Acción de oxígeno en especies reactivas en los espermatozoides / Action of reactive oxygen species on spermatozoa / Ação das espécies reativas de oxigênio nos espermatozoides

Para que el esperma puede desempeñar sus funciones y lograr el objetivo final, que es la fertilización, requieren energía que proviene de trifosfato de adenosina (ATP). Durante el metabolismo de la energía se almacena en forma de electrones de alta energía que se dirige a la cadena de transporte de electrones, compuesto de cinco proteínas supramolecular. En este proceso, se produce la formación de una, el anión intermedio radical semiquinona (Q- ) que es finalmente capaz de transferir este electrón desapareado a O2 y formar especies reactivas del oxígeno, la superóxido principal, peróxido de hidrógeno y el radical hidroxilo. Estas moléculas son procesos de activación altamente reactivos y espermatozoides que llevan a la degradación y la disminución de la calidad celular. Sin embargo, estas mismas moléculas que a menudo se consideran grandes villanos, también participan en los mecanismos que culminan en la fertilización y la formación de cigoto, adquiriendo así una gran importancia. Con el advenimiento de la criopreservación del semen y el estrés oxidativo asociado con el procesamiento, especies reactivas de oxígeno entraron en evidencia en la investigación, por lo que es necesario estudiar su acción y formas de reducir el estrés oxidativo.(AU)

So that spermatozoa can perform functions and achieve the goal that is fertilization, require energy from adenosine triphosphate (ATP). During the energy metabolism is stored in the form of high-energy electrons that are directed to the electron transport chain, comprised of five supramolecular protein. In this process, there is the formation of a semiquinone anion (Q¯) an intermediate radical that is eventually able to transfer this unpaired electron to O2 and form reactive oxygen species, as the main superoxide, hydrogen peroxide and hydroxyl radical. These molecules are highly reactive and sperm trigger processes that lead to degradation and decrease in cell quality. However these same molecules that are often considered great villains, also participate in mechanisms that culminate in fertilization and zygote formation, thus acquiring great importance. With the advent of semen cryopreservation and oxidative stress associated with the processing, reactive oxygen species entered into evidence in the research, making it necessary to study its action and ways to reduce oxidative stress.(AU)

Para que os espermatozoides possam executar suas funções e alcançarem o objetivo final, que é a fecundação, necessitam de energia que advém da adenosina trifosfato (ATP). Durante o metabolismo, a energia é armazenada na forma de elétrons de alta energia que são direcionados a cadeia de transporte de elétrons, composta de cinco proteínas supramoleculares. Neste processo, há a formação de um radical intermediário, o ânion semiquinona (Q) que eventualmente é capaz de transferir este elétron desemparelhado ao O2 e formar as espécies reativas de oxigênio, sendo as principais o superóxido, o peróxido de hidrogênio e o radical hidroxila. Essas moléculas são altamente reativas e nos espermatozoides desencadeiam processos que levam à degradação e decréscimo na qualidade celular. Porém, essas mesmas moléculas que muitas vezes são consideradas grandes vilãs, também participam de mecanismos que culminam na fertilização e formação do zigoto, adquirindo assim uma grande importância. Com o advento da criopreservação de sêmen e o estresse oxidativo associado ao processamento, as espécies reativas de oxigênio entraram em evidência nas pesquisas, tornando-se necessário o estudo de sua ação e maneiras de reduzir o estresse oxidativo.(AU)

Acción de oxígeno en especies reactivas en los espermatozoides / Action of reactive oxygen species on spermatozoa / Ação das espécies reativas de oxigênio nos espermatozoides

