In vitro propagation and conservation of Cattleya tigrina A Rich / Propagação e conservação in vitro de Cattleya tigrina A Rich

Cattleya tigrina A. Rich has been suffering heavy losses in its natural habitat and it is now included in the list of plants that are vulnerable to extinction. The development of in vitro propagation and conservation methodologies, as well as acclimatization, are considered important for species at the risk of extinction, as they promote the multiplication and conservation of the species, hence avoiding the loss of their genetic variability. The present study established the protocol of micropropagation and the in vitro conservation of C. tigrina. For the in vitro propagation, the study tested two volumes of the MS medium and two medium consistencies (stationary liquid and semi-solid). For acclimatization, the substrate mixtures containing pine bark, charcoal, vermiculite, and coconut coir were analyzed. For the in vitro conservation, different concentrations of the salts were tested in the MS medium, together with the osmotic regulators (sucrose, mannitol, and sorbitol), and at two temperatures (18 and 25 °C). The results obtained inferred that the semi-solid medium was superior to the stationary liquid medium in the variables of survival and the presence of roots, while the liquid medium was superior to the semi-solid medium in the number of shoots. For acclimatization, pine bark was the substrate where the plants developed an improved height, with sprouting, and rooting. The conservation was satisfactory and the plants remained viable for a period of 730 days, with the MS medium with 25% of the salts, and at temperatures of 18 ºC or 25 ºC. The plants were propagated in the stationary liquid MS medium (10 mL) and the semi-solid medium (25 mL), while they were acclimatized in pine bark and preserved in the MS medium with 25% of the salts (18 ºC or 25 ºC).

A Cattleya tigrina A. Rich vem sofrendo grandes perdas no seu habitat natural, sendo assim foi inclusa na lista de vulneráveis a extinção. O desenvolvimento de metodologias de propagação e conservação in vitro, bem como de aclimatização, são consideradas importantes para espécies em risco de extinção, por promover a multiplicação e conservação da espécie, evitando a perda do seu material genético. Desta forma, o presente trabalho visou estabelecer protocolo de micropropagação e conservação in vitro de C. tigrina. Para propagação in vitro testou volumes de meio de cultura e duas consistências do meio MS (líquido estacionário e semissólido). Para aclimatização, analisou misturas de substratos contendo casca de pinus, carvão vegetal, vermiculita e pó de coco. Para conservação in vitro, foram testados diferentes concentrações de sais no meio MS, reguladores osmóticos (sacarose, manitol e sorbitol), e duas temperaturas (18 e 25 °C). Os resultados obtidos inferem que, o meio de cultura semissólido foi superior ao líquido nas variáveis sobrevivência e presença de raízes, enquanto que o meio líquido foi superior ao meio semissólido em números de brotos. Na aclimatização a casca de pinus foi o substrato em que as plantas se desenvolveram melhor em altura, brotação e enraizamento. A conservação foi satisfatória e as plantas permaneceram viáveis por um período de 730 dias, usando 25% dos sais MS e temperatura de 18 ºC ou 25 ºC. As plantas podem ser propagadas em meio MS líquido estacionário (10 mL) ou semissólido (25 mL), aclimatizadas em casca de pinus e conservadas em 25% dos sais MS (18 ºC ou 25 ºC).

Fitorreguladores e espectros de luz na micropropagação de Oncidium baueri Lindl / Phytoregulators and light spectrum in micropropagation Oncidium baueri Lindl

Considerando que algumas espécies de orquídeas estão ameaçadas de extinção, a micropropagação é uma alternativa para a produção de um grande número de mudas com qualidade, em curto espaço de tempo. Dentre os fatores que poderão interferir na eficácia dessa técnica, podem ser citados os fitorreguladores e o espectro da luz. Assim, o objetivo do trabalho foi verificar a multiplicação e o enraizamento in vitro da orquídea Oncidium baueri com uso de diferentes concentrações de fitorreguladores e distintos filtros modificadores da luz natural. Para a multiplicação dos explantes, foram avaliados dois fatores: diferentes concentrações de 6-benzilaminopurina (BAP) (0, 1,0 e 2,0mg L-1) e espectro de luz, com uso ou não de filtros (azul, vermelho, verde); no período de enraizamento, testaram-se duas concentrações de ácido indolbutírico (AIB) (0 e 0,1mg L-1) e os mesmos níveis de luz. Concluiu-se que, durante a multiplicação, a não utilização de BAP e filtros proporciona maior número de folhas, brotações e maior comprimento dessas brotações. Na etapa de enraizamento, obtiveram-se raízes mais desenvolvidas em meio de cultura com 0,1mg L-1 de AIB.(AU)

