Synchronization with estradiol benzoate in the presence of the corpus luteum in Wagyu cows increases the number of medium follicles but does not interfere with in vitro production of embryos / Sincronização com benzoato de estradiol na presença do corpo lúteo em vacas de Wagyu aumenta o número de folículos médios, mas não interfere com a produção in vitro de embriões

Reproductive biotechnologies are emerging as an important element for livestock; however, some strategies must be modified to adapt to different breeding systems, such as the use of follicular synchronization protocols. This study aimed to evaluate follicular synchronization using estradiol benzoate (EB), in the presence of the corpus luteum (CL) from Wagyu oocyte donors in in vitro embryo production (IVEP). Rounds of IVEP were performed in heifers and cows (n=19) that were classified into three groups: G1/CL - animals with CL, G2/WCL - animals without CL, and G3/CL + EB - animals with CL that were subjected to follicular synchronization with EB at D0. The groups G1/CL and G2/WCL were considered the control and undertook the natural process of follicular dynamics. The results showed that the synchronization of the follicular wave with the application of EB in the presence of CL, presented a smaller number of small (6.05 ± 0.55) and large follicles (0.45 ± 0.15), but increased (P < 0.05) the number of medium-sized follicles (16.20 ± 0.90). However, the results of ovum pick up showed that regardless of whether or not EB was applied, and regardless of the presence or absence of CL in the Wagyu donor, there was no difference among the groups (P > 0.05) concerning the number of viable oocytes and the viability rate. It was concluded that follicular synchronization using EB in Wagyu oocyte donors that presented a CL, increased the number of medium-sized follicles. However, there was no improvement in the efficiency of ovum pick up, in vitro embryo production, and pregnancy rate.(AU)

As biotecnologias reprodutivas estão emergindo como um elemento importante para a pecuária, entretanto, algumas estratégias devem ser modificadas para se adaptar a diferentes sistemas de criação, como o uso de protocolos de sincronização folicular. Este estudo teve como objetivo avaliar a sincronização folicular utilizando benzoato de estradiol (BE), na presença do corpo lúteo (CL) de doadoras de oócitos Wagyu na produção in vitro de embriões (PIVE). Sessões de PIVE foram realizadas em novilhas e vacas (n=19) que foram classificadas em três grupos: G1/CL - animais com CL, G2/SCL - animais sem CL e G3/CL+BE - animais com CL que foram submetidos para sincronização folicular com BE em D0. Os grupos G1/CL e G2/ SCL foram considerados o controle e realizaram o processo natural da dinâmica folicular. Os resultados mostraram que a sincronização da onda folicular com a aplicação de BE na presença de CL, apresentou um menor número de folículos pequenos (6,05 ± 0,55) e grandes (0,45 ± 0,15), mas aumentou (P < 0,05) o número de folículos de tamanho médio (16,20 ± 0,90). No entanto, os resultados da ovum pick up mostraram que independente da aplicação ou não de BE, e independente da presença ou ausência de CL na doadora Wagyu, não houve diferença entre os grupos (P > 0,05) quanto ao número de oócitos viáveis e a taxa de viabilidade. Concluiu-se que a sincronização folicular por meio de BE em doadoras de oócitos Wagyu que apresentaram CL, aumentou o número de folículos de tamanho médio. No entanto, não houve melhora na eficiência da ovum pick up, na produção in vitro de embriões e na taxa de prenhez.(AU)

Estratégias para aumentar a produção de embriões em bovinos / Strategies to increase embryo production in cattle

As biotecnologias para produção de embriões in vivo e in vitro são de grande importância para acelerar o ganho genético dos rebanhos de corte e de leite. No entanto, o sucesso desses processos depende diretamente da quantidade e da qualidade dos oócitos da doadora de embrião. Diversos fatores influenciam a produção de embriões como a população folicular, a idade da doadora, o estresse térmico, o status metabólico e o status reprodutivo. Na atualidade, vários estudos têm sido desenvolvidos para elaborar estratégias que contornem estes desafios e aumentem a eficiência das técnicas de produção de embriões. Dentre os tratamentos estabelecidos para melhorar a produção de embriões das doadoras destacam-se a utilização de FSH, rBST, propilenoglicol e células tronco mesenquimais.(AU)

Biotechnologies for producing in vivo and in vitro embryos are very important to accelerate the genetic gain of beef and dairy herds. However, the success of these processes depend directly on the quantity and quality of the donors oocytes. Many factors influence the embryo production, such as follicle population, age, heat stress, metabolic status and reproductive status. Recently, many studies have been conducted to elaborate strategies that can overcome these issues and increase the efficiency of the embryo production techniques. Among the treatments developed to improve the embryo production, the use of FSH, rBST, propylene glycol and mesenchymal stem cells stand out.(AU)

Colheita transcervical de embriões em ovelhas e cabras / Transcervical embryo collection in ewes and does

