Vincristine sulfate treatment influence on kidney function of female dogs with transmissible venereal tumor / Influência do tratamento com sulfato de vincristina na função renal de cadela com tumor transmissível venéreo

Chemotherapy agents have some undesirable and non-selective cytostatic effects. Considering that kidneys are vulnerable to drug-induced toxicity, this study evaluated renal injury caused by vincristine sulfate (VS) in 12 female dogs diagnosed with transmissible venereal tumor (TVT). The animals were treated with VS (0.025 mg/kg IV) every 7 days for 4 weeks. During treatment, the animals were subjected to clinical examination, blood count, serum measurement of symmetric dimethylarginine (SDMA), blood urea nitrogen (BUN), creatinine, alanine aminotransferase, and alkaline phosphatase. In addition, urinalysis and urinary gamma-glutamyl transferase (GGT) measurements were performed. All parameters were determined three times: before beginning the treatment (T0), after 14 days (T1), and after 28 days (T2). During the study period, there were no changes in serum urea or creatinine levels, urine specific gravity, or persistent proteinuria. Furthermore, urinary GGT measurement did not indicate tubular lesions, and consistent elevation of SDMA was found in only one patient above the reference range. The results showed that weekly therapy with VS as a single agent for 28 days does not induce renal injury in most cases.(AU)

Os agentes quimioterápicos possuem efeitos citostáticos indesejáveis e não seletivos. Considerando a vulnerabilidade renal à toxicidade induzida por drogas, este estudo avaliou a lesão renal causada pelo sulfato de vincristina (VS) em 12 cadelas com diagnóstico de tumor venéreo transmissível (TVT). Os animais foram tratados com VS (0,025 mg / kg IV) a cada sete dias, durante quatro semanas. No transcurso do tratamento, os animais foram submetidos a exame clínico, hemograma, dosagem sérica de dimetilarginina simétrica (SDMA), nitrogênio ureico sanguíneo (BUN), creatinina, alanina aminotransferase e fosfatase alcalina. Além disso, foram realizadas análises de urina e medições de gama-glutamil transferase (GGT) urinária. Todos os parâmetros foram mensurados em três tempos, antes do início do tratamento (T0), aos 14 dias (T1) e aos 28 dias (T2). Durante o período do estudo, não houve alterações nas concentrações de ureia ou creatinina séricas, na gravidade específica da urina ou proteinúria persistente. Além disso, a medição de GGT urinária não indicou lesões tubulares, e elevação consistente de SDMA foi encontrada em apenas um paciente acima do intervalo de referência. Os resultados mostraram que a terapia semanal com VS como agente único por 28 dias não induz lesão renal na maioria dos casos.(AU)

Protein-to-creatinine urinary in the early diagnosis of renal injury in canine pyometra / Relação proteína-creatinina-urinária no diagnóstico precoce de lesão renal em cadelas com piometra

Kidney disease that affects bitches with pyometra may lead patients to develop chronic renal failure even after pyometra treatment. Therefore, several studies have sought to clarify the gaps in the understanding of the pathogenesis of renal injury in pyometra. Identification of early detection markers for renal damage, which can predict and identify the prognosis of the disease, is very important. Proteinuria analysis can diagnose kidney damage, since proteins such as albumin are not filtered through the glomerulus and those that undergo glomerular filtration are almost completely reabsorbed by tubular cells. The objective of this study was to evaluate whether the urinary protein-to-creatinine ratio (UPC) can detect renal injury in bitches with pyometra before development of azotemia. For this, 44 bitches with pyometra were divided into two groups: bitches with azotemic piometra (A, n=15, creatinine >1.7) and bitches with non-azotemic pyometra (NA, n=29). The two groups were compared to the control group (CG, n=12), which had no signs of systemic disease. All animals underwent blood and urine tests. Leukocytosis was more evident in bitches in the A group than in the other groups. This shows that the inflammatory response may be associated with the pathogenesis of renal injury. The median UPC in bitches with pyometra was significantly higher than in the CG, with a median above the reference values. In conclusion, the UPC can be used in bitches with pyometra to detect renal damage before the development of azotemia. It has been suggested that the UPC of bitches with pyometra should be followed through during the postoperative period so that permanent renal lesions secondary to pyometra can be diagnosed and treated properly before the development of azotemia.(AU)

A doença renal que afeta cadelas com piometra pode levar a insuficiência renal crônica mesmo após o tratamento. Portanto, vários estudos procuraram esclarecer as lacunas na compreensão da patogênese da lesão renal na piometra. A identificação de marcadores de lesão renal precoce, que podem prever e identificar o prognóstico da doença é muito importante. A análise da proteinúria pode diagnosticar lesão renal, uma vez que proteínas como a albumina não são filtradas através do glomérulo e aquelas que sofrem filtração glomerular são quase completamente reabsorvidas pelas células tubulares. O objetivo deste estudo foi avaliar se a relação proteína-creatinina urinária (UPC) pode detectar lesão renal em cadelas com piometra antes do desenvolvimento de azotemia. Para isso, 44 cadelas com piometra foram divididas em dois grupos: cadelas com piometra azotêmica (A, n=15, creatinina >1,7) e cadelas com piometra não azotêmica (NA, n=29). Os dois grupos foram comparados ao grupo controle (CG, n=12), que não apresentaram sinais de doença sistêmica. Todos os animais foram submetidos a exames de sangue e urina. A leucocitose foi mais evidente nas cadelas do grupo A do que nos outros grupos. Isso mostra que a resposta inflamatória pode estar associada à patogênese da lesão renal. A mediana da UPC em cadelas com piometra foi significativamente maior que no CG, com uma mediana acima dos valores de referência. Em conclusão, a UPC pode ser usada em cadelas com piometra para detectar lesões renais antes do desenvolvimento de azotemia. Sugeriu-se que a UPC de cadelas com piometra deve ser acompanhada durante o pós-operatório, de modo que as lesões renais permanentes secundárias à piometra possam ser diagnosticadas e tratadas adequadamente antes do desenvolvimento de azotemia.(AU)

Protein-to-creatinine urinary in the early diagnosis of renal injury in canine pyometra / Relação proteína-creatinina-urinária no diagnóstico precoce de lesão renal em cadelas com piometra

