial pathogens. For this, a systematic review of zoonotic bacterial pathogens found in bats was carried out, and a cross-sectional study investigating the presence of Brucella spp., Leptospira spp. and Salmonella spp. in bats from Montes Claros, Minas Gerais, Brazil. The systematic review followed the guidelines of PRISMA (Preferred Reporting Items for Systematic Reviews and Metaanalyses) and retrieved 146 studies. One hundred and one bacterial genera were detected in 66.7% (14/21) families of bats surveyed around the world, in a variety of clinical samples (blood, heart, lung, kidney, liver, spleen, feces, saliva, skin, among others). In the cross-sectional study, the investigation of the DNA of pathogens was carried out using molecular biology techniques in blood, liver and spleen samples of bats from the urban and wild areas of Montes Claros. The presence of DNA from Salmonella spp. was identified in a blood sample of an insectivorous female bat of the species Lasiurus blossevilli, showing the capacity of this animal to host this pathogen. Overall, our results showed that bats harbor several bacterial pathogens, having potential to act as transmitters or reservoirs of important bacterial agents from the public and animal health point of view. These results can drive the design of preventive and surveillance measures considering the One Health context.

Avaliação da patogenicidade de Edwardsiella tarda, Chryseobacterium sp., Streptococcus agalactiae e Francisella orientalis para Tambaqui (Colossoma macropomum)

O tambaqui (Colossoma macropomum) é a espécie de peixe nativo mais produzida no país. Atualmente, a susceptibilidade do tambaqui foi confirmada somente para uma bactéria, Aeromonas hydrophila. Sendo assim, este estudo tem como objetivo avaliar a suscetibilidade de C. macropomum a isolados de Edwardsiella tarda, Chryseobacterium sp., Streptococcus agalactiae e Francisella orientalis. Os isolados de E. tarda e Chryseobacterium sp. foram oriundos de órgãos internos de tambaquis saudáveis, enquanto que os isolados de S. agalactiae e F. orientalis foram oriundos de tilápias do Nilo (Oreochromis niloticus) apresentando sinais clínicos. Essas bactérias foram avaliadas quanto à sua patogenicidade para tambaqui por meio de infecção experimental. Para tanto, cada um desses isolados bacterianos, assim como caldo de crescimento bacteriano estéril para os grupos controle, foi inoculado em seis juvenis de tambaqui saudáveis por injeção intraperitoneal e, esses peixes foram observados quanto à ocorrência de sinais clínicos e mortes por um período definido. Os animais que morreram durante esse período e os sobreviventes ao final foram necropsiados e analisados por bacteriologia e histologia. Apenas os animais infectados por S. agalactiae apresentaram sinais clínicos com progressão para a morte de 83,3% dos tambaquis daquele grupo. O isolamento em cultura pura das bactérias recuperadas foi registrado para animais dos grupos de tambaqui infectados por S. agalactiae, F. orientalis e E. tarda e alterações histopatológicas encontradas foram descritas. Os animais infectados por S. agalactiae alterações histopatológicas associadas a inflamação neutrofílica e fibrinonecrótica no baço, fígado, cérebro e coração. Já os animais infectados por F. orientalis e E. tarda desenvolveram alterações histopatológicas associadas a esplenite, hepatite e nefrite granulomatosas. Por fim, concluímos que o postulado de Koch foi cumprido para a interação de E. tarda com tambaqui, enquanto que para a interação desse peixe com Chryseobacterium sp., o postulado de Koch não foi demonstrado. Já para as cepas bacterianas originalmente isoladas de tilápia, S. agalactiae e F. orientalis, a suscetibilidade do tambaqui em condições experimentais foi demonstrada.

