Comparison of three doses of estradiol benzoate for synchronization of follicular wave emergence in suckled Bos indicus beef cows

We aimed to compare the effect of three estradiol benzoate (EB) doses on follicular wave emergence (FWE) and dominant follicle growth of suckled Nelore cows submitted to TAI (D0). On a random day of estrous cycle (D−10), multiparous (MULT; n=36) and primiparous (PRIM; n=20) suckled Nelore cows received an intravaginal progesterone (P4) device and were assigned in three groups. Cows in the EB-1 (n=20), EB-1.5 (n=15) or EB-2 (n=21) groups received, respectively, an im treatment with 1, 1.5 or 2 mg EB. A subgroup (n=10-13 cows/group) were subject to daily ovarian evaluations from D−10 to D0. On D−2, P4 devices were removed, and all cows received the same treatment: 1 mg estradiol cypionate, 0.53 mg sodium cloprostenol, and 300 IU eCG. Statistical analyses were performed considering only the main effects of treatment group and parity order. The proportion of cows with a synchronized FWE and the moment of the FWE did not differ (p>0.05) among the treatment groups (overall: 80% [28/35] and 4.1 ± 0.4 days); however, the FWE occurred earlier (p=0.007) in MULT (3.8 ± 0.2 days) than PRIM (5.1 ± 0.4) cows. The proportion of animals detected in estrus was greater (86% [31/36] vs. 70% [14/20]; p=0.02) and the dominant follicle was larger on D−2 (9.7 ± 0.3 mm vs. 7.8 ± 0.7 mm; p=0.006) and D0 (11.9 ± 0.4 mm vs. 10 ± 0.5 mm; p=0.008) in MULT than PRIM cows. In conclusion, the three EB doses presented similar efficiency to synchronize the FWE in suckled Nelore cows. Moreover, a delayed FWE and smaller dominant follicle is observed in PRIM cows, contributing to the reduced reproductive performance in this parity category when using similar TAI protocols of MULT cows.

Comparison of three doses of estradiol benzoate for synchronization of follicular wave emergence in suckled Bos indicus beef cows

We aimed to compare the effect of three estradiol benzoate (EB) doses on follicular wave emergence (FWE) and dominant follicle growth of suckled Nelore cows submitted to TAI (D0). On a random day of estrous cycle (D−10), multiparous (MULT; n=36) and primiparous (PRIM; n=20) suckled Nelore cows received an intravaginal progesterone (P4) device and were assigned in three groups. Cows in the EB-1 (n=20), EB-1.5 (n=15) or EB-2 (n=21) groups received, respectively, an im treatment with 1, 1.5 or 2 mg EB. A subgroup (n=10-13 cows/group) were subject to daily ovarian evaluations from D−10 to D0. On D−2, P4 devices were removed, and all cows received the same treatment: 1 mg estradiol cypionate, 0.53 mg sodium cloprostenol, and 300 IU eCG. Statistical analyses were performed considering only the main effects of treatment group and parity order. The proportion of cows with a synchronized FWE and the moment of the FWE did not differ (p>0.05) among the treatment groups (overall: 80% [28/35] and 4.1 ± 0.4 days); however, the FWE occurred earlier (p=0.007) in MULT (3.8 ± 0.2 days) than PRIM (5.1 ± 0.4) cows. The proportion of animals detected in estrus was greater (86% [31/36] vs. 70% [14/20]; p=0.02) and the dominant follicle was larger on D−2 (9.7 ± 0.3 mm vs. 7.8 ± 0.7 mm; p=0.006) and D0 (11.9 ± 0.4 mm vs. 10 ± 0.5 mm; p=0.008) in MULT than PRIM cows. In conclusion, the three EB doses presented similar efficiency to synchronize the FWE in suckled Nelore cows. Moreover, a delayed FWE and smaller dominant follicle is observed in PRIM cows, contributing to the reduced reproductive performance in this parity category when using similar TAI protocols of MULT cows.(AU)

Development of fixed-time artificial insemination protocols for locally adapted Curraleiro Pé-Duro cows / Desenvolvimento de protocolos de inseminação artificial em tempo fixo em vacas da raça localmente adaptada Curraleiro Pé-Duro

Two experiments were conducted aiming to evaluate the effects of two ovulatory inducers (Exp.1) and equine chorionic gonadotropin (eCG; Exp.2) on follicular and luteal dynamics in a fixed-time AI (FTAI) protocol in locally adapted Curraleiro Pé-Duro cows. In Exp. 1 multiparous cows (n=12) received an intravaginal device containing 1g of progesterone (P4) for 8 days and 2mg of estradiol benzoate (EB) intramuscularly (IM) at device insertion (Day 0). At device removal (Day 8) 0.150mg of Sodium D-Cloprostenol was administered IM and the cows were randomly assigned to receive 1mg of EB (EB8) or 1mg of estradiol cypionate (EC8) IM, or to not receive any ovulatory inducer (Control). All the animals participated in all treatments (crossover). The interval from P4 removal to ovulation was shorter and less variable in the EB8 treatment group (P≤0.05). In Exp. 2 (crossover), multiparous cows (n=12) received the same hormonal treatment as the EB8 group in Exp.1. At device removal (Day 8) cows were randomly assigned to receive 300UI of eCG IM or to not receive eCG (Control). No difference was ascertained on follicular and luteal parameters in Exp. 2 (P>0.05). We concluded that EB can be used as the ovulatory inducer (Exp. 1) in a FTAI protocol in Curraleiro Pé-Duro cows. However, eCG (Exp. 2) was not able to stimulate follicular and luteal development. This result is probably due to the adaptive capacity of Curraleiro Pé-Duro cows that maintained a satisfactory body condition score even in dry and hot environments.(AU)

Foram realizados dois experimentos com o objetivo de avaliar o efeito de dois indutores da ovulação e da gonadotrofina coriônica equina (eCG) na dinâmica folicular e luteal, em um protocolo de inseminação artificial em tempo fixo (IATF) em vacas localmente adaptadas da raça Curraleiro Pé-Duro. No experimento 1, vacas pluríparas receberam um dispositivo intravaginal contendo 1g de progesterona (P4) durante oito dias e 2mg de benzoato de estradiol (BE) intramuscular (IM) no momento da inserção do dispositivo (dia zero). Na retirada do dispositivo (dia oito), as vacas receberam 0,150mg de D-cloprostenol sódico IM e foram separadas aleatoriamente para receber 1mg de BE IM (BE8) ou 1mg de cipionato de estradiol IM (CE8), ou nenhum indutor da ovulação (controle). Todos os animais participaram de todos os tratamentos (crossover). O intervalo entre a retirada da P4 e a ovulação foi menor e menos variável no tratamento BE8 (P≤0,05). O momento da ovulação foi mais precoce e mais concentrado nos animais do grupo BE 8. No experimento 2 (crossover), vacas pluríparas receberam o mesmo tratamento hormonal do grupo BE8 do experimento1. Na retirada do dispositivo (dia 8), as vacas foram separadas aleatoriamente para receberem 300UI de eCG IM, enquanto o controle não. Não houve diferença nos parâmetros foliculares e luteais avaliados no experimento 2 (P>0,05). Em conclusão, o BE pode ser utilizado como indutor da ovulação (experimento 1) em protocolos de IATF em vacas Curraleiras Pé-Duro. Entretanto, o eCG (experimento 2) não foi capaz de estimular o desenvolvimento folicular e luteal. Esse resultado é devido provavelmente à capacidade adaptativa das vacas Curraleiras Pé-Duro em manter uma condição corporal satisfatória mesmo em condições de clima seco e quente.(AU)

Comparação de doses de benzoato de estradiol no início da sincronização e ressincronização superprecoce da ovulação para inseminação em tempo fixo em vacas de corte Bos indicus

Com base no amplo uso de benzoato de estradiol (BE) em protocolos de IA em tempo fixo (IATF), objetiva-se com a presente pesquisa comparar os efeitos de diferentes doses de BE na sincronização da ovulação e ressincronização aos 14 dias após IATF em vacas Nelore (Bos indicus) lactantes. Para isso, esta dissertação consiste em dois estudos. No primeiro estudo, comparamos três doses de BE (1 mg, n=20; 1,5 mg, n=15; e 2 mg, n=21) associadas a um dispositivo de progesterona (P4) no início de um protocolo de sincronização para IATF em vacas de corte primíparas (n = 20) e multíparas (n = 36). O momento e sincronia da emergência da onda folicular não diferiu (P>0,05) entre as diferentes doses de BE. A emergência folicular ocorreu mais tarde (P<0,05) em vacas primíparas comparadas às multíparas. Além disso, o diâmetro folicular das primíparas foi menor (P<0,05) que nas vacas multíparas no D2 e na IATF. Concluímos com este estudo que doses de 1 a 2 mg de BE foram eficazes em promover a emergência da nova onda folicular. Além disso, o atraso na emergência folicular em vacas primíparas contribuiu para a redução do diâmetro folicular na IATF em comparação com vacas multíparas. No segundo estudo, comparamos o uso de 1 ou 2 mg de BE associado a um dispositivo P4 no início do protocolo de ressincronização aos 14 dias após a IATF (D0) em vacas de corte Bos indicus lactantes (1 mg; grupo BE-1, n = 516; e 2 mg, grupo BE-2, n = 510). No D14, junto com o início da ressincronização, foi possível avaliar a presença de corpo lúteo ativo em 933 vacas. Além disso, um subgrupo dessas vacas (n=18-19/grupo) foi submetido a avaliações ultrassonográficas diárias do D14 ao D22 para localização e mensuração do diâmetro dos folículos antrais e área do corpo lúteo, e avaliação da perfusão sanguínea do corpo lúteo. No D22, todas as vacas foram submetidas a avaliações ultrassonográficas no modo Doppler colorido para detecção de luteólise. Vacas com luteólise detectada no D22 foram submetidas a IATF2 no D24. O diagnóstico de gestação convencional foi realizado 30-35 dias após primeira ou segunda IATF. A taxa de prenhez da IATF1 foi 21,4% maior (P<0,05) no grupo BE-1 do que no grupo BE-2. A potencial perda embrionária entre D22 e D30-35 foi 100% maior (P<0,05) no grupo BE-2 que no grupo BE-1. A taxa de prenhez da IATF2 não diferiu (P>0,1) entre os grupos. Assim, com taxas de prenhez satisfatórias na IATF1 e na IATF2, o grupo BE-1 teve uma maior taxa de prenhez acumulada após duas IATFs com intervalo de 24 dias que o grupo BE-2. Portanto, podemos concluir que 1 mg de BE é a dose segura e recomendada para ser utilizada associada ao dispositivo de P4 nos protocolos de ressincronização iniciados aos 14 dias pós-IATF.