Judging from the fact that a few species of orchids are threatened with extinction, the micropropagation is an alternative to produce a bigger number of seedlings with high quality, in a shorter period of time. Among the factors that could interfere in the efficiency of this technique, some are the phytoregulators and the quality of the light. Thus, the objective of the research was to verify the multiplication and the rooting in vitro of the orchid Oncidium baueri using different concentrations of phytoregulators and distinct modifiers filters of natural light. Concerning the multiplication of the explants, two factors have been evaluated: different concentrations of 6-benzylaminopurine (BAP) (0, 1,0 and 2,0mg L-1) and light spectrum, with or without filters (blue, red, green); and in the period of rooting, two concentrations of indolebutyric acid (IBA) (0 and 0,1mg L-1) and the same levels of light have been tested. It's possible to conclude that during the multiplication, not using BAP and filters provides a bigger number of leaves, more sprouting and bigger length of these sprouts. In the rooting phase, more developed roots were obtained in 0,1mg L-1 de AIB culture.(AU)

Estabelecimento e multiplicação in vitro de brotos no processo de micropropagação de cultivares de bananeira (Musa spp.)

The banana (Musa spp) is one of the most consumed fruits in the world and is widely consumed in Brazil, but diseases such as yellow and black sigatoka have been reducing its production. The immediate availability of new cultivars resistant to major diseases is limited by conventional propagation. The micropropagation, is an alternative for the production of seedlings with phytosanitarium and vegetative quality, but presents factors that difficult its application such as contamination by fungi and bacteria, associated with oxidation of the explants. The objective of this work was to adapt and/or optimize the stages of the micropropagation of banana cultivars, through the control of oxidation, contamination, and multiplication of shoots. The cultivars used Caipira (AAA), BRS Caprichosa (AAAB), Pacovan Ken (AAAB), Preciosa (AAAB), PV 03-76 (AAAB), Thap Maeo (AAB) were subjected to different micropropagation stages. In the study we used the streptomycin sulfate antibiotic and fungicide Opera® (BASF) to reduce contamination in vitro caused by bacteria and fungi, besides the anti-oxidant PVP (polivinilpirrolidona) to control the oxidation. We found contamination reduction with the use of streptomycin sulfate in the concentration of 100 mg L-1 and of oxidation with PVP at 4 g L-1. At the stage of multiplication of shoots, the cultivates showed means ranging from 1,90 to 4,75 shoots / explant. The cultivate Caipira (AAA) stood out from the others with the highest rate of shoot multiplication after three subcultivations, 41,50 shoots per rhizome average.

A banana (Musa spp.) é uma das frutas mais consumidas no mundo, e amplamente cultivada no Brasil, porém doenças como as sigatokas, negra e amarela, vêm reduzindo a sua produção. A disponibilização imediata de novas cultivares resistentes às principais doenças é limitada pela propagação convencional. A micropropagação é uma alternativa para a produção de mudas com qualidade fitossanitária e vegetativa, mas apresenta fatores que dificultam sua aplicação como a contaminação por fungos e bactérias, associada à oxidação dos explantes. O objetivo desse trabalho foi adaptar e/ou otimizar as etapas do processo de micropropagação para diferentes cultivares de bananeira, por meio do controle de oxidação, contaminação, e multiplicação de brotos, sendo utilizadas as cultivares Caipira (AAA), BRS Caprichosa (AAAB), Pacovan Ken (AAAB), Preciosa (AAAB), PV 03-76 (AAAB), Thap Maeo (AAB). No estudo foram utilizados o antibiótico sulfato de estreptomicina e o fungicida Opera® (BASF) visando reduzir a contaminação in vitro provocada por bactérias e fungos, além do anti-oxidante PVP (polivinilpirrolidona) para controlar a oxidação. Houve redução da contaminação com uso do sulfato de estreptomicina à concentração de 100 mg L-1 e da oxidação com PVP a 4 g L-1. Na fase de multiplicação de brotos, as cultivares apresentaram médias que variaram de 1,90 a 4,75 brotos/explante. A cultivar caipira (AAA) destacou-se das demais com a maior taxa de multiplicação de brotos após três subcultivos, média de 41,50 brotos por rizoma.