Para que el esperma puede desempeñar sus funciones y lograr el objetivo final, que es la fertilización, requieren energía que proviene de trifosfato de adenosina (ATP). Durante el metabolismo de la energía se almacena en forma de electrones de alta energía que se dirige a la cadena de transporte de electrones, compuesto de cinco proteínas supramolecular. En este proceso, se produce la formación de una, el anión intermedio radical semiquinona (Q- ) que es finalmente capaz de transferir este electrón desapareado a O2 y formar especies reactivas del oxígeno, la superóxido principal, peróxido de hidrógeno y el radical hidroxilo. Estas moléculas son procesos de activación altamente reactivos y espermatozoides que llevan a la degradación y la disminución de la calidad celular. Sin embargo, estas mismas moléculas que a menudo se consideran grandes villanos, también participan en los mecanismos que culminan en la fertilización y la formación de cigoto, adquiriendo así una gran importancia. Con el advenimiento de la criopreservación del semen y el estrés oxidativo asociado con el procesamiento, especies reactivas de oxígeno entraron en evidencia en la investigación, por lo que es necesario estudiar su acción y formas de reducir el estrés oxidativo.

So that spermatozoa can perform functions and achieve the goal that is fertilization, require energy from adenosine triphosphate (ATP). During the energy metabolism is stored in the form of high-energy electrons that are directed to the electron transport chain, comprised of five supramolecular protein. In this process, there is the formation of a semiquinone anion (Q¯) an intermediate radical that is eventually able to transfer this unpaired electron to O2 and form reactive oxygen species, as the main superoxide, hydrogen peroxide and hydroxyl radical. These molecules are highly reactive and sperm trigger processes that lead to degradation and decrease in cell quality. However these same molecules that are often considered great villains, also participate in mechanisms that culminate in fertilization and zygote formation, thus acquiring great importance. With the advent of semen cryopreservation and oxidative stress associated with the processing, reactive oxygen species entered into evidence in the research, making it necessary to study its action and ways to reduce oxidative stress.

Para que os espermatozoides possam executar suas funções e alcançarem o objetivo final, que é a fecundação, necessitam de energia que advém da adenosina trifosfato (ATP). Durante o metabolismo, a energia é armazenada na forma de elétrons de alta energia que são direcionados a cadeia de transporte de elétrons, composta de cinco proteínas supramoleculares. Neste processo, há a formação de um radical intermediário, o ânion semiquinona (Q) que eventualmente é capaz de transferir este elétron desemparelhado ao O2 e formar as espécies reativas de oxigênio, sendo as principais o superóxido, o peróxido de hidrogênio e o radical hidroxila. Essas moléculas são altamente reativas e nos espermatozoides desencadeiam processos que levam à degradação e decréscimo na qualidade celular. Porém, essas mesmas moléculas que muitas vezes são consideradas grandes vilãs, também participam de mecanismos que culminam na fertilização e formação do zigoto, adquirindo assim uma grande importância. Com o advento da criopreservação de sêmen e o estresse oxidativo associado ao processamento, as espécies reativas de oxigênio entraram em evidência nas pesquisas, tornando-se necessário o estudo de sua ação e maneiras de reduzir o estresse oxidativo.

INFLUÊNCIA DO TESTE DE TERMORRESISTÊNCIA RÁPIDO SOB O ESPERMATOZOIDE BOVINO, PÓS-DESCONGELAMENTO

A análise do sêmen e a fertilidade dos touros no desempenho reprodutivo do rebanho tem uma relevância significativa para a bovinocultura, pois a baixa fertilidade tem impacto direto na produtividade do sistema e o país vem obtendo excelentes resultados na comercialização de sêmen bovino criopreservado. Este trabalho tem como objetivo avaliar os efeitos da termorresistência rápida sob os aspectos morfofuncionais das membranas, por citometria de fluxo, e qualidade da cromatina de espermatozoides, técnica do Azul de Toluidina, antes e após o teste de termorresistência. Foram utilizadas seis partidas de sêmen congeladas de dez touros. Para análise estatística foi utilizado o teste T pareado, significância (P < 0.05). Observou-se que dos resultados apresentados, as amostras de sêmen depois do teste de termorresistência apresentaram uma redução de aproximadamente 56% para a motilidade e 36% para o vigor (P < 0.05), quando comparado as amostras antes do teste. Na avaliação por citometria de fluxo observou-se diferença significativa para todos os pontos analisados (membrana plasmática e membrana acrossomal). Da análise da compactação e da heterogeneidade foi realizada a média de todos os espermatozoides, pré e pós-teste de termorresistência sem significância estatística. Concluiu-se que o teste de termorresistência rápido (TTR) altera as estruturas, principalmente acrossomal e não tem interferência na estrutura da compactação da cromatina, devendo ser considerado, em associação com outros testes de avaliação, um parâmetro complementar na avaliação da qualidade do sêmen bovino.