Based on the wide use of estradiol benzoate (EB) in timed-AI (TAI) protocols, with this research we aimed to compare the effect of different doses of EB in synchronization of ovulation and resynchronization at 14 days after TAI in suckled Nelore beef cows. Therefore, this dissertation consists of two studies. In the first study we compared three EB doses (1 mg, n=20; 1.5 mg, n=15; and 2 mg, n=21) associated with a progesterone device (P4) at the beginning of a synchronization protocol for TAI in primiparous (n=20) and multiparous (n=36) beef cows. Follicular wave emergence (FWE) did not differ (P > 0.05) among treatment groups, as well as the other features. The FWE occurred later (P < 0.05) in primiparous cows than in multiparous cows. In addition, the follicular diameter of primiparous was smaller (P < 0.05) than multiparous cows at D 2 and TAI. We conclude with this study that doses from 1 to 2 mg EB were efficient in promoting the emergence of the new follicular wave. Furthermore, we also concluded that the delay in follicular emergence in primiparous cows contributed to the reduced follicular diameter at TAI compared to multiparous cows. In the second study, we compared the use of 1 or 2 mg EB associated with a P4 device at the beginning of the resynchronization protocol at 14 days post-TAI in suckled Bos indicus beef cows (1 mg; EB-1 group, n=516; and 2mg, EB-2 group, n=510). On D14, along with the beginning of resynchronization, it was possible to assess the presence of an active corpus luteum in 933 cows. In addition, a subgroup of these cows (n=18-19/group) was submitted to daily ultrasound assessments from day 14 to 22 for localization and measurement of antral follicles and corpus luteum area, and assessment of corpus luteum perfusion. On D22, all cows were submitted to ultrasound evaluations in color Doppler mode to detect luteolysis. Cows with luteolysis detected on D22 were submitted to TAI2 on D24. The conventional diagnosis of pregnancy was performed 30-35 days after TAI1 or TAI2. The pregnancy rate from first TAI was 21,4% greater (P<0.05) in the EB-1 group than in the EB-2 group. The potential embryonic loss between D22 and D30-35 was doubled (P<0.05) in the EB-2 group. The pregnancy rate of the second TAI did not differ (P>0.1) between groups. Thus, with satisfactory pregnancy rates in TAI 1 and TAI 2, the EB-1 group had a greater cumulative pregnancy rate after two TAIs with a 24-day interval than the EB-2 group. Therefore, we can conclude that 1 mg EB is the safe and recommended dose to be used in association with the P4 device in resynchronization protocols started at 14 days after TAI.

Development of fixed-time artificial insemination protocols for locally adapted Curraleiro Pé-Duro cows / Desenvolvimento de protocolos de inseminação artificial em tempo fixo em vacas da raça localmente adaptada Curraleiro Pé-Duro

Two experiments were conducted aiming to evaluate the effects of two ovulatory inducers (Exp.1) and equine chorionic gonadotropin (eCG; Exp.2) on follicular and luteal dynamics in a fixed-time AI (FTAI) protocol in locally adapted Curraleiro Pé-Duro cows. In Exp. 1 multiparous cows (n=12) received an intravaginal device containing 1g of progesterone (P4) for 8 days and 2mg of estradiol benzoate (EB) intramuscularly (IM) at device insertion (Day 0). At device removal (Day 8) 0.150mg of Sodium D-Cloprostenol was administered IM and the cows were randomly assigned to receive 1mg of EB (EB8) or 1mg of estradiol cypionate (EC8) IM, or to not receive any ovulatory inducer (Control). All the animals participated in all treatments (crossover). The interval from P4 removal to ovulation was shorter and less variable in the EB8 treatment group (P≤0.05). In Exp. 2 (crossover), multiparous cows (n=12) received the same hormonal treatment as the EB8 group in Exp.1. At device removal (Day 8) cows were randomly assigned to receive 300UI of eCG IM or to not receive eCG (Control). No difference was ascertained on follicular and luteal parameters in Exp. 2 (P>0.05). We concluded that EB can be used as the ovulatory inducer (Exp. 1) in a FTAI protocol in Curraleiro Pé-Duro cows. However, eCG (Exp. 2) was not able to stimulate follicular and luteal development. This result is probably due to the adaptive capacity of Curraleiro Pé-Duro cows that maintained a satisfactory body condition score even in dry and hot environments.(AU)

Foram realizados dois experimentos com o objetivo de avaliar o efeito de dois indutores da ovulação e da gonadotrofina coriônica equina (eCG) na dinâmica folicular e luteal, em um protocolo de inseminação artificial em tempo fixo (IATF) em vacas localmente adaptadas da raça Curraleiro Pé-Duro. No experimento 1, vacas pluríparas receberam um dispositivo intravaginal contendo 1g de progesterona (P4) durante oito dias e 2mg de benzoato de estradiol (BE) intramuscular (IM) no momento da inserção do dispositivo (dia zero). Na retirada do dispositivo (dia oito), as vacas receberam 0,150mg de D-cloprostenol sódico IM e foram separadas aleatoriamente para receber 1mg de BE IM (BE8) ou 1mg de cipionato de estradiol IM (CE8), ou nenhum indutor da ovulação (controle). Todos os animais participaram de todos os tratamentos (crossover). O intervalo entre a retirada da P4 e a ovulação foi menor e menos variável no tratamento BE8 (P≤0,05). O momento da ovulação foi mais precoce e mais concentrado nos animais do grupo BE 8. No experimento 2 (crossover), vacas pluríparas receberam o mesmo tratamento hormonal do grupo BE8 do experimento1. Na retirada do dispositivo (dia 8), as vacas foram separadas aleatoriamente para receberem 300UI de eCG IM, enquanto o controle não. Não houve diferença nos parâmetros foliculares e luteais avaliados no experimento 2 (P>0,05). Em conclusão, o BE pode ser utilizado como indutor da ovulação (experimento 1) em protocolos de IATF em vacas Curraleiras Pé-Duro. Entretanto, o eCG (experimento 2) não foi capaz de estimular o desenvolvimento folicular e luteal. Esse resultado é devido provavelmente à capacidade adaptativa das vacas Curraleiras Pé-Duro em manter uma condição corporal satisfatória mesmo em condições de clima seco e quente.(AU)

TAXA DE GESTAÇÃO DE NOVILHAS RESSINCRONIZADAS AOS 14 DIAS PÓSIATF COM PROGESTERONA OU BENZOATO DE ESTRADIOL

O objetivo deste trabalho foi comparar as taxas de gestação de novilhas Bos taurus x Bos indicus ressincronizadas 14 dias após a primeira IATF com progesterona injetável de longa ação (P4Inj) associada ao dispositivo intravaginal de P4 àquelas ressincronizadas pela associação de benzoato de estradiol (BE) e dispositivo intravaginal de P4. Foram utilizadas 677 novilhas (Braford e Brangus) submetidas a um ciclo de IATF (D0). No D14, os animais receberam um dispositivo intravaginal de P4 (1 g, Sincrogest, Ourofino Saúde Animal, Cravinhos, SP) e foram divididos aleatoriamente em dois grupos para receber: BE (1 mg I.M., Sincrodiol, Ourofino; n=339); ou P4Inj (75 mg I.M., Sincrogest Injetável, Ourofino; n=338). No D22, os dispositivos foram retirados e o DG realizado pela detecção da luteólise morfológica através de avaliações ultrassonográficas em modo Doppler. Nas novilhas consideradas não gestantes (NG) foi mensurado o diâmetro do maior folículo (FD), e aplicado 1 mg de cipionato de estradiol (SincroCP, Ourofino), 250 g de cloprostenol sódico (Sincrocio, Ourofino) e 200 UI de eCG (SincroeCG, Ourofino), seguido da segunda IATF no D24. O modelo estatístico foi ajustado por análise de regressão logística (PROC GLIMMIX, SAS versão 9.2) considerando as seguintes variáveis: tratamento, raça, idade, fazenda e interações tratamento x fazenda, tratamento x raça, tratamento x idade. O diâmetro do FD no D22 nas novilhas NG não diferiu (P>0,05) entre os grupos BE (9,77 ± 0,25) e P4Inj (9,92 ± 0,22). Não foi observada diferença entre os grupos BE e P4Inj para taxa de gestação no D22 (56,3%, 191/339 versus 60,1%, 203/338, respectivamente), e no D40 pós-IATF (49,6%, 168/339 versus 53,3%, 180/338, respectivamente). A taxa de perdas gestacionais no DG22 em relação ao DG40 foi similar entre os grupos BE (12%, 23/191) e P4Inj (11,3%, 23/203). A taxa de gestação na ressincronização do grupo P4Inj (31,85%, 43/135) foi inferior à taxa do grupo BE (45,95%, 68/148). Em conclusão, propõe-se que a suplementação com 1 mg de BE ou 75 mg de P4Inj em associação com o dispositivo de P4 aos 14 dias pós-IATF é igualmente segura para a gestação em curso. Adicionalmente, enquanto a ressincronização da onda folicular pela associação de BE e dispositivo intravaginal de P4 alcança taxas de gestação satisfatórias à segunda IATF, estudos complementares são necessários para investigar as aparentes baixas taxas de gestação obtidas pela associação de P4Inj e dispositivo de P4.