Tambaqui (Colossoma macropomum) is the most produced native fish species, in Brazil. Currently, the susceptibility of tambaqui was confirmed only for one bacterial pathogen, Aeromonas hydrophila. Therefore, this study aims to evaluate the susceptibility of C. macropomum to isolates of Edwardsiella tarda, Chryseobacterium sp., Streptococcus agalactiae and Francisella orientalis. E. tarda and Chryseobacterium sp. strains were isolated from internal organs of healthy tambaquis, while S. agalactiae and F. orientalis strains were isolated from Nile tilapia (Oreochromis niloticus) showing clinical signs. These bacteria were evaluated for their pathogenicity to tambaqui through experimental infection. To this end, each of these bacterial strains and sterile bacterial broth, for the control groups, was inoculated into six healthy tambaqui juveniles by intraperitoneal injection after which the occurrence of clinical signs and deaths were observed for a defined period of time. Animals that died during this period and survivors at the end of experimental period were necropsied and analyzed for bacteriology and histology. Fish infected by S. agalactiae were the only ones who showed clinical signs with progression to the death of 83.3% of the tambaquis in that group. The isolation in pure culture of the recovered bacteria as well as histopathological findings were observed for animals of the groups infected by S. agalactiae, F. orientalis and E. tarda. Were observed histopathological findings in the spleen, liver, brain and heart of animals infected by S. agalactiae, which were related to neutrophilic and fibrinonecrotic inflammation. Meanwhile, animals infected by F. orientalis and E. tarda developed histopathological findings related to granulomatous nephritis, splenitis and hepatitis. Finally, we conclude that Koch's postulate was fulfilled for the interaction of E. tarda with tambaqui, whereas for the interaction of this fish with Chryseobacterium sp., Koch's postulate was not fulfilled. As for the bacterial strains originally isolated from tilapia, S. agalactiae and F. orientalis, the susceptibility of tambaqui in experimental conditions was demonstrated

Fecal indicators and bacterial pathogens in bottled water from Dhaka, Bangladesh

Forty-six bottled water samples representing 16 brands from Dhaka, Bangladesh were tested for the numbers of total coliforms, fecal indicator bacteria (i.e., thermotolerant Escherichia coli and Enterococcus spp.) and potential bacterial pathogens (i.e., Aeromonas hydrophil, Pseudomonas aeruginos, Salmonella spp., and Shigella spp.). Among the 16 brands tested, 14 (86%), ten (63%) and seven (44%) were positive for total coliforms, E. coil and Enterococcus spp., respectively. Additionally, a further nine (56%), eight (50%), six (37%), and four (25%) brands were PCR positive for A. hydrophila lip, P. aeruginosa ETA, Salmonella spp. invA, and Shigella spp. ipaH genes, respectively. The numbers of bacterial pathogens in bottled water samples ranged from 28 ± 12 to 600 ± 45 (A. hydrophila lip gene), 180 ± 40 to 900 ± 200 (Salmonella spp. invA gene), 180 ± 40 to 1,300 ± 400 (P. aeruginosa ETA gene) genomic units per L of water. Shigella spp. ipaH gene was not quantifiable. Discrepancies were observed in terms of the occurrence of fecal indicators and bacterial pathogens. No correlations were observed between fecal indicators numbers and presence/absence of A. hydrophila lip (p = 0.245), Salmonella spp. invA (p = 0.433), Shigella spp. ipaH gene (p = 0.078), and P. aeruginosa ETA (p = 0.059) genes. Our results suggest that microbiological quality of bottled waters sold in Dhaka, Bangladesh is highly variable. To protect public health, stringent quality control is recommended for the bottled water industry in Bangladesh.(AU)

Bacteriophages for control of bacterial pathogens in foods / Bacteriófagos para controle de bactérias patogênicas em alimentos

Over the last few years, a number of strategies to minimize the microbial load in raw products have beenexplored. Problems with the acceptability and deterioration of organoleptic properties have been describedafter physical treatments such as steam, dry heat and UV light. Moreover, consumers are looking for morenatural foods, i.e. free from chemical preservatives. An approach that has been the object of growing interestis the use of bacteriophages, which are viruses that infect and kill bacteria. Bacteriophages are components ofthe natural microflora in the food production continuum from the farm to the retail outlet; they are stable inthese environments and are readily recovered from soil, sewage, water, farm and processing plant effluents,feces, and retail foods. Studies on pathogens control in foods by using bacteriophage are promising, howeverthey have to be improved. The success of this methodology will depend on the consumers acceptance. Inthis way, it is recommended to carefully consider the origin of the phage before introducing it into foods.