A biotécnica de múltipla ovulação e transferência de embriões (MOTE) em pequenos ruminantes tem aplicações que se estendem da pesquisa básica à aplicada. Porém, ainda existem etapas no processo da biotécnica que reduzem sua eficiência e restringem sua utilização, a exemplo da necessidade de procedimentos cirúrgicos. Em caprinos, já é possível realizar a MOTE sem nenhuma intervenção cirúrgica e com resultados satisfatórios. Todavia, em ovinos, as particularidades anatômicas da cérvix dificultam sua transposição, fazendo com que etapas cirúrgicas ainda sejam necessárias. Com foco nessa limitação, tem-se estudado e descrito técnicas para a dilatação cervical e métodos para triagem de doadoras de embrião com maior facilidade para transposição cervical. Assim, a colheita não cirúrgica, principalmente na espécie ovina, vem se tornando uma realidade exequível em condições de campo e pesquisa.(AU)

In small ruminants, the multiple ovulation and embryo transfer (MOET) has applications in basic and applied research. However, there are still drawbacks in this biotechnology hampering its applicability and efficiency, as the need of surgical intervention. In goats, it is possible to perform MOET without any surgical procedure and with satisfactory results. Although, in sheep, the anatomical features of the cervix make transcervical transposition challenging, leading to a wider use of surgical steps in this specie. In the attempt to overcome these limitations, techniques for cervical dilation and methods for screening donors with cervices that can be easily transposed have been studied and described. Therefore, the nonsurgical embryo collection, mainly in the ovine species, has become feasible under field and research conditions.(AU)

Colheita transcervical de embriões em ovelhas e cabras / Transcervical embryo collection in ewes and does

A biotécnica de múltipla ovulação e transferência de embriões (MOTE) em pequenos ruminantes tem aplicações que se estendem da pesquisa básica à aplicada. Porém, ainda existem etapas no processo da biotécnica que reduzem sua eficiência e restringem sua utilização, a exemplo da necessidade de procedimentos cirúrgicos. Em caprinos, já é possível realizar a MOTE sem nenhuma intervenção cirúrgica e com resultados satisfatórios. Todavia, em ovinos, as particularidades anatômicas da cérvix dificultam sua transposição, fazendo com que etapas cirúrgicas ainda sejam necessárias. Com foco nessa limitação, tem-se estudado e descrito técnicas para a dilatação cervical e métodos para triagem de doadoras de embrião com maior facilidade para transposição cervical. Assim, a colheita não cirúrgica, principalmente na espécie ovina, vem se tornando uma realidade exequível em condições de campo e pesquisa.

In small ruminants, the multiple ovulation and embryo transfer (MOET) has applications in basic and applied research. However, there are still drawbacks in this biotechnology hampering its applicability and efficiency, as the need of surgical intervention. In goats, it is possible to perform MOET without any surgical procedure and with satisfactory results. Although, in sheep, the anatomical features of the cervix make transcervical transposition challenging, leading to a wider use of surgical steps in this specie. In the attempt to overcome these limitations, techniques for cervical dilation and methods for screening donors with cervices that can be easily transposed have been studied and described. Therefore, the nonsurgical embryo collection, mainly in the ovine species, has become feasible under field and research conditions.

Estratégias para aumentar a produção de embriões em bovinos / Strategies to increase embryo production in cattle

As biotecnologias para produção de embriões in vivo e in vitro são de grande importância para acelerar o ganho genético dos rebanhos de corte e de leite. No entanto, o sucesso desses processos depende diretamente da quantidade e da qualidade dos oócitos da doadora de embrião. Diversos fatores influenciam a produção de embriões como a população folicular, a idade da doadora, o estresse térmico, o status metabólico e o status reprodutivo. Na atualidade, vários estudos têm sido desenvolvidos para elaborar estratégias que contornem estes desafios e aumentem a eficiência das técnicas de produção de embriões. Dentre os tratamentos estabelecidos para melhorar a produção de embriões das doadoras destacam-se a utilização de FSH, rBST, propilenoglicol e células tronco mesenquimais.

Biotechnologies for producing in vivo and in vitro embryos are very important to accelerate the genetic gain of beef and dairy herds. However, the success of these processes depend directly on the quantity and quality of the donors oocytes. Many factors influence the embryo production, such as follicle population, age, heat stress, metabolic status and reproductive status. Recently, many studies have been conducted to elaborate strategies that can overcome these issues and increase the efficiency of the embryo production techniques. Among the treatments developed to improve the embryo production, the use of FSH, rBST, propylene glycol and mesenchymal stem cells stand out.