The objective of this work was to compare the pregnancy rates of Bos taurus x Bos indicus heifers resynchronized 14 days after the first TAI with long-acting injectable progesterone (iP4) associated with the intravaginal P4 device to those resynchronized by the association of estradiol benzoate (EB) and intravaginal P4 device. Six hundred and seventyseven heifers (Braford and Brangus) submitted to a TAI cycle (D0) were used. On D14, the animals received a P4 intravaginal device (1 g, Sincrogest, Ourofino Saúde Animal, Cravinhos, SP) and were randomly divided into two groups to receive: EB (1 mg I.M., Sincrodiol, Ourofino; n=339); or iP4 (75 mg I.M., Injectable Sincrogest, Ourofino; n=338). On D22, the P4 devices were removed and the pregnancy diagnosis (PD) performed by assessing morphological luteolysis through Doppler ultrasound examination. Heifers considered non-pregnant (NP) had the diameter of the dominant follicle (DF) measured and received 1 mg of estradiol cypionate (SincroCP, Ourofino), 250 g of sodium cloprostenol (Sincrocio, Ourofino) and 200 IU eCG (SincroeCG, Ourofino), followed by the second TAI no D24. The statistical model was adjusted for each dependent variable by logistic regression analysis (PROC GLIMMIX, SAS version 9.2) considering the following independent variables: treatment, race, age, ranch, and interactions treatment x ranch, treatment x race, treatment x age. The diameter of the DF on D22 in the NP heifers did not differ (P>0.05) between the EB (9.77 ± 0.25) and iP4 (9.92 ± 0.22) groups. No difference was observed between the EB and iP4 groups for pregnancy rate on D22 (56.3%, 191/339 versus 60.1%, 203/338, respectively), and D40 post-TAI (49.6%, 168/339 versus 53.3%, 180/338, respectively). The rate of pregnancy losses from PD22 to PD40 was similar between the EB (12%, 23/191) and iP4 (11.3%, 23/203) groups. The resynchronization pregnancy rate of the iP4 group (31.85%, 43/135) was lower than that of the EB group (45.95%, 68/148). In conclusion, it is proposed that supplementation with 1 mg EB or 75 mg of iP4 in combination with the P4 device at 14 days after TAI is equally safe for the ongoing pregnancy. Additionally, whereas the resynchronization of the follicular wave by the association of EB and intravaginal P4 device reaches satisfactory pregnancy rates to the second TAI, complementary studies are necessary to investigate the apparent low pregnancy rates obtained by the association of iP4 and P4 device.

Comparison of two esters estradiol as inductors on ovulation follicular diameter and pregnancy rate of dairy cattle subject to program of FTAI / Comparação de dois ésteres de estradiol como indutores da ovulação sobre o diâmetro folicular e a taxa de gestação de bovinos leiteiros submetidos a programa de Inseminação Artificial em Tempo Fixo

This study aimed to evaluate the effect of using two estradiol esters, on the diameter of the ovulatory follicle (DFOL), and pregnancy rates of dairy cows submitted to FTAI program. Therefore, 94 females crossbred Dutch-Gir were subjected to the following hormone protocol started on a random day D0, by insertion of an intravaginal device of progesterone (P4) associated to 2.0 mg of estradiol benzoate (EB) intramuscular (im). In D8, the devices were removed and 500 µg of sodium cloprostenol prostaglandin F2 was administered and 300 IU of equine chorionic gonadotropin (eCG) i.m. At this time the animals were divided in two groups: 50 cows were allocated to EC group and received 1 mg of estradiol cypionate i.m., while the other 44 received 1.0 mg of EB i.m. 24 hours after removal of the devices (D9), being called the BE Group. At D10, inseminations were carried out, and prior to each IA procedure were performed trans rectal ultrasonography to measure the DFOL. Pregnancy diagnosis was performed 55 days after the FTAI. There was no significant difference between measurement of DFOL found for the BE and CE groups being, respectively, 11.45 ± 2.34 and 10.71 ± 2,43mm. The BE group also showed a 34.10% pregnancy rate, similar to the EC group which was 40.00%. It is concluded that CE can replace the BE in TAI protocol in dairy cows, representing an alternative to simplify the FTAI(AU)

Objetivou-se com este trabalho avaliar o efeito da utilização de dois ésteres de estradiol, sobre o Diâmetro do Folículo Ovulatório (DFOL) e taxa de gestação de fêmeas bovinas leiteiras submetidas a um programa de Inseminação Artificial em Tempo Fixo (IATF). Para tanto, 94 fêmeas mestiças Holandês-Gir foram submetidas ao seguinte protocolo hormonal, iniciado em um dia aleatório, D0, por meio da inserção de um dispositivo intravaginal de progesterona (P4) associado à 2mg de Benzoato de Estradiol (BE) via intramuscular (i.m.). No D8, os dispositivos foram removidos e administrados 500 µg de Cloprostenol sódico prostaglandina F2 e 300 UI de Gonadotrofina Coriônica equina (eCG) i.m. Neste momento, os animais foram divididos em dois grupos experimentais: 50 vacas foram alocadas no grupo Cipionato de Estradiol (CE) e receberam 1mg dessa substância via i.m., enquanto outras 44 receberam 1mg de BE i.m., 24 horas após a retirada dos dispositivos (D9), sendo chamadas grupo BE. No D10, foram realizadas as inseminações e, previamente a cada procedimento de IA, foi executada a mensuração do DFOL por meio de ultrassonografia transretal. O diagnóstico de gestação foi realizado 55 dias após as IATFs. Não houve diferença significativa entre as médias de DFOL encontradas para os grupos BE e CE sendo, respectivamente, 11,45 ± 2,34 e 10,71 ± 2,43mm. O grupo BE também apresentou um índice de(AU)

Comparação de dois ésteres de estradiol como indutores da ovulação sobre o diâmetro folicular e a taxa de gestação de bovinos leiteiros submetidos a programa de Inseminação Artificial em Tempo Fixo

SUMMARY This study aimed to evaluate the effect of using two estradiol esters, on the diameter of the ovulatory follicle (DFOL), and pregnancy rates of dairy cows submitted to FTAI program. Therefore, 94 females crossbred Dutch-Gir were subjected to the following hormone protocol started on a random day D0, by insertion of an intravaginal device of progesterone (P4) associated to 2.0 mg of estradiol benzoate (EB) intramuscular (im). In D8, the devices were removed and 500 µg of sodium cloprostenol prostaglandin F2 was administered and 300 IU of equine chorionic gonadotropin (eCG) i.m. At this time the animals were divided in two groups: 50 cows were allocated to EC group and received 1 mg of estradiol cypionate i.m., while the other 44 received 1.0 mg of EB i.m. 24 hours after removal of the devices (D9), being called the BE Group. At D10, inseminations were carried out, and prior to each IA procedure were performed trans rectal ultrasonography to measure the DFOL. Pregnancy diagnosis was performed 55 days after the FTAI. There was no significant difference between measurement of DFOL found for the BE and CE groups being, respectively, 11.45 ± 2.34 and 10.71 ± 2,43mm. The BE group also showed a 34.10% pregnancy rate, similar to the EC group which was 40.00%. It is concluded that CE can replace the BE in TAI protocol in dairy cows, representing an alternative to simplify the FTAI protocol.

RESUMO Objetivou-se com este trabalho avaliar o efeito da utilização de dois ésteres de estradiol, sobre o Diâmetro do Folículo Ovulatório (DFOL) e taxa de gestação de fêmeas bovinas leiteiras submetidas a um programa de Inseminação Artificial em Tempo Fixo (IATF). Para tanto, 94 fêmeas mestiças Holandês-Gir foram submetidas ao seguinte protocolo hormonal, iniciado em um dia aleatório, D0, por meio da inserção de um dispositivo intravaginal de progesterona (P4) associado à 2mg de Benzoato de Estradiol (BE) via intramuscular (i.m.). No D8, os dispositivos foram removidos e administrados 500 µg de Cloprostenol sódico prostaglandina F2 e 300 UI de Gonadotrofina Coriônica equina (eCG) i.m. Neste momento, os animais foram divididos em dois grupos experimentais: 50 vacas foram alocadas no grupo Cipionato de Estradiol (CE) e receberam 1mg dessa substância via i.m., enquanto outras 44 receberam 1mg de BE i.m., 24 horas após a retirada dos dispositivos (D9), sendo chamadas grupo BE. No D10, foram realizadas as inseminações e, previamente a cada procedimento de IA, foi executada a mensuração do DFOL por meio de ultrassonografia transretal. O diagnóstico de gestação foi realizado 55 dias após as IATFs. Não houve diferença significativa entre as médias de DFOL encontradas para os grupos BE e CE sendo, respectivamente, 11,45 ± 2,34 e 10,71 ± 2,43mm. O grupo BE também apresentou um índice de gestação de 34,10%, semelhante ao grupo CE que foi de 40,00%. Conclui-se que o CE pode substituir o BE em protocolo de IATF em vacas leiteiras, representando uma alternativa para simplificar o protocolo de IATF.