Nos últimos anos, um grande número de estratégias para minimizar a contaminação microbiana dealimentos tem sido explorado. Problemas com aceitabilidade e alteração nas características organolépticasdos alimentos, decorrentes de tratamentos físicos como o emprego do calor e da luz ultravioleta, têm sidodescritos. Além disso, os consumidores estão buscando cada vez mais os alimentos naturais, isto é, isentosde conservantes químicos. Uma abordagem que tem sido objeto de interesse crescente é a utilização debacteriófagos, que são vírus que infectam e matam as bactérias. Os bacteriófagos são componentes damicrobiota natural da produção de alimentos, desde o campo até a comercialização; são estáveis nessesambientes e são prontamente recuperados do solo, da água, de efluentes, das fezes e dos próprios alimentos.Os estudos para o controle de micro-organismos patogênicos em alimentos com o uso de bacteriófagos sãopromissores, mas ainda necessitam ser aperfeiçoados. O sucesso dessa metodologia dependerá da aceitaçãodo consumidor dentre outros fatores. Por esta razão, é prudente considerar cuidadosamente a fonte dequalquer bacteriófago antes deste ser aplicado nos alimentos.

Incidence and characterization of mastitic bovine milk antimicrobial multi-drug resistant bacteria in middle west region of São Paulo, Brazil / Incidência e caracterização de bactérias com resistência múltipla antimicrobiana em leite mastítico bovino da região centro-oeste do Estado de São Paulo, Brasil

A study of the incidence and characterization of bacteria multi-drug resistance isolated from 750 milk samples of cows affected by subclinical mastitis in middle west region of São Paulo, Brazil, was carried out. Staphylococci (75.8%) (mainly represented by Staphylococcus aureus andStaphylococcus epidermidis) and Escherichia coli(7.1 % ) were most frequently isolated bacteria. Most milk samples yielded pure cultures, but associations of pathogens were found in some samples. In vitro multi-drug resistance to six antibiotics (penicillin, ampicillin, dicloxacillin, streptomycin, tetracycline and oxacillin), was observed only among Gram-negative isolates and in some Staphylococcus aureus (39.9%) strains. Remaining Gram positive bacteria, were all sensitive to drugs tested. Multi-drug resistance in mastitogenic bacteria remain a problem difficult to be solved or controlled, mainly by short term programmes.

Foram analisadas a incidência e a multi-resistência a drogas antimicrobianas em bactérias patogênicas isoladas de 750 amostras de leite de vacas com mastite sub-clínica, na região-centro oeste do Estado de São Paulo. Os microorganismos do gênero Staphytococcus (75,8%), principalmente representados pelo S. aureuse S. epidermes, e a Escherichia coli (7,1%) foram as bactérias mais freqüentemente isoladas. A maioria dos agentes etiológicos apresentou-se em cultura pura, emboraassociações de microorganismos tenham sido encontradas em algumas amostras. A resistência múltipla a drogas antimicrobianas (penicilina, ampicilina, dicloxacilina, estreptomicina, tetraciclina e oxacilina) foi observada somente entre bactérias Gram negativas e em algumas linhagens de S. aureus (39,9%). Os demais agentes bacterianos Gram positivos demonstraram sensibilidade às drogas testadas. Os problemas conseqüentes da resistência múltipla a drogas constituem um obstáculo àterapêutica e de difícil solução, principalmente através de programas de controle a curto prazo.