EFEITO DA IDADE DE FÊMEAS NELORE (Bos indicus) NA PRODUÇÃO IN VITRO DE EMBRIÕES E TAXA DE GESTAÇÃO

O objetivo do presente estudo foi avaliar a quantidade e qualidade oocitária e produção de embriões de doadoras da raça Nelore (Bos indicus) de três categorias de idade (novilhas pré-púberes, novilhas púberes e vacas) e associá-las com taxa de gestação. Foram utilizadas 36 doadoras, sendo 11 novilhas pré-púberes (13±0,61 meses, 240±10,3 kg), 17 novilhas púberes (25±0,78 meses, 352±8,30 kg) e 8 vacas (83±28 meses, 560±12,1 kg). As fêmeas foram submetidas a três aspirações folicular guiadas por ultrassom (OPU), sem sincronização, em dias aleatórios do ciclo estral, com intervalo de 21 dias. Foram realizadas medidas do trato genital externo (comprimento da rima e largura da vulva) e avaliações ultrassonográficas dos ovários para quantificação de folículos antrais e média dos diâmetros dos ovários (XOV). Os embriões produzidos de oócitos das novilhas pré-púberes, novilhas púberes e vacas foram transferidos para receptoras multíparas da raça Nelore. O diagnóstico de gestação foi realizado 30 dias após a transferência de embriões por meio de ultrassonografia, e o diagnóstico confirmatório foi realizado 60 dias depois. As variáveis foram testadas quanto a distribuição por meio do procedimento Box-cox e transformadas quando necessário, e foram analisadas utilizando-se os procedimentos MIXED, GLIMMIX e CORR (SAS Inst., Inc., Cary, NC, US). O comprimento da rima diferiu entre vacas (9,56 ± 0,30a cm) e novilhas, sendo semelhante nas novilhas pré-púberes e púberes (7,85 ± 0,25b cm, e 8,40 ± 0,20b cm, respectivamente), enquanto a largura da vulva diferiu entre as três categorias de idade (4,60±0,11c, 5,58±0,09b, e 6,09±0,13a cm para vacas, novilhas prépúberes, e novilhas púberes). A XOV foi semelhante para a categoria das novilhas prépúberes e púberes mas diferiu da categoria das vacas (20,0 ± 0,57b mm, 20,8 ± 0,46b mm, e 25,96 ±0,67a mm para novilhas pré-púberes, novilhas púberes e vacas). Vacas apresentaram maior número de folículos totais (32,87 ± 5,32b; 35,0 ± 4,28b; e 58,68 ± 6,26a para novilhas pré-púberes, púberes e vacas), assim como maior número de folículos <5mm (30,0±5,3b, 31,7±4,2b, e 54,5±6,2a para novilhas pré-púberes, novilhas púberes e vacas), e de folículos de 5-8mm (1,7±0,36b, 1,8±0,29b, e 4,0±0,43a). Entretanto, o número de folículos >8mm foi maior na categoria das novilhas pré-púberes (1,0±0,16b, 1,3±0,12ab, e 1,0±0,19a). Em relação à produção oocitária, as vacas apresentaram maior número de oócitos viáveis (20,60 ± 5,12b, 19,05 ± 4,12b, e 34,14 ± 6,01a para novilhas pré-púberes, novilhas púberes e vacas), de oócitos inviáveis (6,96 ± 1,06b, 7,29 ± 0,85b, e 10,03 ± 1,25a), e de total clivados (13,09 ± 3,72b, 12,4 ± 3,19b, e 21,1 ± 4,22a), embora a taxa de clivagem tenha sido semelhante entre as categorias de idade (63,5%, 65,5%, e 62,2%). Entretanto, o número de blastocistos por OPU (5,57 ± 1,99, 6,66 ± 1,72, e 9,74 ± 2,26 para novilhas pré-púberes, novilhas púberes e vacas) e a taxa de blastocistos foram semelhantes entre as categorias de idade. Quando transferidos para as receptoras, os embriões das novilhas pré-púberes e das vacas apresentaram maior taxa de gestação aos 30 dias do que embriões das novilhas púberes (43,1%, 33,8%, e 40,4% para novilhas pré-púberes, novilhas púberes e vacas), e o mesmo ocorreu com a taxa de gestação aos 60 dias (41,3%, 30,6%, e 39,0%). A variável XOV foi mediana e positivamente correlacionada com produção oocitária e embrionária na categoria das novilhas pré-púberes e púberes, o que não foi observado na categoria das vacas, enquanto o número de folículos totais foi alta e positivamente correlacionado com produção oocitária e embrionária nas três categorias. Os resultados permitem concluir que vacas apresentam maior produção oocitária e folicular do que fêmeas jovens. Entretanto, quando os oócitos são submetidos a FIV não há diferença na produção de blastocistos. As variáveis XOV e número de folículos totais podem ser indicativos da produção oocitária e embrionária, principalmente em fêmeas jovens.