Comparison of two esters estradiol as inductors on ovulation follicular diameter and pregnancy rate of dairy cattle subject to program of FTAI / Comparação de dois ésteres de estradiol como indutores da ovulação sobre o diâmetro folicular e a taxa de gestação de bovinos leiteiros submetidos a programa de Inseminação Artificial em Tempo Fixo

This study aimed to evaluate the effect of using two estradiol esters, on the diameter of the ovulatory follicle (DFOL), and pregnancy rates of dairy cows submitted to FTAI program. Therefore, 94 females crossbred Dutch-Gir were subjected to the following hormone protocol started on a random day D0, by insertion of an intravaginal device of progesterone (P4) associated to 2.0 mg of estradiol benzoate (EB) intramuscular (im). In D8, the devices were removed and 500 µg of sodium cloprostenol prostaglandin F2 was administered and 300 IU of equine chorionic gonadotropin (eCG) i.m. At this time the animals were divided in two groups: 50 cows were allocated to EC group and received 1 mg of estradiol cypionate i.m., while the other 44 received 1.0 mg of EB i.m. 24 hours after removal of the devices (D9), being called the BE Group. At D10, inseminations were carried out, and prior to each IA procedure were performed trans rectal ultrasonography to measure the DFOL. Pregnancy diagnosis was performed 55 days after the FTAI. There was no significant difference between measurement of DFOL found for the BE and CE groups being, respectively, 11.45 ± 2.34 and 10.71 ± 2,43mm. The BE group also showed a 34.10% pregnancy rate, similar to the EC group which was 40.00%. It is concluded that CE can replace the BE in TAI protocol in dairy cows, representing an alternative to simplify the FTAI

Objetivou-se com este trabalho avaliar o efeito da utilização de dois ésteres de estradiol, sobre o Diâmetro do Folículo Ovulatório (DFOL) e taxa de gestação de fêmeas bovinas leiteiras submetidas a um programa de Inseminação Artificial em Tempo Fixo (IATF). Para tanto, 94 fêmeas mestiças Holandês-Gir foram submetidas ao seguinte protocolo hormonal, iniciado em um dia aleatório, D0, por meio da inserção de um dispositivo intravaginal de progesterona (P4) associado à 2mg de Benzoato de Estradiol (BE) via intramuscular (i.m.). No D8, os dispositivos foram removidos e administrados 500 µg de Cloprostenol sódico prostaglandina F2 e 300 UI de Gonadotrofina Coriônica equina (eCG) i.m. Neste momento, os animais foram divididos em dois grupos experimentais: 50 vacas foram alocadas no grupo Cipionato de Estradiol (CE) e receberam 1mg dessa substância via i.m., enquanto outras 44 receberam 1mg de BE i.m., 24 horas após a retirada dos dispositivos (D9), sendo chamadas grupo BE. No D10, foram realizadas as inseminações e, previamente a cada procedimento de IA, foi executada a mensuração do DFOL por meio de ultrassonografia transretal. O diagnóstico de gestação foi realizado 55 dias após as IATFs. Não houve diferença significativa entre as médias de DFOL encontradas para os grupos BE e CE sendo, respectivamente, 11,45 ± 2,34 e 10,71 ± 2,43mm. O grupo BE também apresentou um índice de

Comparação de dois ésteres de estradiol como indutores da ovulação sobre o diâmetro folicular e a taxa de gestação de bovinos leiteiros submetidos a programa de Inseminação Artificial em Tempo Fixo

SUMMARY This study aimed to evaluate the effect of using two estradiol esters, on the diameter of the ovulatory follicle (DFOL), and pregnancy rates of dairy cows submitted to FTAI program. Therefore, 94 females crossbred Dutch-Gir were subjected to the following hormone protocol started on a random day D0, by insertion of an intravaginal device of progesterone (P4) associated to 2.0 mg of estradiol benzoate (EB) intramuscular (im). In D8, the devices were removed and 500 µg of sodium cloprostenol prostaglandin F2 was administered and 300 IU of equine chorionic gonadotropin (eCG) i.m. At this time the animals were divided in two groups: 50 cows were allocated to EC group and received 1 mg of estradiol cypionate i.m., while the other 44 received 1.0 mg of EB i.m. 24 hours after removal of the devices (D9), being called the BE Group. At D10, inseminations were carried out, and prior to each IA procedure were performed trans rectal ultrasonography to measure the DFOL. Pregnancy diagnosis was performed 55 days after the FTAI. There was no significant difference between measurement of DFOL found for the BE and CE groups being, respectively, 11.45 ± 2.34 and 10.71 ± 2,43mm. The BE group also showed a 34.10% pregnancy rate, similar to the EC group which was 40.00%. It is concluded that CE can replace the BE in TAI protocol in dairy cows, representing an alternative to simplify the FTAI protocol.

RESUMO Objetivou-se com este trabalho avaliar o efeito da utilização de dois ésteres de estradiol, sobre o Diâmetro do Folículo Ovulatório (DFOL) e taxa de gestação de fêmeas bovinas leiteiras submetidas a um programa de Inseminação Artificial em Tempo Fixo (IATF). Para tanto, 94 fêmeas mestiças Holandês-Gir foram submetidas ao seguinte protocolo hormonal, iniciado em um dia aleatório, D0, por meio da inserção de um dispositivo intravaginal de progesterona (P4) associado à 2mg de Benzoato de Estradiol (BE) via intramuscular (i.m.). No D8, os dispositivos foram removidos e administrados 500 µg de Cloprostenol sódico prostaglandina F2 e 300 UI de Gonadotrofina Coriônica equina (eCG) i.m. Neste momento, os animais foram divididos em dois grupos experimentais: 50 vacas foram alocadas no grupo Cipionato de Estradiol (CE) e receberam 1mg dessa substância via i.m., enquanto outras 44 receberam 1mg de BE i.m., 24 horas após a retirada dos dispositivos (D9), sendo chamadas grupo BE. No D10, foram realizadas as inseminações e, previamente a cada procedimento de IA, foi executada a mensuração do DFOL por meio de ultrassonografia transretal. O diagnóstico de gestação foi realizado 55 dias após as IATFs. Não houve diferença significativa entre as médias de DFOL encontradas para os grupos BE e CE sendo, respectivamente, 11,45 ± 2,34 e 10,71 ± 2,43mm. O grupo BE também apresentou um índice de gestação de 34,10%, semelhante ao grupo CE que foi de 40,00%. Conclui-se que o CE pode substituir o BE em protocolo de IATF em vacas leiteiras, representando uma alternativa para simplificar o protocolo de IATF.

ANÁLISE DA POPULAÇÃO DE BACTÉRIAS ÁCIDO-LÁTICAS (BAL) VAGINAIS EM RESPOSTA À PROGESTERONA E AO ESTRÓGENO EM OVELHAS PRÉ- PÚBERES

A microbiota compreende os microrganismos que habitam um determinado compartimento de um organismo vivo e pode estar relacionada ao estado de saúde do hospedeiro. O ambiente vaginal, incluindo a microbiota local e o equilíbrio redox, parece estar sob a regulação das flutuações hormonais, em especial a dos esteroides ovarianos. Este trabalho teve por objetivo investigar o efeito da suplementação exógena com progesterona apenas ou progesterona seguida de benzoato de estradiol na população de bactérias acido lácticas, espécies reativas ao oxigênio e potencial antioxidante no ambiente vaginal de ovelhas pré-púberes. Dez ovelhas pré-puberes foram aleatoriamente divididas para receber ou não progesterona (P4) de longa ação via injeção intramuscular no dia zero (D0), seguido de suplementação com benzoato de estradiol (BE) no D5 para todas as fêmeas. O grupo de fêmeas que receberam ambos, P4 e BE, foi denominado Grupo PE, enquanto o grupo de fêmeas que receberam apenas estradiol foi chamado de Grupo E. No D0, D2 e D7, amostras vaginais de todos os animais foram coletadas via suabe, colocadas em solução salina, diluídas 1:10, 10-3 e 10-5 e semeadas em ágar sangue, em triplicatas. Alternativamente, amostras em solução salina estéril foram diluídas 1:10 e 10-4 e semeadas em ágar MRS (De Man e Rogosa e Sharpe) pelo método pour plate, em triplicatas. Três meses depois, o mesmo experimento foi repetido nos mesmos animais para a coleta de lavado vaginal. No D0, D2 e D7 todos os animais foram coletados via lavado vaginal, por meio de infusão de 5 ml de solução salina estéril no fórnix vaginal, seguida de recuperação em tubo estéril, e armazenamento a -20ºC. O lavado vaginal foi avaliado para a produção de ROS e potencial antioxidante. Os dados foram analisados por análise de variância de amostras repetidas no tempo, considerando os efeitos de tratamento (Grupos E e PE), dia (D0, D2, D7) e sua interação. Não foi detectado efeito de tratamento para nenhuma das variáveis analisadas. O dia, altamente influenciado pelo efeito do tratamento com BE no D5, induziu um aumento das UFCs de BAL e potencial antioxidante das células vaginais e a uma redução na produção de ROS pelas células e lavado vaginal. Observou-se também um enriquecimento de colônias de lactobacillus ao longo do tempo. Conclui-se que o estrógeno favorece o crescimento da população vaginal das bactérias acido lácticas e o estabelecimento de um ambiente vaginal mais antioxidante que parece estar correlacionado a uma mudança qualitativa da microbiota vaginal favorecendo o estabelecimento de lactobacillus.