The analysis of the semen and the fertility of the bulls in the reproductive performance of the herd has a significant relevance for the bovine culture, since the low fertility has a direct impact on the productivity of the system and the country has been obtaining excellent results in the commercialization of cryopreserved bovine semen. This work aims to evaluate the effects of rapid thermoresistance under the morphofunctional aspects of membranes, by flow cytometry, and quality of sperm chromatin, Toluidine Blue technique, before and after the thermoresistance test. Six sets of frozen semen from ten bulls were used. For statistical analysis, the paired T test, significance (P < 0.05), was used. It was observed that from the results presented, semen samples after the resistance test showed a reduction of approximately 56% for motility and 36% for vigor (P < 0.05), when compared to samples before the test. In the evaluation by flow cytometry, a significant difference was observed for all points analyzed (plasma membrane and acrosomal membrane). From the analysis of compression and heterogeneity, the average of all sperm was performed, pre- and post-thermoresistance test without statistical significance. It was concluded that the rapid thermoresistance test (TTR) alters the structures, mainly acrosomal and has no interference in the chromatin compression structure, and should be considered, in association with other evaluation tests, a complementary parameter in the evaluation of bovine semen quality

Avaliação da Frequência de coletas de semên em machos reprodutores suínos no início da vida reprodutiva.

Na reprodução de suínos, com os avanços específicos em genética e demanda do mercado suinícola, há a necessidade de se avaliar a possibilidade do maior aproveitamento dos animais jovens, e com isso aumentar a produção de doses inseminantes, bem como maximizar sua vida útil nos centros de difusão genética. O objetivo deste estudo foi avaliar quais os melhores intervalos entre coletas de sêmen de suínos reprodutores no início da vida reprodutiva, com 9 meses de idade. Para isso, 20 suínos foram distribuídos aleatoriamente em quatro tratamentos (T): T1- intervalo entre coletas de dois dias; T2- intervalo entre coletas de três dias; T3- intervalo entre coletas de quatro dias e T4- intervalo entre coletas de sete dias. Os ejaculados foram diluídos em Vitassem® (diluente de longa duração), e produzidas doses inseminantes, as quais, foram avaliadas quanto ao volume, motilidade total, motilidade massal, concentração total, número total de células, morfologia, integridade de membrana e as substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARS). As doses de sêmen produzidas foram avaliadas nas horas 0, 24, 72, 120 e 168. Foram realizadas medidas testiculares (comprimento, largura e volume). O T3 apresentou concentração espermática 5,6% (p>0,05), 37,04% (p<0,05) e 42,15% (p<0,05) superior se comparado ao T4, T2 e T1. A motilidade total do T4 foi superior em 0,79% (p>0,05), 2,02% (p>0,05) e 3,38% (p<0,05) se comparada ao T3, T2 e T1, respectivamente. O volume do testículo direito do T4 foi 18,48% (p<0,05), 23,14% (p<0,05) e 34,46% (p<0,05) em comparação a T3, T2 e T1, respectivamente. Na avaliação da morfologia espermática para células normais, o T4 foi superior em 6,47% (p<0,05), 8,14% (p<0,05) e 14,21% (p<0,05) se comparada aos grupos T3, T2 e T1. O grupo T4 apresentou integridade de membrana plasmática normais (p<0,05) de 6,89%, 8,8% e 14,57 quando comparado com T3, T2 e T1, respectivamente. Já o TBARS do grupo T1 foi 6,58%, 12,52% e 10,03% superior (p<0,05) aos grupos T2, T3 e T4, respectivamente. Esses resultados indicam que menores intervalos entre coletas de sêmen, influenciam negativamente as características quantitativas e qualitativas das células espermáticas. O intervalo entre coletas de 3 e 4 dias proporcionou os melhores resultados sobre a viabilidade espermática.