Incidence and characterization of mastitic bovine milk antimicrobial multi-drug resistant bacteria in middle west region of São Paulo, Brazil / Incidência e caracterização de bactérias com resistência múltipla antimicrobiana em leite mastítico bovino da região centro-oeste do Estado de São Paulo, Brasil

A study of the incidence and characterization of bacteria multi-drug resistance isolated from 750 milk samples of cows affected by subclinical mastitis in middle west region of São Paulo, Brazil, was carried out. Staphylococci (75.8%) (mainly represented by Staphylococcus aureus andStaphylococcus epidermidis) and Escherichia coli(7.1 % ) were most frequently isolated bacteria. Most milk samples yielded pure cultures, but associations of pathogens were found in some samples. In vitro multi-drug resistance to six antibiotics (penicillin, ampicillin, dicloxacillin, streptomycin, tetracycline and oxacillin), was observed only among Gram-negative isolates and in some Staphylococcus aureus (39.9%) strains. Remaining Gram positive bacteria, were all sensitive to drugs tested. Multi-drug resistance in mastitogenic bacteria remain a problem difficult to be solved or controlled, mainly by short term programmes.

Foram analisadas a incidência e a multi-resistência a drogas antimicrobianas em bactérias patogênicas isoladas de 750 amostras de leite de vacas com mastite sub-clínica, na região-centro oeste do Estado de São Paulo. Os microorganismos do gênero Staphytococcus (75,8%), principalmente representados pelo S. aureuse S. epidermes, e a Escherichia coli (7,1%) foram as bactérias mais freqüentemente isoladas. A maioria dos agentes etiológicos apresentou-se em cultura pura, emboraassociações de microorganismos tenham sido encontradas em algumas amostras. A resistência múltipla a drogas antimicrobianas (penicilina, ampicilina, dicloxacilina, estreptomicina, tetraciclina e oxacilina) foi observada somente entre bactérias Gram negativas e em algumas linhagens de S. aureus (39,9%). Os demais agentes bacterianos Gram positivos demonstraram sensibilidade às drogas testadas. Os problemas conseqüentes da resistência múltipla a drogas constituem um obstáculo àterapêutica e de difícil solução, principalmente através de programas de controle a curto prazo.

Isolation and characterization of bacteria associated with silkworm gut under antibiotic-treated larval feeding

Abstract The impact of antibiotics on growth, cocoon production was assessed in addition to isolation and characterization of bacteria associated with silkworm gut of infected larvae. Larval rearing was maintained at recommended conditions of temperature and humidity. Silkworm larvae showing abnormal symptoms were collected from the control group and dissected for gut collection. Bacteria were isolated from the gut content by spreading on agar plates and incubated at 37 °C for 48 hrs. Bacterial identification and phylogenetic analysis were carried out by 16S rRNA gene sequencing. The isolated bacteria were subjected to antimicrobial susceptibility test (disc diffusion methods) by using Penicillin (10 µg/mL), Tetracycline (30 µg/mL), Amoxicillin (25 µg/mL), Ampicillin (10 µg/mL), and Erythromycin (15 µg/mL). All isolated strains showed positive results for the catalase test. We isolated and identified bacterial strains (n = 06) from the gut of healthy and diseased silkworm larvae. Based on the 16S rRNA gene sequence, isolated bacteria showed close relation with Serratia, Bacillus, and Pseudomonas spp. Notably, 83.3% of strains were resistant to Penicillin, Tetracycline, Amoxicillin, Ampicillin, and Erythromycin but 16.6% showed antibiotic susceptibility to the above-mentioned commonly used antibiotics. Silkworm larvae fed on penicillin-treated leaves showed significant improvement in larval weight, larval length, and cocoon production. Significantly higher larval weight (6.88g), larval length (5.84cm), and cocoon weight (1.33g) were recorded for larvae fed on leaves treated with penicillin as compared to other antibiotics. Isolated bacterial strains showed close relation with Serratia spp., Bacillus spp. and Pseudomonas spp.