Kidney disease that affects bitches with pyometra may lead patients to develop chronic renal failure even after pyometra treatment. Therefore, several studies have sought to clarify the gaps in the understanding of the pathogenesis of renal injury in pyometra. Identification of early detection markers for renal damage, which can predict and identify the prognosis of the disease, is very important. Proteinuria analysis can diagnose kidney damage, since proteins such as albumin are not filtered through the glomerulus and those that undergo glomerular filtration are almost completely reabsorbed by tubular cells. The objective of this study was to evaluate whether the urinary protein-to-creatinine ratio (UPC) can detect renal injury in bitches with pyometra before development of azotemia. For this, 44 bitches with pyometra were divided into two groups: bitches with azotemic piometra (A, n=15, creatinine >1.7) and bitches with non-azotemic pyometra (NA, n=29). The two groups were compared to the control group (CG, n=12), which had no signs of systemic disease. All animals underwent blood and urine tests. Leukocytosis was more evident in bitches in the A group than in the other groups. This shows that the inflammatory response may be associated with the pathogenesis of renal injury. The median UPC in bitches with pyometra was significantly higher than in the CG, with a median above the reference values. In conclusion, the UPC can be used in bitches with pyometra to detect renal damage before the development of azotemia. It has been suggested that the UPC of bitches with pyometra should be followed through during the postoperative period so that permanent renal lesions secondary to pyometra can be diagnosed and treated properly before the development of azotemia.(AU)

A doença renal que afeta cadelas com piometra pode levar a insuficiência renal crônica mesmo após o tratamento. Portanto, vários estudos procuraram esclarecer as lacunas na compreensão da patogênese da lesão renal na piometra. A identificação de marcadores de lesão renal precoce, que podem prever e identificar o prognóstico da doença é muito importante. A análise da proteinúria pode diagnosticar lesão renal, uma vez que proteínas como a albumina não são filtradas através do glomérulo e aquelas que sofrem filtração glomerular são quase completamente reabsorvidas pelas células tubulares. O objetivo deste estudo foi avaliar se a relação proteína-creatinina urinária (UPC) pode detectar lesão renal em cadelas com piometra antes do desenvolvimento de azotemia. Para isso, 44 cadelas com piometra foram divididas em dois grupos: cadelas com piometra azotêmica (A, n=15, creatinina >1,7) e cadelas com piometra não azotêmica (NA, n=29). Os dois grupos foram comparados ao grupo controle (CG, n=12), que não apresentaram sinais de doença sistêmica. Todos os animais foram submetidos a exames de sangue e urina. A leucocitose foi mais evidente nas cadelas do grupo A do que nos outros grupos. Isso mostra que a resposta inflamatória pode estar associada à patogênese da lesão renal. A mediana da UPC em cadelas com piometra foi significativamente maior que no CG, com uma mediana acima dos valores de referência. Em conclusão, a UPC pode ser usada em cadelas com piometra para detectar lesões renais antes do desenvolvimento de azotemia. Sugeriu-se que a UPC de cadelas com piometra deve ser acompanhada durante o pós-operatório, de modo que as lesões renais permanentes secundárias à piometra possam ser diagnosticadas e tratadas adequadamente antes do desenvolvimento de azotemia.(AU)

Alterações morfofuncionais renais em cães Golden Retriever Distróficos (GRMD) / Kidneys morphological changes in Golden Retriever Muscular Dystrophy dogs (GRMD)

A Golden Retriever Muscular Dystrophy (GRMD) é geneticamente homóloga à distrofia muscular de Duchenne (DMD) que acomete seres humanos. É uma doença genética que gera degeneração progressiva da musculatura esquelética. Considerando-se as intensas alterações musculares, é natural pensar em uma possível lesão renal decorrente da intensa lesão muscular. Foram avaliados seis cães machos da raça Golden Retriever afetados pela distrofia muscular (GRMD) e três cães machos clinicamente sadios. A concentração de creatinina foi determinada e as proteínas urinárias foram avaliadas por eletroforese em gel de poliacrilamida. Os resultados mostraram que a proteinúria patológica não está diretamente associada à Distrofia Muscular de Duchenne, porém diversos parâmetros apresentaram concentrações aumentadas para animais afetados, como a razão proteína/albumina, que foi maior em cães distróficos, podendo ser indício de microalbuminúria e conseqüente lesão renal precoce. Estes resultados visam embasar avaliações clínicas e futuros estudos considerando-se as patologias decorrentes ou associadas a esta doença genética.(AU)

The Golden Retriever Muscular Dystrophy (GRMD) is genetically homologous to Duchenne muscular dystrophy (DMD) that affects humans. It is a genetic disease that causes progressive degeneration of skeletal muscle. Considering the intense muscle changes, it is natural to think in possible kidney damage caused by intense muscle injury. We evaluated six male Golden Retriever dogs affected by Duchenne muscular dystrophy (GRMD) and three clinically healthy male dogs. The urinary proteins and creatinine concentration were determined. The proteins were analyzed by polyacrylamide gel electrophoresis. The results showed that pathological proteinuria is not directly associated with Duchenne muscular dystrophy, but several parameters showed increased concentrations for affected animals, as the ratio protein/albumin, which was higher in dystrophic dogs, probably a consequence of microalbuminuria a sign of early kidney damage. These results aim to base future studies and clinical evaluations considering the pathologies arising from or associated with this genetic disease.(AU)

Mensuração da concentração da dimetilarginina simetrica (SDMA) e gamaglutamil transferase (GGT) urinário como marcadores precoces de lesão renal em cães em tratamento com sulfato de vincristina

O estudo avaliou o comprometimento renal do tratamento quimioterápico com sulfato de vincristina em 12 cadelas, com tumor transmissível venéreo (TVT). Os animais foram tratados sulfato de vincristina, na dose de 0,025 mg/kg/IV, a cada sete dias, durante quatro semanas, e avaliados através do exame clínico, hemograma, dosagens séricas da dimetilarginina simétrica (SDMA), ureia, creatinina, alanina aminotransferase (ALT) e fosfatase alcalina (ALP); além da análise de urina e aferição de GGT urinária, em três tempos de coleta, antes do início do tratamento (T0), 14 dias após a implantação (T1) e 28 dias de terapia. Dentre as alterações hematológicas, foi verificada a presença de anemia e leucopenia, frequentemente relatada em pacientes com TVT em tratamento com sulfato de vincristina. Nos parâmetros utilizados para avaliar a função renal, não foram evidenciados aumentos de ureia e creatinina séricas, ou a identificação de redução de densidade ou proteinúria, no exame de urina. As concentrações de GGT urinária não evidenciaram lesões tubulares e a elevação consistente do SDMA foi somente constatada em um paciente, acima do intervalo de referência. Os resultados demonstraram que, durante a terapia semanal com sulfato de vincristina, como agente único, durante 28 dias, não foi evidenciada injúria renal, detectáveis nos exames de rotina e na mensuração de GGT urinário. Entretanto, o aumento da SDMA sérica foi observado em 50% dos animais em T1 e T2, quando comparados ao T0.