Estabelecimento e multiplicação in vitro de brotos no processo de micropropagação de cultivares de bananeira (Musa spp) / Establishment and in vitro multiplication of banana (Musa spp) cultivars with the use of PVP (Polyvinylpyrrolidone)

A banana (Musa spp.) é uma das frutas mais consumidas no mundo, e amplamente cultivada no Brasil, porém doenças como as sigatokas, negra e amarela, vêm reduzindo a sua produção. A disponibilização imediata de novas cultivares resistentes às principais doenças é limitada pela propagação convencional. A micropropagação é uma alternativa para a produção de mudas com qualidade fitossanitária e vegetativa, mas apresenta fatores que dificultam sua aplicação como a contaminação por fungos e bactérias, associada à oxidação dos explantes. O objetivo desse trabalho foi adaptar e/ou otimizar as etapas do processo de micropropagação para diferentes cultivares de bananeira, por meio do controle de oxidação, contaminação, e multiplicação de brotos, sendo utilizadas as cultivares Caipira (AAA), BRS Caprichosa (AAAB), Pacovan Ken (AAAB), Preciosa (AAAB), PV 03-76 (AAAB), Thap Maeo (AAB). No estudo foram utilizados o antibiótico sulfato de estreptomicina e o fungicida Opera® (BASF) visando reduzir a contaminação in vitro provocada por bactérias e fungos, além do anti-oxidante PVP (polivinilpirrolidona) para controlar a oxidação. Houve redução da contaminação com uso do sulfato de estreptomicina à concentração de 100 mg L-1 e da oxidação com PVP a 4 g L-1. Na fase de multiplicação de brotos, as cultivares apresentaram médias que variaram de 1,90 a 4,75 brotos/explante. A cultivar caipira (AAA) destacou-se das demais com a maior taxa de multiplicação de brotos após três subcultivos, média de 41,50 brotos por rizoma.

The banana (Musa spp) is one of the most consumed fruits in the world and is widely consumed in Brazil, but diseases such as yellow and black sigatoka have been reducing its production. The immediate availability of new cultivars resistant to major diseases is limited by conventional propagation. The micropropagation, is an alternative for the production of seedlings with phytosanitarium and vegetative quality, but presents factors that difficult its application such as contamination by fungi and bacteria, associated with oxidation of the explants. The objective of this work was to adapt and/or optimize the stages of the micropropagation of banana cultivars, through the control of oxidation, contamination, and multiplication of shoots. The cultivars used Caipira (AAA), BRS Caprichosa (AAAB), Pacovan Ken (AAAB), Preciosa (AAAB), PV 03-76 (AAAB), Thap Maeo (AAB) were subjected to different micropropagation stages. In the study we used the streptomycin sulfate antibiotic and fungicide Opera® (BASF) to reduce contamination in vitro caused by bacteria and fungi, besides the anti-oxidant PVP (polivinilpirrolidona) to control the oxidation. We found contamination reduction with the use of streptomycin sulfate in the concentration of 100 mg L-1 and of oxidation with PVP at 4 g L-1. At the stage of multiplication of shoots, the cultivates showed means ranging from 1,90 to 4,75 shoots / explant. The cultivate Caipira (AAA) stood out from the others with the highest rate of shoot multiplication after three subcultivations, 41,50 shoots per rhizome average.

Micropropagação de plântulas de erva-mate obtidas de embriões zigóticos

The aim of this research was to evaluate the micropropagation potential of holly (Ilex paraguariensis Saint Hilaire) aseptic plantlets derived from immature zygotic embryos. Shoot tip were inoculated in a quarter-strength MS basal medium with different doses of 6-benzylaminopurine (BAP) to induce multiple shoots. Shoot tips were inoculated in a basal medium with different doses of indol-butiric acid (IBA) for in vitro rooting and to test their effects in plantlet acclimatization. The addition of 8.88µM BAP to the basal medium increased the number of adventitious shoots and shoot height. Shoot tip rooted in basal medium with 7.38µM IBA in 30 days of culture. The IBA doses of the rooting medium affect plantlet acclimatization. The described micropropagation protocol might be used to produce a high number of holly plants.