In breeding pigs, with the specific advances in genetics and demand of the swine market, it is necessary to evaluate if it is possible the greater use of the young animals and with that increase the production of inseminating doses and to maximize their useful life in the centers of artificial insemination .Therefore, the objective of this study was to evaluate the best intervals for the collection of semen from boars at the beginning of their reproductive life, at nine months of age. For this, twenty boars were randomly distributed in four treatments (T), being T1 - interval between collections of two days; T2- interval between collections of three days; T3- interval between collections of four days and T4- interval between collections of seven days (control). The ejaculates were diluted in Vitassem® (long acting diluent), and inseminating doses were produced, which were evaluated for the volume, total motility, mass motility, total concentration, , total number of cells, morphology, membrane integrity and reactive substances to thiobarbituric acid (TBARS) The inseminated doses were evaluated at hours 0, 24, 72, 120 and 168) and testicular measurements (length, width and volume). The T3 group presented a spermatic concentration of 5.6% (p> 0.05), 37.04% (p <0.05) and 42.15% (p <0.05) higher than T4, T2 and T1. The total motility of T4 was higher in 0.79% (p> 0.05), 2.02% (p> 0.05) and 3.38% (p <0.05) than in T3, T2 and T1, respectively. The right testicle volume in the T4 was 18.48% (p <0.05), 23.14% (p <0.05) and 34.46% (p <0.05) compared to T3, T2 and T1, respectively. In the evaluation of sperm morphology for normal cells, T4 was higher in 6.47% (p <0.05), 8.14% (p <0.05) and 14.21% (p <0.05) when compared to the groups T3, T2 and T1. The T4 group had normal plasma membrane integrity (p <0.05), 8.8% (p <0.05) and 14.57 (p <0.05) plasma membrane integrity when compared to T3, T2 and T1. And for the Tbars parameters, the T1 group was 6.58% (p <0.05), 12.52% (p <0.05) and 10.03% (p <0.05) higher than the groups T2, T3 and T4, respectively. These results indicate that short intervals between semen collections negatively influence the quantitative and qualitative characteristics of sperm cells. The four day interval between collections provides the best results on sperm viability.

Níveis de cálcio no desempenho de machos reprodutores de corte com e sem crista

The objective of this trial was to evaluate the effect of dietary calcium on the body weight and reproductive variables (semen volume, number of spermatic cells and fertility) in broiler breeder males with or without comb. A total of 32 males Cobb 500 were used, 50% combed and 50% not combed males. The experimental design was completely randomized in a factorial 2x2, with two comb conditions (with or without) and two levels of calcium (0.90 e 1.35%). Semen was collected using the American methods and number of spermatic cells was determined in a Neubauer chamber. At 42, 43 and 44 weeks of age, 48 females were artificially inseminated by treatment, twice a week, with dosage of 0.05mL fresh semen. After 21 day of incubation the unhatched eggs were broken and examined macroscopically to analyze the fertility. The roosters that were fed with 0.90 and 1.35% of calcium on the diets had similar weight. Besides, at 31st of age, males with comb that were fed with 0.90% of calcium on the diet presented higher number of spermatic cells (3.00x10(6) 0.90% with comb intact against 9.46x10(5) 0.90% without comb). The 0.90% calcium level was enough to promote a good reproductive performance in broiler breeder males. Males with comb intact had better fertility than the males without comb.