Resumo O impacto dos antibióticos no crescimento e na produção do casulo foi avaliado, além do isolamento e caracterização das bactérias associadas ao intestino de larvas infectadas do bicho-da-seda. A criação das larvas foi mantida nas condições recomendadas de temperatura e umidade. As larvas do bicho-da-seda com sintomas anormais foram coletadas do grupo controle e dissecadas para coleta do intestino. As bactérias foram isoladas do conteúdo intestinal por espalhamento em placas de ágar e incubadas a 37° C durante 48 horas. A identificação bacteriana e a análise filogenética foram realizadas pelo sequenciamento do gene 16S rRNA. As bactérias isoladas foram submetidas a teste de sensibilidade antimicrobiana (métodos de difusão em disco) com penicilina (10 µg / mL), tetraciclina (30 µg / mL), amoxicilina (25 µg / mL), ampicilina (10 µg / mL) e eritromicina (15 µg / mL). Todas as cepas isoladas apresentaram resultados positivos para o teste da catalase. Isolamos e identificamos cepas bacterianas (n = 06) do intestino de larvas de bicho-da-seda saudáveis e doentes. Com base na sequência do gene 16S rRNA, as bactérias isoladas mostraram estreita relação com Serratia, Bacillus e Pseudomonas spp. Notavelmente, 83,3% das cepas eram resistentes a penicilina, tetraciclina, amoxicilina, ampicilina e eritromicina, mas 16,6% mostraram suscetibilidade aos antibióticos comumente usados mencionados acima. As larvas do bicho-da-seda alimentadas com folhas tratadas com penicilina apresentaram melhora significativa no peso larval, comprimento larval e produção de casulo. Peso larval significativamente maior (6,88g), comprimento larval (5,84cm) e peso do casulo (1,33g) foram registrados para larvas alimentadas com folhas tratadas com penicilina, em comparação com outros antibióticos. Cepas bacterianas isoladas mostraram estreita relação com Serratia spp., Bacillus spp. e Pseudomonas spp.

Antibacterial activity of Ricinus communis plant extract against antibiotic resistant Helicobacter pylori and Gluconobacter oxydans isolated from fresh apple juices samples

Abstract Bacteria were isolated from samples of Fresh Apple juices from shops of three different localities of Lahore. Analysis of samples from Liberty, Anarkali and Yateem khana Markets show different levels of contamination. There were pathogenic and non-pathogenic bacteria in all samples and were identified by the morphological and biochemical tests. Most of the plasmids of pathogenic bacteria were 4kb in their molecular size. Ribotyping of 16S ribosomal RNA gene sequencing was done to confirm Helicobacter pylori strain and Gluconobacter oxydans. The highest sensitivity of 210mm was shown by Enterobacter sp. against Aztheromysine disk (15µg) while Micrococcus sp. was highly resistant against all of the Antibiotics applied. The antibiotic resistance of pathogenic bacteria was also checked against Ricinus communis plant's extracts, all isolated bacterial pathogens were resistant but only, E.coli was inhibited at 300µl of the extracts. Presence of pathogenic bacteria in Apple juice samples was due to contamination of sewage water in drinking water while some of these pathogenic bacteria came from Apple's tree and other from store houses of fruits.

Resumo As bactérias foram isoladas de amostras de suco de maçã fresco de lojas de três diferentes localidades de Lahore. A análise de amostras dos mercados Liberty, Anarkali e Yateem khana mostram diferentes níveis de contaminação. Havia bactérias patogênicas e não patogênicas em todas as amostras e foram identificadas pelos testes morfológicos e bioquímicos. A maioria dos plasmídeos de bactérias patogênicas tinha 4 kb em seu tamanho molecular. A ribotipagem do sequenciamento do gene do RNA ribossômico 16S foi realizada para confirmar a cepa de Helicobacter pylori e Gluconobacter oxydans. A maior sensibilidade de 210 mm foi mostrada por Enterobacter sp. contra disco de azteromisina (15µg) enquanto Micrococcus sp. foi altamente resistente a todos os antibióticos aplicados. A resistência a antibióticos de bactérias patogênicas também foi verificada contra extratos de plantas de Ricinus communis, todos os patógenos bacterianos isolados foram resistentes, mas apenas E. coli foi inibida em 300µl dos extratos. A presença de bactérias patogênicas nas amostras de suco de maçã deveu-se à contaminação da água de esgoto na água potável, enquanto algumas dessas bactérias patogênicas vieram da árvore da maçã e outras de armazéns de frutas.