The microbiota comprehends the microrganisms that inhabit a given body compartment of a live organismo and may be related to the state of health of the host. The vaginal environment, including the local microbiota and the redox equilibrium, seems to be under the regulation of hormonal fluctuations, particularly that of ovarian steroids. This study aimed to investigate the effect of progesterone alone or progesterone followed by estradiol benzoate exogenous supplementation on the lactic acid population, reactive oxygen species production and antioxidant potential in the vaginal environment of prepubertal ewe lambs. Ten prepubertal ewe lambs were randomly divided to receive or not an intramuscular injection of a longacting progesterone on day zero (D0), followed by an injection of estradiol benzoate (EB) on D5 to all ten females. The female group receiving both P4 and EB was called PE group, whereas the female group receiving only EB was called E group. On D0, D2 and D7 vaginal samples from all animals were collected by swab into a sterile saline solution, diluted 1:10, 10-3 e 10-5 and seeded on blood agar, in triplicates; alternatively, samples in saline were diluted 1:10 and 10-4 and seeded on MRS agar (De Man, Rogosa and Sharpe) by the pour plate method, in triplicates. Three months later, the experiment was repeated with the same animals aiming to collect vaginal washings. ON D0, D2 and D7 all the animals were sampled by infusing 5 ml of sterile saline in to the vagina fornix, followed by solution recovery into a sterile tube and storage at -20ºC. Vaginal washings were assessed for ROS production and antioxidant potential. The data were analyzed by repeated measures analysis of variance, considering the effects of treatment (E and PE), day (D0, D2, D7) and their interaction. No effect of treatment was detected for the assessed variables. The effect of day, highly influenced by the EB treatment effect on D5, induced an increase on the CFU of vaginal BALs and antioxidant potential of vaginal cells, and a reduction of ROS production in vaginal cells and vaginal washings. An enrichment of lactobacillus colonies over time was also observed. In conclusion, estrogen favors the growth of vaginal lactic acid bacteria and the establishment of a more antioxidant vaginal environment, which seems to be related to the observed shift of the microbiota favoring the establishment of lactobacillus.

EFEITO DO BENZOATO DE ESTRADIOL OU GONADOTROFINA CORIÔNICA HUMANA (hCG) EM NOVILHAS DE CORTE SUBMETIDAS A PROTOCOLOS DE RESSINCRONIZAÇÃO DA OVULAÇÃO

O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito da ressincronização da ovulação, iniciada 24 dias após a primeira IATF, sobre a área do corpo lúteo (CL), a concentração plasmática de progesterona (P4) e a taxa de prenhez. Exp.1 526 novilhas Brangus com idades entre 24 e 26 meses, foram submetidas a um programa de IATF no início da estação de acasalamento. O protocolo de sincronização para a primeira IATF começou com a inserção de um implante intra-vaginal contendo 750 mg de P4 e a administração de 2 mg de benzoato de estradiol (BE) intramuscular (i.m.) no dia -9 (D-9). Depois de sete dias (D-2), os implantes de P4 foram removidos, e 150 µg de D-cloprostenol (PGF), i.m., e 1 mg de cipionato de estradiol (CE), i.m., foram administrados. A IATF foi realizada entre 48 e 54 horas após a remoção do implante de P4 (D0). Vinte e quatro dias após a primeira IATF (D24), as novilhas foram divididas aleatoriamente nos seguintes grupos experimentais: controle (n = 167, sem tratamento), BE (n = 208, 1 mg de BE, i.m.) e hCG (n = 151, 1000 UI de hCG, i.m.). Novilhas dos grupos BE e hCG receberam um novo implante intra-vaginal contendo 750 mg de P4 na D24. No dia 31 (D31), os implantes de P4 foram removidos e o diagnóstico de prenhez foi realizado por ultrassonografia. As taxas de prenhez da primeira IATF no D31 foram 58,7% (98/167), 53,4% (111/208) e 52,9% (80/151), respectivamente, para os grupos controle, BE e hCG. Novilhas diagnosticadas como não gestantes receberam 150 µg de PGF, i.m., e 1 mg de CE, i.m., sendo a segunda IATF realizada 48 a 54 horas após a remoção do implante (D33). No D31, os subgrupos de novilhas prenhes de cada grupo experimental foram aleatoriamente divididos, sendo realizado exame por ultrassonografia para determinar a área do CL e coleta de uma amostra de sangue para determinar a concentração sérica de P4: Controle (n = 13), BE (n = 26), e hCG (n = 24). A área de CL foi significativamente maior (P<0,05) no grupo hCG (3,42±0,76 cm 2 ), em comparação aos grupos de BE (2,44±0,57 cm 2 ) e controle (2,61±0,61 cm 2 ). Da mesma forma, a concentração sérica de P4 foi significativamente maior (P<0,05) no grupo hCG (12,43±3,48 ng/ml) em comparação aos grupos BE (6,92±3,04 ng/ml) e controle (7,29±2,45 ng/ml). O uso do BE e do hCG em programas de ressincronização da ovulação 24 dias após a IATF não interferiu na taxa de prenhez da primeira IATF. É provável que o mecanismo de ação do BE não afete a atividade do CL, a produção de P4, e consequentemente, não tenha efeito negativo na manutenção da prenhez em protocolos de ressincronização da ovulação. O tratamento com hCG resultou no aumento da área de CL e da produção de P4, porém, este efeito não favoreceu a taxa de prenhez da primeira IATF. Exp.2 184 novilhas Brangus com idade entre 24 a 26 meses e peso corporal médio de 361±29,2 kg foram submetidas a dois programas de IATF. O protocolo de sincronização para a primeira IATF foi o mesmo utilizado no Exp.1. Vinte e quatro dias após a primeira IATF (D24), as novilhas foram aleatoriamente divididas conforme os hormônios utilizados para ressincronização, formando os seguintes grupos experimentais: BE (n = 83, 1 mg de BE, i.m.) e hCG (n = 101, 1000 UI de hCG, i.m.). Novilhas dos grupos BE e hCG receberam um novo dispositivo intravaginal contendo 750mg de progesterona no D24. No D31, os implantes foram removidos e o diagnóstico de gestação por ultrassonografia foi realizado. As taxas de prenhez da primeira IATF no D31 foram de 63,9% (53/83) e 64,9% (65/101), respectivamente, para os grupos BE e hCG. Novilhas diagnosticadas como não gestantes (n=66) receberam 150 µg de PGF, i.m., e 1 mg de CE, im; a segunda IATF foi realizada no D33. Trinta dias após a segunda IATF (D63), foi realizado o segundo diagnóstico de gestação. As perdas gestacionais entre o D31 e D63, das novilhas prenhes da primeira IATF foram 9,4% (5/53) e 6,2% (4/65) respectivamente para os grupos BE e hCG. As taxas de prenhez da segunda IATF foram 40,0% (12/30) e 22,2% (8/36), respectivamente, para os grupos BE e hCG. As taxas de prenhez acumulada para os grupos BE e hCG foram, respectivamente, 72,3% (60/83) e 68,3% (69/101). O uso do BE e hCG para ressincronização da ovulação 24 dias após a primeira inseminação não afetou a taxa de prenhez da primeira IATF. As taxas de prenhez obtidas na segunda IATF foram inferiores às expectativas, considerando a resposta da primeira IATF. Entretanto, as taxas de prenhez acumulada foram similares e satisfatórias para os primeiros 33 dias da estação de acasalamento.