O objetivo deste trabalho foi avaliar o potencial de micropropagação de erva-mate (Ilex paraguariensis Saint Hilaire) a partir de plântulas assépticas oriundas de embriões zigóticos imaturos. Ápices caulinares foram inoculados em meio base, formado por » da concentração dos sais do meio MS, com diferentes doses de 6-benzilaminopurina (BAP). Ápices caulinares foram enraizados em meio base com diferentes doses de ácido indolbutírico (AIB) e avaliado o efeito do AIB do meio de enraizamento in vitro na aclimatização das plantas. O meio base com 8,88µM de BAP foi o mais efetivo para a multiplicação, promovendo o maior número e comprimento de brotações adventícias. Ápices caulinares enraizaram em 30 dias de cultivo em meio base, acrescido de 7,38µM de AIB. A dose de AIB utilizada no enraizamento in vitro interfere na aclimatização das plantas. A técnica de micropropagação descrita pode ser utilizada para a produção massal de plantas de erva-mate.

Micropropagação de plântulas de erva-mate obtidas de embriões zigóticos

The aim of this research was to evaluate the micropropagation potential of holly (Ilex paraguariensis Saint Hilaire) aseptic plantlets derived from immature zygotic embryos. Shoot tip were inoculated in a quarter-strength MS basal medium with different doses of 6-benzylaminopurine (BAP) to induce multiple shoots. Shoot tips were inoculated in a basal medium with different doses of indol-butiric acid (IBA) for in vitro rooting and to test their effects in plantlet acclimatization. The addition of 8.88µM BAP to the basal medium increased the number of adventitious shoots and shoot height. Shoot tip rooted in basal medium with 7.38µM IBA in 30 days of culture. The IBA doses of the rooting medium affect plantlet acclimatization. The described micropropagation protocol might be used to produce a high number of holly plants.

O objetivo deste trabalho foi avaliar o potencial de micropropagação de erva-mate (Ilex paraguariensis Saint Hilaire) a partir de plântulas assépticas oriundas de embriões zigóticos imaturos. Ápices caulinares foram inoculados em meio base, formado por » da concentração dos sais do meio MS, com diferentes doses de 6-benzilaminopurina (BAP). Ápices caulinares foram enraizados em meio base com diferentes doses de ácido indolbutírico (AIB) e avaliado o efeito do AIB do meio de enraizamento in vitro na aclimatização das plantas. O meio base com 8,88µM de BAP foi o mais efetivo para a multiplicação, promovendo o maior número e comprimento de brotações adventícias. Ápices caulinares enraizaram em 30 dias de cultivo em meio base, acrescido de 7,38µM de AIB. A dose de AIB utilizada no enraizamento in vitro interfere na aclimatização das plantas. A técnica de micropropagação descrita pode ser utilizada para a produção massal de plantas de erva-mate.

OBTENÇÃO in vitro DE BROTOS DE Begonia rieger COM THIDIAZURON, CINETINA E ÁCIDO NAFTALENO ACÉTICO

Petiole segments, basal and distal leaf disks were cultivated in MS medium to determine an adequate protocol to obtain shoots of Begonia rieger. The MS medium was used with four combinations of naphthaleneacetic acid (NAA) and kinetin, respectively: 0.01 + 0.1; 0.05 + 0.5; 0.1 + 1.0; 0.2 + 2.0mg/l, and in two combinations of NAA and thidiazuron (TDZ), respectively: 0.01 + 0.1 and 0.01 + 0.25mg/l. Basal leaf disks were more effective to form shoots (60 to 80%) without roots. However petiole segments were more effective to form rooted shoots. The concentration of 0.1 mg/l of NAA plus 1.0mg/l of Kinetin was more effective to form shoots from distal leaf disks. The TDZ at smaller concentration was more effective to form shoots without roots (60%). It induced more shoots than kinetin. The distal leaf disks produced more shoots with 0.1 mg/l of NAA and 1.0mg/l of kinetin. The smaller concentration of TDZ induced more shoots, 80 and 90%, respectively, for distal and basal leaf disks. For petiole segments the highest TDZ concentration induced more shoots. In both TDZ concentrations the explants remained in active vegetative growth, oposed as observed for kinetin.