The aim of the present study was to evaluate the quantity and quality of oocytes and embryo production of Nelore donors (Bos indicus) from three age categories (prepubertal heifers, pubescent heifers and cows) and to associate them with gestation rate. Thirty-six donors were evaluated: 11 prepubertal heifers (13 ± 0.61 months, 240 ± 10.3 kg), 17 pubescent heifers (25 ± 0.78 months, 352 ± 8.30 kg) and 8 cows (83 ± 28 months, 560 ± 12.1 kg). The females were submitted to three follicular aspirations guided by ultrasound (OPU), without synchronization, on random days of the estrous cycle, with an interval of 21 days. Measurements of the external genital tract (length of the rhyme and width of the vulva) and ultrasound evaluations of the ovaries were performed to quantify antral follicles and mean ovary diameters (XOV). The embryos produced from oocytes of prepubescent heifers, pubescent heifers and cows were transferred to multiparous Nelore recipients. The pregnancy diagnosis was made 30 days after the embryo transfer by ultrasound, and the confirmatory diagnosis was made 60 days later. The variables were tested for distribution using the box-cox procedure and it was transformed when necessary. Variables were analyzed using the MIXED, GLIMMIX and CORR procedures (SAS Inst., Inc., Cary, NC, US). The length of the rhyme differed between cows (9.56 ± 0.30a cm) and heifers, being similar in prepubescent and pubescent heifers (7.85 ± 0.25b cm, and 8.40 ± 0.20b cm, respectively), while the width of the vulva differed between the three age categories (4.60 ± 0.11c, 5.58 ± 0.09b, and 6.09 ± 0.13a cm for cows, prepubescent heifers, and heifers pubescent). The XOV was similar for the category of prepubertal and pubescent heifers but it differed for the category of cows (20.0 ± 0.57b mm, 20.8 ± 0.46b mm, and 25.96 ± 0.67a mm for heifers prepubertal, pubescent heifers and cows). Cows showed a higher number of total follicles (32.87 ± 5.32b; 35.0 ± 4.28b; and 58.68 ± 6.26a for prepubescent, pubescent and cows heifers), as well as a greater number of follicles < 5mm (30.0 ± 5.3b, 31.7 ± 4.2b, and 54.5 ± 6.2a for prepubertal heifers, pubescent heifers and cows), and follicles of 5-8mm (1.7 ± 0, 36b, 1.8 ± 0.29b, and 4.0 ± 0.43a). However, the number of follicles >8mm was higher in the category of prepubertal heifers (1.0 ± 0.16b, 1.3 ± 0.12ab, and 1.0 ± 0.19a). Regarding oocyte production, cows showed a higher number of viable oocytes (20.60 ± 5.12b, 19.05 ± 4.12b, and 34.14 ± 6.01a for prepubescent heifers, pubescent heifers and cows), non-viable oocytes (6.96 ± 1.06b, 7.29 ± 0.85b, and 10.03 ± 1.25a), and total cleavages (13.09 ± 3.72b, 12.4 ± 3, 19b, and 21.1 ± 4.22a), although the cleavage rate was similar between age categories (63.5%, 65.5%, and 62.2%). However, the number of blastocysts per OPU (5.57 ± 1.99, 6.66 ± 1.72, and 9.74 ± 2.26 for prepubertal heifers, pubescent heifers and cows) and the rate of blastocysts were similar across age categories. When transferred to the recipients, embryos of prepubertal heifers and cows showed a higher gestation rate at 30 days than embryos of pubescent heifers (43.1%, 33.8%, and 40.4% for pre-pubescent, pubescent heifers and cows), and the same tendency occurred with the pregnancy rate at 60 days (41.3%, 30.6%, and 39.0%). The XOV variable was median and positively correlated with oocyte and embryonic production in the category of prepubescent and pubescent heifers, which was not observed in the category of cows, while the number of total follicles was high and positively correlated with oocyte and embryonic production in the three categories. The results allow us to conclude that cows have higher oocyte and follicular production than young females. However, when the oocytes are submitted to IVF there is no difference in the production of blastocysts. Furthermore, XOV and number of total follicles can be indicative of oocyte and embryonic production, especially in young females.

Análise da produção de embriões na fertilização in vitro e transferência de embriões para doadoras nelore / Analysis of embrio production in vitro fertilization and embryo transfer to nellore donors

Ajustou-se uma função de densidade probabilidade para o número de embriões viáveis produzidos após fertilização in vitro em doadoras da raça Nelore, a partir de dados fornecidos pela Associação Brasileira de Criadores de Zebu (ABCZ), referente à análise de 20.619 doadoras, 71.602 aspirações e um total de 509.643 embriões. Modelou-se a densidade probabilidade do número de embriões viáveis mediante a função exponencial, executando-se a determinação dos parâmetros por meio da máxima verossimilhança, em um método de gradiente não linear. O nível de precisão obtido foi de RMSE = 0,040 e R2 = 0,98, para a representação da probabilidade do número de embriões viáveis produzidos por doadoras Nelore na técnica de fertilização in vitro(FIV). Para comparar os modelos (curvas de probabilidade de transferência de embriões ajustada por Beltrame,em 2006, e de FIV, neste trabalho), aplicou-se a técnica de comparação de curvas com o teste F (Silva e Azevedo, 2002). Não foram encontradas diferenças entre as curvas do número de embriões viáveis obtidos após coleta e produzidos após aspiração de doadoras na raça Nelore. Ainda, sugere-se a existência de um fator único limitante que afete biologicamente a produção de embriões nas técnicas de transferência de embriões e fertilização in vitro.