O objetivo deste experimento foi avaliar o efeito do nível de cálcio na dieta sobre o peso corporal e as variáveis reprodutivas (volume de sêmen, número de células espermáticas e fertilidade) em reprodutores de corte machos com ou sem crista. Foram utilizados 32 machos Cobb 500, 50% com crista inteira e 50% sem crista. O delineamento experimental utilizado foi o inteiramente casualizado, com esquema fatorial 2x2, duas condições de crista (com e sem) e dois níveis de cálcio (0,90 e 1,35%). O sêmen foi coletado pelo método americano, e o número de células espermáticas foi determinado em câmara de Neubauer. Na 42ª, na 43ª e na 44ª semana de idade dos machos, 48 fêmeas para cada tratamento foram inseminadas artificialmente. As inseminações foram realizadas duas vezes por semana, com sêmen fresco, na dose de 0,05mL. Depois de 21 dias de incubação, os ovos não eclodidos foram quebrados e examinados macroscopicamente para análise da fertilidade. Os machos alimentados com 0,90 e 1,35% de cálcio nas dietas tiveram pesos similares. Além disso, na 31ª semana de idade, machos com crista que receberam dietas com 0,90% de cálcio apresentaram maior número de células espermáticas (3,00x10(6) 0,90% com crista contra 9,46x10(5) 0,90% sem crista). O nível de cálcio de 0,90% foi suficiente para promover um bom desempenho reprodutivo em reprodutores de corte machos. Machos com crista inteira tiveram melhor fertilidade que os demais machos sem crista.

Níveis de cálcio no desempenho de machos reprodutores de corte com e sem crista

The objective of this trial was to evaluate the effect of dietary calcium on the body weight and reproductive variables (semen volume, number of spermatic cells and fertility) in broiler breeder males with or without comb. A total of 32 males Cobb 500 were used, 50% combed and 50% not combed males. The experimental design was completely randomized in a factorial 2x2, with two comb conditions (with or without) and two levels of calcium (0.90 e 1.35%). Semen was collected using the American methods and number of spermatic cells was determined in a Neubauer chamber. At 42, 43 and 44 weeks of age, 48 females were artificially inseminated by treatment, twice a week, with dosage of 0.05mL fresh semen. After 21 day of incubation the unhatched eggs were broken and examined macroscopically to analyze the fertility. The roosters that were fed with 0.90 and 1.35% of calcium on the diets had similar weight. Besides, at 31st of age, males with comb that were fed with 0.90% of calcium on the diet presented higher number of spermatic cells (3.00x10(6) 0.90% with comb intact against 9.46x10(5) 0.90% without comb). The 0.90% calcium level was enough to promote a good reproductive performance in broiler breeder males. Males with comb intact had better fertility than the males without comb.

O objetivo deste experimento foi avaliar o efeito do nível de cálcio na dieta sobre o peso corporal e as variáveis reprodutivas (volume de sêmen, número de células espermáticas e fertilidade) em reprodutores de corte machos com ou sem crista. Foram utilizados 32 machos Cobb 500, 50% com crista inteira e 50% sem crista. O delineamento experimental utilizado foi o inteiramente casualizado, com esquema fatorial 2x2, duas condições de crista (com e sem) e dois níveis de cálcio (0,90 e 1,35%). O sêmen foi coletado pelo método americano, e o número de células espermáticas foi determinado em câmara de Neubauer. Na 42ª, na 43ª e na 44ª semana de idade dos machos, 48 fêmeas para cada tratamento foram inseminadas artificialmente. As inseminações foram realizadas duas vezes por semana, com sêmen fresco, na dose de 0,05mL. Depois de 21 dias de incubação, os ovos não eclodidos foram quebrados e examinados macroscopicamente para análise da fertilidade. Os machos alimentados com 0,90 e 1,35% de cálcio nas dietas tiveram pesos similares. Além disso, na 31ª semana de idade, machos com crista que receberam dietas com 0,90% de cálcio apresentaram maior número de células espermáticas (3,00x10(6) 0,90% com crista contra 9,46x10(5) 0,90% sem crista). O nível de cálcio de 0,90% foi suficiente para promover um bom desempenho reprodutivo em reprodutores de corte machos. Machos com crista inteira tiveram melhor fertilidade que os demais machos sem crista.