Com o objetivo de determinar um protocolo adequado à obtenção de brotos aéreos de Begonia rieger, cultivaram-se segmentos de pecíolos, discos foliares basais e distais, em meio MS completo, testando-se quatro combinações de ácido naftaleno acético (ANA) e cinetina (0,01 + 0,1; 0,05 + 0,5; 0,1 + 1,0; 0,2 + 2,0mg/l) e duas combinações de ANA e thidiazuron (TDZ) (0,01 +0,1; 0,01 +0,25mg/l). Os discos foliares basais mostraram-se mais eficientes na formação de brotos (60-80%) sem raízes, enquanto que os pecíolos foram mais eficientes na formação de brotos com raízes. Para os discos foliares distais o melhor tratamento foi de 0,1 e 1,0mg/l de ANA e cinetina. O uso de TDZ a 0,1 mg/l teve maior eficiência na formação de brotos sem raízes (60%) para todos os explantes estudados. O material tratado com o TDZ apresentou maior número de brotos aéreos do que com a cinetina. Quando associou-se 0,1 + 1,0mg/l de ANA e cinetina, os discos foliares distais formaram maior número (52/explante) de brotos. Na menor concentração de TDZ houve maior número de brotos, 80 e 90 por explante, nos discos foliares distais e basais, respectivamente. Nos pecíolos, a maior concentração de TDZ formou maior número de brotos. Em ambas concentrações de TDZ, as culturas permaneceram em ativo crescimento vegetativo, ao contrário das crescidas em meio com cinetina, cujos brotos oxidaram e morreram.

OBTENÇÃO in vitro DE BROTOS DE Begonia rieger COM THIDIAZURON, CINETINA E ÁCIDO NAFTALENO ACÉTICO

Petiole segments, basal and distal leaf disks were cultivated in MS medium to determine an adequate protocol to obtain shoots of Begonia rieger. The MS medium was used with four combinations of naphthaleneacetic acid (NAA) and kinetin, respectively: 0.01 + 0.1; 0.05 + 0.5; 0.1 + 1.0; 0.2 + 2.0mg/l, and in two combinations of NAA and thidiazuron (TDZ), respectively: 0.01 + 0.1 and 0.01 + 0.25mg/l. Basal leaf disks were more effective to form shoots (60 to 80%) without roots. However petiole segments were more effective to form rooted shoots. The concentration of 0.1 mg/l of NAA plus 1.0mg/l of Kinetin was more effective to form shoots from distal leaf disks. The TDZ at smaller concentration was more effective to form shoots without roots (60%). It induced more shoots than kinetin. The distal leaf disks produced more shoots with 0.1 mg/l of NAA and 1.0mg/l of kinetin. The smaller concentration of TDZ induced more shoots, 80 and 90%, respectively, for distal and basal leaf disks. For petiole segments the highest TDZ concentration induced more shoots. In both TDZ concentrations the explants remained in active vegetative growth, oposed as observed for kinetin.

Com o objetivo de determinar um protocolo adequado à obtenção de brotos aéreos de Begonia rieger, cultivaram-se segmentos de pecíolos, discos foliares basais e distais, em meio MS completo, testando-se quatro combinações de ácido naftaleno acético (ANA) e cinetina (0,01 + 0,1; 0,05 + 0,5; 0,1 + 1,0; 0,2 + 2,0mg/l) e duas combinações de ANA e thidiazuron (TDZ) (0,01 +0,1; 0,01 +0,25mg/l). Os discos foliares basais mostraram-se mais eficientes na formação de brotos (60-80%) sem raízes, enquanto que os pecíolos foram mais eficientes na formação de brotos com raízes. Para os discos foliares distais o melhor tratamento foi de 0,1 e 1,0mg/l de ANA e cinetina. O uso de TDZ a 0,1 mg/l teve maior eficiência na formação de brotos sem raízes (60%) para todos os explantes estudados. O material tratado com o TDZ apresentou maior número de brotos aéreos do que com a cinetina. Quando associou-se 0,1 + 1,0mg/l de ANA e cinetina, os discos foliares distais formaram maior número (52/explante) de brotos. Na menor concentração de TDZ houve maior número de brotos, 80 e 90 por explante, nos discos foliares distais e basais, respectivamente. Nos pecíolos, a maior concentração de TDZ formou maior número de brotos. Em ambas concentrações de TDZ, as culturas permaneceram em ativo crescimento vegetativo, ao contrário das crescidas em meio com cinetina, cujos brotos oxidaram e morreram.