The study evaluated the renal impairment of vincristine sulfate chemotherapy treatment in 12 female dogs with transmissible venereal tumor (TVT). Animals were treated with vincristine sulfate at a dose of 0.025 mg / kg / IV every seven days for four weeks and evaluated by clinical examination, blood count, symmetric dimethylarginine (SDMA) serum levels, urea, creatinine, alanine. aminotransferase (ALT) and alkaline phosphatase (ALP); in addition to urine analysis and urinary GGT measurement, at three collection times, before the beginning of treatment (T0), 14 days after implantation (T1) and 28 days of therapy. Among the hematological alterations, the presence of anemia and leukopenia, frequently reported in TVT patients treated with vincristine sulfate, was verified. In the parameters used to assess renal function, no increases in serum urea and creatinine, or the identification of reduction in density or proteinuria were observed in the urine examination. Urinary GGT concentrations did not show tubular lesions and consistent elevation of SDMA was found only in one patient above the reference range. The results demonstrated that during weekly therapy with vincristine sulfate as a single agent for 28 days, no renal injury was detected, detectable in routine examinations and measurement of urinary GGT. However, the increase in serum SDMA was observed in 50% of the animals at T1 and T2, when compared to T0.

COMPARAÇÃO DOS EFEITOS DA PENTOXIFILINA COM A CLORPROMAZINA E LOVASTATINA NA PROTEÇÃO RENAL DE RATOS WISTAR APÓS ISQUEMIA E REPERFUSÃO NOMOTÉRMICA

Pereira, Daniel Peixoto. Comparação da pentoxifilina com a clorpromazina e lovastatina na proteção renal de ratos wistar após isquemia e reperfusão normotérmica. 2019. Dissertação (Mestrado em Ciência Animal) Universidade de Franca, Franca - SP. Objetivou-se com esse estudo avaliar a capacidade da pentoxifilina (PTX) frente a lovastatina (LOV) e a clorpromazina (CLOR) como substâncias nefroprotetoras perante episódio da síndrome da isquemia e reperfusão renal (SIRR). Foram utilizados 36 animais, machos, adultos, distribuídos aleatoriamente em quatro grupos de nove indivíduos, todos submetidos experimentalmente à isquemia e reperfusão normotérmica, sendo o grupo controle (CT) sem tratamento, grupo PTX tratados previamente com pentoxifilina, grupo LOV tratados com lovastatina, e grupo CLOR com o uso de clorpromazina. Três animais de cada grupo foram avaliados nos tempos 24, 72 e 120 horas após a SIRR. As avaliações da função renal foram realizadas por exame físico, concentração sérica de ureia e creatinina e também foi avaliada a integridade morfológica do tecido renal por meio de análise histopatológica. Observou-se que 24 horas após a SIRR, apenas a clorpromazina apresentou eficácia no controle azotêmico. Com 72 horas, tanto a clorpromazina quanto a pentoxifilina foram eficazes. Após 120 horas, os três fármacos apresentaram capacidade renoprotetora. A pentoxifilina foi a mais efetiva contra necrose tubular, seguida da clorpromazina. Nas condições do presente estudo concluiu-se que os três tratamentos (PTX, CLOR e LOV) mostraram-se efetivos. A PTX mostrou-se promissora na resposta contra necrose tubular aguda, no entanto a clorpromazina demonstrou efeitos renoprotetores 2mais precoces.

Pereira, Daniel Peixoto. Comparative renoprotective effects of pentoxifiline with clorpromazine and lovastatin in wistar rats (Rattus novergicus) submitted to ischemia and renal reperfusion. 2019. Dissertation (Master in Animal Science) - University of Franca, Franca - SP. The aim of this study was to compare pentoxifylline (PTX), lovastatin (LOV) and chlorpromazine (CLOR) as nephroprotective agents during renal ischemia and reperfusion syndrome (RIRS). Thirty-six adult male rats submitted to ischemia and reperfusion and were randomly assigned to four groups, untreated (control group), thePTX group previously treated with pentoxifylline, the LOV group treated with lovastatin, and group with the use of chlorpromazine. Three animals from each group were evaluated at times 24, 72 and 120 hours after the ischemia and reperfusion procedure. Renal function assessments were performed by physical examination, serum urea and creatinine, and the morphological integrity of the renal tissue was also assessed by histopathological analysis. It was observed that 24 hours after the RIRS, only chlorpromazine showed efficacy in the azotemic control. At 72 hours, both chlorpromazine and pentoxifylline were effective. After 120 hours, all three drugs showed renoprotective capacity. Pentoxifylline and chlorpromazine were efetive in necrosis tubular damage. In conclusion the three treatments (PTX, CLOR and LOV) were effective. PTX was efeitive in acute tubular necrosis, however chlorpromazine demonstrated earlier renoprotective effects.