The aim of this study was to evaluate the effect of resynchronization of ovulation, which began 24 days after the first TAI, on the corpus luteum area (CL), plasma progesterone production (P4) and pregnancy rates. Exp.1 526 Brangus heifers between 24 and 26 months of age were submitted to a TAI program at the beginning of the breeding season. The protocol synchronization for the first TAI started with the insertion of an intravaginal implant containing 750 mg progesterone (P4) and the administration of 2 mg of estradiol benzoate (EB) intramuscular (i.m.) on day -9 (D-9). After seven days (D-2), P4 implants were removed, and 150 µg D-cloprostenol (PGF), and 1 mg estradiol cypionate (EC), were administered, i.m. The TAI was carried out between 48 and 54 hours after removal of the P4 implant (D0). Twenty-four days after the first TAI (D24), heifers were divided randomly into the following groups: control (n = 167, untreated), EB (n = 208, 1 mg EB, i.m.) and hCG (n = 151, 1000 IU hCG, i.m.). Heifers of the EB and hCG groups received a new intravaginal implant containing 750 mg of P4 on D24. On day 31 (D31), P4 implants were removed and the pregnancy diagnosis was performed by ultrasonography. Pregnancy rates for the first TAI, on D31, were 58.7% (98/167), 53.4% (111/208) and 52.9% (80/151), respectively, for the control, EB and hCG groups. Non-pregnant heifers received 150 µg PGF, i.m., and 1 mg EC, i.m., and the second TAI was performed 48 to 54 hours after removal of the P4 implant (D33). On D31, subgroups of pregnant cows from each experimental groups were randomly divided to determine the surface area of the CL by ultrasound and blood samples were collected to determine P4 concentrations: control (n = 13), BE (n = 26), and hCG (n = 24). The surface area of the CL was significantly higher (P<0.05) in the hCG group (3.42±0.76 cm 2 ) compared to the EB (2.44±0.57 cm 2 ) and control (2.61±0.61 cm 2 ) groups. Also, P4 concentrations were significantly higher (P<0.05) in the hCG group (12.43±3.48 ng/mL) compared to the EB groups (6.92±3.04 ng/mL) and control (7.29±2.45 ng/mL). The use of EB and hCG in ovulation resynchronization programs 24 days after TAI did not affect the pregnancy rates of the first TAI. It is likely that EB mechanism of action does not affect the activity of the CL and P4 production, consequently having no negative effect on the maintenance of pregnancy. Nevertheless, the hCG treatment on D24 increased the area of CL and P4 plasma levels, but this effect neither improves nor compromised pregnancy rate of the first TAI. Exp.2 184 aged 24-26 months Brangus heifers old with mean body weight of 361±29.2 kg were submitted to two consecutive TAI programs. The synchronization protocol to the first TAI was the same as in Exp.1. Twenty-four days after the first TAI (D24), heifers were randomly divided according to the hormones used for resynchronization, according to the following groups: BE (n = 83, 1 mg EB, i.m.) and hCG (n = 101, hCG 1000 IU, i.m.). Heifers of the EB and hCG groups received a new intravaginal device containing 750 mg of progesterone on D24. On D31, P4 implants were removed and pregnancy diagnosis was performed by ultrasonography. The first TAI pregnancy rates on D31 were 63.9% (53/83) and 64.9% (65/101), respectively, for the EB and hCG groups. Heifers diagnosed as open received 150 µg PGF, i.m., and 1 mg EC, i.m.; the second TAI was performed on D33. Thirty days after the second TAI (D63), the second pregnancy diagnosis was performed. Pregnancy loss rates from D31 to D63 were 9.4% (5/53) and 6.2% (4/65) respectively for the EB and hCG groups. Pregnancy rates for the second TAI were 40.0% (12/30) and 22.2% (8/36), for the EB and hCG groups respectively. The cumulative pregnancy rates for EB and hCG groups were, respectively, 72.3% (60/83) and 68.3% (69/101). The use of hCG and EB for resynchronization of ovulation 24 days after the first insemination did not affect pregnancy rates of the first TAI. Pregnancy rates obtained in the second TAI were below expected values, considering the first TAI response. However, cumulative pregnancy rates were similar and satisfactory for the first 33 days of the breeding season.

Effect of medroxy-progesterone acetate on follicular growth and endometrial cycloxygenase-2 (COX-2) expression during the bovine estrous cycle / Efeito do acetato de medroxi-progesterona sobre o crescimento filicular e expressão endometrial de ciclooxigenase-2 (COX-2) durante o ciclo estral de bovinos

The objective of this study was to evaluate the effect of medroxy-progesterone acetate (MAP) with or without estradiol benzoate (EB) on follicular growth during the estrous cycle in cattle. In the first experiment, Hereford cows were synchronized with a synthetic analogue of PGF2 alpha and were treated with two different doses of MAP (250 or 500 mg) with or without EB for 7 days starting on day 8 of the estrous cycle. Follicular growth was inhibited (P<0.05) in all cows except controls and those receiving 250mg MAP without EB. Seventy-five percent of the animals (15/20) showed estrus on days 21 and 22 of the cycle rather than at MAP withdrawal, demonstrating that these treatments did not induce estrus. To determine whether the EB treatment altered endometrial sensitivity to oxytocin and thus the luteolytic cascade, multiparous pre-synchronized cows received 5 mg of EB followed 6 hours later with 50 IU of oxytocin (OT; n=9). Eight hours after EB injection, endometrial fragments were collected from the cows on days 4, 13 and 17 of the estrous cycle and COX-2 gene expression was measured by PCR. EB increased COX-2 mRNA levels only on day 17 of the estrous cycle (P<0.05). In conclusion, MAP alone or associated with EB is able to suppress bovine follicular growth. However, EB in the presence of MAP is not efficient to induce luteolysis in cows when injected on day 8 of the estrous cycle.(AU)

Este estudo teve como objetivo avaliar o efeito do acetato de medroxi-progesterona (MAP) com ou sem benzoato de estradiol (BE) sobre o crescimento folicular durante o ciclo estral bovino. No primeiro experimento, vacas da raça Hereford foram sincronizadas com um análogo sintético de PGF2á e tratadas com duas doses diferentes de MAP (250 ou 500mg), com ou sem EB, durante 7 dias, iniciando-se no oitavo dia do ciclo estral. Observou-se uma inibição do crescimento folicular (P<0,05) em todas as vacas, exceto no grupo controle e no grupo que recebeu 250mg de MAP sem BE. Os 75 por cento dos animais não exibiu estro no momento da remoção do MAP, mas sim nos dias 21 e 22 do ciclo, demonstrando que os tratamentos não induziram cio. Para se determinar se o tratamento com BE alterou a sensibilidade endometrial à ocitocina e, assim, a cascata luteolítica, vacas multíparas pré-sincronizadas receberam 5mg de BE, seguidos, após 6 horas, de 50 UI de ocitocina (OT; n=9). Oito horas após a administração de BE, colheram-se fragmentos endometriais das vacas, nos dias 4, 13 e 17 do ciclo estral, mensurando-se a expressão gênica de COX-2 através de PCR. O BE aumentou os níveis de RNAm de COX-2 apenas no dia 17 do ciclo estral (P<0,05). Em conclusão, o MAP isolado ou associado a BE é capaz de suprimir o crescimento folicular bovino. Entretanto, o BE, na presença de MAP é ineficaz na indução da luteólise bovina, quando injetado no oitavo dia do ciclo estral.(AU)

DINÂMICA DO FLUXO SANGUÍNEO FOLICULAR EM VACAS NELORE SUBMETIDAS A PROTOCOLOS DE IATF.

Objetivou-se caracterizar a perfusão sanguínea folicular em vacas submetidas a três protocolos de IATF. Foram utilizadas 21 vacas, divididas aleatoriamente em três protocolos de IATF num modelo crossover, com intervalo de 30 dias de descanso. O protocolo BED9 constituiu na inserção de um dispositivo intravaginal de P4 e aplicação IM de 2mg de BE em D0, retirada da P4 e 150µg IM de PGF2 (D-cloprostenol) em D8, e 1mg de BE IM em D9; o BED8 de um dispositivo de P4 e 2mg de BE em D0, retirada da P4, 150µg de PGF2 e 1mg de BE em D8; o CED8 de um dispositivo de P4 e 2mg de BE em D0, retirada da P4, 150µg de PGF2 e 1mg de CE em D8. As vacas foram avaliadas com ultrassom Color Doppler (MyLab30GoldVET, Itália) em intervalos de 3 horas, nas três primeiras manipulações e após de 6 em 6 horas até ocorrer a ovulação ou um prazo máximo de 90 horas após a retirada do dispositivo. Para a avaliação da vascularização folicular foi adotada uma classificação subjetiva de Grau 1 a 5, a qual considera a porcentagem de circulação na parede do folículo. Foi observado diferença (P<0,05) no horário de ovulação após a retirada da P4, onde o BED8 (64,36±10,42h) antecipou a ovulação em relação aos outros dois tratamentos, sendo o BED9 (74,40±3,04h) e CED8 (72,00±6,63h) iguais. O tamanho médio do folículo pré-ovulatório foi igual nos três protocolos (p=0.0708). A taxa de ovulação foi menor no protocolo BED8 (52,38%), e igual em BED9 (80,95%) e CED8 (90,47%) (p=0,3778). No início da avaliação de todos os protocolos, todos as vacas apresentaram um folículo em grau 1, dos folículos que ovularam todos chegaram ao grau 5 antes de ovular, ocorrendo a ovulação em 12 horas, em média. Foi observado que o folículo tem a taxa de crescimento inversamente proporcional ao aumento do grau de circulação. A ferramenta Color Doppler permite examinar a vascularização na parede do folículo, tal como predizer a proximidade da ovulação.

This study aimed to characterize the blood follicle perfusion in 3 fixed-time artificial insemination protocols. Twenty one Nelore cows, randomly divided into three FTAI protocols in a crossover model with a 30 days interval, were used. The BED9 protocol consisted of an intravaginal progesterone implant Sincrogest® and 2 mg of BE IM in D0; implant removal and 150g IM PGF2 (D-cloprostenol) in D8, and 1 mg of BE IM in D9; BED8 protocol consisted of a P4 implant and 2 mg BE in D0; removal of the implant, 150g of PGF2 and 1 mg BE in D8; CED8 protocol consisted of na P4 implant and 2 mg BE D0, removal of the implant, 150g of PGF2 and 1 mg CE in D8. The group of cows was evaluated with ultrasound Color Doppler (MyLab 30GoldVET, Italy) at 3 hours intervals in the first three manipulations and then with 6 hours intervals until ovulation occurs or a maximum of 90 hours, after implant withdrawal. For follicle vascularization was used a subjective rating of degree 1 to 5, which considers the percentage of vascularization in the follicle wall. There was difference (P<0.05) in ovulation time after P4 withdrawal, wich BED8 (64.36 ± 10,42h) anticipated ovulation comparing with the other two treatments, being BED9 (74.40 ± 3,04h) and CED8 (72.00 ± 6,63h) equal. The average size of the pre-ovulatory follicles were similar in the three protocols (p=0.0708). The ovulation rate was lower in BED8 protocol (52.38%), and BED9 (80.95%) and CED8 (90.47%) were similar (p=0.3778). In the three protocols, all animals had a degree 1 follicle at the beginning of evaluation; all ovulatory follicles had degree 5 before ovulation time and this occurred in 12 hours. It was observed that the follicle has the growth rate inversely proportional to the increase of vascularization grade. The Color Doppler tool can examine the vasculature in the follicle wall as predicting the approach of ovulation.