A probability density function for the number of viable embryos produced after an in vitro fertilization program in Nellore donors was adjusted through data provided by the Brazilian Association of Zebu breeders. Results were based on 20,619 donors, 71,602 aspirations and the total of 509,643 embryos. The probability density function of the number of viable embryos was modeled using exponential distribution. Parameters fitting were carried out for the maximum likelihood using a non-linear gradient method. The precision level was RMSE = 0.040 and R2 = 0.98 for the representation of probability of number of viable embryos produced by Nellore donors by in vitro fertilization technique. To analyze probability density of embryo recovery (Beltrame, 2006) with in vitro fertilization adjust was used the curve comparison test through F test (Silva and Azevedo, 2002). There were no differences between the curves. These results suggest that there may be a unique and restricting factor that affects biologically the embryo production on the embryo transfer and in vitro fertilization techniques.

Análise da produção de embriões na fertilização in vitro e transferência de embriões para doadoras nelore / Analysis of embrio production in vitro fertilization and embryo transfer to nellore donors

Ajustou-se uma função de densidade probabilidade para o número de embriões viáveis produzidos após fertilização in vitro em doadoras da raça Nelore, a partir de dados fornecidos pela Associação Brasileira de Criadores de Zebu (ABCZ), referente à análise de 20.619 doadoras, 71.602 aspirações e um total de 509.643 embriões. Modelou-se a densidade probabilidade do número de embriões viáveis mediante a função exponencial, executando-se a determinação dos parâmetros por meio da máxima verossimilhança, em um método de gradiente não linear. O nível de precisão obtido foi de RMSE = 0,040 e R2 = 0,98, para a representação da probabilidade do número de embriões viáveis produzidos por doadoras Nelore na técnica de fertilização in vitro(FIV). Para comparar os modelos (curvas de probabilidade de transferência de embriões ajustada por Beltrame,em 2006, e de FIV, neste trabalho), aplicou-se a técnica de comparação de curvas com o teste F (Silva e Azevedo, 2002). Não foram encontradas diferenças entre as curvas do número de embriões viáveis obtidos após coleta e produzidos após aspiração de doadoras na raça Nelore. Ainda, sugere-se a existência de um fator único limitante que afete biologicamente a produção de embriões nas técnicas de transferência de embriões e fertilização in vitro.(AU)

A probability density function for the number of viable embryos produced after an in vitro fertilization program in Nellore donors was adjusted through data provided by the Brazilian Association of Zebu breeders. Results were based on 20,619 donors, 71,602 aspirations and the total of 509,643 embryos. The probability density function of the number of viable embryos was modeled using exponential distribution. Parameters fitting were carried out for the maximum likelihood using a non-linear gradient method. The precision level was RMSE = 0.040 and R2 = 0.98 for the representation of probability of number of viable embryos produced by Nellore donors by in vitro fertilization technique. To analyze probability density of embryo recovery (Beltrame, 2006) with in vitro fertilization adjust was used the curve comparison test through F test (Silva and Azevedo, 2002). There were no differences between the curves. These results suggest that there may be a unique and restricting factor that affects biologically the embryo production on the embryo transfer and in vitro fertilization techniques.(AU)

PRODUÇÃO DE OÓCITOS E EMBRIÕES BUBALINOS: EFEITOS DA ÉPOCA DO ANO E DA ADIÇÃO DE ÓLEO ESSENCIAL DE Lippia origanoides NA MATURAÇÃO IN VITRO

Esta pesquisa pretendeu estabelecer estratégias para aumentar a eficiência da produção in vitro de embriões (PIVE) bubalinos. Neste contexto, avaliou a eficiência de protocolos de sincronização de doadoras de oócitos bubalinas visando aumentar a disponibilidade e qualidade dos oócitos obtidos pela aspiração folicular guiada por ultrassom (OPU) e o efeito da fonte de obtenção dos oócitos sobre a quantidade e qualidade dos mesmos. Além disso, analisou-se o efeito do fotoperíodo sobre a quantidade e qualidade do oócitos disponíveis, além da competência destes expressos pelas taxas de PIVE. Por fim, avaliou-se o efeito da adição do óleo essencial de Lippia origanoides (OELO) nas concentrações de 2,5; 5,0 e 10µg/mL, no meio de maturação in vitro (MIV) sobre as taxas de maturação oocitária, qualidade embrionária e PIVE em bovinos e bubalinos. Ovários e oócitos de animais não protocolados, protocolados por aspiração prévia dos folículos e protocolados com uso de hormônios esteróides e gonadotróficos, foram avaliados ultrassonograficamente e de acordo com a qualidade dos oócitos recolhidos por OPU. Demonstrou-se não haver variação na população folicular, no número e na qualidade dos oócitos recuperados por sessão, exceto uma redução dos folículos e oócitos Grau A foi notada quando o ciclo estral foi sincronizado por aspiração prévia dos folículos(p<0,05). Em relação a fonte de obtenção, para todos parâmetros avaliados, foi notada superioridade quando oócitos são recuperados de ovários de frigorífico(p<0,05). A qualidade dos oócitos recolhidos por OPU e a PIVE bubalinos foi influenciada pelo fotoperíodo na região estudada, elevando-se durante os meses de baixa luminosidade(p<0,05), fato não observado em bovinos. Por fim, a partir de avaliações da cromatina com DAPI, encontrou-se uma elevação da taxa de maturação nuclear em bovinos quando utilizou-se concentrações de 2,5µg/mL de OELO(p<0,05). A qualidade dos embriões, expressa pelo número de células, aumentou quando utilizou-se concentrações de 2,5 e 5µg/mL do OELO em bubalinos(p<0,05). Embora não tenha alterado a taxa final de PIVE em ambas as espécies, o OELO apresentou boas perspectivas quando acrescido aos meios MIV em razão da melhoria da qualidade embrionária e da maturação nuclear dos oócitos.