AVALIAÇÃO DA PERFUSÃO RENAL DE CADELAS EM SEPSE POR PIOMETRA POR MEIO DA ULTRASSONOGRAFIA COM CONTRASTE POR MICROBOLHAS E DOPPLER

A sepse é uma síndrome clínica que ocasiona alta morbimortalidade em humanos e animais, devido à disfunção orgânica a qual conduz, sendo a principal complicação a lesão renal aguda (LRA), originada por alteração da perfusão dentre outros fatores. No entanto, até o presente momento as técnicas utilizadas para o diagnóstico precoce de alterações na perfusão renal são pouco acuradas, invasivas ou de alto risco para o paciente. Por tal motivo, este estudo clínico avaliou parâmetros clínicos, hematológicos, urinários, de ultrassonografia Modo-B, Doppler espectral e contrastada por microbolhas (CEUS), utilizando o exame histopatológico da biopsia renal como padrão diagnóstico de LRA, em 20 cadelas com piometra de origem natural como modelo experimental de sepse. Objetivou-se identificar alterações patofisiológicas que expliquem o desenvolvimento da LRA e sepse neste tipo de pacientes e verificar a acurácia dos métodos estudados para o diagnóstico desta lesão, utilizando um grupo de 12 pacientes saudáveis como controle. Todas as pacientes apresentaram algum grau de lesão renal de diversas origens celulares e 40% apresentaram-se em sepse. A LRA pôde ser explicada em 57% dos casos por alteração da hemodinâmica renal, principalmente redução da magnitude e velocidade do fluxo sanguíneo renal avaliados pelo Doppler e da perfusão cortical pela CEUS; e em 22% dos casos por alterações inflamatórias sistémicas, associadas à redução da concentração plasmática de albumina e aumento das globulinas. Os parâmetros que apresentaram melhor valor diagnóstico para LRA (acurácia > 80%) foram: razão proteína-creatinina urinária (UPC), albumina sérica, tempo médio de velocidade na artéria renal (TaMin), indice de pulsatilidade (IP), relação comprimento renal-aorta (RelCompAor) e pico de realce do contraste no córtex renal. A sepse e as alterações na albumina, PaO2, TaMin, hematócrito, UPC, RelCompAor, fosfatase alcalina e IP, associaram-se a degeneração tubular, infiltração inflamatória, necrose tubular aguda, fibrose intersticial, glomerulonefrite membranoproliferativa e glomerulonefrite membranosa, mais severas, sendo estas as lesões renais encontradas na análise histopatológica. Além disso, sugere-se a utilização da UPC ao invés da creatinina como método de avaliação renal no escore SOFA para determinação de sepse em cães.

Sepsis is a clinical syndrome that causes high morbidity and mortality in humans and animals, due to the organic dysfunction it leads to. The main complication is acute kidney injury (AKI), caused by changes in perfusion, among other factors. Unfortunately, to date the techniques used for the early diagnosis of changes in renal perfusion are not accurate, invasive or at high risk for the patient. Therefore, this clinical study evaluated clinical, hematological, urinary and utrasonographic B-mode, spectral Doppler and microbubble contrast (CEUS) techniques, using histopathological exam of renal biopsy as the diagnostic standard of AKI in 20 bitches with pyometra of natural causes as an experimental model of sepsis. The aim was to identify pathophysiological changes that explain the development of AKI and sepsis in this kind of patients and to verify the accuracy of the methods studied for the diagnosis of this lesion, using a group of 12 healthy control patients. All animals with pyometra presented some degree of renal damage from multiple cellular origins and 40% presented with sepsis. The LRA could be explained in 57% of cases due to renal hemodynamics changes, mainly reduction of renal blood flow magnitude and velocity evaluated by Doppler ultrasonography and cortical perfusion evaluated by CEUS; and in 22% of cases due to systemic inflammatory alterations, associated to reduction of plasmatic concentration of albumin and increase of globulins. The parameters that presented the best diagnostic value for AKI (accuracy> 80%) were: urinary protein-creatinine ratio (UPC), serum albumin, mean renal artery velocity (TaMin), pulsatility index (PI), kidney length/aorta ratio (KLAorR) and peak contrast enhancement in the renal cortex. Sepsis and alterations in albumin, PaO2, TaMin, hematocrit, UPC, KLAorR, alkaline phosphatase and PI were associated with aggravation of tubular degeneration, inflammatory infiltration, acute tubular necrosis, interstitial fibrosis, membranoproliferative glomerulonephritis and membranous glomerulonephritis, these being the renal lesions found in the histopathological analysis. In addition, we suggest the use of UPC instead of creatinine as a renal evaluation in the SOFA score for determination of sepsis in dogs.

UTILIZAÇÃO DE BIOMARCADORES NA DOENÇA RENAL AGUDA EM GATOS

A doença renal aguda (DRA) representa um espectro de mecanismos associados ao aparecimento súbito de lesão renal. Na rotina clínica de gatos a maior causa de DRA é a obstrutiva. Diante disso o objetivo do trabalho foi identificar biomarcadores precoces de doença renal aguda em gatos de causa espontânea à obstrução uretral. Os animais foram diagnosticados clinicamente com obstrução uretral oriundos do Hospital Veterinário FAVET/UECE. Após serem diagnosticados foram coletados amostras de sangue e urina de 20 gatos com nefropatia obstrutiva durante a primeira consulta, 24 horas após a obstrução espontânea e 7 dias depois, além de 15 gatos clinicamente saudáveis no momento da primeira consulta. Em todos os animais foram avaliados hemograma completo, a creatinina sérica, creatinina urinária e uGGT pelo analisador automático e dosado KIM-1 por ELISA sanduíche. Para as análises estatísticas e elaboração dos gráficos dos experimentos foram utilizados o software GraphPad Prism® 7.04. Nos resultados foram observados que as dosagens de creatinina sérica nos gatos obstruídos apresentaram valores maiores que dos gatos saudáveis (P<0,05). Já os biomarcadores precoces de DRA, KIM-1 e uGGT, não apresetaram diferença significativa quando comparados o grupo saudável e os gatos com nefropatia obstrutiva na primeira consulta. Nos tempos 24h e 7 dias após os gatos receberem tratamento adequado para nefropatia obstrutiva foram observados valores aumentados de KIM-1 e uGGT quando comparados entre os tempos. Ao comparar os tempos dos gatos com nefropatia obstrutiva, pode-se observar que a dosagem de creatinina no tempo 7 dias após a desobstrução apresentava dentro da normalidade já o KIM-1 e uGGT estavam aumentados (P<0,05). A correlação da creatinina sérica com KIM-1 pode-se observar uma relação positiva em níveis fracos (P<0,1124). Gatos com nefropatia obstrutiva apresentaram quantidades aumentadas de KIM-1 e uGGT nos tempos 24h e 7 dias após a obstrução, demostrando ser possíveis biomarcadores precoces de doença renal aguda.