Níveis de cálcio no desempenho de machos reprodutores de corte com e sem crista

The objective of this trial was to evaluate the effect of dietary calcium on the body weight and reproductive variables (semen volume, number of spermatic cells and fertility) in broiler breeder males with or without comb. A total of 32 males Cobb 500 were used, 50% combed and 50% not combed males. The experimental design was completely randomized in a factorial 2x2, with two comb conditions (with or without) and two levels of calcium (0.90 e 1.35%). Semen was collected using the American methods and number of spermatic cells was determined in a Neubauer chamber. At 42, 43 and 44 weeks of age, 48 females were artificially inseminated by treatment, twice a week, with dosage of 0.05mL fresh semen. After 21 day of incubation the unhatched eggs were broken and examined macroscopically to analyze the fertility. The roosters that were fed with 0.90 and 1.35% of calcium on the diets had similar weight. Besides, at 31st of age, males with comb that were fed with 0.90% of calcium on the diet presented higher number of spermatic cells (3.00x10(6) 0.90% with comb intact against 9.46x10(5) 0.90% without comb). The 0.90% calcium level was enough to promote a good reproductive performance in broiler breeder males. Males with comb intact had better fertility than the males without comb.

O objetivo deste experimento foi avaliar o efeito do nível de cálcio na dieta sobre o peso corporal e as variáveis reprodutivas (volume de sêmen, número de células espermáticas e fertilidade) em reprodutores de corte machos com ou sem crista. Foram utilizados 32 machos Cobb 500, 50% com crista inteira e 50% sem crista. O delineamento experimental utilizado foi o inteiramente casualizado, com esquema fatorial 2x2, duas condições de crista (com e sem) e dois níveis de cálcio (0,90 e 1,35%). O sêmen foi coletado pelo método americano, e o número de células espermáticas foi determinado em câmara de Neubauer. Na 42ª, na 43ª e na 44ª semana de idade dos machos, 48 fêmeas para cada tratamento foram inseminadas artificialmente. As inseminações foram realizadas duas vezes por semana, com sêmen fresco, na dose de 0,05mL. Depois de 21 dias de incubação, os ovos não eclodidos foram quebrados e examinados macroscopicamente para análise da fertilidade. Os machos alimentados com 0,90 e 1,35% de cálcio nas dietas tiveram pesos similares. Além disso, na 31ª semana de idade, machos com crista que receberam dietas com 0,90% de cálcio apresentaram maior número de células espermáticas (3,00x10(6) 0,90% com crista contra 9,46x10(5) 0,90% sem crista). O nível de cálcio de 0,90% foi suficiente para promover um bom desempenho reprodutivo em reprodutores de corte machos. Machos com crista inteira tiveram melhor fertilidade que os demais machos sem crista.

Efeito da gelatina na refrigeração à 5ºc do sêmen ovino

Na refrigeração a sobrevivência da célula espermática é dependente da sua orientação espacial no meio diluidor não devendo essas se aglutinarem e nem sedimentarem. Em diluentes mais sólidos como os suplementados com gelatina, essa disposição pode ser beneficiada, além de ocorrer uma redução na demanda metabólica celular devido a redução da motilidade quando refrigerado. Em decorrência disto, este trabalho teve como objetivo avaliar o efeito da adição de gelatina ao diluente para sêmen ovino acondicionado a 50, através de parâmetros de qualidade seminal realizados por teste in vitro durante um período de até 72hs.. Foram utilizados 8 carneiros, realizando-se 4 coletas de sêmen para cada macho, totalizando 32 ejaculados. Dois diluentes foram utilizados neste estudo, E1 (leite integral 10%, 0,2 g de D-gligose, 50 mg de estreptomicina e 100 ml de água mili Q), e a E2 (E1 acrescido de 1,5% de gelatina). Foram avaliados os parâmetros de motilidade, morfologia espermática, integridade de membrana, DNA e acrossoma durante os períodos de 0, 24, 48 e 72h de armazenado a 5ºC. Durante as primeiras 48 horas de armazenamento, não houve diferença estatística na motilidade entre E1 e E2, no entanto, a E2 nas 72 horas (51,9%) foi mais eficaz (P <0,05) na manutenção dos parâmetros de motilidade do que o E1 (31,1%). A integridade do acrossoma foi semelhante em ambos os extensores a 0, 24 e 48 horas, mas às 72h a E2 foi maior (P <0,05) da qualidade neste parâmetro (E1= 42,9 e E2 = 66,9). As variáveis, integridade de membrana, DNA, e morfologia espermática, não apresentaram diferença entre os tratamentos (P>0,05). Com os resultados encontrados pode-se concluir que a adição de gelatina na concentração de 1,5% ao diluente melhorou a motilidade e integridade do acrossoma em sêmen ovino armazenado por até 72hs, a 5ºC aumentando assim o período de armazenamento das doses em 24 horas, sem perda de qualidade do espermática em testes realizado in vitro.