This study aimed to develop strategies to increase the efficiency of buffalo in vitro embryo production (IVEP). In this context, we evaluated the efficiency of synchronization protocols on buffalo oocyte donor aimed at increasing the availability and quality of oocytes obtained by ovum pick-up (OPU) and the effect of the source of obtaining oocytes on the quantity and quality. In addition, we analyzed the effect of photoperiod on the quantity and quality of oocytes available on ovary, beyond the competence of those expressed by the blastocyst rate. Finally, we evaluate the effect of essential oil of Lippia origanoides (EOLO) added at concentrations of 2.5, 5.0 and 10¿g/ml, on in vitro maturation (IVM) media over oocyte maturation rate, embryo quality and IVEP on cattle and buffalo. Ovaries and oocytes of animals without protocol, protocol by prior aspiration of follicles and protocol with use of steroids and gonadotropic hormones were evaluated by ultrasonography and according to the of oocyte quality. It was demonstrated not vary the follicular population, number and quality of oocytes retrieved per session between the protocols but a reduction of follicles and Grade A oocytes was noted when the follicles were aspirated previously OPU. Regarding the oocyte source (live animals and abattoir ovaries), all evaluated parameters showed superiority when oocytes were derived from abattoir ovaries. The quality of oocytes collected by OPU and IVEP buffaloes was influenced by photoperiod in the region studied, increased when daylight decreases, which was not observed in cattle. Finally, from evaluations of chromatin stained with DAPI, it was found that bovine nuclear maturation rate increased when used concentrations of 2,5¿g/ml EOLO. The quality of oocytes, expressed by cell number, increased when used concentrations of 2.5 and 5¿g/ml of EOLO in buffaloes. Although it has not changed the blastocyst rate of PIVE in both species, the EOLO has good prospects when added to IVM media.

Diversidade genética de doadoras de embriões das raças Nelore e Aberdeen Angus / Genetic diversity of embryos donnors of Nelore and Aberdeen Angus breeds

Foi analisada a diversidade genética, em doadoras de embrião puras de origem das raças Nelore e Aberdeen Angus, através de marcadores moleculares (6 repetições curtas em tandem e 3 polimorfismos de um nucleotídeo) ligados à reprodução. A variação observada do número de alelos detectados nas raças Nelore e Angus foi de 2 a 8 e 1 a 10, respectivamente. As duas raças não apresentaram freqüências alélicas semelhantes em nenhum dos sistemas estudados e alguns alelos foram observados somente em uma das raças, como para A. Angus BMS3004 129, HEL5 161, e, para Nelore BMS3004 132, 138, HEL5 149 e AFZ 111. Os valores de heterozigose esperada, nos diversos sistemas, em A. Angus variou de 0 a 87%, enquanto que, em Nelore, oscilou entre 0,03 e 0,75, sendo as médias de 56 e 50%, respectivamente. Conclui-se que as práticas seletivas aplicadas a estes rebanhos não afetaram grandemente a variabilidade genética dos mesmos. A diversidade entre rebanhos foi bastante alta, refletindo-se em baixa probabilidade (6x10-9) de encontrar dois indivíduos geneticamente identicos, um de cada rebanho

This paper analyzed the genetic diversity of embryos donors from Nellore and Aberdeen Angus pure of origin breeds, through molecular markers (6 short tandem repeats and 3 single nucleotide polymorphisms) linked to reproduction. The variation observed in the number of alleles in Nellore and A. Angus breeds was 2 to 8 and 1 to 10, respectively. No similarity in allele frequencies was observed in both breeds in all investigated systems, and some alleles were exclusive of one of the herds, such as BMS3004 129, HEL5 161, in A. Angus, and BMS3004

Diversidade genética de doadoras de embriões das raças Nelore e Aberdeen Angus / Genetic diversity of embryos donnors of Nelore and Aberdeen Angus breeds