Acute kidney disease (AKD) represents a spectrum of mechanisms associated with the sudden onset of renal injury. In the cats clinical routine, a major cause of DRA is obstructive. Therefore, the study aimed to identify early biomarkers of acute renal disease in cats with urethral obstruction of spontaneous origin. Cats clinically diagnosed with urethral obstruction were provided from the Veterinary Hospital - FAVET / UECE. After diagnosis them, blood and urine samples were collected from 20 cats with obstructive nephropathy (ON group) during the first visit, 24 hours after obstruction and 7 days later, in addition to 15 clinically healthy cats (control group) at the time of the first visit. In all animals, complete blood count, serum creatinine, urinary creatinine and uGGT were measured by the automatic analyzer and dosed KIM-1 by sandwich ELISA. GraphPad Prism® 7.04 software was used for the statistical analysis and drawing graphics. In the results, it was observed that serum creatinine levels in ON group were higher than healthy cats (P <0.05). On the other hand, the early biomarkers of AKD, KIM-1 and uGGT did not show a significant difference when compared to control and ON group at the first visit. However, ON groups at times 24h and 7 days after the cats received adequate treatment for obstructive nephropathy increased values of KIM-1 and uGGT were observed when compared them within timing. When comparing timing of the cats with obstructive nephropathy, it can be observed that the creatinine levels at 7 days after the un-obstruction had within normal limits, KIM-1 and uGGT were already increased (P <0.05). The correlation of serum creatinine with KIM-1 could show a positive relationship in weak levels (P <0.1124). Cats with obstructive nephropathy showed increased amounts of KIM-1 and uGGT at 24h and 7 days post-obstruction, showing that early biomarkers of acute kidney disease are possible.

Efeito da Niedenzuella multiglandulosa em coelhas gestantes e em embriões bovinos produzido in vitro.

Niedenzuella (Tetrapterys) multiglandulosa, cipó perene de ocorrência na região Sudeste e Centro-oeste do Brasil, tem sido correlacionada a surtos de intoxicação em bovinos gerando perdas econômicas relacionadas à morte de animais por insuficiência cardíaca, abortamentos, natimortalidade e mortalidade neonatal. A patogênese das lesões ainda é desconhecida e há controvérsias em relação aos fatores que desencadeiam a ocorrência de abortamentos. Os objetivos desta pesquisa foram avaliar o potencial de indução de morte embrionária e fetal de N. multiglandulosa em coelhas e determinar o potencial embriotóxico da planta em embriões bovinos in vitro. Foram utilizadas 15 coelhas gestantes distribuídas aleatoriamente em três grupos (controle, 2 e 3), com cinco animais cada. Após 12 dias e 21 dias de gestação, somente os grupos denominados 2 e 3, respectivamente, receberam10g/kg de folhas frescas jovens e maduras de N. multiglandulosa. O grupo controle funcionou como testemunha até o parto. Os animais foram avaliados por exame físico diário e ultrassonografia a cada cinco dias. Análises hematológicas e bioquímicas foram feitas antes da gestação e após o parto. Após o parto, as coelhas e os neonatos/fetos foram eutanasiados e procedeu-se a avaliação anatomohistológica. No estudo in vitro, foram realizadas cinco repetições de cultivo de embriões bovinos com dois grupos: extrato, onde foi administrado 2,7mg/mL de extrato aquoso da planta (10%) na gota de cultivo no sexto dia de cultivo in vitro (CIV), e controle, que não recebeu tratamento. Foram avaliados, qualitativamente e comparativamente, o desenvolvimento e a eclodibilidade embrionária até o nono dia de CIV nos dois grupos. A planta N. multiglandulosa não causou abortamento em coelhas nas doses e tempo de exposição utilizados. Os exames físicos, hematológicos e bioquímicos não se alteraram. Na ultrassonografia detectou-se menor ecogenicidade do esqueleto fetal nos grupos 2 e 3. Ao exame histopatológico observou-se nefrose focal aguda e discreta degeneração hidrópica no coração das coelhas. Conclui-se que N. multiglandulosa não causa abortamento em coelhas, mas leva ao subdesenvolvimento embrionário na dose de 27mg/mL.

Niedenzuella (Tetrapterys) multiglandulosa perennial cypress occurring in Southeastern and Midwestern Brazil has been correlated with outbreaks of intoxication in cattle, generating economic losses related to death of animals due to heart failure, miscarriage, stillbirth and neonatal mortality. The pathogenesis of the lesions is still unknown and there are controversies regarding the factors that trigger the occurrence of abortions. The objective of this research was to evaluate the potential of induction of embryonic and fetal death of N. multiglandulosa in rabbits and to determine the embryotoxic potential of the plant in vitro bovine embryos. Fifteen pregnant rabbits were randomly distributed in three groups (1, 2 and 3), with five animals each. After 12 days and 21 days of gestation, groups named 2 and 3, respectively, received 10 g / kg fresh young leaves of N. multiglandulosa. The group 1 functioned as a control and was monitored until parturition. The animals were evaluated by daily physical examination and ultrasound every five days. Hematological and biochemical analyzes were performed before and after parturition. After the parturition, the rabbits and the neonates / fetuses were euthanizes and the anatomo-histopathological evaluation was carried out. To perform the in vitro study, five replicates of bovine embryo culture were distributed in two groups: extract, where 2.7 mg / mL of aqueous plant extract (10%) was administered to the culture, and control, without extract. Embryonic development and hatchability were evaluated qualitatively and comparatively up to the ninth day of culture in both groups. N. multiglandulosa did not cause abortion in the rabbits at the doses and time of exposure. The physical, hematological and biochemical exams did not change. Ultrasonography revealedlower echogenicity of the fetal skeleton in groups 2 and 3. Histopathological examination revealed acute focal nephrosis and discrete hydropic degeneration in the heart of the rabbits. It is concluded that N. multiglandulosa does not cause abortion in rabbits, but it takes embryonal underdevelopment at the dose of 27mg/mL.