Under refrigeration, the spermatic cell survivability depends upon its spatial orientation in the extender medium and the agglutination or sedimentation of these cells should not occur. In more solid extenders like the one supplemented with gelatin, the spatial disposition can be improved, and also the metabolic demand is lower by the reduced motility provoked by more solid medium. The main aim of this work was evaluate the qualitative effect provoked by addition of gelatina to the ram semen extender stored at 5ºC. There were used 8 rams being accomplished 4 semen collections for each, totalizing 32 ejaculates. Two extenders were used in this study, E1 (whole milk 10%, 0.2g D-Glugose, 50 mg streptomycin and 100 ml of mili Q water), and the E2 (E1 plus 1.5% of gelatin). There were evaluated motility, cell morphology, DNA, membrane and acrosome integrity, during the period of 0h, 24hs, 48hs, and 72 hours of storage under refrigeration at 5°C. During the first 48hs of storage the spermatic motility remained the same in the E1 and E2, however, at 72hs the E2 (51,9%) was more efficient in the maintenance of the motility parameters (P<0.05) than the E1 (31,1%). The acrosome integrity was similar in both extenders at 0h, 24hs and 48h of storages, but at 72hs the E2 showed the best result (P<0.05) in this parameter (E1=42,9% and E2=66,9%). The viability, morphology and membrane and DNA integrity had not shown statistical difference comparing the treatments (P>0.05). With the results there is possible to conclude that the addition of gelatin to the extender increased the motility and acrosome integrity in ram semen stored at 5ºC, increasing through this the possibility of extending the storage time under refrigeration of the semen doses to more than 24hs.

Qualitative parameters of the piapara semen (Leporinus elongatus Valenciennes, 1850)

Qualitative parameters of piapara semen (Leporinus elongatus) were evaluated before and after hormonal induction with carp pituitary extract at 2.5 mg.kg-1 of live weight. The progressive motility, the spermatic vigor and the lifetime of the spermatozoa were higher before the hormonal induction (P > 0.05). The percentage of normal spermatozoa and spermatozoa with secondary pathologies did not differ (P > 0.05) between treatments: before induction (44.0 and 44.4%, respectively) and after-induction (44.3 and 46.7%, respectively). However, the percentage of primary pathologies was higher (P 0.05) for the semen collected before induction than for the semen collected after induction; the estimates were 12.2 and 8.0%, respectively. The most frequent pathologies were the taillessness with the frequencies of 27.4 and 36.3% followed by the headlessness for which the estimates were 10.1 and 3.9%, before and after induction respectively. The semen collected before the hormonal induction presented better qualitative parameters.

Os parâmetros qualitativos do sêmen de piaparas (Leporinus elongatus) foram avaliados antes e após a indução hormonal com o extrato de hipófise de carpa na dosagem 2,5 mg.kg-1 de peso vivo. A motilidade progressiva, o vigor espermático e o tempo de vida dos espermatozóides apresentaram valores superiores (P 0,05) no sêmen coletado antes da indução hormonal. Já a estimativa da porcentagem de espermatozóides normais ou com patologias leves, na pré-indução (44,0 e 44,4%, respectivamente) e na pós-indução hormonal (44,3 e 46,7%, respectivamente) não diferiram (P > 0,05) entre os tratamentos. Porém a estimativa de patologias graves foi maior (P 0,05) no sêmen de pré-indução do que no pós-induzido com 12,2 e 8%, respectivamente. A patologia mais freqüente foi cabeça solta com 27,4 e 36,3% seguida por cauda solta com 10,1 e 3,9%, antes e após a indução hormonal respectivamente. De acordo com os resultados, o sêmen de piapara coletado na pré-indução hormonal apresentou os melhores parâmetros qualitativos.