Foi analisada a diversidade genética, em doadoras de embrião puras de origem das raças Nelore e Aberdeen Angus, através de marcadores moleculares (6 repetições curtas em tandem e 3 polimorfismos de um nucleotídeo) ligados à reprodução. A variação observada do número de alelos detectados nas raças Nelore e Angus foi de 2 a 8 e 1 a 10, respectivamente. As duas raças não apresentaram freqüências alélicas semelhantes em nenhum dos sistemas estudados e alguns alelos foram observados somente em uma das raças, como para A. Angus BMS3004 129, HEL5 161, e, para Nelore BMS3004 132, 138, HEL5 149 e AFZ 111. Os valores de heterozigose esperada, nos diversos sistemas, em A. Angus variou de 0 a 87%, enquanto que, em Nelore, oscilou entre 0,03 e 0,75, sendo as médias de 56 e 50%, respectivamente. Conclui-se que as práticas seletivas aplicadas a estes rebanhos não afetaram grandemente a variabilidade genética dos mesmos. A diversidade entre rebanhos foi bastante alta, refletindo-se em baixa probabilidade (6x10-9) de encontrar dois indivíduos geneticamente identicos, um de cada rebanho(AU)

This paper analyzed the genetic diversity of embryos donors from Nellore and Aberdeen Angus pure of origin breeds, through molecular markers (6 short tandem repeats and 3 single nucleotide polymorphisms) linked to reproduction. The variation observed in the number of alleles in Nellore and A. Angus breeds was 2 to 8 and 1 to 10, respectively. No similarity in allele frequencies was observed in both breeds in all investigated systems, and some alleles were exclusive of one of the herds, such as BMS3004 129, HEL5 161, in A. Angus, and BMS3004(AU)

Fatores associados à produção e à sobrevivência embrionária em programas de superovulação e transferência de embriões em fêmeas da raça Holandesa em clima tropical / Factors associated to embryo production and survival in superovulation programs and embryo transfer in Holstein females raised in tropical climate

A alta variabilidade na resposta aos tratamentos superovulatórios e na produção de embriões tem sido relacionada a causas multifatoriais. Além disso, são restritas as informações que relacionam fatores correlatos ao embrião à concepção. Dessa forma, o objetivo do presente estudo foi avaliar a influência de variáveis relacionadas às doadoras (categoria animal e época do ano de produção do embrião) na eficiência de programas de superovulação (SOV), assim como na eficiência reprodutiva de receptoras em programas de transferência de embrião. Foram avaliados dados de 1.562 protocolos de SOV (609 em vacas em lactação e 953 em novilhas da raça Holandesa) e 4.076 transferências de embrião (receptoras Holandesas em lactação). A taxa de SOV (número de doadoras com dois ou mais CL) foi semelhante entre novilhas e vacas em lactação (89,7 vs. 91,9%, respectivamente; P = 0,26). A época do ano, também, não influenciou a taxa de SOV (época quente = 89,3% vs. época não quente = 92,2%; P = 0,09). Doadoras lactantes apresentaram maior número de CL (10,6 ± 0,6 vs. 7,5 ± 0,4; P < 0,0001), de estruturas recuperadas (7,6 ± 0,6 vs. 4,6 ± 0,4; P < 0,0001) e taxa de recuperação (77,6 vs. 58,7%; P < 0,0001) que novilhas. [...] Em conclusão, apesar das doadoras em lactação apresentarem maior resposta superovulatória, as novilhas apresentaram semelhante número de embriões viáveis, porém maior taxa de embriões viáveis. A resposta ao tratamento superovulatório e a produção de embriões foram inferiores durante a época quente do ano. Embriões originados de doadoras Holandesas lactantes apresentaram maior taxa de concepção aos 31 e aos 45 dias de gestação do que embriões originados de novilhas. Apesar da época do ano não influenciar na taxa de concepção e na perda gestacional, verificou-se relação negativa da temperatura máxima entre o estro e a TE na taxa de concepção.

The high variability in the response to superovulatory treatments and embryo production has been related to multifactorial causes. Furthermore, there are restricted data that correlates factors related to the embryo to the conception. Thus, the objective of the present study was to evaluate the influence of variables related to donors (animal type and season of embryo production) in the efficiency of superovulation (SOV) programs and reproductive performance of dairy cows submitted to embryo transfer. We evaluated data from 1,562 SOV protocols (609 in lactating Holstein cows and 953 in heifers) and 4,076 embryo transfers (lactating Holstein recipient). The SOV rate (number of donor with two or more CL) was similar among lactating cows and heifers (89.7 vs. 91.9%, respectively; P = 0.26). Also, the season did not influence the SOV rate (warm season = 89.3% vs. not warm season = 92.2%; P = 0.09). Lactating donor had higher number of CL (10.6 ± 0.6 vs. 7.5 ± 0.4; P <0.0001), of recovered structures (7.6 ± 0.6 vs. 4.6 ± 0.4; P <0.0001) and recovery rate (77.6 vs. 58.7%; P <0.0001) than heifers. Donors superovulated during warm season had fewer number of CL (8.3 ± 0.5 vs. 9.7 ± 0.5; P = 0.03), of recovered structures (5.3 ± 0.5 vs. 6, 7 ± 0.5; P = 0.04) and recovery rate (65.7 vs. 72.3%; P = 0.007). [...] In conclusion, despite the lactating donors had higher superovulatory response, heifers presented similar number of viable embryos, but higher viable embryos rate. The superovulatory response and the embryo production were lower during the warm season. Embryos from lactating Holstein donors had higher conception rate at 31 and 45 days of gestation than embryos from heifers. Although the season did not influence the conception and pregnancy loss rates, there was a negative relationship between average maximum temperature during estrus and TE and conception rate.