AVALIAÇÃO DE PROTEÍNAS URINÁRIAS NA DETECÇÃO PRECOCE DA LESÃO RENAL EM CADELAS COM PIOMETRA

A piometra tem cárater multissistêmico e acomete cadelas adultas e idosas, geralmente durante o diestro. A insuficiência renal, durante a piometra, é um dos fatores mais importantes do prognóstico dessa afecção e a avaliação da proteômica urinária permite identificar biomarcadores de lesão renal precoce. Esse estudo objetivou avaliar o uso da relação proteína/creatinina urinária para a identificação de lesão renal antes do desenvolvimento da azotemia e identificar as proteínas urinárias presentes em cadelas com piometra com potencial para serem utilizadas como biomarcadores de lesão renal. Foram incluídas na pesquisa 44 cadelas com piometra, azotêmicas e não azotêmicas, e 12 cadelas que não apresentavam alterações sistêmicas. O primeiro artigo comparou cadelas com piometra e azotêmicas (A, n = 15, creatinina > 1,7), com não azotêmicas (NA, n = 29) e cadelas sem alterações sistêmicas que formaram o grupo controle (GC, n = 12). Todas as cadelas passaram por coleta de sangue e urina para hemograma completo, perfil bioquímico, urinálise e dosagem da proteína e creatinina urinária. As cadelas que apresentaram sedimento urinário ativo, ou seja, mais que cinco leucócitos ou hemácias por campo não foram utilizadas para a avaliação da relação proteína/creatinina urinária (UPC). Os valores da UPC foram superiores nas cadelas dos grupos NA e A quando comparadas com o GC (p < 0,05), o que mostra que a UPC pode detectar lesão renal em cadelas com piometra antes do desenvolvimento da azotemia. A leucocitose foi mais evidente nas cadelas do grupo A do que nos demais grupos, o que evidencia que a resposta inflamatória pode estar relacionada ao agravamento da doença renal. O segundo artigo estudou 32 cadelas com piometra e 12 cadelas sem alterações sistêmicas. Foi realizada espectrometria de massas do pool das amostras de urina dos grupos, piometra por bactérias gram-negativas não azotêmica (GnegNA, n = 18), gram-negativas azotêmicas (GnegA, n = 6), gram-positivas não azotêmicas (GposNA, n = 4), gram-positivas azotêmicas (GposA, n = 4) e grupo controle (GC, n = 12). As principais proteínas identificadas nos grupos de cadelas com piometra e não identificadas no GC, portanto, com potencial para biomarcadores de lesão renal precoce foram a clusterina, hepcidina, Ig Kappa cadeia V, lisozima C, proteína ligadora de retinol (RBP), amiloide sérica A, proteína de domínio central de quatro disulfetos WAP e a uromodulina, sendo que, a maioria dessas proteínas possuem massa molecular menor que a albumina (69 kDa), o que sugere lesão no compartimento tubular renal. Os resultados obtidos possibilitaram concluir que a UPC pode ser utilizada para detectar lesão renal em cadelas com piometra antes da azotemia e pode ser utilizada como exame controle durante o período pós operatório para detectar proteinúria persistente e permitir o tratamento precoce da insuficiência renal, contribuindo para qualidade de vida. O estudo proteômico da urina permitiu a identificação de proteínas com potencial para serem utilizadas como biomarcadores de lesão renal precoce e definiu que a lesão renal em cadelas com piometra é principalmente tubular e não glomerular como consta na maioria da literatura vigente.

Pyometra has multisystemic disease and affect adult and old bitches during diestrus. Renal insufficiency during pyometra is one of the most important factors in the prognosis and the evaluation of urinary proteomics allows the identification of biomarkers of early renal damage, however, few studies in this sense in veterinary medicine. This study aimed to evaluate the use of the protein-to-creatinine ratio in urinary for the identification of renal injury before the development of azotemia and identify the urinary proteins present in bitches with pyometra to be used as biomarkers of renal injury. Thirty-four bitches with pyometra, azotemic and non-azotemic and 12 bitches with no systemic alterations were included in the study. The first article evaluate the use of the urinary protein-to-creatinine ratio (UPC) in clinical routine. 44 bitches with pyometra azotemics (A, n = 15, creatinine> 1.7), non-azotemic (NA, n = 29) and bitches without systemic alterations that formed the control group (GC, n = 12). All bitches underwent blood and urine collection for complete blood count, biochemical profile, urinalysis and protein and urine creatinine dosage. Bitches that had active urinary sediment, more than five leukocytes or erythrocytes per field were not used for urinary protein/creatinine UPC evaluation. The UPC values were higher in the bitches of the PNA and PA groups when compared to the CG (p < 0.05). Which shows that UPC can detect renal injury in bitches with pyometra before the development of azotemia. The leukocytosis was more evident in the group A than in the other groups, which shows that the inflammatory response may be related to the aggravation of renal disease. The second paper studied 32 bitches with pyometra and 12 bitches without systemic alterations. Mass spectrometry of the pool of urine samples of the following groups, pyometra by Gram negative and non-azotemic (GnegNA, n = 18), Gram negative azotemic (GnegA, n = 6), Gram positive non-azotemic (GposNa, n = 4), Gram positive azotemic (GposA, n = 4) and control (GC, n = 12). The major proteins identified in the groups of bitches with pyometra and unidentified in the GC, therefore, with potential for biomarkers of early renal damage were clusterin, hepcidin, Ig Kappa chain V, lysozyme C, retinol binding protein, serum amyloid A, WAP four-disulfide core domain protein 2 and uromodulin. Most of these proteins have a lower molecular weight than albumin (69 kDa), suggesting damage to the renal tubular compartment. The results obtained allow us to conclude that UPC can be used to detect renal lesions in bitches with pyometra prior to azotemia and can be used as a control test during the postoperative period to detect persistent proteinuria and allow early treatment in these patients, improving survival and quality of life. The proteomic study of urine allowed the identification of proteins with potential to be used as biomarkers of early renal damage and defined that kidney injury in bitches with pyometra is mainly tubular and non-glomerular as found in most of the current literature. Key words: Renal injury. Mass spectrometry. Cystic endometrial hyperplasia. Canine