Isolation and characterization of bacteria associated with silkworm gut under antibiotic-treated larval feeding / Isolamento e caracterização de bactérias associadas ao trato intestinal do bicho-da-seda sob alimentação larval tratada com antibióticos

Abstract The impact of antibiotics on growth, cocoon production was assessed in addition to isolation and characterization of bacteria associated with silkworm gut of infected larvae. Larval rearing was maintained at recommended conditions of temperature and humidity. Silkworm larvae showing abnormal symptoms were collected from the control group and dissected for gut collection. Bacteria were isolated from the gut content by spreading on agar plates and incubated at 37 °C for 48 hrs. Bacterial identification and phylogenetic analysis were carried out by 16S rRNA gene sequencing. The isolated bacteria were subjected to antimicrobial susceptibility test (disc diffusion methods) by using Penicillin (10 µg/mL), Tetracycline (30 µg/mL), Amoxicillin (25 µg/mL), Ampicillin (10 µg/mL), and Erythromycin (15 µg/mL). All isolated strains showed positive results for the catalase test. We isolated and identified bacterial strains (n = 06) from the gut of healthy and diseased silkworm larvae. Based on the 16S rRNA gene sequence, isolated bacteria showed close relation with Serratia, Bacillus, and Pseudomonas spp. Notably, 83.3% of strains were resistant to Penicillin, Tetracycline, Amoxicillin, Ampicillin, and Erythromycin but 16.6% showed antibiotic susceptibility to the above-mentioned commonly used antibiotics. Silkworm larvae fed on penicillin-treated leaves showed significant improvement in larval weight, larval length, and cocoon production. Significantly higher larval weight (6.88g), larval length (5.84cm), and cocoon weight (1.33g) were recorded for larvae fed on leaves treated with penicillin as compared to other antibiotics. Isolated bacterial strains showed close relation with Serratia spp., Bacillus spp. and Pseudomonas spp.

Resumo O impacto dos antibióticos no crescimento e na produção do casulo foi avaliado, além do isolamento e caracterização das bactérias associadas ao intestino de larvas infectadas do bicho-da-seda. A criação das larvas foi mantida nas condições recomendadas de temperatura e umidade. As larvas do bicho-da-seda com sintomas anormais foram coletadas do grupo controle e dissecadas para coleta do intestino. As bactérias foram isoladas do conteúdo intestinal por espalhamento em placas de ágar e incubadas a 37° C durante 48 horas. A identificação bacteriana e a análise filogenética foram realizadas pelo sequenciamento do gene 16S rRNA. As bactérias isoladas foram submetidas a teste de sensibilidade antimicrobiana (métodos de difusão em disco) com penicilina (10 µg / mL), tetraciclina (30 µg / mL), amoxicilina (25 µg / mL), ampicilina (10 µg / mL) e eritromicina (15 µg / mL). Todas as cepas isoladas apresentaram resultados positivos para o teste da catalase. Isolamos e identificamos cepas bacterianas (n = 06) do intestino de larvas de bicho-da-seda saudáveis e doentes. Com base na sequência do gene 16S rRNA, as bactérias isoladas mostraram estreita relação com Serratia, Bacillus e Pseudomonas spp. Notavelmente, 83,3% das cepas eram resistentes a penicilina, tetraciclina, amoxicilina, ampicilina e eritromicina, mas 16,6% mostraram suscetibilidade aos antibióticos comumente usados mencionados acima. As larvas do bicho-da-seda alimentadas com folhas tratadas com penicilina apresentaram melhora significativa no peso larval, comprimento larval e produção de casulo. Peso larval significativamente maior (6,88g), comprimento larval (5,84cm) e peso do casulo (1,33g) foram registrados para larvas alimentadas com folhas tratadas com penicilina, em comparação com outros antibióticos. Cepas bacterianas isoladas mostraram estreita relação com Serratia spp., Bacillus spp. e Pseudomonas spp.