Fatores associados à produção e à sobrevivência embrionária em programas de superovulação e transferência de embriões em fêmeas da raça Holandesa em clima tropical / Factors associated to embryo production and survival in superovulation programs and embryo transfer in Holstein females raised in tropical climate

A alta variabilidade na resposta aos tratamentos superovulatórios e na produção de embriões tem sido relacionada a causas multifatoriais. Além disso, são restritas as informações que relacionam fatores correlatos ao embrião à concepção. Dessa forma, o objetivo do presente estudo foi avaliar a influência de variáveis relacionadas às doadoras (categoria animal e época do ano de produção do embrião) na eficiência de programas de superovulação (SOV), assim como na eficiência reprodutiva de receptoras em programas de transferência de embrião. Foram avaliados dados de 1.562 protocolos de SOV (609 em vacas em lactação e 953 em novilhas da raça Holandesa) e 4.076 transferências de embrião (receptoras Holandesas em lactação). A taxa de SOV (número de doadoras com dois ou mais CL) foi semelhante entre novilhas e vacas em lactação (89,7 vs. 91,9%, respectivamente; P = 0,26). A época do ano, também, não influenciou a taxa de SOV (época quente = 89,3% vs. época não quente = 92,2%; P = 0,09). Doadoras lactantes apresentaram maior número de CL (10,6 ± 0,6 vs. 7,5 ± 0,4; P < 0,0001), de estruturas recuperadas (7,6 ± 0,6 vs. 4,6 ± 0,4; P < 0,0001) e taxa de recuperação (77,6 vs. 58,7%; P < 0,0001) que novilhas. [...] Em conclusão, apesar das doadoras em lactação apresentarem maior resposta superovulatória, as novilhas apresentaram semelhante número de embriões viáveis, porém maior taxa de embriões viáveis. A resposta ao tratamento superovulatório e a produção de embriões foram inferiores durante a época quente do ano. Embriões originados de doadoras Holandesas lactantes apresentaram maior taxa de concepção aos 31 e aos 45 dias de gestação do que embriões originados de novilhas. Apesar da época do ano não influenciar na taxa de concepção e na perda gestacional, verificou-se relação negativa da temperatura máxima entre o estro e a TE na taxa de concepção. (AU)

The high variability in the response to superovulatory treatments and embryo production has been related to multifactorial causes. Furthermore, there are restricted data that correlates factors related to the embryo to the conception. Thus, the objective of the present study was to evaluate the influence of variables related to donors (animal type and season of embryo production) in the efficiency of superovulation (SOV) programs and reproductive performance of dairy cows submitted to embryo transfer. We evaluated data from 1,562 SOV protocols (609 in lactating Holstein cows and 953 in heifers) and 4,076 embryo transfers (lactating Holstein recipient). The SOV rate (number of donor with two or more CL) was similar among lactating cows and heifers (89.7 vs. 91.9%, respectively; P = 0.26). Also, the season did not influence the SOV rate (warm season = 89.3% vs. not warm season = 92.2%; P = 0.09). Lactating donor had higher number of CL (10.6 ± 0.6 vs. 7.5 ± 0.4; P <0.0001), of recovered structures (7.6 ± 0.6 vs. 4.6 ± 0.4; P <0.0001) and recovery rate (77.6 vs. 58.7%; P <0.0001) than heifers. Donors superovulated during warm season had fewer number of CL (8.3 ± 0.5 vs. 9.7 ± 0.5; P = 0.03), of recovered structures (5.3 ± 0.5 vs. 6, 7 ± 0.5; P = 0.04) and recovery rate (65.7 vs. 72.3%; P = 0.007). [...] In conclusion, despite the lactating donors had higher superovulatory response, heifers presented similar number of viable embryos, but higher viable embryos rate. The superovulatory response and the embryo production were lower during the warm season. Embryos from lactating Holstein donors had higher conception rate at 31 and 45 days of gestation than embryos from heifers. Although the season did not influence the conception and pregnancy loss rates, there was a negative relationship between average maximum temperature during estrus and TE and conception rate. (AU)