Metabolismo da glutamina em felinos sadios e caninos e felinos com doença renal

A Glutamina (Gln) é considerada um aminoácido (AA) essencial, porém em situações catabólicas onde o consumo é maior que sua síntese, passa a ser classificada como condicionalmente essencial. Em diversas espécies animais, como carnívoros e onívoros, a glutamina sintetase (GS), enzima responsável pela síntese da Gln, apresenta baixíssima expressão no tecido renal, isso ocorre devido ao tipo de urina ácida produzida por essas espécies, entretanto a Glutaminase, que é responsável pela degradação da Gln, está presente nesse tecido e esse processo é importante para a regulação do pH na acidose metabólica. Sendo assim, a perda do tecido renal durante a insuficiência renal (IR), aguda ou crônica, pode estar associada à modificações no metabolismo de Gln, interferindo na regulação das concentrações desse aminoácido no sangue e demais tecidos. Nos herbívoros e equinos, a elevada expressão da GS contribui na regulação do pH sanguíneo e contribui também para a produção de Gln, diferentemente do que ocorre nos carnívoros. A IR é uma enfermidade regular em cães e gatos idosos, podendo ser de etiologia congênita, hereditária ou adquirida e ser classificada de acordo com a evolução e achados laboratorias, em aguda ou crônica. Os trabalhos elaborados durante o desenvolvimento desta tese envidenciaram que a Gln plasmática apresentou-se reduzida para os caninos com lesão renal e não apresentou alteração para os felinos, com a mesma alteração clínica. Também foram comparados difrentes protocolos terapêuticos para o tratamento desta enfermidade e não foi observada diferença estatística entre esses protocolos em relação às variáveis ureia e creatinina, porém verificou-se alteração na taxa de mortalidade onde animais tratados somente com fluidoterapia apresentaram alta taxa de mortalidade e os animais pertencentes ao grupo submetido à hemodialise apresenaram menor taxa de mortalidade.

Estudo de respostas fibróticas e apoptóticas em rins de ratos tratados com aldosterona

Procurando compreender o envolvimento da aldosterona (Aldo) na injúria renal, o objetivo deste projeto foi avaliar o efeito do tratamento crônico com Aldo sobre a função renal e a histologia das arteríolas renais, procurando correlacionar os achados com a expressão de genes reguladores do processo de fibrose e apoptose. A Aldo não alterou os parâmetros fisiológicos, PA, ritmo de filtração glomerular (estimado pela depuração plasmática de creatinina), proteinúria e a morfologia das arteríolas corticais. No entanto, aumentou a expressão do RNAm para TGF-1, PAI-1 e BAX no tecido renal, além da contagem de células TUNEL positivas nos glomérulos. O antagonismo ao receptor MR (pelo uso da espironolactona) aboliu o efeito hormonal somente sobre a expressão do RNAm para BAX e a marcação do DNA degradado (TUNEL), enquanto que o antagonismo ao GR (pelo uso do RU 486) reduziu ou aboliu todos os efeitos da Aldo. Os resultados indicam que a Aldo pode induzir respostas precoces sobre o remodelamento do tecido renal, sem ainda comprometer a função renal ou alterar a PA. Essas respostas foram independentes da sobrecarga de sal e ocorreram por um mecanismo que envolveu os receptores MR e GR.

In order to understand the aldosterone (Aldo) involvement in renal injury, the objective of this project was to evaluate the effect of Aldo chronic treatment on renal function and renal arterioles histology, trying to correlate the findings with the regulatory genes of fibrosis and apoptosis. Aldo did not change the physiological parameters, BP, glomerular filtration rate (estimated by creatinina clearance), proteinuria and cortical arterioles morphology. However, Aldo increased mRNA expression for TGF-1, PAI-1 and BAX in renal tissue, as well as TUNEL-positive cell count in glomeruli. MR receptor antagonism (by spironolactone) abolished only the hormonal effect on the mRNA expression for BAX and degraded DNA labeling (TUNEL); whereas GR antagonism (by RU 486) reduced or abolished all Aldo effects. The results indicated that Aldo can induce early responses on renal tissue remodeling, without altering renal function or BP. These responses were salt independent and involved MR and GR receptors.

Efeitos da terapia anti-inflamatória não esteroidal sobre a função renal durante o pós cirúrgico de animais submetidos à ovário-histerectomia eletiva.

As doenças renais podem ser desencadeadas por várias causas, entre elas, agentes infecciosos, substâncias tóxicas e por isquemia renal. O presente trabalho objetivou avaliar o potencial lesivo dos anti-inflamatórios não esteroidais (AINEs) meloxicam e cetoprofeno aos rins e verificar a precocidade de detecção destas alterações com testes de função renal em animais submetidos à terapia anti-inflamatória após ovariohisterectomias eletivas. Foram utilizadas 30 cadelas, divididas em três grupos e submetidas à ovariohisterectomia e diferentes protocolos analgésicos e anti-inflamatórios. Os animais do primeiro grupo (GM) receberam meloxicam, os do segundo grupo (GC) receberam cetoprofeno e os animais do terceiro grupo (GT) receberam cloridrato de tramadol. De cada paciente foram realizadas colheitas de urina e sangue nos seguintes momentos: pré-operatório, 24, 48 e 72 horas pós-operatório. As amostras de sangue foram utilizadas para a realização de hemograma completo, determinação bioquímica de ureia e creatinina. Os animais foram avaliados quanto à evolução clínica. Foi realizada urinálise e a determinação bioquímica da concentração proteína, ureia e creatinina urinários. Foram ainda calculadas a relação proteína urinária/creatinina urinária e a excreção fracionada de creatinina. Não foi observada diferença em relação à evolução clínica entre os grupos, ingestão hídrica e de alimentos, diurese e cicatrização das feridas. Com relação aos valores séricos de ureia e creatinina, no GC observou-se elevação nos três momentos pós-cirúrgicos e decréscimo dos valores observados na urina, indicando redução na taxa de filtração glomerular nesses animais. Na avaliação da relação proteína urinária/creatinina urinária foi observada diferença apenas no GM, onde foi evidenciado um aumento de 207% da excreção proteica do período pré-operatório em relação à mensuração das 24 horas pós-operatório, mantendo-se elevada ao longo das 72 horas de avaliação, indicando aumento da permeabilidade de membrana e consequente proteinúria neste grupo. Os valores observados, entretanto, são considerados marginais na avaliação de proteinúria renal. Os resultados obtidos demonstram que a utilização de cetoprofeno e meloxicam em animais submetidos a eventos cirúrgicos alteram a taxa de filtração glomerular e a excreção proteica, respectivamente e devem ser evitados em animais com risco de desenvolver lesões renais. A avaliação seriada dos níveis séricos e urinários de creatinina e ureia, assim como a relação proteína urinária/creatinina urinária foram métodos efetivos na detecção de alterações da função renal. A evolução clínica semelhante entre os grupos sugere que apenas a terapia analgésica durante o pós-cirúrgico é suficiente em procedimentos em que não haja grande manipulação de tecidos e, dessa forma, menor inflamação, sendo indicada por não induzir alterações na função renal.