Sincronização do estro e da ovulação utilizando protocolos de curta duração durante a pré-estação reprodutiva em ovelhas Suffolk / Estrus and ovulation synchronization using short-term protocolsduring the previous reproductive season in Suffolk ewes

Este trabalho foi realizado com o objetivo de estudar a eficácia do protocolo de curta duração de sincronização do estro. As ovelhas foram divididas em quatro grupos: Grupo Controle (esponjas de MAP por 12 dias, e eCG na retirada); Os Grupos I, II e III permaneceram com a esponja por quatro dias e na retirada foi aplicado 100 µg de PGF e adicionalmente: no Grupo I (0,1 mg de Benzoato de estradiol - BE na colocação da esponja e 48h após a retirada 50 µg de GnRH); Grupo II (35 mg de progesterona injetável e 0,1 mg de BE na colocação da esponja e na retirada 400 UI de eCG e 50 µg de GnRH 48h após); Grupo III (35 mg de progesterona injetável e 0,2 mg de BE na colocação da esponja e na retirada 400 UI de eCG e 50 µg de GnRH 56h após). Foram feitos exames de ultrassom, dosagens de progesterona, e observações do início do estro e da ovulação. A falta do eCG no Grupo I fez com que esse protocolo fosse menos eficaz na indução e sincronização do estro e ovulação. O Grupo Controle teve maior sincronia do estro e da ovulação.(AU)

This study was carried out with the objective of examining the effect of the short-term estrus synchronization protocol. Ewes were divided in four groups: Control Group (MAP sponges for 12 days, and eCG at withdrawal); Groups I, II and III used the sponge for four days, and 100 µg of PGF was applied at withdrawal; and additionally, Group I (0.1 mg of Estradiol benzoate - EB, in the sponge placement, and in the withdrawn 400 UI of eCG and 50 µg of GnRH 48h later); Group II (35 mg of injectable progesterone and 0.1 mg of EB in the sponge placement, and 400 UI of eCG at withdrawal, and 50 µg of GnRH 48h after); Group III (35 mg of injectable progesterone and 0.2 mg of EB in the sponge placement, and 400 UI of eCG at withdrawal, and 50 µg of GnRH 56h after). Exams were accomplished for ultrasound and determine the plasmatic concentrations of progesterone and observations of the beginning the estrus and the ovulation. The lack of eCG in Group I caused this protocol to be less efficacious in induction and synchronization of estrus and ovulation. The Control Group had a greater synchronization of estrus and ovulation.(AU)

Sincronização do estro e da ovulação utilizando protocolos de curta duração durante a pré-estação reprodutiva em ovelhas Suffolk / Estrus and ovulation synchronization using short-term protocolsduring the previous reproductive season in Suffolk ewes

Este trabalho foi realizado com o objetivo de estudar a eficácia do protocolo de curta duração de sincronização do estro. As ovelhas foram divididas em quatro grupos: Grupo Controle (esponjas de MAP por 12 dias, e eCG na retirada); Os Grupos I, II e III permaneceram com a esponja por quatro dias e na retirada foi aplicado 100 µg de PGF e adicionalmente: no Grupo I (0,1 mg de Benzoato de estradiol - BE na colocação da esponja e 48h após a retirada 50 µg de GnRH); Grupo II (35 mg de progesterona injetável e 0,1 mg de BE na colocação da esponja e na retirada 400 UI de eCG e 50 µg de GnRH 48h após); Grupo III (35 mg de progesterona injetável e 0,2 mg de BE na colocação da esponja e na retirada 400 UI de eCG e 50 µg de GnRH 56h após). Foram feitos exames de ultrassom, dosagens de progesterona, e observações do início do estro e da ovulação. A falta do eCG no Grupo I fez com que esse protocolo fosse menos eficaz na indução e sincronização do estro e ovulação. O Grupo Controle teve maior sincronia do estro e da ovulação.

This study was carried out with the objective of examining the effect of the short-term estrus synchronization protocol. Ewes were divided in four groups: Control Group (MAP sponges for 12 days, and eCG at withdrawal); Groups I, II and III used the sponge for four days, and 100 µg of PGF was applied at withdrawal; and additionally, Group I (0.1 mg of Estradiol benzoate - EB, in the sponge placement, and in the withdrawn 400 UI of eCG and 50 µg of GnRH 48h later); Group II (35 mg of injectable progesterone and 0.1 mg of EB in the sponge placement, and 400 UI of eCG at withdrawal, and 50 µg of GnRH 48h after); Group III (35 mg of injectable progesterone and 0.2 mg of EB in the sponge placement, and 400 UI of eCG at withdrawal, and 50 µg of GnRH 56h after). Exams were accomplished for ultrasound and determine the plasmatic concentrations of progesterone and observations of the beginning the estrus and the ovulation. The lack of eCG in Group I caused this protocol to be less efficacious in induction and synchronization of estrus and ovulation. The Control Group had a greater synchronization of estrus and ovulation.

Efeito do eCG ou benzoato de estradiol associado ao norgestomet na taxa de concepção de vacas de corte submetidas à IATF no pós-parto / Effect of eCG or estradiol benzoate associated with norgestomet on the conception rate of beef cows submitted to FTAI in the postpartum

Este estudo objetivou comparar as taxas de concepção, em vacas de corte no período pós-parto (PPP), tratadas com Gonadotrofina Coriônica Eqüina (eCG) ou Benzoato de Estradiol (BE), após o uso de Norgestomet submetidas à inseminação artificial em tempo fixo(IATF). A hipótese é que a administração de eCG ou BE aumenta as taxas de concepção. Vacas Nelore (n=138) e Brangus (n=63), lactantes,entre 26 e 118 dias do PPP, foram divididas em três grupos homogêneos e dentro de cada grupo subdivididas em dois blocos, um com um PPP < 45 dias (PPP1; n=107) e outro > 45 dias (PPP2;n=94). Todas as fêmeas receberam um implante auricular contendo 3mg de Norgestomet (Crestar®), seguido pela administração de 5mg de Valerato de Estradiol. Os implantes auriculares foram mantidos durante 10 dias. Na retirada dos implantes, as fêmeas receberam 1mL de solução fisiológica (n=68; Grupo Controle) ou 500 UI de eCG (Folligon®; n=67; Grupo eCG) ou 1mg de Benzoato de Estradiol (Index; n=66; Grupo BE) 24 horas após a retirada do implante. AIATF foi realizada 54 horas após a retirada do implante. O diagnóstico de gestação foi realizado por ultra- sonografia 30 dias após a IATF. Houve interação entre os tratamentos e o PPP. No PPP1, a taxa de concepção foi maior no grupo eCG comparado ao BE (47,22% vs.15,38%; P<0,01). No PPP2, as taxas de concepção dos grupos eCG eBE foram maiores que no grupo controle (41,93%, 44,44% vs.22,22%; P<0,01). Conclui-se que vacas, com até 45 dias do PPP, o eCG associado ao Norgestomet aumenta as taxas de concepção.(AU)

This study aimed to compare conception rates at the post partum period (PPP) in beef cows which were administered either Equine Chorionic Gonadotrophin (eCG) or Estradiol Benzoate (EB) after Norgestomet and submitted to fixed-time artificial insemination(FTAI). The hypothesis was that the administration of eCG or E Benhances the conception rate. Lactating Nelore cows (n=138) and Brangus (n = 63), between 26 and 118 days of post partum period(PPP) were divided into three homogeneous groups, and subdividedin two blocks, inside each group one of them with a PPP d” 45 days (PPP1; n=107) and another with a PPP > 45 days (PPP2; n=94). Allcows received an auricular implant containing 3mg Norgestomet(Crestar®), followed by the administration of 5mg Estradiol Valerate.The auricular implants were kept during 10 days. Cows received 1mL saline solution (n=68, Control Group) or 500IU eCG (Folligon®;n=67; eCG Group) or 1mg Estradiol Benzoate (Index, n=66; EB Group) 24 hours after the removal of the implant. FTAI was made 54 hours after the implant removal. The pregnancy diagnosis was carried through ultrasonography 30 days after FTAI. There was an interaction between treatments and PPP. In the PPP1, the conception rate was higher in the eCG Group than in the EB Group (47.22% vs.15.38%; Pd”0.01). In the PPP2, the conception rates of the eCG and EB Groups were higher than in the Control Group (41.93%, 44.44%vs. 22.22%: Pd”0.01). It was concluded that in cows up to 45 days of PPP, the eCG associated with Norgestomet enhances the conception rates.(AU)

Avaliação da reutilização de implantes auriculares contendo norgestomet associados ao valerato ou ao benzoato de estradiol em vacas nelore inseminadas em tempo fixo / Evaluation of norgestomet auricular implants reused associated to valerate or to estradiol benzoate in fixed time artifical insemination in Nelore cows