Screening, biochemical characterization and antibiotics resistance/susceptibility of bacteria isolated from native soil and water samples / Triagem, caracterização bioquímica e resistência/suscetibilidade a antibióticos de bactérias isoladas de amostras nativas de solo e água

The present study was conducted to isolate and characterize bacteria from water and soil sample taken from the Lahore Canal at different sites i.e. Mall Road, Mohlanwal and Khera site. Isolated bacterial strains were identified on the basis of morphological and biochemical tests. Identification was confirmed by culturing bacteria on selective media. Antibiotic resistance test was also performed to observe the resistance of bacteria against different antibiotics. Blood agar test was performed for identification of different pathogenic bacteria. The result revealed that water and soil samples of Lahore Canal Lahore from different sites were contaminated with Escherichia coli, Salmonella sp., Vibrio sp., Bacillus spp., Enterococcus sp. and Staphylococcus spp. Due to presence of these pathogens, this water is not suitable for any domestic and irrigation use. Study also revealed that water of the Lahore Canal is harmful for human health as it is contaminated with bacteria that can cause severe disease e.g., Escherichia coli can cause gastroenteritis, Bacillus spp. can cause nausea and vomiting, Enterococcus may infect urinary tract, Salmonella sp. is responsible for Bacteremia, Staphylococcus spp. can cause mild fever and Vibrio sp. can be the reason of cholera. Thus it is rendered unfit for any kind of human use even other than drinking like swimming, bathing, washing etc., until and unless some remedial measures are employed to eradicate pathogenic microorganisms by WASA and LWMS according to standards of WHO. Similarly, it is quite harmful, when and where ever it is used for irrigation without proper treatment.

O presente estudo foi realizado para isolar e caracterizar bactérias de amostras de água e solo retiradas do Canal Lahore, em Lahore, em diferentes locais, ou seja, Mall Road, Mohlanwal e Khera. As cepas bacterianas isoladas foram identificadas com base em testes morfológicos e bioquímicos. A identificação foi confirmada por cultura de bactérias em testes de meios seletivos. O teste de resistência aos antibióticos também foi realizado para observar a resistência das bactérias a diferentes antibióticos. Foi realizado o teste de ágar sangue para identificar diferentes bactérias patogênicas. O resultado revelou que amostras de água e solo do Canal Lahore, Lahore, de diferentes localidades estavam contaminadas com Escherichia coli, Salmonella sp., Vibrio sp., Bacillus spp., Enterococcus sp. e Staphylococcus spp. Por causa da presença desses patógenos, essa água não é adequada para qualquer uso doméstico e de irrigação. O estudo revelou que a água do Canal Lahore é prejudicial à saúde humana, pois está contaminada com bactérias que podem causar doenças graves, por exemplo: Escherichia coli pode ocasionar gastroenterite; Bacillus spp. pode causar náuseas e vômitos; Enterococcus sp. pode infectar o trato urinário; Salmonella sp. é responsável pela bacteremia; Staphylococcus spp. pode causar febre leve; e Vibrio sp. pode ser a razão da cólera. Assim, torna-se imprópria para uso humano, como natação, banho, lavagem etc., até que algumas medidas corretivas sejam empregadas para erradicar microrganismos patogênicos por WASA e LWMS de acordo com os padrões da OMS. Da mesma forma, é bastante prejudicial, quando usada para irrigação sem tratamento adequado.