Renal diseases are important in human and veterinary patients and may have different causes, such as infections, toxic agents and renal ischemia. The present work aimed to evaluate the potential of two nonsteroidal anti-inflammatory drugs (NSAIDs), meloxicam and ketoprofen, to cause kidney injury and the ability to early detect renal changes by laboratory methods. 30 healthy bitches were divided into three groups and underwent ovariohysterectomy. The groups were treated as follows: meloxicam (group 1, GM), ketoprofen (group 2, GK), and tramadol monohydrate (group 3, GT). Blood and urine samples were collected from each animal before (M0), 24, 48 and 72 hours after surgery. Blood samples were used for complete blood count (CBC) and serum determination of blood ureic nitrogen (BUN) and creatinine concentration. The clinical evolution was also assessed. Urine analysis and ureic nitrogen, creatinine and protein concentrations were also biochemically determined in urine samples. Protein/Creatinine ratios (PCR) and fractionated excretion of creatinine were calculated. No difference was observed in regard to clinical outcome, water or food intake, diuresis and wound healing between the groups. Considering serum creatinine and BUN, there was an increase in all post-operative moments in GK and a decrease in urinary ureic nitrogen and creatinine, indicating a reduction in glomerular filtration rate (GFR). The results of protein excretion showed an increase of 207% in PCR in GM. This increase was seen only in GM and at 24 hours and remained increased until 72 hours. Increased PCR can be related to an increased permeability of the glomerular membrane leading to proteinuria in this group. However, the values observed are defined as borderline when evaluating proteinuria. The obtained results demonstrate that ketoprofen and meloxicam administered to animals submitted to surgery can change GFR and protein renal excretion, respectively and should be avoided in animals with risk of developing renal diseases. Serial evaluation of serum and urinary levels of ureic nitrogen and creatinine, as well as the PCR were effective in detecting alterations in renal function. The similar clinical outcome between the groups suggests that after surgeries with low complexity and minor tissue manipulation, only analgesia may be sufficient, and is indicated in order to avoid further kidney dysfunction.

N-Acetil-B-D-glucosaminidase (NAG): padronização de ensaio espectrogométrico automático em urina de cães

A determinação de injúria renal, especialmente pela avaliação da atividade de enzimas urinárias, é uma importante ferramenta para o médico veterinário, especialmente, por sua precocidade em relação aos métodos de avaliação da função renal, que são considerados tardios, visto que a instalação da injúria precede a alteração da função. Neste estudo foi realizada a padronização de reagentes, determinação de valor de referência (com e sem correção para densidade urinária) e avaliação de estabilidade em diferentes faixas de temperatura da enzima NAG (N-Acetyl--D-Glucosaminidase) para cães (machos e fêmeas), hígidos de diferentes faixas etárias. Para a padronização de reagentes para avaliação de atividade urinária de NAG em cães, a enzima apresentou pH ótimo e concentração de substrato similares aos utilizados em kits comerciais para avaliação da atividade desta enzima em humanos. A automatização da técnica de avaliação da atividade urinária de NAG em humanos, para cães hígidos de diferentes faixas etárias, mostrou-se eficaz. Por meio de análise estatística, observou-se que a NAG apresenta correlação positiva com a idade do animal e com a densidade urinária. Quando aplicada a fórmula de correção para densidade urinária de 1,025, o intervalo de confiança médio de atividade urinária da NAG foi menor do que quando não se realizou a correção e estatisticamente concluiu-se que a atividade urinária de NAG, com correção de densidade urinária é mais precisa. Para avaliação da estabilidade urinária da enzima, foram analisados três métodos de conservação de urina em temperaturas de -20º C, 2-8º C e 20-30º C, com tempos de armazenamento de 24, 48, 72 horas, 7 e 15 dias. Concluiu-se que o método de armazenamento das amostras de urina em temperatura de 2-8º C é um método confiável de armazenamento por até 7 dias, sem que haja alterações estatísticas nos valores encontrados nas análises das amostras. Os métodos de conservação em temperaturas de -20º C e em temperaturas de 20-30º C demonstraram-se inadequados para conservação de amostras de urina para posterior avaliação da atividade de NAG urinária devido às diferenças estatísticas nas médias ao longo do tempo

The determination of renal injury, especially through the assessment of the activity of urinary enzymes, is an important tool for the veterinary doctor, especially by its precocity in relation to methods of evaluation of renal function, which are considered to happen late, since the installation of injury precedes the change in the function. In this study was performed the standardization of reagents, determination of a reference value (with and without correction for urine density) and assessment of stability - in different temperature ranges - the enzyme NAG (N-acetyl-beta-D-glucosaminidase) for dogs (male and female), healthy individuals of different age groups. For the standardization of reagents for evaluation of urinary activity of NAG in dogs, the enzyme showed optimal pH and concentration of substrate similar to those used in commercial kits for evaluation of the activity of this enzyme in humans. The automation of the technique for the assessment of urinary NAG activity in humans, for healthy dogs in different age groups, has proved to be effective. By means of statistical analysis, it was observed that NAG presents a positive correlation with the age and urine density of the animal. Once applied the correction formula for urinary specific density of 1.025, the average confidence interval of urinary activity of NAG was shorter than when there was no correction and statistically it was concluded that the activity of urinary NAG, with correction of urinary density is more accurate. In order To evaluate the stability of urinary enzyme, were analyzed three methods of conservation of urine in temperatures of -20 C, 2-8C and 20-30C, with retention times of 24, 48, 72 hours and 7 and 15 days. It was concluded that the storage method of urine samples at a temperature of 2-8C is a reliable method of storage for up to 7 days, without any statistical changes in the values found in the analyzes of the samples. The methods of conservation in temperatures of -20 C and at temperatures of 20-30C proved to be unsuitable for conservation of urine samples for later evaluation of urinary activity of NAG due to statistical differences in average values over time.