Em fêmeas bovinas a utilização da técnica de inseminação artificial em tempo fixo (IATF) é possibilitada pelo emprego de fármacos que tem como objetivos sincronizar a emergência das ondas foliculares, os estros e a ovulação. Em rebanhos comerciais, o custo de tais fármacos deve estabelecer uma vantajosa relação com os benefícios. O presente estudo, objetivou comparar as taxas de prenhez em vacas Nelore (Bos taurus indicus) inseminadas em tempo fixo, tratadas com implantes auriculares contendo 3mg de norgestomet (Crestar®), novos (IN) ou utilizados uma vez (IR; reutilizados), associados a administração de norgestomet (NG) e valerato de estradiol (VE) ou progesterona (P4) e benzoato de estradiol (BE). Vacas Nelore PO (n=241), amamentando, com o bezerro ao pé, receberam um dos quatro tratamentos: Crestar® novo durante 10 dias associado a administração de 3mg de NG e 5mg de VE (grupo IN/NG+VE; n=61); Crestar® novo inserido durante 8 dias associado a 50mg de P4 e 2mg de E (grupo IN/P4+BE; n=61); Crestar® reutilizado inserido durante 10 dias associado a administração de 3mg de NG e 5mg de VE (grupo IR/NG+VE; n=58) ou Crestar® reutilizado inserido durante 8 dias associado a e 50mg de P4 e 2mg de BE (grupo IR/ P4+BE; n=61). No dia da remoção dos implantes os animais receberam 7,5mg de Luprostiol e 24 horas após a remoção 1mg de BE. A IATF foi realizada 54 a 56 horas após a retirada dos implantes. Após a IATF, as vacas tiveram os estros observados durante um período de 49 dias e em estro foram reinseminadas 12 horas após a observação. O diagnóstico de gestação foi realizado por ultra-sonografia 35 dias após a IATF e após o final da estação de monta. Foram avaliadas as taxas de prenhez na IATF (TP IATF) e no final da estação de monta (TP EM). Não houve interação entre as características dos implantes (novos e reutilizados) e os tratamentos administrados no dia da inserção do implante (NG+VE e P4+BE).(AU)

The use of fixed-time artificial insemination (IATF) in cows is possible by the use of drugs that aim at the synchronization of the folicular wave pool, the estrus and ovulation. In trading cattle the costs of these drugs must stablish a profitable relation with the benefits. The present study meant to compare the pregnancy rates in Nelore (Bos taurus indicus) cows inseminated at fixed-time, treated with new (IN) or once used (IR; reused) auricular releasing devices with 3mg of norgestomet (Crestar®), associated with the administration of norgestomet (NG) and estradiol valerate (VE) or progesterone (P4 and estradiol benzoate (BE). Pure breed Nelore cows (n=241), on lactation with calf received one of the four treatments: new Crestar® during 10 days administrated with 3mg of NG and 5 mg of VE (group lN/NG+VE; n=61); new Crestar® inserted during 8 days with 50mg of P4 and 2mg of BE (group lN/P4 +BE; n=61); reused Crestar® inserted during 10 days in association with 3 mg of norgestomet and 5 mg of VE (group IR/NG+ VE; n=58) or reused Crestar® inserted during 8 days in association with 50mg of P 4 and 2mg of BE (group lR/P4+BE; n=61). On the day the releasing devices were removed the animals received 7,5mg of Luprostiol and after 24 hours 1mg of BE. A fixed-time artificial insemination was done 54 to 56 hours after the removal of the releasing devices. Cows detected in estrus after the insemination at fixed-time were observed during a period of 49 days and reinseminated. The pregnancy diagnosis was done by ultrassonography 35 days after the IATF and after the end of the breeding season. The pregnancy rates of IATF (TPIATF) and at the end of the breeding season (TP EM) were estimated. There was no interaction between the characteristics of the (new or reused) releasing devices and the treatment given at the day the releasing devices were inserted (NG+ VE e P4 + BE).(AU)

Avaliação do benzoato de estradiol com um pré-tratamento para a recuperação de oócitos em ovelhas / Evaluation of estradiol benzoate as a pre-treatment for oocyte recovery in sheep

O objetivo deste estudo foi comparar o número de folículos, oócitos e a taxa de recuperação em ovelhas submetidas ao protocolo one-shot com ou sem priming ovariano de benzoato de estradiol (BE). Ovelhas não lactantes (n=33), multíparas, com idade média de cinco anos (intervalo 4-6) e um escore de condição corporal de 3,0±0,3 foram divididas em três grupos. O grupo one-shot (n=10) foi tratado com um implante subcutâneo contendo 1,5 mg de norgestomet do D0 ao D10, além de receberem 0,04 mg de D-loprostenol, 200 UI de hormônio folículo estimulante (FSH) e 300 UI de gonadotrofina coriônica equina (eCG) no D8. As ovelhas do grupo BE (n=11) receberam o mesmo tratamento do oneshot e uma aplicação de 0,6 mg de BE no D0. Os animais do grupo não tratado (n=12) não receberam hormônios. A aspiração folicular foi realizada por laparotomia 36 horas após a administração da gonadotrofina (D10) e os oócitos pesquisados e classificados com base na morfologia. Observou-se um aumento (p 0,05) no número de folículos aspirados no grupo one-shot comparado com os grupos BE e não tratado (16,3±5,6 vs. 9,5±2,4 e 12,1±4,1) respectivamente. O número médio de oócitos e taxa de recuperação foram superiores (p 0,05) nos grupos one-shot e BE em comparação com o grupo não tratado, o que resultou em 14,2±9,0 e 87,1% (142/163), 11,0±6,2 e 91,4% (122/134) vs. 6,8±3,5 e 71,9% (82/114), respectivamente. Concl

The objective of this study was to compare the number of follicles, oocytes and the recovery rate in sheep submitted to the one-shot protocol with or without ovarian priming with estradiol benzoate (EB). Pluriparous non-lactating sheep (n=33) with an average age of five years (range 4-6) and a body condition score of 3.0±0.3 were divided into three groups. The one-shot group (n=10) was treated with a subcutaneous implant containing 1.5 mg of norgestomet from D0 to D10. The animals in this group were administered 0.04 mg of D-cloprostenol, 200 IU of follicle stimulating hormone (FSH) and 300 IU of equine chorionic gonadotropin (eCG) on D8. Animals in the EB group (n=11) received the same treatment as one-shot plus the administration of 0.6 mg of EB on D0. In the untreated group (n=12), the animals received no hormone stimulation. The collection of the oocytes was performed by laparotomy 36 h after the administration of gonadotropins (D10). Oocytes were searched and classified based on morphology. An increase was observed (p 0.05) in the number of follicles aspirated in the one-shot vs. the EB and untreated groups (16.3±5.6 vs. 9.5±2.4 and 12.1±4.1), respectively. The average number of oocytes and the recovery rate were higher (p 0.05) in the one-shot and EB groups compared to the untreated group, resulting in 14.2±9.0 and 87.1% (142/163), 11.0±6.2 and 91.4% (122/134) vs. 6

Avaliação do benzoato de estradiol com um pré-tratamento para a recuperação de oócitos em ovelhas / Evaluation of estradiol benzoate as a pre-treatment for oocyte recovery in sheep

O objetivo deste estudo foi comparar o número de folículos, oócitos e a taxa de recuperação em ovelhas submetidas ao protocolo one-shot com ou sem priming ovariano de benzoato de estradiol (BE). Ovelhas não lactantes (n=33), multíparas, com idade média de cinco anos (intervalo 4-6) e um escore de condição corporal de 3,0±0,3 foram divididas em três grupos. O grupo one-shot (n=10) foi tratado com um implante subcutâneo contendo 1,5 mg de norgestomet do D0 ao D10, além de receberem 0,04 mg de D-loprostenol, 200 UI de hormônio folículo estimulante (FSH) e 300 UI de gonadotrofina coriônica equina (eCG) no D8. As ovelhas do grupo BE (n=11) receberam o mesmo tratamento do oneshot e uma aplicação de 0,6 mg de BE no D0. Os animais do grupo não tratado (n=12) não receberam hormônios. A aspiração folicular foi realizada por laparotomia 36 horas após a administração da gonadotrofina (D10) e os oócitos pesquisados e classificados com base na morfologia. Observou-se um aumento (p 0,05) no número de folículos aspirados no grupo one-shot comparado com os grupos BE e não tratado (16,3±5,6 vs. 9,5±2,4 e 12,1±4,1) respectivamente. O número médio de oócitos e taxa de recuperação foram superiores (p 0,05) nos grupos one-shot e BE em comparação com o grupo não tratado, o que resultou em 14,2±9,0 e 87,1% (142/163), 11,0±6,2 e 91,4% (122/134) vs. 6,8±3,5 e 71,9% (82/114), respectivamente. Concl

The objective of this study was to compare the number of follicles, oocytes and the recovery rate in sheep submitted to the one-shot protocol with or without ovarian priming with estradiol benzoate (EB). Pluriparous non-lactating sheep (n=33) with an average age of five years (range 4-6) and a body condition score of 3.0±0.3 were divided into three groups. The one-shot group (n=10) was treated with a subcutaneous implant containing 1.5 mg of norgestomet from D0 to D10. The animals in this group were administered 0.04 mg of D-cloprostenol, 200 IU of follicle stimulating hormone (FSH) and 300 IU of equine chorionic gonadotropin (eCG) on D8. Animals in the EB group (n=11) received the same treatment as one-shot plus the administration of 0.6 mg of EB on D0. In the untreated group (n=12), the animals received no hormone stimulation. The collection of the oocytes was performed by laparotomy 36 h after the administration of gonadotropins (D10). Oocytes were searched and classified based on morphology. An increase was observed (p 0.05) in the number of follicles aspirated in the one-shot vs. the EB and untreated groups (16.3±5.6 vs. 9.5±2.4 and 12.1±4.1), respectively. The average number of oocytes and the recovery rate were higher (p 0.05) in the one-shot and EB groups compared to the untreated group, resulting in 14.2±9.0 and 87.1% (142/163), 11.0±6.2 and 91.4% (122/134) vs. 6